文档库 最新最全的文档下载
当前位置:文档库 › 硫酸盐还原菌生理特性及其在废水处理中的应用

硫酸盐还原菌生理特性及其在废水处理中的应用

硫酸盐还原菌生理特性及其在废水处理中的应用
硫酸盐还原菌生理特性及其在废水处理中的应用

硫酸盐还原菌杀菌实验 (瓶试法)

硫酸盐还原菌杀菌实验 一、方法提要 MPN法-测试瓶法,在35℃(或实际水养环境温度下)培养7天。 二、硫酸盐还原菌生长显示特征 硫酸盐还原菌测试瓶中的液体变黑、有黑色沉淀或铁钉变黑,均表示有硫酸盐还原菌生长。 三、试验仪器和设备 1、生化培养箱 2、无菌注射器:1mL 3、SRB—HX测试瓶(七天) 4、100mL试剂瓶。 四、实验前的准备 1.准备好所需无菌注射器和测菌瓶; 2.待检测的现场水样(或驯化好的SRB富集液—其获得见“五-1-菌种的制备”)。 五、测定步骤 1、菌种的制备 一般采用现场取得含菌水样作为待用的菌悬液。当没有现场水样或水样不足时,可采用以下方法进行SRB的富集液培养: (1)向SRB测试瓶(9mL规格,如北京华兴化学试剂厂产的SRB-HX型细菌测试瓶)中注入1ml含SRB菌种的水样,可根据需要量做多个平行瓶; (2)将注菌的SRB测试瓶于恒温培养箱中合适温度(最好与现场待测水样温度一致,误差可为±5℃)下培养4~7天;如果测试瓶发黑则表明培养成功;然后放入冰箱(4℃)内,作为菌种保存备用。 (3)在实验的前一天需在使用原培养温度下活化培养3-5小时,作为制备菌悬液之用。 当然,SRB富集液的培养也可采用更为复杂的自制培养基进行驯化培养,但由于相对测菌瓶而言比较费时复杂,一般情况下采用以上方法即可。 2、菌悬液的制备 取现场水样为试验用菌悬液。如果现场水样菌数不足或因存放过久没有细菌可如下操作获得菌悬液:将冰箱内驯化的富集液在使用原培养温度下活化培养3-5小时,然后用滤纸过滤,按照菌种:现场水样=1:20~200比例(根据需要

的空白菌数选择相应的稀释),加入至现场水样中,搅匀后即可作为菌悬液使用。 3、药剂的配制 将被检测药剂配成10mg/mL(1%)水溶液。(可根据具体的检测要求具体配制药剂浓度) 4、 7、试样菌药接触培养 取100mL菌悬液加入试剂瓶中,再加入规定浓度药剂后,密封放入生化培养箱中35℃(或实际水养环境温度下)培养接触4h(可根据具体实验规定接触培养时间),待测。 同时做空白对照样。 8、试样的稀释和接种 (1)用10倍稀释法稀释水样,即用无菌注射器取1mL待测样注入SRB-HX测试瓶中,充分摇匀,此时稀释度为10-1。 (2)另取一支无菌注射器取稀释度为10-1的水样1mL注入到第二个SRB-HX 测试瓶中,充分摇匀,此时稀释度为10-2,以此类推,直至需要的稀释度为止。 (3)每个稀释度作2-5个平行测试瓶。每接种一个稀释度更换一支无菌注射器针管。 (4)加药试样的操作相同,最后的稀释度可以比空白试样少1-2次方。 9、培养 将稀释好的SRB-HX测试瓶充分摇匀,置于生化培养箱中在规定温度下培养7天。 六、计数与报告 (1)凡测试瓶中的液体变黑、有黑色沉淀或铁钉变黑,均表示有硫酸盐还原菌存在,以“+”(阳性)表示,其余测试瓶以“-”(阴性)表示。 (2)算出10进位稀释测试瓶中阳性试剂瓶数,以阳性组合指数记录下来。(3)在10进位稀释中多于三个稀释度时,阳性组合的指数只需要用其中依次的三个稀释度,对这三个稀释度的决定是先选出5瓶全部阳性反应的最大稀释度,然后选出其次相连的两个更高的稀释度,算出阳性组合指数。(见表格1例1、2、4) (4)若按照上条规定的原则选出三个稀释度后,有更高的稀释仍然产生一个阳性试剂瓶,就应将这一阳性试剂瓶并入所选择的最高稀释的阳性结果中。(5)根据阳性组合的指数,查阳性组合指数与菌数的对应关系表计算出对应菌数。 七、分析结果表述 以百分数表达杀菌率X按照公式(1)计算:

油田硫酸盐还原菌快速定量检测方法

油田硫酸盐还原菌快速定量检测方法 第六图书馆 现有油田废水中硫酸盐还原菌检测周期长、检测费用较高,本研究应用聚合酶链式反应(PCR)技术与倍比稀释法(MPN)相结合的DSR-MPN-PCR法,对硫酸盐还原菌进行快速定量检测.从废水中制备了直接用于PCR扩增的菌液,保证了定量准确性;建立以硫酸盐还原菌亚硫酸盐还原酶基因(Dsr)为靶位点的通用探针DSR1F和DSR5R的反应体系和扩增条件.结果表明,该方法检测灵敏度明显比液体稀释培养法高2个数量级,真实地表征了废水中实际的SRB菌数量,整个操作过程需要3-4h。检测结果非常稳定,降低了检测费用,可以在生产中应用.现有油田废水中硫酸盐还原菌检测周期长、检测费用较高,本研究应用聚合酶链式反应(PCR)技术与倍比稀释法(MPN)相结合的DSR-MPN-PCR法,对硫酸盐还原菌进行快速定量检测.从废水中制备了直接用于PCR扩增的菌液,保证了定量准确性;建立以硫酸盐还原菌亚硫酸盐还原酶基因(Dsr)为靶位点的通用探针DSR1F和DSR5R的反应体系和扩增条件.结果表明,该方法检测灵敏度明显比液体稀释培养法高2个数量级,真实地表征了废水中实际的SRB菌数量,整个操作过程需要3-4h。检测结果非常稳定,降低了检测费用,可以在生产中应用.硫酸盐还原菌 菌液制备 定量检测 异化型亚硫酸盐还原酶 DSR-MPN-PCR法环境科学魏利 马放 王继华 赵立军哈尔滨工业大学市政环境工程学院,哈尔滨1500902007第六图书馆 第六图书馆 https://www.wendangku.net/doc/c84725894.html,

第六图书馆https://www.wendangku.net/doc/c84725894.html,

第六图书馆https://www.wendangku.net/doc/c84725894.html,

硫酸盐还原菌及其在废水厌氧治理中的应用

硫酸盐还原菌及其在废水厌氧治理中的应用 发布时间:2012-5-29 10:24:14 中国污水处理工程网 随着社会经济的高速发展,我国的工业化程度得到极大提高,但伴随着经济发展而出现的环境问题也日益严重。目前城市生活污水处理已在工艺上取得成熟技术并得到应用,但工业废水特别是含高浓度硫酸盐和重金属离子的废水处理仍是令人困惑的技术难题。但关于硫酸盐还原菌(SRB)的研究有望解决这一类废水的处理问题。硫酸盐还原菌(SRB)是一类厌氧异养细菌,其生命力很强,广泛存在于土壤、河水、海水等由微生物分解作用造成的厌氧水陆环境中。SRB是一类形态、营养多样化的细菌,以有机物作为生化代谢的能量来源和电子供体,通过异化作用以硫酸盐为电子受体将其还原。利用这一特性,将其广泛应用于含硫酸盐的废水和含重金属离子废水等方面的处理。SRB处理废水作为一项新技术极具潜力。本文论述了SRB处理废水机理及其生化作用的影响因子,对其在不同种类废水处理中的研究现状进行综述。 1硫酸盐还原菌(SRB)处理废水的机 理及厌氧环境中的影响因子 1.1硫酸盐还原菌(SRB)的分类 SRB是一类厌氧菌,革兰氏染色成阴性。目前已知的SRB有40多种,分类也较为复杂。通常根据其对不同有机物的利用性能,将SRB分为8个属[1](见表1)。 表1硫酸盐还原菌(SRB)的分类 1.2硫酸盐还原菌(SRB)处理废水的机理 对于硫酸盐还原菌(SRB)的代谢机理已有很多报道,但对其合成代谢过程的研究尚不明确,对其分解代谢过程已做过较多研究,现就SRB处理废水的机理简单概括如下: 1.2.1SRB对SO42-的还原机理 关于SRB还原SO42-的机理,具体分为三个阶段; (1)分解阶段。在厌氧状态下,有机物通过“基质水平磷酸化”产生ATP和高能电子;

