超敏肌钙蛋白T(HS-TNT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)浓度监测在诊断急性心肌梗死(AMI)中的作用

肌酸激酶同工酶——MB评估

肌酸激酶同工酶——MB评估 上海仁济医院检验科 肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）是由M和B亚基构成的杂化型二聚体，主要存在于心肌细胞的外浆层，是心肌酶谱中最有特异性的酶，从80年代起公认为心肌酶学诊断的“金标准”，应用于急性心肌梗塞（AMI）的早期诊断[1，2]1979年Gerhardt[3]等人首次报道用免疫抑制原理测定CK同工酶，免疫抑制法以其快速、灵敏、定量且可进行自动分析等优点适合常规检测，随着方法与试剂不断改进与完善，1986年国外已有试剂盒供应，但价格昂贵；最近国内研制成功免疫抑制法测CK-MB的试剂盒，本文旨在对该试剂盒的特性作一评估。 材料和方法 一、标本来源 分正常组，AMI组和非AMI组，非常人血清来自体检健康人员，计30例，AMI 组53例，系仁济医院心内科病房已确诊为AMI者，非AMI组系心内科及其它科门诊病人，因胸痛、心率失常等初诊疑拟AMI，后经系列观察和酶学检查证实不是AMI患者，共20例。 血标本留取后及时分离血清检测或将检测血清置于-20度冰箱保存至测定。 二、试剂 1. 免疫抑制法检测CK-MB试剂盒：上海北加生化试剂有限公司产品 （1）R1：含CK-MB抗体的咪唑缓冲液 （羊抗人CK-M多克隆抗体抑制剂>2000U/L，100mmol/L的咪唑缓冲液成 pH6.7内含葡萄糖20mmol/L，醋酸镁10mmol/L，EDTA 2mmol/L）（2）R2(A)：酶干粉。 （AMP 5mmol/L，磷酸肌酸30mmol/L，五磷酸二腺苷10mmol/L，NADP 2mmol/L，V-乙腺半胱氨酸20mmol/L，已糖激酶≥2500U/L，G6PDH≥ 500U/L，ADP 2mmol/L）。

心肌肌钙蛋白I(医学参照)

心肌肌钙蛋白I（cTnI） 参考范围： ＜0.1nm/mL 排除心肌损伤 0.1~0.5ng/mL 心肌损伤低风险，需结合多种诊断结果及临床症状综合判定 0.5~25ng/mL 心肌损伤高风险 ＞25ng/mL 严重心肌损伤 临床意义： CTnI是心肌损伤的特异指标。心肌梗死发生后4~8h血清中cTnI水平即可升高，12~14h达到峰值，升高持续时间较长，可达6~10天。CTnI的诊断特异性优于Mb和CK-MB，可用于评价不稳定心绞痛，cTnI水平升高预示有较高的短期死亡危险性，连续监测cTnI有助于判断血栓溶解和心肌再灌注。 在AMI时，所有生化标志物的敏感度都与时间有关。对于胸痛发作4h以内的患者，首先应测定Mb水平；3h后得到的血液标本，应同时评价Mb和人cTnI。所有阳性结果，都可确认为AMI；所有阴性结果都可以排除心肌损伤，当结果不一致时，需要进一步联合检查胸痛发作后9h，此时所有的生化标志物都达到最大的敏感度。 D-二聚体（D-Dimer） 参考范围 ＜500ng/ml 可以排除 ＞500ng/ml 提示出现高凝状态，并结合临床 临床意义 1.是交联蛋白降解中的一个特异性产物，在深静脉恤衫、肺栓塞、弥漫性血管内凝血、严重肝炎、 肺栓塞等疾病中升高。 2.也可作为溶栓治疗的观察指标 3.陈旧性血栓患者D-二聚体并不升高 4.凡有血块形成的出血，本试验均可呈阳性，故其特异性较低。 氨基末端脑钠肽前体（BNP） 参考范围 检测结果＜300pg/ml可排除心衰

50岁以下＞450pg/ml提示心衰的可能性较大 50岁-75岁＞900pg/ml提示病人心衰的可能性较大 75岁以上＞1800pg/ml提示病人心衰的可能性较大 临床意义 ①、BNP 诊断症状性心衰: 心力衰竭时,心脏容量负荷或压力负荷增加,心肌受到牵张或室壁压力增大,引起血中BNP 浓度增高,可诊断心力衰竭。 ②、BNP 诊断无症状性心衰和舒张性心衰: 在无症状性左室收缩功能低下的患者中,NT2ANP 和BNP均会增高。这有助于心衰的早期诊断。 ③、BNP 鉴别诊断呼吸困难病因: 在急诊,BNP 还有助于判断急性呼吸困难患者的病因。最近对321例急性呼吸困难的患者进行了BNP 测定(由于肺心病导致的右心衰归属心衰组) ,结果心力衰竭患者(134 例) 的平均BNP 水平[ (758. 5 ±798) pg/ ml ]明显高于肺部疾患导致呼吸困难的患者[85 例, (61 ±10) pg/ ml ] 。既往有肺部疾患史,此次诊为心衰患者(54 例) 的BNP[ (731 ±764) pg/ ml ]又显著高于既往有心衰病史,此次诊为阻塞性肺病的患者[ 11例, (47 ±23) pg/ ml ] 。肺癌及肺栓塞也可以导致BNP 水平增高,但它与急性左心衰导致的BNP 增高的水平不同。即使同时患有慢性阻塞性肺病及慢性心力衰竭的患者,此次导致呼吸困难的原因不同,BNP 水平也大不一样。 另外,BNP 同样可以帮助诊断右室功能异常。伴有肺动脉高压的右室功能异常的患者中BNP 值高于一般水平,也与慢性肺栓塞导致的肺动脉高压程度相关,且在血栓动脉内膜切除术后,BNP 水平也随肺动脉阻力下降而下降。 降钙素原（PCT） 参考范围： ＜0.05ng/ml 正常人 0.05≤PCT≤0.5 轻度局部细菌感染或细菌感染早期 0.5＜PCT≤2 很大可能为全身细菌感染，或继发于细菌之上的真菌感染，但应排除48h 内 的新生儿、严重外伤、烧伤、较大外科手术、重度心源性休克等临床状 态 2＜PCT＜10 全身感染 PCT≥10 严重脓毒症或脓毒性休克

