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蒙药材河柏体外抑菌活性研究_薛培凤

蒙药材河柏体外抑菌活性研究_薛培凤
蒙药材河柏体外抑菌活性研究_薛培凤

用量达6 kg时菌核产量即维持较高水平,即使继续增加段木用量产量亦无明显增加;当段木用量相同时,接种量变化对菌核产量影响不明显,仅在由200 g增至300 g时有显著差异,继续增加对产量无显著影响。因此,在当前湖北茯苓产区的栽培模式条件下,采用段木量6 kg,接种量200~300 g为宜。

3 讨论

在茯苓道地产区,每年栽培都要大量损耗10~15龄松树,对森林资源及生态植被均造成破坏,并且窖段木用量的增大,茯苓生长期亦相对延长,给茯苓生产带来了不确定因素[3],本文探索了当前栽培模式下,适宜的段木和栽培菌种的用量,在保证菌核产量的前提下,一定程度上减少了资源的浪费。但为实现资源高效利用和生态环境保护的茯苓可持续生产,类似香菇、银耳等药用菌的代料栽培技术,甚至是采用农作物废弃料代替段木,具有重大的经济价值和生态效益。

参考文献

[1] 王克勤, 傅 杰, 苏 玮, 等. 道地药材茯苓疏[J]. 中药研究与信息, 2002,

4(6):16-17

[2] 徐 雷, 陈科力, 苏 玮. 九资河茯苓栽培关键技术及发展演变[J]. 中国中

医药信息杂志,2011,18(6):106-108

[3] 刘振武, 游 平, 郑 威, 等. 2种长度料简旱田栽培茯苓的比较试验[J].

长江大学学报(自科学版),2006,(2):129-134

蒙药材河柏体外抑菌活性研究

薛培凤1*,李占军1,2,解红霞1,杨丽敏3

(1. 内蒙古医科大学药学院,内蒙古 呼和浩特010000;2. 内蒙古化工职业学院化学工程系,内蒙古 呼和浩特010000;3. 内蒙古医科大学基础医学院,内蒙古 呼和浩特010000)摘 要:目的 研究蒙药材河柏体外抑菌活性。方法 利用系统溶剂法制备河柏的不同溶剂提取物,再经柱色谱法分离纯化得11个单体化合物,采用管碟法测定不同溶剂提取物和各单体化合物的抑菌活性。

结果 乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球菌、耐药金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、大肠埃希菌、痢疾杆菌、

绿脓杆菌具有较强的体外抑制作用,从中分离鉴定的化合物Ⅴ、Ⅶ对金黄色葡萄球菌具有一定抑制作用。

结论 乙酸乙酯提取物为强抑菌活性部位,化合物Ⅴ、Ⅶ为抑菌活性成分,河柏和三春水柏枝同入蒙药水

柏枝具有一定的科学性和合理性。

关键词:河柏;提取物;化合物;抑菌活性

中图分类号:S504文献标识码:A文章编号:1673-6427(2013)03-0008-03

Studies on Bacteriostasis of Myricaria alopecuroides Schrenk In Vitro

XUE Pei-feng1, LI Zhan-jun1,2, JIE Hong-xia1, YANG Li-ming3

(1.School of Pharmacy, Inner Mongolia Medical University, Hohhot 010000, China; 2. Department of Chemical Engineering, Inner Mongolia Chemical Engineering Professional College, Hohhot 010000, China; 3. School of Basic Medicinal Sciences, Inner Mongolia Medical University, Hohhot 010000, China) Abstract: Objective To study bacteriostasis of Myricaria alopecuroides Schrenk in vitro. Methods

收稿日期:2012-02-15

基金项目:内蒙古政府蒙药现代化重大研究专项蒙药材质量标准化资助

项目(MX2005ZB012);内蒙古自治区高等学校科学研究项

目(NJZY08098)

作者简介:薛培凤(1969-),女,教授,研究方向为中蒙药药效物质

基础及质量控制,E-mail: xpfdc@https://www.wendangku.net/doc/a811812771.html,

Extracts of the medicinal materials were prepared by various solvents, and compound Ⅰ~Ⅺ were isolated by column chromatography. The bacteriostatic action of extracts and compounds from Myricaria alopecuroides Schrenk were tested by cylinder-plate method. Results Ethyl acetate extract was tested to have bacteriostatic action on the six bacteria strains (Staphylococcus aureus, resisitant Staphylococcus aureus, Staphylococcus albus, Escherichia coli, Dysentery bacilli, Pseudomonas aeruginosa). CompoudⅤand Ⅶ had bacteriostasis against resisitant Staphylococcus aureus. Conclusion Ethyl acetate extract was the bacteriostatic fraction of Myricaria alopecuroides. CompoudⅤand Ⅶ from Ethyl acetate extract were bacteriostatic compounds. It was scientific and reasonable that both Myricaria alopecuroides and Myricaria paniculata were used as Myricaria germanica in Mongolia medicine.

Key words: Myricaria alopecuroides Schrenk; extract; compound; bacteriostasis

蒙药材河柏为柽柳科植物河柏(Myricaria alopecuroides Schrenk)的嫩枝叶,和同属植物三春水柏枝(Myricaria paniculata)的嫩枝叶同作蒙药水柏枝使用,蒙药名“巴勒古纳”,载于《中华本草》(蒙药卷)、《内蒙古植物药志》、《认药白晶鉴》、《无误蒙药鉴》等,味涩、苷,性凉,效钝、重、固,具有清热燥、透疹、敛毒之功能,蒙医临床以其治毒热、陈热、伏热、热症扩散、肉毒症、血热、麻疹等[1]。本草研究表明,同属入藏药“翁布”的药用植物水柏枝(Myricaria germanica)与入蒙药“巴勒古那”的三春水柏枝为同物异名[2],藏药以其治疗麻疹不透、咽喉肿痛、中毒症、黄水病、血热病、瘟病时疫、脏腑毒热等[3]。有文献报道藏药翁布的水提物和醇提物有显著的抑菌作用[4,5],即三春水柏枝具有体外抑菌作用。本文对蒙药材水柏枝的另一个来源植物河柏的体外抑菌活性进行研究,旨在阐明蒙药水柏枝的药效物质基础,并为河柏和三春水柏枝同入蒙药水柏枝(巴勒古那)提供依据。

1 材料与方法

1.1 

1.1 材料

河柏药材于2007年8月采集于内蒙古和林县蛮汉山,经内蒙古医学院药学院生药学教研室庞秀生教授鉴定为柽柳科植物河柏(Myricaria alopecuroides Schrenk)的嫩枝叶,标本存放于内蒙古医学院药学院天然药物化学教研室。

金黄色葡萄球菌、耐药金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、大肠埃希菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌和营养琼脂培养基均购自中国药品生物制品检定所。

1.2 

1.2 方法

1.2.1 

1.2.1 不同溶剂提取物的制备 取干燥河柏嫩枝4.5 kg粉碎,依次用95%乙醇、50%乙醇各冷浸提取三次(每次15 L),每次48 h,合并相应提取液,减压浓缩至无醇味,分别依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,回收溶剂得石油醚萃取物-I (30 g),乙酸乙酯萃取物-I (67.5 g ),正丁醇萃取物-I (194 g),乙酸乙酯萃取物-II (11 g),正丁醇萃取物-II (145 g)。50%乙醇提取部位几乎没有成分被萃取至石油醚中。