硫酸盐还原菌鉴定和检测方法的研究进展

硫酸盐还原菌鉴定和检测方法的研究进展 王明义1,2,梁小兵13,郑娅萍2,赵由之1,魏中青1 (1.中国科学院地球化学研究所环境地球化学国家重点实验室,贵州贵阳 550002; 2.贵阳医学院生物化学与分子生物学教研室,贵州贵阳 550001) 摘 要 硫酸盐还原菌有着重要的生态、经济和环境意义。系统地论述了硫酸盐还原菌鉴定和检测常用手段,如硫酸盐还原菌分离纯化培养方法、检测遗传标记的分子生物学方法和生物特征化合物方法。这些技术的发展,不断扩展了硫酸盐还原菌的研究领域和深度并使对硫酸盐还原菌在分子水平的研究成为可能。 关键词 硫酸盐还原菌;分离纯化;遗传标记;生物特征化合物 中图分类号 Q93-31 文献标识码 A 文章编号 1005-7021(2005)06-0081-04 Advanced in Identif ication of Sulfate2R educing B acteria and Its Detection Method WAN G Ming2yi1,2,L IAN G Xi2bing1,ZHEN G YA2ping2,ZHAO Y ou2zhi1,WEI Zhong2qing1 (1.State Key L ab.of Envi ron.Geochem.Inst.of Geochem.Chi nese Acad.of Sci.Guiyang,Guiz hou550002; 2.Teach,&Res.Sect.of Biochem.&Molec.Biol.Guiyang Med.Coll.Guiyang,Guiz hou550001) Abstract Sulfate2reducing bacteria(SRB)play an important role in ecology,economy,and environment.Identifi2 cation of the bacteria and common detection methods were introduced,includin g the isolation,purification of the bacteria,the molecular biological methods based on the genetic markers and detecting methods of biologically charac2 teristic compounds.With the development of these technologies,it is possible to expand the research field and pro2 fundity of SRB and their research at molecular level. K eyw ords sulfate2reducing bacteria(SRB);isolation and purification;genetic markers;biologically characteristic compounds 硫酸盐还原菌(sulfate2reducing bacteria, SRB)是一大类严格厌氧菌,其利用硫酸盐作为有机物异化时的电子受体,并在代谢活动中产生高浓度H2S。硫酸盐还原菌有着重要的生态、经济和环境意义。研究表明硫酸盐还原菌参与有机物厌氧降解和低硫酸盐环境中碳的厌氧矿物化,其产生的H2S除了对很多微生物和其他生物有毒害作用,也可以作为一些硫代谢细菌的电子供体;同时由于硫酸盐还原菌产生的H2S、代谢过程中引起油和气体酸化以及细菌和FeS对孔隙的堵塞等原因可造成钢铁、金属等材料的腐蚀,引起工程设施受损[1,2]。硫酸盐还原菌在倍受关注的甲基汞生物富集过程中起着重要作用,亦参与环境甲苯和二甲苯降解以及可溶性铀和不溶性铀转化[3~5]。作为自然界中一类生物,硫酸盐还原菌是硫化物转化、物质循环和能量流动中不可缺少的参与者和发动者。 随着环境中硫酸盐还原菌研究的深入,要求建立准确可靠的硫酸盐还原菌鉴定和微生物群落结构中硫酸盐还原菌量化分析的方法。本文围绕着对硫酸盐还原菌类群鉴定和量化分析方法作一综述。  收稿日期:2005-03-25  作者简介:王明义 男,主管检验师,硕士研究生。研究方向为微生物分子生物学。  基金项目:国家自然科学基金资助项目(40473050) 3通讯作者18 微生物学杂志 2005年11月第25卷第6期 JOURNAL OF MICROBIOLOGY Nov.2005Vol.25No.6

SRB硫酸盐还原菌测试瓶(企业标准)

