金苗免疫助手指南

金苗免疫助手在使用中遇到的问题及解决方法（陆续更新中）

以下问题都是工程部人员反应上来的问题，我感觉出现这些问题的时候的情况比较普遍，所以总结出来和大家分享，后续问题还会继续更新。如果说大家在使用过程中有什么问题和好的解决方法都可以发帖和大家共同分享。毕竟大家都是在为公司的发展而努力。我感觉大家有怎么一个交流的平台可以相互提高大家的技术水平的。

1.金苗免疫系统如果提示升级后用户没有选择升级，那么当有在一次发布升级包的时候，金苗免疫系统是直接升级到下一版本吗？

答案:可以。

2.维护工具出现socket error # 11004

答案:网络不通的提示。

3.备份文件保存时间问题。

答案:年备份永久保存;月备份保留12个月;日备份保留30天。

4.在旧基层导出数据时，出现下列错误提示，是什么原因造成的。

main(main):122

主菜单33(ON...):1666

wt_export(_25w0mffy0):17

wt_export(wt_export):537

答案:由于居委会重复导致的。

5.如何打印儿童迁出证明。

答案:找到迁出儿童打印儿童正帐就是。

6.居委会可以合并但是不可以删除，一般情况下是什么原因导致的。

答案:居委会下面有儿童信息。

7.在到期未种查询时弹出

预约过程出错：SQL Server Error: database file appears corrupt ()

wrong page type

page 39463 is of wrong type (expected 7, found 5)

如何处理

答案:数据库库损坏，做下数据备份和恢复整理下数据库。

8.在做旧基层导出时提示“系统中有n个儿童编码无法升级”出现这种提示的原因是什么。

答案:没有相应的儿童旧编码对照表。

9.在运行金苗免疫助手时弹出提示并且程序无法启动：

“程序出错，程序被迫退出，错误信息如下：

SQL Server Error: Unable to complete network request to host "1 27.0.0.1".

Failed to establish a connection.

由于目标机器积极拒绝，无法连接。”什么原因导致的。

答案:用户手动关闭了数据库服务器，在启动像里启动就可以可.

免疫组化抗体手册

免疫组织化学 抗体手册 目录 中间丝 细胞角蛋白 AE1/AE3 Cam5.2 MNF-116 34βE12 CK5/6 常见肿瘤中的特殊角蛋白 CK1 CK7 CK8 CK13 CK14 CK18 CK19 CK20 TTF-1，CK7和CK20的表达有助于诊断原发性肺腺癌还是转移性腺癌Vimentin（波形蛋白） Desmin（结蛋白） GFAP（胶质纤维酸性蛋白） Neurofilament proteins（神经细丝蛋白） Acid phosphatase（酸性磷酸酶） Actins（肌动蛋白） Muscle-specific actin（HHF35）肌肉特异性肌动蛋白（MSA） Smooth muscle actin（SMA）平滑肌肌动蛋白 α-actinin（α-肌动蛋白） NPM/ALK（间变性淋巴瘤激酶） AAT、AACT （α1-抗胰蛋白酶、α1－抗糜蛋白酶） AFP （甲胎蛋白） α-lactalbumin （α-乳清蛋白） Angiotensin-converting enzyme（血管紧张素-转换酶） Anti- Mullerian hormone（AMH），Mullerian-抑制因子 Cyclin D1（PRAD-1，bcl-1,CCND1）细胞周期蛋白D1 bcl-2 Bcl-6 Ber-EP4 Ca15.3 B72.3 (BRST-3) BCA-225 CA125 CA19.9 CEA（CD66e） Cadherins Calcitonin h-Caldesmon S-100 Calponin Calretinin CD1 CD2 CD3 CD4 CD5 CD7 CD8 CD9（运动相关蛋白，MRP-1） CD10（CALLA，NEP） CD11 CD13 CD14 CD15（LeuM1） CD16 CD19 CD20 CD21

新手冲级攻略R2

新?冲级攻略 R2 R2，是?个?常值得玩的游戏，它接近真实的游戏系统，久经磨练的游戏??，能给你拥有相当强悍的耐久?（H P，M P值的提升）、命中和回避率的提升，当然，攻击?也会有?定的提升，但是R2的攻击?和防御?，不可以说完全，90%是依靠?套好的装备和?把好的武器。现实也是如此~相对于?些游戏，等级?于?切，这会让?玩得很头痛！?个??家（久经磨练，级别很?）就代表了?定能战胜?个年轻?吗？N O！！！下?我们来看看我们玩R2升级和打装备的?标。 很久很久以前~R2的新?药?（?瓶补H P药和加速药?，29级前使?包括29级。）只有在新?村??才能买得到，但是经过官?照顾??新?玩家的改版之后，R2新?药?在艾斯本镇和??镇也能买得到啦，购买N P C就在两城的杂货店旁边。这是福?~下?我来给?家推荐?下，练级的地点和?法： 1-30级是?个?常重要的阶段！因为新?药?和新?加速药?的使?阶段就在1-29级（包括29级），新?药?的价格很便宜，?瓶补H P药6银币，新?加速药?12银币。这个阶段?，我推荐?家到以下?个地点练级： 1-10级?家可以在新?村练级，那?可以提供升级的怪物很多，也可以做新?任务，可领到的重要装备有：+3流浪者武器（剑和?，通过强化?进?强化）、流浪者铠甲；在游戏??升到10级的时候系统就会?动把??传送出新?村啦，所以?家应该主要把新?武器和装备的任务完成了，然后9级的时候再回村?找N P C进??次变?再升级到10级或找N P C??直接传送出村。 10-20级，趁变?时间还有1?时的时间，把药?和箭买满，加速药??般5-10个就够了，别忘了买回城药哦~，?切都准备好了，往?暗洞窟冲吧~在?层到?层的???，?常多的哥布林矿?和洞?蝙幅，因为你变了?，所以怪物不会?动攻击你，你就?你?上的宝剑和强?，?只只的把它们消灭掉吧，这?怪物会掉?些较为值钱的材料，其中有?属碎块、铜块、硬刺护?。注意（不要节药你的药?,打到的材料，在不练级的时候摆摊出售，?属碎块可以卖8000-15000银币，铜块500银币，硬刺护? 4500-6000银币，这个销售价格，视乎当时服务器的需求量，?般刚开的新服，装备类价格较?。这样?，凭着新?村的武器和装备就可以很快的升到20级啦，也拥有了??的第?笔存款哈~ 20-30级，流浪者武器继续?，这个可以?到荣誉币换取的武器之前。之前的练级有了?定的存款，这?可以向其它玩家购买?套硬刺装备，主要是硬刺头盔、硬刺?、硬刺?、硬刺靴。基本的攻击?和防御?有了，就推荐?家到以下?个地点练级：1、兽?营地（可以打到硬刺装备和防卷，防卷打兽?战?会出）；2、豺狼?，具体的位置在?暗之城的上?，并不难寻找（打豺狼??兵和豺狼??箭?，这?出碎铁链，是后期主要装备的制作材料）； 3、半?鱼栖息地（这?主要出防卷、?痹法杖和加速药?，可以卖给玩家）；还有其它的练级地点，但没有这?个地?好，也说?下：帝王墓?地表、?龙沼泽，亡者之地、不死地牢??等。 重点推荐：豺狼?！这?由20级打到30级，碎铁链的收??少也有10-20条。?够做?套锁链装备了，多余的也可以出售给其它玩家，价格在5- 10W，新服相对较?。