血清肌酸激酶MB同工酶测定

血清肌酸激酶MB同工酶测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2 实验原理 使用CK-M 多克隆抗体对肌酸激酶（CK）中CK-M同工酶的活性进行抑制后，采用德国临床化学会（DGKC）和国际临床化学会（IFCC）推荐的连续监测法测定余下的肌酸激酶（CK）活性。其反应原理如下： ⑴CK-MM 型同工酶 + CK-M抗体→ CK-MM型同工酶的活性被抑制；CK-MB 型同工酶+ CK-M 抗体→ 50%的CK-MB 型同工酶的活性被抑制； ⑵剩余的50%无活性的CK-MB型同工酶 + N-乙酰半胱氨酸→有活性的CK-B型同工酶 CK同工酶 ⑶磷酸肌酸 + ADP 肌酸 + ATP 己糖激酶(HK)

ATP + 葡萄糖 ADP + 葡萄糖-6-磷酸 (G6P-DH) 葡萄糖-6-磷酸+NADP+6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+ 式中：ADP为二磷酸腺苷；ATP为三磷酸腺苷；NADP+为氧化型辅酶II；NADPH+H+为还原型辅酶II。 在上述反应中，NADPH+H+ 的生成速率与样本中肌酸激酶B 型同工酶（CK-B）的活性成正比。通过在波长340nm 处监测吸光度值的上升速率，即可测得样本中肌 酸激酶B 型同工酶（CK-B）的活性。肌酸激酶B 型同工酶（CK-B）活性相当于1/2肌酸激酶MB型同工酶的活性，将所测得的肌酸激酶B型同工酶（CK-B）的活性乘以2，即为肌酸激酶MB 型同工酶（CK-MB）的活性。 3 标本： 3.1 病人准备：无特殊。 3.2 类型：血清或肝素血浆。

3.3 标本存放：稳定性：-20℃保存稳定4周（避光保存）。 活性损失：2～8℃保存24小时或18～22℃保存1小时至少 损失10%。 3.4 标本运输：常温条件下保存运输。血标本应尽快送往化 验室,室温下放置30―45分钟,后离心,放置时间不得超过3h. 血清必须吸出,转移至有盖的试管中. 3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。 4 实验材料 4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司CK-MB试剂盒（沪 食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014） 4.1.1 试剂组成 试剂1（R1）： D-葡萄糖27mmol/L 咪唑缓冲液 60mmol/L 乙酸镁14mmol/L NADP 2.7mmol/L

