白皮松不定芽增殖和生长研究

白皮松育苗技术

白皮松育苗技术 内容提要：白皮松为中国特有树种?树姿优美，树皮奇特，可供观赏，木材可供房屋建筑、家具、X具等用材, 在我培过程中一般多用播种繁殖，育苗地应选择排水良好■地势平坦.土层深厚的沙壤土为好，下面我们就一起来看一看白皮松育苗技术吧！ 白皮松为中国特有树种,树姿优美，树皮奇特，可供观赏，木材可供房屋建筑、家具、文具等用材，在栽培过程中一般多用播种繁殖，弃苗地应选择排水良好，地势平坦、上层深厚的沙壤上为好，下而我们就一起来看一看白皮松疗苗技术吧！

白皮松圃地选择 白皮松幼苗怕涝，冇苗地要选平坦、有排灌条件的地块。重粘土地、盐碱上地、低洼积水地不宜作育苗地。精细整地，冇苗地要深翻整平耙细，施足底肥，如腐熟的圈肥、堆肥。也可将过磷酸钙与饼肥或土杂肥等混合使用，效果更好。整地前每亩撒施10公斤硫酸亚铁粉末，翻入上中进行杀菌消毒。丄地整好后，做成南北向畦田，畦埋高25厘米，畦宽1米，以备播种。

白皮松种子播种 1、种子催芽：处理白皮松种子要用波尔多液浸种消毒，播前用温水（50°C至60'C）浸种催芽或混沙层积催芽, 咧嘴种子数达到种子总数的50%时即可播种。这样出苗壮且整齐，一般在15至20天即可出上发芽。 2、种子播种：播种一般在土壤解冻后10至15天（3月下旬至4月初）为最好。播前畦而浇透水，每10平方米播种1至1. 5公斤，可产苗1500株左右，采用宽幅条播或撒播。播后盖细沙上1至1. 5厘米，每亩用扑草净125 克加25%的可湿性除草瞇250克对水25公斤，用喷雾器洒在苗床上除草。最后在畦面上搭小拱棚增温保湿，提髙岀苗率，出苗前不用浇水。 3、播后管理：因老鼠爱吃松子，在搭拱棚盖薄膜前，要往畦而上撒些老鼠药。苗期管理待幼苗岀齐后，逐渐加大苗床通风时间，通过炼苗增强其抗性。白皮松喜光，但幼苗较耐荫，去掉薄膜后应随即盖上遮阴网，以防高温日灼和立枯病的危害。

细胞培养技术在医药研究中的应用

细胞培养技术在医药研究中的应用 摘要：近年来，动物细胞培养技术在生物制药领域成为最受关注的热点之一，动物细胞培养技术广泛应用于动物细胞高密度培养，推动了现代生物医药 产业的发展。动物细胞培养是指离散的动物活细胞在体外模拟体内的: 生理环境 , 在无菌、适宜的培养条件下生长、繁殖的过程。利用人工培养的动物细胞可以进行科学研究和生物制药, 动物细胞的大规模的培养技术是生物制药中非 常重要的环节。在动物细胞培养过程中, 最重要的是使细胞的培养条件达到最 优化程度, 尽可能消除或减轻环境对细胞的影响, 因此动物细胞培养环境的控 制是细胞培养的关健技术。 关键词：动物细胞培养技术，生物制药，培养条件,人工培养。 自1885 年，Roux 从鸡胚中分离细胞首次建立体外细胞培养; Dulbecco于1943 年创建单层细胞培养已有半个多世纪。因其具有的培养简单、操作方便、消耗少、大量运用等优点，被广泛运用于生命科学的各个领域[1]。全球生物制药技术和市场的迅速发展为动物细胞培养基市场提供了快速成长的发展环境， 并使之保持强劲的发展势头。 1 细胞培养的环境及条件 1.1 无污染的环境 无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件[3]。 1.2 适宜的温度 维持培养细胞旺盛生长, 必须有恒定而适宜的温度。不同种类的细胞对培养温度要求也不同[3]。 1.3 气体环境和氢离子浓度 气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一, 所需气体主要有氧气和二氧化碳[3]。 1.4 适宜的p H 值 每种细胞都有其最适p H 值。p H 值随培养的细胞种类不同而不同, 大多数细胞的适宜pH 为7.2至7.4, 偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响[3]。 1.5 培养基 培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质, 而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境[3]。 1.6 细胞培养外部环境 细胞培养是一种无菌操作技术, 对实验室、常用设施及设备、培养器皿等都有严格的要求[3]。 2 细胞培养无菌操作基本技术无菌操作技术分为: 工作环境及表面、细胞培养所用器皿、培养液与培养细胞的处理。 2.1 工作环境的处理 使用层流超净工作台是最经济有效的手段[3]。 2.2 细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒 消毒方法分为物理灭菌法( 紫外线、湿热、干烤、过滤等), 化学灭菌法( 各种化学消毒剂) 和抗生素三类。[3] 细胞培养基的质量标准及产品质量控制参考国内外细胞培养基产品企业标 准的现状，着重考虑了生物制药用户对产品质量的要求以及《中华人民共和国

白皮松的种植技术

白皮松的种植技术 白皮松为松科松属常绿乔木，高可达30米，胸径达2米。阳性树种，幼树耐半阴；耐寒性不如油松，但耐旱、耐湿和对土壤的适应性均较油松强。它对-30℃的干冷气候、pH值7.5至8的土壤，均能适应；能在石灰岩地区生长，而在排水不良或积水地方不能生长，对二氧化硫及烟尘的污染有较强的抗性。深根性，寿命长。幼树枝条自然分布、稠密均匀，故不必进行修剪整形，就能形成美丽的树冠。它生长较缓慢，一年生苗高仅3厘米至5厘米，10年后高达1米左右。