免疫组化操作步骤

免疫组化操作步骤集团标准化工作小组 #Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#

免疫组化操作流程 试剂准备 1. PBS缓冲液（～）： NaCl 137mmol/L，KCl L，Na2HPO4 L， KH2PO4 L。 2. L柠檬酸盐缓冲液（CB，，1000ml）：柠檬酸三钠 3g，柠檬酸。即抗原修复液 : PBS+吐温-20（1000:1）洗液可全部运用PBST 4. 3% 甲醇-H2O2溶液：用30%H2O2和80%甲醇溶液配制。 5. 封片剂：中性树脂+二甲苯。 操作流程 免疫组织化学染色 SP法： 1. 脱蜡、水化： 脱蜡前，应将切片在60℃恒温箱中烘烤60~120分钟，观察石蜡应溶解。 从烤箱拿出切片后尽快置于二甲苯中浸泡30分钟，更换二甲苯后再浸泡30分钟； 无水乙醇中浸泡3分钟； 95%乙醇中浸泡3分钟； 70%乙醇中浸泡3分钟（我用80%）； 50%乙醇中浸泡3分钟； 自来水中浸泡3分钟；

梯度脱蜡 2. 抗原修复：（用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片） 高压热修复高压锅里放少许水，用一量杯或容器（大小能容纳玻片架为宜）装抗原修复液放入高压锅里一起煮沸，再放入玻片架，盖上不锈钢高压锅的盖子，将排气阀门套上，待听到阀门冒气时，即可倒计时2min，之后将玻片杯一起放入凉水中，静置15min，平衡至室温。电磁炉1000W 2min。 3.丢弃抗原修复液，将玻片浸泡在去离子水中（时间不限）可省略 4.用组织笔沿组织边缘画线（可与组织边缘留适当间隙），画完立即放入PBST溶液中浸泡3遍X3min（三个容器，每个容器3min，时间不限制）。 5. 3%H2O2滴加在切片上，室温静置15分钟(3%的H2O2用30%的 H2O2加双蒸水稀释10倍，现配现用。目的为阻断内源性过氧化物酶)； 6. PBST洗3次各3分钟(过三缸) 7. 滴加正常山羊血清封闭液,室温30分钟。用与一抗不同源的血清即可，本人用Western-blotting的含胎牛血清封闭液。 8. 甩去封闭液（注：不要冲洗），滴加一抗50ul（至少50ul否则易干片），4℃孵育过夜。4℃过夜后需在37℃复温45分钟（未验证：室温静置1小时或者4℃过夜或者37℃1小时。）。 9. PBST洗3次各3分钟；

WOW魔兽世界诺森德70-80级快速升级路线全攻略秘籍

很多人都去台服已经升到了80级,但还是有大部分人留了下来,希望这篇70-80升级路线能对国服的玩家有所帮助偌森德70-80升级路线指南： 1)诺森德地图(点击查看放大图)： 1、70-80升级路线：北风苔原(点击查看放大图)： (怪物等级：68-71)

首先，从暴风城港口最右边的码头坐船。到达骁勇要塞(沙到北极的传送门现在取消，只出现在PTR服务器上面)。 这个地图有5个飞行点，任务总数在140个左右，包括副本任务。 一个5人副本，魔枢之心，适合71-73级玩家。 一个5人80级副本，魔枢之眼，适合78-80级玩家。 一个25人副本，永恒之眼。 副本外的飞行点：隘境之盾，不能直接跑到。这个飞行点会由地图上的另外一个飞行点：琥珀看台的任务开启。琥珀看台任务其中一步就会让你飞去隘境之盾。和飞行点的龙对话即可。 初来这个地图的注意要塞里面。急救、锻造、采矿以及其他所有的专业训练师都在要塞，宗师级的。不用另外找了。出了急救和锻造的在一下船就可以找到外，其他的都在要塞堡垒的后面集中。厨师在旅馆里面。 新的急救技能上线是450。一开始不用冲急救，因为厚符纹布绷带，375，已经是灰色的了。练霜纹布绷带吧。当急救技能到达390之后，你可以在74级人形怪身上，有一定几率拾取：厚霜纹布绷带，然后练到450。书是拾取绑定的，不能卖。 地图的右边：昂纽沛，这个是海象人的飞行点，有船可以去往龙骨荒野的港口：默亚基港。 地图的上面：简易机场，这个是侏儒的飞行点，任务较多。这里有一个任务需要一个工程学制品，很多JS这个机会赚钱。不推荐完成了，花钱，而且任务奖励很一般(绿装而已)。 本地图的重点任务：死亡看台有一个任务链，最后任务是一个5人任务，73的精英。血量大概是20多万(有点忘记)，任务奖励蓝色武器6选1。奖励的级别大概是KLZ的武器水平。对于我们工会大部分成员来说，作用不大。不过经验还不少。 2、嚎风峡湾(点击查看放大图)：

