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DYCZ-24DN迷你双垂直电泳仪(槽)和你双垂直电泳仪(槽)价格

DYCZ-24DN迷你双垂直电泳仪(槽)和你双垂直电泳仪(槽)价格
DYCZ-24DN迷你双垂直电泳仪(槽)和你双垂直电泳仪(槽)价格

全站仪的基本操作方法

第一节全站仪的结构组成和基本操作方法 数字化测图的关键仪器是电子全站仪。它 具有功能强、精度高、用途广和使用方便、快 捷等特点,备受欢迎。 目前,世界各国生产的全站仪品种、规格、型号繁多,并朝着自动化、智能化的方向发展,如增加自动调焦、自动锁定跟踪目标、激光对点、数字键、免棱镜观测、DOS操作等等。但无论哪一种规格型号,其中最主要的几种指标是:测程、测角精度、测距精度、存点数量。(图5-1)为南方测绘公司的全站仪系列产品。 各种全站仪的基本操作上略有不同。但基本原理和主要功能基本相同。本章将以拓普康电子全站仪为例,介绍全站仪的有关知识。 一、GTS—332电子全站仪的组成 GTS—332电子全站仪由电子经纬仪、光电测距仪和微机三部分组成,主要技术指标是:单棱鏡测程3km,测角精度±2″,测距精度(±2mm+2ppm?D),野外测量最多能存8000个点,能进行数据采集、数据文件存储并通过RS—232C串行信号接口与其它计算机进行数据通讯。全站

仪的各部件名称如(图5-2)。 基本操作方法 全站仪的安置操作(对中、整平、瞄准等)与经纬仪基本相同,所不同的是,全站仪有一操作键盘和显示屏(图5-3),通过观测和键盘的操作,会在显示屏上显示出各种数据。 1、键盘操作 各种操作键的功能见(表5-1)。按POWER键打开电源开关后,可 直接进入角度测量,如按键或键可进行距离测量或坐标测量, 若按MENU键,将进入菜单测量模式。 操作键表5-1

2、显示屏显示的符号(表5-2) 显示屏表5-2

在显示屏右边的各操作键与显示屏下方的软键(功能键)配合,将组合成各种各样的功能,并在显示屏上显示出各种信息(图5-4)。 3、角度测量模式下各功能键的功能(表5-3) 角度测量模式表5-3

Bio Rad电泳仪操作规程

Bio-rad小电泳槽及电泳仪操作规程 一.目的 为规范Bio-rad小电泳槽及电泳仪的基本操作、维护保养、异常处理程序,防止人为操作失误,确保Bio-rad小电泳槽及电泳仪正常运转,特制定本程序。 二.适用范围 本程序适用于Bio-rad小电泳槽及电泳仪。 三.责任 1. 本程序的实施者为Bio-rad小电泳槽及电泳仪操作者,各实验室负责人对 本程序的实施情况进行监督。 2. 日常运行及维护、定期维护、定期点检及保养由Bio-rad小电泳槽及电泳 仪操作者负责。 四.内容 1.灌胶 a、取出灌胶模具,打开封底盘至完全开放的状态,松开两侧螺丝,向外侧打开夹子。 b、取长方形和带凹槽的长玻板各一块,从内到外依次按带凹槽玻板及长方形玻板的顺序排列,形成gel sandwich。注意正确排列以防漏胶。 c、短玻板朝外将sandwich放入模具中,检测sandwich的底是否紧靠底面。旋紧螺丝。将封底盘锁至密闭状态。 d、将模具放在桌面上准备灌胶。 e、根据需要配制一定浓度的胶。 1、分离胶的灌制:用加样枪慢慢将胶加入sandwich中,注意不要有气泡。其上加0.1%SDS封顶. 2、浓缩胶的灌制:待分离胶凝后弃去SDS,开始灌浓缩胶,最后轻轻插入梳子。 f、待胶聚合后,拔出梳子,用电泳缓冲液清洗加样槽,去除未聚合的胶。 g、

模具放入电泳槽中。 2.电泳 a、加适量的电泳缓冲液 b、准备样品,加样。 c、盖上电泳槽的盖子,注意红色对正极,黑色对负极。打开电源,开始电泳。初始电压100V,15分钟后改为120v。 d、直至指示剂距前沿1cm处结束电泳,拔掉电源,小心取出胶,根据需要进行染色或转膜,回收电泳缓冲液(可重复利用3次)。 五.注意事项: a、每次用完后,立即清洗电泳槽,灌胶模具,玻璃板(先用自来水洗干净,再用蒸馏水冲一遍后放在架子上晾干)。 b、扣紧或打开灌胶模具时要用力均匀,以免压坏玻璃板。 c、盖上电泳槽的盖子时,务必注意正负极不要接反。

全站仪的基本操作与使用方法

1.水平角测量 (1)按角度测量键,使全站仪处于角度测量模式,照准第一个目标A。 (2)设置A方向的水平度盘读数为0°00′00〃。 (3)照准第二个目标B,此时显示的水平度盘读数即为两方向间的水平夹角。 2.距离测量 (1)设置棱镜常数 测距前须将棱镜常数输入仪器中,仪器会自动对所测距离进行改正。 (2)设置大气改正值或气温、气压值 光在大气中的传播速度会随大气的温度和气压而变化,15℃和7 60mmHg是仪器设置的一个标准值,此时的大气改正为0ppm。实测时,可输入温度和气压值,全站仪会自动计算大气改正值(也可直接输入大气改正值),并对测距结果进行改正。 (3)量仪器高、棱镜高并输入全站仪。 (4)距离测量 照准目标棱镜中心,按测距键,距离测量开始,测距完成时显示斜距、平距、高差。 全站仪的测距模式有精测模式、跟踪模式、粗测模式三种。精测模式是最常用的测距模式,测量时间约,最小显示单位1mm;跟踪模