白皮松的生长习性 生于海拔500-1800米地带。为喜光树种，耐瘠薄土壤及较干冷的气候；在气候温凉、土层深厚、肥润的钙质土和黄土上生长良好。 白皮松为中国特有树种，产于山西（吕梁山、中条山、太行山）、河南西部、陕西秦岭、甘肃南部及天水麦积山、四川北部江油观雾山及湖北西部等地。苏州、杭州、衡阳等地均有栽培。 白皮松的繁殖技术 1、播种繁殖：白皮松一般多用播种繁殖，育苗地应选择排水良好，地势平坦、土层深厚的沙壤土为好。早春解冻后立即播种，可减少松苗立枯病。由于怕涝，应采用高床播种，播前浇足底水，每10平方米用1公斤左右种子，可产苗1000至2000株。撒播后覆土1至1.5厘米，罩上塑料薄膜，可提高发芽率。待幼苗出齐后，逐渐加大通风时间，以至全部去掉薄膜。播种后幼苗带壳出土，约20天自行脱落，这段时间要防止鸟害。幼苗期应搭棚遮阴，防止日灼，入冬前要埋土防寒。小苗主根长，侧根稀少，故移栽时应少伤侧根，否则易枯死。 2、嫁接繁殖：如采用嫩枝嫁接繁殖，应将白皮松嫩枝嫁接到油松大龄砧木上。白皮松嫩枝嫁接到3年至4年生油松砧木上，一般成活率可达85%至95%，且亲和力强，生长快。接穗应选生长健壮的新梢，其粗度以0.5厘米为好。二年生苗裸根移植时要保护好根系，避免其根系吹干损伤，应随掘随栽，以后每数年要转垛一次，以促生须根，有利于定植成活。一般绿化都用10年生以上的大苗。移植以初冬休眠时和早春开冻时最佳，用大苗时必须带

细胞生物学研究技术答案

第四章细胞生物学研究技术 一、填空 C-四-1.一般观察培养的活细胞用相差显微镜，各种细胞工程中显微操作时用激光扫描共焦显微镜、分辨干涉差显微镜，用荧光染料对细胞结构标记后观察用荧光显微镜。 C-四-2.由起始实验材料所进行的细胞培养叫原代培养，对已有细胞进行的继续培养叫传代培养。 C-四-3.由单一类型的细胞所组成的细胞系称为细胞株。 C-四-4.处于对数生长期的细胞群体，当它的细胞数量增加一倍所需要的时间称为群体倍增时间。 C-四-5.两个或两个以上细胞相互接触并合并而形成一个细胞的现象称为细胞融合。 D-四-1.激光扫描共聚焦显微镜的主要用途有：①荧光检测；②细胞结构的三维重现；③显微操作。 D-四-2.细胞器和大分子的离心分离方法常用有：①差速离心；②密度梯度离心。 D-四-3.常用的离心分离方法包括：①差速离心；②密度梯度离心。 D-四-4.双向电泳的操作可以分成两部分，第一步是等电聚焦，第二步是SDS-PAGE 。 二、单项选择 A-四-1.下列显微镜中，可以对活细胞进行观察的是（ C ）。 A 普通光学显微镜 B 荧光显微镜 C 相差显微镜 D 电子显微镜 A-四-2.下列显微镜中，可以用于细胞工程中显微操作的是（ C ）。 A 普通光学显微镜 B 荧光显微镜

C 微分干涉显微镜 D 电子显微镜 A-四-3.下列显微镜中，用于荧光染料标记细胞结构后观察的是（ A ）。 A 荧光显微镜 B 普通光学显微镜 C 相差显微镜 D 电子显微镜 A-四-4.冷冻蚀刻技术是（ B ）样品制备的一种方法。 A 普通光镜 B 透射电镜 C 暗视野显微镜 D 相差显微镜 A-四-5.群体倍增时间越短，表明细胞的增殖速度（ A ）。 A 越快 B 越慢 C 维持不变 D 无关 A-四-6.如果一种细胞在体外不能传代，或者只能传少数几代，就可以将其称为（ A ）。 A 有限性细胞系 B 永生性细胞系 C 转化性细胞系 D 细胞株 A-四-7.如果一种细胞在体外能无限的传代，永远的活下去，就可以将其称为（ B ）。 A 有限性细胞系 B 永生性细胞系 C 转化性细胞系 D 细胞株 B-四-1.有关体外培养细胞，下列说法不正确的是（ D ）。 A 可根据需要人为地建立培养条件，来观察和研究细胞生命活动的规律 B 通过传代培养可获得研究所需要的细胞量 C 可摆脱活体组织的复杂背景 D 可获得与其在活体组织中完全相同的实验结果 B-四-2.在制备单克隆抗体的过程中，使得与骨髓瘤细胞发生融合的细胞是（ A ）。 A B淋巴细胞 B T淋巴细胞 C 巨噬细胞 D 粒细胞 B-四-3.要探知细胞内某一蛋白质的表达水平，可以通过（ C ）技术实现。 A Southern blot B Northern blot C Western blot D 原位分子杂交 DNA印迹技术由Southern于1975年创建，称为Southern印迹技术，RNA印

白皮松栽培技术

白皮松栽培技术 作者：2007-8-11 白皮松?(Pinus?bungeana) 松科常绿乔木。又称白松。树高可达30米。树皮片状脱落，露出白色内皮。球果圆锥状卵形，种子有短翅。分布于山西、河北等广大地区。喜光?、喜湿润山坡。木材纹理直?，轻软，加工后有光泽和花纹，供细木工用。其树姿优美，树皮奇特，可供观赏。 1831年，德裔俄国人亚历山大·冯·本格博士（Alexander?von?Bunge）在北京附近的寺庙的树林中发现了白皮松，并命名。 白皮松为松科松属常绿乔木，高可达30米，胸径达2米。阳性树种，幼树耐半阴；耐寒性不如油松，但耐旱、耐湿和对土壤的适应性均较油松强。它对-30℃的干冷气候、pH值7.5至8的土壤，均能适应；能在石灰岩地区生长，而在排水不良或积水地方不能生长，对二氧化硫及烟尘的污染有较强的抗性。深根性，寿命长。幼树枝条自然分布、稠密均匀，故不必进行修剪整形，就能形成美丽的树冠。它生长较缓慢，一年生苗高仅3厘米至5厘米，10年后高达1米左右。 繁殖方法及其栽植要点 白皮松一般多用播种繁殖，育苗地应选择排水良好，地势平坦、土层深厚的沙壤土为好。早春解冻后立即播种，可减少松苗立枯病。由于怕涝，应采用高床播种，播前浇足底水，每10平方米用1公斤左右种子，可产苗1000至2000株。撒播后覆土1至1.5厘米，罩上塑料薄膜，可提高发芽率。待幼苗出齐后，逐渐加大通风时间，以至全部去掉薄膜。播种后幼苗带壳出土，约20天自行脱落，这段时间要防止鸟害。幼苗期应搭棚遮阴，防止日灼，入冬前要埋土防寒。小苗主根长，侧根稀少，故移栽时应少伤侧根，否则易枯死。 如采用嫩枝嫁接繁殖，应将白皮松嫩枝嫁接到油松大龄砧木上。白皮松嫩枝嫁接到3年至4年生油松砧木上，一般成活率可达85%至95%，且亲和力强，生长快。接穗应选生长健壮的新梢，其粗度以0.5厘米为好。 二年生苗裸根移植时要保护好根系，避免其根系吹干损伤，应随掘随栽，以后每数年要转垛一次，以促生须根，有利于定植成活。一般绿化都用10年生以上的大苗。移植以初冬休眠时和早春开冻时最佳，用大苗时必须带土球移植，栽植胸径12厘米以下的大苗，需挖一个高120厘米、直径150厘米的土球，用草绳缠绕固土，搬运过程中要防止土球破碎，种植后要立桩缚扎固定。 白皮松在园林配置上用途十分广阔，它可以孤植，对植，也可丛植成林或作行道树，均能获得良好效果。它适于庭院中堂前，亭侧栽植，使苍松奇峰相映成趣，颇为壮观。 白皮松畦播育苗技术 白皮松为常绿乔木，幼树树皮平滑，灰绿色，老树树皮不规则脱落后露出粉

