一、名词解释:
1.灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器
对单位浓度或质量的被检物质通过检测器时所产生的响应信号值变化大小的反应能力,它反映仪器能够检测的最小被测量。
2.误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与标称值(即真值)之间
的差异称为误差,误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。
3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(即输入为零)时,仪器输出信
号的波动或变化范围即为噪音。
4.最小检测量:检测仪器能确切反映的最小物质含量。最小检测量也可以
用含量所转换的物理量来表示。如含量转换成电阻的变化,此时最小检测量就可以说成是能确切反应的最小电阻量的变化量了。
5.精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真
值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。
6.可靠性:仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下执行
其功能的能力。它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。
7.重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)
下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。
8.分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产
生、能响应的输出量)的最小值。
9.测量范围:在允许误差极限内仪器所能测出的被检测值的范围。
10.线性范围:输入与输出成正比例的范围。也就是反应曲线呈直
线的那一段所对应的物质含量范围
二、简答题:
3. 临床检验仪器具有哪些特点?答:临床检验仪器具有以下特点:结构复
杂、涉及的技术领域广、技术先进、精度高、对使用环境要求严格。
5. 简述临床检验仪器的发展趋势。答:由计算机技术和通信技术相结合
而发展的计算机网络,形成了多用户共享高精度、高速度、多功能、高可靠性的检验仪器;临床检验仪器正朝着集大型机的处理能力和小型机的应变能力于一身,超小型、多功能、低价格、更新换代频繁、床边和家庭型的方向迈进;模块式设计形成一个高质量多功能的检验系统,实现了一机多用;生物传感器和芯片的应用将使检验仪器小型化,灵活多用,相应的检验仪器正在不断出现和发展;专家系统技术更趋完善,使临床检验仪器具有更高级的智能;仪器更机器人化;自动化水平更高。检验结果标准化;仪器更个性化;仪器小型便携化。
6. 临床检验仪器常用的性能指标有哪些?
答:一个优良的检验仪器应具有的性能指标有:灵敏度好、精度高;噪音、误差小;分辨率高,可靠性、重复性好;响应迅速;线性范围宽和稳定性好。
7. 临床检验仪器有哪些主要部件?答:通常,临床检验仪器有取样装置、
预处理系统、分离装置、检测器、信号处理系统、显示装置、补偿装置、辅助装置、样品前处理系统等主要部件。
8. 临床检验仪器的维护应从哪几个方面考虑?答:使用前,操作人员应认
真阅读仪器操作说明书,熟悉仪器性能,严格按照操作规程掌握正确的使用方法,才能使仪器始终保持在良好运行状态;应该有一个符合检验仪器使用标准的环境;应有良好的供电以保证检验仪器的精度和稳定性;应当按照仪器说明书提供的方法和标准(图谱)对仪器定期进行校验;应该认真做好仪器的工作记录。
一、名词解释
1.光学显微镜:简称光镜,是利用日光照明将小物形成放大影像的精密光学仪器,由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成。光学系统由物镜和目镜组成,其核心是物镜和目镜中的两组透镜,其放大成像的机理是先由物镜形成放大的实像,再由目镜进一步放大成虚像,最后在人眼中形成实像。
2.荧光显微镜:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物
质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。
3.相衬显微镜:是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,用于观察活细胞和未染色的标本的一种特殊显微镜。
4.暗视野显微镜:是利用特殊的聚光镜使照明光线斜射而不能直接进入物镜,形成暗视野,那些经过标本散射的光线才能进入物镜放大,在黑暗的背景中呈现标本明亮的轮廓的显微镜。
5.偏光显微镜:是利用光的偏掁特性,对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后分成两束折射光) 的晶态、液晶态物质进行观察和研究的重要光学仪器。
6.激光扫描共聚焦显微镜:以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点,使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像,而焦面以外的漫射光不参加成像,改变焦平面,可获得细胞或原标本不同层次的图像,从而得到样品的三维结构图像。
7.倒置显微镜:当观测活体标本时,需要把照明系统放在载物台及标本之上,而把物镜组放在载物台器皿下进行放大成像的显微镜,又称生物培养显微镜。
8.紫外光显微镜:使用紫外光源进行照明的显微镜。
9.电子显微镜:简称电镜,是利用波长很短的电子束作为照明光源,通过电子流对细胞样品的透射或反射及电磁透镜的多级放大而在荧光屏上成像的大型精密仪器。
10.透射电子显微镜:简称透射电镜,是利用电子枪发出的高速电子束照射超薄的生物样品,收集透射电子流经电磁透镜的多级放大后成像的仪器。
11.扫描电子显微镜:简称扫描电镜,是一种主要用于观察组织细胞表面或细胞内断面的电镜。其工作原理是从电子枪发出的电子束经电磁聚光镜汇聚成极细的电子探针,并在细胞样品表面逐点扫描,收集样品表面产生的二次电子再经转换、放大,最终在荧光屏同步扫描成像。
12.超高压电子显微镜:生成电子束的电压超过500kV 的电子显微镜。
13.扫描隧道电子显微镜:当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时,此处电子云重叠,外加电压(2mV~2V),针尖与样品之间产
生隧道效应而有电子逸出,形成隧道电流,通过隧道电流获取显微图像的电子显微镜。
14.分辨率:也称分辨本领,指分辨物体细微结构的的能力。
15.放大率:或称放大倍数是指显微镜经多次成像后最终所成(放大的)
像的大小相对于原物体大小的比值。
16.数值孔径:又叫镜口率,是物体与物镜间媒质的折射率n 与物镜孔
径角的一半(β)正弦值的乘积。
17.显微摄影术:是利用显微照相装置,把显微镜视野中所观察到物件的
细微结构真实地记录下来,以供进一步分析研究之用的一种技术。
18.景深与焦长:在成一幅清晰像的前提下,像平面不变,景物沿光轴前后移动的距离称“景深”。景物不动,像平面沿光轴前后移动的距离称“焦长”。
19.视野:视野又称视场,是指通过显微镜所能看到的标本所在空间的范围。
20. 齐焦:当某一物镜调焦清晰后,变换其它物镜时,也能基本保证焦距
适当、成像清晰。
21. 像差:光学仪器不可能使物点发出而进入系统的所有光线都是沿着
高斯光学的理想光路成像,从而导致成像在形状方面的缺陷,称之为像
差。
22. 色差: 是一种由白光或复色光在即使严格满足高斯条件下也存在
的特殊类型的成像缺陷。当用白光或复色光经透镜成像时,会因各种色
光存在着光程差而造成颜色不同、位置不重合、大小不一致的不同成像
效果,从而造成像和物体的较大失真。
三、简答题
1.简述光学显微镜的工作原理。答:显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统,是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜,而焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。
被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然
后此实像再被目镜作第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。
2.简述光学显微镜的结构组成。答:基本结构包括光学系统和机械系统两大部分。光学系统是显微镜的主体部分,包括物镜、目镜、聚光镜及反光镜等组成的照明装置。机械系统是为了保证光学系统的成像而配置的,包括调焦系统、载物台和物镜转换器等运动夹持部件以及底座、镜臂、镜筒等支持部件。照明设置的主要部件有光源、滤光器、聚光镜和玻片等。
3.物镜和目镜在工作条件和技术要求上有哪些不同?