式,常用于跟踪移动目标或放样时连续测距,最小显示一般为1cm,每次测距时间约;粗测模式,测量时间约,最小显示单位1cm或1mm。在距离测量或坐标测量时,可按测距模式(MODE)键选择不同的测距模式。 应注意,有些型号的全站仪在距离测量时不能设定仪器高和棱镜高,显示的高差值是全站仪横轴中心与棱镜中心的高差。 全站仪3.坐标测量 (1)设定测站点的三维坐标。 (2)设定后视点的坐标或设定后视方向的水平度盘读数为其方位角。当设定后视点的坐标时,全站仪会自动计算后视方向的方位角,并设定后视方向的水平度盘读数为其方位角。 (3)设置棱镜常数。 (4)设置大气改正值或气温、气压值。 (5)量仪器高、棱镜高并输入全站仪。 (6)照准目标棱镜,按坐标测量键,全站仪开始测距并计算显示测点的三维坐标。 4.数据通讯 全站仪的数据通讯是指全站仪与电子计算机之间进行的双向数 据交换。全站仪与计算机之间的数据通讯的方式主要有两种,一种是利用全站仪配置的PCMCIA(personal computer memory card inter nation association,个人计算机存储卡国际协会,简称PC卡,也

电泳操作方法

XXX有限公司SDS-PAGE 电泳的测定方法 文件编号XXXX-02 制定部门研发部 版本A/0 页码1/3 生效日期2014/4/9 一、目的 建立SDS-PAGE电泳的测定方法,确保电泳检测的准确性,保证电泳的安全性、有效性。 二、范围与权责 适用于本公司的所有成品以及中间体的分析,由化验员负责采样检测。 品控主管负责审核。 三、原理 SDS-PAGE电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS,SDS会与变性的多肽结合,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合SDS的量总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此SDS多肽复合物在丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关,在达到饱和的状态下,每克多肽可与1.4g去污剂结合。当分子量在15KD到200KD之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合下式:lgMw=k-bX。式中:Mw为分子量;X为迁移率;k、b均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对数分子量对数作图,可获得一条标准曲线,未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 四、实验仪器及试剂 1.DYCZ-24DN 双垂直电泳仪 2.DYY-8C 电泳仪电源 3.STS-2A 脱色摇床(水平) 4.标准蛋白Marker 5.平皿:直径150mm 6.TEMED:四甲基乙二胺 7.DTT:二硫苏糖醇 8.储存液 ①2M Tris-HCl缓冲液:称取24.2g Tris,用50ml蒸馏水溶解后,滴加HCl调节pH至8.8, 待室温,加蒸馏水至100ml。 ②1 M Tris-HCl缓冲液:称取12.1g Tris,用50ml蒸馏水溶解后,滴加HCl调节pH至6.8, 待室温,加蒸馏水至100ml。 ③10%SDS溶液:称取10g SDS ,加蒸馏水溶解至100ml。 ④50%甘油:50ml甘油加50ml蒸馏水,混合均匀。 ⑤1%溴酚蓝:100mg溴酚蓝,加蒸馏水至10ml,搅拌至完全溶解,水相针式过滤器过滤除去聚 合的染料。 9. 工作液 ①A液:30%丙烯酰胺储存液,丙烯酰胺是一种神经毒素,可通过皮肤被人体吸收并富集。操 作时要避免皮肤接触,并带合适的口罩于通风橱中进行。 ②B液—分离胶缓冲液:取75ml 2M Tris-HCl缓冲液,4ml10%SDS溶液,加21ml蒸馏水,混 合均匀,4℃保存数月。 ③C液—浓缩胶缓冲液:取50ml 1M Tris-HCl缓冲液,4ml10%SDS溶液,,加46ml蒸馏水,混 合均匀,4℃保存数月。 ④10%APS:称取1g过硫酸铵,加10ml蒸馏水溶解后,水相针式过滤器过滤分装到EP管中,

JY300C电泳仪的使用说明

一、设置 /设置状态: 2、按“↑”键或“↓”键,可修改闪动位置; 3、按“ENT”键,选择电压U、电流I、功率的设置换挡。 二、输出 1、在停机/设置状态下按“RUN/STOP”键,使电泳仪输出; 2、液晶屏幕显示输出电压、电流、功率、运行累计时间。 三、停机 1、在运行状态下按“RUN/STOP”键,返回停机/设置状态; 2、如果定时时间到,显示“END”并自动停机,按“RUN/STOP”键,返回停机/设置 状态。 四、编辑 在停机/设置状态下连续按“EDIT”键即可进入编辑状态中的: →程序储存状态“SA VE[X]”按“EDIT”键 →程序选择状态“LOAD[X]”按“EDIT”键 →定时设置状态“XX:XX”按“EDIT”键 →编辑选择状态“QUIT” 1、在“SA VE[X]”程序储存状态下: a)按“↑”或“↓”键,可选择0~9储存程序编号; b)按“ENT”键,使程序储存并返回停机/设置状态; c)按“EDIT”键,放弃程序储存,进入程序选择状态。 2、在“LOAD[X]”程序选择状态下: a)按“↑”或“↓”键,可选择0~9储存程序编号; b)按“ENT”键,使程序调出并返回停机/设置状态; c)按“EDIT”键,放弃程序储存,进入定时设置状态。 3、在“XX:XX”定时设置状态下: a)按“↑”或“↓”键,可选择定时时间; [注]如果定时设置为00:00,即定义为“无定时” b)按“ENT”键,将所有设置参数储存并返回停机/设置状态; c)按“EDIT”键,放弃定时设置,进入编辑选择状态。 4、在“QUIT”编辑选择状态下: a) 按“ENT”键退出编辑,返回停机/设置状态; b) 按“EDIT”键,重复进入编辑状态。

