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细胞培养实验写报告内容

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1目的

2 原理

3材料与方法(操作步骤)

4实验结果

5结论或结果分析

实验一鸡胚原代成纤维细胞的制备与培养

实验二滤泡性口炎病毒(VSV)的增殖(纯培养)

实验三 Hep-2细胞的传代培养

实验四 VSV TCID50滴定

实验五干扰素活性(效价)的测定

实验六 VSV中和试验(稀释血清固定病毒法)

实验二鸡胚原代成纤维细胞的制备与培养

一、目的

1、掌握鸡胚原代成纤维细胞的制备及培养的基本步骤;

2、掌握活细胞的显微镜下观察;

3熟悉病毒在细胞内增殖的基本判断方法。

二、原理

离体动物组织通过温和的手段(机械和酶消化)形成单个细胞后,在适宜的外界环境中,包括温度、酸碱度和气相环境,并给予充足合适的营养条件,能生存、生长形成单层细胞,这种原代培养的细胞具有原来体内所具备的基本特性,比如肌肉细胞的收缩功能;上皮细胞的分泌功能等。通常把这种从体内取出组织细胞开始培养到第一次进行传代之前的这一段时期称为原(初)代培养。原代细胞最接近体内细胞的特性,因而对外界环境的变化也最敏感,因此比较适合病毒的增殖,药物的作用机制等的研究。

三、材料(按2人/组的量发放)

四、操作步骤

1、在DMEM和Hank’s 液中分别无菌操作以1%的量加入双抗,吸出10~

15mlHank’s 液至无菌平皿中备用;

2、碘酒和酒精棉球分别拭擦鸡胚气室外卵壳;

3、取出两只无菌平皿,并标记①和②,待用。

4、大镊子轻敲卵壳顶部然后小心去掉气室外卵壳;

5、消毒镊子后小心撕破卵膜,两人互相配合取出鸡胚置于盛有Hank’s 液的

平皿①中,小心去头、内脏、爪和粘液及血球,洗涤后置于盛有Hank’s 液的平皿②中,再充分洗涤;

6、取出洗净的组织块置于大青霉素瓶中,在火焰附近用无菌眼科剪刀将其

剪成约0.5~1mm3的小块(约250次),此时体积约0.5ml;用Hank s’液洗涤两次。

7、按照10倍量加入0.25%胰蛋白酶,调节pH至约7.3~8.0(肉眼观为肉

红色)盖上瓶塞,写好标记;

8、将上述细胞瓶置于37℃水浴中,开始计时,约15~30min,其间缓慢摇

匀以充分消化。消化停止的标志是:轻轻晃动后细胞悬起,呈云雾状,很快聚集成团,表明细胞活力好。

9、消化结束后,取出,稍沉淀,缓慢吸出上清,用Hank’s 液小心洗涤2~

3次,可以尽量减少胰蛋白酶的残留量,然后加入DMEM液约5ml,用小头吸管充分吹打,使细胞充分分散。吸上清;重复操作3~4次,收集

细胞上清。

10、(1)上述细胞悬液自然沉降,待未消化彻底的组织块沉入瓶底后,收集

上清,并加入足量的小牛血清(终浓度为10%),将细胞密度调到

约1×106个/ml。

(2)经四层无菌纱布过滤后收集滤液,并加入足量的小牛血清(终浓度为10%),将细胞密度调到约1×106个/ml;

11、将上述制备好的细胞悬液平均分配到2只细胞瓶中,5ml/瓶,塞好螺口

塞,注意生长面朝下,在非生长面上做好标记,包括细胞名称,接种培

养时间,组别及姓名等。

12、细胞统一置于本室指定的CO2孵箱中培养。

13、24h后观察细胞生长情况,如果细胞长成单层,细胞界限清晰,大多数

细胞为梭形并贴壁,布满细胞瓶的生长面,说明细胞生长状态良好。

实验三滤泡性口炎病毒(VSV)的增殖(纯培养)

一、实验目的

掌握病毒在细胞内增殖的基本判断方法。

二、实验原理

原代细胞最接近体内细胞的特性,因而对外界环境的变化也最敏感,因此比较适合病毒的增殖,药物的作用机制等研究。病毒在细胞内增殖的检测指标有细胞变化、红细胞吸附、细胞代谢改变、干扰现象、免疫荧光法检测等。由病毒引起的细胞病变称细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),常见的细胞形态学变化为细胞变圆、聚集、融合、裂解或脱落等。

四、操作步骤

1、上述原代成纤维细胞培养24h后,一旦细胞完全贴壁生长良好后,则轻

弃培养上清,换上细胞维持液(含3%小牛血清的RPMI-1640),接种200TCID50的VSV0.1ml,在细胞瓶上标记换液时间,接种病毒量。正常对照也按照上述方法换上维持液。

2、再继续培养,每间隔12~24h观察,直至全部细胞出现明显的病变,显微镜观察细胞脱落,圆缩,则可停止培养。

3、收集全班的病毒培养物于100ml无菌盐水瓶中,写好标记,置于-20℃冰箱充分冷冻后再置于4℃冰箱或室温下解冻,该过程称为冻融。反复冻融三次后,细胞膜破坏,释放出胞内病毒。低速离心,弃细胞碎片沉渣,收集上清即为病毒悬液。留样测定病毒的TCID50。

五、实验结果

1、鸡胚原代成纤维细胞的显微镜下观察。

2、VSV攻击鸡胚原代成纤维细胞后,细胞病变效应(CPE)的观察。

3、病毒收获的方法。

实验四 Hep-2细胞的传代培养

一、目的

掌握细胞传代培养的方法及其应用。

二、原理

原代培养后由于细胞游出数量增加,细胞进行增殖,单层培养细胞相互汇合,整个瓶底逐渐被细胞覆盖。这时需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶的过程称之为传代;进行一次分离再培养称之为传一代。

细胞培养传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代;部分贴壁生长的细胞用直接吹打即可传代;悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打传代。

四、操作步骤

1、将细胞生长面朝上轻轻倒掉上清,用PBS小心洗涤三次,注意吸管尖头不要伸到细胞瓶中。

2、用上述吸管吸取1ml VTP加入细胞瓶中,铺满整个细胞生长面即可;室温或手握住消化,约3~5min。当细胞胞质回缩、细胞间隙增大后,即可停止消化,尽可能弃尽消化液,继续利用残余的消化液消化,直至细胞大部分易在外力作用下从细胞瓶表面脱落下来为止。

3、加入少量DMEM液细胞瓶中,用小头吸管吹打瓶壁细胞以及脱落细胞充分使细胞均匀,吹打时动作要轻柔不要用力过猛,尽可能不要出现泡沫。吸一滴细胞悬液于Ep管中。

4、计数:用吸管吹打细胞悬液,取少许细胞悬液与等量0.04%台盼兰混匀,在计数板上盖玻片的一侧加该细胞悬液,加样量不要溢出盖玻片,也不要过少或带气泡。计算细胞密度。用DMEM制备成1×106/ml的细胞悬液,并按10%的量加入小牛血清。

5、将上述细胞悬液分装5ml到新细胞瓶中,塞好塞子,送培养箱培养,24h 后观察。

以备实验五、六、七用。

实验五VSV TCID50滴定

(注:此实验和实验五、六同时进行)

一、目的

掌握病毒TCID50滴定的基本原理和计算方法以及应用。

二、原理

多数病毒感染体外培养的细胞后,常引起细胞形态学改变,如细胞团缩、裂解和细胞肿大等,这种改变称为病毒致病变效应(cytopathic effect,CPE),可以直接通过显微镜观察,亦可通过染色得以识别和判断。CPE的程度可间接反映病毒的毒力,因此利用这种特征可以用来测定病毒的毒力。即能在细胞培养板孔或试管内引起半数细胞发生病变所需的病毒量定义为病毒的组织细胞感染指数

(tissue culture infection dose,TCID50)。

测定时,首先在微量细胞板上培养敏感细胞,待细胞贴壁形成单层,弃上清。将待测病毒用维持液做10倍稀释后加入细胞单层,逐日观察,直至病毒产生的CPE不再进展为止。具体时间根据病毒的增殖特点而定,如肠道病毒增殖迅速,一般48h即可;VSV增殖也较快,因此,48h~72h也可以观察、染色、计算。

