生科实验论文
生命科学综合实验2
向鹏程 1353357
Abstract:
miRNA是一类长20~22的小分子非编码RNA，它可以与靶基因mRNA3'非翻译序列结合从而促进靶基因降解或抑制翻译过程，进而抑制靶基因的表达。本实验通过6个连续实验，经过克隆以及相关蛋白和核酸分析，来进一步了解miRNA的功能，理解并掌握基因工程的基本思路和分子生物学、细胞生物学的核心技术。
Keyword：
miRNA-194；western blot；RT-PCR；DNA抽提；RNA抽提；蛋白质抽提；MTT实验；pSuper载体；shRNA；转染。
Introduction:
miRNA参与生物体的生长、发育和凋亡的调控，并在疾病发生和发展过程中起着重要作用。基于miRNA所产生的多种多样的生物学功能，近年来对miRNA的研究成为科学研究的热点之一。
克隆获得特定的miRNA是研究其功能的前提。重组质粒经测序验证后经过质粒抽提，进而转染真核细胞，基于本实验涉及的质粒pSuper带有EGFP标记，可以在荧光显微镜下观察转染效率，通过MTT实验检测microRNA-194过表达对细胞活力的影响；通过RT-PCR检测microRNA-194对其特定靶基因的表达调控；进一步在蛋白水平通过Western Blot进行验证。本综合实验microRNA-194的克隆与功能分析涉及基本的生物信息学、基本的分子生物学实验技术和基本的细胞生物学实验技术，其包含了6个连续的实验：
1.人工合成shRNA与pSuper载体的体外连接与转化；
2.质粒DNA的抽提与鉴定；重组质粒DNA序列测定；
3.转染真核细胞；MTT法检测对细胞活力的影响；
4.RNA的抽提纯化及逆转录PCR扩增目的基因；
5.Western blot对特定蛋白表达的检测；
Materials
细胞株
人胚肾293细胞
质粒和菌株
pSuper载体和E.coli DH5α
分子克隆及转染试剂
限制性内切核酸酶
连接酶试剂盒
LB固体/液体培养基
质粒抽提试剂盒
Lipofectanmin2000
MTT
DMSO
Biowit钙转试剂盒
细胞培养试剂
DMEM-HG
小牛血清
胰酶
EDTA
100*双抗
RT-PCR实验试剂
无RNA 酶水
Trizol试剂
氯仿、异丙醇、无水乙醇
甲醛变性电泳缓冲液
RNA电泳用加样缓冲液
逆转录反应试剂盒
dNTP mix、RNase Inhibitor、PCR kit试剂盒、oligo Dt
电泳缓冲液5×TBE
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western-印记法试剂
PMSF(苯甲基磺酰氟)
SDS（十二烷基磺酸钠）
丙烯酰胺
N,N,-亚甲基甲叉双丙烯酰胺
TEMED(N,N,N,N-四甲基乙烯二胺)
溴酚蓝（BPB）
碱性磷酸酶标记羊抗鼠
β-Actin
PVDF 膜
分子量标准蛋白
BCA 蛋白测定试剂盒
Content:
1、人工合成shRNA与pSuper载体的体外连接与转化
载体酶切双链shRNA的体外退火载体与shRNA的连接感受态细胞制备与转化步骤：
1)载体酶切（本实验室提供已经双酶切的质粒载体）
2)双链shRNA的体外退火
干粉oligo引物呈粉末状，离心后稀释至100μmol/μL，1XPCR缓冲液为
退火缓冲液，体系如下：
10XPCR缓冲液 5μL
正向oligo 5μL
反向oligo 5μL
ddH2O 35μL
反应体系50μL，混匀后置95℃保温10min，然后自然冷却到室温
3)载体与shRNA的连接
酶切质粒电泳→酶切质粒与退火的shRNA混合→连接反应
反应体系：shRNA 3ul
酶切质粒 2ul
solutionI 5ul
Solution 3 1ul
反应条件：16℃保温0.5小时，－20℃冷冻保存
4)感受态细胞制备与转化
阳性对照组阴性对照组
100ul感受态菌液与 100ul感受态菌液与 100ul感受态菌液与
10ul连接产物混合 1ul pSuper混合 1ul连接液
休克反应
加入kana- LB500μl
37℃复苏45min
离心后去上清，剩余200ul, 37℃培养
16h
反应条件：置42℃水浴热休克90sec，迅速取出，置于冰水浴中冷
2、质粒DNA的抽提纯化，鉴定及测序
2.1 质粒的快速提取
接种细菌，培养过夜取培养物离心，弃上清溶液悬浮，震荡静置
P2轻微颠倒混匀 P3轻微摇动，离心上清加入层析柱中，离心弃流出液，加漂洗液离心（该步骤重复一次）弃流出液，离心换套管，加洗脱液，静置离心，收集流出液nanodrop测浓度
1. 取 1-5 ml 过夜培养的菌液，加入离心管中，5,000 rpm ，5 分钟，尽量吸除上清。
2. 向留有菌体沉淀的离心管中加入 250μl 溶液 P1(5ml菌液）。使用移液器或涡
旋振荡器彻底悬浮细菌沉淀。
3. 离心管中加入 250 μl 溶液 P2（5ml菌液），温和地上下翻转 6－8 次使菌体充
分裂解。
注意：温和地混合，不要剧烈震荡，以免打断基因组 DNA ，造成提取的质粒中混有基因组 DNA 片断。
4. 向离心管中加入 350 μl 溶液 P3 （5ml菌液），立即温和地上下翻转 6–8 次，
充分混匀，5,000 rpm ，20 分钟。
5. 将上清液转移到吸附柱 CP3 中，12,000 rpm ,1分钟，弃废液，将吸附柱 CP3 放
入收集管中。每5ml菌液一个吸附柱。
6. 向吸附柱 CP3 中加入 500 μl 漂洗液 WA，12,000 rpm ，1分钟，倒掉收集管中
的废液，将吸附柱 CP3 放入收集管中。
7.向吸附柱 CP3 中加入 700 μl 漂洗液 WB，12,000 rpm ，1分钟，倒掉收集管中的
废液。
8.将吸附柱 CP3 放入收集管中, 12,000 ，离心 1 分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。
注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、 PCR 等）实验。为确保下游实验不受残留乙醇的影响，将吸附柱 CP3 开盖，置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
9. 将吸附柱 CP3 置于一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位滴加 50μl
ddH2O(60℃)，室温放置 2 分钟，12,000 ，1 分钟将质粒溶液收集到离心管中。
注意：洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序，需使用去离子水做洗脱液，并保证其 pH值在 7.0-8.5 范围内 ( 可以用 NaOH 将水的 pH 值调到此范围 ) ，pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率。且 DNA 产物应保存在 -20 ℃，以防 DNA 降解。
2.2 琼脂糖凝胶电泳检测
配胶取样加缓冲液，加样紫外照射，观察结果
3、转染真核细胞及MTT法检测对细胞活力的影响
3.1真核细胞转染（脂质体转染法）
1．铺细胞:
i.吸去培液，用PBS溶液洗一遍；
ii.加入胰蛋白酶－EDTA溶液消化，于CO2培养箱放置3-5分钟；
iii.用手掌轻敲培养瓶侧面，若细胞呈均匀的细沙粉状表明已消化完全（否则再消化片刻）；
iv.加入适量细胞培液终止消化；
v.反复吹打将细胞吹成单细胞；
vi.计数，按每60mm培养皿0.6－1.0 ×106个细胞铺2个皿。
2．细胞转染
i.配制转染混合物：
A：DMEM+DNA，混匀；B：DMEM+脂质体
ii.将等体积B液逐滴加入A液，同时轻弹管壁；
iii.将此脂质体－DNA混悬液转移至单层细胞上的培养液中;
iv.轻轻摇动培养皿混匀（注：可以观察到滴入的部位培养基瞬间会出现浑浊的橘黄色，应尽快将其混匀）
v.置于37℃、5％CO2培养箱中培养。
vi.转染后3-6小时，可换液。
3．换液：
转染后6-8小时，弃去培养皿中含有沉淀的细胞培养液；
加入新鲜培养液继续培养。
4．收获细胞：
继续培养36-48小时后收获细胞；
3.2 MTT检测细胞活性
1. 接种细胞：
i.细胞用胰酶消化成单细胞；
ii.计数；
iii.用培养液配成单细胞悬液，以每孔2x104-4x104个细胞接种到96孔板，每孔体积100ul，每组6个孔。
2. 培养细胞：细胞培养1天（根据实验目的和要求决定培养时间）。
3. 转染：处理时间48h。
4. 呈色：换液后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS
5. 终止培养：
i.孵育1小时后，小心吸弃孔内培养上清液；
ii.每孔加150ul DMSO，振荡10分钟，使结晶物充分融解。
6. 比色：
i.选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值；