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋白

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋白 [实验目的] (1)学习聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳原理。 (2)掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳的操作技术。 (3)比较醋酸纤维薄膜电泳与聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋白的操作效果。[实验原理] 带电质点在电场作用下,会向两极移动;带正电荷的移向负极,带负电荷的移向正极,这种现象称为电泳。 聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺(简称Bis)在加速剂N,N,N',N'—四甲基乙二胺(简称TEMED)和催化剂过硫酸铵(简称AP)或核黄素的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE)。 [实验试剂] 1、待测样品:新鲜血清 2、制备分离胶、浓缩胶有关试剂: (1)凝胶缓冲液:称取1 mol/L HCl 48ml,Tris(三羟基氨基甲烷)36.6g,TEMED 0.23mL,加重蒸馏水至80mL 使其溶解,调pH8.9,然后加重蒸馏水定容至100mL ,至棕色瓶,冰箱储藏。 (2)分离胶贮液,一般有两种配法: ⅰ28%Acr-0.735%Bis贮液:丙烯酰胺28.0克,甲叉双丙烯酰胺0.735克,加重蒸馏水使其溶解然后定容至100mL. ⅱ30%Acr-0.8%Bis贮液:Acr30.0克,Bis0.8克,加重蒸馏水使其溶解定容至100mL. 以上两种溶液需用棕色试剂瓶盛放,4℃储存,一般可放置一个月左右. (3)分析纯过硫酸铵(AP)(AR)0.14g加重蒸水100mL,棕色瓶,4℃储存仅能用一周,最好当天配置.上述三种试剂用于制备分离胶. (4)浓缩胶缓冲液:称取1mol/LHCL48mL,Tris5.98g,TEMED 0.46mL,加重蒸水至80mL,调pH6.7,用重蒸水定容至100mL,棕色瓶4℃储存. (5)浓缩胶贮液:称取Acr10g,Bis2.5g,加重蒸水溶解定容100mL,过滤后至棕色瓶4℃贮存。 (6)40%蔗糖溶液(W/V)

全站仪使用方法及使用步骤(详细)

全站仪使用方法及使用步骤 一、全站型电子速测仪简称全站仪,它是一种可以同时进行角度(水平角、竖直角)测量、距离(斜距、平距、高差)测量和数据处理,由机械、光学、电子元件组合而成的测量仪器。由于只需一次安置,仪器便可以完成测站上所有的测量工作,故被称为“全站仪”。 二、全站仪上半部分包含有测量的四大光电系统,即水平角测量系统、竖直角测量系统、水平补偿系统和测距系统。通过键盘可以输入操作指令、数据和设置参数。以上各系统通过I/O接口接入总线与微处理机联系起来。 三、微处理机(CPU)是全站仪的核心部件,主要有寄存器系列(缓冲寄存器、数据寄存器、指令寄存器)、运算器和控制器组成。微处理机的主要功能是根据键盘指令启动仪器进行测量工作,执行测量过程中的检核和数据传输、处理、显示、储存等工作,保证整个光电测量工作有条不紊地进行。输入输出设备是与外部设备连接的装置(接口),输入输出设备使全站仪能与磁卡和微机等设备交互通讯、传输数据。 四、目前,世界上许多著名的测绘仪器生产厂商均生产有各种型号的全站仪。不同型号的全站仪,其具体操作方法会有较大的差异。下面简要介绍全站仪的基本操作与使用方法。 (一)全站仪的操作与使用 1.全站仪的基本操作与使用方法 (1)测量前的准备工作 1)电池的安装(注意:测量前电池需充足电) ①把电池盒底部的导块插入装电池的导孔。 ②按电池盒的顶部直至听到“咔嚓”响声。 ③向下按解锁钮,取出电池。 2)仪器的安置。 ①在实验场地上选择一点,作为测站,另外两点作为观测点。 ②将全站仪安置于点,对中、整平。 ③在两点分别安置棱镜。 3)竖直度盘和水平度盘指标的设置。 ①竖直度盘指标设置。 松开竖直度盘制动钮,将望远镜纵转一周(望远镜处于盘左,当物镜穿过水平面时),竖直度盘指标即已设置。随即听见一声鸣响,并显示出竖直角。 ②水平度盘指标设置。 松开水平制动螺旋,旋转照准部360,水平度盘指标即自动设置。随即一声鸣响,同时显示水平角。至此,竖直度盘和水平度盘指标已设置完毕。注意:每当打开仪器电源时,必须重新设置和的指标。 4)调焦与照准目标。 操作步骤与一般经纬仪相同,注意消除视差。 (2)角度测量 1)首先从显示屏上确定是否处于角度测量模式,如果不是,则按操作转换为