三、材料与器材

四、操作步骤

1、制备细胞:方法同实验五。一瓶细胞消化后加入8ml营养液即可制成所

需细胞悬

液。密度约为1×106/ml。用微量移液器将细胞悬液加入40或96孔板微孔中,每孔100μl,37℃,5%CO2孵育箱培养24h,形成单层,做病毒滴定用。

2、50%组织细胞感染量(TCID50)测定

(a)稀释病毒液:取无菌小试管或青霉素瓶9支,各管分别加3%小牛血清的维

持液2.7ml,然后向第一管加VSV病毒液0.3ml,反复吹吸混合三次,从第一管内

吸液0.3ml加入第二管内,反复混合三次,从第二管内吸液0.3ml加入第三管内,

反复混合三次,依此类推将待测的病毒液做连续10倍稀释,使病毒稀释为10-1,

10-2,10-3…10-9。

(b)病毒接种:将长好单层细胞的培养板各孔细胞液全部倾弃,用微

量移液器

把各稀释度的VSV病毒从低浓度开始依次加入各微孔中,每稀释度平行加2孔,

每孔100μl。细胞对照孔不加病毒液,只加维持液。置37℃,5%CO2孵育箱中

孵育。

(c)结果观察:于孵育后18、24、36、48、72h在倒置显微镜下观察CPE,病

毒可引起细胞圆缩、堆聚及脱落现象。“-”表示细胞正常;“+”25%细胞产生病

变、圆缩、破碎脱落;“2+”50%细胞产生病变;“3+”75%细胞产生病变;“4+”

100%细胞产生病变。(实验时,观察24h~48h即可染色计算)

3、计算TCID50参见下表:

表1 VSV在Hep-2细胞上的TCID50结果记录

病毒稀释度病变孔数/

接种孔数

累积数(孔)病变细胞孔

有病变

无病变

比例百分比(%)

10-38/8 10 0 10/10 100

10-42/8 2 6 2/8 25

10-50/8 0 14 0/14 0

10-60/8 0 22 0/22 0

10-70/8 0 30 0/30 0

10-80/8 0 38 0/38 0

按表中,10-3稀释的病变高于50%;10-4稀释的病变低于50%;50%病变分布于10-3与10-4之间,计算公式如下:

高于50%病变率-50% 100-50 距离比例= = =0.67

高于50%的病变率-低于50%的病变率100-25 即1个TCID50=10-3.67,查0.67的反对数为4.68,即病毒做4.68×103倍稀释时取0.1ml接种细胞,即可使50%细胞产生病变.

附录:如何计算200个TCID50?

4.38×103÷200=23.4,将病毒作23.4倍稀释时即得200个TCID50。

五、计算

请计算提供的病毒的TCID50。

六、写实验报告并计算给定的病毒的TCID50。

附录3

一、关于50%终点法的计算(参见《病毒学检验》(李洪源)人民卫生出版社2007)1)Reed-Muench法计算CCID50

举例如下:

VSV在Hep-2细胞上的TCID50结果记录

病毒稀释

度病变孔数/

接种孔数

累积数(孔)病变细胞孔

有病变↑无病变

比例百分比(%)

10-34/4 9 0 9/9 100

10-43/4 5 1 5/6 83

10-52/4 2 3 2/5 40

10-60/4 0 7 0/7 0 由上表可知该病毒的CCID50介于10-4与10-5两个稀释度之间,二稀释度之间的距离比例为:

高于50%感染百分数-50% 83-50

距离比例=-×lg稀释倍数= =-0.767

高于50%的感染百分数-低于50%的感染百分数83-40 低稀释度的对数(高于50%的感染百分数)=lg10-4=-4

lgCCID50=高于50%的感染百分数的低稀释度的对数+距离比例

=(-4)+(-0.767)=-4.767≈-4.8

因此该病毒的CCID50为10-4.8/0.1ml,也就是说,此病毒的10-4.8的浓度(即1:63000)按0.1ml接种一组细胞孔后,可使50%的细胞感染,即有50%病变的可能性。

2)Karber法计算

二、实验结果的观察(《病毒学检验》P55)

1、观察结果

于培养后的不同时间,如18h、24h、36h等,在倒置显做镜下观察细胞病变情况。

a)细胞病变程度表示法通观整个“单层区”,权衡总的情况,以下列符号表示其病变程度:

- 表示无细胞病变

+ 表示1%~25%的细胞病变

++ 26%~50%的细胞有病变

+++ 51%~75%的细胞有病变

++++ 76%~100%的细胞有病变

b)记录结果病毒引起细胞病变效应的滴度以半数细胞培养感染量(cell culture infectious dose,CCID50)表示,即凡能使50%(半数)细胞出现病变的最高病毒稀释度,即为50%感染单位,简称CCID50。有时也称其为半数组织培养感染量(50% tissue culture infectious dose,TCID50)。细胞病变效应出现的时间,不同病毒不完全一样,以感染细胞的病变不再发展,而对照细胞仍然完好为准。

实验六干扰素活性(效价)的测定

(注:此实验所需的细胞为实验四时传代培养所得)

一、目的

1、掌握微量细胞病变抑制法测定干扰素效价的基本步骤以及结果分析。

2、熟悉常用生物制品生物学活性测定的实际意义。

3、了解影响结果的常见因素。

二、基本原理

病毒或其他干扰素诱生剂作用于巨噬细胞、T细胞或成纤维细胞后,由细胞基因自身编码产生的具有抗病毒、抗肿瘤和调节免疫功能的一类小分子糖肽,统称为干扰素。干扰素发挥重要的酶的特性而抑制病毒DNA和蛋白质的合成,从而抑制病毒在细胞内的增殖。因此具有间接的广谱抗病毒作用。

为了进一步确定人工方法制备的干扰素的生物学活性,需进行体外抗病毒试验测定,即干扰素效价的测定。干扰素效价一般定义为:凡1ml干扰素标本的最高稀释度仍能保护半数细胞(50%)免受“攻击病毒”损害者,该稀释度的倒数即为干扰素的效价,即单位/毫升。

三、测定方法

测定干扰素效价的方法有多种,最常用的是“细胞病变抑制法”(Method of Cytopathic effect inhibition assay,简称CPE法)。此法的主要优点是操作简便,

易于掌握,结果可靠,故已成为目前各实验室的常规。亦可用“放射化学测定法”、

“染料摄入测定法”。本次实验也主要采用前法。下面就此法的发展做一简要阐述。

1、全量细胞病变抑制测定法

优点:操作简单、易于掌握、结果可靠

缺点:大量测定时,耗费细胞量太大,清洗工作量大,判断结果不能完全排出主观因素。

2、常规微量细胞病变抑制测定法

此法是在“全量法”基础上加以改良的一种方法,它的最大优点是:需用细胞量少,适于大量干扰素标本检测。其主要缺点是:判断结果不能完全排除主观因素。具体操作形式有:

先使细胞培养24~48h形成单层后,再加入不同稀释度的干扰素孵育24h,弃去,再加入100TCID50的攻击病毒,继续孵育直至病毒对照出现完全病变为止。

主要特点是干扰素稀释标本和细胞同时加,优点是细胞对攻击病毒较敏感,且省时。两种方法滴定的干扰素效价无明显差别。

3、微量快速检测法(一步快速法)

本法的特点是干扰素(不同稀释倍数)、细胞(一定浓度)和病毒(一定量)三者同时加入。因为干扰素诱导细胞形成“抗病毒状态”要先于病毒的复制与成熟,即VSV的复制周期为7小时,而干扰素作用于靶细胞后约1小时即形成抗病毒状态。但一步快速法的敏感性随病毒攻击剂量的提高而迅速下降。因此常规

微量法比微量快速法稳定。

四、材料准备

1、待测标本为了除去非干扰素抑制物,待测标本应作(1)离心处理;(2)pH处理(此步学生不需做)。可分装为20~40μl /份/2人。

2、测定细胞应根据“种属特异性”选择测定细胞。本实验室选用生长良好的一日龄或两日龄人羊膜单层细胞传代培养物(WISH)或人喉癌上皮细胞(Hep-2),本次实验选取后者。

3、攻击病毒选用具有“同步致病作用”的VSV(Vesicular Stomatitis Virus)作为“攻击病毒”。使用前,应先在原代鸡胚成纤维细胞培养物(约400万细胞/毫升)中传代增殖及滴定病毒的空斑形成单位(PFU)或在人羊膜单层细胞上滴定其TCID50。病毒的攻击量一般可选100~300个TCID50(一般不得小于10个TCID50,不得大于500个TCID50)。

4、胰蛋白酶混合消化液VTP,其胰蛋白酶和Versene的最终浓度分别为0.05和0.02。用VTP比单用胰蛋白酶作消化液对细胞的损伤要小些。

5、营养培养基配方是(1)DMEM;(2)10%灭活小牛血清;(3)双抗。最后用NaHCO3调pH至7.2~7.4。

6、微量细胞培养板无菌40孔进口板1块/组。

7、CO2培养装置采用CO2孵箱(CO2为5%,空气为95%)。

8、其他器材:5ml吸管2只/组,1ml吸管1只/组,tip头1盒/桌。

五、操作步骤

1、稀释待检干扰素(在微量滴定板上直接进行)

(1)配制10%小牛血清的营养液5ml,除第一列外,在第一、二排的第2~

10孔各加100μl营养液;