ii.记录结果，以处理组为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞活力柱状图。4、RNA的抽提纯化，鉴定及RT-PCR
4.1 RNA的快速提取
1.倒出HEK293细胞培养液，1×PBS 清洗3次。
2.每 10 cm 2 （或107）培养细胞中加入 1 ml的Trizol，水平放置10min，并不时晃
动培养皿充分裂解（对于贴壁牢固的培养细胞可用细胞刮勺剥离细胞）。
3.将裂解液转移至离心管中。室温静置 5 分钟。
4.加入氯仿0.2ml，剧烈振荡，室温放置10min。12000rpm，15min，取上清。
（离心后溶液分为三相，即上层的水相、下层的有机相以及中间的变性蛋白。小心吸取上层相，绝不能有中层蛋白混入。）
5. 加入异丙醇0.5ml，振荡混匀，室温放置10min，12000rpm,10min，弃上清。
（加入50％的异丙醇沉淀核酸。异丙醇的用量应与以上所取上清液的体积相当）
6. 1ml 75％乙醇洗涤沉淀，12000rpm,5min，重复一次。
7. 空气干燥沉淀，溶解于20μl DEPC-H2O。留样2μl，其余－70℃保存备用。
4.2紫外分光光度计检测纯度和含量
1. RNA的纯度与含量检测：紫外分光光度法
高纯度RNA的A260/A280应处于1.6至1.8之间，A260与RNA浓度呈正比，1
OD = 40μg/ml RNA。RNA浓度（μg/μl）= A260 ×40×稀释倍数/1000（Nano
drop 检测仪直接读数）
2. RNA定量：加1.5 μl RNA溶液于Nanodrop仪检测，读取260nm与280nm的吸
光度数值及RNA浓度。
4.3 RNA中性琼脂糖凝胶电泳检测
1. 制备琼脂糖凝胶：首先将0.5g琼脂糖溶化于32ml水，冷却至60℃。加入5×甲
醛变性凝胶电泳缓冲液10ml，37％甲醛水溶液9ml，混合均匀并灌制胶板。
2. 取1μl RNA溶液，加入甲酰胺-上样缓冲液9μl，95℃变性5分钟，迅速冰浴冷
却，点样。
3 . 150V电泳30分钟，紫外灯下观察电泳结果。
4.4 逆转录（RT-PCR, Takara RT kit）
如下加入试剂加满至10μl
总RNA0.5μg
5X Primescript RT master mix2μl
DEPC-ddH2O Xμl
4.5 基因的普通PCR扩增
5、WESTERN BLOT检测蛋白质的表达与含量
5.1蛋白样品的制备
1.裂解：100mm培养皿/450μl裂解液；组织样品 1：5-10; 4℃，15000g离心1小时取
上清
2. 蛋白定量（Bradford法）
3. 根据样品蛋白浓度加入Laemmli 样品缓冲液，100℃加热3-5分钟，10000g离心
10分钟，取上清。
5.2 蛋白定量
BCA法
1.5ml离心管ddH2O(μl)2mg/mLBSA(μl)蛋白质终浓度
a)配置BCA工作液
依据样品数量，将试剂A和试剂B按体积比50:1配置适量BCA工作液，
并充分混匀。
b)标准品及样品的测定
A.分别取25μL上表中新鲜配置的BSA标准液和待测样品，加入到微孔
板中
B.每孔中加入200μLBCA工作液，并充分混匀
C.加盖，37℃孵育30min后冷却至室温
D.以I号管调零点，于565nm处测定各管吸光度
E.以吸光度为纵坐标，蛋白质含量为横坐标，绘制标准曲线。计算样品
蛋白质浓度。
5.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
1. 制胶
2.上样，电泳
上层胶60-80V,下层胶100-120V
5.4转膜
a.装好“三文治”夹板（在转膜缓冲液内操作，不要有气泡！）
次序: 负极-海绵-滤纸-胶-膜-滤纸-海绵-正极
b.装好转膜设备和内置冰袋
c. 300mA恒流 2h转印
5.5 总蛋白丽春红染色鉴定转膜成功与否
a. 转印结束后取出印迹膜置于丽春红染色液中，并在室温下搅动3-5min
b. 将膜放入PBS洗数次，每次1-2min，并且更换PBS
c. 根据需要将转印部位和分子量标准位置进行标记,剪膜。
5.6 膜的封闭余抗体杂交
1.封闭：
1.1 RT洗膜三次，去除SDS
1.2 加入封闭液内，RT 1-2h
2.孵育一抗：
2.1 将封闭后的杂交膜放入杂交袋中，加入稀释的一抗；
2.2 1XTBST 洗膜，10min X 3次；
3. 孵育二抗
3.1 将洗好的膜封入稀释好的二抗中，RT 1-2h；
3.2 1XTBST 洗膜，10min X 3次。
5.7 检测ECL发光法
1.工作液配制：A，B试剂1：1混合
2.发光：在暗示将杂交后印记膜放入显色盒中，将混匀的工作液平铺在二抗杂
交后的膜上，约1-5min；吸去多余显色液，用透明玻璃纸覆盖膜；在表面覆盖胶片
3.暗室曝光1-5min
4.取出胶片，显影，定影
Result and discussion
实验1 载体与质粒连接较成功。转化过程中要注意对照组的设立，因为转化结果受连接
效率和转化效率的双重影响，如果转化失败，难以分析原因。阳性对照可检验转化效率，阴性对照可防止受体菌出现抗性污染。连接载体时应该尽量延长连接时间和适当提高温度以提高连接效率。
实验2 nanodrop检测DNA浓度为645 ng/μL，AD260/AD280值为1.89，结果较好电泳结果：图中四号泳道为我和组员的电泳图。有少量DNA开环，但结果较好。
注：由于试验中全班洗脱试剂先加了WB，为验证实验wa与wb的顺序有必要，在过wb后我又加了wa洗脱以验证。结果显示，DNA洗脱出来浓度正常，但是解离曲线相差巨大。由此可见，实验过程中wa与wb的加入顺序很重要，可能与wb中的乙醇有关。
实验3转染真核细胞
DNA-脂质体转染法转染293细胞，绿色细胞为表达增强型绿色荧光蛋白的细胞，见转染较成功。
MTT 检测细胞活力
本组293 细胞转染后96孔板MTT 实验结果数据，活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT ，同时在细胞色素C 的作用下，生成蓝紫色不溶于水的Formazan ，加入过氧化氢可使细胞破坏，Formazan 生成数量减少，检测活力下降吸光度值下降。
实验4 RNA 抽提结果
电泳
吸光度
0.053空白管0.054平均0.0535
0.582未加入过氧化氢0.643平均0.61250.413
加入过氧化氢
0.443
平均0.428
左边第3泳道为我们的实验结果，三条条带从上到下分别为28s，18s的rRNA，以及5s、5.8s的rRNA 与tRNA。可见：少量RNA已经降解，可能与操作过程有关。
RNA定量
RNA浓度为275.2ng/μl OD值为1.87，较好
RT-PCR 实验失败，原因可能与实验过程中无菌操作不规范，过程中加热不充分等导致RNA降解有关。
实验5 蛋白质定量
表中折线图分别采用的是AB两行的数据，R平方分别是0.9926和0.979，标准曲线非常合理。表格中第十列为样品的吸光值。其中第三行为我的数据。由于标准
液配制过程中出现差错，导致结果不标准。且样品为稀释十倍后的稀释液。由
曲线方程可得样品浓度大致为705μg/mL，浓度较高。
Western Blot
由于洗脱过程不够，致使显影成模糊像，但可看见GAPDH中约为45KDa.转染
成功
可见gfp显影特别清晰，可见明显的条带。
Conclusion
1、成功构建了含有shRNA 的pSuper 载体，经酶切鉴定，结果显示构建正确；
2、获得了转染成功的293 细胞；
3、通过一系列实验检验并正确解释microRNA-194的预期功能。
Appendix
目的基因
第一组基因：
Homo sapiens SET domain containing (lysine methyltransferase) 8 (SETD8), transcript
variant X3, mRNA
Sequence (5'->3')Template
strand
Length Start Stop Tm GC%
Self
complementarity
Self 3'
complementarity
Forward
primer
CTTCCATCGCAGCCATTCAAC Plus2111013060.2052.38 5.00 3.00 Reverse
primer
CCGCAATAACTGCAAACGCT Minus2021019160.1150.00 5.00 2.00 Internal
oligo
Plus
Product
length
101
SETD8：a protein-lysine N-methyltransferase that monomethylates both histones and
non-histone proteins. Methylates K20 of histone H4 (H4K20me1), a specific tag for
epigenetic transcriptional repression.