免疫组化超详细步骤

免疫组化 一实验目的：分别用KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体检测肺癌组织中KRAS、NRAS、HRAS蛋白的表达情况 二实验原理: 应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术. 三实验试剂及耗材:经病理医生确认的肺癌组织切片、KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体、DAB 显色试剂盒、抗原修复液、PBS、苏木素染料、1%盐酸酒精溶液、0.05%氨水、二甲苯、等 四实验设备：切片机、4℃冰箱、显微镜、烤片机 五主要试剂配置: 缓冲液 应用液A NaH2PO4 38.4g配成1000毫升溶液 应用液B Na2HPO4·12H2O 114.8g配成1000毫升溶液 配制1000毫升PBS需要14毫升应用A液，36毫升应用B液，加8.5gNaCl。 枸橼酸钠抗原修复液 应用液A 枸橼酸 10.55g配成1000毫升溶液 应用液B 柠檬酸三钠（三水合柠檬酸三钠） 29.01g 配成1000毫升溶液 配制500毫升抗原修复液需要9毫升应用A液，41毫升应用B液。 苏木素染液配方：苏木素2g,无水乙醇250毫升，硫酸铝17.6g蒸馏水750毫升，碘酸钠0.2g，冰醋酸20毫升。先将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝溶于蒸馏水水中。两液溶解后将其混合，加入碘酸钠，最后加入冰醋酸。 抗体说明书建议的抗体稀释度 N-Ras 1:50-1:500 H-Ras 1:50-1:500 K-Ras 1:20-1:200 六实验步骤： 1组织常规石蜡切片厚度3-5um，防脱片捞片后晾干，放入72℃烤箱烤片2小时。 2 切片脱蜡水化程序

传奇3免费版新手初期升级攻略

传奇3免费版新?初期升级攻略 此攻略只适合那些第?次进?游戏，并且没有朋友帮助?起游戏升级的菜鸟们观看哦。^o^ 战?： 战?的开始地点为边境城市，先不要着急升级哦，旁边就是上官?姐(461:257)，把初级任务接了吧。然后就开始了战?的新?之旅~ 1级~4级：就在边境城市周围打：鸡，?，猪来赚经验。记得要为了任务挖??哦(A LT+左键，按住了)~ 4级~7级：可以离边境城市稍微远?点的地?打：稻草?、蛤蟆、多钩猫、钉耙猫、狼、毒蜘蛛、半兽?、森林雪?来赚经验。后边的四个要??，经常是在?起?常多的怪。 到了7级也应该做完了初级任务了，先去龙?先?(坐标:边境村456, 302)那学完技能，就可以去?奇县把书交给王??了。 7级~14级：在?奇、道馆、边境城市、毒蛇??打地?上的怪，11级?服可以做任务得到，其它装备打到什么?什么。学技能：攻杀剑术 14级~22级：边境城市、?奇县的矿洞?打僵?(可以打到书，店?没有卖的书也要在这?打?王)，记得18级和20级都能换武器，22级?服商店?买。学技能：刺杀剑术 22级~30级：从绿洲传送到蚂蚁洞练级，30级就可以装备商店的所有?饰了。学技能：半?弯?、野蛮冲撞。半?弯?只能?书学。 30级~38级：在盟重县的绝命?，?峡?，?阁庙打怪。装备好的可以去潘夜岛的潘夜?窟?狂打，33级换?服，商店有卖。学技能：烈?剑法、翔空剑法、莲?剑法。这三个技能只能买书或??打书学，没有任务。 到了38级。绝对就不会是个新?了，??去闯吧。==b具体哪?更适合??，还是要慢慢在游戏?学的。 相关参考资料：[初级任务][战?技能学习任务][职业技能][怪物资料][装备资料] 法师： 法师的开始地点为银杏??，先去找南宫?姐(264:201)把初级任务接了。装备好?剑开始边升级边完成这个初级任务。 1级~4级：在银杏??周围打：鸡，?，猪来赚经验。记得挖鸡?哦(A LT+左键，按住了挖~)~ 4级~7级：可以离城市远?点的地?打：稻草?、蛤蟆、多钩猫、钉耙猫、狼、毒蜘蛛、半兽?、森林雪?来赚经验。后边的四个要??，经常是在?起?常多的怪。 到了7级做完了初级任务了吧。也学了第?个技能??球了。

免疫组化步骤

免疫组化实验步骤 细胞和组织的固定 （一）固定 为了更好的保持细胞和组织原有的形态结构，防止组织自溶，有必要对细胞和组织进行固定。固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固，终止或抑制外源性和内源性酶活性，更重要的是最大限度的保存细胞和组织的抗原性，使水溶性抗原转变为非水溶性抗原，防止抗原弥散。不同抗原，其稳定性也不相同，因而对固定剂的耐受性差异较大 （二）固定剂 用于免疫组织化学的固定剂种类较多，性能各异，在固定半稳定性抗原时，尤其重视固定剂的选择，介绍如下。 1．醛类固定剂双功能交联剂，其作用是使组织之间相互交联，保存抗原于原位，其特点是对组织穿透性强，收缩性小。有人认为它对IgM、IgA、J链、K 链和λ链的标记效果良好，背景清晰，是常用的固定剂。 1）4%多聚甲醛为我们常用固定剂 2）Bouin’s液 该固定液为组织学、病理学常用固定剂之一，对组织穿透力较强而收缩性较小，比单独醛类固定更适合免疫组化染色。Kayhko认为用于标记B细胞的J链较好，但Bullock则认为它可导致Igg γ重链变性，故必需加大第一抗体的浓度。 2．丙酮及醇类固定剂 系最初免疫细胞化学染色的固定剂，其作用是沉淀蛋白质和糖，对组织穿透性很强，保存抗原的免疫活性较好。但醇类对低分子蛋白质、多肽及胞浆内蛋白质保存效果较差，解决的办法是和其它试剂混合使用，如加冰醋酸、乙醚、氯仿、甲醛等。 丙酮的组织穿透性和脱水性更强，常用于冰冻切片及细胞涂片的后固定，保存抗原性较好，平时4。C低温保存备用，临用时，只需将涂片或冰冻切片插入冷丙酮内5-10min，取出后自然干燥，贮存于低温冰箱备用。 以上介绍了免疫组织化学中常用的固定液，用于免疫组化的固定剂种类很多，不同的抗原和标本需经过反复试验，选用最佳固定液，迄今尚无一种标准固定液可以用于各种不同的抗原固定。而且同一固定液固定的组织，免疫组化染色标记