SRB-HX型硫酸盐还原菌测试瓶 1.范围 本标准规定了油田注入水用SRB-HX型硫酸盐还原菌测试瓶的技术要求、检测和试验方法、检验规则、标志、包装、运输和贮存。 本标准适用于SRB-HX型硫酸盐还原菌测试瓶的质量检验。 2.引用标准 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版本均不适用于本标准。凡是不注明日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T 14643.5 工业循环冷却水中硫酸盐还原菌的测定MPN法 SY/T 0532 油田注入水细菌分析方法绝迹稀释法 3.定义 本标准采用以下定义: MPN法即最可能数法。最可能数法的原理是将同一水样的几份试样或水样的稀释液接种于培养基中。假设在培养过程中,接种的一个或多个微生物将表现出具有特征变化或非特征变化的生长。如果这些培养基出现阴性结果,那么,在一特定体积的样品内,有机体的最可能数(MPN数)可以从阳性结果的数量分布来估测。 4.技术要求 SRB-HX型硫酸盐还原菌测试瓶的技术指标应符合表1的技术要求。 表1 SRB-HX型硫酸盐还原菌测试瓶指标 项目技术指标 培养基外观无色、淡黄色透明溶液 pH值7.0~7.5 培养基体积(mL) 8.8~9.2 精密度同一样品进行平行测定,结果误差不大于±5% 5.检测和试验方法 5.1试验用设备和器材 a) 75%酒精溶液; b) 无菌注射器,1mL; c) 恒温培养箱,工作温度30℃~37℃,控温精度土2℃

d)精密pH试纸,范围4.6~8.0; e)量筒,10mL。 5.2培养基外观检查 取多个测试瓶,采用目视法观察其颜色。 5.3 pH值测定 取多个测试瓶,任取一个打开后,用精密pH纸测定pH值,应重复测量3次,以平均值为准。 5.4培养基体积测定 取多个测试瓶,任取一个打开后,将培养基全部倒入10mL量筒中,读出体积测量结果。应重复测量3次,以平均值为准。 5.5精密度测定 同一操作者在同一实验室连续时间内,按以下方法对同一样品进行硫酸盐还原菌总数平行测定,计算其结果误差。 5.5.1 根据水样中硫酸盐还原菌的多少,取数个测试瓶排成一组,并依次编上序号。 5.5.2 用75%的酒精溶液将测试瓶盖及操作者的手进行消毒。 5.5.3 用无菌注射器吸取1mL水样注入到1号瓶内,摇匀。 5.5.4 另取一支无菌注射器,从1号瓶内吸取1mL液体注射到2号瓶中,摇匀。 5.5.5 重复上述操作程序,根据含菌量的多少稀释到最后所需浓度。放入恒温箱中,在30℃~37℃培养7d—21d,测试瓶中液体变黑或有黑色沉淀,即表示有硫酸盐还原菌生长。 5.5.6 按SY/T 0532中绝迹稀释法的计数方法计算水样中细菌含量。 由于微生物是不稳定的,精密的实验是不能实现,故试验结果精密度的表达仅能按GB/T 14643.5 中的MPN程序进行。在样品中细菌的分布是不规则的,有时细菌成倍地吸附到小颗粒上,MPN正确度随着平行测试瓶的增加而增加。当使用五个平行测试瓶,每瓶增加1mL样品时,测定结果的置信度为95%。 6.检验规则 6.1每批出厂的SRB-HX型硫酸盐还原菌测试瓶产品应有符合本标准要求的产品质量检验合格证明。 6.2由每批产品总箱数的3%随机抽样,但不得少于1箱,开箱后从上、中、下层不同行列中分别各取出5瓶,混合。标明批号、取样日期、取样人,以便留样待查。留样时间规定为3个月。