病毒的增殖

第二十八讲病毒的增殖 教学目的：掌握病毒的增殖过程各阶段特点 教学重点：病毒的增殖过程 教学难点：病毒的增殖过程 课时分布：1学时 教学过程： 病毒在活细胞中的繁殖既不象细菌一样进行二分分裂，也不象霉菌样通过形成孢子繁殖。病毒细胞结构不完整。仅由生物大分子构成。缺乏代谢必需的酶系统与能量。不可能合成自力的蛋白质与核酸。从而决定了病毒是通过感染寄主细胞后。控制宿主细胞的整套生物合成机构，利用它的合成材料，按照病毒的遗传特性，合成病毒的核酸与蛋白质。然后组装成新的病毒粒子，故称增殖。 一、病毒的复制周期 1、一步生长曲线：是病毒接种于敏感细胞后培养时，定时取样测定培养物中的病毒效价，以病毒效价对培养时间作图而得的病毒特征性的繁殖曲线。 潜伏期：是毒粒吸附于细胞到受染细胞释放子代毒粒的时期。 裂解量：平均每个感染细胞裂解时所释放的代毒粒的数目。 2、隐蔽期：病毒在受染细胞内消失到细胞内出现新的感染性病毒的时间。

3、病毒的复制周期 定义：指病毒自吸附、侵入到释放的整个复制过程。包括五个阶段：吸附、侵入、脱壳、大分子合成、装配与释放。 二、病毒的复制过程 分五个阶段： （-）吸附是病毒感染细胞的第一步。 1、病毒吸附蛋白 当病毒与寄生细胞混合时，由于运动（扩散、分子运动、静电引力）而吸附在敏感细胞的特异性受体上，病毒吸附蛋白能特异性地识别它。无包膜毒粒的病毒吸附蛋白是核壳的组成部分，有包膜的则为包膜糖蛋白。 2、细胞受体 受体是具有一定化学结构的球形体，位于宿主细胞表面。不同寄主细胞，其受体的化学结构不同。当寄主细胞发生突变而使受体结构发生改变，不再被某一种病毒所吸附，则寄主细胞获得了对该病毒的抗性。如果病毒一方发生变异，吸附也不能发生，或病毒一方也发生变异，重新能吸附有抗性的寄主细胞。 （二）、侵入与脱壳

细胞衰老与肿瘤的发生的研究进展

细胞衰老与肿瘤的发生的研究进展 广东药科大学公共卫生学院卫生检验与检疫15 戚嘉铭 【摘要】近几年，细胞衰老成为一种针对癌细胞永久性生长的治疗肿瘤新途径，一直是细胞生物学家的研究重点。研究发现，细胞衰老可以作为阻碍癌细胞致癌的抑制机制。原因在于癌基因诱导具有双向性，癌基因的活化可以诱导细胞衰老。但研究发现，细胞衰老同样可能促使癌细胞的增值。 【关键词】细胞衰老肿瘤癌细胞 细胞衰老是生物体中普遍存在的一种永久性生长抑制现象，能够防止老化的或非正常细胞的进一步生长，对抗细胞的无限增殖能力而对机体起到保护作用。因此，死亡的细胞衰老与无限增殖的癌细胞一直都是细胞生物学家们致力研究的重点。本文主要是描述探究决定细胞走向衰老还是转为癌细胞的因素的相关研究进展。 1、细胞衰老:一种阻碍癌细胞致癌的机制 在多种衰老细胞中,某些抑癌基因的过表达会引起细胞进入衰老程序,细胞绕过衰老途径是其永生化及癌变的必要条件,因而细胞复制性衰老是抑制肿瘤的一种可能机制.这样对衰老细胞的研究将为肿瘤的预防和治疗方法提供新的策略[12]。细胞衰老是人体防癌的机制之一,研究细胞衰老对于抗肿瘤是很有意义的,同时为打开抗肿瘤药物治疗和新药的研发提供了依据。 1961年,Hayflick在体外培养成纤维细胞的研究中发现,正常二倍体细胞在体外条件下增殖分裂50~70代即进入一种衰老的状态,无法进一步传代培养,但仍然存活.正常的动物细胞无论是在体内生长还是在体外生长,其分裂次数总存在一个"极限值",此值被称为"Hayflick"极限,亦称最大分裂次数[11].研究表明，恶性肿瘤细胞系会发生自发性老化,其程度与细胞系种类有关.短期饥饿培养会明显增加老化细胞所占的比率,提示饥饿诱发细胞老化可能是抗肿瘤治疗的又一快速、简单且有效的途径[13]。 2、癌基因诱导的双向性 在人部分的肿瘤中都发现有癌基因的活化，癌基因的活化被认为是导致肿瘤发生的重要原因。然而，在野生型细胞内，癌基因的活化可以诱导细胞衰老，称为癌基因诱导的细胞衰老(oncogene-induced senescence, OIS)[1]。癌基因诱导的衰老( OIS)是指癌基因突变所产生的异常增殖信号，通过MAPK和PI3 K信号通路，使细胞处于生长停