(2)将待检干扰素进行400倍稀释后,分别取100μL于第一孔和第二孔,

将第二孔,充分吹吸3次,吸出100μl于第三孔,重复上述操作,直到第8孔,

吹吸后弃去100μl。因此依据倍倍稀释原则对干扰素进行系列稀释,各孔的稀释

倍数如下表所列。

第九孔为细胞对照孔,不加干扰素保护也不加病毒攻击;第十孔为病毒对照,不加干扰素保护加病毒攻击。第二排按照同样方法进行,即每个稀释度重复两孔。每孔含量为100μl。

2、微量单层细胞培养

(1)按常规方法将预先培养好的细胞单层用VTP消化下来;

(2)用营养培养基将细胞制成40万个细胞/毫升的悬液;

(3)用加样器向微量细胞培养板每孔中加入100μL细胞悬液(加时不断

摇匀瓶中的细胞);

(4)置CO2孵箱中培养18~24h。

3、病毒攻击

观察到细胞单层良好时,将各孔内含干扰的培养液倒掉,于每孔中加入

100TCID50的攻击病毒VSV 100μl,该病毒用3%维持液稀释,细胞对照组加入等量的维持液。本组加入24小时引起75~100病变的VSV 100μl。置37℃孵育24~40小时。

4、观察结果

4.1 可直接倒置显微镜观察。在规定的时间内首先观察“细胞对照组”和“病毒对照组”,若病毒对照组各孔中的细胞出现75~100%的明显病变和死亡,而细胞对照组中的细胞仍完全生长良好,则表明对照系统完全合格,即可作全面观察。否则弃去重做。每孔中出现的细胞病变(CPE)程度,用+表示。一般病毒对照孔,出现+++或++++,干扰素保护孔CPE不再进展,则可终止反应,并染色。

4.2 结晶紫染色:将上述反应板取出,弃去孔内液体于消毒液中,每孔加入1滴染色液,3~5min后,弃去,洗净孔内残余液体,控干即可记录结果。细胞着色的深浅可以直观反应CPE出现的程度,一般++++时板孔内几乎无可见的细胞贴壁层,无CPE时则板孔内细胞贴壁层完整。

六、结果判断与计算分析

1、效价单位:效价以单位/毫升表示

一般判定法:凡1ml干扰素标本的最高稀释度仍能保护半数细胞(50%)免受“攻击病毒”损害者,该稀释度的倒数即为干扰素的单位/毫升。如某干扰素稀释到1:8000时仍能保护半数细胞(50%)免受“攻击病毒”的损害,即出现++的稀释度,则该干扰素的效价即为8000单位/毫升。

特殊计算法(通常按照Reed-Muench法计算)

○1计算保护百分比,见下表

A、B、C项为原始数据,

4+表示全部细胞病变;3+表示75%细胞病变;

2+表示50%细胞病变;1+表示25%细胞病变。

○2求出干扰素单位

从上表中可大略看出,此批干扰素能保护半数(50%)细胞不被“攻击病毒”

损害的最高稀释度在1:3200~1:6400之间。因此,可通过下式求出其距离比。

高于50%的百分比-50 63-50

距离比===0.52 高于50%的百分比-低于50%的百分比63-38 即此批干扰素稀释到2-5.52×10-2 (1:4588)时,能保护半数细胞免受“攻击病毒”损害,其结果可记为5.52Log2+2单位/毫升(5.52Log2+2 u. ml-1)。

4、工作单位修正

各实验室所测得的干扰素单位,习惯上一般都称为该实验室“工作单位”。为了表明某种干扰素效价的高低,就必须用同型国际干扰素参考制剂加以修正。例如,当我们要修正本实验室所制备的兽用白细胞干扰素的效价时,就应当:(1)查明兽用白细胞干扰素参考制剂的标准单位(R1)

(2)并在相同条件下测出兽用白细胞干扰素参考制剂的工作单位(R2)(3)测出本实验室所制兽用白细胞干扰素的工作单位(X2)

(4)按下式求出本室所制兽用白细胞干扰素的修正单位(X1):

R1 : X1 = R2 : X2

例如设:R1=5000单位,R2=10000单位,X2= 8000单位;

则按上式可求知:X1 = 4000单位。

实验七 VSV中和试验(稀释血清固定病毒法)

一、实验目的

测定血清中的VSV中和抗体效价

二、实验原理

特异的抗病毒免疫血清(中和抗体)和病毒作用后,使病毒失去感染的能力,一种病毒只能被相应的免疫血清所中和,中和一定量的病毒的感染力必须有一定效价的中和抗体。根据稀释成分不同可分为两种方法。一为固定病毒用量(100TCID50)与等量一系列倍比稀释的血清进行中和试验,以血清中和抗体滴度表示。二为固定血清用量与等量一系列对数稀释的病毒进行中和试验。结果以中和指数表示。

三、实验材料

VSV免疫动物血清(S1、S3)、患者血清(S2)、100TCID50 VSV病毒悬液、稀释液、40孔平底细胞板、Hep-2细胞一瓶、吸管、加样器等。

四、实验步骤

1、40孔板每孔加稀释液100μl,作好标记,按图进行。每块板做2个血清

标本:S1、S2。

S对照1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 C对照V对照

2、取1:10灭活血清,第一孔加入100μl,吹吸三次后吸出100μl加入第二孔,吹吸三次吸出100μl加入第三孔,依次直至第八孔,吸出100μl弃去。第九孔细胞对照,第十孔病毒对照均不加血清。

3、预先配好100TCID50VSV病毒悬液,按照每孔100μl加入,C对照及S对照(即第1、9孔)不加病毒,V对照加100TCID50100μl。最后每孔总量200μl,C对照及S对照补充稀释液100μl/孔。

4、37℃作用1小时。

5、利用此1小时制备Hep-2细胞悬液并加入上述混合液中。

Hep-2一瓶,PBS洗涤二次VTP 1ml消化约5min后倾去37℃至细胞从玻璃瓶脱落加营养液6ml,细胞计数,成1×106/ml,每孔加100μl细胞悬液。37℃CO2孵育,48h观察结果。

六、实验结果

用倒置显微镜观察。首先观察对照:V对照(+++~++++);S对照(-/±);C对照(-)。以病变作为指标,能抑制病毒CPE的血清最高稀释度为中和抗体的效价(滴度)

烘焙实验报告撰写具体内容及要求

实验一:面包制作 1. 实验目的 通过实验进一步熟悉面包生产工艺,掌握面包制作技术及相关原理。 2. 面团形成和发酵的基本原理 【补充】 3.面包的配方 4. 实验仪器 和面机、醒发箱、烤箱、冰箱、台称及其他食品制作小工具。 5.制作工艺及操作步骤 面包一次发酵法制作工艺流程:【补充】 操作步骤如下: (1)称料(按配方百分比计量称重) (2)调整加水水温。“水温=3×面团理想温度-室温-面粉温度-和面摩擦升温”(测定室温、面粉温度,确定面团理想温度,和面升温,计算出加水水温)(3)投料:粉→酵母→干搅匀→糖、面包改良剂→干搅匀→加水(边加水边搅拌)(4)搅拌:慢速搅拌,至无粉粒(约2min),加入融化的黄油慢速搅拌lmin,快速搅拌(约10~12min),面团受拉,形成薄膜。 (5)切割:切割成450g重面团。注意:称重时加减面团要切,不应拉面团,以免破坏已形成的面筋网络。 (6)搓团:将切好的面团搓成圆形。表面要形成光滑,无接口,接口放在底部。 (7)舒缓:将搓圆后的面团放在工作台上,用塑料布盖住,静止约15min。 (8)成型:将舒缓好的面团放入成型机内(压片→卷折→成型);或将面团用杆面

仗压成面片状,将面片卷折2.5圈以上,再顺搓,成长型面包坯。 (9)装模:将做好的面包坯装入模盒内。 (10)醒发:将模盒放在烤盘内,一起送入醒发箱。醒发时间约1h,箱内温度:约35℃。醒发后的面团两边与模盒相平。 (11)焙烤:将醒发后的面团送入烤箱。上火:180℃,下火:210℃,时间:25min 6.面包评分【附产品外观和切面组织图片】 按面包评分标准,逐一评述。如: 面包表皮色泽为棕黄,有斑点且无光泽,4分; …….. 7.结果分析分析影响面包品质的因素。 结合评分结果分析影响面包品质的因素【参考《食品工艺学》】 附:面包评分标准 1.表皮色泽(5分) (1) 棕黄、金黄、红棕、浅棕色; 5分 若有斑点、无光泽、不均匀扣0.5分。 (2) 棕黄、棕色、浅褐色; 4分 若有斑点、无光泽、不均匀扣0.5分。 (3) 棕灰、褐灰。 3分 (4) 灰白或焦黑色 2分 (5) 灰白或焦黑色并呈塌陷状 1分 2.表皮质地与面包形状(5分) (1) 冠大,预极明显,无裂纹,平滑无斑 5分 不平滑,厚而硬,有裂纹扣0.5分。 (2) 冠中等,颈短,表皮光洁平滑无斑点。 4分 (3) 冠小,颈短,表皮光洁平滑无斑点。 3分 表皮不光洁,不平滑扣0.5分。 (4) 冠不显示,无颈,塌陷。 2分 (5) 无冠,无颈,塌陷。 1分 3.面包心色泽(5分) (1) 洁白、乳白并有丝样光泽; 5分 无丝样光泽扣除0.5分。