油田水中硫酸盐还原菌的快速检测

doi:10 3969/j issn 1006 6896 2010 08 066 油田水中硫酸盐还原菌的快速检测 丛丽 范晓刚 古文革 吴迪 大庆油田设计院 摘要:通过大量实验研制出的硫酸盐还 原菌新型培养基配方能使硫酸盐还原菌繁殖 迅速,缩短了阳性反应的时间,可将检测所 需时间由14d缩短到7d。硫酸盐还原菌快 速检测技术具有生长指示明显,操作简单, 检测周期短的优点,其检测结果与石油行业 硫酸盐还原菌标准方法无差异,适用于油田 水驱、聚合物驱及三元复合驱采出水中硫酸 盐还原菌含量的检测。 关键词:SRB;快速检测;培养基 硫酸盐还原菌的检测是油田注入水水质常规检测的重要指标之一。目前,油田注入水中硫酸盐还原菌的标准测定方法为 油田注入水细菌分析方法 绝迹稀释法(SY/T0532-1993) 和 碎屑岩油藏注水水质推荐指标及分析方法(SY/T5329 -1994) 。检测水中硫酸盐还原菌需要14~21d,存在检测周期过长的问题,针对该问题开展了油田水中硫酸盐还原菌(以下简称SRB)快速检测技术研究。 1 培养基配方的研制 (1)SRB快速检测技术培养基配方的研制。运用现代细菌生理学的新理论和新成果,结合石油行业硫酸盐还原菌测定方法所用培养基配方和美国石油工程学会细菌分析方法API培养基配方中的优点,对能促进硫酸盐还原菌生长繁殖的生化物质进行了筛选,在快速检测技术的培养基配方中,特别添加了生长促进剂1#和生长促进剂2#,这两种生长促进剂对硫酸盐还原菌的生长具有加速作用,以加快硫酸盐还原菌的生长繁殖速度,提高代谢产物S2-的数量,缩短测试瓶阳性反应的时间,从而大幅缩短硫酸盐还原菌菌体数量的检测周期。 (2)新型SRB-7快速测试瓶现场试验。分别取大庆油田采油六厂喇400联合站过滤前含油污水及大庆油田采油四厂杏十九联合站过滤前含油污水进行新型快速硫酸盐还原菌测定方法与标准硫酸盐还原菌测定方法对比试验。对比检测结果表明,以油田水驱、聚合物驱采出水为介质,经过多次调整优化后的新型硫酸盐还原菌培养基配方,能使硫酸盐还原菌生长繁殖速度加快,缩短了阳性反应时间,第7天检测水中的硫酸盐还原菌与标准方法第14天的检测结果相同,检测结果重现性好。 2 室内对比检测 (1)杀菌剂的对比检测。用硫酸盐还原菌快速检测技术与硫酸盐还原菌标准测试方法分别对水驱和聚驱用杀菌剂的筛选、评价进行检测。从检测结果中得出,采用快速检测技术与标准测试方法对杀菌前后水中硫酸盐还原菌含量、杀菌率的检测结果均相同。 (2)新型SRB测试瓶保存时间的对比检测。选用油田3种采出水样,对存放时间在1个月、6个月和12个月的SRB-7测试瓶与SRB-14测试瓶进行了对比检测。检测结果表明,在室温条件下贮存的SRB-7测试瓶中的培养基未见有变色、变质现象,由此证明SRB-7测试瓶中的培养基保质期在室温条件下不少于12个月。 3 现场水质的对比检测 采用硫酸盐还原菌快速检测技术,对大庆油田采油一厂、采油二厂、采油六厂和采油九厂选取的10种含油污水样品进行了检测,并与已有硫酸盐还原菌标准测定方法进行对比检测。检测结果表明,采用硫酸盐还原菌快速检测技术在不同取样地点、不同硫酸盐还原菌含量、不同聚合物浓度水样的条件下,对比标准方法检测硫酸盐还原菌含量时,其检测结果表现出良好的重现性,第7天所得到的检测结果与标准方法第14天检测结果无差异,测试精度符合石油行业标准SY/T5329-1994的要求。 4 结语 (1)研制的硫酸盐还原菌培养基配方能使硫酸盐还原菌适应速度快,繁殖迅速。 (2)SRB-7测试瓶具有生长指示明显,操作简单,检测结果重现性好,检测周期为7d的优点,保质期在室温条件下不少于12个月。 (3)硫酸盐还原菌快速检测技术的测试精度符合石油天然气行业标准 碎屑岩油藏注水水质推荐指标及分析方法(SY/T5329-1994) 的要求。 (栏目主持 樊韶华) 104 油气田地面工程第29卷第8期(2010 8)