各萃取部位少量留样用于体外抑菌活性测试,剩余部分用于单体成分的分离制备。

1.2.2 

1.2.2 单体化合物的制备 上述各萃取部位经各种柱色谱反复分离纯化,得化合物I~XII,分别为鞣酸-3,3',4-三甲醚(I)、鞣酸-3,3'-二甲醚(II)、5,7,4'-三羟基-3'-甲氧基-黄酮醇(III)、山奈酚(IV)、3,5-二羟基-4-甲氧基苯甲酸(V)、胡萝卜苷(VI)、6, 7, 10-三羟基-8-十八烯酸(VII)、槲皮素(VIII)、没食子酸(IX)、棕榈酸(X)、棕榈酸-α-单甘油酯(XI),其中化合物 I~X来自乙酸乙酯部位,化合物X、XI来自石油醚部位[6]。

1.2.3 

1.2.3 不同溶剂萃取物供试品溶液的制备 取河柏各萃取部位0.2 g,加水1 000 mL溶解,去渣,冷藏,编号备用。

1.2.4 

1.2.4 单体化合物样品溶液的制备 取各单体化合物各2.0 mg,分别加水20 mL和二甲基亚砜20 μL 溶解,冷藏,编号备用。

1.2.5 

1.2.5 培养基的制备 普通营养琼脂培养基经高压消毒(123℃,15 Pa)20 min后,冷却至56℃时倒入培养皿中,制备平皿培养基,备用。

1.2.6 

1.2.6 菌液的制备 取已培养 24 h 的金黄色葡萄球菌、耐药金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、大肠埃希菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌的营养肉汤培养物,用 0.9%的无菌氯化钠溶液制成每毫升3 000~5 000 CFU (colony-forming units)的菌悬液[7]。

1.2.7 

1.2.7 抑菌实验 将各菌悬液分别致密接种涂布到平皿培养基上,采用管碟法,在每个培养基上均匀放置 6个钢管,取供试样品的水溶液3 mL,水浴煮沸10 min 灭菌,按编号依次加样100 μL,37±1℃

培养24 h,观察测量抑菌环直径。

2 结果

对河柏药材各种溶剂萃取物及单体化合物的水溶液进行了体外抑菌活性研究。石油醚萃取物I仅对耐药金黄色葡萄球菌具有较强抑制作用;乙酸乙酯萃取物I、II对6种菌株均显示不同程度抑制作用;正丁醇萃取物I对大肠杆菌、痢疾杆菌、耐药金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌有不同程度抑制作用,而正丁醇萃取物II则仅对绿脓杆菌具有一定抑制作用;水层I对各种菌株均无抑制作用,水层II对痢疾杆菌、绿脓杆菌具有不同程度抑制作用(表1);各单体化合物中,化合物Ⅴ、Ⅶ对金黄色葡萄球菌显示不同程度抑制作用(表2)。

表 1 河柏各萃取部位的抑菌活性(n=6)

Tab.1 Bacteriostatic activity of extracts from

Myricaria alopecuroides Schrenk

细菌类别乙酸

乙酯

萃取

物I

乙酸

乙酯

萃取

物II

石油

醚萃

取物I

正丁

醇萃

取物I

正丁

醇萃

取物

III

水层I水层

II

大肠埃希菌1717—18———

痢疾杆菌2224—12——18白色葡萄球菌1212—————耐药金黄色葡萄球菌20162210———金黄色葡萄球菌1418—10———绿脓杆菌1815——15—12注:抑菌圈直径(mm)(下同)

表 2 河柏中单体化合物的抑菌活性(n=6)

Tab.2 Bacteriostatic activity of monomeric compounds from

Myricaria alopecuroides Schrenk

细菌类别ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪ大肠埃希菌———————————痢疾杆菌———————————白色葡萄球菌———————————耐药金黄色葡萄球菌———————————金黄色葡萄球菌————17—10————绿脓杆菌———————————3 讨论

河柏各萃取部位中乙酸乙酯萃取物I、II对6种菌株均显示较强的抑制作用,为河柏抑菌活性部位。从该部位分离得到的化合物Ⅴ、Ⅶ为河柏抑菌活性成分。抑菌活性部位和活性成分的确定为进一步阐明河柏有效物质基础提供了科学依据。

文献报道三春水柏枝水提物和醇提物具有显著体外抑菌作用,我们的研究结果表明河柏不同溶剂萃取部位及两个单体成分对6种菌株具有不同程度抑制作用,为河柏和三春水柏枝同入蒙药水柏枝(巴勒古那)的合理性提供了现代药理学依据。

河柏乙酸乙酯部位显示较强抑菌作用,而两个活性单体抑菌作用弱于活性部位,可能是成分间的协同作用被破坏所致。正丁醇部位虽不及乙酸乙酯部位抑菌活性强,但对部分菌株亦显示出不同程度抑制作用,应进一步研究其化学成分和活性,有待发现新的活性单体。

参考文献

[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会. 中华本草(蒙药卷)[M]. 上海:

上海科学技术出版社, 2004, 142

[2] 李占军,薛培凤. 水柏枝属药用植物研究进展[J]. 中药材,2010,33(4):

636-639

[3] 朱亚民. 内蒙古植物药志(第二卷)[M]. 呼和浩特: 内蒙古人民出版社,

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[4] 鲍 敏,曾 阳,米 琴,等. 藏药翁布不同提取物的体外抑菌实验研究[J].

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[5] 鲍 敏,陈振宁,曾 阳,等. 藏药翁布体外抑菌作用研究[J].山东中医杂志,

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[6] 李占军,薛培凤,解红霞,等. 蒙药河柏的化学成分研究[J].中国中药