答:显微镜的物镜、目镜各由数只组成一套,物镜和目镜间的不同组合构成不同的放大倍率。物镜采用转换器调换,显微镜的物镜应满足齐焦要求,即调换物镜后,不需要重新调焦就能看到物体的像。为此,不同倍率物镜的共轭距应为常数。目镜采用插入式调换,目镜的相对孔径很小,一般为 1/20~1/40。显微镜的目镜是在窄光束、大视场的条件下工作的。
5.简述医学检验中常用的荧光显微镜的原理、结构及用途。答:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。荧光显微镜是由光源、滤色系统和光学系统等主要部件组成。荧光显微镜与普通光学显微镜主要区别在于光源和滤光片不同。通常用高压汞灯作为光源,可发出紫外线和短波长的可见光;滤光片有二组,第一组称激发滤片,位于光源和标本之间,仅允许能激发标本产生荧光的光通过(如紫外线);第二组是阻断滤片,位于标本与目镜之间,可把剩余的紫外线吸收掉,只让激发出的荧光通过,这样既有利于增强反差,又可保护眼睛免受紫外线的损伤。光学系统主要有反光镜、聚光镜、目镜、物镜、照明系统等组成。荧光显微镜可用于观察检测细胞中能与荧光染料特异结合的特殊蛋白、核酸等,其标本染色简便、荧光图像色彩鲜亮,而且敏感度较高。
6. 简述荧光显微镜的使用注意事项。答:使用荧光显微镜时应注意以下事
项:①观察对象必须是可自发荧光或已被荧光染料染色的标本;②载玻片、盖玻片及镜油应不含自发荧光杂质;③选用最好的滤片组;④荧光标本一般不能长久保存,若持续长霎时间照射(尤其是紫外线)易很快褪色。因此,如
有条件则应先照相存档,再仔细观察标本;⑤启动高压汞灯后,不得在 15 分钟内将其关闭,一经关闭,必须待汞灯冷却后方可再开启。严禁频繁开闭,否则,会大大降低汞灯的寿命;⑥若暂不观察标本时,可拉过阻光光帘阻挡光线。这样,即可避免对标本不必要的长时间照射,又减少了开闭汞灯的频率和次数;⑦较长时间观察荧光标本时,最好戴能阻挡紫外光的护目镜,加强对眼睛的保护。
7.简述相衬显微镜的工作原理、结构特点及其主要用途。答:相衬显微镜的基本原理是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见。光线透过标本后发生折射,偏离了原来的光路,同时被延迟了1/4λ(波长),如果再增加或减少1/4λ,则光程差变为1/2λ,两束光合轴后干涉加强,振幅增大或减小,提高反差。相衬显微镜的结构特点:①环形光阑(annular diaphragm)位于光源与聚光镜之间,作用是使透过聚光镜的光线形成空心光锥,聚焦到标本上;②相位板(annular phaseplate)在物镜中加了涂有氟化镁的相位板,可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ,并能吸收直射光(背景光)的光强,使直射光与衍射光的光强趋于一致,能更好地突出干涉的效果。相衬显微镜主要用于观察活细胞和未染色的标本。
8.简述偏光显微镜的结构特点、工作原理及其主要用途。答:是利用光的偏掁特性,对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后分成两束折射光)的晶态、液晶态物质进行观察和研究的重要光学仪器。偏光显微镜是在一般显微镜的基础上增添了使普通光线转变成偏振光和检测偏振光的装置或观察干涉图样的特殊透镜,即光源前有偏振片(起偏器),使进入显微镜的光线为偏振光,镜筒中有检偏器(一个偏振方向与起偏器垂直的起偏器),这种显微镜的载物台是可以旋转的。当载物台无样品时,无论如何旋转载物台,由于两个偏振片是垂直的,显微镜里看不到光线。而放入旋光性物质后,由于光线通过这类物质时发生偏转,因此旋转载物台便能检测到这种物体。移相装置是偏光显微镜在使用过程中不可缺少的附件。全波片、半波片及 1/4 波片可以使通过波片的偏振光分别延迟 2π、π和π/2 的相位。而补偿器则可连续调节使通过的偏振光相位发生连续改变。移相装置对观察光的偏振
性质是十分必要的。利用偏光显微镜可以清楚地观察到纤维丝、纺锤体、胶原、染色体、卵巢、骨骼、毛发、活细胞的结晶或液晶态的内含物、神经纤维、肌肉纤维等的细微结构等。
9.简述激光扫描共聚焦显微镜的工作原理。答:激光扫描共聚焦显微镜利用单色激光扫描束经过照明针孔形成点光源,对标本内焦平面上的每一点进行扫描,标本上的被照射点,在检测器的检测针孔处成像,由检测针孔后的光电倍增管逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像,照明针孔与检测针孔相对于物镜焦平面是共轭的。焦平面的点同时聚焦于照明针孔和检测针孔,焦平面以外的点不会在检测针孔处成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面,克服了普通荧光显微镜图像模糊的缺点。另外在显微镜的载物台上加一个微量步进马达,可使载物台沿着Z 轴上下移动,将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上,样品的不同层面的图像都能清楚地显示,成为连续的光切图像。
10.简述激光扫描共聚焦显微镜的结构特点及其在医学领域的主要用途。
答:激光共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。另外在其载物台上加一个微量步进马达,可使载物台沿着Z 轴上下移动,将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上,样品的不同层面的图像都能清楚地显示,成为连续的光切图像。
激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)具有高灵敏度、高分辨率、高放大率等特点。在医学领域主要用于细胞三维重建、细胞定量荧光测定、细胞内钙离子、pH 值和其它离子的动态分析、细胞间通讯和膜的流动性等过程的研究。
11. 电镜的基本类型有哪些?各有什么特点?答:电镜的基本类型有透射
电子显微镜与扫描电子显微镜。射电子显微镜与扫描电子显微镜都用于放大与分辨微小结构,这两种技术通过标本对电子束的影响来探测标本结构。透射电子显微镜的电子束穿过标本,聚焦成像于屏幕或显像屏上,扫描电子显微镜的电子束在标本表面进行扫描,反射的电子聚焦成像于屏幕或显像屏。透射电子显微镜用于研究超薄切片标本,有极高分辨率,可给出细微的
胞内结构。扫描电子显微镜可以反映未切片标本的表面特征。
12.扫描电镜与透射电镜相比有哪些特点?
答:①能够直接观察样品表面的结构,样品的尺寸可大至120mm×
80mm×50mm;②样品制备过程简单,不用切成薄片;③样品可以在样品室中作三度空间的平移和旋转,因此,可以从各种角度对样品进行观察;④景深大,图像富有立体感。扫描电镜的景深较光学显微镜大几百倍,比透射电镜大几十倍;
⑤图像的放大范围广,分辨率也比较高。可放大十几倍到几十万倍,它基本上包括了从放大镜、光学显微镜直到透射电镜的放大范围。分辨率介于光学显微镜与透射电镜之间,可达 3nm;⑥电子束对样品的损伤与污染程度较小;⑦在观察形貌的同时,还可利用从样品发出的其他信号作微区成分分析。
13.电镜由哪几个主要部分组成?对成像质量影响较大的部件有哪些?电子显微镜主要由电子光学系统(电子透镜和电子枪)、真空系统、供电系统、机械系统和观察显示系统等几部分组成。对成像质量影响较大的部件有电子透镜和电子枪。电子透镜存在各种像差,这是影响成像质量的主要因素。
在实际设计中,是通过适当缩小口径、提高加速电压、增大电极圆筒或线圈直径及减低放大率来减少球差,通过降低电子的初速度、提高加速电压和稳定电源电压来减少色差的。
14.光学显微镜与电子显微镜的主要区别是什么?
答:①照明源不同。电镜所用的照明源是电子枪发出的电子流,而光镜的照明源是可见光。由于电子流的波长远短于光波波长,故电镜的放大及分辨率显著高于光镜。②透镜不同。电镜中起放大作用的物镜是电磁透镜,而光镜的物镜则是玻璃磨制而成的光学透镜。电镜中的电磁透镜共有三组,分别与光镜中聚光镜、物镜和目镜的功能相当。③成像原理不同。在电镜中,作用于被检样品的电子束经电磁透镜放大后打到荧光屏上成像或作用于感光胶片成像。其电子浓淡的差别产生的机理是,电子束作用于被检样品时,入射电子与物质的原子发生碰撞产生散射,由于样品不同部位对电子有不同散射度,故样品电子像以浓淡呈现。而光镜中样品的物像以亮度差呈现,它是
由被检样品的不同结构吸收光线多少的不同所造成。④所用标本制备方式不同。电镜观察所用组织细胞标本的制备程序较复杂,技术难度和费用都较高,在取材、固定、脱水和包埋等环节上需要特殊的试剂和操作,最后还需将包埋的组织块切成超薄标本片。而光镜观察的标本则一般置于载玻片上,如细胞涂片标本,细胞滴片标本等。
15.扫描隧道显微镜是纳米生物学研究工具,为何能用来观察活的生物样品?
答:扫描隧道显微镜可在真空、大气、常温等不同环境下工作,甚至可将样品浸在水和其它溶液中,不需要特别的制样技术。这些特点特别适用于研究生物样品和在不同实验条件下对样品表面的评价。由于没有高能电子束,探测过程对样品表面没有破坏作用(如辐射,热损伤等),所以能对生理状态下生物大分子和活细胞膜表面的结构进行研究,样品不会受到损伤而保持完好。
一、名词解释
1.离心现象:物体远离圆心运动的现象称为离心现象,也叫离心运动。
2.重力沉降:液体中的微粒受重力的作用,较重的微粒下沉与液体分开,这个现象称为重力沉降。
3.沉降速度:在强大离心力的作用下,单位时间内物质的运动的距离。
4.扩散现象:在介质中,扩散是由于微粒的热运动而产生的质量迁移现象,主要是由于密度差引起的,这种现象称为扩散现象。
5.解释R·C·F:相对离心力,是指在离心力场中,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度“g”
6.解释沉降系数:是指颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度,其单位为秒。
7.K 系数:是用来描述在一个转子中,将粒子沉降下来的效率。也就是溶液恢复成澄清程度的一个指标。
8.最大转速:指离心转头可达到最大转速,单位是rpm。
9.最大离心力:指离心机可产生的最大相对离心力场R·C·F,单位是g。
10.最大容量:指离心机一次可分离样品的最大体积,通常表示为m×n。
11.调速范围:也叫转速设置范围,指离心机转头转速可调整的范围。
12.温度控制范围:指离心机工作时可控制的样品温度范围。
13.工作电压:一般是指离心机电机工作所需的电压。
14.电源功率:通常是指离心机电机的额定功率。
三、简答题
1.什么是离心技术,离心技术主要用于哪些方面?答:应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为离心技术,实现离心技术的仪器是离心机。
离心技术主要用于各种生物样品的分离、纯化和制备,在细胞生物学和分子生物学的每一进程中,总可见到离心技术的运用。
2.离心机的工作原理是什么?答:(1)离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差异进行分离、浓缩和提纯生物样品的一种方法。(2)悬浮液在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒以一定的速度沉降,从而使溶液得以分离。(3)颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。(4)微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态、密度、重力场的强度及液体的黏度有关。(5)离心机就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力,迫使液体中微粒克服扩散加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。
3.怎样克服微粒在沉降中所发生的扩散现象?答:扩散现象是不利于样品的分离的,离心就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力,迫使液体中微粒克服扩散加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。
4.什么是离心力及离心现象?答:当物体所受外力小于运动所需要的向心力时,物体将向远离圆心的方向运动。物体远离圆心运动的现象称为离心现象。也叫离心运动。
6.什么叫相对离心力?
答:是指在离心力场中,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度“g”。
7.什么叫沉降速度?答:指在强大离心力
作用下,单位时间内物质运动的距离。
8.什么叫离心沉降?答:(1)在离心机中,离心管放于离心转头里,当离心机开动时,离心管绕离心转头的轴旋转,作圆周运动,在离心管内的样品颗粒将同样运动。(2)对于离心管而言,样品颗粒由顶位移到了A 位,也就是由离心管顶部移到了底部,这与重力场中的由高处落到低处相似。这种颗粒在圆周运动时的切线运动称为离心沉降。
9.什么叫最小离心力场及最大离心力场?
答:通常称离心管顶部到旋转中心的距离为最小离心半径R min,该处承受的离心力场为最小离心力场。通常称离心管底部到旋转中心的距离为最大离心半径R max,该处承受的离心力场称为最大离心力场。
10.常用的离心方法分几类?答:常用的离心方法大致可分为平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法等三类。
11.什么是差速离心法?答:是利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别,在同一离心条件下,通过不断增加相对离心力,使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分步沉淀的离心方法。所以这个方法又称为分步离心法。
12.差速离心法的优、缺点是什么?答:差速离心法的优点:(1)操作简单;(2)分离时间短、重复性高;(3)样品处理量大。缺点:(1)分辨率有限、分离效果差;(2)壁效应严重;(3)颗粒被挤压,离心力过大、离心时间过长会使颗粒变形、聚集而失活。
13.什么是密度区带离心法?答:又称为区带离心法,是样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡,在一定离心力下把颗粒分配到梯度液中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。
14.什么是速率区带离心法?答:速率区带离心方法是根据分离的粒子在离心力作用下,在梯度液中沉降速度的不同,离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内形成几条分开的样品区带,达到彼此分离的目的。
15.什么是等密度区带离心法?答:当不同颗粒存在浮力密度差时,在离
心力场下,颗粒或向下沉降,或向上浮起,一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上(即等密度点)形成区带,称为等密度区带离心法。
16.分析型超速离心机的工作原理是什么?