第二组基因：
Homo sapiens TAF4 RNA polymerase II, TATA box binding protein (TBP)-associated
factor, 135kDa (TAF4), mRNA
Sequence (5'->3')Templ
ate
stran
d
Len
gth
Sta
rt
St
op
Tm
GC
%
Self
compleme
ntarity
Self 3'
compleme
ntarity
Forward primer AAACCTTCC
TCCTCCAAG
CG
Plus20
26
09
26
28
59.
96
55.
00
3.00 2.00
Reverse primer CTTTGTTGC
GTGGCATGT
GA
Minus20
27
26
27
07
59.
97
50.
00
4.00 2.00
Internal
oligo
Plus
Product
length
118
TAF4：Initiation of transcription by RNA polymerase II requires the activities of more than 70 polypeptides. The protein that coordinates these activities is transcription factor IID (TFIID), which binds to the core promoter to position the polymerase properly, serves as the scaffold for assembly of the remainder of the transcription complex, and acts as a channel for regulatory signals.
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使用抗生素是无效的，但是，如果感冒后并发了细菌感染，就应该及时加入抗生素进行治疗，切忌不要滥用抗生素。另外，泰诺、百服宁对感冒后期的发热、头痛和关节痛也有很好的疗效。还有许多感冒复方制剂，在选用时，可多征询医生意见。 2）流感病毒主要通过空气飞沫传播，因而传播速度极快，在短时间内会出现大批病人，本次流感病程为7天，发烧平均持续时间为3天，而发病率即无性别差异，也无城乡差异，但家庭聚集性却十分明显，符合流感的传播途径。 学生的发病率在各职业人群中是最高的，由于学生为集体人群，一旦流感流行，传播将非常迅速。此外被感染的学生还会把病毒带回家，因此学生是一个不可忽视的人群。 3）感冒和流感是不是一回事 社会上不少人，甚至某些医务人员对“感冒”的概念不清楚，存在许多误解。实际上“感冒”、流感、上感的概念是不同的，预防和治疗的方法也不完全一样。感冒和流感都是由病毒感染呼吸道引起的，但它们是两种不同的疾病。感冒是指普通感冒，而不是普通流感，是由多种病毒引起的一种呼吸道常见病，其中30—50％是由某种血清型的鼻病毒引起。普通感冒虽多发于初冬，但任何季节，如春天、夏天也可发生，但不同季节的感冒的致病病毒并非完全一样。感冒病例分布是散发性的，不引起流行。
医学生毕业论文-范文
毕业论文 题目:糖尿病与恶性心律失常关系及机制探讨
目录 摘要 (1) 1材料与方法 (2) 2结果 (3) 3讨论 (5) 结束语 (7) 参考文献 (8) 成绩评定表 (9)
摘要 目的初步探讨患者发生糖尿病与恶性心律失常的在联系及机制。 方法回顾分析239例2型糖尿病患者，根据常规心电图检测有无心律失常，分为糖尿病心律失常组66例，糖尿病无心律失常组173例，另外选取70例单纯心律失常患者作为心律失常无糖尿病组，对以上3组患者的相关临床资料、血糖、心电图检查结果进行分析比较。 结果糖尿病患者心律失常发生率为27．6％。以房性期前收缩最多见；2型糖尿病伴高血压、冠心病更易发生心律失常 (P<0.01或P<0.05；心律失常组的年龄、体重，体质指数、糖尿病病程、高血压病程、冠心病病程、收缩压、空腹胰岛素、LDL-C、胰岛素抵抗指数高于无心律失常组P<0.01或P<0.05)；糖尿病合并心律失常组和单纯心律失常对照组心律失常发生率分别为93.9％、52．9％，其中窦性心律失常、房性心律失常、交界性心律失常、传导阻滞、室性心律失常均显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0．01)。 结论2型糖尿病患者伴其他心血管疾病与单纯糖尿病无心律失常患者及单纯心血管疾病无糖尿病患者相比更易发生心律失常，可能与疾病病程长、胰岛素抵抗程度重、伴其他疾病而造成心脏血管、心肌、神经病变有关。
关键词：糖尿病；心律失常；心血管疾病
. . . . 糖尿病与心率失常的关系及机制探讨 随着我国稳步进入小康社会，人民物质生活水平不断提高，糖尿病的患病率及患病人数正不断增加，已成为影响广大人民群众身心健康的一种重要疾患。世界卫生组织(WHO)估计到2025年全球将有3.8亿人口患糖尿病。糖尿病与心血管疾病之间的相关性正在为临床所重视，但目前研究主要侧重于糖尿病与心肌、心脏血管病变之间的关系，对患者发生糖尿病与心律失常及两者之间的关联性的报道不多。本文2010-01—2012-06入住我院分泌科的2型糖尿病患者进行回顾性分析，另外选取70例心律失常无糖尿病的患者进行对照，旨在研究2型糖尿病患者心律失常发生率、心律失常类型及相关因素，并比较糖尿病对心律失常发生的影响，探讨其临床意义。 1材料与方法 1.1一般资料 住院患者309例，2型糖尿病诊断符合WH01999年诊断标准。排除其他类型糖尿病、糖尿病急性并发症、低血糖患者。高血压诊断符合2004年中国指南诊断标准。冠心病诊断是患者曾行冠状动脉造影术确诊。其中男209例，女100例，年龄26～91岁，糖尿病病程>5年82例，伴高血压97例，伴冠心病11例。根据常规心电图检查结果，将309例患者分为3组：①糖尿病心律失常组：共66例，男48例，女18例，糖尿病病程>5年34例。②糖尿病无心律失常组：共173例，男109例，女64例，糖尿病病程>5年48例。③心律失常无糖尿病组：共70例，男52，女18收集307例患者的基本资料，包括一般信息，生化指标等。 1.2方法 详细记录病史，每日心脏听诊2次以上．每次>3min，发现心律失常者及时记录床边心电图；心律失常检查方法，常规12导联心电图，动态心电图检查：采用美高仪动态心电图检测系统，导联选用cm1、cm3、cm5，患者均进行24h动态心电图检查，保持正常生活起居，记录生活日志。记录239例患者的心律和心率资料。2.3血糖测定氧化酶法，所有患者均测空腹血糖值。 1.3观察指标 309例糖尿病患者24小时平均心率为75士8.5bpm,围52～111bpm,最高心率175 bpm，最低心率35 bpm。 1.4统计学分析
论文研究方法有哪些