杂志,2010,35(7):865-868

[7] 国家药典委员会. 中国药典(二部) [S]. 北京: 中国医药科技出版社,

2010,93

天门冬属植物的生物活性

文章编号: 1000-1336(2010)03-0489-06 天门冬属植物的生物活性 张 玲1 刘永宏2 陶华明3 1广东药学院生命科学与生物制药学院,广州 510006; 2中国科学院南海海洋研究所,广州 510301; 3南方医科大学中医药学院,广州 510515 摘要:天门冬属植物在我国民间作为常用中药历史悠久,国内外已报道该属植物具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、免疫促进、抗炎症、抗溃疡、抗腹泻、抗糖尿病、降血脂和止咳镇痛等诸多生物活性。此外,该属植物中存在一些强药效的单体化合物,且具有显著构效关系。天门冬属植物的生物活性研究为开发我国丰富的本属植物资源奠定了基础。 关键词:天门冬属植物;生物活性 中图分类号:Q5 天门冬属(Asparagus)属百合科(Lillaceae),种类约有300种,除美洲外,在全世界温带至热带均有分布,其中我国的天门冬属植物资源丰富,已发现的共24种,还有一些外来栽培品种,分布于全国各地[1]。本属植物被用作常用中药历史悠久,在我国有9种该属植物具有药用价值[2],即:羊齿天门冬(A.filicinus)、石刁柏(A. officinalis)、非洲天门冬 (A.densiflorus)、兴安天门冬 (A. dauricus)、南玉带(A.ofigoclonos.)、天门冬(A. cochinchinensis)、文竹(A.setaceus)、龙须菜(A. schoberioides)、滇南天门冬(A.subscandens),其中天门冬A. cochinchinensis (Lour.)Merr. 被《中华人民共和国药典》2000年版收载为正品。天门冬性寒,味甘苦,具有滋阴、润燥、清肺、生津等功效。用于治疗阴虚发热、咳嗽吐血、肺痰肺痈、咽喉肿痛[3]。 近年来国内外对天门冬属植物的研究一直热度不减,主要是对其化学成分及生物活性两方面的报道较多。天门冬属植物所含的化学成分类型丰富,主要有甾体皂苷类、蜕皮甾酮类、木质素类、多糖类化合物等,本文主要对本属植物的生物活性做一详细综述。 1. 药理作用 国内外已报道本属植物有抗肿瘤,抗氧化,抗菌,免疫促进,抗炎,抗溃疡,抗腹泻,抗糖尿病,降血脂,止咳镇痛等诸多生物活性。 1.1 抗肿瘤活性 美国科学家经多年研究和临床试验,发现芦笋(石刁柏的别名)对癌症具有良好的辅助治疗作用,其疗效在多位已康复的癌症患者身上均得到了证实。早在1996年,Shao等[4]就研究了芦笋茎干部位甲醇提取物(asparagus crude saponins, ACS)对人淋巴瘤细胞株HL-60的影响。研究结果发现,ACS在低浓度时可抑制淋巴瘤细胞生长,高浓度可杀死该该肿瘤细胞,且ACS对肿瘤细胞DNA的合成具有不可逆抑制作用。Koo等[5]利用肝癌细胞株HepG2研究了天门冬根水提物(aqueous extract of Asparagus cochinchinensis,ACAE)对由乙醇引起的细胞毒性的抑制作用,结果发现:ACAE随剂量增大对乙醇诱导产生α-的肿瘤坏死因子(TNF-α)的分泌抑制作用增强,结果表明:ACAE能够通过抑制HepG2细胞的凋亡来抑制乙醇诱导产生的细胞毒性。汲晨锋等[6]研究发现芦笋的 收稿日期:2010-01-12 国家自然科学基金青年基金(No. 40706046)资助 作者简介:张玲(1981-),女,硕士,讲师,E-mail:zhangling_811015@126.com;刘永宏(1972-),男,博士,研究员,E-mail: yonghongliu@scsio.ac.cn;陶华明(1980-),男,博士,讲师,通讯作者,E-mail:taohm929@yahoo.com.cn

天冬

天冬 文章目录*一、天冬的概述*二、天冬的功效与作用*三、天冬的分类*四、天冬的药方选录*五、天冬的服用方法*六、天冬的选购方法、保存方法 天冬的概述 1、天冬的概述天冬,中药名。为百合科植物天冬的干燥块根。从河北、山西、陕西、甘肃等省的南部至华东、中南、西南各省区都有分布。具有养阴润燥,清肺生津之功效。常用于肺燥干咳,顿咳痰黏,腰膝酸痛,骨蒸潮热,内热消渴,热病津伤,咽干口渴, 肠燥便秘。 2、天冬的别名天门冬、小叶青、三百棒、大当门根。 3、天冬的性状形态长纺锤形,略弯曲,长5~18厘米,直径0.5~2厘米。表面黄白色至淡黄棕色,半透明,光滑或具深浅不等的纵皱纹,偶有残存的灰棕色外皮。质硬或柔润,有黏性,断面角质样,中柱黄白色。气微,味甜、微苦。 4、天冬的性味归经性寒,味甘、苦。归肺经、肾经。 5、天冬的来源百合科植物天冬的块根。

6、天冬的产地分布生于阴湿的山野林边、山坡草丛中或丘陵地带灌木丛中,也有栽培。分布于甘肃、四川、贵州、云南等地。 天冬的功效与作用 1、天冬的化学成分、营养成分本品含苷类、皂苷及其苷元、氨基酸、糖类等化学成分。含天冬素、5-甲氧基-甲基糠醛、葡萄糖、果糖、β-谷甾醇、黏液质以及甾体皂苷类。动物试验表明,水煎剂有抑菌、镇咳、抗肿瘤和杀虫作用。 2、天冬的功效作用养阴润燥、润肺生津。属补虚药下属分类的补阴药。 3、天冬的毒副作用虚寒泄泻及外感风寒致嗽者,皆忌服。 脾虚便溏之人不宜使用。 不宜与药材曾青一同使用。 胃虚无热者忌服。 服用天冬期间禁食鲤鱼。 孕妇慎用。 天冬的分类1、川天冬:主产于贵州遵义、湄潭,风岗、赤水、

仁怀,大方等地及四川叙水、古蔺、涪陵、黔江、酉阳等处。其 产品根条较大,肥壮饱满,呈圆柱形或扁圆柱形。两端稍尖,其色 淡黄明亮,中心有白色梗心。含糖分较多,质地柔润,常有粘汁渗出,为天冬中之上品。(包括云南、广西及鄂西等地产品)。 2、湖天冬:主产于湖北咸宁、蒲圻等地;其次英山、罗田亦产。其特点为根条较川天冬为小,圆柱形,两头尖,色淡黄,粘性亦重。当中以咸宁等地产品较肥壮;英山、罗田所产多较细瘦。(此外,皖西及湖南等地产品亦届此类)。 3、温天冬:主产浙江温州、临海、天台等地,其特点为根条 较小,圆柱形,仅中部粗壮,两端细尖,色黄褐甚至棕褐,粘性亦重。(华东一带产品多属此类)。

白蔹抗菌活性的研究[文献综述]

毕业论文文献综述 生物工程 白蔹抗菌活性的研究 1 前言 微生物耐药性已成为全球关注的严峻问题,由多重耐药菌和许多新的病原微生物引起 的感染对人类健康造成极大威胁。随着抗微生物药物的广泛应用,医院感染性微生物耐药性问题日趋严重,细菌感染在临床上也有逐年上升趋势[1]。微生物的耐药性产生速度,远远大于抗生素研制速度。与此同时,中草药具有清热解毒、滋补、抗菌等作用, 且毒副作用小、耐药性小, 也开始得到人们的关注。 白蔹为葡萄科植物自蔹 Ampelopsis japonica(Thunb)akino的干燥块根 ,又名白根 , 五爪藤 ,山地瓜。始载于《神农本草经》 ,性微寒,味苦,具有清热解毒、生肌止痛之功效。用于痈肿疮疡、瘰疬、烫伤、扭挫伤;外用于痈、疖、蜂窝组织炎、淋巴结炎等。白蔹入药历史悠久,早在《名医别录》中已有记载 ,是历代医家治疗疔痈的重要药物[2]。 临床报道白蔹用于治疗化脓性皮肤感染、细菌性痢疾等疾病,疗效显著[3]。现代研究表明,白蔹含有大黄素甲醚、大黄酚、大黄素、富马酸、没食子酸等多种抗细菌和抗真菌成分,与其临床应用相一致[4]。 2 植物提取物的抑菌活性 人类自从古代就记载了许多具有杀虫或控制害虫、抗菌或杀菌作用的植物, 如中国、印度等东南亚以及一些非洲国家的劳动人民积累了许多利用植物杀虫防病的经验。几个世纪前, 我国人民就已知道植物中含有抗菌物质, 在许多实例中,这些化合物能以天然的抗性或防御体系来抵抗微生物或其他病害。某些化合物具有特殊味道或气味, 已经在香料工业中使用, 使用药草和香料作为调味品或食品防腐剂, 许多文献已报道了它们的特性及活性成分[5~6]。 不同的抗菌、杀菌植物, 其有效成分分布在植物根、茎、叶、花、果、种子等不同部位, 如厚扑存在于叶中、苦瓜存在于果实中等。同种植物不同部位活性成分的含量亦存在差异, 黄梁绮龄等对香港地区四种红树植物的根、茎分别用95%乙醇浸取, 其浸取物对三种植物病菌抑制活性存在一定差异[7]。研究有效成分在植物中分布, 应针对具体的杀菌、抗菌植物, 分成根、茎、叶、花、果实等部分, 采用生物测定法来分析活性成分在植株中的部位, 只有