答:其工作原理与一个普通水平转子相同。分析室有上下两个平面的石英窗,离心机中装有的光学系统可保证在整个离心期间都能观察小室中正在沉降的物质,可以通过对紫外光的吸收(如对蛋白质和DNA)或折射率的不同对沉降物进行监测。后一方法的原理是:当光线通过一个具有不同密度区的透明液,在这些区带的界面上产生光的折射。在分析室中物质沉降时重粒子和轻粒子之间形成的界面就像一个折射的透镜,结果在检测系统的照相
底板上产出一个“峰”,由于沉降不断进行,界面向前推进,故“峰”也在移动,从峰移动的速度可以得到物质沉降速度的指标。
17.分析型超速离心机的应用范围?答:(1)测定生物大分子的相对分子重量;(2)生物大分子的纯度估计;(3)分析生物大分子中的构象变化
18.国际上对离心机的分类有几种方法,分成哪些类型?答:通常国际上对离心机的分类有三种方法:按用途分、按转速分、按结构分。按用途可分为制备型、分析型和制备分析两用型;按转速分类可分为低速、高速、超速等离心机;按结构可分为台式、多管微量式、细胞涂片式、血液洗涤式、高速冷冻式、大容量低速冷冻式、台式低速自动平衡离心机等。
19.低速离心机、高速离心机、超速离心机的应用范围是什么?答:(1)低速离心机主要用作血浆、血清的分离及脑脊液、胸腹水、尿液等有形成份的分离;(2)高速离心机主要用于临床实验室分子生物学中的DNA、RNA 的分离和基础实验室对各种生物细胞、无机物溶液、悬浮液及胶体溶液的分离、浓缩、提纯样品等;(3)超速离心机主要用于亚细胞器的分级分离,还可以分离病毒、核酸、蛋白质和多糖等。
20.超速离心机按用途可分为几种类型?答:超速
离心机按用途分为制备型、分析型及分析制备两用型
三种。
21.制备型及分析型超速离心机的用途有哪些?答:制备型超速离心机主要用于生物大分子、细胞器和病毒等的分离纯化,能使亚细胞器分级分离,并可
用于测定蛋白质及核酸的分子量;分析型超速离心机可以通过光学系统对测试样品的沉降过程及纯度进行观察。
22.免疫血液离心机都用于哪些方面?答:是为临床输血所设计的一种带有标准化操作程序的专用离心机。用于白细胞抗原检测的淋巴细胞分离、洗涤及细胞染色体制作的细胞分离;用于血小板的分离、凝血酶的处理离心;
用于抗人球蛋白试验;用于洗涤红细胞及血浆的分离等。
23.细胞涂片离心机的工作程序是怎样进行的?答:当样品经梯度离心分离出杂质,将细胞使用离心力从液体悬浮物中分离出来,甩到载玻片上。染液由自动喷雾器的转盘喷到每一张涂片上,用离心的方法除去过剩的染液,细胞、细菌分布均匀,无重叠,染色效果好。
24.低速离心机的大致结构有哪些?答:结构较为简单,由电动机、离心转盘(转头)、调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件构成。
25.高速、超速(冷冻)离心机的结构包括哪几部分?答:高速(冷冻)离心机的结构由转动装置、速度控制系统、温度控制系统、真空系统、离心室、离心转头及安全保护装置等。超速(冷冻)离心机主要由驱动和速度控制、温度控制、真空系统和转头四部分组成。
26.离心机转头一般可分为几类、各自
用途是什么?答:一般可分为五大类。
(1)固定角转头:用于分离沉降速度有明显差异的颗粒样品。
(2)甩平式转头:又分为敞开式和封闭式两种。敞开式主要用于样品的初分离。封闭式主要用于线粒体、细胞核等的分离和密度梯度离心。
(3)连续流动转头:用于悬浮介质中高速分离较小的颗粒物质。
(4)区带转头:用于大容量的密度梯度离心。
(5)垂直转头:用于样品在短时间作密度梯度离心。
27.简述区带转头的结构与用途?答:该转头由四块叶片的转头体和密封系统组成为四个扇形小室,叶片上有径向导管,梯度液通过密封管道泵入转子内,然后通过密封组件中心输液管加入样品。主要用于大容量的密度梯度离心。
28.对使用离心方法的选择要求是什么?答:差速离心法的选择:若样品
中存在两种以上质量和密度不同的样品颗粒,可采用差速离心法。密度梯度离心法的选择:对于有密度梯度差异的样品介质,可采用密度梯度离心法,使沉降系数比较接近的物质得以分离。等密度梯度离心法的选择:若不同样品颗粒的密度范围在离心介质的密度梯度范围内,离心时密度不同的物质颗粒因浮力差异或向下沉降,或向上漂浮,一直移到它们各自密度恰好对应的位置(等密度点),形成区带。可采用等密度梯度离心。
29.离心机分离样本时的离心时间、温度和pH 的确定,其意义是什么?
答:离心时间的确定依据离心方法的不同有所差别。对于差速离心来说,是指某种颗粒完全沉降到离心管底的时间;对等密度梯度离心而言,是指颗粒完全到达等密度点的平衡时间;密度梯度离心所需的离心时间则是指形成界限分明的区带的时间。温度和pH值的确定是为了防止欲分离物质的凝集、变性和失活,除了在离心介质的选择方面加以注意外,还必须控制好温度及介质溶液的pH值等离心条件。
30.在使用离心机时应注意哪些问题?答:(1)使用各种离心机时,必须事先平衡离心管和其内容物,要对称放置,转头中绝对不能装载单数的管子,以便使负载均匀地分布在转头的周围:
(2)装载溶液时,使用开口离心机时不能装得过多,以防离心时甩出,造成转头不平衡、生锈或被腐蚀。制备型超速离心机的离心管,则要求必须
将液体装满,以免离心时塑料离心管的上部凹陷变形。严禁使用显著变形、损伤或老化的离心管:
(3)离心过程中应随时观察离心机上的仪表是否正常工作,如有异常的声音应立即停机检查,及时
排除故障。未找出原因前不得继续运转。
31.简述离心机转头的使用、消毒及保养方式。答:转头是离心机中须重点保护的部件,每次使用前要严格检查孔内是否有异物和污垢,以保持平衡;每次使用后,必须仔细检查,并用温水(500C-600C)及中性洗涤剂浸泡清洗或定期用消毒液消毒(每周消毒一次),最后用蒸馏水冲洗,软布擦干后用电吹风吹干、上蜡、干燥保存。每一转头都应有使用档案,记录累积的使用时间,若超过了该转头的最高使用时限,则须按规定降速使
用。
32.怎样对离心机进行保养?答:在日常使用离心机的过程中,每隔三个月应对主机校正一次水平度,每使用5亿转处理真空泵油一次,每使用
1500小时左右,应清洗驱动部位轴承并加上高速润滑油脂,转轴与转头接合部应经常涂酯防锈,长期不用时应涂防锈油加油纸包扎,平时不用时,应每月低速开机1-2次,每次0.5小时,保证各部位的正常运转。
33.离心机电机不转时应怎样进行检查?答:(1)主电源指示灯不
亮,检查保险丝是否熔断,电源线、插头、插座是否接触良好。
(2)主电源指示灯亮而电机不能启动。①检查波段开关,瓷盘变阻器损坏或其连接线是否断脱。②检查磁场线圈的连接线断脱或线圈内部短路③检查真空泵表及油压指示值。
34.离心机机体震动、响声异常,常见的原因有哪些?答:(1)离心管重量不平衡,放置不对称;(2)转头孔内有异物,负荷不平衡或使用了不合格的试管套;(3)转轴上端固定螺帽松动,转轴摩擦或弯曲;(4)电机转子不在磁场中心会产生噪音;(5)机座上减震弹簧的固定螺丝松动或其中一根弹簧断裂;(6)转子本身损伤。
35.简述使用Ficoll 梯度液直接分离外周血单个核细胞的原理。答:红细胞、粒细胞比重大,离心后沉于管底;淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重,离心后漂浮于分层液的液面上,也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞,就可以从外周血中分离到单个核细胞。
36.简述快速氯化铯密度梯度离心法提取分离大质粒DNA 的原理。答:用氯化铯密度梯度离心分离核酸时,在高浓度氯化铯溶液中和溴化乙锭(EB)过量的情况下,EB-DNA 络合物的浮力密度发生改变,改变的大小与 EB 结合量成反比。因此,用氯化铯密度梯度超速离心法,可分离双链RNA 和单链RNA。也可分离共价闭合环状DNA 与线形或带缺口的环状DNA。同时,EB-DNA 络合物在紫外光下能产生荧光,可见到离心后形成的区带,便于收集DNA,所得的EB-DNA 络合物用异戊醇抽提去EB,即可回收所需的
DNA。此法得到的DNA 纯度很高。
37.离心分离技术在实际工作中应用的范围大致有哪些?答:离心分离技
术已成为常规的分离、纯化、鉴别各种生物大分子的不可缺少的方法。高(超)速离心机已成为生物、医学、化学、农业实验室必不可少的实验设备。在生物化学领域,超速离心技术广泛应用于蛋白质、酶、激素、核酸和病毒的研究。
38.简述国内外新型离心机的类型及应用特点。
答:我国研制的SS 型三足式离心机是一种过滤式离心机,结构简单、操作方便、分离时颗粒不易破坏,已广泛应用于各行业和科研实验室。国外研制的 P2 离心机将拥有更强大的转子,旋转速度更快,浓缩能力更强的新式离心机。俄罗斯利萨马拉医科大学的专家,已研制了使下肢骨折患者更快地康复的新型医用离心机并应用于临床治疗。
39.离心方法目前发展的现状是什么? 答:目前,离心方法已逐渐走向规范化、标准化、专业化。各种专用离心机不断出现,对所分离样品由计算机自动控制程序设定了一定的转速、相对离心力及离心时间等。
一、名词解释
1.激发光谱:将激发光的光源用单色器分光,连续改变激发光波长,固定荧光发射波长,测定不同波长的激发光照射下,物质溶液发射的荧光强度的变化,以激发光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标作图,即可得到荧光物质的激发光谱。从激发光谱图上可找出发生荧光强度最强的激发波长λex。
2.荧光光谱:选择λex 作激发光源,并固定强度,而让物质发射的荧光通过单色器分光,测定不同
波长的荧光强度。以荧光波长作横坐标,荧光强度为纵坐标作图,便得荧光光谱。荧光光谱中荧光强度最强的波长为λem 。荧光物质的最大激发波长(λex)和最大荧光波长(λem)是鉴定物质的根据,也是定量测定中所选用的最灵敏的波长。
3.光谱分析:对物质发射辐射能的能谱分析或对辐射能与物质相互作用引起的能谱改变的分析均称
为光谱分析。
4.吸收光谱:光照射到物质时,一部分光会被物质吸收。在连续光谱中某些波长的光被物质吸收后产生的光谱被称作吸收光谱。每一种物质都有其特
定的吸收光谱,因此可根据物质的吸收光谱来分析物质的结构和含量。
5.发射光谱:一部分物质分子或原子吸收了外来的能量后,可以发生分子或原子间的能级跃迁,所
产生的光谱称为发射光谱,包括线状光谱、带状光谱及连续光谱。通过测定物质发射光谱可以分析物质的结构和含量。
6.摩尔吸光系数(ε):摩尔吸光系数表示在一定波长下测得的液层厚度为1cm, 溶液浓度c为
1mol/L时的稀溶液吸光度值。吸光系数与入射光波长、溶液温度、溶剂性质及吸收物质的性质等多种因素有关。当其它因素固定不变时,吸光系数只与吸收物质的性质有关,可作为该物质吸光能力大小的特征数据。
7.分光光度计:能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器称为分光光度计。它具有分析精密度高、测量范围广、分析速度快和样品用量少等优点。根据所使用的波长范围不同可分为紫外光区、可见光区、红外光区以及万用(全波段)分光光度计等。
8.荧光:某些物质吸收光能量后,可发射波长与激发光波长相同或不同的光,当激发光源停止照射
试样,再发射过程立即停止,这种再发射的光称为荧光。按照来源不同可分为分子荧光和原子荧光。荧光的发生和强度与物质的分子(或原子)结构有着密切的关系。通过测定物质分子产生的荧光强度可进行物质的定性与定量分析。
9.朗伯-比尔定律:是比色分析的基本原理,表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度
