微生物思考题与答案

生长与控制1

1、微生物生长与繁殖的定义

微生物生长是细胞物质有规律地、不可逆的增加，导致细胞体积扩大的生物学过程。

繁殖是微生物生长到一定阶段，由于细胞结构的复制与重建并通过特定方式产生新的生命个体，引起生命个体数量增加的生物学过程。在微生物学里, 繁殖定义为细胞数量的增加。2、快速生长的细菌里DNA复制与细胞分裂是如何协调的？

细菌中DNA的复制和细胞分裂两个过程的控制是不连接的，具有多个复制叉。在细菌个体细胞生长的过程中，染色体以双向的方式进行连续的复制，在细胞分裂之前不仅完成了染色体的复制，而且也开始了两个子细胞内DNA分子的复制。

3、细菌的二等分裂

在细菌长度的中间位置，通过细胞质膜内陷并伴随新合成的肽聚糖插入，导致横隔壁向心生长，最后在中心会合，经一个细菌分裂成两个大小相等的子细菌。

4、在给定温度下，细菌中各组分的变化量与什么有单一的函数关系，与什么无关？

与生长速度有关，与培养基中营养成分无关

5、细菌群体生长有哪些不同时期？其原因是什么？

1、迟缓期：细菌数不增加。原因：（1）种子老化（2）适应新环境的酶系统没有表达

2、对数生长期：最大生长速率，对数增加，平衡生长

3、稳定生长期：生长速率为零，活菌数最多。原因：营养物质耗尽、代谢产物积累、pH等环境变化引起细菌不宜生长

4、衰亡期：代谢活性降低、衰老自溶。原因：营养物质耗尽，有毒代谢产物大量积累

6、概念：Quorum sensing、代时、比生长速率、倍增时间、迟缓时间

Quorum sensing：细菌通过监测细胞分泌的特定信号分子浓度从而监测种群自身密度的方式。此种现象又被称为自诱导，因为信号分子的浓度会随着菌密度增加而增加，超过阈值后细菌开始表达一系列的密度依赖型基因（QS），合成生物膜、次级代谢旺盛、不再生长等等。[个体细胞间的信息交流 分化结构的确定]

代时：在细菌个体生长里每个细菌分裂繁殖一代所需要的时间

倍增时间：群体生长里细菌数量增加一倍所需要的时间

迟缓时间：微生物在生长过程中，在实际条件下达到对数生长期所需要时间与理想条件（即无迟缓期）下达到对数生长期所需时间之差，可用作图方法求出

7、代时、比生长速率、生长基质浓度之间的数学关系

代时G = 0.693/u；比生长速率u=u m×S/（Ks + S）

u m: 最大比生长速率；S：生长基质浓度；Ks: u为u m一半时的基质浓度

8、什么是细菌的平衡生长？

在对数生长期内，细胞数量对数增加、细胞各成分按比例稳定增长。具有可重复性。

8、什么是恒化器连续培养、恒浊器连续培养？如何进行连续培养？

恒化器连续培养：使培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率下进行生长繁殖。将某种必需的营养物质控制在较低的浓度，作为限制性因子，而其他营养物均过量。恒浊器连续培养：不断调节流速而使细菌培养液浊度保持恒定。一般用于菌体及与菌体生长平行的代谢产物声产的发酵工业。

连续培养：在微生物的整个培养期间，通过不断补充营养物质、移出培养物使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法

10、如何获得同步培养的细胞？

1)使用机械方法，如离心，过滤分离或膜洗脱法（硝酸纤维素滤膜）

2)使用环境条件控制技术，如温度，培养基成分和明显的生理周期

11、什么是宏基因组？它是针对了什么技术难题？有什么应用前景？

宏基因组：特定小生境中全部微小生物遗传物质的总和

针对不能纯培养的微生物

应用前景：宏基因组研究将使人们摆脱物种界限，揭示更高更复杂层次上的生命运动规律。细菌宏基因组、细菌人工染色体文库筛选和基因系统学分析使研究者能更有效地开发细菌基因资源，更深入地洞察细菌多样性，充分利用未被培养的庞大微生物种类资源。如宏基因组成为生物催化剂的新来源。