阅读精选（1）： 大学毕业论文的研究方法有哪些? 大学毕业论文的论文的研究方法有哪些呢？那里罗列了一些大学论文的研究方法，期望能给大家带给关于论文的研究方法问题的帮忙。 调查法是科学研究中最常用的方法之一。它是有目的、有计划、有系统地搜集有关研究对象现实状况或历史状况的材料的方法。调查方法是科学研究中常用的基本研究方法，它综合运用历史法、观察法等方u法以及谈话、问卷、个案研究、测验等科学方式，对教育现象进行有计划的、周密的和系统的了解，并对调查搜集到的超多资料进行分析、综合、比较、归纳，从而为人们带给规律性的知识。 调查法中最常用的是问卷调查法，它是以书面提出问题的方式搜集资料的一种研究方法，即调查者就调查项目编制成表式，分发或邮寄给有关人员，请示填写答案，然后回收整理、统计和研究。 论文的研究方法之实验法 实验法是透过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果联系的一种科研方法。其主要特点是：第一、主动变革性。观察与调查都是在不干预研究对象的前提下去认识研究对象，发现其中的问题。而实验却要求主动操纵实验条件，人为地改变对象的存在方式、变化过程，使它服从于科学认识的需要。第二、控制性。科学实验要求根据研究的需要，借助各种方法技术，减少或消除各种可能影响科学的无关因素的干扰，在简化、纯化的状态下认识研究对象。第三，因果性。实验以发现、确认事物之间的因果联系的有效工具和必要途径。 论文的研究方法之观察法i 观察法是指研究者根据必须的研究目的、研究提纲或观察表，用自我的感官和辅助工具去直接观察被研究对象，从而获得资料的一种方法。科学的观察具有目的性和计划性、系统性和可重复性。在科学实验和调查研究中，观察法具有如下几个方面的作用：①扩大人们的感性认识。②启发人们的思维。③导致新的发现。
实验性毕业论文范例终审稿)
实验性毕业论文范例文稿归稿存档编号：[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-
学号: 泰山医学院毕业设计（论文） 题目：蜂胶黄酮抗H2O2诱导PC12细胞 凋亡机制的研究 院（部）系 药学院 所学专业药学 年级、班级 完成人姓名 指导教师姓名 专业技术职称 2013年 6 月 18 日 论文原创性保证书 我保证所提交的论文都是自己独立完成，如有抄袭、剽窃、雷同等现象，愿承担相应后果，接受学校的处理。 专业： 班级： 签名： 20 年月日
摘 要 目的 观察蜂胶黄酮对过氧化氢（H 2O 2）诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 （PC 12）凋亡的影响及机制。 方法 培养PC 12细胞，取对数生长期细胞分为五组，空白对照组、模型组、蜂 胶黄酮高、中、低剂量组，剂量分别为200mg/L 、100 mg/L 、50 mg/L.药物预处理2h 后，孵育H 2O 2（140μmol/L）24h 诱导过氧化损伤。TUNEL 试剂盒检测原位细胞 凋亡,流式细胞仪检测细胞内活性氧水平以及细胞周期，ELISA 检测细胞内 Caspase-3蛋白含量。 结果 TUNEL 细胞凋亡染色显示, H 2O 2组与空白对照组比较染色明显加深,而蜂 胶黄酮组染色明显变浅，说明蜂胶黄酮能对抗H 2O 2诱导细胞凋亡；周期结果显示 H 2O 2组处于G0/G1细胞明显增多，而处于G2/M 、S 期细胞明显减少，细胞增殖降 低，而蜂胶黄酮增加S 期细胞促进细胞增殖；与空白对照组相比H 2O 2组活性氧水 平、细胞内Caspase-3含量明显增高，而蜂胶黄酮各剂量组活性氧水平降低，Caspase-3含量减少。 结论 蜂胶黄酮对H 2O 2诱发PC 12神经细胞凋亡有显着的抑制作用，其机制可能 其影响细胞周期、清除氧自由基、降低凋亡因子Caspase-3有关。 关键词 蜂胶黄酮；PC 12细胞；H 2O 2;Caspase-3；细胞凋亡
临床医学的毕业论文
学校 : 山东力明科技职业学院 年级专业 : 临床医学 姓名: 孙庆庆 毕业设计(论文)任务书 论文题目: 阑尾炎的治疗分析 指导教师 : 刘培和 下达时间: 2012 年 3月1 日 论文摘要: 目的阑尾炎是外科常见病，是最多见的急腹症之一。方法通过诊断、鉴别诊断及临床表现采取治疗方法。注意手术应注意的问题，及其术后护理。合理治疗，疗效满意。 目录 一资料与方法 1 病因 2 临床表现 3 辅助检查 4 临床鉴别 5 并发症 二讨论 1手术适应证及禁忌证 2手术方法选择及注意事项 治疗: 手术治疗保守治疗 3 三结果
阑尾炎是临床最常见的急腹症之一，好发于老年人及儿童，阑尾是盲肠的延续肠系膜短于阑尾，又是一个盲端。一条动脉两条静脉导致供血不足。 临床资料 40例患者均经B超、血常规、CT、X线检查及临床表现确诊。年龄12,48岁，平均28.岁。 1 病因 急性阑尾炎 (1)阑尾管腔阻塞:是急性阑尾炎最常见的病因。造成阑尾管腔阻塞的常见原因有:?淋巴组织明显增生，最常见，约占60,，多见于青年人;?粪石，约占35,;?异物、炎性狭窄、食物残渣、蛔虫、肿瘤等，较少见;?阑尾的解剖结构异常，如管腔细长，开口狭小，系膜短致阑尾卷曲。 (2)细菌入侵:阑尾管腔阻塞后，内容物排出受阻，腔内致病菌繁殖并分泌内毒素和外毒素，上皮的完整性受损，细菌侵入壁内并沿粘膜下层扩散，引起和加重感染。感染的致病菌多为肠道内的格兰阴性杆菌和厌氧菌。 (3)其他胃肠道疾病，如急性肠炎直接蔓延至阑尾。饮食因素，如经常进食高脂肪、高糖和缺乏纤维的食物者可因肠蠕动减弱、菌群改变、粪便粘稠而易形成粪石。 慢性阑尾炎大多数由急性阑尾炎转变而来，少部分开始即 呈慢性过程。部分可因阑尾腔内粪石、虫卵等异物，或阑尾扭曲、粘连。淋巴滤泡过度增生等导致阑尾管腔变窄而发生慢性炎症变化 2临床表现 急性阑尾炎 常见症状和体征 (1)常见症状
植物生理学实验论文
植物生理学实验综合论文《矿质元素对植物生长的影响》 学院： 学号： 姓名：
摘要：植物在其自养生活中，除了从土壤中吸收水分外，还必须吸收矿质元素，并将吸收的矿质元素运输到需要的部位加以同化利用，以维持其正常的生命活动。N、P、K、Ca、Mg、Fe是植物必需的大量元素，环境中这些元素的多寡必然使植物发生相应的生理生化变化并影响其生长发育而产生相应的症状。用植物无土培养法，对二叶一心得玉米幼苗进行缺素培养。配制完全营养液以及缺N、P、K、Ca、Mg 、Fe元素的缺素培养液进行无土培养，培养3周后，取出对玉米进行生理生化指标测量。测定根冠比、RGB、根系总吸收面积、活跃吸收面积、吸收面积、叶绿体色素含量。实验结果表明：在六种缺素培养下的玉米幼苗，生长情况明显差于全素培养的玉米幼苗，且各缺素症状表现在不同部位。缺素培养下，植物生长速率下降，根冠比改变，对植物生长产生了很大影响。 关键词：缺素培养缺素症状生理指标叶绿素 前言：植物对各种营养元素的需要量尽管不一样，但各种营 养元素在植物的生命代谢中各自有不同的生理功能，相互间是 同等重要和不可代替的。将植物必需元素按一定比例配成培养 液来培养植物，可使植物正常生长发育，如缺少某一必需元素， 则表现出相应的缺素症状并影响其生长速率和根冠比。 本文以N、P、K、Ca、Mg、Fe这6种植物必需的矿质元素， 利用营养液培育方法，分析使植物发生相应的生理生化并影响 其生长发育而产生相应症状。如缺乏这些元素可产生特有的缺
素症状；生长速率下降；根冠比改变；根的活力及物质、积累 受影响等，进而对生理指标测定产生一定的影响。学习无土栽 培的技术，观察N、P、K、Ca、Mg、Fe元素的缺素症状，加 强对元素的生理功能。 本组中的实验由8人共同完成，分别为完全培养Ⅰ、完全培养Ⅱ、缺 N、缺P、缺K、缺Ca、缺Mg、缺Fe。本人做完全培养Ⅰ的工作，以 下方法和操作介绍以完全培养为对照，实验结论为本组所有实验的共 同分析。 1、材料与方法： 1.1材料：玉米幼苗 1.2仪器设备： ①缺素培养： 烧杯移液管试剂瓶量筒棕色玻璃广口瓶胶塞 ②根系总吸收面积和活跃吸收面积的测定（甲烯蓝吸附法）： 分光光度计烧杯量筒移液管试管容量瓶 ③叶绿体色素含量测定（分光光度计）: 分光光度计电子天平研钵玻棒容量瓶小漏斗滴管小量筒 滤纸吸水纸擦镜纸 1.3 试剂：Ca(NO3)2 、KNO3 、MgSO4、KH2PO4、CaCl2 、NaH2PO4 、NaNO3 、 Na2SO4 、EDTA-Fe、微量元素、0.0002mol/L甲烯蓝溶液、10μg/ml甲烯蓝溶液、乙醇、丙酮、石英砂、碳酸钙粉
论文中常用的研究方法