酵母菌酒精发酵实验报告

实验方案 酵母菌酒精发酵的条件研究 学院(部):生物与化学工程学院 专业:生物工程 学生姓名:鑫 学号:11018150 班级:生物工程二班 指导教师:肖

一、实验目的 1、学会实验的设计和操作过程 2、找到酵母菌发酵时的最优条件 二、培养基和实验方法及材料的确定 1、玉米粉的糖化方法 玉米粉的糖化采用双酶法,其工艺流程如下 玉米粉→加水→液化→糖化→发酵→蒸馏→成品酒精 试验中,发酵培养按照三角瓶100ml培养。本次工做20组是要,共需发酵液20*100=2000ml。培养液按照100g玉米粉、300ml水。所以共需玉米粉700g。 液化:取100g玉米粉,加入300mL的水,液化温度为90℃,pH值为5.5,液化时间为3.5h,液化酶的添加量为0.035g/100 g玉米粉 糖化:糖化时的工艺条件为:糖化温度为58℃,pH值为4.5,糖化时间为3.5h,糖化酶的添加量为0.3g/100g玉米粉。 2、活化培养基 本实验在进行实验时采用察氏(czapck)培养基的配制,配方如下表一: 表一 3、扩大培养基 扩大培养仍然用察氏(czapck)培养基,由于要用液体的,所 以将其中的琼脂配料去掉。 4、发酵培养基

糖化液稀释至l0%浓度,添加辅料(硫酸铵0.4%),pH5.5 灭菌 三、培养基的制备及酵母的活化 1、准备酵母母菌一支常温下存放一天,增加菌种的活力。在母菌存放期间制作各时期培养基 2、准备固体培养基(察氏培养基)50ml,做成8支试管斜面,扩大培养基800ml(做扩大培养时使用)。做成8个三角瓶,每瓶200ml。120℃灭菌30min。 3、发酵液的制备 (1)玉米粉的筛选 实验前准备粉碎后的玉米粉700g。 (2)玉米粉的液化 按照100g玉米粉、300ml水的配比对玉米粉进行液化,液化方案上文已经交代。在1000ml烧杯里,或者500ml烧杯分两次,水浴液化。 器材:烧杯500ml两个,玻璃棒一个,水浴锅一个,糖化酶0.225g 步骤:1、将糖化酶,玉米粉,水按照比例配置好在烧杯里。2、将配好的玉米液放于水浴锅中90℃液化3.5h。边液化边搅拌。 (3)玉米粉的糖化 将液化后的玉米液中按照0.3g/100ml加入液化液中。再在水浴锅中,58℃糖化3.5h。 (4)过滤 糖化后的糖化液有可能有没有彻底液化的玉米颗粒,会造成浑浊,这时需要对糖化液进行过滤操作。 操作步骤: 最后与以上培养基一起进行灭菌处理。灭菌时,清洗16支移液管,与培养基一起灭菌。 (5)活化步骤 器材:酒精灯,接种针,母菌,斜面培养基,消毒酒精。 步骤:1、将器材放于实验台上。对双手合桌面进行灭菌。对接种针进行灼烧灭菌。2、在酒精灯旁按照无菌操作步骤在酒精灯火焰旁取

原代细胞培养与分离

原代细胞的培养与建系 凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。细胞的纯化或细胞克隆技术是细胞培养工作的基础。 原代细胞的取材 人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件,直接影响细胞的体外培养。 一、取材的基本要求 .1.取材要注意新鲜和保鲜 .2.应严格无菌 .3.防止机械损伤 .4.去除无用组织和避免干燥 .5.应注意组织类型、分化程度、年龄等 .6.作好记录 二、各类组织的取材技术 皮肤和粘膜的取材 内脏和实体瘤的取材 血液细胞的取材 骨髓、羊水、胸/腹水细胞取材 动物组织取材 人胚体组织取材 鸡(鸭)鸟类胚胎组织取材鸡(鸭)鸟类胚胎组织取材 皮肤和粘膜的取材 主要取自于手术过程中的皮片,方法似外科取断层皮片手术操作,但面积一般2~4平方厘

米。 内脏和实体瘤的取材 内脏除消化道外基本是无菌的,但取材时要明确和熟悉所需组织的类型和部位,实体瘤取材时要取肿瘤细胞丰富的区域,要避开破溃、坏死液化部分,以防污染,尽量去除混杂的结缔组织。 血液细胞的取材 血细胞、淋巴细胞的取材,一般多抽取静脉外周血,或从淋巴组织中(如脾、扁桃体、胸腺、淋巴结等)分离细胞,取材时应注意抗凝。 骨髓、羊水、胸/腹水细胞取材 严格无菌,注意抗凝,还要尽快分离培养,离心后,用无钙、镁PBS洗两次,再用培养液洗一次后即可培养,不宜低温存放。 动物组织取材 1、鼠胚组织取材 首先用引颈或气管窒息致死法处死孕期合适的动物,然后将其整个浸泡在含有75%酒精的烧杯中,5分钟后(注意时间不能太长,以避免酒精从口或其他通道进入体内,影响组织活力),取出动物,在消毒过的木板上可用无菌的图钉或大头针固定四肢,切开皮肤,用无菌操作法解剖取胚或用无菌止血钳挟起皮肤、用无菌眼科剪沿躯干中部环形剪开皮肤,用止血钳分别挟住两侧皮肤拉向头尾,把动物反包,暴露躯干,然后再固定,更换无菌解剖器材,采用无菌操作法解剖取出胚胎。 2、幼鼠胚肾(或肺)取材 幼鼠采用上述方法处死消毒后,腹部朝上固定在木板上,先切开游离毛皮并拉开至两侧:然后采用无菌法打开胸腔取肺,或背部朝上固定在木板上,先将背部毛皮切开游离并拉向两侧,

教育实验报告范例

教育实验报告例 1、菊珍、华山:《改善大学生人际交往不良现状的团体辅导实验研究》,载《教育研究与实 验》,2005年第2期。 改善大学生人际交往不良现状的团体辅导实验研究 菊珍、华山 容摘要:本研究通过前测,选取存在人际交往困扰的大学生40人,随机分成实验组和对照组,对实验组按照自行制定的辅导方案,进行14次人际交往团体辅导,用青年性格问卷和大学生人际关系综合诊断量表,结合他评和自评,对辅导效果进行评估。结果表明,人际交往团体辅导对减轻大学生人际交往困扰,增强大学生人际适应能力具有良好的效果。 关键词:大学生人际交往团体辅导 一、研究过程 (一)测试工具 本研究以“青年性格问卷”和“大学生人际关系综合诊断量表”为主要测量工具。“青年性格问卷”是前人根据“加里弗尼业心理测验表”修订而成的,“大学生人际关系综合诊断量表”是由师大学日昌等编制的。 (二)被试选定与分组 本研究以冶金职业技术学院40名存在人际交往困难的大学生为被试。将筛选出来的40名学生随机分成甲乙两组,每组20人。甲组为实验组,乙组为对照组。实验组又随机分为两个小组,每一小组10人,接受完全相同的辅导。为了更好地引导实验组成员适时暴露自己,分析自我,特意安排10个交往正常的大学生加人实验组,一个小组5人。他们在上述心理测验中,未表现出明显的交往困扰,但研究者要求他们参加团体辅导,他们也愿意协助辅导老师开展工作他们在前后测中得分不参与统计分析。乙组则未安排任何形式的辅导。(三)前期调查 辅导前运用自编“大学生人际交往制约因素调查表”,对40名实验对象进行调查,以了解妨碍大学生人际交往的主要因素,为制定团体辅导方案提供依据。本调查表共列出17个不利于交往的心理因素,由被调查者选出其中5个,同时允许其予以补充。 (四)制定辅导方案 辅导分为两类,一类为主题讨论、人为情境训练,共9次,每次分为理论研讨、情境训练和行动作业三个环节。另一类为真实情境训练活动。 (五)实施团体辅导 对实验组实施14次团体辅导,持续7周。 (六)实施后测 团体辅导结束后,用“青年性格问卷”和“大学生人际关系综合诊断量表”对实验组和对照组实施后测。 (七)统计分析 运用王建中教授开发的WJZ心理测量和统计软件对前后测数据进行统计分析,结合师生评价、自我评价,评估团体辅导方案及其实施的有效性。 二、结果 (一)“大学生人际交往制约因素调查表”统计结果 (二)青年性格问卷统计结果 (三)大学生人际关系综合诊断量表统计结果