之间的定量关系。当用一束单色光照射吸收溶液时,其吸光度A 与液层厚度b 及溶液浓度的乘积c 成正比,此即朗伯-比尔定律。数学表达式为: A=kbc。它适用于分子吸收和原子吸收。
10.单色器:将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束的装置,是分光光度计的关键部件。主要由入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜组成。
11.吸收池:又称为比色皿、比色杯、样品池或液槽等,是用来盛放被测
溶液的器件,同时也决定
着透光液层厚度,可用塑料、玻璃、石英或熔凝石英制成。在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;在紫外区,需用能透紫外线的石英或熔凝石英制作。
12.外光电效应:光照射在某些金属表面,会有光电子从金属表面逸出,这种光电效应称为外光电效应。利用外光电效应可以制成光电管和光电倍增管。
13.内光电效应:光深入到物体内部,将物体内部原子中的一部分束缚电子激发成自由电子,但这些电子并不逸出物体,而是留在物体内部从而使物体导电性增强,这种效应称为内光电效应。利用内光电效应,可制成光敏电阻(阻值随光照强度而明显改变)、光敏二极管(二极管接上反向电压,没有光照时呈反向截止状态,有光照射时,反向电流明显增大,经三极管放大后再推动继电器工作)以及光电池。
14.光电管:利用碱金属的外光电效应制成的光电转换元件。按电极结构不同可分为中心阳极式、中心阴极式和平行平板式几种,按管内充气与否又可分为真空光电管与充气光电管两种。光电管的质量取决于阴极灵敏度、线性范围、最大、最小可测能量等几个重要技术指标。
15.光电倍增管:利用外光电效应与多级二次发射体相结合而制成的光电元件,由一个表面涂有光敏材料的阴极和若干个(通常为 9 个~13 个)二级电子发射极(打拿极)组成,其灵敏度比光电管高 200 多倍。有三个重要指标:波长效应、灵敏度和噪声水平。
16.光电二极管阵列:检测器为多道光检测器,可同时检测多个波长的光强度。它是由一行光敏区
和二行读出寄存器构成。光电二极管阵列不怕强光、耐振动、耐冲击、重量轻、耗电少、寿命长、光谱响应范围宽、量子效率高、可靠性高、读出速度快。
17.光电池:某些半导体材料受光照射时,背光面和受光面之间会产生电位差。在两面之间可检测到电流。这种光电转换元件即为光电池。常用的有硒光电池、硅光电池等。光电池所产生的光电流与入射光强成正比。光电池
的优点是结实、便宜、使用方便,不用外接电源,只要受光照射,便能产生电流,应用起来很方便。缺点是容易受潮而使其产生的电流大小不稳定。
18.电荷耦合器件:一种新型固体多道光学检测器件,是在大规模硅集成电路工艺基础上研制而成
的模拟集成电路芯片。它可以借助必要的光学和电路系统,将光谱信息进行光电转换、储存和传输,在其输出端产生波长-强度二维信号,信号经放大和计算机处理后在末端显示器上同步显示出人眼可见的图谱,无须感光板那样的冲洗和测量黑度的过程。
19.波长准确度:指仪器波长指示器上所示波长值与仪器此时实际输出的波长值之间的符合程度。可用二者之差来衡量分光光度计的准确性。
20.波长重复性:是指在对同一个吸收带或发射线进行多次测量时,峰值波长测量结果的一致程度。通常取测量结果的最大值与最小值之差来作为衡量分光光度计的准确性指标之一。
21.光度准确度:指仪器在吸收峰上读出的透射率或吸光度与已知真实透射率或吸光度之间的偏差。该偏差越小,光度准确度越高。
22.光度线性范围:指仪器光度测量系统对于照射到接收器上的辐射功率与系统的测定值之间符合线性关系的功率范围,也就是仪器的最佳工作范围。在此范围内测得的物质的吸光系数才是一个常数。这时候仪器的光度准确度最高。
23.分辨率:指仪器对于紧密相邻的峰可分辨的最小波长间隔,它是分光光度计质量的综合反映。单色器输出的单色光的光谱纯度、强度以及检测器的光谱灵敏度等是影响仪器分辨率的主要因素。
24.光谱带宽:指从单色器射出的单色光(实际上是一条光谱带)最大强度的1/2 处的谱带宽度。它与狭缝宽度、分光元件、准直镜的焦距有关,可以认为是单色器的线色散率的倒数与狭缝宽度的乘积。
25.杂散光:指除了所需波长以外的其余所有光。它是测量过程中的主要误差来源,会严重影响检测准确度。有两种原因引起的杂散光:①仪器中光学、机械零件的反射和散射等原因使所采用的测定波长的光偏离正常光路,在不通过样品的情况下直接照射到单色器。这种杂散光波长与测定波
长相同;②由仪器的光学系统设计制作缺陷引起。如不必要的反射面、光束孔径不匹配、光学元件表面的擦痕、光学系统的像差、不均匀色散以及由于机械零部件加工不良、位置错移、仪器内壁防眩黑漆脱落等。
26.基线稳定度:指在不放置样品的情况下,分光光度计扫描100%T 或0%T 时读数偏离的程度,是
仪器噪声水平的综合反映。一般取最大的峰缝之间的值作为绝对噪声水平。如果基线稳定度差,光度准确度就低。
27.基线平直度:指在不放置样品的情况下,扫描100%T 或0%T 时基线倾斜或弯曲的程度,是分光
光度计重要性能指标之一。在高吸收时,0%线的平直度对读数的影响大;在低吸收时,100%线的平直度对读数的影响大。光学系统的失调、两个光束不平衡、仪器振动等都影响基线平直度。基线平直度不好,可使样品吸收光谱中各吸收峰间的比值发生变化,给定性分析造成困难。
28.原子化器:原子化器是在原子吸收光谱仪中提供能量将液态试样中的待测元素干燥蒸发使之转
变成原子态蒸气的部件。常用的有火焰原子化器和无火焰原子化器两种。火焰原子化器常用的是预混合型原子化器,无火焰原子化器常用的是石墨炉原子化器。
29.特征浓度:指产生1%吸收或0.0044 吸光度时所对应的被测元素的浓度或质量。可作为原子吸
收光谱仪对某个元素在一定条件下的分析灵敏度。特征浓度S值越小,表示分析灵敏度越高。
30.检出限:表示在选定的实验条件下,被测元素溶液能给出的测量信号 3 倍于标准偏差时所对应的浓度(单位:mg/L)。无火焰光谱法中常用绝对检出限表示,单位为g。它是原子吸收光谱法中一个很重要的综合性技术指标,既反映仪器的质量和稳定性,也反映仪器对某元素在一定条件下的检出能力。检出限越低,说明仪器性能越好,对元素的检出能力越强。
31.原子发射光谱法:根据处于激发态的待测元素原子回到基态时发射的特征谱线对待测元素进行分析的方法。
临床检验仪器复习题及 答案 集团文件版本号:(M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988)
《临床检验仪器学》 一、选择题 1.流式细胞仪检测细胞的大小的信号是.:前向角散射 2、VCS白细胞分类技术不包括:细胞化学染色技术 3.毛细管粘度计不适合检测:全血 4、尿液分析仪的测试项目中,与酸碱指示剂无关的项目是:尿葡萄糖 5.血细胞分析仪中对网织红细胞的检测原理: 光散射和细胞化学染色 6、关于光学显微镜的分辨率,下列有误的是:与照明光的波长成反比 7、流式细胞仪中的光电倍增管接收:荧光 8、前向角散射可以检测:被测细胞的大小 9、流式细胞仪测定的标本,不论是外周血细胞,还是培养细胞,首先要保证是:单细胞悬液 10、电阻抗型血细胞分析仪的缺点是只能将白细胞按体积大小分为:三个亚群或二个亚群 11、有关血细胞分析仪的叙述不正确的是:高档次血细胞分析仪白细胞的分类计数很准确 12、双磁路磁珠法中,随着纤维蛋白的产生增多,磁珠的振幅逐渐:减弱 13、毛细管黏度计工作原理的依据是:泊肃叶定律 14、尿蛋白定性干化学检测法只适用于检测:清蛋白 15、流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理是:应用流式细胞术和电阻抗 16、BacT/Alert血培养瓶的底部含一个传感器,用于检测:二氧化碳
17、密度梯度离心法又称为:区带离心法 18、根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是:等密度区带离心法 19、等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是:液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度 20、表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是:Rmin 21、pH玻璃电极对样本溶液pH的敏感程度取决于:电极的玻璃膜 22、PCO 电极属于:气敏电极 2 23、临床上大量使用的电解质分析仪,测量样本溶液中离子浓度的电极是:离子选择电极 24、通常血气分析仪中毛细管pH玻璃电极的pH测定范围是:0?10 25、为将血气分析仪气路系统所提供的气体饱和湿化,需经过的装置是:湿化器 26、世界上最早的自动生化分析仪是:管道式自动生化分析仪 27、具有空气分段系统的自动生化分析仪是:连续流动式自动生化分析仪 28、离心式自动生化分析仪特有的关键部件是:转头 29、自动分析仪中采用“顺序分析”原理的是:连续流动式自动生化分析仪 30、微孔板固相酶免疫测定仪器(酶标仪)的固相支持是:PVC微孔板 31、以空气为加热介质的PCR仪是:离心式实时定量PCR仪 32、能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为:原位PCR仪
第一章概论 一、名词解释: 1.灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器时所产生的响应信号值变化大小的反应能力,它反映仪器能够检测的最小被测量。 2.误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与标称值(即真值)之间的差异称为误差,误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。 3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(即输入为零)时,仪器输出信号的波动或变化范围即为噪音。 4.最小检测量:检测仪器能确切反映的最小物质含量。最小检测量也可以用含量所转换的物理量来表示。如含量转换成电阻的变化,此时最小检测量就可以说成是能确切反应的最小电阻量的变化量了。 5.精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。 6.可靠性:仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下执行其功能的能力它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。 7.重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。 8.分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输出量)的最小值。 9.测量范围:在允许误差极限内仪器所能测出的被检测值的范围。 10.线性范围:输入与输出成正比例的范围。也就是反应曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围 11.