PAGE电泳操作说明

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 一、制胶 本实验室常用40ml 体系胶浓度9% NH基团中的氢原子被甲基替换而得。工作原理在于TEMED可以催化过硫酸铵或核黄素产生自由基,从而引发聚合反应,促进聚丙烯酰胺凝胶的形成。 根据不同情况TEMED和过硫酸铵可适量加减。 以上的各组分按顺序加入(TEMED最后加入),充分的摇匀后用玻璃棒引流到两块 玻璃板之间,当胶加到上部时,在灌胶口处插入梳子,此步骤要选择合适的梳子,且插入时要尽量缓慢,防止气泡的产生,影响点样,若有漏出要及时的补加聚丙烯酰胺溶液,后用夹子将下面和两边夹紧防止漏胶,放在室温下让其凝结15min以上。 制胶时底板(不带缺口)和盖板(带缺口)与胶接触的那一面以及梳子齿要保证干净,没有灰尘、胶颗粒等,制胶前一般会用酒精擦拭玻璃板表面和梳子齿。 凝固后上电泳仪前将夹子、胶条、梳子卸掉用水冲洗上样孔将残胶冲掉同时赶走气泡。 二、电泳 PCR 扩增产物由非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)垂直电泳分离检测。稳定功率20W(电压200V±),电泳时间一般1.5h,可根据产物片段大小适当调整。 1.预电泳,待凝胶聚合后,将梳子拔出,在电泳槽内加入 1×TBE,预电泳10分钟 2.上样,预电泳后,将PCR产物和loading buffer 3.5ul混合,用移液枪吸取5ul 混 合液轻轻地加入点样孔,尽量的减少加样时间,以防样本弥散。 3.接上电源进行电泳, 电泳槽和玻璃板要用夹子夹紧,否则漏缓冲液会让整个条带跑歪。 功率过高会使温度升高导致玻璃板炸裂,同时注意环境温度,天热时开空调或风扇散热。 三、染色 本实验采用银染法 1.电泳结束后,切断电源,倒去电泳缓冲液,卸去玻璃板,去掉胶条。 2.在托盘中加入固定液100ml/块胶。将整版胶小心放入溶液中(要没过胶),水平摇床上摇2min。 3.加入1ml 20% 硝酸银溶液,8—10min。后倒掉溶液,加清水洗一次。 4.托盘中加入显影液100ml/块胶,于摇床震荡至显色。 5.将洗干净的凝胶放在保鲜膜上包好,以备统计带型和照相。

全站仪的使用原理和操作方法

全站仪的使用原理和操作方法内容:了解全站仪的分类、等级、主要技术指标;掌握全站仪的基本操作,测角、测边、测三维坐标和三维坐标放样的原理和操作方法;了解全站仪的对边测量、悬高测量、面积测量等方法。 重点:全站仪的基本操作,测角、测边、测三维坐标和三维坐标放样的原理和操作方法。 难点:全站仪测三维坐标和三维坐标放样的原理和操作方法。 教学方法:采取演示法教学。讲解拓普康全站仪使用,在课堂上每讲一项功能后,利用多媒体课室的优点,现场演示一次,并将操作过程通过投影仪投影到屏幕上,起到直观、形象的效果,使学生能迅速掌握全站仪的使用。 § 7.1 全站仪(total station)的功能介绍: 随着科学技术的不断发展,由光电测距仪,电子经纬仪,微处理仪及数据记录装置融为一体的电子速测仪(简称全站仪)正日臻成熟,逐步普及。这标志着测绘仪器的研究水平制造技术、科技含量、适用性程度等,都达到了一个新的阶段。 全站仪是指能自动地测量角度和距离,并能按一定程序和格式将测量数据传送给相应的数据采集器。全站仪自动化程度高,功能多,精度好,通过配置适当的接口,可使野外采集的测量数据直接进入计算机进行数据处理或进入自动化绘图系统。与传统的方法相比,省去了大量的中间人工

操作环节,使劳动效率和经济效益明显提高,同时也避免了人工操作,记录等过程中差错率较高的缺陷。 全站仪的厂家很多,主要的厂家及相应生产的全站仪系列有:瑞士徕卡公司生产的TC 系列全站仪;日本TOPCN (拓普康)公司生产的GTS 系列;索佳公司生产的SET 系列;宾得公司生产的PCS 系列;尼康公司生产的DMT 系列及瑞典捷创力公司生产的GDM 系列全站仪。我国南方测绘仪器公司90 年代生产的NTS 系列全站仪填补了我国的空白,正以崭新的面貌走向国内国际市场。 全站仪的工作特点: 1、能同时测角、测距并自动记录测量数据; 2、设有各种野外应用程序,能在测量现场得到归算结果; 3、能实现数据流; 一、TOPCON 全站仪构造简介