论文中常用的研究方法 调查法 调查法是科学研究中最常用的方法之一。它是有目的、有计划、有系统地搜集有关研究对象现实状况或历史状况的材料的方法。调查方法是科学研究中常用的基本研究方法，它综合运用历史法、观察法等方法以及谈话、问卷、个案研究、测验等科学方式，对教育现象进行有计划的、周密的和系统的了解，并对调查搜集到的大量资料进行分析、综合、比较、归纳，从而为人们提供规律性的知识。 调查法中最常用的是问卷调查法，它是以书面提出问题的方式搜集资料的一种研究方法，即调查者就调查项目编制成表式，分发或邮寄给有关人员，请示填写答案，然后回收整理、统计和研究。 观察法 观察法是指研究者根据一定的研究目的、研究提纲或观察表，用自己的感官和辅助工具去直接观察被研究对象，从而获得资料的一种方法。 科学的观察具有目的性和计划性、系统性和可重复性。在科学实验和调查研究中，观察法具有如下几个方面的作用：①扩大人们的感性认识。②启发人们的思维。③导致新的发现。 实验法 实验法是通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果联系的一种科研方法。其主要特点是：第一、主动变革性。观察与调查都是在不干预研究对象的前提下去认识研究对象，发现其中的问题。而实验却要求主动操纵实验条件，人为地改变对象的存在方式、变化过程，使它服从于
科学认识的需要。第二、控制性。科学实验要求根据研究的需要，借助各种方法技术，减少或消除各种可能影响科学的无关因素的干扰，在简化、纯化的状态下认识研究对象。第三，因果性。实验以发现、确认事物之间的因果联系的有效工具和必要途径。 文献研究法 文献研究法是根据一定的研究目的或课题，通过调查文献来获得资料，从而全面地、正确地了解掌握所要研究问题的一种方法。文献研究法被子广泛用于各种学科研究中。其作用有：①能了解有关问题的历史和现状，帮助确定研究课题。②能形成关于研究对象的一般印象，有助于观察和访问。③能得到现实资料的比较资料。④有助于了解事物的全貌。 实证研究法 实证研究法是科学实践研究的一种特殊形式。其依据现有的科学理论和实践的需要，提出设计，利用科学仪器和设备，在自然条件下，通过有目的有步骤地操纵，根据观察、记录、测定与此相伴随的现象的变化来确定条件与现象之间的因果关系的活动。主要目的在于说明各种自变量与某一个因变量的关系。 定量分析法 在科学研究中，通过定量分析法可以使人们对研究对象的认识进一步精确化，以便更加科学地揭示规律，把握本质，理清关系，预测事物的发展趋势。 定性分析法
医学生全科医学论文
浅谈全科医生如何做好人性化服务 随着中国社会的发展，人口老龄化的进程加快，老年病、慢性病、非传染性疾病的防治成为了医疗界日渐重要的问题。同时随着生活水平的提高，人们对卫生服务的也要求越来越高，而高科技检测治疗手段的应用使得医疗费用不断上涨，重点三甲医院人满为患，“看病难看病贵”难以解决，医生无暇详细问诊病人，导致医患关系剑拔弩张…在应付这些棘手的问题方面，全科医疗和全科医生显示出明显的优势。人性化服务是全科医疗的核心观念和优势所在，人性化服务的概念同时也顺应了21世纪以人为本的发展趋势。如何做好人性化服务，是关乎提升全科医疗水平、推动全科医疗持续发展的重要课题。 一、加强理论知识的支持，从培养源头抓起 做好人性化服务首先是要加强服务人员的理论基础，以理论知识指导人性化服务的实践。具体包括改善全科医生培养机制，为现有工作人员提供相关理论培训等途径。 社区卫生服务在内容上集医疗、预防、保健、康复、健康教育与计划生育于一体。由此可见，全科医师不仅要具备临床医学知识，还要有预防医学、社会医学和心理学等方面的知识和技能，才能完成其功能。而社会医学，心理学，行为科学等学科知识是进行全科医学人性化服务的理论基础。只有掌握了这些知识才能有效与病人进行沟通，了解病人的身体情况及疾病的心理社会背景，真正以病人为中心地做好人性化服务。 我国目前从事社区卫生服务的人员从总体上看学历、职称结构偏低，所学专业基本为医疗或护理两类，医疗服务侧重于疾病的诊治，无论从知识结构、技术水平和服务模式都不能很好适应社区卫生服务发展和卫生改革的需求。而这些缺陷与我国独特的医学教育模式有关。建国初期，由于医学人才短缺，我国培养了大批大中专医学生，在当时解决了广大群众基本医疗问题，但随着社会卫生水平和人们健康意识的提高，以前的知识结构和服务技能无法适应现在社区服务六位一体的要求，也是导致基层医院就医率不高的原因之一。 我国全科医学是一门新兴学科。目前全科医师的培养主要是针对基层卫生技术人员进行短期全科医学概念及理论培训。这种短期培养没有充分的时间让医师掌握心理、社会学及预防医学方面知识，而在从业后全科从业人员也缺乏良好的途径继续进行预防心理学等方面的学习。因此要加强全科医生的人性化服务水平，就要从培养的源头上抓起，加大对相关理论知识的指导教育。人才培养不是一蹴而就的，首先在医学生课程设置中应加强对心理社会学、行为科学及预防医学等专业课程的重视力度，加强医学院校的全科医学教育，同时采取措施鼓励医学本科毕业生进入全科医学队伍，提高全科医师的地位及收入等，还可以参照其他国家理发，规定医学本科毕业后到社区工作一定年限后才能从事专科等。其次在平时工作过程中，应安排时间对现有从业人员进行心理学等相关理论知识的培训，以提高医师综合素质，为良好的人性化服务奠定基础。 二、从细节做起，切实体会病人的喜怒哀乐 全科医生与我们日常所了解的专科医生之间的区别在于：全科医生的工作特点可以总结为：量大，面广，以人为主，与人文社科知识紧密相关。具体说来，全科医生重点以社区为服务对象，提供高素质的医疗服务以及人性化的医疗保障，给予病人持续性、综合性的照顾。 也就是说，全科医生的工作是以社区为范围，以家庭为单位，以病人为中心。他们更注重的是人，而不像专科医师一样，相比更侧重于疾病本身；在对病人进行康复治疗的时候，他们更加注重病人的权利，全科医生必须全面了解每个就诊病人家庭、社会各方各面的详细信息，以便能更好了解造成病疾的原因，采取更加全面且有针对性的治疗方案。 作为专科医生，则要坐在医院的门诊大楼里等待病人“登门造访”。由于就诊患者数量多，流动性大，势必造成医师无法向全科医生那样了解每个病人，因此也就决定了他们不可能过多的重视病人的社会属性，而只能把重点放在病人生物属性的疾病上面，也就是说他们的任务就是尽可能把生理的病疾医治好。
实验型论文的一般格式
实验型论文的一般格式 前置部分 主体部分 前言 正文 结论 一、题目 1、题名全文内容的高度概括，是读者了解全文的窗口 写作原则 突出主题突出具有创新和特色之处，使读者一目了然 准确 具体确切恰如其分地反映研究的范围和深度，从题目可大体了解内容 忌：抽象、笼统、小题大做等 题目太大、范围过宽属于小题大做，要做到范围明确，内容具体间断精炼（一般20字左右，不超过30字） 语言必须高度概括，反复推敲，简明扼要 标题中少用“……的探讨”、“……的研究”、“……的观察”等非特定词 尽量不用“漫谈”、“浅谈”、“试论”等没有特色的词 检索性强 2、拟题方法 包括三要素 三要素：研究方法、研究对象、研究目的 如《遥测法研究户外冬眠刺猬体温变化》 片名拟题注意事项 避免使用非公认的缩略词 数字一般用阿拉伯数字，但作为名词或形容词除外。如“十二指场”“12指肠” …… 二、作者 署名是学术论文的必要组成部分 包括姓名、单位、所在地、邮编等避免同名同姓 署名的意义 1、署名事关学术和法律责任、着作权、版权等 2、便于读者作者通信 3、对作者劳动的肯定 4、作为检索途径满足文献检索的需要 署名的条件 自始自终参与论文全部或部分研究工作和写作过程，能对论文内容复责并具有答辩能力 合作完成成果，按照贡献的大小顺序署名。署名人对本人所贡献部分负责，发表前应由本人审阅并署名区别具有实质性贡献的作者 署名的形式和方法 集体署名 第一作者、并列第一作者 个人署名 署名的方法因不同杂志二有区别 署名注意事项