三种心肌肌钙蛋白的检测方法比较及其应用研究_陈效琴

. 4994 . 吉林医学2011年8月第32卷第24期 评估治疗效果和早期发现糖尿病患者微血管性病变，及时采取针对性治疗措施。 4 参考文献 [1] 张胜兰.微循环的基础与临床[M].北京:人民军医出版社, 1986:249. [2] 谷伟军,陆菊明.同型半胱氨酸与糖尿病及慢性血管并发症[J].国际内分泌代谢杂志,2006,26(2):80. [3] 金泽宁,吕树铮.定量冠状动脉造影对糖尿病患者靶病变及参考血管的评价[J].中华心血管病杂志,2009,37(8):721. [4] 高晓慧,杨新春.糖尿病与非糖尿病冠心病患者左冠状动脉主干硬化性病变的对比研究[J].中华超声影像学杂志,2006,15(9):660.[5] 陈秀华,陆召麟.老年糖尿病患者下肢动脉病变与血脂的关系[J].中华内科杂志,2008,47(7):556. [6] 陈秀华,陆召麟.老年糖尿病患者颈动脉病变与血脂关系探讨[J].中华老年医学杂志,2009,23(8):528. [7] 许樟荣.糖尿病足与周围动脉闭塞性病变[M].国外医学内分泌学分册,2004,24(5):312. [收稿日期：2011-05-17 编校：潘宏竹] 糖尿病患者组的红细胞聚集指数、纤维蛋白原、血脂（主要以三酰甘油为主）高于对照组，红细胞变形指数低于对照组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。在高糖状态下，红细胞膜胆固醇、胆固醇磷脂、过氧化脂质的含量增加，引起红细胞膜的弹性降低，导致红细胞的变形性下降，红细胞的变形能力对于微血管保持流态和保证脏器的微循环的正常灌注十分重要[3]。纤维蛋白原增加可使红细胞聚集性增加，当红细胞膜发生改变时，红细胞表面的负电荷减少，则红细胞的聚集性增加，使红细胞聚集体解聚所需要的切应力也增加[4] 。糖尿病患者的红细胞变形性降低、纤维蛋白原和红细胞比容增加、红细胞聚集性增加、脂代谢异常等因素，使血浆处于高渗状态，血液相对浓缩，黏滞性明显升高，血液流动缓慢，微循环血液流动不畅，使组织的有效灌注不足，甚至发生阻塞，形成血栓，使局部组织缺氧[5]。总之，糖尿病患者的血液流变学及血脂指标的异常改变，使其血液处于高黏、高凝状态，是导致糖尿病患者慢性并发症，特别是血管性病变的主要原因[6]。因此，对糖尿病患者的治疗不仅应控制血糖，还要控制好血脂，降低血黏度，同时，应注意采取抗凝措施，改善微循环，从而有效防止糖尿病患者心血管并发症的产生[7]。在治疗过程中，应进行血液流变学及血脂指标的动态测定分析，以 肌钙蛋白是肌钙蛋白T （TnT ）、肌钙蛋白I （TnI ）及肌钙蛋白C （TnC ）三种亚单位组成，它们是肌肉的主要调节蛋白，由于三者紧密结合与钙有依赖性，由钙的控制肌肉的收缩功能。肌钙蛋白I （TnI ）是分布在心肌细胞内，主要调节心肌的收缩。因为其特异性高，有较高的敏感性，所以肌钙蛋白I （cTnI ）成为心肌损伤的高敏感性和高特异性的标志物之一，同时也是判断心肌损伤和危险分级，以及判断预后的重要生化指标。钙蛋白T （cTnT ）只分布在心肌内，因为在心肌受损后，外周血中出现时间早，诊断时间长，是早期诊断心肌损伤的有效指标。随着现代实验室诊断技术的飞速发展，肌钙蛋白T （cTnT ）具有了高特异性和高敏感性的心肌特异标志物，在临床是诊断心肌损伤的很好指标[1] 。笔者收集2010年 3月～2011年2月60例血清样本，采用三种方法分析肌钙蛋白I 和超敏肌钙蛋白T ，以及三种方法的相关性。 1 资料与方法 1.1 一般资料：本文收集2010年3月～2011年2月我院心内科 60例血液样本，其中男32例，女28例，平均年龄（64.5±5.4）岁，所有参与患者均排除高脂血症、溶血、黄疸等疾病。 1.2 方法：晨起空腹静卧抽取静脉血，随后4 000 r/min ，5 min 分理出血清，作为待检验品。用抗体夹心法、夹心法和胶体金法定量测定血清中肌钙蛋白I 和超敏钙蛋白T 浓度[2]。免疫分析采用电化学免疫发光法使用罗氏Elecsys 2010电化学发光免疫分析仪[3]。试剂：罗氏原装配套试剂定标液质控液及耗材；胶体金法使用康华生物公司的胶体金法进行检测[4]。以上操作均严格按照操作说明进行。 1.3 判断的方法：钙蛋白I 胶体金法临床参考值为0.3 ng/ml 。电化学发光免疫法钙蛋白I 参考值0.12～0.60 ng/ml 超敏肌钙蛋白T 临床参考值为1 2.4～24.9 ng/L 。 1.4 统计学处理：采用SPSS 15.0统计学软件分析Excel 数据库，采用t 检验分析，计量数据以均数±标准差（x ±s ）表示。χ2检验分析采用率表示的计数数据。以P ＜0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 三种方法的定性结果：所有患者的血清标本通过三种方法检测发现，抗体夹心法检测结果为肌钙蛋白I 有18例阳性，有 42例阴性，夹心法检测超敏肌钙蛋白T 有17例阳性，43例阴性；胶体金法肌钙蛋白I 有19例阳性，41例阴性。通过统计分析，三 三种心肌肌钙蛋白的检测方法比较及其应用研究 陈效琴（四川省广元市中心医院检验科，四川 广元 628000） ［摘 要］　目的：分析比较三种心肌肌钙蛋白的检测方法，以便在临床应用中选择适合的检测方法。方法：用抗体夹心法、夹心法和胶体金法测定60例肌超敏钙蛋白T 和钙蛋白I ，评价三种方法的分析性能、检测结果的差异和相关性，以便临床根据需要选择合适的方法测定肌钙蛋白。结果：三种检测方法测定定量结果中，胶体金、抗体夹心法和夹心法检测定性结果三者之间差异无统计学意义（P ＞0.05）。在肌钙蛋白I 检测结果中，胶体金法和抗体夹心法比较，差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论：在分析性能上，胶体金法测定优于抗体夹心法和夹心法，且与抗体夹心法有较好的相关性，适用于急诊及床旁检测。 ［关键词］　电化学发光法；胶体金法；心肌肌钙蛋白