串口调试助手使用方法

串口调试助手使用方法 你可以试试串口监控器，一个功能强大，非常易用的软件。 串口监控器是一个免费的多功能串口通讯监控软件，它能够多种方式显示，接收，分析通讯数据；能够以多种灵活方式发送数据；功能强大，操作简便，在串口通讯监控，设备通讯测试中，能够有效提高工作效率。 主要功能如下： 接收数据： 1. 以十六进制方式显示接收到的数据。 2. 以字符方式显示接收到的数据。 3. 数据帧自动识别，分行显示。 4. 接收数据自动换行设置。 5. 显示或隐藏数据帧的接收时间。 6. 自动清除，自动保存接收到的数据。 7. 接收数据个数计数。 发送数据： 1. 十六进制方式发送数据。 2. 字符串方式发送数据。 3. 发送“发报窗口”当前光标行的数据帧。 4. 循环发送“发报窗口”当前光标行的数据帧。 5. 循环发送“发报窗口”固定行的数据帧。 6. 循环依次发送“发报窗口”的多行数据帧。（设置起始行，行数） 7. 触发发送，接收到“发报窗口”某一行数据，触发发送“发报窗口”另一行数据。 8. 发送数据个数计数。 实用增强功能： 1. 强大易用的进制转换功能。 2. 智能识别当前光标处数据帧的行号，“字符”或“十六进制数”的个数。 3. 智能计算当前选择的“字符”或“十六进制数”的个数。 4. 强大的数据查找功能。 5. 定时保存，定时清除数据。 6. 根据自己的喜好，灵活变换操作界面。

应用场合： 1. 截取和分析设备之间通讯数据流。 2. 串行外围设备硬件开发。 3. 串行设备驱动程序开发。 4. 调试和测试设备和设备之间的串行通讯过程。 5. 记录和分析RS232/422/485通信过程。 6. 模拟某设备通讯过程，对另外设备进行通讯测试。

学习强国学习积分快速提升指南

学习强国学习积分快速提升指南 一、学习积分指南 登陆后点击右下方“我的”——“学习积分”，进入“学习积分”界面，共有12大项可以通过学习累积积分。 1. 登陆获取1分。 （活跃时段分早晨6:00—8:30，中午12:00 2. 阅读文章获取6分。 —14:00，晚上20:00—22:30）3篇文章6分。注意：打开后几秒关闭也可得分。 3. 观看视频获取6分。活跃时段只要观看3个视频。注意：打开后几秒关闭也可得分。 4. 文章学习时长获取8分。注意：活跃时段阅读16分钟，不计阅读的篇数，只计阅读的时长。 5. 视频学习时长获取10分。活跃时段满25分钟。注意：新闻联播是最佳选择。 6. 智能答题获取6分。1组智能答题，完全正确即可获取2分。每天最高可以获取6分。注意：有错误得1分，超时不得分。当然，题库无限，只要不放弃就可以拿满6分。 7. 每周一答获取8分。每天完成1组每周一答，完全正确即可获取8分。如有错误，获取6分。注意：提交前一定要复查答案，错误后本题再答也不会加分；如果重开一题地浪费宝贵的题库资源。 8. 专题考试获取10分。每天完成1组专题考试，完全正确即可获取10分。每天最高可以获取10分。如有错误，获取8分。注意：提交前一定要复查答案，错误后本题再答也不会加分；如果重开一题地浪费宝贵的题库资源。 9. 订阅获取2分。每天完成2个订阅。注意：千万别1天订阅2个以上。目前大概60个订阅平台，订阅过的即使取消后再订阅也不会加分。 10. 收藏获取1分。每天完成2篇文章的收藏。注意：1篇文章可以多次收藏。 11. 分享获取3分。每天每完成2次分享，获取1分。注意：1篇文章可以多次分享。 12. 发表观点获取5分。发表1个观点1分。注意：至少要5个字，1个观点可多次发表。 二、学习积分总体建议

免疫组化的原理和步骤

免疫组织化学的概念： 免疫组化是利用抗原与特异性结合的原理，通过化学反应使标记的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。 免疫组化实验所用的有哪些？ 免疫组化实验中常用的抗体为单抗体和多抗体。单抗体是一个B淋巴细胞分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。 免疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些？ 实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理大片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。 其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。石蜡切片为什么要做抗原修复？有哪些方法？ 石蜡切片标本均用甲醛固定，使得细胞抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行IHC染色时，需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。常用的抗原修复方法有微波修复法，高压加热法，酶消化法，水煮加热法等，常用的修复液是pH6.0的0.01 mol/L的柠檬酸盐缓冲液。 免疫组化常用的染色方法有哪些？ 根据标记物的不同分为免疫荧光法，免疫酶标法，亲和组织化学法，后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高，有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位，其中生物素——抗生物素染色法最常用。 抗体交叉反应的原因： 指抗体除与其相应的抗原发生特异性反应外还与其它抗原发生反应。产生的原因有以下几个方面： 1. 抗原特异性指用于免疫动物的抗原性物质中含有多种抗原分子，它引起动物产生针对多种抗原分子特异性的相应抗体。任何其它物质只要含有一种或多种与上述物质相同的抗原分子，必将与上述多特异性的抗血清发生交叉反应。 2. 共同决定簇即两种抗原分子中都含有相同的抗原决定簇。 3. 决定簇相似，两种不同的抗原决定簇，如果结构大致相同，由于空间构象关系，某一决定簇的相应抗体可以与大致相同的决定簇发生交叉反应。当然抗原一抗体之间构象相似时的结合力小于吻合时的结合力。 免疫细胞化学技术 一、免疫细胞化学技术的概述 *免疫细胞化学(immunocytochemistry, ICC) -是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定细胞抗原的成分(主要是多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为～。