电泳仪使用方法

电泳仪使用方法-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1

电泳仪使用方法 1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接,注意极性不要接反。 2.电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小,根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 3.接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。 4.工作完毕后,应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态,并拨出电泳插头。 注意事项 1.电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端,以防漏电。 2.仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致仪器损坏。 3.由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流量也不同,其泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。 4.在总电流不超过仪器额定电流时(最大电流范围),可以多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响仪器寿命。 5.某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时,允许在稳压状态下空载开机,但在稳流状态下必须先接好负载再开机,否则电压表指针将大幅度跳动,容易造成不必要的人为机器损坏。 6.使用过程中发现异常现象,如较大噪音、放电或异常气味,须立即切断电源,进行检修,以免发生意外事故。 夹芯式垂直电泳槽使用方法: 二、使用方法 (一)清洗部件 上述部件组装前要彻底清洗干净。尤其是玻璃板及凹形带槽橡胶框,必须用泡沫海绵沾少许肥皂粉或洗涤剂彻底清洗干净。清洗后的玻璃板应放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。 (二)组装电泳槽 A、1、将四只固定螺杆插进一只贮液框(半上槽)的相应孔洞中,然后将贮液框仰放在桌上。 2、左手拿凹型槽橡胶模框,右手的拇指与中指握住玻璃板的两侧边缘插到橡胶模框内 (注意手指不能接触灌胶面的玻璃板)。 3、将带有玻璃的橡胶模框子放在仰放的贮液槽框架上,其下缘必须对齐贮液槽框下缘。 4、双手拿另一只贮液槽框与仰放在桌上的贮液槽框相合,并使橡胶框上的凸出线位于贮液槽有机玻璃框中央。 5、装上四只螺母,拧紧螺丝。注意拧紧螺丝时用力应均匀,最好用双手按斜角位置双双逐渐拧紧。 6、将电泳槽垂直竖起,放在桌上,带短玻璃板的贮液槽称上槽(阴极端),带长玻璃板的贮液槽称为下槽(阳极端),在长玻璃板与橡胶框间有一缝隙。此缝隙可用已熔化的10%琼脂沿长玻璃板下端灌入,为防止留存气泡,可稍抬起一端即可赶去气泡。待琼脂完全凝固后才能灌胶。 B、也可将槽垂直竖起,将带有玻璃的橡胶模框直接放入槽中,对称拧紧螺丝后,用琼脂封底边。 (三)灌胶 1、先灌分离胶,待凝固后再灌浓缩胶。灌胶前接通冷却水,夹紧连接上下贮液槽的两根橡胶管。 2、用细头滴管吸取胶液,沿长、短玻璃板中间缝隙从一端加入胶液。为防止产生气泡,可稍拾起另一端(气泡往高处走),不断加入胶液。若单层胶(分离胶)则加胶量约距离短玻璃板上端厘米处,轻轻加少许水,双手轻轻将梳子插入,待胶凝后就可形成凹形加样孔。 3、为防止漏胶,在上、下贮液槽中立即加入蒸馏水,但蒸馏水不能超过短玻璃板上缘。 4、胶凝固后即可看到样品槽梳子与凝胶板间有一层折

SDS-PAGE电泳的基本原理及浓缩胶浓缩样品的原理

SDS-PAGE电泳的基本原理及浓缩胶浓缩样品的原理 SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)是目前最常用的分离蛋白质的电泳技术 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS,SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中,与SDS分子按比例结合,形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物,这种复合物由于结合大量的SDS,使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块,从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异,由于SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的,因此在进行电泳时,蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小。当分子量在15KD到200KD之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合下式:logMW=K-bX,式中:MW为分子量,X为迁移率,k、b均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图,可获得一条标准曲线,未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 SDS-PAGE电泳成功的关键是什么? ①溶液中SDS单体的浓度 SDS在水溶液中是以单体和SDS-多肽胶束的混合形式存在,能与蛋白质分子结合的是单体。为了保证蛋白质

与SDS的充分结合,它们的重量比应该为1∶4或1∶3。②样品缓冲液的离子强度因为SDS结合到蛋白质上的量仅仅取决于平衡时SDS单体的浓度,不是总浓度,而只有在低离子强度的溶液中,SDS 单体才具有较高的平衡浓度。所以,SDS电泳的样品缓冲液离子强度较低,常为10-100 mM。③二硫键是否完全被还原只有二硫键被完全还原以后,蛋白质分子才能被解聚,SDS才能定量地结合到亚基上从而给出相对迁移率和分子质量对数的线性关系。Sample buffer 中的β-巯基乙醇的浓度常为4-5%,二硫苏糖醇的浓度常为2-3%。前者有挥发性,最好使用前加入。 SDS-PAGE缓冲液系统的选择,Tris-Glycine、Tris-Tricine、Tris-硼酸盐或者其他? 一般来说,在被分析的蛋白质稳定的pH范围,凡是不与SDS发生相互作用的缓冲液都可以使用,但缓冲液的选择对蛋白带的分离和电泳的速度是非常关键的。Tris-甘氨酸系统是目前使用最多的缓冲系统。Tris-甘氨酸系统是目前使用最多的缓冲系统。如果要测定糖蛋白的分子量,最好采用Tris-硼酸盐缓冲系统,对于分子质量小于15 kDa的蛋白样品,可以使用SDS-尿素系统,也可以采用Tris-tricine缓冲系统。 积层胶(或称浓缩胶)的作用原理?

全站仪快速操作方法

全站仪快速操作方法 随着从全站仪在测绘领域的广泛应用,操作全站仪的操作应用已经是广大测绘人员必须掌握的一门技术,本文从四个方面对常用全站仪在测绘工作中的快速操作方法做一简要说明,以供参考。 随着电子技术和计算机技术日新月异的发展及其在测绘领域的广泛应用,集电子测角、电子测距、数据采集与存储的全站仪已经取代了常规的光学经纬仪和S3光学水准仪。各测绘仪器厂商生产出各种型号的全站仪,出现了大内存、多功能、防水型、防爆型、电脑型等全站仪,而且品种越来越多,精度越来越高,使用上也是越来越方便,全站仪正朝着功能全、效率高、全自动、易操作、体积小、重量轻的方向发展,使的野外测绘作业的劳动强度逐渐地减轻,工作效率得到不断提高,测绘技术水平也相应地得到了迅速地提高,从根本上更新了测量的观念和理论。本文试结合我院现有的尼康、拓普康、索佳、宾得、南方、苏一光、搏飞、科力达等系列的全站仪,从四个方面对常用全站仪在测绘工作中的快速操作方法做一简要说明 1 全站仪的基本组成与基本测角、测距原理 1.1 全站仪的基本组成 全站仪的基本组成可分为外部组成和内部组成。其外部组成与经纬仪大体相似,同样有望远镜、竖直制动、竖直微动,水平制动、水平微动,管水准器、圆水准器,对中器等。最大区别是在基座上方增加了液晶显示屏和操作面板进行人机对话。 液晶显示屏用来显示全站仪的测 量状态、数据输入、输出状态和测量结 果,操作面板向全站仪输入各种测量指 令和数据,由于全站仪体积所限不能有 太多的按键,所以全站仪的大部分按键 往往有几种功能,随着全站仪的测量状 态不同按键功能随之改变。因此,在操 作全站仪时必须看清液晶显示屏所显 示的测量状态。全站仪本身就是一个带 有特殊功能的微型计算机系统,其内部 组成与微型计算机的组成大致相似,都 有输入、输出设备,微处理器、运算器、