肌酸激酶同工酶——MB

a-L-岩藻糖苷底物测定AFU酶活的评估 元升生物科技技术研发部 1概述 a-L-岩藻糖苷酶(a-L-Fucosidase，AFU)的分类名为a-L-岩藻糖苷酶水解酶(EC3．2．1．51），催化岩藻糖苷键水解，参与含岩藻糖的低聚糖、糖肽、糖蛋白和糖脂的分解代谢。AFU合成于细胞内，定位于溶酶体，是一种酸性水解酶，它的本质是糖蛋白。广泛分布于人体肝、肾、胰、脑和胎盘等组织以及血清、尿液、唾液和泪液中。AFU在人体内呈多形性，在等电聚焦电泳中AFU 可分出5～9条区带，血清中AFU除含有PI为4．68和4．84两种主要成分以外，还可见到5个次要成分。AFU具有3型同工酶，即AFU1、AFU2和AFU3，是由1个位于第一号染色体短臂（1p34）上基因位点的2个等位基因所表达，由于不同人所表达的同工酶类型不同，所以正常人群AFU活性也有所不同，大约有10%左右的正常人血浆AFU呈低活性。测定a-L-岩藻糖苷酶(a-L-Fucosidase,AFU)对诊断原发性肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC)具有重要临床意义。它是PHC的特异性标志物,可用于PHC的早期诊断. 2 原理 底物CNP-AFU在血清样本中a-L-岩藻糖苷酶酶作用下，生成产物CPNP，而产物CPNP的生成量与样本中AFU的酶活性成正比，通过测定黄色产物在405nm波长的生成速率，即可计算出样本中AFU的活性。 3 实验方法 3.1 样本瑞安市人民医院临床新鲜血清样品。 3.2 仪器和试剂CNP-AFU元升生物科技生物科技有限公司生产，批号 1213M05QH。进口底物购自美国sigma公司，批号1013C07QH；仪器为日立7080全自动生化分析仪、抗坏血酸、胆红素、人胎盘a-L-岩藻糖苷酶均购自sigma公司，血红蛋白标准品购自上海血液中心。 3.3 试剂配制方法按常法配制，所用原料均为分析纯。 3.4 测定方法HITACHI 7080自动分析仪参数反应类型：Rate-A法；反应温

心肌肌钙蛋白的正常值及其临床意义

心肌肌钙蛋白的正常值及其临床意义 发表者：薛一涛(访问人次：10727) 肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白。心肌肌钙蛋白（cTn）是由三种不同基因的亚基组成：心肌肌钙蛋白T（cTnT）、心肌肌钙蛋白I（cTn I）和肌钙蛋白C（TnC）。目前，用于ACS实验室诊断的是cTnT和cTnI。 肌钙蛋白T（TnT）分子量为 37KD，是原肌球蛋白结合亚基。有三种亚型：骨骼肌肌钙蛋白T（sTnT）包括快骨骼肌型和慢骨骼肌型，此外还有心肌型。心肌肌钙蛋白T（cTnT）的大部分是以C-T-I的复合物形式存在于细丝上，6%—8%以游离的形式存在于心肌细胞浆中。因cTnT与骨骼肌TnT的基因编码不同，骨骼肌中无cTnT的表达。cTnT相对于两种骨骼肌亚型有40%的不同源性。cTnT 分子稳定、亲水、特异性抗原决定簇的反应性好。目前所用的单克隆抗体为对心 肌特异的捕捉抗体和标记抗体。 TnI（肌钙蛋白I）存在三种亚型：骨骼肌肌钙蛋白I（sTnI）中存在快骨骼肌型和慢骨骼肌型，它们具有相似的分子量（20KD），但二者之间的氨基酸序列约存在40%的差异；第三种为心肌型。心肌肌钙蛋白I（cTnI）与骨骼肌型的氨基酸序列也存在40%的差异。但人的eTnI氨基末端比sTnI多31个amino acid，使其molecular weight达到22KD，这种独特的顺序使之具有较高的心肌特异性，有助于制备相应的单克隆。cTn是以cTnI-C-T复合物和游离cTnI形式存在于心肌细胞中，心肌损伤时释放到血循环中后，cTnI-C-T可进一步分解为c TnI-C复合物和游离cTnI。故血循环中除cTnI C-T、游离cTnI外还有cTnI-C，而且cTnI-C是其在血液中的主要形式。其代谢产物由肾脏排出体外。 TnC分子量为18KD，是Ca2+结合亚基，每个分子结合2个Ca2+。心肌和骨 骼肌的TnC结构相同。 由于cTnT和cTnI与骨骼肌中的异质体分别由不同基因编码，具有不同的氨基酸顺序，有独特的抗原性，故它们的特异性要明显优于CK—MB同工酶。 心肌以外的肌肉组织出现损伤或疾病时，CK和CK-MB可能会升高，而c TnT和cTnI则不会超过其临界值。由于它们在正常血清中含量极微，在AMI时明显增高，且增高倍数一般都超过总CK和CK-MB的变化。 cTnT和cTnI由于分子量小，发病后游离的cTn从心肌细胞浆内迅速释放人血，血中浓度迅速升高，其时间和CK—MB相当或稍早。虽然肌钙蛋白半寿期很短（cTnT 2小时，游离cTnI的半寿期据报道为2h～5d不等），但其从肌原纤维上降解的过程持续时间很长，可在血中保持较长时间的升高，故它兼有C K-MB升高较早和LD1诊断时间窗长的优点。故目前cTn已有逐渐取代酶学指标 的趋势。 参考值： cTnT0.1ng／ml 以下均为贝克曼Access化学发光分析系统的数据，不同厂家的试剂其诊断 界值不同。