魔兽世界 1-60级升级指南(联盟篇)完整版

这些地方大部分已经被证实确实很好，但是为了防止地区的过分拥挤，我将尝试列出几个不同的地方，所有的地方都应该是很合适的。一般来说这些地方只有一两个人，不像其他人多怪少的地方。不过因为这样，当你死亡了之后也许你会很不幸的发现这些地方没有你想象中的好，如果是这种情况的话，我提前道歉。 下面给的只是一个大约的等级，为了进入下一个区域，你有可能要多练1－2级做为补充。同样的，练级区后面的等级代表你差不多可以在那打怪练级的开始等级。当你的等级高于开始等级4－5级的时候，你应该停止继续在那练级了。事实上，推荐你最好在练了4级之后换个地方。。 同时呢，联盟的玩家要记住，我只玩过联盟阵营，对部落的大陆不是很熟悉。你也会注意到对卡利姆多的菲拉斯和塔纳利斯以上的地区的不了解。所以我并不是说灰谷、石爪峰、千针峡谷或者凄凉之地这些是不好的地方，诚恳的说，我是对这些地方没有经验，我列出的这些形形色色的地方只是代表性的说明这些地方足够你升级。 请紧记，我在一个地方旁边列出的等级，如果只是一个数字的话，代表那是你可以在那开工的等级。每个地区应该都可以让你在那练4－5级（任务区除外），如果你没有足够的耐心在那待着那是另外一回事。 谢谢所有帮忙编写和增加这个表格的人。 1－12级： －新手区：最好在11级的时候离开。 12－20级： －西部荒野[哨兵岭，西部荒野灯塔] －洛克莫丹[赛尔萨玛，速骑林屋，巨石水坝] －黑海岸[奥伯丁] －精英区域：莫格罗什要塞(洛克莫丹) －副本:死亡矿井 先完成你去的第一处地方最简单的任务(精灵先去黑海岸，矮人/侏儒先去洛克莫丹，人类先去西部荒野)。然后去下一区域同样做，但是这次你可以完成这个区域更多的任务。留下最难的,除非你能找到一支队伍一起完成－可是不要花费过多时间在上面。然后再去最后一块地方完成所有任务，或者是几乎所有可以完成的任务。这时候，你应该有17－18级了，再回到第一处，完成剩余的任务。 一般来说，我去的第一处是西部荒野，等做了洛克莫丹和黑海岸的任务再会去，完成Van Cleef 任务之后就会是一个很合适去副本的等级。

免疫组化基本步骤

细胞免疫组化染色步骤 1．细胞爬片，取出后，PBS洗三遍，每次3分钟。4℃冷丙酮固定10分钟，（或用4%多聚甲醛固定30分钟），干燥30分钟。 2. 用PBS洗三次，每次5分钟，加3%过氧化氢30μl，室温孵育10分钟，（以消除内源性过氧化物酶的活性）蒸馏水冲洗，PBS洗三次，每次5分钟。 3．加1%的Triton X-100 30μl，室温孵育10分钟，增加细胞膜的通透性。蒸馏水冲洗，PBS洗三次，每次5分钟。 4．滴加正常山羊血清30μl，封闭非特异性结合位点，以消除非特异性染色，室温孵育30分钟，倾去勿洗。 5．滴加适当稀释度的一抗，空白对照组以PBS代替一抗，4℃湿盒孵育过夜。PBS洗三次，每次5分钟。 6．滴加生物素标记的二抗工作液30μl，室温孵育30分钟。PBS洗三次，每次5分钟。 7．滴加辣根酶标记链酶卵白素30μl，室温孵育30分钟。PBS洗三次，每次5分钟。 8．滴加DAB显色剂30μl，显微镜下观察显色，自来水冲洗。 9. 将处理好的玻片细胞核衬染：浸入苏木精染液染色2min，自来水洗，迅速过盐酸酒精溶液，自来水洗，过氨水溶液，自来水洗。 10.梯度酒精脱水，过70%酒精1次，95%酒精2次，无水乙醇3次，每次1min 11.二甲苯透明，过二甲苯溶液3次，每次１min。 12.中性树胶封片将有细胞的一面向下，用中性树脂封片。 稀盐酸酒精溶液：用75%酒精配制1%盐酸。 淡氨水溶液：在400ml自来水中滴2滴浓氨水(使细胞核蓝化) 另外：需1%TritonX-100增加细胞膜通透性。苏木素复染时间和盐酸酒精脱色时间需自己摸索，我是染5-6秒脱色1-2秒。盐酸酒精还可用70%乙醇配制1%盐酸。我没用淡氨水溶液。若为悬浮细胞则需涂片，20μl即可。

串口调试助手VC++6.0程序

串口调试助手源程序 及编程详细过程 作者：龚建伟 2001.6.20 可以任意转载，但必须注明作者和说明来自https://www.wendangku.net/doc/b28192891.html,，不得作为商用 目次： 1.建立项目 2.在项目中插入MSComm控件 3.利用ClassWizard定义CMSComm类控制变量 4.在对话框中添加控件 5.添加串口事件消息处理函数OnComm() 6.打开和设置串口参数 7.发送数据 在众多网友的支持下，串口调试助手从2001年5月21日发布至今，短短一个月，在全国各地累计下载量近5000人次，在近200多个电子邮件中，20多人提供了使用测试意见，更有50多位朋友提出要串口调试助手的源代码，为了答谢谢朋友们的支持，公开推出我最初用VC控件MSComm编写串口通信程序的源代码，并写出详细的编程过程，姑且叫串口调试助手源程序V1.0或VC串口通讯源程序吧，我相信，如果你用VC编程，那么有了这个代码，就可以轻而易举地完成串口编程任务了。（也许本文过于详细，高手就不用看） 开始吧： 1.建立项目：打开VC＋＋6.0，建立一个基于对话框的MFC应用程序SCommTest（与我源代码一致，等会你会方便一点）； 2.在项目中插入MSComm控件选择Project菜单下Add To Project子菜单中的 Components and Controls…选项，在弹出的对话框中双击Registered ActiveX Controls项（稍等一会，这个过程较慢），则所有注册过的ActiveX控件出现在列表框中。选择Microsoft Communications Control, version 6.0，，单击Insert按钮将它插入到我们的Project中来，接受缺省的选项。（如果你在控件列表中看不到Microsoft Communications Control, version 6.0，