产品使用说明书

产品使用说明书 D -Tube TM 透析透析//电洗脱管电洗脱管:: Mini/Midi/Maxi/Mega/D Mini/Midi/Maxi/Mega/D--Tube96TM *建议同时参考本说明书英文原文(说明书编号TB422)。 产品名称产品名称 包装包装 货号货号 D-Tube? Dialyzer Mini, 截留分子量 6–8kDa D-Tube Dialyzer Mini,截留分子量 12–14kDa 10个 10个 71504-3 71505-3 D-Tube Dialyzer Midi, 截留分子量 3.5kDa D-Tube Dialyzer Midi, 截留分子量6–8kDa 10个 10个 71506-3 71507-3 D-Tube Dialyzer Maxi, 截留分子量 3.5kDa D-Tube Dialyzer Maxi, 截留分子量6–8kDa D-Tube Dialyzer Maxi, 截留分子量12-14kDa 10个 10个 10个 71508-3 71509-3 71510-3 D-Tube96? Dialyzer, 截留分子量6-8kDa D-Tube96 Dialyzer, 截留分子量12-14kDa 1 1 71712-3 71713-3 D-Tube Electroelution Accessory Kit 1 71511-3 截留分子量截留分子量 体积体积 试剂盒包装试剂盒包装 目录号目录号 D-Tube? Dialyzer Mega D-Tube Dialyzer Mega D-Tube Dialyzer Mega D-Tube Dialyzer Mega 3.5kDa(蓝色) 3.5kDa(蓝色) 6-8kDa(粉色) 6-8kDa(粉色) 3-10ml 3-10ml 3-10ml 3-10ml 10个 50个 10个 50个 71739-3 71739-4 71740-3 71740-4 D-Tube Dialyzer Mega D-Tube Dialyzer Mega D-Tube Dialyzer Mega D-Tube Dialyzer Mega 3.5kDa(蓝色) 3.5kDa(蓝色) 6-8kDa(粉色) 6-8kDa(粉色) 10-15ml 10-15ml 10-15ml 10-15ml 10个 50个 10个 50个 71742-3 71742-4 71743-3 71743-4 D-Tube Dialyzer Mega D-Tube Dialyzer Mega D-Tube Dialyzer Mega D-Tube Dialyzer Mega 3.5kDa(蓝色) 3.5kDa(蓝色) 6-8kDa(粉色) 6-8kDa(粉色) 15-20m 15-20ml 15-20ml 15-20ml 10个 50个 10个 50个 71745-3 71745-4 71746-3 71746-4 Floating Racks,Mega - - 10个 71748-3 试剂盒概述试剂盒概述 D-Tube? 透析管为生物样品制备提供了极为方便、通用的操作系统。该系统包括两种操作模式——透析和电洗脱,能够高效地替换样品缓冲液或从凝胶中抽提蛋白质、DNA或RNA。所有操作只需在一支离心管中进行,简单快捷,适合在很多实验条件下使用。样品操作中不再需要注射器,微量离心,专门的电洗脱装置或是重复繁琐的操作步骤,只需实验室常规移液器进行样品的添加和移除即可。D-Tube?透析管的双膜设计(可以方便地监测样品水分挥发过程)和大表面积使其亦可用来浓缩生物样品。 D-Tube? 透析管按容量不同分为几种型号:Mini型(10-250μl),Midi型(50-800μl),Maxi型(500-3000μl)和Mega型(分别有3-10ml,10-15ml,15-20ml三种载样体积)。Maxi型号的D-Tube? 透析管试剂盒中包括两个盖子,可以方便将透析管的容量分别调节为500-200μl和2000-3000μl。Mega型透析管的截留分子量有两种,以不同颜色区分:3.5kDa(蓝色)和6-8kDa(粉色);Mega型透析管也配有不同的管帽,以方便地根据需要调整最大载样体积。底管则决定了它的截留分子量,相同颜色的底管(具有相同的截留分子量)可以与不同的管帽(具有不同的最大载样体积)组合使用的(如图1)。D-Tube96?采用96-管的配置形式,其它特征与Mini型D-Tube? 透析管一致。所有D-Tube

(整理)SDS-PAGE电泳常见问题解答.

1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响? 在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带。当样品进入分离胶后,由于胶中pH的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶孔径的缩小,在电场的作用下,蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。 所以,pH对整个反应体系的影响是至关重要的,实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况,应首要考虑该因素。2. 样品如何处理? 根据样品分离目的不同,主要有三种处理方法:还原SDS处理、非还原SDS处理、带有烷基化作用的还原SDS处理。 1)还原SDS处理:在上样buffer中加入SDS和DTT(或Beta 巯基乙醇)后,蛋白质构象被解离,电荷被中和,形成SDS与蛋白相结合的分子,在电泳中,只根据分子量来分离。一般电泳均按这种方式处理,样品稀释适当浓度,加入上样Buffer,离心,沸水煮5min,再离心加样。 2)带有烷基化作用的还原SDS处理:碘乙酸胺的烷基化作用