天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒(天门冬氨酸底物法)产品技术要求aiweide

天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒(天门冬氨酸底物法) 适用范围:本试剂用于体外定量测定人体血清中天门冬氨酸氨基转移酶的活性。 1.1 包装规格 a) 试剂1:2×45 mL,试剂2:1×18mL; b) 试剂1:4×50 mL,试剂2:2×20mL; c) 试剂1:2×100mL,试剂2:2×20mL。 1.2 主要组成成分 1.2.1试剂1主要组分 Tris缓冲液100 mmol/L L-天冬氨酸240 mmol/L 苹果酸脱氢酶>600 U/L 乳酸脱氢酶﹥1200U/L α-氧代戊二酸12mmol/L ProClin300 适量 1.2.2试剂2主要组份 Tris缓冲液100 mmol/L 还原型辅酶Ⅰ0.18mmol/L ProClin300 适量 2.1外观 试剂1:无色澄清液体;试剂2:无色或淡黄色澄清液体。 2.2试剂装量 应不低于试剂瓶标示装量。

2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度:在340nm处测定试剂空白吸光度,应≥1.5。 2.3.2试剂空白吸光度变化率:在340nm处测定空白吸光度变化率|△A/min|应≤0.05。 2.4分析灵敏度 测定AST含量为40U/L样本时,其|△A/min|应≥0.01。 2.5线性范围 2.5.1测试浓度在[0,600] U/L范围内,线性回归的相关系数(r)应不低于0.990; 2.5.2测试浓度在[0,60] U/L范围内,线性绝对偏差应不超过±6 U/L; 测试浓度在(60,600] U/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1重复性:重复测试三个水平的样本,所得结果的变异系数(CV)应不大于5%。 2.6.2批间差:抽取3个不同批号的试剂,对同一份样本进行重复测定,相对极差≤10%。 2.7准确度 以国家标准物质为检测样本时,测定结果相对偏差不超过±10%。 2.8 稳定性 取在2℃~8℃条件下贮存达到18个月的试剂进行检测,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

药物的体外抑菌试验

实验五药物的体外抗菌试验 药物的抗菌试验是为了检查药物的抗菌能力。该项试验方法已广泛应用于新药研究和指导临床用药。如抗菌药物的筛选,提取过程的生物追踪、抗菌谱的测定、耐药谱的测定、药敏试验、药物血浓度测定等各个方面。 药物的体外抗菌试验在实验室进行,优点是方法简便、需时短、用药量少,不需要活的动物、实验条件容易控制。因此,药物的体外抗菌试验已广泛应用各种测定了。 药物的体外抑菌试验是常用抗菌试验方法,其中最常用的方法用系列稀释法和琼脂扩散法。 (一)稀释法(结果示教) 稀释法有液体培养基连续稀释法和固体稀释法(斜面法)两种。这两种方法都可以用来测定药物的最小抑菌浓度(MIC):是指该药物能抑制细菌生长的最低浓度,通常用μg∕ml或U/ml表示。 (二)琼脂扩散法 它是将抗菌药物加至接种试验菌的平板表面,抗菌药物在琼脂胶内向四周自由扩散,其浓度随扩散距离增大而降低,在药物一定的扩散距离内,由于药物的抗菌效应,试验菌不能生长,此无菌生长的范围称为抑菌圈,抑菌圈的大小与药物的抑菌效应成正比。琼脂扩散法常有纸片法、管碟法、打洞法和挖沟法。 滤纸片法(K-B纸片法)-学生操作 滤纸片法是最常用的方法,适用于新药的初筛试验(初步药物是否有抗菌作用)及临床的药敏试验(细菌药物第三性试验、以便选择用药)。滤纸片分湿、干两种,可以在试验时用无菌纸片沾取药物溶液放在含菌的平板表面,也以预先做成一定浓度的干燥纸片。一般来说预先做成的干燥纸片实用一些而且准确一些。 至于干燥纸片的制备方法:选用吸水力强而且质地均匀的滤纸,用打洞机制成6mm直径的圆纸片,120℃干燥灭菌2小时。然后把配制好的各种适宜浓度的抗生素溶液,每100张纸片加入0.5ml药液,使它均匀浸润,放在无菌平皿中,

抗菌肽体外抑菌实验方法

微量肉汤稀释法(borth microdilution method) 实验方法: 1.用无菌蒸馏水在聚丙烯离心管中将抗菌肽和抗生素溶解制成1280 g/L的储 备液,然后用等量无菌的0.02%乙酸(含0.4% BSA)稀释,在用0.01%乙酸(含0.2% BSA)溶液对等量稀释后的溶液在进行一系列的双倍稀释,得到质量浓度为640,320,160……1.25 mg/L的共10个梯度的系列稀释液, 4 ?C下保存备用。 2.将待测细菌在灭菌MH肉汤琼脂平板上过夜培养,挑取菌落接种于灭菌试管 中的MH肉汤,37 ?C,180 r/min过夜培养。将培养后的菌液稀释至2*10^5-7*10^5 CFU/mL,向无菌的96孔平板中的1-11孔各加入100 μL的菌液,12孔不加入菌液而加入100 μLMH肉汤,然后从1~10孔逐一加入相应的待测抗菌肽,11孔作为扫描对照组不加肽。37 ?C,90 r/min培养18-24 h,这样待测抗菌肽的终质量浓度分别为64,32,16,……0.125 mg/L。(不知道待测抗菌肽添加量是多少,最终抗菌肽的终浓度怎么缩小了10倍) 3.最小抑菌浓度MIC(mininmal inhibitory concentration)就是能阻止50%以 上细菌生长的最小肽浓度。用酶标仪在490 nm下对平板进行扫描,肽的MIC 的确定按照比对照孔(11孔)的浑浊程度低50%以上的最小质量浓度计算。 4.最小杀菌浓度MBC(minimal bactericidal concentration)就是能抑制任何残 余菌落生长的肽的最低浓度。从没有细菌生长的平板孔中的内容物中取10 μL涂布到MH琼脂平板上,37 ?C培养18 h,以此来确定肽的MBC。 参考文献: 【1】汪以真,抗菌肽与抗生素的体外抗菌效果比较[J].中国兽医学报,2004,24(3):270-273. 抗菌肽的体外抑菌实验(平板法) 1.稀释:将一定效价的抗菌肽做6个浓度的稀释,将抗生素按正常使用剂量同 样做6个浓度的稀释 2.指示菌:指示菌用液体LB培养基培养24 h后稀释至10^6 CFU/mL

广西一点红总生物碱的提取和抗菌活性研究(一)