响应时间:表示从被检测量发生变化到仪器给出正确示值所经历的时间。 12.频率响应范围:为了获得足够精度的输出响应,仪器所允许的输入信号的频率范围。 第四章紫外——可见分光光度计 1.分光光度计:能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器称为分光光度计。它具有分析精密度高、测量范围广、分析速度快和样品用量少等优点。根据所使用的波长范围不同可分为紫外光区、可见区、红外光区以及万用(全波段)分光光度计等。 2.吸收光谱:光照射到物质时,一部分光会被物质吸收。在连续光谱中某些波长的光被物质吸收后产生的光谱被称作吸收光谱。每一种物质都有其特定的吸收光谱,因此可根据物质的吸收光谱来分析物质的结构和含量。 3.朗伯-比尔定律:是比色分析的基本原理,表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。当用一束单色光照射吸收溶液时,其吸光度 A 与液层厚度 b 及溶液浓度的乘积 c 成正比,此即朗伯-比尔定律。数学表达式为: A=kbc。它适用于分子吸收和原子吸收。 4.摩尔吸光系数(ε):摩尔吸光系数表示在一定波长下测得的液层厚度为 1cm, 溶液浓度 c 为1mol/L 时的稀溶液吸光度值。吸光系数与入射光波长、溶液温度、溶剂性质及吸收物质的性质等多种因素有关。当其它因素固定不变时,吸光系数只与吸收物质的性质有关,可作为该物质吸光能力大小的特征数据。 6.单色器:将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束的装置,是分光光度计的关键部件。主要由入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜组成。 7.吸收池:又称为比色皿、比色杯、样品池或液槽等,是用来盛放被测溶液的器件,同时也决定着透光液层厚度,可用塑料、玻璃、石英或熔凝石英制成。在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;在紫外区,需用能透紫外线的石英或熔凝石英制作。 8.光电管:利用碱金属的外光电效应制成的光电转换元件。按电极结构不同可分为中心阳极式、中心阴极式和平行平板式几种,按管内充气与否又可分为真空光电管与充气光电管两种。光电管的质量取决于阴极灵敏度、线性范围、最大、最小可测能量等几个重要技术指标。 9.光电倍增管:利用外光电效应与多级二次发射体相结合而制成的光电元件,由一个表面涂有光敏材料的阴极和若干个(通常为 9 个~13 个)二级电子发射极(打拿极)组成,其灵敏度比光电管高 200 多倍。有三个重要指标:波长效应、灵敏度和噪声水平。 10.波长准确度:指仪器波长指示器上所示波长值与仪器此时实际输出的波长值之间的符合程度。可用二者之差来衡量分光光度计的准确性。 11.波长重复性:是指在对同一个吸收带或发射线进行多次测量时,峰值波长测量结果的一致程度。通常取测量结果的最大值与最小值之差来作为衡量分光光度计的准确性指标之一。 12.光度准确度:指仪器在吸收峰上读出的透射率或吸光度与已知真实透射率或吸光度之间的偏差。该偏差
一选择题 (1)A型题(单项选择题,每题1分,共30分) 1.具有吞噬传递免疫信息在特异免疫中起重要作用的细胞是() A中性粒细胞 B 单核细胞 C淋巴细胞 D 嗜碱性粒细胞 E红细胞 2.冲液后,计数池每个大格的体积是() A 0.1u l B 0.01 ul C 1.0 ul D 0.0001 ul 3.血片经过瑞氏染色后,成熟红细胞呈鲜红色,白细胞核染色呈浅灰色, 其原因是PH为() A 5.4 -6 B 7.4-8 C 6.5-7 D 8.2-8.6 E 8.7-9.4 4.三种粒细胞区别的要点是() A细胞大小 B特异性颗粒 C染色质结构 D浆颜色 E核浆比例 5.下列除了哪种疾病外,均是中性粒细胞增加的疾病() A猩红热 B尿毒症 C 流行性感冒 D 铅中毒 E化脓性阑尾炎 6.嗜酸性粒细胞一般分叶核常为() A一叶 B二叶 C三叶 D四叶 E 五叶 7.在血液中,中性粒细胞杆状核以上幼稚细胞增多称为() A核左移 B核右移 C中毒颗粒 D 逆行性变化 E杜勒氏小体 8.一种血红蛋白衍生物是棕红色,在波长540nm处,有一较宽的吸光带, 它是() 9.大面积烧伤患者红细胞和血红蛋白相对增高的原因是() A红细胞生成增多 B红细胞寿命延长 C 红细胞破坏减少 D 血液浓缩 E白细胞生成减少
10.诊断铅中毒的最佳指标是() A.网织红细胞增多B低色素红细胞增多 C 靶红细胞增多D 点彩红细 胞增多 11使血沉明显加快的原因是() A红细胞数量增多 B 大红细胞贫血 C 镰刀形红细胞贫血 D 球形红细胞贫血 E 红细胞凝集成团 12.关于魏氏血沉发测定下列哪项是错误的() A.深静脉血1.6ml B 用血沉管吸抗凝血至零刻度 C与0.4ml抗凝剂混匀 D垂直立于血沉架上 E 室温静置半小时 13.关于血沉的说法下列哪项是错误的() A.正常男性血沉生理变化不大 B 新生儿血沉加快C妇女月经期血沉可 加快 D 年龄超过50岁的老年人血沉可加快E 高原地区的居民血沉低于平原地区的居民 14.欲中和A型血清的天然抗体,可加哪一种唾液() A A型分泌型唾液 B B型分泌型唾液 C O型分泌唾液 D A B型分 泌唾液 E 任何唾液 15.用标准血清鉴定血型,下列哪项的结果应判断为A型血() A与抗A不凝,抗B凝抗A+B凝 B与抗A凝,抗B不凝抗A+B凝 C 与抗A凝,抗B凝抗A+B不凝 D与抗A不凝,抗B不凝抗A+B凝 E与抗A不凝,抗B凝抗A+B不凝
《临床检验仪器学》 一、选择题 I.流式细胞仪检测细胞的大小的信号是.:前向角散射2、VCS白细胞分类技术不包括: 细胞化学染色技术3.毛细管粘度计不适合检测:.全血4、尿液分析仪的测试项目中, 与酸碱指示剂无关的项目是:尿葡萄糖5.血细胞分析仪中对网织红细胞的检测原理:光散射和细胞化学染色6、关于光学显微镜的分辨率,下列有误的是:与照明光的波长成反比7、流式细胞仪中的光电倍增管接收:荧光8、前向角散射可以检测:被测细胞的大小 9、流式细胞仪测定的标本,不论是外周血细胞,还是培养细胞,首先要保证是:单细胞悬液 10、电阻抗型血细胞分析仪的缺点是只能将白细胞按体积大小分为:三个亚群或二个亚群 II、有关血细胞分析仪的叙述不正确的是:高档次血细胞分析仪白细胞的分类计数很准确 12、双磁路磁珠法中,随着纤维蛋白的产生增多,磁珠的振幅逐渐:减弱13、毛细管黏度计工作原理的依据是:泊肃叶定律14、尿蛋白定性干化学检测法只适用于检测:清 蛋白15、流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理是:应用流式细胞术和电阻抗16、BacT/Alert 血培养瓶的底部含一个传感器,用于检测:二氧化碳17、密度梯度离心法又称为:区带离心法18、根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是:等密度 区带离心法19、等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是:液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度20、表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是:Rmin 21、pH玻璃电极对样本溶液pH的敏感 程度取决于:电极的玻璃膜22、PCO2电极属于:气敏电极23、临床上大量使用的电解质分析仪,测量?样本溶液中离子浓度的电极是:离子选择电极24、通常血气分析仪中毛细管pH玻璃电极的pH测定范围是:0?10 25、为将血气分析仪气路系统所提供的气体饱和湿化,需经过的装置是:湿化器26、世界上最早的自动生化分析仪是:管道式自动生化分析仪27、具有空气分段系统的自动生化分析仪是:连续流动式自动生化分 析仪28、离心式自动生化分析仪特有的关键部件是:转头29、自动分析仪中采用“顺序分析”原理的是:连续流动式自动生化分析仪30、微孔板固相酶免疫测定仪器(酶标仪)的固相支持是:PVC微孔板31、以空气为加热介质的PCR仪是:离心式实时定量PCR 仪32、能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为:原位PCR仪33、PCR反应正确过程应为:变性一退火一延伸34、一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为:梯度PCR仪35、PCR基因扩增仪最关键的部分是:温度控制系统36、试剂空白变化速率:是在反应温度下试剂自身吸光度随时间的变化37、以下哪项不是微生物自动鉴定与药敏分析系统的性能特点:数据管理系统功能强大,但系统软件大多不可以不断升级。 38、全自动血凝仪中的免疫学方法,通常选用:免疫比浊法39、自动生化分析仪工作较长时间后个别项目出现系统误差,则首先考虑日因素是:.标准品是否变质40、比色杯清洗步骤中可以忽略的是:经吹干后可以继续循环使用41、使用(区带)转头离心时 不需要离心管,样品直接加至其中即可42、使用电阻加热和半导体冷却的PCR仪的恒 温方法属:变温金属块恒温法43、含2个加样针、灌注式加试剂装置、双圈反应盘的自 动生化分析仪的取样周期为6s,则测定单试剂法的工作效率为(1200 )测试/h 44、测最电流变化的电极是:P02电极45、血培养仪的检测信号不包括:温度46、按血凝仪检测原理,下述中不属于凝固法的是:免疫比浊法47、流式细胞术尿沉渣分析仪应用的原理是:流式细胞术和电阻抗原理48、含1个加样针、1个加试剂针、 单圈反应盘的自动生化分析仪的取样周期为 4.5s,贝删定单试剂法的工作效率为(800 ) 测试/h 49、关于底物消耗限额参数,不正确的是:目的是提高监测精密度50、全自动尿沉渣分析仪中F1几乎极低而Fsc大小不等可以为:红细胞51、以下哪项不是微生物自动鉴定与药敏分析系统的性能特点:数据管理系统功能强大,但系统软件大多不可以不断升
精心整理 临床检验基础病例分析题一 病例:患者,男,45岁,上腹饱胀,厌食,体重减轻,消瘦和进行性贫血,胃痛呈持续性,进食后加重。 查体:上腹部有肿块,质坚硬,有压痛,可移动,腹腔内有积液。 12患者4常,体重无变化。既往体健,个人史、家族史无特殊。 体检:T 39.5℃,P 98次/分,R 22次/分,BP 122/83mmHg 。发育正常,营养中等,神志清楚,无皮疹,浅表淋巴结不大,咽部无充血,扁桃体不大,颈静脉无怒张,胸廓无畸形,呼吸平稳,左上肺叩浊,语颤增强,有湿哕音,心界不大,心率105次/分,律齐,无杂音,腹软,肝脾未及。
实验室检查:RBC:5.5×1012/L,Hb 145g/L,WBC:12.5×109/L;分类Nsg 75%,E 1.5%,L 22%,PLT 205×109/L,尿常规(-),粪便常规(-)。 1.根据以上资料,请做出初步诊断并简述其诊断依据。 答:根据以上资料,初步诊断为:左侧肺炎(肺炎球菌性可能性大)。 其诊断依据为: ① ② ③ 2 天/28 查体: 苍白,贫血貌,皮肤粘膜无出血点,浅表淋巴结不大,巩膜无黄染,舌乳头正常,心肺无异常,肝脾不大。 实验室检查:血液检查:Hb:64 g/L,RBC:3.6×1012/L,MCV:78fl,MCH:18pg,MCHC:299g/L,HCT 28%,RDW 18%,外周血涂片红细胞以小红细胞为主;WBC:5.6