尿毒症患者血清肌钙蛋白T与部分心肌酶的变化及其临床意义

文章编号:1001-5949-(2001)01-0015-02?论 著?尿毒症患者血清肌钙蛋白T 与部分心肌酶的变化及其临床意义 王冬艳,王煜华 【摘要】　目的　为临床观察尿毒症患者心肌功能状况提供较多依据。方法　检测慢性肾功能不全尿毒症期患者血清中心肌肌钙蛋白T及部分心肌酶的含量,并与正常对照组比较。结果　部分尿毒症患者心肌功能有不同程 度的改变,反映其心功能改变状况的敏感生化指标有CK、LDH、HBDH。结论　认为临床观察尿毒症患者心肌功能 状况的首选生化指标为CK、LDH、HBDH,心肌肌钙蛋白T不十分敏感。 【关键词】　尿毒症;心肌;肌钙蛋白;酶类 【中图分类号】　R692.5 【文献标识码】　A The clinical implication serum torponin T and some myocardial enzymes changes in patients with uremia. W A N G Dong-Yan,W A N G Y u-Hua.(Dept.of Inspection,Affiliated Hos p.Ningxia Med.Coll.,Y inchuan750004,China)【Abstract】　Objectives　To provide much more proof for clinical observation the condition of cardiac function in patients with uremia.Methods　Test the content of serum troponin Tand some myocardial enzymes in patients with uiemia and com pare them to nor2 mal controls.R esults　Discover some changes of cardiac function of patients with uremia in deferent degress and found that CK、LDII、IIBDII is the sensitive biochemistric which can reflect the chan ges of cardiac function.Conclusions　It is concluded that the first se2 lected biochemistric indices are CK、LDH、HBDH,through which we can observe the cardiac function of patients with uremia more pre2 cisly. 【K ey Words】　U remia;Myocardium;T roponin;enzymes 慢性肾功能不全尿毒症期患者由于体内各种毒素作用的影响,心肌功能常出现不同程度的改变。肌酸激酶(C K)、乳酸脱氢酶(LDH)、r羟丁酸脱氢酶(r -HBDH)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(AL T)为临床观察心肌功能状况较常用的生化指标。心肌肌钙蛋白T(c Tn T)是近年来发展起来的灵敏度、特异性均很好地反映心肌损伤的血清标志物,具有出现早和持续时间长的特点,对微小心肌损伤(MMD)具有一定的诊断价值[1～3]。本文通过对慢性肾功能不全尿毒症期患者,临床上出现明显的心脏受累指征之前,血清中c Tn T、C K、LDH、HBDH、AST、AL T含量的检测分析,探索尿毒症期患者反映其心功能状况敏感的生化指标,为临床实践提供较多依据。 1　资料与方法 1.1　临床资料:病例组为1998年1月～1998年9月我院肾内科收治的病人28例,年龄20～60岁(平均4 2.5),男16例,女12例,均符合慢性肾小球肾炎肾功能不全尿毒症的诊断,同时剔除心血管疾患、糖尿病、肝病、血液病、骨病等继发性肾损害所致的尿毒 　作者单位:宁夏医学院附属医院检验科,宁夏银川750004 　作者简介:王冬艳,女(1967年～),辽宁籍,汉族,主管检验师,从事临床检验专业。症患者,以及终晚期明显有心包积液的尿毒症患者。35例体检健康者作为正常对照组,年龄20～60岁(平均39.2岁),男20例,女15例。 1.2　标本留取与存放:抽取患者及正常体检者空腹静脉血3.5ml,血标本在室温自然凝固30分钟,以3000转/分离心5分钟分离出血清,一部分用于测定心肌酶(2小时内完成),另一部分封口置于-30℃冰箱冷冻保存待测心肌肌钙蛋白T(1个月内完成)。1.3　检测及原理:①c Tn T测定:采用德国Borinman 公司提供的ELL SA法c Tn T检测试剂盒检测血清中的c Tn T浓度(0.24μg/L为正常值上限,>0.24μg/L 为阳性)。其测定步骤如下:将所有用品预温至25℃,向链霉亲和素包被聚苯乙酰管中加入样品(待测血清/标准血清/质控血清),30分钟内加入由生物素标记的c Tn T特异性俘获单抗溶液(POD10μg/L)按比例100∶1配成的孵育液700μg/L,25℃孵育30分钟,洗涤液冲洗2次后,加入底色原液700μg/L,25℃孵育15分钟,立即充分混匀后用南京华东电子管厂生产的D G3022型酶标仪检测,读取反应物在410nm的吸光度值。②C K、LDH、HBDH、AST、AL T测定:采用美国Beckman公司提供的试剂盒,方法为酶连续检测法,测定仪器系美国Beckman公司的CX5△全自动生