白皮松育苗及其栽培技术

白皮松育苗及其栽培技术 1引言 白皮松是常绿乔木，属松科松。喜光，幼时耐荫，适应性强，深根性，寿命长（数百年之久），对温度、气候、排水性能等外部条件要求不高，500?1200m的海拔、pH值7.5?8.0均能适应。其树皮白色有光，树姿优雅，针叶青翠，有较好的观赏价值；对空气中的烟尘污染和二氧化硫等有良好的可抗性，具备优良的抗氧化氢及氯气功能，以城市园林绿化的观赏树种栽植为主。 2白皮松苗木培育 2.1种子催芽 种子催芽包括沙藏催芽和浸种催芽。沙藏催芽：冬季（上冻前），选择完好的房屋消毒，用高锰酸钾（0.5%）浸种2h,经清水冲洗，把纯沙堆（经消毒，湿度为60%于室内，按1 ：3比例袋装（种子：沙），平摊覆草帘，注意保湿防冻通风。来年种子出现约1/2 裂口，即可播种。 浸种催芽：春季将种子用高锰酸钾（0.5%）浸种2h,经消毒，40C 温水浸种8?10h，冷水浸种3?5d,保持每天换水，温度25?28C,湿度约90%充分吸水膨胀，7d后视发芽情况，适时播种。 2.2选地整理幼苗怕涝，要选排灌条件好、平坦且无瓜果蔬菜种植 地块，褐色土（土质疏松湿润），深度50c m以上，或沙壤土 （疏松肥沃、通风）。

2.3苗床整理清除杂草，整平育苗地，深翻细耙，施足底肥，做床（南北高垄），垄高20cm间距50cm宽1.2m,长度自定，注意水道畅通，土壤细绵。容器育苗，常用低床（宽80cm深12cm）， 床的深宽由容器袋规格决定，摆好与地面齐平。同时，苗床底部修平、拍实，四壁垂直，苗床间距40cm,长度视地形而定（10m 为宜）。 2.4选择与处理育苗基质 大田育苗时间一般安排在播种前的5?10d,此时要对土壤 层进行湿润处理,具体操作方法是用5kg 左右的硫酸亚铁溶液 （1%）或福尔马林稀释液（1.5%）,以每平方米苗床为单位,进行喷洒湿润，深度保持在10?15c m范围内；或在整地做床的前期阶段,以亩为单位,施撒20kg 左右的硫酸亚铁,将其翻入土中,对土壤进行消毒杀菌处理。容器苗育苗较常采用的方法有：①将园土、腐殖土和腐熟有机肥按照1 : 1 ：1的比例混合，再加入适量细沙；②将园土和松林下腐殖土按照 1 ：1的比例混合， 再加入适量细沙。在装袋过程之前, 要对有机肥和园土进行仔细筛选,然后在土中喷洒40kg/m 的福尔马林稀释液（1.5%）或拌入硫酸亚铁溶液（1% ,将其密封保存约5?10d，在土壤事前经过消毒处理后,将过筛的腐殖土和消过毒的土混合后进行装 袋。 2.5 容器育苗装袋常见的白皮松塑料袋容器育苗普遍采用蜂窝状无底折叠式的塑膜容器，该塑模容器的规格普遍标准为高12cm左右、直径

病毒的繁殖

4类病毒及其繁殖方式 病毒感染敏感宿主细胞后，病毒核酸进入细胞，通过其复制与表达产生子代病毒基因组和新的蛋白质，然后由这些新合成的病毒组分装配（assembly）成子代毒粒，并以一定方式释放到细胞外。病毒的这种特殊繁殖方式称做复制（replication）。 病毒的繁殖方式相似，以原核生物病毒——噬菌体为例。 (一)原核生物的病毒——噬菌体的繁殖 1.噬菌体的繁殖过程 病毒不存在个体的生长过程，只有核酸和蛋白质的合成与装配。 噬菌体的繁殖一般分为5个阶段，即： ①吸附②侵入③增殖（复制与生物合成）④成熟（装配）⑤裂解（释放） 烈性噬菌体所经历的繁殖过程，称为裂解性周期（lytic cycle）或增殖性周期（productive cycle）。

现以 E. coli 的T偶数噬菌体为代表加以介绍：(1)吸附（adsorption）

病毒吸附蛋白： 病毒吸附蛋白是能够特异性地识别细胞受体并与之结合的毒粒表面的结构蛋白分子，亦称做反受体（antireceptor）。 细胞受体： 病毒的细胞受体亦称病毒受体，系指能被病毒吸附蛋白特异性地识别，并与之结合介导病毒进入细胞，启动感染发生的细胞表面组分。 现在已知病毒受体是细胞的功能性物质，为细胞正常生长代谢所必需，而非病毒专一性的成份。 Eg. 单纯疱疹病毒的受体是硫酸乙酰肝素， 狂犬病毒(Rabies virus)的受体是细胞表面的乙酰胆碱受体。 吸附于大肠杆菌上的噬菌体：

吸附于大肠杆菌性毛上的噬菌体： 吸附作用受许多内外因素的影响： ①噬菌体的数量 由于每一宿主细胞表面的特异受体有限，因此所能吸附噬菌体的数目也有一个限量。每一敏感细胞所能吸附的相应噬菌体的数量，就称感染复数（m.o.i，multiplicity of infection）。