上机实验内容及实验报告要求

上机实验内容及实验报告要求 本文从网络收集而来,上传到平台为了帮到更多的人,如果您需要使用本文档,请点击下载按钮下载本文档(有偿下载),另外祝您生活愉快,工作顺利,万事如意! 上机实验内容及实验报告要求 一、《软件技术基础》上机实验内容 1.顺序表的建立、插入、删除。 2.带头结点的单链表的建立(用尾插法)、插入、删除。 二、提交到个人10M硬盘空间的内容及截止时间 1.分别建立二个文件夹,取名为顺序表和单链表。 2.在这二个文件夹中,分别存放上述二个实验的相关文件。每个文件夹中应有三个文件(.C文件、.OBJ 文件和.EXE文件)。 3.截止时间:12月28日(18周周日)晚上关机时为止,届时服务器将关闭。 三、实验报告要求及上交时间(用A4纸打印) 1.格式: 《计算机软件技术基础》上机实验报告 用户名se××××学号姓名学院 ①实验名称: ②实验目的:

③算法描述(可用文字描述,也可用流程图): ④源代码:(.C的文件) ⑤用户屏幕(即程序运行时出现在机器上的画面): 2.对C文件的要求: 程序应具有以下特点:A可读性:有注释。 B交互性:有输入提示。 C结构化程序设计风格:分层缩进、隔行书写。 3.上交时间:12月26日下午1点-6点,工程设计中心三楼教学组。请注意:过时不候哟! 四、实验报告内容 0.顺序表的插入。 1.顺序表的删除。 2.带头结点的单链表的插入。 3.带头结点的单链表的删除。 注意:1.每个人只需在实验报告中完成上述4个项目中的一个,具体安排为:将自己的序号对4求余,得到的数即为应完成的项目的序号。 例如:序号为85的同学,85%4=1,即在实验报告中应完成顺序表的删除。 2.实验报告中的源代码应是通过编译链接即可运

最新实验报告-探究培养液中酵母菌种群数量的变化

实验报告: 探究培养液中酵母菌种群数量的变化 班级姓名小组年月日 一、实验目的: 1、通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化,来研究一个种群的数量变化情况,尝试构建种群增长的数学模型。 2、通过使用血球计数板掌握单细胞生物的计数方法。 二、实验原理: 1、酵母菌可以用液体培养基来培养,培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、PH、温度等因素有关,我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线,从而掌握酵母菌种群数量的变化情况。 2、利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法,这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目,所以一般用于单细胞微生物数量的测定,由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的,所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目。 三、实验材料:酵母菌菌种,无菌马铃薯培养液或肉汤培养液。 四、实验用具:无菌水,试管,棉塞,恒温培养箱,显微镜,无菌滴管,无菌移液管,小烧杯或小试管,血球计数板(2mm×2mm×0.1mm)、纱布、滤纸、镊子、盖玻片。 五、方法步骤: 1、取相同洁净试管若干支,分别加入5ml马铃薯培养液,塞上棉塞。 2、用高压锅进行高压蒸汽灭菌后,标记甲、乙、丙等。 3、将酵母菌母液分别加入试管甲、乙、丙,各5ml,摇匀后用血球计数板计数起始酵母液个数,做好记录。 4、将各试管送进恒温箱,25℃下培养7天。 5、每天时间,各组取出本组的试管,用血球计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察7天。 六、实验记录表 根据表格数据绘图: 七、实验结论:培养液酵母菌种群数量随时间呈型增长变化。 数 量 时间

原代细胞培养实验(药理)

一.细胞培养的基本原理 细胞培养是用酶消化法将组织碎块分离成单个细胞,用培养基制成细胞悬液,在体外适宜条件下,使细胞生长繁殖,并保留其一定的结构和功能特性。细胞培养与组织培养、器官培养主要不同点在于原始培养的对象不同。细胞培养使用的是单个细胞悬液,组织培养使用的是组织块(0.5~1立方毫米)或薄片(厚0.2毫米),而器官培养使用的是器官原基或器官的一部分或整个器官。在组织培养中,细胞自组织块周围移出并生长,细胞在生长过程中总有移动(运动)或其它变动,这样就使被培养的组织难以长期维持其原有的结构和功能。培养时间越长,发生变化的可能性越大,结果常使单一类型的细胞保存下来,最终成了细胞培养。在细胞培养中,细胞生命活动和体内细胞一样,仍然是相互依存的,呈现一定的组织特异性,所以组织培养和细胞培养实际上无严格区别。 细胞培养技术是生命科学中常用的研究手段,该方法能排除神经体液因素的影响及肝、肾解毒功能的干扰,观察某些因素或药物对培养细胞的直接作用。通过实验可获得某一类型细胞的纯培养。如心肌组织中心肌细胞约占50%,非心肌细胞占50%;而经纯化分离的心肌细胞悬液中,心肌细胞可达95%以上,这样,心肌细胞原代培养实验基本不受其它细胞的干扰。在细胞培养实验中能直接观察到培养细胞生命活动的动态过程;用定时显微摄影记录可发现一些肉眼观察不到的生命现象;还可利用电镜手段、同位素标记、放免法和免疫组化法等来研究细胞形态结构及细胞内化学物质的分布。此外,还能节约研究费用。如在某些研究中,用100只动物做实验所获得结论与用100张盖玻片或几十个培养瓶而获得结论具有相同的统计学意义,而细胞培养较之大批量的动物饲养花费要小。 但细胞培养方法也存在不足之处:培养细胞失去体内细胞的制约和整体的调节作用,细胞形态和功能会发生一定程度的改变。培养方法、实验试剂对细胞形态和功能有一定的影响,如胰蛋白酶可破坏细胞表面受体、酶、抗原等。长期体外培养的细胞,由于反复传代、冻存和操作等因素的影响,可能发生染色体非整倍体改变,呈永生化或癌变的特征。 二.细胞培养的基本设备与用品 (1)细胞培养的基本设备 细胞培养的基本设备有:CO2培养箱,倒置显微镜,净化台,压力蒸汽消毒器,自动双重纯水蒸馏器,液氮罐,冰箱,电热干燥箱,电热恒温培养箱,电动吸引器,抽气泵等。 (2)常用的实验用品 1.玻璃器皿 细胞培养所用的玻璃器皿应由透明度好、无毒的中性硬质玻璃制成。常用的有以下几种:国产螺旋口培养瓶[有12.5毫升,25毫升,100毫升等规格,国外培养瓶常以底面积(平方厘米)表示];培养皿(直径有3.5厘米,6厘米,9厘米,10厘米等规格);离心管(5毫升,10毫升);注射器(1毫升,5毫升等);用生理盐水瓶代替的贮存瓶(100毫升,250毫升,500 毫升);青霉素瓶(5毫升);西力辛瓶(10毫升);其它还有尖吸管和移液管,载玻片(厚度0.8~1.2毫米),盖玻片(厚度0.12毫米),贮存尖吸筒用的玻璃筒或金属筒,漏斗,烧杯,量筒,贮蒸馏水瓶,冷冻管(1.5毫升,2毫升)等。

物理实验报告格式范文

物理实验报告格式范文 一、实验目的 二、实验仪器和器材(要求标明各仪器的规格型号) 三、实验原理:简明扼要地阐述实验的理论依据、计算公式、画出电路图或光路图 四、实验步骤或内容:要求步骤或内容简单明了 五、数据记录:实验中测得的原始数据和一些简单的结果尽可能用表格形式列出,并要求正确表示有效数字和单位 六、数据处理:根据实验目的对测量结果进行计算或作图表示,并对测量结果进行评定,计算误差或不确定度. 七、实验结果:扼要地写出实验结论 八、误差分析:当实验数据的误差达到一定程度后,要求对误差进行分析,找出产生误差的原因. 九、问题讨论:讨论实验中观察到的异常现象及可能的解释,分析实验误差的主要来源,对实验仪器的选择和实验方法的改进提出建议,简述自己做实验的心得体会,回答实验思考题. 物理探究实验:影响摩擦力大小的因素 技能准备:弹簧测力计,长木板,棉布,毛巾,带钩长方体木块,砝码,刻度尺,秒表。 知识准备: 1. 二力平衡的条件:作用在同一个物体上的两个力,如果大小相等,方向相反,并且在同一直线上,这两个力就平衡。 2. 在平衡力的作用下,静止的物体保持静止状态,运动的物体保持匀速直线运动状态。 3. 两个相互接触的物体,当它们做相对运动时或有相对运动的趋势时,在接触面上会产生一种阻碍相对运动的力,这种力就叫摩擦力。 4. 弹簧测力计拉着木块在水平面上做匀速直线运动时,拉力的大小就等于摩擦力的大小,拉力的数值可从弹簧测力计上读出,这样就测出了木块与水平面之间的摩擦力。