生长与控制2

1、什么是二次生长曲线？

2、微生物生长的温度三基点是什么？温度对微生物生长的影响有哪些？

最适，最高，最低。

影响：（1）酶活性；（2）细胞质膜的流动性；（3）物质的溶解度。

3、pH对微生物生长的影响是什么？

直接影响：酸破坏DNA、ATP等；碱破坏RNA、磷脂

间接影响：（1）营养物质的离子化程度；（2）营养物质的吸收；（3）有害物对微生物的毒害；

（4）代谢反应中各种酶活性

4、根据氧与微生物生长的关系可将微生物分为哪几种类型？氧对微生物有什么副作用，微

生物是通过哪种机制消除这种副作用？

专性好氧，兼性好氧，耐氧，专性厌氧，微好氧

产生有毒害作用的代谢产物，如超氧基化合物和H2O2

通过SOD酶催化O2-分解为H2O2 ，然后在H2O2酶的作用下生成水

5、微生物生长的测定方法有三类，请举例说明。

1 计数法：细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量

（1）直接计数法：显微镜，细菌计数板、血细胞计数扳

（2）间接计数法：活菌计数法，计数菌落

（3）膜过滤法：样品中菌数很低时

（4）比浊法：分光光度计

2 重量法：可以用于单细胞、多细胞及丝状体微生物

（1）湿重：离心或过滤分离菌体，洗涤，直接称重。

（2）干重：105℃烘干至恒重

（3）蛋白质量：细菌中蛋白质含量大约为65％，蛋白质含氮量16％，凯氏定氮法

（4）DNA量：8.4X10-14g/细菌细胞

3 生理指标法：

微生物的呼吸强度，耗氧量，酶活性，生物热等

“吹口气查胃病”：13C尿素呼气法快速鉴定幽门螺杆菌感染

6、抗微生物剂根据抗微生物程度分为哪三个类型？

（1）抑菌剂：抑制但不能杀死

（2）杀菌剂：杀死细胞，但不能使细胞破裂

（3）溶菌剂：细胞裂解

7、抗生素的定义是什么？常用抗生素的杀菌抑菌机制。

抗生素是由某些生物合成或半合成的一类次级代谢产物或衍生物，、能抑制其他微生物生长或杀死。机制：抑制细胞壁合成；干扰细胞膜；作用于呼吸链以干扰氧化磷酸化；抑制蛋白质合成；抑制核酸（DNA、RNA）合成。

8、抗性菌株、耐药性出现的原因是什么？

（1）细胞质膜透性改变，抗生素不能进入胞内

（2）作用靶位点被修饰改变，对抗生素不敏感

（3）合成修饰抗生素的酶，使抗生素失去抗菌活性

（4）发生遗传变异，合成新物质，替代受抑制物质

（5）光谱药物外派泵系统(multidrug efflux pump system)

（6）persister

（7）biofilm

9、常规加压灭菌法中高压灭菌和低压灭菌的条件是什么？巴氏消毒法的条件是什么？

常规加压灭菌法：高压——121℃15min；低压——105℃30min

巴氏消毒法：LTH 法：63℃30min；HTST 法：72℃15s；UHT 法：141℃2s

代谢1

1、三个基本概念：代谢、分解代谢、合成代谢

代谢：指细胞内发生的各种化学反应的总称．主要由分解代谢与合成代谢两个过程组成．分解代谢：指细胞将大分子物质降解成小分子物质，并在此过程中产生能量

合成代谢：指细胞利用简单的小分子物质合成复杂大分子过程，在这个过程中要消耗能量．2、什么是代谢网络？代谢网络的特点。

代谢网络：一个由代谢能直接支撑的整体，使分解代谢途径和合成代谢途径以及跨膜输送机构的有序组合。代谢途径和输送系统在代谢物分子水平上整合、在辅因子水平上协调，形成横跨微生物活细胞内外的代谢网络。