肌酸激酶同工酶MB测定试剂盒说明书

肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 说明书 【产品名称】 通用名称：肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 英文名称：Creatine kinase MB（CLIA） 【包装规格】 2×30 人份/盒、2×50 人份/盒、2×100 人份/盒 【预期用途】 用于体外定量测定人体血清或（和）血浆中肌酸激酶同工酶MB 的含量。 肌酸激酶主要催化高能磷酸键从ATP 转移到肌酸，生成磷酸肌酸。肌酸激酶是二聚体酶，包括骨骼肌CK-MM，脑组织CK-BB，心肌CK-MB 和线粒体肌酸激酶等四种同工酶形式。CK-MB 分子量80,000，由两个亚单位组成(每个亚基MW= 40000)：亚单位M 表示肌肉型，亚单位B 表示脑型。CK-MB 主要存在于心肌组织，占CK 总活性的20%，骨骼肌中也有微量分布。 血清中CK-MB 含量对诊断急性心肌梗死、心肌炎等心肌缺血性疾病有重要意义。CK-MB 在心肌损伤早期即可出现于循环血中，于心肌损伤后2-6 小时开始升高，在12-24 小时内达到峰值，之后降至正常水平(36–72 小时)， CK-MB 测值的升降伴随ECG 演变和胸痛病史。CK-MB 含量和时间变化，对评估心肌损伤发病时间、梗死体积 以及再灌注后损伤有重要意义。此外，骨骼肌损伤、横纹肌溶解症及中风等疾病中，也伴随有CK-MB 含量升高。 临床诊断上，CK-MB 经常与肌红蛋白和肌钙蛋白I 联合检测。在心肌损伤相关疾病诊断上，肌钙蛋白I 特异 性强，肌红蛋白和CK-MB 早期敏感性高，三者联合检测可以提高诊断的特异性、敏感性。 【检验原理】 肌酸激酶同工酶MB 测定采用双位点夹心化学发光免疫分析法，其采用的技术原理如下： 第一步：将样本与包被着CK-MB 单克隆抗体的超顺磁性磁微粒（磁珠）以及CK-MB 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物添加到反应管中，经过孵育，样本中的CK-MB 和包被在磁珠上的CK-MB 单克隆抗体结合，同时CK-MB 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中CK-MB 另一位点结合。反应完成后，磁场吸住磁珠，洗去未结合的物质。 第二步：将化学发光底物（3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷，AMPPD）添加到反应管内，发光底物AMPPD 能有效地被碱性磷酸酶所分解, 脱去一个磷酸根基团，生成不稳定的中间产物，该中间产物通过分子内电子转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子，处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发态返回基态时，产生化学发光，由光电倍增管对反应所产生的光子数进行测量，所产生的光子数与样本内CK-MB 的浓度成正比。样本内分析物的量由定标曲线来确定。 【主要组成成分】 注：不同批号试剂盒中各组分不能互换。

肌酸激酶与肌酸激酶同工酶的结果解读

肌酸激酶与肌酸激酶同工酶的结果解读 摘要：在当前肌钙蛋白在绝大多数县级以上医院普及的情况下，依然有相当多 的基层医院在评价心肌损伤标记物时会选择心肌酶谱。目前这些指标已整合到生 化全套检测中，其中CK-MB在临床诊断中的敏感性和特异性最高，至今仍然可以 作为心肌损害的重要的诊断指标。 关键词：肌酸激酶；同工酶 The results of creatine kinase and creatine kinase were interpreted Xu ying.（Anhui huainan east hospital group xiesan hospital，Anhui Huainan 232052，China） [Abstract] In the current troponin in the vast majority of the popularization of the hospital at or above the county level cases，there are still quite a lot of basic-level hospitals in evaluating myocardial injury markers will choose myocardial enzyme spectrum. At present，these indexes have been integrated into the biointegration test，and the sensitivity and specificity of ck-mb in clinical diagnosis can still be regarded as an important diagnostic index for myocardial damage. [Key words] Creatine kinase；isozyme 20世纪90年代前，肌钙蛋白还未广泛在临床应用，血清心肌酶谱是诊断心肌损伤的一 类重要指标，即使在当前肌钙蛋白在绝大多数县级以上医院普及的情况下，依然有相当多的 基层医院在评价心肌损伤标记物时会选择心肌酶谱，包括肌酸激酶CK及肌酸激酶同工酶CK-MB、乳酸脱氢酶LDH、谷草转氨酶AST和α羟丁酸脱氢酶α-HBDH。目前这些指标已整合到 生化全套检测中，其中CK-MB在临床诊断中的敏感性和特异性最高，至今仍然可以作为心肌 损害的重要的诊断指标。临床也经常能碰到患者拿化验单咨询的情况，护理人员对此应该有 所了解。CK广泛存在于机体组织中，至少有3种主要的同工酶：CK-MM、CK-MB、CK-BB。 CK-MM 主要存在于骨骼肌细胞中；CK-MB主要存在于心肌细胞中；CK-BB主要存在于脑组织中。心肌细胞损伤主要以CK-MB升高为主，总CK也会随之升高。解读CK-MB应该注意： 1药物原因 他汀是最常见的引起CK-MB升高的药物，主要与他汀肌溶解有关，故CK升高水平更为 明显。除此之外，某些麻醉药、镇静药、催眠药、乙醇、秋水仙碱等均可引起CK和CK-MB 升高。 2运动影响 一般生化检查要求检查者前两天尽可能避免剧烈的运动和锻炼，尤其平常比较少参加锻 炼的检查者，即便检查前不很剧烈的活动也可能会引起CK明显升高，同时伴有CK-MB不同 程度的升高。 3发热 尤其是高热可以引起肌肉损伤，所以对于感染发热患者，如果CK轻度升高并不用特别处理。 4手术或挤压创伤 有时手术后1-2个月CK仍然会不同程度升高，这种患者如果因其他原因再次住院，如没 有仔细询问患者近期手术史，往往会因不清楚CK或CK-MB升高的原因而进行很多不必要的 检查。 5年龄因素 14岁以下儿童的CK-MB无论是绝对活性或相对活性，一般要比成人高出2-3倍，由于不 同年龄CK-MB正常值范围不同，建议有怀疑心肌炎的儿童，以肌钙蛋白作为主要血清学参考 指标。另外，妊娠3个月左右CK和CK-MB水平也明显高于正常人。 6其他系统疾病 肿瘤、脑部疾病、甲状腺功能减退、多发性肌炎、横纹肌溶解、低钾血症等病变也会引 起CK和CK-MB增高，其中肿瘤、脑部疾病可引起CK-BB增高，但由于CK-BB不能直接检测，