广西一点红总生物碱的提取和抗菌活性研究(一) 作者:周吴萍韦媛媛李军生阎柳娟赖雪芬 【摘要】目的考察广西一点红总生物碱的分离提纯及其抗菌活性。方法通过95%乙醇回流提取一点红药材中的生物碱类物质,利用酸水提取法及有机溶剂萃取对其进行分离纯化,同时用化学检识法与薄层色谱法进行定性鉴别。采用滤纸片法研究一点红生物碱类物质的抗菌活性。结果一点红生物碱浓度在600~800 mg/ml时对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草杆菌中度敏感,随着药物(生物碱)浓度的增大,抗菌作用越明显。结论说明一点红生物碱类物质对供试菌有一定的抑菌活性。 【关键词】一点红总生物碱提取分离抗菌活性 Abstract:ObjectiveTo investigate the extraction and separation methods and antibacterial activities of the alkaloids in Emilia sonchifolia from Guangxi.MethodsThe alkaloids in Emilia sonchifolia were reflux extracted by 95% alcohol, and separated by acid water extraction and organic solvent extraction method, at the same time qualitative identification was performed by the chemical methods and the thin layer chromatography methods. To study the antibacterial activities of the alkaloids in Emilia sonchifolia by filter paper method. Results The result showed it was medium sensitive to Escherichia coli, Bacillus subtilis and Staphylococus aureus when the concentrations of the alkaloids were in the range of 600~800 mg/ml. The antibacterial function was more remarkable with the medicine concentrations increased. ConclusionThe alkaloids of Emilia sonchifolia has certain antibacterial activities against the selected microbes. Key words:Emilia sonchifolia; Total alkaloids; Extraction-Separation; Antibacterial activity 一点红Emilia sonchifolia (Linn.) DC属菊科植物一点红的干燥全草,主产于广东、广西、福建、贵州、江西,具有清热解毒、活血散瘀的功效,用于治疗急性扁桃体炎、肺炎、急性阑尾炎、传染性肝炎、痢疾、尿路感染等疾病〔1〕。一点红是妇科临床常用药广西特产中成药花红片的主要原料药〔2〕,其主要含有黄酮类〔3〕,生物碱类〔1〕,甾醇类〔4〕等化学成分。据文献报道,一点红提取物有一定的抗氧化和抗炎作用〔5,6〕,并且对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和痢疾杆菌有一定抑制作用〔1〕。国内外仅对一点红的种植和临床应用方面有少量研究,对活性成分抗菌性能未见有相关报道,而生物碱常常是很多中草药的有效成分,具有抗炎抗菌的药理作用。故实验分离提纯一点红

抗菌活性研究

【作者】王立波;邵萌;高慧媛;吴斌;吴立军; 【Author】WANG Li-bo,SHAO Meng,GAO Hui-yuan,et al.(School of Traditional Chinese Medicines,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110016,China) 【机构】沈阳药科大学中药学院;沈阳药科大学中药学院辽宁沈阳110016;辽宁沈阳110016;辽宁沈阳110016; 【摘要】目的探讨金荞麦乙醇提取物乙酸乙酯的萃取部分(待测样品)的抑菌作用,并对此部分进行分离纯化以研究其抗菌活性的物质基础。方法与复方板蓝根颗粒做对比,采用平皿稀释法及动物实验对待测样品进行体外及体内实验,测定其对各试验菌的最小抑菌浓度(M IC)和对肺炎链球菌感染小鼠的体内保护作用。并采用多种色谱方法对此部分进行分离纯化。结果体外抑菌试验表明,待测样品对乙型溶血性链球菌、肺炎球菌有明显的抑制作用;体内抑菌实验表明此部分对肺炎球菌菌株所致的小鼠感染有保护作用;从该活性部分分离得到8个化合物为:反式对羟基桂皮酸甲酯(trans-p-hydroxy c innam ic m ethy l ester,I),3,4-二羟基苯甲酰胺(3,4-d ihydroxybenzam ide,II),原儿茶酸(protocatechu ic ac id,III),原儿茶酸甲酯(protocatechu ic ac id m ethy l ester,IV),木犀草素(lu teo lin,V),槲皮素(querc itrin,V I),芸香苷(ru tin,V II),(-)-表儿茶素[(-)-ep icate... 更多还原

天门冬提取物

天门冬提取物 【产品名称】天门冬提取物 【英文名称】Asparagosides Root Extraxt 【拉丁名称】Asparagus cochinchinensis(Lour.)Merr 【提取来源】百合科植物天门冬Asparagus cochin,chinensis(Lour.)Merr.的干燥块根提取物 【化学成分】天门冬甙 【产品规格】10:1 20:1 TLC 【颜色性状】天门冬提取物为棕黄色粉末 【产品目数】100%通过80目筛 【性味】味甘;苦;性寒 【功效】滋阴润燥;清肺降火 【主治】燥热咳嗽;阴虚劳嗽;热病伤阴;内热消渴;肠燥便秘;咽喉肿痛 【药理作用】 1.抗菌作用:煎剂体外试验对炭疽杆菌、甲型及乙型溶血性链球菌、白喉杆菌、类白喉杆菌、肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌、白色葡萄球菌及枯草杆菌均有不同程度的抑菌作用。 2.杀灭蚊、蝇幼虫的作用:将切碎的根置水中使成0.5-1%浓度,可使其中的孑孓于72-96小时后全部死亡,2-5%浓度时,经3-4天,可使其中的蛆死亡70-100%。

3.抗肿瘤作用:体外试验(美蓝法及瓦氏呼吸器测定),天门冬对急件淋巴细胞型白血病、慢性粒细胞型白血病及急性单核细胞型白血病患者白细胞的脱氢酶有一定的抑制作用,并能抑制急性淋巴细胞型白血病患者白细胞的呼吸。印度产同属植物Asparagusracemosus中所含皂甙,对动物子宫有抗催产素的作用。 4.镇咳去痰作用:经动物试验有镇咳和去痰作用。 【包装方式】25公斤/纸板桶或铝箔袋 【存储条件】天门冬提取物应密封遮光,贮存在干燥、阴凉、通风良好的地方,有效期为两年。

天冬的功效与作用及吃法

天冬的功效与作用及吃法 天冬的功效和作用 养阴生津 治疗阴虚发热、肺燥干咳、虚劳咳嗽、津伤口渴有很好的作用。 润肺清心 治疗心烦失眠、咽喉肿痛,内热消渴,有很好的疗效。 润肠通便 天冬对内热引起的大便干结,肠燥便秘能起到润肠通便的作用,特别是阴虚引起的效果更加。 抗菌消炎 天冬还有抗菌消炎作用,对气管炎,肺炎,肺结核,肺气肿引起的各种咳嗽痰多,气喘,有很好的治疗作用。金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌、深血性链球菌、白喉杆菌、绿脓杆菌、炭疽杆菌均有不同程度的抑菌作用。 除燥降火 天冬对阴虚火旺引起的骨蒸潮热,盗汗,失眠多梦,也有一定的调理作用。 天冬的食用方法 天冬黑豆粥 原料:天冬,黑豆,黑芝麻,糯米,冰糖

做法: 1.将天冬、黑豆、黑芝麻、糯米洗干净; 2.然后放入砂锅加水同煮成粥,待粥将熟时; 3.再加入冰糖,最后再熬煮一会即可。 天冬烧冬瓜 原料:冬瓜,天冬,盐 做法: 1.将天冬洗净后切成薄片,冬瓜去皮洗净切片; 2.将冬瓜片和天冬片一同放入炖锅内,加入清水; 3.用武火烧沸,再用文火炖煮30分钟,最后加盐即可。天冬芦笋粥 原料:粳米,莴笋,枣,天冬,砂糖 做法: 1.粳米淘洗干净,放入锅中,加入冷水先煮; 2.芦笋去硬皮,洗净,切成小段;天门冬洗净; 3.红枣洗净去核,将芦笋段、天门冬、红枣放入锅中; 4.然后与粳米同煮,至米烂粥稠时加入红糖即可。 天冬雪梨汤 原料:天冬,麦冬,雪梨,冰糖 做法: 1.雪梨洗净去核切片; 2.将天冬、麦冬、冰糖同放锅内; 3.加水大火烧沸后改用小火煲1小时即可。 天冬的药方选录