特点：横跨细胞内外，没有绝对的起点，也没有绝对的终点；既是相对稳定的，又是可以变化的。代谢网络变化的根据在于细胞的遗传物质，变化的原因在于细胞的生存的条件。

3、支撑代谢网络的能量的来源是什么？有哪些能量载体？

能量来源：分解代谢和合成代谢中的氧化还原反应，代谢流形成的电子传递和碳骨架转移能量载体：ATP（高能磷酸键）；NAD+（负载2e- 和2H+）

4、什么是生物氧化过程？

物质在生物体内经过一系列连续的氧化还原反应，逐步分解并释放能量的过程，也叫分解代谢（产能代谢）。

5、什么是呼吸作用？什么是发酵？区别是什么？

呼吸作用：微生物在降解底物的过程中,将释放出的电子交给NAD(P)+,FAD或FMN等电子载体，再经电子传递系统传给外源电子受体，从而生成水或其他还原型产物并释放出能量的过程．

发酵：微生物细胞将有机物氧化释放的电子直接交给底物本身未完全氧化的某种中间产物，同时释放能量并产生各种不同的代谢产物。

区别：呼吸作用需要外界提供电子受体，而发酵不需；呼吸作用中底物分子可被完全氧化为CO2，释放能量更多；呼吸作用不直接将电子交给受体，除底物水平磷酸化外还经电子传递磷酸化产生更多的ATP，有更高的生物合成速率、更高的生长速率及更高的细胞得率。

6、葡萄糖的降解途径的重要性。有哪几个阶段？

重要性：

①葡萄糖和果糖是化能异养型微生物的主要碳源和能源，葡萄糖的降解和合成代谢途径是中心代谢途径的主体。

②葡萄糖的降解途径是研究葡萄糖合成代谢途径的基础。

③既可用于降解代谢，又可用于合成代谢的途径，通称兼性代谢途径（amphibolic metabolic pathway），因为它们有双重功能，又称为两用途径。

④戊糖和其它碳水化合物则必须经降解或被转化成中心代谢途径的某中间产物后才能进入中心代谢途径。

⑤碳水化合物以外的其它有机化合物包括其它醇、醛、有机酸、氨基酸、脂类、烃类、芳香族化合物等也都是经转化后进入中心代谢途径的。

3个阶段：

第一阶段：葡萄糖进入细胞，在胞内以葡萄糖、葡萄糖磷酸酯（如，G-6-P）或葡萄糖酸的磷酸酯（如，6-P-GA）的形式出现。

第二阶段：微生物细胞将葡萄糖或磷酸葡萄糖降解到处于3C水平的丙酮酸，这一过程称为酵解（glycolysis）。其途径在不同的微生物往往不一样。

第三阶段：丙酮酸继续代谢和代谢产物的分泌。这是区分葡萄糖的氧化性代谢与发酵性代谢的关键性阶段。

7、糖酵解有哪些途径？

EMP途径、HMP途径、ED途径、PK途径

8、EMP途径特有的步骤是什么？其催化酶是什么？

二磷酸己糖[6C-2P]（果糖-1.6-二磷酸） 磷酸二羟丙酮[3C-1P] + 甘油醛-3-磷酸[3C-1P]

二磷酸果糖醛缩酶(FDPA)

9、HMP途径的主要生理意义是什么？

具有氧化和回补功能：提供NADPH形式的还原力；生成各种生物合成前体

10、选用ED途径或PK途径会有哪些优势？

ED途径：底物范围广，葡萄糖醛酸、果糖酮酸、甘露糖醛酸等都可以先各自转化成KDPG 然后降解；为其他途径提供building block，中间产物GA-3-P 和G-6-P经HMP途径非氧化阶段的反向运转先后生成各种4、5C中间产物，它们可以参与嘌呤、嘧啶、芳香族氨基酸、His、维生素K2、CoQ、对-氨基苯甲酸、叶酸等的合成。