硫酸盐的去除原理及方法

硫酸盐的去除原理及方法 1、硫酸盐在污水处理中的危害: 厌氧过程中的硫酸盐还原菌竞争产甲烷菌所需要的二氧化碳,影响甲烷的产生,同时硫酸盐还原菌不仅具有转化有机酸和乙酸的功能,同时,将硫酸盐还原为硫化物,对产甲烷菌造成危害。 工业有机废水中由于硫酸盐的存在而产生的主要问题包括: 含硫酸盐的工业废水,如果不经处理就直接被排入水体中,会产生具有腐蚀性和恶臭味的硫化氢气体,不仅如此,硫化氢还具较强的毒性,会直接危害人体健康和影响生态平衡。 含高浓度硫酸盐的工业有机废水,在应用厌氧处理工艺时,高浓度的硫酸盐对产甲烷菌(MPB)产生强烈的抑制,将会致使消化过程难以进行。 硫酸盐的还原是在SRB硫酸盐还原菌)的作用下完成。 SRB是属专性厌氧菌,属于在厌氧消化过程起主要作用的4种微生物种群中 的产氢产乙酸菌。 在不存在硫酸盐的厌氧环境中,SRB则呈现产氢产乙酸菌的功能;当厌氧消化中存在硫酸盐时,则SRB不仅具有了产氢产乙酸菌转化有机酸和乙酸的功能,而且具有还原硫酸盐为H2S的特性。 存在硫酸盐的厌氧消化过程中,本可能被MPB产甲烷菌)利用还原二氧化碳生成甲烷的一切分子氢均被SRB所竞争利用,从而使还原二氧化碳生成甲烷的反应受阻。硫酸盐在SRB的作用下还原成硫化物,是污泥驯化的过程,硫化物浓度超过100mg/L时,对甲烷菌细胞的功能产生直接抑制作用。 相关的实验研究和工程实践表明,当原水SO42含量》400mg/L时就有可能转化为较高浓度的硫化物,并且是不可避免的。 2、硫酸盐的去除和转化: 利用水解酸化池的厌氧环境,硫酸盐还原菌 工艺的流程如下图所示: 微电解反应器管道混合器曝气池沉淀池水解池 该工艺是将水解池和微电解组合,微电解反应器通过微电解反应将产生大量的Fe2+,水解池中的硫酸盐还原菌(SRB)将硫酸盐还原成硫化物,含有大量硫化 物的水解池出水回流,和微电解反应器的出水在管道混合器内混合,硫化物与

亚硫酸盐还原菌及检测

亚硫酸盐还原菌及检测 一、生物学特性与卫生学意义 亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌是梭状芽胞杆菌属的一群细菌,而不是一个生物学分类单位。多指厌氧芽胞杆菌,代表性菌株是致黑梭状芽胞杆菌,其他常见的还有产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、破伤风梭菌等。此类细菌的主要特征是将亚硫酸盐还原为硫化物,多为有动力的革兰氏阳性菌,可形成芽胞,厌氧生长。 厌氧亚硫酸盐还原菌的孢子在自然环境中广泛存在,通常出现在人和动物的粪便排泄物,废水和土壤中。与大肠杆菌和其它杆菌不同的是,由于它们的孢子比营养体对物理和化学因子具有更强的抵抗力,所以可以在自然环境中存活很大时间。因而,通常将他们作为长期污染或间断污染的指示菌。它们甚至可以抵抗正常水处理所用氯的工作浓度,因此,它们对判断是否已达到控制目的非常有用。 由于此类细菌抵抗力强,即使在经适当加工处理的加工食品中其芽胞仍会存活,条件适宜时又会生长繁殖,造成食品品质降低或腐败,甚至会引起食物中毒的危险。因此在食品的制备、贮存以及食品加工厂环境卫生控制上颇受重视,作为食品、矿泉水、加工设备卫生、生产环境的卫生状况的评估指标,正确得到越来越广泛的应用。 该类细菌的检测多用于环境水质和生活饮用水污染状况的评估,在九十年代中后期开始在食品卫生领域中有所要求,但多局限于欧洲国家和地区,如法国、瑞士、英国、捷克等欧盟成员国。到目前为止,该菌一般不被作为食品卫生常规检测项目和致病菌检测内容,我国和美国未将该检测项目列入食品微生物检测项目和要求中。 二、检测方法 由于此类细菌以形成芽胞、厌氧生长和还原亚硫酸盐为硫化氢为主要特征,往往无需作进一步实验验证,因此在检测中将满足以上三个条件的一群细菌全部认定为厌氧亚硫酸盐还原菌。 检测方法一般包括以下三部分:检样在接种前在80-100℃水浴中处理10-15分钟,以杀灭抵抗力弱的芽胞细菌的营养体,同时刺激芽胞的繁殖;通过选择性培养如亚硫酸铁盐琼脂等判定是否具有还原亚硫酸盐的能力,如果有则进一步与培养基中的亚铁盐如枸橼酸铁反应,使菌落呈现黑色;培养基接种后置于厌氧环境中培养确认厌氧特征。也可在培养基中加入抗生素等抑制剂抑制其它非亚硫酸盐还原菌的生长。 下面详细介绍亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌的检验方法。 1.培养基和试剂