1、署名不应太多 三、摘要 对论文内容不加注释和评论的高度概括和简练的陈述 作用 快速查询和阅读 便于文摘检索刊物的编制和应用 便于计算机文献数据库的建立和检索 对论文的初步评价 要求 完整性包含研究目的、内容、方法、结果等 自明性 独立性 简洁性 类型与写法 1、报道性摘要（资料性、信息性摘要） 按照研究目的、方法、结果和结论顺序写作 2、指示性摘要 3、报道_指示性摘要 4、结构式摘要 写摘要注意事项 在全文完稿后，仔细思考后写 如实、高度浓缩 不要简单重复题目已有的信息，不要将本专业已成常识的内容写进摘呀 一般用第三人称城市，“对……进行了研究”，不用“本人”“我们”等，表客观 不分段 不用公式 四、关键词 特点 1、代表性 一组关键词变成浓缩的摘要 2、检索性 3、专指性 关键词意义单一，指向性和特异性强 各个关键词都从一个侧面反映论文的中心内容，读者可从不同角度了解论文的内容通过关键词查阅到所需文献，而少检出不需要的文献 4、关键性 作用 1、便于读者快速了解论文主题和中心内容 2、便于编制索引 3、便于二次文献检索刊物和计算机数据库收录和检出文献 适应信息时代的需要 标明关键词利于论文的收录率、检出率 标引反方法 1、根据论文主题 数量适当，过多或过失影响文献的检出率和检准率 注意事项 1、表示化学物质的用名称不用结构式
临床医学教育本科毕业论文范文
临床医学教育本科毕业论文范文 摘要： 美国的医学教育是成功医学教育典范，值得我们研究学习。本文通过对中美临床医学教育的比较，分析了医学教育历史、入学条件、课程教学方式和培养目标等方面的异同，总结了几点值得我国临床医学教育借鉴的成功经验。 关键词：中国美国临床医学教育比较启示 1 中国和美国医学教育的差异 1.1 医学院校医学史 我国的中医文化源远流长，自文献记载距今有2000 多年历史，而西医发展不到200 年。我国最早的西医学校创始于1866年，名为博济医学堂（现中山大学医学院）。50年间，相继成立了几所医学院校。1912 年成立国立北京医学专门学校（现北京大学医学部）。1914 年创办湘雅医学专门学校（现中南大学湘雅医学院）。1917年创办私立北平协和医学院（现北京协和医学院—清华大学医学部）。1927年成立国立中央大学医学院（现复旦大学上海医学院）。自改革开放后，各大医学院校如雨后春笋般在全国各个省份成立。西医起源也有2000 多年的历史，1722 年美国第一家军队医院在路易斯安那州成立，美国医学教育也有 250年历史，1765年第一所宾夕法尼亚大学医学院校成立，1910 年，教育学家弗莱克斯勒展开了一场教育革新。经过百年发展，现已成为世界医学教育典范。 1.2 入学条件 1.3 医学教育学制 培养一个美国医师需要很长的时间，首先普通本科四年，再进入医学院校完成四年学习，最后是住院医师培训和专科医师培训。医学生从医学院毕业后有资格参加执业医师考试，获取普通医师执照。想成为一名专科医师，还需要不少于八年的专科医生培训。也就是
说，在美国想要成为一名专科医生至少需要12 年。在中国，高等医学教育的学制种类较多。1988年，我国开始实施7 年制高等医学教育，将学制进一步规范为3、5、7、8 年制。[2] 本科生毕业后一年可参加执业医师资格证考试，如果不继续深造， 5 年学习就可以培养一名医生。 1.4 课程学习 1.4.1 教材美国的医学教材相比中国的教材厚很多，我们不是说书越厚越好，厚书是内容和逻辑的结合，是为了知其然知其所以然，更好的让学生理解，更偏向过程与结果，体现故事性。而中国的医学教材与美国相比较薄，只偏向结果，让学生只知其然不知所以然。更注重的是记忆而不是理解。 1.4.2 课程一方面，美国课程更重视实验教学，他们认为单纯的实验教学比理论教学更重要，通常可以在实验课上见到顶尖老师、教授的身影。中国医学院校的实验课与理论课比例正好相反，①实验课大部分都是资历较轻的老师授课; ②实验课课时数少于理论课; ③实验课课时费也低于理论课。一方面，美国医学课程更加注重医学人文教育，每学年都开设有人文医学系列课程，如医患关系、医学社会学等。从多学科多角度，让学生掌握与病人沟通的技巧，为将来成为一名有担当有正确价值观的医生打下良好的基础。另一方面，美国医学教育的课程设置非常注重课程的交叉与融合，基础课程与实践实习课程相综合，将一、二学年的基础学科教学同临床联系起来，并在三、四学年的临床见习、实习中继续强化基础学科教育。 1.5 培养目标 美国的医学人才培养分两部分，一是培养临床医生， 4 年的医学博士全面学习疾病的诊断与治疗，目标就是成为一名合格的医生。学习过程中，他们不需要做科研工作，也不用完成科研论文; 二是对医学科学研究感兴趣的学生，他们可以选择继续攻读科研类博士。美国允许学生在修完两年医学博士课程，转修科研类课程，完成学位论文后，可以继续完成医学博士课程[3] 。而中国的培养目标相对 一致，硕士、博士、各级医生在做好临床工作的同时，还需要兼顾科学研究。 2 美国医学教育对中国医学教育的启示
植物生理学实验期末论文
植物生理学实验（设计）论文 题目探究不同pH对菠菜叶气孔开度的影响 班级 2012及生物本科班 队员符广勇赵英松罗昌琴聂艳梅王伟李茂吉指导老师胥老师 完成日期 2014年12月27日
目录 摘要: (i) 引言 (1) 1. 研究材料及方法 (2) 1.1仪器药品 (2) 1.1.1研究仪器 (2) 1.1.2研究药品 (2) 1.2研究材料 (2) 1.3研究方法 (2) 2. 结果与讨论 (2) 2.1 结果记录 (2) 2.1.1 结果与讨论一 (3) 2.1.2 结果与讨论二 (4) 3. 结论 (5) 4. 结果分析 (5) 参考文献 (6) 致谢 (7) 附录 (8)
探究不同pH对菠菜叶气孔开度的影响作者姓名：符广勇赵英松罗昌琴聂艳梅王伟李茂吉 专业班级：2012级生物本科班指导教师：胥献宇 摘要:为了探讨pH是否对气孔开度有所影响，配置了柠檬酸—磷酸缓冲液pH为3 4 5 6 7 五个梯度，撕取菠菜叶下表皮在光照培养箱中25℃培养1小时显微镜测得各个pH处理的气孔开度，结果表明：气孔纵径在pH=3—4有所上升。在pH=4—5下降，pH=5—6又上升，pH=6—7时有所下降。横径在pH=3—7慢慢的下降的趋势。由此可见气孔的开闭随着pH的升高慢慢关闭。因此pH会影响气孔的开闭。 关键词: pH ；气孔开度；菠菜
引言 菠菜（Spinacia oleracea L.）又名波斯菜、赤根菜、鹦鹉菜等，属苋科藜亚科菠菜属，一年生草本植物。植物高可达1米，根圆锥状，带红色，较少为白色，叶戟形至卵形，鲜绿色，全缘或有少数牙齿状裂片。 影响气孔开度的因素有很多。为此有学者提出气孔运动的机理有K+积累学说、苹果酸代谢学说、淀粉与糖转化学说。认为影响气孔开放的渗透物质代谢有三条途径：1、伴随着K+的进入，苹果酸和Cl-也不断地进入，以维持电中性;2、淀粉水解或通过卡尔文循环形成的中间产物转变为蔗糖，同时也形成苹果酸；3、叶肉细胞产生的蔗糖，从之外提进入保卫细胞。影响气孔的因素有蓝光、温度、CO2、脱落酸。在一定程度上影响着气孔的开闭[1]。 以上的气孔运动机理中K+积累学说中提到pH的升高会会驱动K离子从表皮细胞经过保卫细胞质膜上的钾通道进入保卫细胞，在进入液泡。脱落酸会引起胞质pH升高，激活外向钾离子通道，导致钾离子从保卫细胞流出，引起保卫细胞丧失膨压，气孔变关闭。由此可见pH会对气孔的开度可能会有一定的影响。 目前：此方面的研究较少，田秀红等[2]研究表明植物经历逆境胁迫时，木质部汁液pH常常升高。pH升高本身可诱导气孔开放，导致过度失水，对植物的生存具有危害作用。然而，木质部汁液pH升高与植物中普遍存在的低浓度ABA交互作用，却使气孔开度减小，蒸腾速率下降。张华等[3]干旱胁迫后pH升高很可能通过改变组织和器官之间ABA含量比例,使叶片ABA达到足够浓度,从而调节气孔关闭,调控蒸腾速率。杨毅[4]以蚕豆为实验材料，运用细胞压力探针技术在不同pH值下对单个保卫细胞的弹性模量进行了直接测定，发现：(1)保卫细胞壁在相同pH(4.50)下随着气孔开度的增加(5.55μm增加到15.20μm)，弹性模量发生了相同趋势的变化(20.95bar增加到87.78bar)。(2)相似的气孔开度(8.43μm与9.76μm)下随着保卫细胞壁的酸化(pH8.60到pH6.50)，弹性模量有明显的下降(从70.98bar下降为56.90bar)，由此可见pH会对气孔的开度有影响。王晓黎等[5],以黄瓜品种'中农203'(Cucumis sativus L.cv.Zhongnong 203)幼苗为试材,采用SA溶液根部施用和子叶表皮浸泡两种方式,显微观测了不同外源水杨酸(Salicylic acid,SA)溶液处理对其子叶表皮气孔开度的影响,溶液低pH值,增强了SA对气孔开度的抑制作用,且SA浓度越高作用越明显;0.1 mmol/L SA处理后,pH为8、7、6溶液的气孔开度抑制率分别为90.2%、93.8%和96.3%,即SA溶液对气孔开度的抑制率随着溶液pH降低而升