PK途径：在厌氧条件下运行；拓宽了底物范围，接入5C途径（Xu-5-P），不但可以利用葡萄糖，而且可以利用D-核糖，D-木糖和L-阿拉伯糖。

11、电子传递系统的功能是什么？

从电子载体接受电子并将电子传递给电子受体，实现电子流载体的循环；通过合成ATP把在电子传递过程中释放的一部分能量保存起来，将电子流能量转化为化学能。

代谢2

1、大肠杆菌从供氧条件转入厌氧条件时，TCA环发生什么样的变化？

①依赖NAD的丙酮酸脱氢酶（PDH ）被不依赖NAD的丙酮酸-甲酸裂合酶（PFL）所替代，以减少厌氧条件下NADH再生的麻烦（很多还原力NADH无电子受体O2无法循环）；

②α- 酮戊二酸脱氢酶合成受阻遏，使得TCA环环式运行中断，在OAA处发生分支的分叉途径，形成还原支路和氧化支路，由于这时氧化支路的酶也受一定程度阻遏，TCA中间产物

虽仍有合成但合成速度下降；

③延胡索酸还原酶（FR）被诱导合成，有了从OAA到SCA的还原途径（与TCA环逆向）。

2、生理性发酵的意义是什么？有哪些主要的发酵产物及相关菌株？

还原力（NAD+，NADH）的循环

3、什么是向心途径与离心途径？

向心途径：代谢网络中，胞外碳架物质跨膜并注入中心板块所流经的途径

离心途径：代谢网络中，碳架物质离开中心板块所流经的代谢途径

4、什么是回补途径？举例说明。

回补途径：对兼性代谢途径因生物合成而消耗的中间产物的回补。

1)CO2的固定:

①丙酮酸在丙酮酸羧化酶（PC）催化下的羧化：PYR + CO2 →OAA；

②PEP在PEP羧化酶（PEPC）催化下的羧化：PEP+CO2→OAA；

③丙酮酸在苹果酸酶（ME ）的催化下生成苹果酸：PYR + CO2→MLA（→OAA）。

2)乙醛酸循环：乙酸 草酰乙酸

3)甘油酸途径

5、自养微生物中发现的固定CO2的途径是什么？异养微生物中发现的固定CO2的途径是

什么？

自养：

1)卡尔文循环：CO2的固定；被固定的CO2的还原；CO2受体的还原。

2)还原性三羧酸循环：在光合细菌和绿硫细菌内发现，每循环一次固定四分子CO2，合成一分子OAA,消耗三分子ATP，两分子NADP(H)和一分子FADH2

3)还原的单羧酸环：不需要ATP，只要有Fd就能运转

异养：

甘油酸途径（见上）

6、什么是生物固氮？根据固氮微生物与高等植物以及其它生物的关系，可以分为哪几类？生物固氮：一些特殊类群的原核生物能够将分子态氮还原为氨的过程。

三类：

1)自生固氮体系

固氮菌属（Azotobacter）生长好氧固氮能力强

巴氏固氮梭菌生长厌氧固氮能力弱

蓝细菌即能固氮又能固CO2。

2)联合固氮体系

这些固氮菌在某些作物的根系粘质鞘内生长发育，并把所固定的氮供给植物。

3)共生固氮体系

根瘤菌和豆科植物的共生固氮体系－－研究得最多

7、结瘤过程中，根瘤菌与豆科植物之间的分子对话。

？

8、代谢的调控分哪两类？

酶活性调节：体内已有的酶分子的活性调节，在酶化学水平上发生。

酶合成调节：酶分子的合成量，在基因表达调控水平上发生。

9、什么是次级代谢？其产物都有哪些？

次级代谢：微生物在一定的生长时期，以初级代谢产物为前体，合成一些对微生物的生命活动无明确功能的物质的过程．

产物根据作用可分为抗生素，激素，生物碱，毒素及维生素

基因表达调控1

1、基因表达调控的本质是什么？有什么特点？

本质：酶合成量的调节。

特点：粗放、慢。

2、转录起始过程中依次形成哪些复合体？

封闭复合物、开放复合物、三元复合物

3、什么是操纵子，什么是启动子？

操纵子：原核生物细胞中功能相关的基因顺序排列。这些基因的表达同时受统一调控。

启动子：包括RNA聚合酶结合位点及其附近的一些顺式作用元件。

4、有哪些实验方法可以检测某一蛋白质是否与DNA结合？

凝胶阻滞法，印迹法

5、DNA结合蛋白质有哪些特殊结构？它们的共同特点是什么？

结构：

（1）螺旋-转角-螺旋结构（Helix-Turn-Helix）

（2）锌指结构（zinc finger）

（3）亮氨酸拉链（leucine zipper）

特点：

（1）识别DNA大沟；

（2）依靠a螺旋识别DNA

（3）有稳定a螺旋的结构

6、根据调节蛋白和诱导物作用的不同，转录调控系统分为哪几类？

正控阻遏正控诱导，负控阻遏负控诱导

7、什么是顺式作用？什么是反式作用？

顺式作用：由核酸或特定DNA序列影响自身基因表达活性的作用，作用于自身DNA区段反式作用：由调控蛋白及类似物介导的影响位于其他位置或其他DNA分子上的调控作用，作用于非自身DNA区段

8、PTS系统介导的葡萄糖效应如何影响乳糖操纵子的表达？信号传递、阻遏作用、激活作

用是如何进行的？

1）诱导物阻遏

借助LacI介导的负控诱导系统。葡萄糖代谢的存在阻止LacI的诱导物进入

细胞里，使LacI持续阻遏lac操纵子的转录表达。

2）分解代谢抑制

借助cAMP-CRP的正控诱导系统。葡萄糖代谢的存在降低体内cAMP的浓度，

使cAMP-CRP复合体不能有效地激活乳糖操纵子。

（1）信号传递。葡萄糖的存在影响PTS系统中的磷酸基团分布，进而影响透过酶活性和腺苷酸环化酶的活性，引起诱导物阻遏和分解代谢抑制。

（2）蛋白质与DNA的相互作用

LacI、cAMP-CRP复合体以及RNA聚合酶

（3）蛋白质与蛋白质的相互作用

两个LacI二聚体之间相互作用，形成四聚体；CRP与RNA聚合酶之间的相互作用。

基因表达调控2：

1、TrpR介导的色氨酸操纵子的调控系统是属于哪种调控系统？

答：负控阻遏型

2、什么是弱化子？色氨酸操纵子的弱化作用是如何调控操纵子表达？

答：位于转录起始位点和结构基因之间的特殊序列。

在细胞内某种氨酰-tRNA足够时表现其终止功能．当trp缺乏时，tRNAtrp也缺乏，使前导肽不被翻译，核糖体在两个相邻的色氨酸密码子处停止，阻止1：2配对，从而形成2：3配对以致3：4不能形成茎－环终止子结构，将RNA聚合酶放行越过先导区进入结构基因导致操纵子表达．如果trp过量，则可得到tRNAtrp ，使核糖体越过色氨酸密码子的位置导致前导肽被正常翻译，终止信号出现使转录中断（p250）

3、二组分系统的二组分是什么？各自有什么功能？

答：

传感蛋白：自身磷酸化，组氨酸激酶、酪氨酸激酶不一定是膜蛋白，具有激酶活性，功能是感受信号。

应答调节蛋白：被磷酸化/去磷酸化，直接参与表达调控不一定是阻遏蛋白，常常位于细胞质中。（功能书上也没有原文表述，自己描述下就得了吧）

4、分析大肠杆菌氮调节系统中的基因表达调控，包含哪四种典型的调控模式？

σ因子不同，σ24 切换；NtrB/c 二组分调节系统；酶活性/酶量调节；信号控制1〉正反馈2〉glnK刹车机制（李伟强笔记）

5、同属一个操纵子的两个基因表达量有显著差异是什么原因造成的?这种表达调控属于哪种调控?