心肌标志物与心肌酶变化的比较分析

心肌标志物与心肌酶变化的比较分析 【摘要】目的比较心肌标志物和心肌酶的临床敏感性和特异性。方法对113例拟似急性冠状动脉综合征(ACS)患者在入院后24小时内进行心肌标志物三项[肌钙蛋白T（TNT）、肌酸激酶同工酶MB质量（CK-MB mass）、肌红蛋白（MYO）]和心肌酶四项[乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）]检测，对心肌标志物与心肌酶测定结果进行比较分析。结论心肌标志物的敏感性和特异性明显高于心肌酶，特别TNT不受其它因素的干扰。结论建议临床使用心肌标志物进行诊治。 【关键词】急性冠状动脉综合征患者(ACS)；心肌标志物；心肌酶 Compare the Changment of Myocardium damage mark and Myocardium enzyme Zhou LinHua, Zhi GuoHua, Deng DeYao, Xue YunSong Department of Clinical Laboratory,the second People’s hospital of Kunming city, Yunnan 650021 【Abstract】Objective Compare the sensibility and specificity of myocardium damage mark and myocardium enzyme.Methods Test the myocardium damage mark [Troponin T ( TNT) , Creatine kinase isoenzyme MB mass (CK-MB mass), Myoglobin (MYO) ]and the myocardium enzyme [lactate dehydrogenase (LDH),creatine kinase (CK), Creatine kinase isoenzyme (CK-MB), Aspartate aminotransferase (AST)]of the 113 patients with Acute coronary syndrome(ACS) within 24 hours after Admission,compare the testing results of myocardium damage mark and the myocardium enzyme.Results The sensibility and specificity of myocardium damage mark is obviously higher than the myocardium enzyme, and the TNT is free from interference especially.Conclusions It is proposed that the Myocardium damage mark be used for diagnosis and treatment. 【Keyword】Acute coronary syndrome(ACS); Myocardium damage mark; Myocardium enzyme 急性心肌梗死(AMI)诊断有3条标准，包括胸痛等临床症状、心电图异常改变和心肌酶的异常升高。但是大量的流行病学调查发现，约有25%的AMI患者早期可以没有典型的临床症状；约30%左右的AMI患者缺乏心电图的特异改变[l]。在这种情况下，心肌损伤标志物和心肌酶的检测在诊断AMI时尤为重要。随着检验医学的进展，在大中型医院，心肌损伤的生化检测已从过去的以检测心肌酶活力为主发展到目前以检测蛋白质质量为主的早期标志物(肌红蛋白、肌酸激酶等)和确定标志物(肌钙蛋白等)，诊断的敏感性和特异性明显增强。心肌标志物定量检测项目已经能在常规生化分析仪上进行，不需较高的成本投入，就能