硫酸盐还原菌

硫酸盐还原菌(SRB) 1 SRB的分类 硫酸盐还原菌种类很多,广泛分布于土壤、海水、淡水和适宜的陆地环境中。据不完全统计,SRB己有15个属40多种,其中参与废水处理的有9个属。同时SRB也是一类代谢谱较宽的菌群,可作为其生长底物的物质有氢、甲醇、C1-C18的脂肪酸、芳香族化合物等。 2 SRB的生理特性 SRB的一个重要生理特征是生长力强。它广泛存在于水田、湖、沼泽、河川底泥、石油矿床、反当动物的第一胃等地方。SRB生长速度快,含有不受氧毒害的酶系,因此可以在各种各样的环境中生存,保证了SRB有较强的生存能力。 SRB的另一生理特性是硫酸盐的存在能促进其生长,但不是其生存和生长的必要条件。在缺乏硫酸盐的环境下,SRB通过进行无SO42-参与的代谢方式生存和生长:当环境中出现了足量的流酸盐后,SRB则以SO42-为电子受体氧化有机物,通过对有机物的异化作用,获得生存所需的能量,维持生命活动。 3 SRB的代谢机理 一般来说,硫酸故还原菌的代谢过程分为以下三个阶段: (1)分解阶段在厌氧条件下,有机物被分解,并产生少量ATP。 (2)电子传递阶段前一阶段产生的高能电子通过SRB具有的电子传递链(如细胞色素C3等)逐级传递,产生较多的ATP。 (3)氧化阶段电子传递给氧化态的硫元素,将其还原为硫离子,同时消耗ATP提供能量。 4 SRB生长所需的碳源、氮源 SRB的不同菌属生长所利用的碳源是不同的,最普遍的是利用C3,C4脂肪酸,如乳酸盐、丙酮酸、苹果酸。近20余年来,由于选用不同碳源的培养基,SRB利用的有机碳源和电子供体的种类不断扩大,发现SRB还能利用乙酸、丙酸、丁酸和长链脂肪酸及苯甲酸等。SRB在利用多种多样的化合物作为电子供体时表现出了很强的能力和多样性,迄今发现可支持其生长的基质己超过lao种。另外,SRB除了能利用单一有机碳化物作为碳源和能源(化能有机生长)外,还可利用不同的物质分别作为碳源和能源。 不同的污泥来源,不同的驯化条件得到的生态系统中利用各种碳基质的SRB的分布必然有较大差别,从而表现为污泥对于各种碳源具有不同的消化能力,进而影响到它们对硫酸盐的还原速率。据研究报道,SRB利用乳酸、丙酸、丁酸、乙酸的硫酸盐还原速率依次降低。按盐是大多数SRB生长所需的氮源。据一些报道,某些SRB还能够固氮。一些菌种能够利用氨基酸中的氮作为氮源,少数菌种能通过异化还原硝酸盐和亚硝酸盐提供氮。1992, Boopathy分离出一株脱硫弧菌(Desccl fovibrio)能够利用硝酸盐,亚硝酸盐和2, 4, 6一三硝基苯(TNT)作为氮源和电子受体. 5 SRB还原硫酸盐的影响因子 (1)pH值 pH值是影响SRB的活性及发挥最佳代谢功能的重要生态因子之一,主要体现在: a ) pH值引起细胞膜电荷的变化,从而影响SRB对底物的吸收; b)影响SRB代谢过程中各种酶的活性与稳定性,改变生态环境中底物的可给性以及毒物的毒性: c)透过细胞膜的有机酸在SRB细胞内重新电离,改变胞内的pH值,影响许多生化反应的进行及ATP的合成。

硫酸盐还原菌杀菌剂应用现状及研究进展.

292Vol.29No.2 20094Journal of Chinese Society for Corrosion and Protection Apr. 2009 (430074 : :(SRB :TG174.3:A :1005–4537200902–0154-07 1 O 2 Sulfate reducing bacteria SRB H 2S SRB [1~ 7] H 2S SRB corrosion 77%SRB SRB (microbiologicallyinduced corrosion MIC 300~ 5002