答：含稀有密码子多的基因表达效率低而引起的．属于转录后调控

6、生物体内的调控顺式元件为什么往往不是最佳保守序列？

答：我认为，最佳保守序列只代表了比较大的结合常数，在实际的调节中，每个基因的转录水平差别很大，即使同一基因在不同情况下表达水平差别也很大，这个结合常数只要适合实

际的表达水平就足够了。而且，如果结合常数太大了，反而降低了其受调控的灵活性。

遗传1：

1、证明DNA是遗传物质的两个经典实验。

答：Griffith的转化实验（1928年）肺炎链球菌实验和T2噬菌体的感染实验（1952年）Hershey & Chase

2、基因组的定义是什么？

答：指存在于细胞或病毒中的所有基因（新书P207）

3、原核生物基因组有哪些特点？

答：遗传信息的连续性、功能相关的结构基因组成操纵子结构、结构基因是单拷贝rRNA往往多拷贝、基因组的重复序列少而短。

4、细胞内质粒的分子结构通常是什么？从细胞中分离的质粒的分子结构是什么？

答：细胞内通常以共价闭合环状（CCC）的超螺旋双链DNA分子形式存在；细胞中分离的质粒DNA还会有另外两种构型：OC(open circular)型和L(linear)型（课件P17）

5、什么是窄宿主范围质粒、广宿主范围质粒和穿梭质粒？

答：窄：复制起点较特异，只能在一种特定的宿主细胞内复制

广：复制起点不特异，可在许多种细菌内复制

穿梭：具有两个或以上复制起点的质粒，可在原核和真核细胞内启动复制（P214）

6、什么是质粒的不亲和性？

答:如果将一种类型的质粒通过接合或其他方式导入某一合适的但已含一种质粒的宿主细胞，只经少数几代后，大多数子细胞只含有其中一种

质粒，那么这二种质粒便是不亲和的

不能在同一细胞共存的质粒是因为它们共享一个或多个共同的复制因子或相同的分配系统（P214）

9、转座子中与转座有关的因子是什么？转座引起的遗传效应有哪些？

答：转座酶和末端重复序列。（我不太明白语转座有关的因子到底指什么。转座子也叫转座因子，这样理解的话有三种：插入序列IS、转座子Tn 和某些病毒如Mu、D108）

遗传效应：插入突变、染色体畸变、基因的移动和重排

10、从一个菌株的基因型信息中，判断出哪个氨基酸营养缺陷型。

（这道题没明白什么意思）是指命名规则么？

命名规则：

1966年M.Demerec规则：

（1）每一基因座位用三个小写字母表示；说明这一基因的特性的一个或两、三个英文单词的前面三个字母；

（2）产生同一突变表型的不同基因，加一个大写字母表示；

（3）同一基因的不同位点加阿拉伯数字表示；

（4）如果突变位点所属的基因还不确定，大写字母用一短线代替。

例子：his 组氨酸基因；hisA、hisB是依次被定位的组氨酸基因；

trp 色氨酸基因；trpA23、trpA46是不同位点突变的trpA基因。

这些基因符号在不引起误解的情况下，也可以用来表示突变型。如果会引起误解，就加上加号表示野生型，减号表示突变型。

11、什么是同义突变、错义突变、无义突变、移码突变、回复突变和suppression?

答：

同义：碱基变化未导致氨基酸序列密码子变化

错义：碱基序列的改变引起产物氨基酸的改变

无义：形成终止密码子使翻译提前终止的突变

移码：由于缺失或插入额外的碱基使翻译的阅读框发生改变，从而导致从改变位置后的氨基酸序列的完全变化

回复突变：使突变体恢复原来野生型的基因型

Suppression:gene undergoes mutational event in its anticodon region that enables it to recognize and align with a mutant

nonsense codon (such as UAG)to insert an amino acid (tyrosine) and permit completion of the translation.(课件)