探究导引 探究指导: 关闭发动机的列车会停下来,自由摆动的秋千会停下来,踢出去的足球会停下来,运动的物体之所以会停下来,是因为受到了摩擦力。 运动物体产生摩擦力必须具备以下三个条件:1.物体间要相互接触,且挤压;2.接触面要粗糙;3.两物体间要发生相对运动或有相对运动的趋势。三个条件缺一不可。 摩擦力的作用点在接触面上,方向与物体相对运动的方向相反。由力的三要素可知:摩擦力除了有作用点、方向外,还有大小。 提出问题:摩擦力大小与什么因素有关? 猜想1:摩擦力的大小可能与接触面所受的压力有关。 猜想2:摩擦力的大小可能与接触面的粗糙程度有关。 猜想3:摩擦力的大小可能与产生摩擦力的两种物体间接触面积的大小有关。 探究方案: 用弹簧测力计匀速拉动木块,使它沿长木板滑动,从而测出木块与长木板之间的摩擦力;改变放在木块上的砝码,从而改变木块与长木板之间的压力;把棉布铺在长木板上,从而改变接触面的粗糙程度;改变木块与长木板的接触面,从而改变接触面积。 物理实验报告 .化学实验报告 .生物实验报告 .实验报告格式 .实验报告模板 探究过程: 1. 用弹簧测力计匀速拉动木块,测出此时木块与长木板之间的摩擦力:0.7N 2. 在木块上加50g的砝码,测出此时木块与长木板之间的摩擦力:0.8N 3. 在木块上加200g的砝码,测出此时木块与长木板之间的摩擦力:1.2N 4. 在木板上铺上棉布,测出此时木块与长木板之间的摩擦力:1.1N 5. 加快匀速拉动木块的速度,测出此时木块与长木板之间的摩擦力:0.7N 6. 将木块翻转,使另一个面积更小的面与长木板接触,测出此时木块与长木板之间的摩擦力:0.7N 探究结论:

计算机上机实验内容及实验报告要求

计算机上机实验内容及实验报告要求 一、《软件技术基础》上机实验内容 1.顺序表的建立、插入、删除。 2.带头结点的单链表的建立(用尾插法)、插入、删除。 二、提交到个人10m硬盘空间的内容及截止时间 1.分别建立二个文件夹,取名为顺序表和单链表。 2.在这二个文件夹中,分别存放上述二个实验的相关文件。每个文件夹中应有三个文件(.c文件、.obj文件和.exe文件)。 3. 截止时间:12月28日(18周周日)晚上关机时为止,届时服务器将关闭。 三、实验报告要求及上交时间(用a4纸打印) 1.格式: 《计算机软件技术基础》上机实验报告 用户名se××××学号姓名学院 ①实验名称: ②实验目的: ③算法描述(可用文字描述,也可用流程图): ④源代码:(.c的文件) ⑤用户屏幕(即程序运行时出现在机器上的画面): 2.对c文件的要求: 程序应具有以下特点:a 可读性:有注释。 b 交互性:有输入提示。 c 结构化程序设计风格:分层缩进、隔行书写。 3. 上交时间:12月26日下午1点-6点,工程设计中心三楼教学组。请注意:过时不候哟! 四、实验报告内容 0.顺序表的插入。

1. 顺序表的删除。 2.带头结点的单链表的插入。 3. 带头结点的单链表的删除。 注意:1. 每个人只需在实验报告中完成上述4个项目中的一个,具体安排为:将自己的序号对4求余,得到的数即为应完成的项目的序号。 例如:序号为85的同学,85%4=1,即在实验报告中应完成顺序表的删除。 2. 实验报告中的源代码应是通过编译链接即可运行的。 3. 提交到个人空间中的内容应是上机实验中的全部内容。

实验四 酵母菌细胞大小的测定

时间:2014年4月21日班级:食检133 学号:1201131344 姓名:袁蕊 实验四酵母菌细胞大小的测定 一、实验目的 1. 了解测量微生物大小的原理; 2. 学习并掌握接目测微尺的校正方法及微生物大小的测定方法,增强微生物细胞大小的感性认识。 二、实验原理 微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征,也是分类鉴定的依据之一。微生物细胞个体较小,需要在显微镜下借助于特殊的测量工具—测微尺来测定其大小。测微尺包括镜台测微尺和接目测微尺。 镜台测微尺是一张中央部分刻有精确等分线的载玻片,专门用于校定接目镜测微尺每小格的相对长度。通常,刻度的总长是1mm,被等分为100格,每格0.01mm(即10μm)。镜台测微尺不直接用来测量细胞的大小。 接目测微尺是一块可以放入接目镜的圆形小玻片,其中央有精确的等分刻度,有等分为50小格和100小格的两种。在测量时将接目测微尺放在目镜的隔板上,即可来测量经显微镜放大后的细胞物象。也有专用的目镜,里面已经安放好了接目测微尺。 由于接目测微尺所测量的是经显微镜放大后的细胞物象,因此,在不同的显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同,接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度也不一样。所以,在用接目测微尺测量微生物大小之前,必须先用镜台测微尺校定接目镜测微尺,以确定该显微镜在特定放大倍数的目镜和物镜下,接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度,然后根据微生物细胞相当于的接目镜测微尺格数,计算出微生物细胞的实际大小。 三、实验仪器及试剂 1. 菌种:酵母菌悬液 2. 仪器或其他用具:显微镜,接目测微尺,镜台测微尺,载玻片,盖玻片 四、实验步骤 1. 装接目测微尺:取下显微镜的目镜,换上专用目镜。如果没有专用的目镜,则取下显微镜的目镜,旋下透镜,将接目镜测微尺刻度朝下放在接目镜的隔板上,再旋上目镜透镜,将装有测微尺的目镜装回镜筒。 2. 接目测微尺的标定: 1) 放镜台测微尺:将镜台测微尺刻度面朝上固定在显微镜的载物台上,注意不可放反。 2) 标定:将低倍镜转入光路,镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央,调节焦距,当清晰地看到镜台测微尺的刻度后,转动目镜使接目测微尺与镜台测微尺的刻度相平行。利用移动钮移动镜台测微尺,使两尺在某一区域内两线完全重合,然后分别数出两重合线之间镜

实验报告-细胞原代培养实验

细胞生物学实验报告 实验三细胞原代培养 1引言 1.1 实验目的 1. 理解细胞原代培养原理。 2. 了解细胞原代培养的应用。 3. 独立进行鼠胚和鸡胚细胞原代培养操作。 4. 巩固无菌操作技术。 1.2 实验原理 细胞原代培养:原代培养组织直接从机体获取后,通过组织块长出单层细胞或者用酶消化或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养,严格意义上的原代培养指在首次传代前的培养,但通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。 2实验仪器、试剂及操作步骤 2.1 实验仪器 超净工作台、倒置相差显微镜、CO2培养箱、酒精灯、酒精棉球、酒精喷壶、试管架、滴管筒 (头)、废液缸、手术小直剪刀、眼科直镊子、眼科弯镊子、玻璃平皿、培养瓶等 2.2 实验试剂 DMEM培养基、D-Hanks缓冲液、血清、抗生素、胰蛋白酶消化液等 2.3 实验材料 动物:9至12日龄的鸡胚、15日龄的鼠胚 2.4 实验步骤 A.鸡胚成纤维细胞的原代培养 1.实验室和超净工作台消毒,紫外照射20Min左右。 2.穿好实验服,进无菌室前穿鞋套、洗手。 3.关闭紫外灯,开日光灯和开风机,超净工作台台面应整洁,用75%酒精擦双手消毒,擦拭台面。 4.在D-Hanks缓冲液中按1:100的比例加入双抗。 5.取9-12日龄鸡胚,用照蛋器照检,画出气室边界和胎位。将鸡胚置于鸡卵架上,用酒精棉球擦拭蛋 壳。 6.用镊子在鸡蛋气室位置敲一道划痕,然后用镊子小心去除气室部位的蛋壳。 7.换用洁净的无菌镊子揭开膜,取出鸡胚至灭菌的培养皿中,用D-Hanks缓冲液冲洗鸡胚。 8.用眼科剪去除鸡胚的头部、四肢以及内脏,然后用D-Hanks缓冲液充分洗涤躯干。 9.将躯干置于小平皿盖中,用D-Hanks缓冲液至少洗涤3次,充分弃除红细胞。 10.用无菌眼科小剪刀将鸡胚躯干剪成1mm3的碎块。在胚胎组织块中加入1mL的胎牛血清,用滴管吸取组 织块接种到培养瓶内。在培养瓶中放置10-15个组织块。 11.在培养瓶的另一侧面加入完全培养基,注意不要冲到组织块。将接种组织块的培养瓶面朝上在