羽灵快速冲级篇快速升级全指南完美世界

?灵快速冲级篇快速升级全指南完美世界 （在?络游戏中，要想成为真正的??，具体的升级任务，打怪掉宝?率?然需要牢牢掌握，但是更重要的是了解游戏的本质内涵，只有真正的理解了游戏，融?游戏之中，才有可能成为真正的游戏达?。因此，本?更倾向于概念性的阐述在《完美世界》中的攻略重点，祝?家都能在游戏中实现??的完美梦想。） 《完美世界》逍遥内测正在如?如荼的进?当中，各种族也都出现了满60级（逍遥内测所开放最?等级）的练级达?，虽然在《完美世界》?，除了枯燥的升级打怪，还有?量丰富的创新系统可以带给我们愉快的游戏体验，但是作为实?的象征，如何迅速提???的等级，仍然是我们每个玩家梦寐以求的最终秘籍。 要想快速提升??的等级，那么对??所选职业进??番深?了解就是必做的功课了，那么第?课就从职业特?说起吧。 ?前，《完美世界》共开放了三?种族的四种职业供玩家选择，分别是?族的武侠、法师；妖族的妖兽及?族的?灵。根据笔者使?各种职业进?游戏的经验来看，《完美世界》在职业特点的设定上，可谓是煞费苦?。同传统的欧美及“泡菜”?游相?，更加着重的突出了中国玩家的需求特?。但是由于??玩家对“泡菜”?游已经形成了习惯性思维，所以有部分玩家可能在初期会感觉不?适应，但是在认真体验尝试之后，相信?家也?定会爱上这种更具中国特?的原创设定。 ?灵：这个职业接近于传统?游的牧师??，强?的回复h p技能以及复活技能使之成为组队游戏不可或缺的灵魂?物。但与其他游戏不?样的是，?灵在具有强?辅助技能的同时，也还具有极?的杀伤?，这可是和其他游戏设定的不??样哦。在其他许多国家的世界观?，救死扶伤是神职?员的专利，因此，这些神职?员除了治病救?以外，基本就是废柴?个，最多来个什么对?暗系列攻击加成x x x%。可是，我们中国可没有这样的职业哦，?论是神话还是武侠故事?，救?的能?，往往与??的实?成正?。因此，在《完美世界》?，??热爱救死扶伤，却又苦于升级能?不?的玩家们，这下再也不?担?这样的问题了。 妖兽：动物造型的妖兽外貌魄???，其特点是攻击?，?厚?长，但?动缓慢。实际上可以理解为最基本的战?升级版。利????命?顽强的优势顶住敌?的攻击，为??的队友换来攻击的机会，同时，??也拥有极少数超级强?的技能，可以在短时间内给敌?造成巨?的伤害。如果组队升级的话，妖兽将会是队伍?最坚实的盾牌。 法师：在绝?部分?络游戏?，法师都是毫?疑问的s o l o之王。超强的攻击?使这个职业成为了最容易遭受玩家争议的??，?在《完美世界》中，法师的职业设定特?尤其明显，在获得超强的攻击?的同时，法师的施法速度得到了削弱，因此，法师很难疯狂的个?s o l o，同他?配合，找寻机会释放??的致命?击才是??最好的选择。 武侠：《完美世界》中最具争议的??，?他的争议之处也正是其特?所在。按?般玩家的思维惯性，很容易将武侠与其他游戏中的战?划上等号，这就?错特错了，在《完美世界》?，妖兽才是更接近战?的职业，?武侠，只能勉强与敏捷型战?划上等号。再回头想想，在中国背景的设定中，快狠准似乎才是??主?的普遍真理，各项均衡发展的平衡战?，并不是我们中国的“特?产品”呢。

病理科免疫组化常用抗体

免疫组织化学常用抗体标记谱系 第一节 上皮细胞标志 １.细胞角蛋白Cｙtokｅraｔin(ＣK) CＫ就是一种中间丝蛋白,就是上皮细胞及其肿瘤较特异标志物。CＫ分子量为4０~6０KD,根据其分子量不同分为２０余种,并粗略划分为高分子CK(HCK)与低分子CK(LＣK)。 2.广谱细胞角蛋白PCＫ PCK标记所有单层上皮、复层上皮、移行上皮细胞,各种上皮细胞来源得良恶性肿瘤、滑膜瘤与间皮瘤等少部分间叶源性肿瘤亦可阳性、 3。高分子角蛋白HCＫ HCK主要标记复层鳞状上皮及鳞状细胞癌,ＨCK(34βE１2)常用于标记前列腺基底细胞,观察基底细胞存在与否有助于前列腺癌得诊断。 4、低分子细胞角蛋白LＣK ＬCK主要存在于单层上皮及腺上皮细胞,因此,LＣK主要用于内脏腺上皮肿瘤得诊断与鉴别诊断。 5。细胞角蛋白7 CＫ 7 CK7分子量为54ＫD。主要标记腺上皮与移行上皮细胞,卵巢、肺与乳腺上皮为CK7阳性,而结肠、前列腺与胃肠道上皮为CD７阴性,因此可用于卵巢癌(CD7+)与结肠癌(CK７—)得鉴别。 6。细胞角蛋白8 CＫ8 ＣDK8分子量为５2、５KD,主要标记非鳞状上皮,因此主要用于腺癌与导管癌得诊断,鳞癌一般不表达CＫ8。有报道肝细胞癌主要表达CＫ8与CK１8、７、细胞角蛋白10 ＣK10 CK１0分子量为56。５ＫD、主要标记上皮得基底上层与颗粒细胞层,同时CK10表达与细胞得分化程度呈正比,高分化者常阳性,主要用于鳞癌得诊断。 8。细胞角蛋白１3 CK1３ CK１3分子量为５3ＫD。标记所有得复层上皮,包括角化与非角化上皮。主要用于高分化鳞状细胞癌得诊断、 9、细胞角蛋白18 CK18 CK1８分子量为4５KD,属低分子量Ａ型细胞角蛋白。主要标记各种单层上皮包括腺上皮,而复层鳞状上皮常为阴性。主要用于腺癌得诊断。 10、细胞角蛋白19 ＣK19 CK19分子量为40ＫD,分布于各种单层上皮包括腺上皮,主要用于腺癌得诊断。肝细胞不表达ＣK1９,因此可用于肝癌与转移性腺癌得鉴别。 1１。细胞角蛋白2０ CK２0 细胞角蛋白２0(CK20)分子量为46KD,主要标记胃肠道上皮、尿道上皮与Merkel细胞、主要用于胃肠道腺癌、卵巢粘液性肿瘤与Merkel细胞癌得诊断。鳞癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌与卵巢非粘液性肿瘤均不表达CK2０。 12。上皮膜抗原Epitheliａｌ mｅｍbrａnｅ anｔｉgen, EMＡ EMA就是一组糖蛋白,广泛分布在各种正常上皮细胞膜及其肿瘤细胞中,分布范围与细胞角蛋白相似,但对内脏腺上皮得表达优于细胞角蛋白。对上皮源性肿瘤,尤其就是低分化腺癌,最好与细胞角蛋白联合应用,可提高阳性率、