肿瘤的发生与发展

肿瘤的发生与发展 肿瘤的定义：肿瘤是机体在各种致瘤因素作用下，局部组织的细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控，导致克隆性异常增生而形成的新生物，常表现为局部肿块。 过程：局部组织的细胞—基因突变—细胞异常增生—新生物—局部肿块 发病机制：肿瘤的发病是一个多因素、多步骤参与的过程。 恶性肿瘤的病因（尚未完全了解）， 1.环境因素：化学，物理，生物因素 2.机体因素 化学致癌 化学致癌物：目前认为凡接触引起人或动物形成肿瘤的化学物质，称为化学致癌物（chemical carcinogen）。目前发现对动物有致癌作用的化学物质已达2000余种，其中有些可能和人类肿瘤的形成有关 分类：1。作用分式：直接致癌物，间接致癌物，促癌物 2.与肿瘤的关系：肯定致癌物，可疑致癌物，潜在致癌物 ? 1.直接致癌物：进入机体后与细胞直接作用，诱导细胞癌变的化学物质。 ? 2.间接致癌物：进入体内经微粒体氧化酶活化，变成具有致癌作用的化学物质 ? 3.促癌物：能促进其他致癌物诱发肿瘤形成的化学物质 ? 4.肯定致癌物（defined carcinogen）经流行病学调查确定，临床医师和科学工 作者都承认对人和动物有致癌作用，其致癌作用具有剂量反应关系的化学致癌物。 ? 5.可疑致癌物（suspected carcinogen）具有体外转化能力，而且接触时间和发 病率相关，动物致癌实验阳性，结果不恒定，且缺乏流行病学方面的证据。 ? 6.潜在致癌物（potential carcinogen）是在动物实验中可获得某些阳性结果， 但在人群中尚无资料证明对人具有致癌性的物质。 １、化学致癌物的作用点：为细胞的癌基因和抑癌基因 ２、作用：使癌基因激活，抑癌基因失活。 １、累积作用:(summation effect) 是指两种或多种致癌物同时或相继作用于机体，其复合效应等于单独作用之和２、协同作用:(synergistiic effect) 机体同时暴露于几种致癌物中其致癌作用高于个单独致癌物作用之和 常见的化学致癌物：多环芳香烃类，芳香胺与偶氮染料，亚硝胺类 化学致癌例子。苯胺染料：膀胱癌，烟草：肺癌，黄曲霉素：肝癌 物理致癌 1.电离辐射是最主要的物理性致癌因素 2.放射性同位素：镭、铀、氡等放射性同位素 3.紫外线：皮肤癌，着色性干皮病 病毒致癌 1/3为DNA病毒，2/3为RNA病毒 ?一、乳头状瘤病毒与宫颈癌（HPV） ?二、乙型肝炎病毒与肝癌（HBV） ?三、EB病毒与鼻咽癌和Burkit肉瘤（EBV） ?四、HTL V与人类T细胞白血病（HTL V） 致瘤性DNA病毒

病毒增殖的机制

病毒的复制及各类病毒的增殖过程 1 病毒的种类 病毒可分为亚病毒与真病毒两类：前者不具有完整的病毒结构，仅由某种核酸或蛋白质构成；后者通常由核酸及蛋白质外壳构成，部分病毒还具有囊膜结构。不同病毒所含核酸的种类、转录形成m ＲNA和合成蛋白质的方式迥异。因此，根据病毒的核酸类型和转录形成mＲNA的方式不同，可将病毒归为六大类：双链DNA病毒、单正链DNA( + DNA) 病毒、双链ＲNA病毒、单正链ＲNA( +ＲNA) 病毒、单负链ＲNA(－ＲNA) 病毒和逆转录病毒。以下介绍各类病毒的具体增殖步骤。 2 各类病毒的增殖过程 2.1 双链DNA病毒

腺病毒、疱疹病毒以及痘病毒等病毒均属于双链DNA病毒。 以疱疹病毒为例，说明此类病毒的主要增殖过程：①疱疹病毒包膜上的血型糖蛋白B与宿主细胞膜上的受体特异性识别并吸附； ②宿主细胞膜包裹疱疹病毒颗粒，形成吞噬泡，疱疹病毒颗粒通过吞噬作用而进入细胞质，并脱去包膜；③在宿主细胞的溶酶体作用下脱去蛋白质外壳；④病毒DNA进入宿主细胞的细胞核；⑤在ＲNA 聚合酶的帮助下，以病毒DNA为模板合成早期mＲNA并进入细胞质中；⑥早期mＲNA翻译形成早期蛋白，主要指与DNA复制相关的酶，如DNA聚合酶、脱氧胸腺嘧啶激酶等；⑦在解旋酶作用下，DNA双链打开，以打开的两条链为模板，遵循碱基互补配对原则，依赖合成的 DNA 聚合酶，合成子代DNA分子；⑧合成晚期mＲNA，并以此翻译成晚期蛋白，主要为病毒的结构蛋白，子代病毒DNA与结构蛋白装配形成子代病毒；⑨子代病毒从细胞核释放出来，同时披上包膜；⑩细胞膜通过胞吐的形式将子代病毒释放到体外。 2.2 单正链 DNA( + DNA) 病毒 代表病毒为细小病毒，此类病毒增殖的主要过程为：①形成复制中间体：单正链 DNA 病毒进行生物合成时，首先以亲代DNA 作模板，依赖复制酶，遵循碱基互补配对原则，合成其互补DNA 链，并与亲代DNA形成双链，作为复制中间型，含有亲代DNA的新合成的双链 DNA 继续复制；②转录和翻译: 不含亲代 DNA 的新

