HPLC测定盐酸头孢甲肟含量的方法学验证

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HPLC测定盐酸头孢甲肟含量的方法学验证作者：史瑞李金花

来源：《科技创新与应用》2014年第15期

摘要：目的对建立的HPLC法测定盐酸头孢甲肟含量方法，进行方法学验证。方法仪器：Agilent 1260，色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料的色谱柱，流动相：乙腈-水-冰醋酸（15：45：1），检测波长：254nm，进样量：20μl。结果线性和范围0.05522mg/ml～0.14678mg/ml，精密度RSD=0.03%，回收率98.4%～101.6%，耐用性对同一批次本品含量测定结果的RSD%为0.81%（n=13）。结论建立的方法准确、可靠，能够满足实际生产要求。

关键词：盐酸头孢甲肟；HPLC；方法学验证

引言

盐酸头孢甲肟属于第三代头孢菌素，对革兰氏阴性和阳性的需氧菌和厌氧菌均有抗菌作用。生产工艺中常利用HPLC测定盐酸头孢甲肟含量的方法，目前已经建立的方法是：色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料的色谱柱，流动相乙腈-水-冰醋酸（15：45：1），检测

波长254nm，进样量20μl。

分析步骤：按外标法以峰面积计算供试品中头孢甲肟（C16H17N9O5S3）的含量。

计算公式：

式中：RU：供试品溶液中主峰响应值；RS：对照品溶液中主峰响应值；CS：对照品溶液浓度mg/ml；CU：供试品溶液浓度mg/ml。

对该方法进行方法学验证，证明方法是否准确、可靠，能够满足实际生产要求。

1 仪器与试剂

仪器：天平：Mettler XS205、高效液相色谱：Agilent1260。

试剂：冰醋酸（分析纯、上海市化学试剂一厂）、磷酸（分析纯、天津市科密欧）、乙腈（色谱纯、TEDIA）。

2 实验方法

2.1 进样精密度验证