菌种活力测定方法

菌种活力测定方法

1.1活力管的制备

1.1.1称取脱脂奶粉11克加入89毫升蒸馏水,搅拌10-15分钟使之充分溶解,溶解后静置一小时后用双层纱布过滤,除去不溶物。然后将溶液分装试管10毫升,盖上塞子密封。采用间歇三次灭菌:第一次灭菌90-95℃水浴灭菌20分钟,取出自然冷却至室温然后放置于4-6℃冰箱保存。第二天进行第二次灭菌,方法同第一次灭菌,取出自然冷却至室温然后放置于4-6℃冰箱保存。第三天进行第三次灭菌,方法同第一次灭菌,取出自然冷却至室温然后放置于4-6℃冰箱保存备用。

1.1.2脱脂奶粉溶液要求:比重1.033-1.034;酸度≤200T;温度为20℃.

1.2活力测定:

1.2.1接种:接种前将活力管预热至37℃,在灭菌的活力管中加入3%的发酵剂。接种操作要求在超净台完成,操作过程为无菌操作,使用接种吸管必须经过灭菌。

1.2.2发酵:在恒温37℃进行发酵培养3.5小时。

1.2.3测酸:发酵培养3.5小时后,立即取出活力管进行酸度测定。用移液管移取10ml样品至100ml三角瓶中,用20ml纯净水将移液管润洗干净后,一并倒入100ml三角瓶中,加入3滴0.5%酚酞,开始滴定。用0.1 mol/mlNaOH标准溶液滴定至微红色,并在30秒内不退色。消耗的0.1 mol/mlNaOH标准溶液毫升数乘以10,即为酸度。

1.2.4计算:菌种活力=0.087×消耗氢氧化钠毫升数。一般菌种活力要求在0.6

以上。

1.2.5其他要求:氢氧化钠标准液=0.1N (N保留第四位小数,要求在0.0995-0.1005范围)。

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