×109/L,分类:Nsg 68%,L 25%,M 2%,PLT:240×109/L,Reti 2.0%。尿蛋白(-),镜检无异常,大便隐血(-),血清铁9.5 μrnol/L(9~27μrnol/L)。1.根据以上资料,请做出初步诊断并简述其诊断依据? 答: (1)根据以上资料,该患者初步诊断为:①缺铁性贫血? ②月经过多原因待查? (2) :299g/L 2 答: 急诊。 查体:急性病容,巩膜疑有黄染。右上腹有明显压痛伴肌紧张: 实验室检查:WBC 12.4×109/L,中性粒细胞80%,淋巴细胞20%:B超:胆囊明显增大,囊壁增厚,可见反射很强的胆石数个,最大约1.5cm,提示胆囊炎、胆石症。
《临床检验仪器学》复习题 一、名词解释 灵敏度线性范围预处理系统K系数TEM SEM STM 灵敏度数值孔径离子选择性电极血细胞分析仪(BCA) 尿液分析仪自动生化分析仪自动化程度电化学分析技术流式细胞术噪音线性范围响应时间漂移电化学分析技术参比电极待测电极预处理系统实验室自动化系统全实验室的自动化(TLA)临床实验室信息系统(LIS) 医院信息系统(HIS) 化学电池离心现象离心技术扩散现象相对离心力沉降系数沉降速度沉降时间自动化程度通道差孔间差零点漂移ELISA 化学发光电化学发光发光免疫分析技术电化学性质POCT 二、填空 高速(冷冻)离心机的结构包括_________、_________、_________、________、____________、_________、_________等. 临床实验室常用的离心方法包括、和三类. 显微镜的分辨率表达式是。 流式细胞仪主要在通常在____ 和____ 这两个角度接收并检测细胞散射光强度。 电子显微镜包括_________、_________、_________ 、___________ 、____________五部分。 电子透镜包括____ 和____ 两种。 扫描隧道显微镜是根据量子力学原理中的和而设计。 STM 的两种工作模式分别是____ 和____ 。 尿液分析仪的测试原理包括、和三个原理。 尿液分析仪的反射率= 。 尿液分析仪由:、和三部分组成。 尿有形成分检验包括和两方面的检验。 流式细胞仪主要接受细胞的____ 信号和____ 信号。 流式细胞仪的基本结构由_________、_________、_________ 、___________ 、____________五部分构成。 常用参比电极主要有____ 和____ 两种 流式细胞仪中鞘液的作用是。 自动血培养系统主要由、和所构成。 电子显微镜根据成像方式的不同可以分为____ 和____ 两种类型。 生化分析仪的光路按照单色器的位置可以分为____ 和____ 两种。 自动生化分析仪的类型按反应装置的结构可分为4类:_______________、_______________、_______________、_______________。 目前临床上常用的三类免疫标记方法是______________、___________________、____________________。 临床电化学分析仪器包括____ 和____ 两种 血气分析仪的包括基本电极包括_______________、_______________、_______________、_______________四种。 血气分析仪的pH系统使用和两种标准缓冲液来进行定标;氧和二氧化碳系统用两种混合气体来进行定标。第一种混合气中含;第二种含。 电化学发光免疫分析的发光反应底物有____ 和____ 两种 生化分析仪的分析效率是指。 A/D转换的含义是。 LCD器的中文全称是。 自动生化分析仪采用后分光的含义是指。 自动生化分析仪中的通道数是指。 微生物自动化系统一般可分_______________________和____________________________ 两类。 临床电化学分析仪主要有_____________、_____________两种。 单色器包括________、_____________、_____________三种类型。 样品前处理系统占检验总工作量的。 离心机按照离心速度大小分为________、_____________、_____________。 FCM分选指标包括________、_____________、_____________。
第一章血液标本采集和血涂片检查 一、选择题 (一)、A1型题(标准型) 1.静脉采血法的采血部位首选: A. 肘部静脉 B. 手背静脉 C. 内踝静脉 D. 股静脉 E. 颈静脉 2.WHO推荐成人皮肤采血部位为: A. 无名指指端内侧 B. 中指和无名指指端内侧 C. 中指指端内侧 D. 耳垂 E. 大拇趾 3.血细胞分析中最常用的染色法为: A. 吉姆萨染色 B. 瑞氏染色 C. HE染色 D. 罗氏染色 E. PAS染色 (二)、A1型题(否定型) 3. 下列那一种抗凝剂不能与血液中的钙离子结合: A. EDTA-K2 B. 草酸钠 C. 草酸铵 D. 肝素 E. 枸橼酸钠 四、论述题 1. 试述瑞氏染色法的原理及PH值对其的影响? 参考答案 一、选择题 (一)、A1型题(标准型) 1.A 2.A 3.B (二)、A1型题3.D 四、论述题 1. ①瑞氏染色法的原理:瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料美兰组
成的复合染料。瑞氏染料溶于甲醇后,解离为带正电的美兰和带负电的伊红。由于各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力不同,因此染色后呈现不同的色彩。如血红蛋白和嗜酸颗粒为碱性可与酸性染料伊红结合染成红色。细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美兰或天青结合染成紫蓝色或蓝色。中性颗粒呈等电状态,与伊红和美兰均可结合染成紫红色。此染色过程既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。 ②PH值的影响:细胞各种成分均为蛋白质组成,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH值而定。在偏酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,染色偏红。在偏碱性环境中负电荷增多,易与美兰或天青结合,染色偏蓝。
名词解释 分辨率:显微镜可分辨的两点间的最小距离,即为显微镜的分辨率,它主要取决于照明波长以及物镜的球差系数。 朗伯比尔定律:光被透明介质吸收的比例与入射光的强度无关;在光程上每等厚层介质吸收相同比例值的光。 离子选择性电极:离子选择性电极是一类利用膜电势测定溶液中离子的活度或浓度的电化学传感器,当它和含待测离子的溶液接触时,在它的敏感膜和溶液的相界面上产生与该离子活度直接有关的膜电势。 数值孔径:数值孔径描述了物镜收光锥角的大小,而后者决定了显微镜收光能力和空间分辨率。数值孔径是物镜和聚光镜的主要技术参数,是判断两者性能高低的重要标志。 鞘流技术:为了避免计数中血细胞从小孔边缘处流过及湍流,涡流的影响,发明的技术。具体做法是用一毛细管对准小孔管,细胞混悬液从毛细管喷出。同时与四周流出的鞘液一起流过敏感区,保证细胞混悬液在中间形成单个排列的细胞流,四周被鞘液围绕。 问答题 1、影响电泳的因素 答:电场强度、溶液的PH值、溶液的离子强度、电渗作用、粒子的迁移率、吸附作用 2、离心机的离心方法 答:差速离心法、密度梯度离心法、分析性超速离心法 3、酸度计的测定原理以及常用电极 答:酸度计的测定原理:酸度计的主体是一个精密电位计,将电极插在被测溶液中,组成一个电化学原电池,通过测量原电池的电动势并直接用PH值表示出来。传感电极根据被测液氢离子浓度不同而产生不同的电位,根据能斯特方程式,酸度计将所检测到的微小电压变化值换算成PH值。 常用电极有参比电极和测量电极,参比电极包括甘汞电极和Ag-AgCl电极,测量电极为玻璃电极 简答题 1、朗伯比尔定律的成立条件 答:①入射光为单色光②溶液浓度不能过大 2、分光光度计的类型 答:单光束分光光度计、双光束分光光度计、双波长分光光度计 3、血细胞计数器的测量原理 答:当细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,其内外电极之间的恒流电路上的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号,脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积成正比,根据欧姆定律,细胞体积越大,电压越高,产生信号的脉冲幅度越大。经计算机处理后,以体积直方图显示出特定细胞群中的细胞体积和细胞分布情况。 4、常用的色谱仪有哪两种以及各自的特点 答:常用的色谱仪有气相色谱仪和液相色谱仪两种。 气相色谱仪具有高分辨率、高速度、高灵敏度以及选择性好等优点。但它只能用于被气化物
第一章概论 1、一个优良的检验仪器应具有(P3):灵敏度、分辨率和精度高,噪音和误差小,可靠性、稳定性和重复性好,响应时间短,测量范围、示值范围、频率响应范围和线性范围宽等性能指标。 2、最小检测量与分辨率的区别?(P5) 答:①分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输入量)的最小值。 3、精确度与灵敏度的区别?(P3) 答:①灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器是所产生的响应信号值变化大小的反应能力,他反应仪器能够检测的最小被测量。②精确度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。③区别: 4、精确度(P5):对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。 5、重复性(P5):在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。 6、准确度和精确度的区别。(P5) 第二章离心机 1、简述分析型超速离心机的工作原理。(P26) 答:分析型超速离心机主要由一个椭圆形的转子、一套真空系统和一套光学系统所组成。该转子通过一个柔性的轴联接成一个高速的驱动装置,此轴可使转子在旋转时形成自己的轴。转子在一个冷冻的真空腔中旋转,其容纳了两个小室:分析室和配衡室。配衡室是一个经过精密加工的金属块,作为分析室的平衡用。分析室的容量一般为1ml,呈扇形排列在转子中,其工作原理与一个普通水平转子相同。分析室有上下两个平面的石英窗,离心机中装有的光学系统可保证在整个离心期间都能观察小室中正在沉降的物质,可以通过对紫外光的吸收(如对蛋白质和DNA)或折射率的不同对沉降物进行监测。在分析室中物质沉降时重粒子和轻粒子之间形成的界面就像一个折射的透镜,在检测系统的照相底板上产出一个“峰”。