1.治肺胃燥热,痰涩咳嗽:天门冬(去心)、麦门冬(去心)等分。上两味熬膏,炼白蜜收,不时含热咽之。(《张氏医通》二冬膏) 2.治肺痿咳嗽,吐涎沫,心中温温,咽燥而不渴者:生天冬捣取汁一升,酒一斗,饴一升,紫菀四合,入铜器于汤上煎至可丸。服如杏子大一丸,日可三服。(《肘后方》)[5] 3.治血虚肺燥,皮肤拆裂,及肺痿咳脓血证:天门冬新掘者不拘多少,净洗,去心、皮,细捣,绞取汁用砂锅慢火熬成膏。每用一二匙,空心温酒调服。(《医学正传》天门冬膏)[5] 4.治肺痨:多儿母、百部、地骨皮各15g,麦冬9g,折耳根30g。煨水或炖肉吃。(《贵州草药》) 5.治吐血、咯血:天门冬(水泡,去心)一两,甘草(炙)、杏仁(去皮、尖,炒熟)、贝母(去心,炒)、白茯苓(去皮)、阿胶(碎之,蛤粉炒成珠子)各半两。上为细末,炼蜜丸如弹子大。含化一丸咽津,日夜可十丸。(《本事方》天门冬丸)[5] 6.治妇人喘,手足烦热,骨蒸寝汗,口干引饮,面目浮肿:天门冬十两,麦门冬八两,生地黄三斤(取汁为膏)。上二味为末,膏子和丸如梧子大。每服五十丸,煎逍遥散送下。逍遥散中去甘草加人参。(《保命集》天门冬丸)[5] 7.治百日咳:天门冬、麦门冬各15g,百部根9g,瓜蒌仁6g,橘红6g。煎两次,1~3岁每次分3顿服;4~6岁每次分2顿服;7~10岁1次服。(《中医杂志》) 8.治肾瘅真阴不足:天门冬、怀地黄、知母、黄柏。四味同煎三次,去渣,冲玄武胶收膏服。(《症因脉治》家秘天地煎)

抗菌药物血清杀菌活性研究的临床意义分析

抗菌药物血清杀菌活性研究的临床意义分析 【摘要】目的:研究抗菌类药物血清杀菌活性的临床意义。方法:选取36名健康男性为研究对象,按照随机抽取的方式将其划分为三组,每组各计12人。以抗菌类药物头孢哌酮及其复合制剂(头孢哌酮/他唑巴坦与头孢哌酮/舒巴坦)对其进行静脉滴注(静脉滴注按照头孢哌酮1.5g剂量、头孢哌酮/他唑巴坦2.25g剂量以及头孢哌酮/舒巴坦3.0g剂量进行滴注),选取静脉滴注后0.5h以及7h为监测点,对36名健康男性前后在接受这几种抗菌类药物静脉滴注前后体内血清杀菌活性(SBA)相关指标参数进行临床观察与监测。结果:抗菌类药物头孢哌酮复合制剂(头孢哌酮/他唑巴坦与头孢哌酮/舒巴坦)对产超广谱β—内酰胺酶中的金黄色葡萄球菌、阴沟肠杆菌、表皮葡萄球菌以及大肠埃希菌的SBA 血清杀菌活性较单纯意义上的头孢哌酮高出2~4倍左右(p<0.05),差异具有统计学意义。结论:抗菌类药物头孢哌酮及其复合制剂(头孢哌酮/他唑巴坦与头孢哌酮/舒巴坦)针对临床常见致病病菌而言有着良好的SBA血清杀菌活性,抗菌类药物复合制剂对于产超广谱β—内酰胺酶中的金黄色葡萄球菌、阴沟肠杆菌、表皮葡萄球菌以及大肠埃希菌的SBA血清杀菌活性明显优于单一式的抗菌药物,值得临床推广。 【关键词】抗菌药物;头孢哌酮;复合制剂;血清杀菌活性;β—内酰胺酶 头孢哌酮以及良好的抗菌活性在临床有着很高的应用价值,但其针对各种细菌所产生的β—内酰胺酶不如第三代头孢菌素稳定。头孢哌酮/他唑巴坦与头孢哌酮/舒巴坦作为头孢哌酮的复合制剂,其针对各种细菌所产生的β—内酰胺酶抑制剂有着高效、广谱且不可逆的特性,对阴性细菌以及革兰阳性细菌生成的β—内酰胺酶有着良好的抑制作用[1]。本文选取36名健康男性为研究对象,对头孢哌酮、头孢哌酮/他唑巴坦以及头孢哌酮/舒巴坦的SBA血清杀菌活性进行对比,研究抗菌药物血清杀菌活性的临床意义,所取得成果现总结报告如下。1 资料与方法1.1一般资料选取36名健康男性为研究对象,按照随机抽取的方式将其划分为三组,每组各计12人。研究对象年龄为20~31岁,平均年龄为(25±1.8)岁,体重为58~73kg,平均体重为(63±2.1)kg。所选对象经调查测定均无药物过敏史[2],签署同意书自愿参与实验。1.2 方法所选取的36名健康男性以随机顺序先后给予包括头孢哌酮、头孢哌酮/他唑巴坦以及头孢哌酮/舒巴坦在内的抗菌药物(其中,头孢哌酮取剂量为1.5g、头孢哌酮/他唑巴坦含1.5g头孢哌酮以及0.75g他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦含1.5g头孢哌酮以及1.5g舒巴坦),晨起空腹状态下进行静脉滴注,并在静脉滴注后0.5h以及7h两个时间点采取观测者静脉血,制备血清标本(每类药物给药间隔时间为7d)。1.3统计学处理本文所有数据均采用SPSS13.0软件进行分析,经t检验并以p<0.05为有统计学意义。 2 结果 抗菌类药物头孢哌酮复合制剂(头孢哌酮/他唑巴坦与头孢哌酮/舒巴坦)对产超广谱β—内酰胺酶中的金黄色葡萄球菌、阴沟肠杆菌、表皮葡萄球菌以及大肠埃希菌的SBA血清杀菌活性较单纯意义上的头孢哌酮高出2~4倍左右(p<

抗菌药物的体外抑菌及体内抗菌实验

《生物工程综合实验平台》——《抗菌药物的体外抑菌及体内抗菌实验》 专业班级: 学号: 姓名: 小组成员: 实验日期:5月27日-5月30日 微生物综合实验

抗菌药物的体外抑菌及体内抗菌实验 班级16级生物技术1、2班姓名 学号座位号 实验日程安排 日期开始时间实验内容备注 5月27日(周一)14:30-15:30 实验背景、原理、方法 讲解 15:30-18:00 分组准备试剂、培养基、 实验器具 5月28日(周二) 上午 8:00-8:30 体内抑菌实验细菌接 种、培养 8:30-10:30 体外抑菌实验:MIC法 10:30-11:40 固体培养基的配制、体 外抑菌实验:纸片法、 5月28日(周二) 下午12:30-13:30 体内抑菌实验:4小时 实验组稀释涂布 5月28日(周二) 晚上20:00-21:00 体内抑菌实验:12小时 实验组稀释涂布 5月29日(周三) 上午10:00-12:00 体内抑菌实验:24小时 实验组稀释涂布; 体外抑菌实验:纸片法、 MIC法结果观察,分析; 5月30日(周四) 上午8:30-12:00 体内抑菌实验:4小时、 12小时、24小时实验组 结果观察、分析; 所有实验结果的统计与 讨论 抗菌药物的体外抑菌及体内抗菌实验