定量分析方法重点整理
v1.0 可编辑可修改 1、公共管理：是一门研究公共组织尤其是政府组织的管理活动及其规律的学科。公共管理研究的内容：①公共组织的结构、功能、环境和运行机制；②行政管理体制改革、中央与地方的关系；③市场经济条件下政府的职能与作用、政府与市场、政府与企业、政府与社会的关系；④公共人力资源的开发与利用；⑤公共管理中的规划、计划与决策、监督与控制，公共项目评估，行政立法、司法和执法；⑥公共信息管理和咨询服务；⑦财政管理、教育管理、科技管理和文化管理。 2、定量分析方法的主要内容 系统模型与系统分析、线性回归预测分析、社会调查程序与方法、统计分析方法、线性回归预测分析、马尔可夫预测方法、投入产出分析方法、最优化方法（线性规划、运输问题、动态规划、资源分配问题）、评价分析方法、层次分析法、对策论、风险型决策与多目标决策、管理系统模拟、排队论、系统动力学方法、网络计划方法 3、为什么在系统分析中广泛使用系统模型而不是真实系统进行分析人类认识和改造客观世界的研究方法，一般有实验法和模型法。实验法是通过对客观事物本身直接进行科学实验来进行研究的，因此局限性比较大。公共管理问题大多是难以通过实验法直接进行研究，广泛使用系统模型还基于以下五个方面的考虑：①系统开发的需要只能通过建造模型来对系统或体制的性能进行预测；②经济上的考虑对复杂的社会经济系统直接进行实验，成本十分昂贵；③安全性、稳定性上的考虑对有些问题通过直接实验进行分析，往往缺乏安全性和稳定性，甚至根本不允许；④时间上的考虑使用系统模型很快就可得到分析结果；⑤系统模型容易操作，分析结果易于理解 4、系统分析的要点和步骤 要点(1)任务的对象是什么即要干什么(what)； (2)这个任务何以需要即为什么这样干(why)； (3)它在什么时候和什么样的情况下使用即何时干(when)； (4)使用的场所在哪里即在何处干(where)； (5)是以谁为对象的系统即谁来干(who)； (6)怎样才能解决问题即如何干(how)。步骤 (1)明确问题与确定目标。当一个有待研究分析的问题确定以后，首先要对问题进行系统的合乎逻辑的阐述，其目的在于确定目标，说明问题的重点与范围，以便进行分析研究。 (2)搜集资料，探索可行方案。在问题明确以后，就要拟定解决问题的大纲和决定分析方法，然后依据已搜集的有关资料找出其中的相互关系，寻求解决问题的各种可行方案。 (3)建立模型。为便于对各种可行方案进行分析，应建立各种模型，借助模型预测每一方案可能产生的结果，并根据其结果定性或定量分析各方案的优劣与价值。(4)综合评价。利用模型和其他资料所获得的结果，对各种方案进行定性与定量相结合的综合分析，显示出每一种方案的利弊得失和效益成本，同时考虑到各种有关因素，如政治、经济、军事、科技、环境等，以获得对所有可行方案的综合评价和结论。（5）检验与核实。 5、简述霍尔三维结构与切克兰德“调查学习”模式之间的区别。 1）霍尔三维结构将系统的整个管理过程分为前后紧密相连的六个阶段和七个步骤，并同时考虑到为完成这些阶段和步骤的工作所需的各种专业管理知识。三维结构由时间维、逻辑维、知识维组成。霍尔三维结构适用于良结构系统，即偏重工程、机理明显的物理型的硬系统。2）切克兰德“调查学习”模式的核心不是寻求“最优化”，而是“调查、比较”或者说是“学习”，从模型和现状比较中，学习改善现存系统的途径，其目的是求得可行的满意解。适用于不良结构系统，偏重社会、机理尚不清楚的生物型的软系统。3）处理对象不同：前者为技术系统、人造系统，后者为有人参与的系统；4）处理的问题不同：前者为明确、良结构，后者为不明确，不良结构；5）处理的方法不同：前者为定量模型，定量方法，后者采用概念模型，定性方法；6）价值观不同：前者为一元的，要求优化，有明确的好结果（系统）出现，后者为多元的，满意解，系统有好的变化或者从中学到了某些东西。 6、定性分析的方法：目标--手段分析法、因果分析法、KJ 分析法 7、社会调查的含义：是人们有意识、有目的地通过对社会现象的考察、了解和分析，来认识社会生活的本质机器发展规律的实践活动和认识活动。 基本原则①客观性原则，核心是实事求是，这是社会调查
全科医学论文
浅谈全科医学 通过对全科医学的学习，我对其有了深刻的认识，全科医学有十大基本原则，分别是基础医疗保健、人性化照顾、综合性照顾、持续性照顾、协调性照顾、可及性照顾、个体-群体一体化照顾、以生物-心理-社会模式为诊治理论基础、以预防为导向的照顾、团队合作的工作方式、其中我最感兴趣的是以生物-心理-社会模式和团队合作的工作方式，所以我就重点说说这两个原则吧。 全科医学的整体论，系统论思维，突破了传统的专科医学对的疾病的狭窄的还原论方法，强调把病人看做社会和自然系统中的一部分，从身体，心理，社会和文化等因素来观察，认识和处理健康问题，而不是单纯的个体-疾病。 生物-心理-社会的医学模式是在1977年的《科学》杂志首先由美国罗彻斯特大学医学院精神病学和内科教授恩格尔（O．L．Engel）提出的，他指出：生物医学模式关注导致疾病的生物化学因素，而忽视社会、心理的维度，是一个简化的、近似的观点。 恩格尔提出：“为理解疾病的决定因素，以及达到合理的治疗和卫生保健模式，医学模式必须考虑到病人、病人生活在其中的环境以及由社会设计来对付疾病的破坏作用的补充系统，即医生的作用和卫生保健制度”。 生物-心理-社会医学模式实现了对生物医学模式的超越。生物-心理-社会医学模式的提出是以人类的疾病谱以及健康观念的变化为依据的。
这一模式认为导致人类疾病的不只是生物因素，而且还有社会因素和心理因素，因而治疗方法除了传统的生物学方法以外，还应当包括社会科学法和心理学方法。 生物-心理-社会医学模式的研究对象不仅是自然的人, 还要研究人的状态和人所处的环境。医学必须建立在人与其生存环境的和谐适应基础上, 改善人的生存状态, 而不仅仅是简单的治病、防病和促进健康. 这也就是这种模式的最初定义，而它是在以下背景产生的： （一）疾病谱和死因谱的改变凸显心理和社会因素的作用人类的疾病与死因结构发生了改变。 世界各国先后出现了以心脏病、脑血管病、恶性肿瘤占据疾病谱和死因谱主要位置的变化趋势。例如，影响我国人群健康的主要疾病，也已由过去的传染病为主而逐步转变为以非传染病为主。 （二）对保护健康和防治疾病的认识深化 随着人们对保护健康、防治疾病的经验积累，认识也有了深刻的变化。对人的属性的认识，由生物自然人上升到社会经济人。对疾病的发生和变化，由生物层次深入到心理与社会层次。对健康的思维也日趋全方位、多层次。 （三）医学科学发展的社会化趋势 医学发展史证明，医学的发展与社会发展息息相关。人类保护健康和防治疾病。已经不单是个人的活动，而成为整个社会性活动。只有动员全社会力量，保持健康、防治疾病才能奏效。