临床检验仪器的常用性能指标:灵敏性,误差,噪音,最小检测量,精确度,可靠性,重复性,分辨率,测量范围和示值范围,线性范围,响应时间,频率响应范围。 光学显微镜的工作原理:利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。由两组会聚透镜组成光学折射成像系统。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组成为物镜;焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。相对于物镜的成像条件及最后二次成像于观察者的明视距离等条件的满足,是通过仪器的机械调焦系统来实现的。 光学显微镜的基本结构:包括光学系统(物镜、目镜、聚光镜及反光镜)和机械系统(聚光镜升降、调焦系统、载物台和物镜转换器等运动夹持部件以及底座、镜臂、镜筒等支持部件) 光学显微镜照明设置部件:光源、滤光器、聚光镜、玻片。 光的吸收定律:即郎伯-比尔定律,是比色分析的基本原理。表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的函数关系。A=-lg I/I0=lg I0/I=lg 1/T=kbc 电阻抗型血细胞分析仪的计数原理:血细胞与等渗的电解质溶液相比为不良导体,其电解质比稀溶液大。当血细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,其内外电极之间的恒流电路上的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号。脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积成正比。根据欧姆定律,在恒电流电路上,电压变化与电阻变化成正比,电阻值又同细胞体积成正比,血细胞体积越大,电压越高,产生信号的脉冲幅度就越大。各种大小不同的细胞产生的脉冲信号分别被送入仪器的检测通道,经计算机处理后,以体积直方图显示出特定细胞群中的细胞体积和细胞分布情况。最后得出WBC、RBC、PLT。(该原理称库尔特血细胞检测原理 血细胞分析仪测定Hb的原理:除干式离心分层型、无创型外,各种BCA对Hb测定都采用光电比色原理。血细胞悬液中加入溶血剂后,RBC溶解释放出Hb,后者与溶血剂中有关成分形成Hb衍生物,进入Hb测试系统。在特定波长(多为530~550nm)下进行光电比色,吸光度值与所含Hb含量成正比。与不同型号BCA配套的溶血剂不同,形成Hb衍生物也不同,吸收光谱也有差异,但最大吸收峰都接近540nm,因为国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的氰化高铁(HiCN)法的最大吸收峰在540nm,仪器Hb的校正必须以HiCN值为标准。 尿液分析:是临床诊断泌尿系统疾病的重要措施之一,通过对尿液的物理学检查和化学检查,可观察尿液物理性状和化学成分的变化。在尿沉渣检查中能够看到的有形成分为红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、巨噬细胞、肿瘤细胞、细
第一章血液一般检验的基本技术 ㈠单项选择题(A型题) 1. 成人静脉采血时,通常采血的部位是(A1型题)"实践技能" A 手背静脉 B 肘部静脉 C 颈外静脉 D 踝静脉 E 股静脉 [本题答案] 2. 静脉采血时,错误的操作是(A1型题)“实践技能" A 从向外消毒穿刺部位皮肤 B 进针时使针头斜面和针筒刻度向上 C 见回血后松开压脉带 D 未拔针头而直接将血液打入容器 E 如需抗凝应轻轻混匀 [本题答案] 4. EDTA盐抗凝剂不宜用于(A1型题)“实践技能" A 红细胞计数 B 白细胞计数
C 血小板计数 D 白细胞分类计数 E 凝血象检查和血小板功能试验 [本题答案] 6. 枸橼酸钠的抗凝原理是(A1型题)"基础知识" A 阻止凝血酶的形成 B 阻止血小板聚集 C 除去球蛋白 D 与血液中的钙离子形成螯合物 E 除去纤维蛋白原 [本题答案] 7. 关于抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"专业知识" A EDTA-Na2溶解度大于 EDTA-K2 B EDTA盐与血浆中钙离子生成螯合物 C 肝素作为抗凝血酶Ⅲ的辅因子而抗凝 D 枸橼酸钠可用于红细胞沉降率测定 E 枸橼酸钠可用于输血保养液 [本题答案] 8. 对草酸盐抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"基础知识"
A 草酸铵可使血细胞膨胀 B 双草酸盐可用于血细胞比容测定 C 对Ⅴ因子保护差 D 过去用于凝血象的检查 E 可干扰血浆中钾,钠和氯的测定 [本题答案] 9. ICSH建议,血细胞计数时首选抗凝剂是(A1型题)"基础知识" A EDTA-K2 B EDTA C EDTA-Na2 D 肝素 E 枸橼酸钠 [本题答案] 11. 肝素抗凝主要是加强哪种抗凝血酶的作用(A1型题)"基础知识" A 抗凝血酶Ⅰ B 抗凝血酶Ⅱ C 抗凝血酶Ⅲ D 抗凝血酶Ⅳ E 抗凝血酶Ⅴ
临床检验仪器学第四讲第12章血细胞分析仪 (Blood Cell Analyzer) 南京医科大学第一临床医学院 临床医学工程处 刘坚
?血细胞分析仪(Blood Cell Analyzer)是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的 常规检验仪器。 ?血液分析仪主要完成以下两大功能: ⑴血细胞计数:红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白。 ⑵血细胞分类:白细胞中的淋巴、中性、嗜酸、嗜碱、单核、 幼稚细胞;红细胞中的网织红细胞。 ?根据计数/分类的测定值计算间接测定值 红血球容积比(HCT)、平均红血球血红蛋白含量(MCH)、 血小板容积比(PCT),等等
1947年Coulter 发明了小孔电阻抗法 通过测量细胞的体积大小对细胞进行分类计数 主要是用来计数红、白细胞 该技术一直被各种血液分析仪沿用至今 1953年库尔特家族研制出全世界第一台血细胞计数仪:Model A Wallace H. & Joseph R. Coulter
血细胞计数(Blood count) 早期的血液分析仪主要用来计数红、白细胞全血细胞计数(Complete Blood cell Count) 增加光电比色系统用来同时测定血红蛋白 血小板可在同一仪器上与红细胞一起计数 利用直接测量到的项目运算得到间接计算 项目(如血球压积等参数) 不包括白细胞分类计数 测定标本采用机外人工处理的预稀释方式
白细胞分类计数 (Differential Leukocyte Cell Count) 带电脑的显微镜下辨认细胞的图象识别技术 效率低,受制片、染色技术的影响大 在计数细胞数不多时,重复性较差 没有得到普遍推广 阻抗法仪器检测白细胞“二分群、三分群” 仪器内部结构的进一步完善 微处理器分辨力的进一步提高 特殊溶血剂的应用 无法对细胞内部结构进行分析,准确性有限
第一章血液一般检验的基本技术㈠单项选择题(A型题) 1. 成人静脉采血时,通常采血的部位是(A1型题)"实践技能" A 手背静脉 B 肘部静脉 C 颈外静脉 D 内踝静脉 E 股静脉 [本题答案] B 2. 静脉采血时,错误的操作是(A1型题)“实践技能" A 从内向外消毒穿刺部位皮肤 B 进针时使针头斜面和针筒刻度向上 C 见回血后松开压脉带 D 未拔针头而直接将血液打入容器 E 如需抗凝应轻轻混匀 [本题答案] D 4. EDTA盐抗凝剂不宜用于(A1型题)“实践技能" A 红细胞计数 B 白细胞计数 C 血小板计数 D 白细胞分类计数 E 凝血象检查和血小板功能试验 [本题答案] E 6. 枸橼酸钠的抗凝原理是(A1型题)"基础知识" A 阻止凝血酶的形成 B 阻止血小板聚集 C 除去球蛋白 D 与血液中的钙离子形成螯合物 E 除去纤维蛋白原 [本题答案] D 7. 关于抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"专业知识" A EDTA-Na2溶解度大于 EDTA-K2 B EDTA盐与血浆中钙离子生成螯合物 C 肝素作为抗凝血酶Ⅲ的辅因子而抗凝 D 枸橼酸钠可用于红细胞沉降率测定 E 枸橼酸钠可用于输血保养液 [本题答案] A 8. 对草酸盐抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"基础知识" A 草酸铵可使血细胞膨胀
B 双草酸盐可用于血细胞比容测定 C 对Ⅴ因子保护差 D 过去用于凝血象的检查 E 可干扰血浆中钾,钠和氯的测定 [本题答案] D 9. ICSH建议,血细胞计数时首选抗凝剂是(A1型题)"基础知识" A EDTA-K2 B EDTA C EDTA-Na2 D 肝素 E 枸橼酸钠 [本题答案] A 11. 肝素抗凝主要是加强哪种抗凝血酶的作用(A1型题)"基础知识" A 抗凝血酶Ⅰ B 抗凝血酶Ⅱ C 抗凝血酶Ⅲ D 抗凝血酶Ⅳ E 抗凝血酶Ⅴ [本题答案] C 13. 关于双草酸盐抗凝剂,错误的说法是(A1型题)"专业知识" A 草酸钾可使红细胞缩小 B 草酸铵可使红细胞胀大 C 不可用于血细胞比容测定 D 过去用于凝血象的测定 E 目前应用较少 [本题答案] C 14. 凝血象检查时,抗凝剂最好用(A1型题)"专业知识" A EDTA-K2 B 38g/dl枸橼酸钠 C 109mmol/L枸橼酸钠 D 肝素 E 草酸钠 [本题答案] C 16. 关于细胞成分的特性,正确的说法是(A1型题)"基础知识" A 嗜酸性颗粒为酸性物质 B 中性颗粒为酸性物质 C 细胞核蛋白为碱性物质 D Hb为碱性物质 E 淋巴细胞浆为嗜酸性物质
临床检验仪器学 第一章概论 1. 灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器是所产生的响应信号值变化大小的反应能力,他反应仪器能够检测的最小被测量。 2. 误差:当对某物理量进行检测时, 所测得的数值与标称值 (真值之间的差异。误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。 3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(输入为零时,仪器输出信号的波动或变化范围。 4. 精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念, 其高低是用误差来衡量的, 误差大则精度低,误差小则精度高。 5. 可靠性:仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下,执行其功能的能力。它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。 6. 重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件下, 在一个不太长的时间间隔内, 连续多次检测同一参数, 所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关, 重复性反映一台设备固有误差的精密度。 7. 分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输入量的最小值。 8. 线性范围:输入与输出呈正比例的范围,也就是反映曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围。 1. 临床检验仪器具有哪些特点?