一、实验原理 抗菌药物一般是指具有抑菌或杀菌活性的药物,包括各种抗生素、磺胺类、咪唑类、硝基咪唑类、喹诺酮类等化学合成药物。由细菌、放线菌、真菌等微生物经培养而得到的某些产物,或用化学半合成法制造的相同或类似的物质,也可化学全合成。抗菌药物在一定浓度下对病原体有抑制和杀灭作用。 药物的体外抑菌实验,是指在体外测定药物抑制或杀灭细菌能力的实验。它是常用抗菌实验的方法,其中最常用的方法有系列稀释法和琼脂扩散法。 稀释法有液体培养基连续稀释法和固体稀释法(斜面法)两种,这两种方法都可以用来测定药物的最小抑菌浓度(MIC):是指该药物能抑制细菌生长的最低浓度,通常用ug/ml或U/ml表示。其结果判断方法为凡无肉眼可见细菌生长的药物最低浓度即为该菌的最小抑菌浓度(MIC)。 琼脂扩散法是将抗菌药物加至接种试验菌的平板表面,抗菌药物在琼脂胶内向四周自由扩散,其浓度随扩散距离增大而降低。在药物一定的扩散距离内,由于药物的抗菌效应,试验菌不能生长,此无菌生长的范围称为抑菌圈。抑菌圈的大小与药物的抑菌效应成正比。琼脂扩散法常有纸片法、管碟法、打洞法和挖沟法。一般药敏实验常采用纸片法,我们可以根据抑菌圈的大小,来判断菌种对药物的敏感性,是敏感,中度敏感还是耐药。 世界卫生组织规定了抗菌药物的敏感性评定标准,在标准实验条件下根据抑菌圈的大小来判断,如: 复方新诺明(SXT)左氧氟沙 星(LEV) 庆大霉 素(CN) 苯唑西 林(OXA) 氯霉素 (CM) MIC ug/ml 敏感(S)≤2/38 ≤1 ≤4 ≤2 ≤8 中度敏感(I)-- 2 8 -- 16 耐药(R)≥4/76 ≥4 ≥16 ≥4 ≥32

天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒(免疫抑制法)产品技术要求lepu

天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶测定试剂盒(免疫抑制法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶的活性。 1.1规格 试剂1: 3×60mL,试剂2: 1×45mL; 试剂1: 1×60mL,试剂2: 1×20mL; 试剂1: 1×48mL,试剂2: 1×12mL; 试剂1: 1×45mL,试剂2: 1×15mL; 试剂1: 1×50mL,试剂2: 1×25mL; 试剂1: 1×50mL,试剂2: 1×50mL; 试剂1: 1×50mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 1×60mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1:1×1.6L,试剂2:1×0.4L; 试剂1:1×4L,试剂2:1×1L。 1.2主要组成成分 试剂1主要组分: 试剂2主要组分:

2.1 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1:无色或淡黄色透明溶液;试剂2:无色或黄色透明溶液。外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 2.3.1 试剂空白吸光度 在340nm处测定试剂空白吸光度,应≥0.05; 2.3.2 试剂空白吸光度变化率 试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.8。 2.4 分析灵敏度 测试50U/L的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0005。 2.5 准确度 参照EP9-A2的方法,用比对试剂盒同时测试40例线性区间内的不同浓度的血清样本。其相关系数(r)不小于0.990。每个浓度点在[1,24)U/L区间内绝对偏差不超过±2.88U/L;[24,200]U/L区间内相对偏差不超过±12%。 2.6 重复性 批内变异系数(CV)应不超过10%。

药物的体外抗菌试验-第十九章

第十九章 药物的体外抗菌试验 教学要求 .(一)掌握常用的体外抑菌试验(连续稀释法、琼脂扩散法)。 .(二)熟悉杀菌试验(最低杀菌浓度、最低致死浓度的含义及测定的方法,活菌计数法,石碳酸系数测定法);联合抗菌试验(纸条试验、梯度平板纸条试验、棋盘格法),协同、拮抗、无关、累加的概念。 .(三)了解体外抗菌试验的影响因素。 第一节 常用的体外抑菌试验 一、药物的体外抗菌试验 .又称药敏试验,主要用于筛选抗菌药物或测定细菌对药物的敏感性。 .最低抑菌浓度(MIC):指药物完全抑制某种微生物生长的最低浓度。 .优点:方法简便、需时短、用药量少,不需要动物。 .缺点:不能根据体外试验结果肯定或否定一个药物的抗菌作用。试验菌 .细菌、霉菌和酵母菌常用 .标准菌株:来自专门机构,我国是卫生部生物制品检定所菌种保藏中心提供。 .临床分离株:经形态、生化及血清学等方面鉴定。不得有杂菌污染,不宜用传代多次的菌种,最好是重新活化的。控制培养时间。 .接种菌量的多少的计算培养基 .根据试验菌的营养要求进行选择 .培养基质量控制供试药物 .药物的浓度和总量要精确配制 .供试药物用适宜溶剂溶解并稀释至所需浓度,难溶药物加助溶剂。 .中草药或某些生药原粉的样品,应先提取,再浓缩至所需浓度对照试验 .试验菌对照:在无药情况下,应能在培养基内正常生长 .已知药物对照:已知抗菌药对标准的敏感菌株应出现预期的抗菌效应,对已知的抗药菌应不出现抗菌效应。 .溶剂及稀释剂对照:抗菌药物配制时所用的溶剂及稀释剂应无抗菌作用 (一)连续稀释法 .方法:液体法和固体法。 .用于测定药物的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。 .抑菌:药物可抑制微生物生长繁殖,但不杀死它,在药物除去后,微生物又可恢复生长 .杀菌:药物能杀死微生物,当药物去除后,微生物不再继续生长。 1、液体培养基稀释法 .方法:两倍稀释法 .步骤: 液体培养基稀释药物成系列递减的浓度每 管加入一定量试验菌24-48小时后肉眼观察试管浑浊情况,记录能抑制细菌生长的最低浓度(MIC)将未见细菌生长的各试管内的培养液(各吸取0.1ml)移种到新鲜的琼脂培养基上重新长出细菌的只具有抑菌作用,无菌生长(菌落数﹤5个)具有杀菌作用,记录最低杀菌浓度(MBC)。 液体稀释法图解 抗菌药物的浓度增加最低抑菌浓度移种平板

聚天门冬氨酸项目可行性(新)