2:155 15629 2:157 15829 2 ? ( ? ? : Y ¨ ? § ? ??· ü ? ? ? ? ? 159 [27] Yi H C Liao M D Liu H Y. The manufacture of complex mixed bactericide with glutaraldehyde[J]. J. Hubei Agric. Coll. 2000 20 4 361-36 3 [28] [29] [30] [31] [32] [33] [34] ? ? ? ¨a ? ? ?22 ¨ ? [J]. (?? ?ò ? ¤ ¤1?2000?20( 4 361-363a Dai Q Y ? Huang Q B ? Deng Y D ? al. Synthesis and reet 2 action of a powerful nucleophilic long chain imidazole-2 ? aldoxime[J]. Chin. J. Org. Chem. ? 2002 ? 22(2 130-134 (¥ ??ê ? ?. 22× 3× ?? ? [J]. è ¤?2002?22(2 130-134 Liu H F ?Xu L M. The complex utilization of bactericides[J]. Acta Pet. Sin. ? 1999 ? 20(2 93-9 5 T . ¨ ?à?à [J]. ±?¤1?1999?20(2 ( ? ? 93-95a Liu H F ?Huang L ?Jiang D S ?et al. Preparation of TiO /PANI nano-composite and its performance to anti iron bacteria[J]. Mater. Prot. (Suppl. ? 200 6 ? 39 238-239 ( ? ?? ?| ê . ? TiO /PANI ?è? ? ×??? [J]. è?μ (ù ?2006?39 238-239 Ron N ? Janauer Gilbert E ? Schrier Eugene E ? al. Water et insoluble disinfectant composition[P]. US 4349646 ? 1982 Jiang S ? Wang L ? H J ? al. Novel organic polymeric Yu et biocides[J]. Polym. Bull. ? 2002 ? 57-62 6 ?? . óè ×? [J]. ×? £ (| ? ? 1?2002?6 57-62 Ikeda T ?Tazuke S ?Suzuki Y. Biologically active polycations ? 4.Synthesis and antimicrobial activity of poly (trialkylvinylbenzyl ammonium chlorides[J]. Makromolekulare Chemie ? 1984 ? 185(5 ? 869-876 Tazuke S. Biologically active polycations antimiIkeda T ? 2 2 £ ? ? ?. ó ?ó??¨ ? ù× [J]. ? ¤ ? à ?2001?13(2 85-88 salts as a novel class of cationic biocides [J]. VI. Antibacterial activity of ?bers surface-treated with phosphonium salts containing trimethoxysilane groups[J]. J. Appl. Polym. Sci. 1994 52(5 641-547 [41] Kanazawa A Ikeda T Endo T. Polymeric phosphonium salts as a novel class of cationic biocides. IV. Synthesis and antibacterial activity of polymers with phosphonium salts in

硫酸盐还原菌的检测

自 主 实 验 论 文 探究污水处理厂中 硫酸盐还原菌是否存在 班级:生物技术一班 成员:

目录 1 背景 (3) 1.1 关于污水 (3) 1.2 污水中的厌氧菌 (3) 2 实验原理、实验材料与仪器 (4) 2.1实验原理 (4) 2.2 实验材料与仪器 (4) 2.2.1 实验材料 (4) 2.2.2 实验仪器 (4) 3 试验方法 (5) 4 结果与结论 (6) 4.1 结果 (6) 4.2 结论 (7) 5 展望 (7)

1 背景 1.1 关于污水 水污染是由有害化学物质造成水的使用价值降低或丧失,污染环境的水。污水中的酸、碱、氧化剂,以及铜、镉、汞、砷等化合物,苯、二氯乙烷、乙二醇等有机毒物,会毒死水生生物,影响饮用水源、风景区景观。污水中的有机物被微生物分解时消耗水中的氧,影响水生生物的生命,水中溶解氧耗尽后,有机物进行厌氧分解,产生硫化氢、硫醇等难闻气体,使水质进一步恶化。 1.2 污水中的厌氧菌 厌氧菌是一类在无氧条件下比在有氧环境中生长好的细菌,且不能在空气(18%氧气)和(或)10%二氧化碳浓度下的固体培养基表面生长的细菌。这类细菌缺乏完整的代谢酶体系,其能量代谢以无氧发酵的方式进行。厌氧菌在污水中会分解其中的有机物,产生的产物会进一步破坏水体。因此,了解污水中的厌氧菌的存在非常有意义。 实验

2 实验原理、实验材料与仪器 2.1实验原理 硫酸盐还原菌在无氧条件下产生H2S,可以与+2价铁离子结合形成FeS黑色沉淀2.2实验材料与仪器 2.2.1 实验材料 取来自“好来西”工厂无氧废水池的废水半试管; 牛肉膏; 蛋白胨; 氯化钠; 琼脂; 5%硫酸亚铁溶液; 50ML生理盐水; 2.2.2 实验仪器 500ML锥形瓶; 搪瓷杯; 无菌吸管(1ml和10ml若干) 电炉; 高压灭菌锅; 40支洁净试管; 无菌操作台;

相关文档