平民玩家升级攻略 1-75级练级技巧分享

平民玩家升级攻略 1-75级练级技巧分享各位王者之剑的玩家们，本篇攻略为大家介绍的是游戏中的平民玩家玩法技巧攻略，平民玩家要怎么练级呢？平民玩家升级有哪些方法技巧呢？下面就为大家带来1-75级的升级技巧完全攻略，请玩家们不要错过哦！一起来了解一下吧！ 一·1~40 级这个时段其实能做的东西并不多，前20级只要跟着任务走就可以轻轻松松过副本 ，当然现在由于破甲和暴击叠加，相信精英副本变得有些难吧，但相信前期的还是可以过的，这 里要注意的是，要发挥出法师的优势，主要是上下直线跑位和上下斜线跑位，近身怪适用上下跑位 ，因为不等他们出手就可以绕开他们，然后向左右两边跑开建立远程优势，上下斜线跑位就是用来 躲开远程法怪用的，因为它们的攻击就只是一条直线。在前期连珠火球·毁灭之光重点升级，撕裂可以放后，因为前期怪的血不高，尽量速战速决，拿个过图三星。宝石选择，在早期就要用一个比较完整的宝石体系，不要在后面再改，这样的话会使属性一上一下不稳定，我的选择是十个生命，然后二三个法防，四个物防，四个绝防，其他就上绝攻和法功，攻击还是根本这个不落下。这里要说一下的，平民的钻不过，最好一天一个20钻孔，要量力而为。这里还要提一提神力的问题，不要 嫌神力贵，因为40还是有几个孔，不求神力升级，但必须要上神力，因为那可是不菲的属性。升 级不要刷星，因为后期等级拉不开太大，所以留钻才使王道 二·40~60级这个时段要做的东西就多了，试炼的出现让你再蓝钻上花销又打了，但我可以告诉你再没有55级前，我只上了蓝色的伊思符文，就一个属性，一直到55试炼出现紫色符文套装，这 样下来就省下了不少的符石和蓝钻，也为后面开紫色符文属性留下了基础，法师使用的紫色符文套装为天使套装和恶魔套装，对应法和绝这俩个属性，两者不能落下也不能偏一，稳步发展才会让 过图更轻松。在这个时段最重要的一样东西莫过于神力了，这是时段必须开始弄神力，全天的钱 大部分都用在这里，不要强求出紫，从蓝色神力弄起，神力碎片可是珍贵的东西，所以千万不要 用来换紫色神力，不然到你高级的时候只能感叹。魔魂系统在这个时段开启，但要告诉你们，千 万不要挑战白色的老板，因为这个时段你们挑战起来还是很吃力的，就从白色的小怪培养，等后 期再弄高级魔魂，这个急不来。 三·60~70 级这个时段是一个黄金时段，很多属性都开始成熟起来，当然精英副本压力还是 很大，想当初我打65级精英的时候复活还是有那几次，不过你们可以放心当你们做出 65级装备的时候，他们对你的威胁将无限降低。这个时段神力依旧关键，大部分钱注入神力，直到65级装备 成功做出一两件的时候，这时候你就要把一些资金投入魔魂中，白色老板是你们的选择，当然这 个概率还是比较低，所以天天都要投入。但最好不要超过200万投入魔魂，不要头脑发热。 四·70~75话说这个时段还真漫长，升级就像乌龟一样，我用了一个月多才上了，所以急不来。这时候只能慢慢来，73~74是没有任务的，所以在这之前要留很多钻来升级，在上75之前要好 好准备好新的神力，这个过程没什么好说，到了75后，升级就不太重要了。 平民玩家的升级方法就为大家介绍到这里呢？玩家们想要了解一下王者之剑怎么练级的话，请继续关注本站哦！ 百度攻略&口袋巴士提供 1

免疫组化超详细步骤

免疫组化超详细步骤 Prepared on 22 November 2020

免疫组化 一实验目的：分别用KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体检测肺癌组织中KRAS、NRAS、HRAS蛋白的表达情况 二实验原理:应用基本原理——抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使的（、酶、、）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和），对其进行定位、定性及定量的研究，称为或. 三实验试剂及耗材:经病理医生确认的肺癌组织切片、KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体、DAB显色试剂盒、抗原修复液、PBS、苏木素染料、1%盐酸酒精溶液、%氨水、二甲苯、等 四实验设备：切片机、4℃冰箱、显微镜、烤片机 五主要试剂配置: 缓冲液 应用液配成1000毫升溶液 应用液BNa2HPO4·配成1000毫升溶液 配制1000毫升PBS需要14毫升应用A液，36毫升应用B液，加。 枸橼酸钠抗原修复液 应用液A枸橼酸配成1000毫升溶液 应用液B柠檬酸三钠（三水合柠檬酸三钠）配成1000毫升溶液 配制500毫升抗原修复液需要9毫升应用A液，41毫升应用B液。 苏木素染液配方：苏木素2g,无水乙醇250毫升，硫酸铝蒸馏水750毫升，碘酸钠，冰醋酸20毫升。先将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝溶于蒸馏水水中。两液溶解后将其混合，加入碘酸钠，最后加入冰醋酸。 抗体说明书建议的抗体稀释度 N-Ras1:50-1:500 H-Ras1:50-1:500 K-Ras1:20-1:200 六实验步骤： 1组织常规石蜡切片厚度3-5um，防脱片捞片后晾干，放入72℃烤箱烤片2小时。 2切片脱蜡水化程序 ⑴二甲苯Ⅰ、Ⅱ脱蜡各12分钟； ⑵无水乙醇Ⅰ、Ⅱ各3分钟；（洗二甲苯） ⑶95%乙醇3分钟； ⑷85%乙醇3分钟； 3自来水漂洗3分钟，洗涤一定要充分。 4组织修复采用高温高压法：压力锅中加入，抗原修复液约1000ml，切片插入塑料架上，放入压力锅，盖上锅盖（此时不扣上压力阀）1600W预热至沸腾，扣上压力阀1300W，待高压锅阀门喷气开始计时，修复时间为2分钟。 5停止加热并用流水冲洗高压锅以降温，室温冷却。 6将抗原修复后切片置自来水中，浸泡2分钟。将样本置于内源性过氧化物酶阻断剂 3%H2O2，室温放置4分钟。（需要盖盖子）自来水洗2分钟，PBS缓冲液洗涤2分钟。