实验性毕业论文范例修订稿
实验性毕业论文范例 WEIHUA system office room 【WEIHUA 16H-WEIHUA WEIHUA8Q8-
学号: 泰山医学院毕业设计（论文）题目：蜂胶黄酮抗H2O2诱导PC12细胞 凋亡机制的研究 院（部）系药学院 所学专业药学 年级、班级 完成人姓名 指导教师姓名 专业技术职称 2013年 6 月 18 日 论文原创性保证书 我保证所提交的论文都是自己独立完成，如有抄袭、剽窃、雷同等现象，愿承担相应后果，接受学校的处理。 专业： 班级： 签名： 20 年月日
摘要 目的观察蜂胶黄酮对过氧化氢（H2O2）诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12）凋亡的影响及机制。 方法培养PC12细胞，取对数生长期细胞分为五组，空白对照组、模型组、蜂胶黄酮高、中、低剂量组，剂量分别为200mg/L、100 mg/L、50 mg/L.药物预处理2h后，孵育 H 2O 2 （140μmol/L）24h诱导过氧化损伤。TUNEL试剂盒检测原位细胞凋亡,流式细胞仪检测 细胞内活性氧水平以及细胞周期，ELISA检测细胞内Caspase-3蛋白含量。 结果TUNEL细胞凋亡染色显示, H2O2组与空白对照组比较染色明显加深,而蜂胶黄酮组染色明显变浅，说明蜂胶黄酮能对抗H2O2诱导细胞凋亡；周期结果显示H2O2组处于 G0/G1细胞明显增多，而处于G2/M、S期细胞明显减少，细胞增殖降低，而蜂胶黄酮增加 S期细胞促进细胞增殖；与空白对照组相比H 2O 2 组活性氧水平、细胞内Caspase-3含量明 显增高，而蜂胶黄酮各剂量组活性氧水平降低，Caspase-3含量减少。 结论蜂胶黄酮对H2O2诱发PC12神经细胞凋亡有显着的抑制作用，其机制可能其影响细胞周期、清除氧自由基、降低凋亡因子Caspase-3有关。 关键词蜂胶黄酮；PC12细胞；H2O2;Caspase-3；细胞凋亡
植物生理学实验报告
首都师范大学生命科学学院实验报告 课程名称植物生理学实验成绩 姓名苗雪鹏班级 1班学号 1080800021 实验题目实验三植物体中N、P、K主要养分的速测 【实验目的】 1．了解植物体内N、P、K测定的意义和方法 2．掌握如何测定植物体中N、P、K的实验技能 【实验原理】 植物体主要由C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S、Fe等十几种元素组成，除 此以外还包括Ca、Zn、Mn、B、Mo，但需要量较少。 在通常条件下，植物利用太阳光能，从空气中获得C，从水中获得氢和氧， 而N、P、K等元素则是来源土壤肥力。在栽培过程中，能够知道植物的需要和 土壤内N、P、K变动的情况，对考虑施肥措施是有帮助的，因此测定土壤及植 物体内的N、P、K是很重要的。 硝态N测定：硝态N是硝酸的阴离子（NO 3 -），它是强氧化剂，所以鉴定N- 离子几乎都用氧化反应，用二苯胺（C 6H 5 ） 2 NH的方法，这个方法的原理是在NO 3 - 存在时二苯胺被硝酸氧化而显蓝色。 有效P和无机P测定：P与钼酸铵反应生成磷钼酸铵，然后以氧化亚锡作为还原剂时，使磷钼酸铵还原为“磷钼兰”（低价钼化合物混合物）溶液呈兰色。此法能测土壤有效P，过磷酸钙中有效P和植物体内的无机磷。 速效K的测定：四苯硼钠〔NaB(C 6H 5 ) 4 〕与钾离子生成白色沉淀为四苯硼酸 钾〔KB(C 6H 5 ) 4 〕 【实验材料和试剂】 在完全培养液、缺乏N、P、K、Fe的营养液中培养四周的玉米苗 硝态氮试剂、磷试剂Ⅰ、磷试剂Ⅱ、K试剂、标准溶液1、5、10、20、40ppm 【实验方法】 1．植物组织浸提液制备 将植物剪成小块，称取1g，迅速倒入已沸腾的蒸馏水（约10ml）烧杯中，用毛细玻璃棒经常搅动，小火煮十分钟，煮液倒入10ml容量瓶中，另加少量蒸馏水，继续小火煮植物材料5分钟，浸提液倒入上述容量瓶内，再以少量蒸馏水洗植物材料，使最后容量为10ml。 植物组织在计算含量时要乘以10，因每克鲜组织稀释了10倍。 2．硝态N测定 在白瓷板的凹内分别滴入1、5、10、20、40ppm的混合标准液1滴，然后将待测液（植物浸提液）分别滴入其他凹内，最后每个凹内各加5滴二苯胺硫酸溶
定量分析论文
定量分析论文 题目：逐步回归的统计方法分析 学院：数信学院 班级：管理10 姓名：李树焕 学号：1011200137 成绩： 二〇一二年八月
摘要：篮球在现代大学生看来是一种日常生活中不可或缺的一门运动，简简单单的投篮 活动可说是不存在什么技术性，而篮球比赛则不同，它不单要求技术更需注重团队的意识以及团队的战术。唯有全面了解团队的特点，才能制定战术，才能克敌制胜。现代篮球比赛的特点要求在攻守激烈对抗中, 快速准确的完成动作。技术动作要求重全面、求扎实、讲速度、要准确。许多专家认为, 大学生篮球运动员的篮球基本功差是其存在的主要问题, 训练应狠抓基本功的练习, 从跑、跳、投的细微入手。战术的安排应简单、实用。 关键词：CUBA联赛；技术统计；逐步回归；回归方程 正文： 一、研究对象与方法 通过网上百度搜索和资料查询，收集到了第三届CUBA联赛分区赛的全部技术统计资料（31支男队、20支女队），经过整理和筛选，剔除无效统计的资料，得到真实的125场比赛的统计资料（男73场、女52场），然后利用SPSS软件，应用逐步回归的统计方法对数进行必要的处理。 二、研究结果 1、技术统计数据的整理 （1）计算每支球队在全部比赛中罚球、盖帽、前场篮板、后场篮板、抢断、三分球命中率、助攻、两分球命中率、快攻、失误、犯规、得分、失分、得失分率14个指标的平均值，建立数据库。 （2）计算全部球队在分区赛中14个指标的均值。见表一、表二。
2、建立回归方程 根据统计学中简单相关的方法，对数据进行处理，发现X1~X11自变量与因变量Y 之间都有一定的相关性，并且各个自变量之间也相互相关，变量之间相互作用、相互影响，导致单个自变量与因变量的相关性较低，从而影响了数据的准确性。 对于这种情况，则需要运用逐步回归的统计方法，它是在剔除自变量间相互作用、相互影响的前提下，计算各个自变量X与因变量Y之间的相关性，并在此基础上，建立对因变量Y有最大影响的变量子集的回归方程。根据实际情况和客观规律，确认X1~X11的11个指标为自变量，得失分率Y为因变量。应用逐步回归方法进行统计学分析,得到回归方程: 男队：Y=0.012 X8 + 0.076 X9 – 0.002 X2 – 0.049 X10 + 0.208 女队：Y=0.009 X8 + 0.073X9 + 0.059 复相关系数代表自变量X与因变量Y之间的相关程度.它越靠近1，说明两者相关程度越高,男女队两个回归方程的复相关系数均在0.9以上，男队复相关系数：R=0.930,女队复相关系数：R=0.927,说明此方程的建立是非常稳定。另外，从公式可看出，11个自变量中，与男队成绩高度相关的四个自变量：2分球命中率、场均快攻数、盖帽、失误，与女队成绩相关性较大的两个自变量：2分球命中率、场均快攻数。 3、对回归方程进行分析 回归计算结果显示，2分球命中率X8在两个公式中均出现，并且，其系数在两个公式中最大，说明2分球命中率对因变量Y的影响显著，2分球是球队的主要得分手段，对球队的取胜至关重要，其中球队之间的差距也主要体现在2分球命中率上；而三分球命中率却未在公式中体现，结合表1、表2，三分球命中率的均值和均方差：男队均值0.257，均方差6.09E-02，女队均值0.239，均方差5.155E-02；由此可知，运动员的三分球命中率很低，且三分球命中率的均方差都较低，说明运动员的远投能力普遍较差，三分球难以成为球队的得分支柱，对球队的胜负影响不显著，故均未在回归方程中显现，