聚天门冬氨酸项目简介 聚天门冬氨酸(polyaspartic acid;缩写为PASP)是一种氨基酸的聚合物,属于生物高分子材料。它天然存在于软体动物和蜗牛类的壳中,用以调节这些生物体的钙平衡。其分子量为1000至数十万,除具有水溶性羧酸的性质外,还有极易降解的特性,因此广泛地用于水处理剂、洗涤剂、化妆品、抑菌剂、分散剂、螯合剂、制革、制药、水凝胶等领域,是一种用途极为广泛,无毒、无污染、易降解的环境友好型化学品。早在1850年就出现了关于PASP合成的报导,由于其原料易得,价格不高,产品市场广阔,且无毒、无污染,因此自其首次人工合成以来,逐渐受到世界上各大化学公司的关注,其中以美国、德国、以及日本等国的化学公司对PASP的研究最为活跃。 一、用途 PASP是一种聚羧酸,其分子结构中含有大量羧基或羰基。PASP除具有一般聚羧酸的特点外,还具有很好的生物相容性及生物降解性,这些特点使PASP在水处理、日用化学品、医药、及农业等领域可获得十分广泛的应用,下面分别予以概述。 (1) 缓蚀剂、阻垢剂 PASP可螯合钙、镁、铜、铁等多价金属离子,尤其是可以改变钙盐的晶体结构,使其形成软垢,因而具有良好缓蚀、阻垢性能,可用作多价螯合剂、缓蚀剂及阻垢剂[35]。目前,PASP在这方面用量最大的是用于水处理,处理锅炉、水冷系统及炼油化工循环用水。例如:美国孟山都(Monsanto)公司[36]研制的PASP在3%的加入量时(pH10,30℃),对钢的缓蚀效果十分明显。美国柔姆哈斯公司(Rohm&Haas)研制的PASP的缓蚀效果非常好,既可用于水处理系统,又可用作仪器设备等洗液,起到清洁及缓蚀的作用。从文献上看,用作缓蚀剂,阻垢剂的PASP的分子量要求不高,一般都在15000以下,两种工艺路线都可用于合成这种产品。 (2)农药、肥料 PASP在土壤中很容易进入植物的根部,可吸收和富集根部周围土壤中对植物有用的元素如:N、P、K及Ca、Mg、S、Mn、Cu、Fe、B等,以此促进植物生长,它对各种土壤都适用。除直接施用外,还可用于植物种子的包衣,具有提高发芽率和保墒的作用。由于PASP降解性好,使用它既可促进植物生长,又可减少由于滥施肥料导致的地表水污染,因此,PASP是非常引人注目的新一代肥料。由于PASP具有良好的杀虫、灭菌和分散能力,因而将PASP用于农药,既可保护植物不受病虫侵害,又可与农药其它成分复配,使其在植物表面润湿、分散、增溶和渗透,充分发挥农药的药效。

天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒(天门冬氨酸底物法)产品技术要求senmeixikema

天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒(天门冬氨酸底物法) 适用范围:用于体外定量检测人血清中天门冬氨酸氨基转移酶的活性。 1.1规格 a) 试剂1:2×50ml,试剂2:2×10ml; b) 试剂1:2×60ml,试剂2:2×12ml; c) 试剂1:2×90ml,试剂2:2×18ml; d) 试剂1:2×400ml,试剂2:2×80ml; e) 试剂1:3×80ml,试剂2:3×16ml; f) 试剂1:4×50ml,试剂2:4×25ml; g) 试剂1:4×60ml,试剂2:4×12ml; h) 试剂1:6×50ml,试剂2:6×55.5ml; i) 试剂1:6×66ml,试剂2:6×16.5ml; j) 试剂1:8×50ml,试剂2:2×40ml; k) 试剂1:8×60ml,试剂2:2×48ml; l) 试剂1:12×20ml,试剂2:12×4ml; m) 试剂1:4×50ml,试剂2:4×10ml; n) 试剂1:1×50ml,试剂2:1×10ml; o) 试剂1:2×40ml,试剂2:2×8ml。 1.2 组成 试剂主要组分见表1: 表1 试剂主要组分 2.1 外观

外包装完整无破损,标签清晰;试剂1应为无色或淡黄色透明溶液;试剂2应为无色或淡黄色透明溶液。 2.2 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.3 试剂空白 2.3.1 试剂空白吸光度 在340nm处测定试剂空白吸光度,应≥1.0。 2.3.2 试剂空白吸光度变化率 试剂空白吸光度变化率(△A/min)应≤0.004。 2.4 分析灵敏度 测定浓度为150U/L的样品,吸光度变化率(△A/min)应不低于0.015。 2.5 线性 2.5.1在[5,500]U/L范围内,线性回归的相关系数应不低于0.990; 2.5.2测试浓度[50,500]U/L的样品,相对偏差应不超过±10%;测试浓度[5,50)U/L的样品,绝对偏差应不超过±5U/L。 2.6 重复性 2.6.1 批内重复性 变异系数(CV)应不超过5%。 2.6.2 批间差 对同一份样品进行重复测定,相对极差(R)应不超过10%。 2.7 准确度 回收率应在90%~110% 范围内。 2.8 稳定性 原包装试剂在2℃~8℃条件下有效期为18个月,取到效期后6个月内的试剂盒检测,应符合本技术要求2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7之规定。

线粒体天门冬氨酸氨基转移酶(mAST)测定试剂盒产品技术要求百奥泰康

线粒体天门冬氨酸氨基转移酶(mAST)测定试剂盒 适用范围:该产品用于体外定量测定人血清或血浆中线粒体天门冬氨酸氨基转移酶的活性。 1.1 产品规格

1.2 组成成分 1.2.1 试剂组成 试剂1 Tris缓冲液: <80mmol/L 乳酸脱氢酶(LDH) >1.2U/mL 苹果酸脱氢酶(MDH) >0.8U/mL 兔抗人天冬氨酸转氨酶胞质同工酶(cAST抗体) <1.5g/L 试剂2 L-天冬氨 酸>200mmol/L 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH) >0.18mmol/L

α-酮戊二 酸>12mmol/L 1.2.2 校准品组成 单水平的冻干校准品:在50mmol/L pH=7.0 的Capso(3-(环己烷)-1-丙磺酸)缓冲液中添加mAST纯品,稳定剂<0.1%;定值范围:30-120U/L。1.2.3质控品组成 单水平的冻干质控品:在牛血清(50g/L)中添加mAST纯品,稳定剂 <0.1%;目标浓度范围:30-100U/L。 2.1 外观 液体双试剂:试剂1:无色至淡黄色液体,试剂2:无色至淡黄色液体。 校准品:冻干、复溶后淡黄色澄清液体 质控品:冻干、复溶后淡黄色澄清液体 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 试剂空白 2.3.1 空白吸光度 试剂空白吸光度应≥1.0 。 2.3.2空白吸光度变化率 试剂空白吸光度变化率(ΔA/min)应≤0.004。 2.4 分析灵敏度 浓度为50U/L时,吸光度变化率(ΔA/min)应≥0.010。 2.5 线性

在(0,600]U/L线性范围内,线性相关系数r ≥0.996;在(0,100]U/L 时绝对偏差不超过10U/L;(100,600]U/L,范围内的相对偏差不超过±10%。 2.6 精密度 变异系数CV应≤8%。 2.7 批间差 不同批号之间测定结果的相对极差应≤10 %。 2.8 准确度 与已上市试剂盒比对,相关系数(r)应不小于0.9750;在[0,100]范围内绝对偏差应不超过10U/L,在(100,600]范围内相对偏差应不超过±10%。 2.9 质控品赋值有效性 测定值在质控靶值范围内。 2.10瓶间重复性(均一性) 校准品、质控品瓶间重复性CV≤5%。 2.11校准品溯源性要求 根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供线粒体天门冬氨酸氨基转移酶校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。校准品溯源至工作校准品并与上市试剂盒比对赋值。 2.12 稳定性 2.12.1效期稳定性 原包装试剂(含校准品、质控品),在2℃~8℃下有效期为18个月,试剂在规定的条件下保存到有效期末,取失效期的试剂盒检测其试剂空白、分析灵

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