白皮松育苗技术2

白皮松育苗技术 华夏园林网2010-06-08 浏览量131 白皮松育苗技术 白皮松是我国北方罕见的珍贵常绿树种之一。其树形雄壮多姿，苍翠挺拔，树皮白色有光，针叶青翠可爱，十分美观，适应性强，寿命长，早已成为城市和庭院绿化的优良树种。为了掌握该树种的育苗技术，大量繁育苗木，我们在露地采用高垄方法进行育苗试验，取得成功。 白皮松属于松科、松属、常绿乔木。针叶3针1束，是东亚唯一的三针松，是中国特产的珍贵树种。白皮松喜光，稍耐荫，是深根性树种，适应较干冷的气候，在中性、酸性及石灰性土壤上均能生长。可生长在pH值为8的土壤上，对二氧化硫及烟尘抗性强，不耐水湿。在干旱地区，白皮松也是优良的造林树种。由于城市特殊的生境，白皮松在近年的城市绿化中受到越来越多的青睐。白皮松苗期易感染猝倒病，用白皮松种子常规育苗，由于圃地选择不当，苗期管理不善，往往造成育苗失败。而采用容器育苗，则可以保证育苗成功。同时具备以下好处：容器育苗的根系发育良好，起苗时不伤根，减少了苗木因起苗、运输、假植等作业时对根系的损伤和水分的损失，从而提高苗木的移栽成活率，特别是在安徽省这样的干旱地区，采用容器育苗的移栽成活率可达到85%以上，为了满足市场供应，尽快培育出优质的白皮松壮苗、大苗，则最好选择容器育苗。 白皮松育苗技术方法 1选地、制苗床 1.1育苗地的选择 在选择苗床时，应充分考虑以下几点：①白皮松怕水湿，因此育苗地应选择地势平坦、排水良好处，切忌选在地势低洼、排水不良、雨季积水的风口处。②白皮松苗期需经常喷水、喷药，因而育苗地附近应有充足清洁的水源。③白皮松苗期易患猝倒病，前作是马铃薯、瓜类、大豆、烟草、棉花、茄科等感病植物，均不宜用来作育苗床。 1.2育苗床的制作 首先要整平育苗地，清除杂草，再制作育苗床。白皮松容器育苗一般用低床育苗，根据容器袋的规格来决定床的深度与宽度。一般挖深12cm、宽80cm的育苗床，使容器袋装土后排放在苗床内刚好与地面平齐。同时，修平并拍实苗床底部，苗床四壁要垂直，两苗床之间留40cm宽的步道，育苗床的长度依地形而定，一般以10m为宜。 2选基质、装袋 2.1育苗基质的选择 常用来配制营养土的材料有林中腐殖质土、泥炭土、未经耕种的山地土、磨碎的树皮、稻壳、蛭石和珍珠岩等，最好选用经过火烧或高温消毒过的土壤，可以消灭病虫害及杂草种子。基质的选择应充分利用当地的土壤和肥源，因地制宜，综合利用，既经济又合理。如选择草皮土和腐熟的有机肥按3∶1比例配制育苗基质，采集的基质要粉碎过筛，除去草根、

病毒增殖概述浅谈

研究病毒的增殖过程和生物合成，不仅关系到病毒病的防治，而且涉及生命起源和肿瘤学等重大理论和实践课题。有关生命本质及其起源的研究，必须从非细胞形态的生命物质开始。在这方面，病毒是最理想的模型。目前关于“人工制造生命”的研究，大多就是应用病毒或病毒成分进行的，而且已经取得了很大进展。例如在有适当的前体和酶的存在条件下，提纯的病毒 RNA和DNA可在体外复制已成为普通的常识。同样，病毒RNA可在体外于细菌核糖体上译制病毒蛋白；病毒核酸和病毒蛋白也可在体外装配成为完整的病毒粒子等等。所有这些成就，均为生命本质的探索提供了途径和证据。甚至有人认为，病毒可能以“附加基因”的方式，结合入细胞基因组内，成为生物进化的原因。 肿瘤，就其本质来讲，是细胞基因突变或某些基因异常表达的结果。病毒至少是肿瘤病因中的一个重要因素。目前发现的脊椎动物肿瘤病毒已经超过30种，而有致瘤特性的病毒约有150多种。许多DNA病毒能在一定条件下引起动物肿瘤，RNA病毒中则只有反转录病毒具有致瘤作用。这种RNA致瘤病毒可借反转录酶的作用(将在下述)，在细胞内复制出含有病毒信息的DNA，也就是前病毒DNA中间体，整合入细胞DNA，改变细胞的遗传性，干扰细胞的正常生命活动而导致细胞恶性变。 病毒性疾病的化学预防和化学治疗，已被证明是可能的，实践中也已取得初步成果。目前发现的一些不见于正常细胞而为病毒增殖所必需的核酸合成酶和其他蛋白质，为病毒病的化学防治提供了进一步的可能性。而对病毒结构及其生物合成各环节的深入了解，则为选择适当药物，切断病毒增殖周期，阻碍病毒增殖而达到防治目的，建立现实的基础。 物病毒的增殖过程大致可以分为：吸附与侵入、脱壳、病毒成分的合成以及装配与释放等4个主要阶段。 1.吸附和侵入 病毒吸附分两步进行。首先，病毒与细胞以静电引力相结合。这种吸附是非特异性的。病毒可在细胞表面任何部位吸附，不具有任何选择性。非细胞颗粒物质，甚至玻璃或金属器皿表面也都可吸附病毒。这种吸附是可逆的，单纯的稀释或冲洗以及应用抗病毒血清或高浓度盐类和一定的pH环境，都可使病毒从吸附物上重新解脱出来。病毒吸附的第二阶段，呈不可逆性结合。此时，病毒蛋白(抗受体)与细胞膜表面特定蛋白(受体)特异性结合。病毒粒子上与细胞受体结合的蛋白质，一般都是病毒表面蛋白，如流感病毒的血凝素。不过，抗受体虽在病毒表面，但不一定参与病毒的高度抗原区，如脊髓灰质炎病毒的病毒蛋白1(VP1)，其抗受体区域与高度变异的中和抗原区并不一致。某些结构复杂的病毒，如痘病毒和疱疹病毒，具有多个抗受体蛋白分子，而每个抗受体蛋白分子又可有几个不同的区域，每个区域可与细胞表面不同的受体结合。据估计，一个宿主细胞上的特异性受体部位可达10 4～105个。这里必须指出，不一定每个细胞表面都有特定病毒的特异受体。细胞有无特定病毒的受体，直接影响是否对该病毒具有易感性。受体与抗受体的结合，需要具备一定的离子浓度，以减少静电干扰。不过，这种特异性结合与温度及能量的关系不大。必须指出，可逆与不可逆的两阶段吸附过程，可能并非所有病毒的共同规律，某些病毒一经吸附于敏感细胞，就再不能解脱，似乎没有可逆吸附阶段的存在。而另一些病毒，例如正粘病毒及副粘病毒，即使进入了不可逆的结合阶段，病毒粒子仍可由细胞分离，并吸附另一细胞。这是由于这些病毒具有神经胺酸酶，该酶可切断细胞受体多糖链上的神经胺酸。应用抗细胞血清处理细胞，常可阻止细胞发生病毒感染，可能是这种抗体封阻了细胞表面的结合部位而使病毒不能吸附的缘故。Much等(1973)应用抗HeLa细胞血清处理 HeLa细胞，得以阻止脊髓灰质炎病毒的吸附。就某些病毒来说，病毒感染范围似乎决定于细胞表面有无相应的病毒受体。抗病毒抗体也可阻抑病毒对细胞的 特异性吸附。脊髓灰质炎病毒能够在灵长类的肾培养细胞中增殖，但不能在啮齿类的肾培养细胞中增殖，就是因为前者具有而后者缺乏对脊髓灰质炎病毒的特异脂蛋白受体。流感病毒的吸附，取决于敏感细胞表面特异糖蛋白受体的存在。破坏这些受体，例如应用由霍乱弧菌抽提出来的神经胺酸酶处理细胞，即可使其不再吸附流感病毒，因而不发生感染。为什么脊髓灰质炎病毒能在体外培养的猴肾细胞中增殖，但却不在活猴体内的肾细胞中增殖?相反，考克赛基病毒能够感染幼龄小鼠，但却不易在小鼠的各种组织培养细胞中增殖?有人认为这也是因为这些细胞在培养过程中获得或丧失了相应受体的缘故。这种解释看来颇为牵强。因为病毒的特异性吸附只是其在细胞中增殖的重要的第一步，而决不是其全部。影响病毒增殖的因素很多，而病毒增殖本身又是一个极为复杂的过程。应用一定的方法人为地将病毒或病毒核酸引入非敏感细胞内，也常不能引起病毒感染。由于细胞膜制剂也能结合病毒，并有抑制其吸附于细胞表面的作用，说明细胞膜上确有病毒受体存在。某些病毒对细胞上的特殊结构，例如微绒毛和致密