答:临床检验仪器具有以下特点:结构复杂、涉及的技术领域广、技术先进、精度高、对使用环境要求严格。 2. 临床检验仪器常用的性能指标有哪些? 答:一个优良的检验仪器应具有的性能指标有:灵敏度好、精度高;噪音、误差小;分辨率高;可靠性、重复性好;响应迅速;线性范围宽和稳定性好。 3. 通常临床检验仪器的分类是从哪两个方面进行的? 答:通常以临床检验的方法为主对临床检验仪器进行分类或以检验仪器的工作原理为主对临床检验仪器进行分类。 4. 临床检验仪器有哪些主要部件? 答:通常,临床检验仪器有取样装置、预分离系统、分离系统、检测器、信号处理系统、显示装置、补偿装置、辅助装置、样品前处理系统等主要部件。 第二章显微镜技术和显微镜 1. 光学显微镜:简称光镜,是利用日光照明将小物体形成放大影像的精密光学仪器, 由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成。光学系统由物镜和目镜组成, 其核心是物镜和目镜中的两组透镜, 其放大成像的机理是先由物镜形成放大的实像, 再由目镜进一步放大成虚像,最后在人眼中形成实像。 2. 荧光显微镜:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。 3. 相衬显微镜:是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度, 用于观察活细胞和未染色的标本的一种特殊显微镜。 4. 激光扫描共聚焦显微镜:以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点, 使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像, 而焦面以外的
第一章概论 1.临床检验仪器常用性能指标(可能考问答题) 1灵敏度 2 误差3噪声4最小检测量5精确度6可靠性7重复性8分辨率9测量范围和示值范围10线性范围11响应时间12 频率影响范围 1 灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比。 2 误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与真值之间的差异。 3 噪音:检测仪器在没有加入被检物品时,仪器输出信号的波动或变化范围。 4 最小检出量:检验仪器能确切的反应最小物质含量。 5 精确度:检测值偏离真值的程度。 6 可靠性:仪器在规定时期内及在保持运行不超限的情况下执行其功能的能力,反应仪器是否耐用的一项指标。 第二章离心机 1.离心技术:应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术 2. 离心机的工作原理:利用离心转子高速旋转产生的强大离心力,迫使液体中的微粒克服扩散,加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离。颗粒的沉降速度取决于离心机的转数、颗粒的质量、大小和密度。 3. 离心力:由于物体旋转而产生的力,物体作圆周运动所产生的向心力的反作用力。
4. 相对离心力:通常颗粒在离心过程中的离心力是相对于颗粒本身所受的重力而言,因此把这种离心力叫做相对离心力。 5. 离心机的分类:按转数分为:低速、高速、超高速。 6. 离心机的最大容量:离心机一次可分离样品的最大体积,m ×n,一次可容纳最多离心管×一个离心管容纳样品最大体积。 7. 沉降系数:颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度,其单位为秒。 8. 离心机的基本结构 低速离心机的结构较简单,由电动机,离心转盘(转头)、调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件构成。其最大转速在10000r/min以内,相对离心力在15000xg以内。 高速(冷冻)离心机最大转速为20000~25000r/min 超速(冷冻)离心机最大转速可达50000~80000r/min 9. 差速离心法:差速离心法又称分步离心法,根据分离物的沉降速度不同,采用不同的离心速度和时间分步离心的方法。10. 差速离心法的优缺点: 优点:操作简单,离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开,并可使用容量较大的角式转子;分离时间短、重复性高;样品处理量大。 缺点:分辨率有限、分离效果差,沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开,不能一次得到纯颗粒;壁效应严重,特别是当颗粒很大或浓度很高时,在离心管一侧会出现沉淀,颗
临床检验基础试题答案 一、选择题 1-5 : DEECB 6-10:BDACD 11-15: CCEBC 16-20: DAABC 二、填空题 1. ①大红细胞;②小红细胞,③棘形红细胞,④环形红细胞(面包圈红细胞),⑤新月形红细胞,⑥颗粒形红细胞,⑦皱缩红细胞,③影细胞,⑨红细胞碎片。 2. 皱缩、胀大、渗出。 3. 大小不均、中毒颗粒、空泡变性、Dvohie小体、退行性变。 4. 3 /HPF,镜下血尿,肉眼血尿。 5. 流动,凝胶。 三、名词解释 1、核右移:外周血的中性粒细胞以若5叶以上者超过3%^称为核象右移,此时常伴有白细胞总数减少。 2、中毒颗粒:中性粒细胞中比正常中性颗粒大,大小不等,分布不均匀,染色较深,呈黑色或紫黑色。有时颗粒很粗大,与嗜碱性粒细胞易混淆,有时又小而稀少,散杂在正常中性颗粒中。 3、渗出液:多为炎症性积液,炎症时由于病原微生物的毒素、缺氧以及炎症介质作用使用血管内皮细胞受损,血管通透性增加,以致血管内大分子物质和细胞通过血管壁而渗出血管外、组织间隙及浆膜腔所形成的积液。
四、简答题 1、异型淋巴细胞种类
I型(空泡型):胞体比正常淋巴细胞稍大,多为圆形、椭圆形或不规则形。核圆形、肾形或分叶状、常偏位。染色质粗糙,呈粗网状或小块状,排列不规则。胞质丰富,染深蓝色,含空泡或呈泡沫状。 H型(不规则型):胞体较大,外形常不规则,可有多数足。核形状及结构与I型相同或更不殊途同归,染色质较粗糙致密。胞质量丰富,染色淡蓝或灰蓝色,有透明感,边缘处着色较深蓝色。可有少数空泡。 皿型(幼稚型):胞体较大,核圆形或卵圆形。染色质细致呈网状排列,可见1-2个核仁,胞质深蓝色,可有少数空泡。 2、血沉增快的病理临床意义? ①各种炎症:细菌性急性炎症时,血中急性反应物质释放增多所致。风湿热的病理改变,结缔组织性炎病症,其活动期血沉增快。慢性炎症如结核病时,血沉增快。 ②组织损伤及坏死:较大的手术创伤可导致血沉增快,如无合并症,一般2-3周内恢复正常。心肌梗塞时血沉增快,,心绞痛时血沉正常,故可借血沉结果加以鉴别。 ③恶性肿瘤:良性肿瘤血沉多正常,恶性肿瘤病人增快的血沉,可因手术切除或化疗放疗较彻底而渐趋正常,复发或转移时又见增快。 ④各种原因导致的高球蛋白血症:亚急性感染性心内膜炎、黑热病、系统性红斑狼疮等所致的高球蛋白血症时,血沉常明显增快,慢性肾炎、肝硬化时血沉亦常增快。⑤贫血:轻度贫血对血沉尚无影响,若血红蛋白低于90g/L时,血沉可增快。 ⑥高胆固醇积压症:特别是动脉粥样硬化血胆固醇明显增高者,血沉常见增快。 3、大便OE试验临床意义是什么? 粪便隐血阳性见于①消化性溃疡、药物致胃粘膜损伤(如服用消炎痛、糖皮质激素等)、肠结核、克罗恩病、溃疡性结肠炎、结肠息肉、钩虫病及胃癌、结肠癌等消化肿瘤时。②消化性溃疡和消化道肿瘤鉴别诊断:在消化性溃疡时呈间断性阳性。消化性