实验报告1windows的基本操作范例

实验名称:Windows的基本操作 一、实验目的 1.掌握桌面主题的设置。 2.掌握快捷方式的创建。 3.掌握开始菜单的组织。 4.掌握多任务间的数据传递——剪贴板的使用。 5.掌握文件夹和文件的创建、属性查看和设置。 6.掌握文件夹和文件的复制、移动和删除与恢复。 7.熟悉文件和文件夹的搜索。 8.熟悉文件和文件夹的压缩存储和解压缩。 二、实验环境 1.中文Windows 7操作系统。 三、实验内容及步骤 通过上机完成实验4、实验5所有内容后完成该实验报告 1.按“实验4--范例内容(1)”的要求设置桌面,将修改后的界面复制过来。 注:没有桌面背景图“Autumn”的,可选择其它背景图。 步骤:在桌面空白区域右击,选择菜单中的“个性化”,在弹出的窗口中点击“桌面背景”,在背景栏内选中“某一张图片”,单击“确定”。 修改后的界面如下图所示: 2.将画图程序添加到“开始”菜单的“固定项目列表”上。 步骤:右击“开始/所有程序/附件”菜单中的画图程序项,在弹出的快捷菜单中选“附到「开始」菜单”命令。 3.在D盘上建立以“自己的学号+姓名”为名的文件夹(如01108101刘琳)和其子文件 夹sub1,然后:

步骤:选定D:\为当前文件夹,选择“文件/新建/文件夹”命令,并将名字改为“学号+姓名”;选定“ D:\学号+姓名”为当前文件夹,选择“文件/新建/文件夹”命令,并将名字改为“sub1” ①在C:\WINDOWS中任选2个TXT文本文件,将它们复制到“学号+姓名”文件夹中;步骤:选定“C:\WINDOWS”为当前文件夹,随机选取2个文件, CTRL+C复制,返回“D:\学号+姓名”的文件夹,CTRL+V粘贴 ②将“学号+姓名”文件夹中的一个文件移到其子文件夹sub1中; 步骤:选定“ D:\学号+姓名”为当前文件夹,选中其中任意一个文件将其拖拽文件到subl ③在sub1文件夹中建立名为“”的空文本文档; 步骤:选定“ D:\学号+姓名\ sub1”为当前文件夹,在空白处单击右键,选择“新建\文本文档”,把名字改为test,回车完成。 ④删除文件夹sub1,然后再将其恢复。 步骤:选定“ D:\学号+姓名”为当前文件夹,右键单击“sub1”文件夹,选择“删除”,然后打开回收站,右键单击“sub1”文件夹,在弹出的快捷菜单中选择“还原”。 4.搜索C:\WINDOWS\system文件夹及其子文件夹下所有文件名第一个字母为s、文件长 度小于10KB且扩展名为exe的文件,并将它们复制到sub1文件夹中。 步骤:选定“ C:\WINDOWS\system”为当前文件夹,单击“搜索”按钮,在左侧窗格选择“所有文件和文件夹”,在“全部或部分文件名”中输入“s*.exe”,在“大小”中,选择“0~10KB”。 5.用不同的方法,在桌面上创建名为“计算器”、“画图”和“剪贴板”的三个快捷方式, 它们应用程序分别为:、和。并将三个快捷方式复制到sub1文件夹中。 步骤:①在"开始"菜单的"所有程序"子菜单中找到"计算器",单击右键,在弹出的快捷菜单中选择“发送到\桌面快捷方式”。 ②在"开始"菜单的"所有程序"子菜单中找到"画图",将其拖至桌面空白处。 ③在桌面上单击右键,在弹出的快捷菜单中选择“新建\快捷方式”,在“创建快捷方式”

计算机上机实验内容及实验报告要求(完整版)

报告编号:YT-FS-1915-76 计算机上机实验内容及实验报告要求(完整版) After Completing The T ask According To The Original Plan, A Report Will Be Formed T o Reflect The Basic Situation Encountered, Reveal The Existing Problems And Put Forward Future Ideas. 互惠互利共同繁荣 Mutual Benefit And Common Prosperity

计算机上机实验内容及实验报告要 求(完整版) 备注:该报告书文本主要按照原定计划完成任务后形成报告,并反映遇到的基本情况、实际取得的成功和过程中取得的经验教训、揭露存在的问题以及提出今后设想。文档可根据实际情况进行修改和使用。 一、《软件技术基础》上机实验内容 1.顺序表的建立、插入、删除。 2.带头结点的单链表的建立(用尾插法)、插入、删除。 二、提交到个人10m硬盘空间的内容及截止时间 1.分别建立二个文件夹,取名为顺序表和单链表。 2.在这二个文件夹中,分别存放上述二个实验的相关文件。每个文件夹中应有三个文件(.c文件、.obj 文件和.exe文件)。 3.截止时间:12月28日(18周周日)晚上关机时为止,届时服务器将关闭。 三、实验报告要求及上交时间(用a4纸打印)

1.格式: 《计算机软件技术基础》上机实验报告 用户名se××××学号姓名学院 ①实验名称: ②实验目的: ③算法描述(可用文字描述,也可用流程图): ④源代码:(.c的文件) ⑤用户屏幕(即程序运行时出现在机器上的画面): 2.对c文件的要求: 程序应具有以下特点:a 可读性:有注释。 b 交互性:有输入提示。 c 结构化程序设计风格:分层缩进、隔行书写。 3.上交时间:12月26日下午1点-6点,工程设计中心三楼教学组。请注意:过时不候哟! 四、实验报告内容 0.顺序表的插入。 1.顺序表的删除。

细胞原代培养细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告 细胞原代培养 姓名: 学号: 班级: 专业: 同组成员: 一、实验原理

细胞培养是生物学和医学研究中最常用的手段之一,可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养。由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段。同时也为以后传代培养创造条件。 原代培养的方法: 1、组织块法在平皿中用弯头剪把组织尽量剪碎,每个组织块小于1mm3大小。用Hanks 液洗涤2—3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。将组织块贴于培养瓶进行培养。 2、酶消化法将1mm3大小的组织块放入1个三角瓶内加入10—30ml的%的胰蛋白酶。370C磁棒搅拌消化20-30分钟。然后终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液,离心800rpm 5—10分钟收集细胞。弃上清,加入带有双抗的培养基,放入培养瓶培养。 取材注意事项: 取材要注意新鲜和保鲜。取材应严格无菌。取材和原代细胞制作时,要用锋利的器械,如手术刀或剃须刀片切碎组织,尽可能减少对细胞的机械损伤。要仔细去除所取材料上的血液(血块)、脂肪、坏死组织及结缔组织,切碎组织时应避免组织干燥,可在含少量培养液的器皿中进行。取材应注意组织类型、分化程度、年龄等,一般来讲,胚胎组织较成熟个体组织容易培养,分化低的较分化高的组织容易生长,肿瘤组织较正常组织容易培养。 二、实验目的 1、理解细胞原代培养原理 2、熟悉细胞原代培养方法与过程 3、了解细胞原代培养的应用 4、独立进行细胞原代培养操作 三、实验材料 手术小直剪刀、眼科直镊子、眼科弯镊子、玻璃平皿、培养瓶、试管、移液管、巴斯德吸管、废液缸、75%酒精棉球、酒精灯。 动物:9-12日龄的鸡胚蛋 四、实验步骤

教育实验报告范例

教育实验报告范例 1、陈菊珍、刘华山:《改善大学生人际交往不良现状的团体辅导实验研究》,载《教育研究 与实验》,2005年第2期。 改善大学生人际交往不良现状的团体辅导实验研究 陈菊珍、刘华山 内容摘要:本研究通过前测,选取存在人际交往困扰的大学生40人,随机分成实验组和对照组,对实验组按照自行制定的辅导方案,进行14次人际交往团体辅导,用青年性格问卷和大学生人际关系综合诊断量表,结合他评和自评,对辅导效果进行评估。结果表明,人际交往团体辅导对减轻大学生人际交往困扰,增强大学生人际适应能力具有良好的效果。 关键词:大学生人际交往团体辅导 一、研究过程 (一)测试工具 本研究以“青年性格问卷”和“大学生人际关系综合诊断量表”为主要测量工具。“青年性格问卷”是前人根据“加里弗尼业心理测验表”修订而成的,“大学生人际关系综合诊断量表”是由北京师范大学郑日昌等编制的。 (二)被试选定与分组 本研究以湖南冶金职业技术学院40名存在人际交往困难的大学生为被试。将筛选出来的40名学生随机分成甲乙两组,每组20人。甲组为实验组,乙组为对照组。实验组又随机分为两个小组,每一小组10人,接受完全相同的辅导。为了更好地引导实验组成员适时暴露自己,分析自我,特意安排10个交往正常的大学生加人实验组,一个小组5人。他们在上述心理测验中,未表现出明显的交往困扰,但研究者要求他们参加团体辅导,他们也愿意协助辅导老师开展工作他们在前后测中得分不参与统计分析。乙组则未安排任何形式的辅导。 (三)前期调查 辅导前运用自编“大学生人际交往制约因素调查表”,对40名实验对象进行调查,以了解妨碍大学生人际交往的主要因素,为制定团体辅导方案提供依据。本调查表共列出17个不利于交往的心理因素,由被调查者选出其中5个,同时允许其予以补充。 (四)制定辅导方案 辅导分为两类,一类为主题讨论、人为情境训练,共9次,每次分为理论研讨、情境训练和行动作业三个环节。另一类为真实情境训练活动。 (五)实施团体辅导 对实验组实施14次团体辅导,持续7周。 (六)实施后测 团体辅导结束后,用“青年性格问卷”和“大学生人际关系综合诊断量表”对实验组和对照组实施后测。 (七)统计分析 运用王建中教授开发的WJZ心理测量和统计软件对前后测数据进行统计分析,结合师生评价、自我评价,评估团体辅导方案及其实施的有效性。 二、结果 (一)“大学生人际交往制约因素调查表”统计结果 (二)青年性格问卷统计结果