可以很好的并经久牢固的保护SH基团,得到较窄的谱带;另碘乙酸胺可捕集过量的DTT,而防止银染时的纹理现象。100ul样品缓冲液中10ul 20%的碘乙酸胺,并在室温保温30min。 3)非还原SDS处理:生理体液、血清、尿素等样品,一般只用1%SDS沸水中煮3min,未加还原剂,因而蛋白折叠未被破坏,不可作为测定分子量来使用。 3. SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成分的作用? 聚丙烯酰胺的作用:丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体,其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否,与促凝剂及环境密切相关; 制胶缓冲液:浓缩胶选择pH6.7,分离胶选择pH8.9,选择tris -HCL系统,TEMED与AP:AP提供自由基,TEMED是催化剂,催化自由基引起的聚合反应进行;十二烷基硫酸钠(SDS):阳离子去污剂,作用有四:去蛋白质电荷、解离蛋白质之间的氢键、取消蛋白分子内的疏水作用、去多肽折叠。 4. 提高SDS-PAGE电泳分辨率的途径? 聚丙烯酰胺的充分聚合,可提高凝胶的分辨率。建议做法:待凝胶在室温凝固后,可在室温下放置一段时间使用。忌即配即用或4度冰箱放置,前者易导致凝固不充分,后者可导致SDS结晶。一般凝胶可在室温下保存4天,SDS可水解聚丙烯酰胺。 一般常用的有氨基黑、考马斯亮蓝、银染色三种染料,不同染料又各自不同的染色方法,具体可参照郭尧君编著的《蛋白质电泳技术手册》P82-103。

DYY-6C电泳仪操作步骤

DYY-6C电泳仪使用说明 操作步骤: 1.接好电源线并确认与有接地保护的电源插座相连。按颜色接好电泳槽与电泳仪的连接导线,并装入电泳样品。 2.确认电源符合要求后,开启“电源开关”。此时“液晶显示屏”显示欢迎界面,同时仪器蜂鸣4声,然后显示上次工作的设定值,对于每次重复使用同一参数时,可直接选择Start后启动输出。3.如要改变其数值可按上【▲】下【▼】按键。 4.如希望查看并设定电压、电流和定时时间,可以按【选择】键,此时←指示相应位置。同样,其数值由上下调节按键控制。 5.按【启/停】键后,仪器鸣响4声,输出启动,“输出指示灯”闪亮,当输出稳定后,稳压/稳流状态改变时,仪器会自动鸣响2声以示提醒用户。仪器正常输出后,设定值Us、Is、Ts自动变为实际值U、I、T。 6.在仪器正常输出时,按【选择】键,相应显示:Us,Is,Ts,T。 7.选择设置Us、Is、Ts后,在8秒内不按任何按键,则自动返回显示实际值U、I、T。 8.在仪器正常输出时若要停机,可按【启/停】键,输出立刻关闭显示“stop”同时仪器反复鸣响,此时应按一下【选择】键,仪器停止鸣响。如果希望继续工作则应选择“Go on”,定时时间继续累加。而如果选择“Start”,则计时重新从“0:00”开始。 9.定时到后仪器自动显示已用时间并反复鸣响以提示用户。考录到电泳的实际情况,仪器输出始终不关,等待用户手动停机,如果用户希望继续工作,可以按一下【选择】键,仪器停止蜂鸣。 当达到仪器的最大定时时间仪器将自动关输出,显示“stop”,以保证使用安全。 注意事项: 1.本机使用一段时间后应检查电极连线与电泳槽是否接触良好,以避免因连接故障造成仪器不能正常工作。 2.仪器使用中,请勿将电泳槽放在电泳仪上进行实验工作,严禁溅入电解质溶液。如溶液已进入电泳仪,切勿接通电源,以免造成事故。同时应由专业人员修理才可使用。 3.本机输出电压较高,开机后人体不宜和电泳槽溶液或样品接触,最好关机后再看样品,以免触电。 4.本仪器输出功率较大,因此采用了通风散热电路,当输出电流达到一定数值时仪器后面板的风扇自动启动,因此,在仪器工作时不要用物体遮挡后面板。 5.使用过程中如发现异常现象,要立即断电并进行检修。对不明原因可与厂家技术科联系。6.在使用过程中出现停电后来电情况,本仪器将回到初始设定状态。 7.当仪器定时达到最大时间100小时后,仪器自动关闭输出,并显示“END”。 8.长时间不用应关闭电源。长期不用应拔下电源插头并盖上防护罩。 9.及时取走自己的物品,注意用电安全,保持实验室清洁,不浪费。仪器不正常时,及时上报,不得自行处理。