串口调试助手使用说明概要

串口调试助手使用说明 为简单明了，有些不言自明的功能不作介绍。 1 串口调试助手 1.1 设置串口参数： 串口号：1-16 波特率：600-256000，>115200 时需要硬件支持。 2 接收区／键盘发送区 2.1 接收数据 a 设置串口参数 b 如果要按十六进制形式显示接收数据，将十六进制显示选项选中。 c 点击打开/关闭串口区中的打开串口按钮。 2.2 显示接收数据的长度 因某些限制，显示接收数据的文本不能太长，所以当显示文本长度快达到 62K 时会自动将显示文本删减到 32K，此时文本可保留 32K 的字符或约 10K 的十六进制数据显示。 2.3 在键盘上发送英文字符 a在接收区/键盘发送区的输入框中用鼠标点一下。 b在键盘按下按键立刻发送。 在这里不能发送回车换行，也不能发送汉字，若要发送请在单字符串发送区发送。 3 发送数据 可以发送单字符串,多字符串(字符串序列或直接在键盘上发送英文字符。有两种发送数据格式，一种是普通的字符串,另外一种是十六进制数据即 HEX 格式数据。发送 HEX 格式数据时要在字符串输入区中输入 HEX 格式字符串，并且要将相应区内的十六进制发送选项选中。 例：HEX 格式数据字符串12 34 AB CD FF

3.1 单字符串发送区 3.1.1自动发送，自动发送周期： 此项功能可以每隔一段时间反复地自动发送输入框中的数据，点击自动发送按钮后即启动自动发送功能。 自动发送周期最大为 65535mS。 3.2 多字符串发送区 在多字符串发送区可以发送一个字符串，或者自动地、依次发送所有的字符串。 请把鼠标移到“接收区／键盘发送区”和“多字符串发送区”之间，当鼠标形状发生变化时按下鼠标器的左键不松开，然后移动鼠标，将“多字符串发送区”的宽度调宽一些，让“间隔时间”显露出来。 3.2.1发送一个字符串 a 输入字符串。 b 如果要发送 16 进制数据, 要先在字符串后的 HEX 选项框中打上对勾。 c 点击发送按钮。发送后，按钮上的数字作为当前字符串序号保存起来，此序号在自动循环发送中要用到它。 3.2.2 发送多个字符串(字符串序列 a 输入多个字符串。 b 如果要发送 16 进制数据, 将相应的 HEX 选项打上对勾。 c 输入间隔时间，最大为 65535mS。 d 点击自动循环发送按钮。 延时时间到达后发送当前字符串( 见3.2.1的步骤 c 的下一个字符串，间隔一段时间后再发送下一个。发送完毕自动从头开始继续发送。 4 打开/关闭串口区 下载后打开串口选项：选中这选项后，每次下载后会自动打开调试助手指定的串口，接收应用程序发送的数据。

《最终幻想14》1-50级迅速升级攻略技巧(二)

《最终幻想14》1-50级迅速升级攻略技巧（二）《最终幻想14》开放性测试已经5天了，想必大家还在为冲级发愁吧，小编今天给大家带来的是1-50级快速冲级小技巧，等级并不是游戏的全部，好好去享受旅途中收获的友情与快乐吧。第一期传送门《最终幻想14》1-50级迅速升级攻略技巧（一） 如果你玩的是DPS职业，你会发现FF14的排本系统也会毫无例外的让你等到抓狂。但是有些主线、日常本之类的又不得不打，那么如何利用这些等待时间，提高升级效率呢？感谢SE给我们设计了F.A.T.E.（危命任务）系统。下面来为大家介绍一下一些比较效率刷危命的地图。 1~8级：在出生主城附近打小怪 除了主线任务之外，最快的升到9级的方法就是欺负城郊的小怪了。出门之前花个几百G去拍卖行捡把比新手武器好点的家伙，找料理师买点+3%经验的食物后就可以出门走起了。这个阶段打危命的效率还不是很高（主要因为单练的打死一个怪要比较久，组队练的可以照杀），但是如果恰巧你附近有个危命刷新了，就过去顺便打了吧，注意别死。打得差不多（注意任务进度条或者计时器）就可以走了，只要你还在这张地图就一定能拿到这个危命的奖励经验的。尽量找个小怪密度大、刷新快的区域，不要停手打打打！如果脸好出的连杀奖励多的话，经验就是刷刷的涨。在出生的主城附近这样练，一般15~20分钟就能升到9级。 9~12级：主城附近一边打小怪一边刷危命 9级之后，由于经验曲线上扬，光靠打小怪升级已经不效率了。这个时候我们就需要危命任务的经验啦！ 比较推荐的办法是找准一个刷怪点打小怪，同时注意打开地图（按M）看看附近的危命是否有刷新（刷新了会有紫色的大圈显示）。一旦附近的危命刷新了，立马奔过去完成危命任务。这个时期有些危命任务奖励很高，而如果你完成评价高的话奖励更加可观。运气好的话可能打一次危命就涨了1/3级，只要打几次就可以升到13级了。 13~20级：西拉诺西亚-小麦酒港附近的危命 13~20级这个阶段的推荐的地点是小麦酒港，地图小且危命刷新密集频繁。这个地方在海之都附近的西拉诺西亚，可以从利姆萨·罗敏萨下层甲板直接坐船过去，营地内还有个主水晶。如果你决定在这刷刷刷到20级的话，不妨把这里的主水晶设为记忆点或者收藏点，万一死了或者回主城采购之类的都方便。 还有一点很重要的就是，尽量组齐8人队一起刷，这样做有几个好处：一是组队做危命有经验加成，二是人多摸的怪多最后计算的总经验就多，三是同一组的人可以互相拉传送机动性强。自己组不来就找队进，组队刷的效率不是高出一点，能组就组。 这个区域有个值得注意的危命是“黑金门事件”。这是个限时收集类的危命任务，要求玩家在指定时间内打倒指定的怪物以获取任务物品，然后交给NPC一定数量的任务物品即可完成任务。这种类型的危命任务由于在指定时间内只要不交掉任务物品，怪就会不停地大量刷新，所以方法就是尽情的杀杀杀，等倒计时走到还剩半分钟的时候再找个人（任意一个人就够了）去交掉物品