实验报告格式与要求

作业格式要求 一、作业题目 围绕如何学习信息安全专业课程,掌握专业知识等内容自拟题目并进行论述。 二、用纸、页面设置要求 作业应按规定格式用计算机打印,纸张大小一律使用A4复印纸,单面打印。 页面设置:每一面的上方(天头)和下方(地脚)应留边25mm左右,左侧(订口)和右侧(切口)应分别留边317mm左右。页码设置为:插入页码,居中。 三、作业内容打印要求 作业中所有标点符号必须是中文全角逗号、句号。 (一)目录 采用四号字,其中每章题目用黑体字,每节题目用宋体字,并注明各章节起始页码,题目和页码用“……”相连,如下所示: 目录(黑体小3号) (自然空一行) 第一章 XXXXXXXX ……………………………………………1 (黑体小4号) 1.1 XXXXXX ………………………………………………2 (宋体小4号) 1.1.1 XXXXX …………………………………………6 (宋体小4号) 第二章 XXXXXXXXXX ………………………………………40(黑体小4号)(二)正文字体要求 每章题目居中、黑体小三号;每节题目左顶边、宋体四号加黑;每小节题目左顶边、宋体小四号加黑。正文文字用宋体小四号汉字和小四号“Times New Roman”英文字体,每自然段首行缩进2个字符。 (三)行间距要求 每章题目与每节题目之间的行距设置:每章题目后设单倍行距,段后0.5 行。

每节题目与小节题目之间的行距设置:每节题目后设单倍行距,段后0.5 行。 正文行距设置:设多倍行距,设置值为1.25。 (四)正文章节序号编制 章,编写为:第一章,第二章…。 节,编写为:1. 1、1. 2…,2. 1、2. 2…。 小节,编写为:1. 1. 1, 1. 1. 2…。 小节以下层次,先以括号为序,如(1),(2)…;再以圈圈为序,如①, ②…。层次采用如下格式: 例如: 第一章 XXXXXXXX(黑体小三号)(单倍行距,段后0.5行) 1. 1 XXXXXXXX(宋体四号加黑)(单倍行距,段后0.5行) 1.1. 1 xxxxxx(宋体小四号加黑) (首行缩进2个字符)(1)xxxxx(小四号宋体) (首行缩进2个字符)① xxxxxx(小四号宋体) (下一章另起一页) 第二章 XXXXXXXX(黑体小三号)(单倍行距,段后0.5行) 2. 1 XXXXXXXX(宋体四号加黑)(单倍行距,段后0.5行) 2.1. 1 xxxxxx(宋体小四号加黑) (首行缩进2个字符)(1)xxxxx(宋体小四号) (首行缩进2个字符)① xxxxxx(宋体小四号) (五)报告的公式、图与表 公式号以章分组编号,如(2-4)表示第二章的第4个公式。 公式尽量采用公式编辑应用程序输入,选择默认格式,公式号右对齐,公式调整至基本居中。 图与表中的文字小于正文中的文字字号。 图与表以章分组编序号,如图3-5表示第三章的第5幅图。

大学物理实验报告范例

怀化学院 大学物理实验实验报告 系别物信系年级2009专业电信班级09电信1班姓名张三学号09104010***组别1实验日期2009-10-20 实验项目:长度和质量的测量 【实验题目】长度和质量的测量

【实验目的】 1. 掌握米尺、游标卡尺、螺旋测微计等几种常用测长仪器的读数原理和使用方法。 2. 学会物理天平的调节使用方法,掌握测质量的方法。 3. 学会直接测量和间接测量数据的处理,会对实验结果的不确定度进行估算和分析,能正确地表示测量结果。 【实验仪器】(应记录具体型号规格等,进实验室后按实填写) 直尺(50cm)、游标卡尺(0.02mm)、螺旋测微计(0~25mm,0.01mm),物理天平(TW-1B 型,分度值0.1g ,灵敏度1div/100mg),被测物体 【实验原理】(在理解基础上,简明扼要表述原理,主要公式、重要原理图等) 一、游标卡尺 主尺分度值:x=1mm,游标卡尺分度数:n (游标的n 个小格宽度与主尺的n-1小格长度相等),游标尺分度值: x n n 1 -(50分度卡尺为0.98mm,20分度的为:0.95mm ),主尺分度值与游标尺分度值的差值为:n x x n n x =-- 1,即为游标卡尺的分度值。如50分度卡尺的分度值为:1/50=0.02mm,20分度的为:1/20=0.05mm 。 读数原理:如图,整毫米数L 0由主尺读取,不足1格的小数部分l ?需根据游标尺与主尺对 齐的刻线数k 和卡尺的分度值x/n 读取:n x k x n n k kx l =--=?1 读数方法(分两步): (1)从游标零线位置读出主尺的读数.(2)根据游标尺上与主尺对齐的刻线k 读出不足一分格的小数,二者相加即为测量值.即: n x k l l l l +=?+=00,对于50分度卡尺:02.00?+=k l l ;对20分度:05.00?+=k l l 。实际读数时采取直读法读数。 二、螺旋测微器 原理:测微螺杆的螺距为,微分筒上的刻度通常为50分度。当微分筒转一周时,测微螺杆前进或后退mm ,而微分筒每转一格时,测微螺杆前进或后退50=。可见该螺旋测微器的分度值为mm ,即千分之一厘米,故亦称千分尺。 读数方法:先读主尺的毫米数(注意刻度是否露出),再看微分筒上与主尺读数准线对齐的刻线(估读一位),乖以, 最后二者相加。 三:物理天平 天平测质量依据的是杠杆平衡原理 分度值:指针产生1格偏转所需加的砝码质量,灵敏度是分度值的倒数,即n S m =?,它表示 天平两盘中负载相差一个单位质量时,指针偏转的分格数。如果天平不等臂,会产生系统误差,消除方法:复称法,先正常称1次,再将物放在右盘、左盘放砝码称1次(此时被测质量应为砝码质量减游码读数),则被测物体质量的修正值为:21m m m ?= 。 【实验内容与步骤】(实验内容及主要操作步骤) 1. 米尺测XX 面积:分别测量长和宽各一次。 2. 游标卡尺测圆环体积:(1)记下游标卡尺的分度值和零点误差。(2)用游标卡尺测量圆环

实验报告撰写要求正式版

For the things that have been done in a certain period, the general inspection of the system is also a specific general analysis to find out the shortcomings and deficiencies 实验报告撰写要求正式版

实验报告撰写要求正式版 下载提示:此报告资料适用于某一时期已经做过的事情,进行一次全面系统的总检查、总评价,同时也是一次具体的总分析、总研究,找出成绩、缺点和不足,并找出可提升点和教训记录成文,为以后遇到同类事项提供借鉴的经验。文档可以直接使用,也可根据实际需要修订后使用。 1. 实验报告和实验预习报告使用同一份实验报告纸,是在预习报告的基础上继续补充相关内容就可以完成的,不作重复劳动,因此需要首先把预习报告做的规范、全面。 2. 根据实验要求,在实验时间内到实验室进行实验时,一边测量,一边记录实验数据。但是为了使报告准确、美观,此时应该把实验测量数据先记录在草稿纸上。等到整理报告时再抄写到实验报告纸上,以避免错填了数据,造成修改,把报告写得很乱。

3. 在实验中,如果发生实验测量数据与事先的计算数值不符,甚至相差过大,此时应该找出原因,是原来的计算错误,还是测量中有问题,不能不了了之,这样只能算是未完成本次实验。 4. 实验报告不是简单的实验数据记录纸,应该有实验情况分析,要把通过实验所测量的数据与计算值加以比较,如果误差很小(一般5%以下)就可以认为是基本吻合的。如果误差较大就应该有误差分析,找出原因。 5. 在实验报告上应该有每一项的实验结论,要通过具体实验内容和具体实验数据分析作出结论(不能笼统的说验证了某某定理)。

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