高敏肌钙蛋白升高的临床意义

中华检验医学杂志?2014-10-13?? 作者：张真路周新 肌钙蛋白升高意味着什么？首选答案肯定是急性心肌梗死（AMI）!前几年这样回答没问题，现在由于“高敏感肌钙蛋白”的出现，这样回答就不准确了。着名的检验医学专家Alan Wu教授在2013年6月的一次讲座幻灯片中引用了一张“三车追尾车祸现场”照片，很形象地讲述了高敏感肌钙蛋白检测目前所出现的局面。 跑在最前面的车代表检验科，最后面的车代表急诊科，中间受夹击的车代表心内科。也就是说，检验科使用“高敏感肌钙蛋白检测试剂”检测出许多“阳性”患者，急诊科通过肌钙蛋白检测的“阴/阳性”以排除/诊断AMI，而心内科则由于肌钙蛋白“阳性”而不恰当地收了一些“不该收”的患者准确地讲，这些患者本身身体存在病变，但不能因为只要是肌钙蛋白升高就一律收心内科。 造成以上结果的原因，关键还是交流不够。临床医生对高敏肌钙蛋白新知识的学习了解不够；检验科主动走入临床的宣传交流不够。再加上还有一些检验科的质量存在问题，不能时刻保证结果的精确和可控等。 这些问题几年前在欧洲已出现过，美国食品和药物管理局（FDA）马上要批准其投入临床，也会遇到这些问题。但美国人在正式使用前做了许多工作，形成一些“共识”，最主要的目的是：要先让临床医生知道如何最佳地应用及对结果进行科学合理的解释。 在我国，许多医院已使用高敏肌钙蛋白检测试剂有4年了，遇到了越来越多的问题。如何规避一些问题，如何统一认识？我们认为，检验与临床应该加强学习、交流，借鉴欧美经验，避免走弯路或回头路，尽快形成共识。 一、了解高敏肌钙蛋白检测的生物化学背景 1．肌钙蛋白的生物化学 首先要明确的是，“高敏肌钙蛋白”是检测实验特性的反映（即检测敏感性的提高），而非反映心脏肌钙蛋白的新形式。大多数“高敏”试剂只是加大样本检测量，标记抗体检测浓度的增加，降低缓冲液本底信号及反应时间延长等方面做了优化改进。 改进的结果是检测敏感性有了10倍的提高，胞浆内6%-8%游离肌钙蛋白的释放就能检出。由于试剂校准物是大肠埃希菌人类cTnT重组体，cTnT第5代试剂校准物与第4代不完全相同，所以同一样本检测的结果会不同，如第4代hs-cTnT临界值（cut-off）值为

连续腰麻与全麻对心肌钙蛋白和心肌酶影响的比较

连续腰麻与全麻对心肌钙蛋白和心肌酶影响的比较 目的比较连续腰麻(CSA)与全麻（GA）对行下肢骨科手术老年冠心病患者心肌钙蛋白和心肌酶的影响程度。方法选择行下肢骨科手术老年冠心病患者60例，年龄65～90岁，ASAⅡ级，分成CSA组（C组）和GA组(G组)，每组30例。监测记录麻醉前后各时点MAP、HR、SpO2变化及心电图ST段改变情况。在麻醉前、术后第1天采集静脉血，测定心肌钙蛋白Ⅰ(CTnⅠ)、肌酸激酶(CK)及肌酸激酶同工酶（CK-MB）。结果与T0比较，C组内麻醉后各时点MAP、HR、SpO2无显著变化（P>0.05）,G组MAP、HR在T1、T7升高（P＜0.05）；C组CTnⅠ、CK-MB处于低值［≤(0.23±0.03) μg/L，(10.62±3.65) U/L］，麻醉前后无显著变化（P>0.05）；G组CTnⅠ、CK-MB术后第1天［(0.69±0.11)μg/L，(23.10±3.75)U/L)］较麻醉前升高（P＜0.05）,较C组升高（P＜0.05）；两组CK 术后第1天均升高（P＜0.05）。结论CSA镇痛完全，循环功能稳定，不引起下肢骨科手术老年冠心患者CTnⅠ和CK-MB升高；GA气管插管和拔管时可引起老年冠心患者CTnⅠ和CK-MB升高。 [Abstract]ObjectiveTo compare the myocardial injury of using continous spinal anesthesia (CSA)and general anesthesia(GA) on coronary heart disease in elderly patients through checking cardiatroponin Ⅰ(CTnⅠ) and myocardial enzyme.MethodsSixty ASA Ⅱpatients aged 65-90 years were divided into two group：CSA group(C,n=30)and GA group (G,n=30) . MAP、HR、SpO2 at pre-anesthesia and post-anesthesia were monitored.ST variation in ECG was recorded.Blood samples were taken before anesthesia and on the first postoperative day for determination of blood CTn Ⅰ,CK and CK-MB activities.ResultsMAP、HR、SpO2 around anesthesia in the group C was not remarkable changces. MAP、HR in the group G was increased at T1,T7 . CTn Ⅰand CK-MB in the group C were at low level ,not changes. CTn Ⅰand CK-MB in the group G was increased on the first postoperative day. CK in each group was increased significantly on the first postoperative day.Conclusion CSA has better analgesia and stable hemodynamics ,and does not increase CTn Ⅰand CK-MB on coronary heart disease in elderly people. GA increase CTnⅠand CK-MB at tracheal intubation. [Key words]Coronary heart disease in elderly people；Continuous spinal anesthesia；General anesthesia；Cardiatroponin Ⅰ；Myocardial enzyme 老年冠心病患者因心血管系统衰老、退变及代偿能力差，麻醉和手术期间血压更易波动，可能发生心肌缺血损伤及心肌梗死，选择适当的麻醉方法可降低手术麻醉期心血管事件的发生率。通过观察血中心肌钙蛋白Ⅰ(CTnⅠ)、心肌酶及心电图ST段变化，比较连续腰麻（CSA）与全身麻醉(GA)影响心肌血供和心肌损伤情况，探讨CSA对行下肢骨科手术老年冠心患者的安全性。 1资料与方法

人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)说明书

人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，组织及相关液体样本中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)的活性。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)水平。用纯化的人肌酸激酶同工酶MB抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入CK-MB，再与HRP标记的CK-MB抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的CK-MB呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份 封板膜2片（48）2片（96） 密封袋1个1个 酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：135U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求： 1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。