仙人掌对体外培养成纤维细胞生长增殖的影响(精)

仙人掌对体外培养成纤维细胞生长增殖的影响 作者：金照，金可可，陈雷，刘长宝 【摘要】目的：观察仙人掌对体外培养成纤维细胞增殖的影响及其量-效关系。方法：以小鼠成纤维细胞株(NIH3T3)为研究对象，采用四氮唑盐(MTT) 比色法测定仙人掌对成纤维细胞增生的影响(以OD值反映细胞活性)，采用免疫细胞化学染色法检测成纤维细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果：在一定浓度范围内(0.0625～0.5 mg/mL)，仙人掌能明显促进体外培养的成纤维细胞生长增殖，同时促进PCNA蛋白的表达，并随着仙人掌浓度的增加，成纤维细胞数量和PCNA蛋白的表达均不断增加，在0.5 mg/mL浓度时达到高峰，呈现明显的剂量-效应关系(r分别为0.761，0.783;P均<0.01)。结论：在一定浓度范围内，仙人掌具有促进体外培养成纤维细胞增殖的作用，并表现为明显的量-效关系。 【关键词】仙人掌;成纤维细胞;增殖 Abstract: Objective: To explore the effects of Opuntia on fibroblast proliferation in vitro and its concentration-effect relationship. Methods: The effects of Opuntia on proliferation of fibroblast were measured with MTT colorimetric assay，and PCNA productions were examined with immunocytechemistry. Results: Opuntia could provoke fibroblast proliferation and increase PCNA protein expression in concentration range 0.0625～0.5 mg/mL. Furthermore，the effects exhibited a significant concentration-dependent relationship (r =0.761，0.783 respectively，P <0.01). Conclusion: Opuntia can provoke fibroblast proliferation within a certain concentration range， which exhibits a significant concentration-effect relationship. Key words: Opuntia;fibroblast;proliferation 仙人掌(Opuntia)，又名神仙掌、老鸦舌、观音掌等，已经被用来治疗糖尿病、溃疡等症[1-2]。仙人掌治疗胃溃疡的机制可能与成纤维细胞的增殖有关[3]。近几年来，虽然仙人掌的药理作用已成为医学热门研究方向，但有关仙人掌对体外培养的成纤维细胞增殖的影响未见报道。本研究以体外培养成纤维细胞为实验对象，观察仙人掌对成纤维细胞生长增殖的影响及其量-效关系。 1 材料和方法 1.1 材料小鼠成纤维细胞株(NIH3T3)购自上海肯强仪器有限公司，鼠抗人PCNA单克隆抗体及其他试剂均购自武汉博士德生物有限公司。仙人掌干粉为鲜茎片80 ℃烘干制成，由福州日冕科技开发有限公司生产提供。

医师三基考试(1完成A卷)