垂直电泳槽操作步骤

1.目的 规范垂直电泳槽的使用、维护与保养。 2.范围 3.职责 使用人员对本规程的实施负责,部门负责人监督实施。 4.规程 4.1安装 4.1.1打开包装,将垂直电泳槽放在平稳无振动的实验台桌面上。 4.2使用 4.2.1制胶: 4.2.1.1选择所需间隔厚度的垫条玻璃板,玻璃板上标记的箭头方向向上,玻璃板上有垫条的 那面面对操作者。薄玻璃板平行盖在垫条上。 4.2.1.2将上述一套玻璃板(垫条玻璃和薄玻璃)垂直放入制胶支架,在平整的桌面上将垫条 玻璃和薄玻璃的底面在制胶支架上的锁紧门向二侧旋转锁紧,完成一个制胶单元。4.2.1.3将准备好的制胶单元的底面压到制胶固定架的密封相交条上,世制胶支架的后边尽量 靠近制胶固定架,左手轻轻下压垫条玻璃板上缘至制胶固定架的弹簧夹能卡住为止,右手调整弹簧夹,使弹簧夹能固定在垫条玻璃的中间位置。 4.2.1.4按要求调配合适浓度的胶灌入二块玻璃板中间的间隙中至薄玻璃板上缘1mm处,插入 对应厚度和齿数的梳子,等待胶的凝固。 4.2.1.5胶凝固后,轻轻把掉梳子,取出制胶单元,打开制胶支架上的锁紧门,将玻璃板从制 胶支架中取出,移入电泳槽。 4.2.2电泳槽准备: 4.2.2.1将已制完的二组玻璃板(薄玻璃板向着电极架的红色胶条)分别装入电极架的两面, 玻璃板的底部架在电极架的支脚上,薄玻璃的边缘与电极架的红色橡胶条紧贴。如仅走一块胶,可用提供的玻璃替代塑料片装在电极架的另一面(请注意玻璃替代塑料片上的方向提示)。 4.2.2.2将装完玻璃板的电极架插入垂直槽槽内固定架,并确认电极架已到底。 4.2.2.3再下压已装入的电极架的电极二边外突部分,使玻璃底面与电极架支脚面分离。 4.2.2.4将垂直槽槽内固定架上的锁紧门向中间旋转锁紧。 4.2.3电泳: 4.2.3.1在内槽中加入电泳缓冲液,直至电泳液溢出到外槽中,外槽中电泳液高度约3-5㎝。 4.2.3.2在梳井内加样,注意避免引入气泡。 4.2.3.3盖好上盖。保证电极架的正负极与槽盖的正负极始终相对应。 4.2.3.4接通电泳仪,电压推荐使用60V-200V。 4.3清洁、维护与保养 4.3.1清洁:

全站仪操作步骤及方法

全站仪操作步骤: 1.架好仪器,对中整平。 2.开机→按MENU键→F3(存储管理)→F4(翻页)→F1(输入坐标)→F1(输入)输入一个文件名,如:File,回车后输入点名如A,回车后输入坐标(N,E,Z),输入完后回车输入第二个点名如B,回车后输入坐标(N,E,Z),回车后进入输第三个点界面,这时按两次ESC退出到“数据采集”界面。 3.按F1(数据采集)→F1(输入)输入刚才的文件名File,→F1(输入测站点)→F4(测站)→F2(调用)找到A,回车,检查屏幕显示的坐标是否正确,是则按F3(是)→输入仪高(如1.5米),按F3(记录)→F3(是)。这时返回到了数据采集界面。 4.全站仪照准后视点,按F2(输入后视点)→F4(后视)→F2(调用)找到B点,F4(回车)→F3(是)→F3(测量)→F1(角度)。这时返回到了数据采集界面。按F3(测量),输入点号,输入镜高→F3(测量)→F3(坐标),将测得的坐标与后视点的坐标比较,若不一样则检查问题所在,若一样或误差不大则可以进行没量了,按F4(设置)以保存刚才所测的数据(按ESC则不保存)。 5.照准前视按F4(同前),测得坐标后按F4(设置)以保存 中国3S吧https://www.wendangku.net/doc/a618276735.html, 全站仪概述 随着现代科学技术的发展和计算机的广泛应用,一种集测距装置、测角装置和微处理器为一体的新型测量仪器应运而生。这种能自动测量和计算,并通过电子手簿或直接实现自动记录、存储和输出的测量仪器,称为全站型电子速测仪,简称全站仪。全站型电子速测仪是数字测图中常用的数据采集设备。全站仪分为分体式和整体式两类。分体式全站仪的照准头和电子经纬仪不是一个整体,进行作业时将照准头安装在电子经纬仪上,作业结束后卸下来分开装箱;整体式全站仪是分体式全站仪的进一步发展,照准头和电子经纬仪的望远镜结合在一起,形成一个整体,使用起来更为方便。对于基本性能相同的各种类型的全站仪,其外部可视部件基本相同。全站仪主要由五个系统组成:控制系统、测角系统、测距系统、记录系统和通讯系统。全站仪组成及各系统间关系见图8.5。 专业的3S站https://www.wendangku.net/doc/a618276735.html, 图8.5 全站仪组成及各系统间关系示意图 控制系统是全站仪的核心,主要由微处理机、键盘、显示器、存储卡、制动和微动旋钮、控制模块和通讯接口等软硬件组成。根据要求,通过键盘(面板)可以进行各种控制操作。如:参数预置,选择显示和记录模式,进行存贮卡格式化,建立或选择工作文件,数据输入输出,确定测量模式等。 全站仪的测角系统与传统光学经纬仪测角系统相比较,主要有两个方面的不同: (1)传统的光学度盘被绝对编码度盘或光电增量编码器所代替,用电子细分系统代替了传统的光学测微器;

电泳仪的使用方法及注意事项

电泳仪的使用方法及注意事项 电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类,自由界面电泳不需支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等,分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,因此在电场中运动速度不同,根据这一特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制造的。下面简单介绍其使用方法及注意事项。 使用方法 1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接,注意极性不要接反。 2.电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小,根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 3.接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。 4.工作完毕后,应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态,并拨出电泳插头。 注意事项

1.电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端,以防漏电。 2.仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致仪器损坏。 3.由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流量也不同,其泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。 4.在总电流不超过仪器额定电流时(最大电流范围),可以多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响仪器寿命。 5.某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时,允许在稳压状态下空载开机,但在稳流状态下必须先接好负载再开机,否则电压表指针将大幅度跳动,容易造成不必要的人为机器损坏。 6.使用过程中发现异常现象,如较大噪音、放电或异常气味,须立即切断电源,进行检修,以免发生意外事故。 . .

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