福永人民医院医师三基考试试题（13）A卷 姓名_______________ 科室_______________ 分数___________ 一、判断题：正确打∨错误打×（每题1分，共10分） 1、沙门氏菌引起的主要疾病有化脓性感染和食物中毒。（） 2、目前所知能在无生命培养基中生长繁殖的最小生物可引起原发性非典型肺炎。（） 3、中和抗体可降低或消除病毒的感染能力。（） 4、逆转录病毒是具有逆转录酶的DNA病毒。（） 5、IgD血清含量极低，可能与自身免疫性疾病有关。（） 6、Ⅰ型超敏反应主要表现为生理功能紊乱，通常没有组织损伤。（） 7、血清钾浓度高于5.5mmol／L为高血钾，低于3.5mmol／L为低血钾。（） 8、某些维生素缺乏会导致组织性缺氧。（） 9、一般每体温升高1℃，基础代谢率提高3％，每分钟心率增加10～20次。（） 10、肿瘤可以使用药物预防。（） 二、单选题：每一道考试题下面有A、B、C、D、E五个备选答案，请从中选择一个最佳答案。(每题1分，共80分) 11．属非细胞型微生物的是( ) A．立克次体B．衣原体C．真菌D．支原体E．病毒12．毒蛇咬伤早期局部最佳用药为( ) A．中草药局部外敷B．胰蛋白酶局部注射C．高锰酸钾溶液冲洗 D．0．5％普鲁卡因局部及套式封闭E．季德胜蛇药片局部外敷 13．急、慢性肾衰竭病人宜用下列哪种膳食( ) A．高蛋白饮食B．高纤维膳食C．少渣膳食D．麦淀粉膳食E．低铜膳食14．心尖在胸前壁的体表投影位于( ) A．位于左侧第4肋间隙，距前正中线7～9cm处B．位于左侧第5肋间隙，距前正中线7～9cm处C．位于左侧第6肋间隙，距前正中线7～9cm处D．位于左侧第5肋间隙，距前正中线5～7cm处E．位于左侧第6肋间隙，距前正中线5～7cm处 15．人耳能感觉到的声波频率范围为( ) A．20～1000Hz B．20～2000Hz C．20～4000Hz D．20～8000Hz E．20～20000Hz 16．运动疗法的禁忌证( ) A．脑血管意外B．截瘫C．急性心肌梗死D．颅脑外伤E．严重衰弱病人 17．尿微量清蛋白，以下说法哪项是错误的( ) A．用常规方法不能测出B．超过尿蛋白正常范嗣的上限而定性方法又不能测出 C．可在隐匿型肾炎及肾炎恢复期尿中出现D．是比较灵敏的早期发现肾损伤的指标E．是指低分子量的蛋白 18．左房增大最早出现的X线征象是( ) A．左心缘第三弓突出B．右心缘双边阴影C．右心缘双房影 D．右前斜位食管吞钡左房压迹增加E．左前斜位左主支气管变窄、抬高 19．习惯性晚期流产最常见的原因是( ) A．孕卵发育异常B．黄体功能不全C．甲状腺功能不全 D．染色体异常E．子宫颈内口松弛 20．下述哪类水、电解质紊乱早期就易发生循环衰竭( ) A．高渗性脱水B．等渗性脱水C．低渗性脱水D．水中毒E．低钾血症21．DIC产生的贫血属( ) A．溶血性贫血B．缺铁性贫血C．中毒性贫血D．失血性贫血E．再生障碍性贫血22．急性胰腺炎患者应( ) A．少量多餐B．低盐饮食C．高维生素膳食D．急性期禁食E．忌辛辣食物23．完全胃肠外营养是指( ) A．通过静脉输入全部营养B．从胃管内补其不足C．少量口服 D．补充要素膳E．添加匀浆液 24．病毒生长增殖的方式是( ) A．有性繁殖B．有丝分裂C．出芽生长D．自我复制E．二分裂 25．下列哪种元素是体内葡萄糖耐量因子的重要组成成分( ) A．铬B．铜C．铁D．硒E．钼 26．股静脉内血栓脱落引起栓塞下列哪一项是不正确的( ) A．大多数栓塞于肺B．都发生出血性梗死C．如栓塞于肺动脉主干常引起猝死D．伴有心力衰竭时一定发生相应部位的梗死E．如有心间隔缺损亦可栓塞于脑27．磁片或磁疗仪器的磁场强度，可以用一种仪器测量，这种仪器名称是( ) A．万能电表B．交直流高斯(特斯拉)计C．紫外分光光度计 D．示波器E．以上都不是 28．子官脱垂的主要病因是( ) A．先天性发育异常B．分娩损伤C．缺乏雌激素D．营养不良E．慢性腹压增加29．枕骨骨折的最佳摄片位置是( ) A．颅骨前后位B．颅骨后前位C．水平侧位D．汤氏位E．颅底位30．以下哪种食物血糖指数最低( ) A．红枣B．黄瓜C．柿子D．香蕉E．红果 31．葡萄胎排出后HCG恢复正常的时间最迟不超过( ) A．4周B．6周C．8周D．10周E．12周 32．确诊伤寒最有力的证据是( ) A．长程稽留热B．玫瑰疹C．血常规白细胞减少，嗜酸性粒细胞消失 D．肥达反应阳性E．血培养见伤寒沙门菌 33．氯胺酮在哪种患者中应用可能出现心肌抑制作用( ) A．小儿B．低血压．C．支气管哮喘 D．老年E．低血容量性休克及交感神经高度兴奋 34．单纯性肾病综合征的主要临床特点应除外( ) A．大量蛋白尿B．低白蛋白血症C．高血压和血尿 D．高胆固醇血症E．不同程度的水肿 35．关于脐血管含氧量，下列哪项错误( ) A．脐动脉含氧量最高B．下腔静脉含氧量较低C．脐静脉含氧量较高

细胞增殖实验word版

细胞增殖检测方法 细胞增殖检测通常是检测分裂中的细胞数量或者细胞群体发生的变化。目前细胞增殖检测主要分为五类：DNA合成检测、代谢活性检测、细胞数量检测、细胞增殖相关抗原检测和ATP 浓度检测。在这些方法中作何选择，主要取决于所研究的细胞类型和研究方案。 1.DNA合成检测 这是目前实验室中检测细胞增殖最准确可靠的方式。该法是将放射性标记的3H-胸腺嘧啶与细胞一同孵育，这样新增殖细胞的DNA中就会掺入放射性标记，经洗脱后可用闪烁计数器检测。该方法耗时长，而且有个明显的弊端就，即使用和处理放射性物质既麻烦又不安全。不过，可以使用5-溴-2-脱氧尿苷BrdU来进行类似实验，因为BrdU也同样可以掺入到新合成的DNA中。但这样就需要进行额外的实验步骤，先孵育特异性BrdU单抗和带标记的二抗，然后再进行比色法、化学发光检测或荧光信号检测等步骤。该方法的优点就是不再需要放射性物质。BrdU标记很适合免疫组化IHC、免疫细胞化学IC、细胞内ELISA、流式细胞分析和高通量筛选。 2.代谢活性检测 检测细胞群体的代谢活性也可以反映细胞增殖的情况。在细胞增殖过程中脱氢酶的活性会增加，因此其底物四唑盐或Alamar Blue在代谢活跃的细胞环境中会逐渐减少，形成能够改变培养基颜色的甲臜染料。可以通过低配置或高配置的分光光度计和酶标仪来读取含染料培养基的吸光度，从而衡量细胞的代谢活性，检测细胞增殖的情况。 四种最常见的四唑盐是：MTT、XTT、MTS和WST1。MTT在标准的细胞培养基中是不溶的，而且其生成的甲臜晶体需要溶解在DMSO或者异丙醇中。因此，MTT 主要作为终点检测方法。其他三种盐与Alamar Blue一样，都是可溶且无毒。它们可以作为连续监控手段来跟踪细胞增殖的动态改变。其中XTT的效率较低，需要添加额外的因子；WST1更灵敏有效，与其他盐相比能够更快显色；Alamar Blue 的灵敏度也很高，只要微孔板的孔中有100个细胞就能够检测到。四唑盐和Alamar Blue氧化还原染料能够用于多种仪器和高通量研究，非常方便。它们适用的检测仪器包括：标准分光光度计、