12、什么是营养缺陷型、野生型和原养型？

答：

营养缺陷型：一种缺乏合成其生存所必须的营养物的突变形；

野生型：没突变的；

原养型prototroph 指在基本培养基中能增殖的，在营养上独立的细胞、个体或系统。为营养缺陷型的对应词。一般作为野生型的同义词使

用。但营养缺陷型发生回复突变或抑制基因突变以及重组时，此类突变型虽然也能在基本培养基上增殖，但其含义却与野生型有区别。因为

有的突变型实际上表现为原养型与营养缺陷型之间的性状，这类突变型称为部分营养缺陷型（bradytro－Ph）。

（https://www.wendangku.net/doc/c85088531.html,/Biology/200701/20070106173921_17659.shtml）

13、自发突变有哪些特性？如何证明自发突变的非对应性？

1 非对应性：突变的发生与环境因子无对应性

2 稀有性：突变率定义

3 规律性：特定微生物某一特征的突变率具有一定规律性

4 独立性：引起各种性状改变的基因突变彼此是独立的，基某种细菌均可以一定的突变率产生不同的突变，一般互不相互干扰

5 遗传和回复:突变可以稳定遗传，突变也可以导致表型回复到野生型

6 可诱变性：通过理化引自等诱变剂的诱变作用可以提高自发突变的频率，但不改变突变的本质。（P220）

证据是波动实验。

遗传2：

1、什么是水平基因转移？水平基因转移有哪些途径？

答：自然界的微生物可通过多种途径进行水平方向的基因转移，通常称为水平基因转移（horizontal gene transfer,HGT. 这个定义给的……跟没给一样）（P224）

接合、转导、转化(P224)

2、描述发现接合作用的Lederberg重组实验和意外发现转导作用的Lederberg重组实验。答：两株多重营养缺陷型菌株只有在混合培养后才能在基本培养基上长出原养型菌落

说明：原养型菌落是两菌株之间发生了遗传交换和重组所致。（P225）

U型管中沙门氏菌LT22A（携带P22噬菌体的溶源性细菌）和非溶源性细菌在不接触的情况下，同样出现原养型细菌。

说明：可透过U型管滤板的P22噬菌体进行着基因的传递。（P228）

3、普遍性转导和局限性转导的主要区别是什么？

答：普遍性转导：由于错误装配一次转移；可以转移染色体的任何部分到受体

局限性转导：噬菌体总是携带相同的dna片段。

与普遍转导的区别：1、被转导的基因共价地与噬菌体DNA连接，与噬菌体DNA一起进行复制、包装以及被导入受体细胞中；2、局限性转导颗粒携带特殊的染色体片段并将固定的个别基因导入受体，故称之为局限性转导。（P227，229

4、自然转化的生理意义是什么？

答：（我觉得这道题问得就是自然转化存在的原因）：

营养物质

突变修复

遗传多样性

5、人工转化有哪些方法？

CaCl2法电穿孔法基因枪法

6、什么是共转导和共转化？

（就是几个基因一通转导或者转化？）

7、准性生殖包括哪几个过程？如何把异核体与单倍重组体或二倍体区分？

答：准性生殖包括异核体的形成、二倍体的形成以及体细胞交换和单元化

异核体产生的分生孢子是单倍的，

A+B-或A-B＋，能在基本培养基上

发芽，但不能在上生长。

单倍重组体的分生孢子是单倍的，A+B+，

能在基本培养基上生长。

二倍体产生的分生孢子是二倍的，

A+B-/A-B+，能在基本培养基上生长。（课件P24）

基因工程1：

1、基因工程的基本过程是什么？其核心技术是什么？

答：（1）分离或合成基因；

（2）通过体外重组将基因插入载体；

（3）将重组DNA导入细胞；

（4）筛选阳性克隆，进行鉴定或测序；

（5）控制外源基因的表达；

（6）得到基因产物或转基因动物、转基因植物

核心技术：DNA的特异切割，DNA的分子克隆，DNA的快速测序（课件P1-2）

2、寡核苷酸指导的定点突变方法中，使用尿嘧啶脱糖苷酶缺陷型菌株带来什么益处？答：可以用U取代t却不被细胞分解，修改后的质粒可以在野生型的细菌里被分解掉原来的链而只保留修改后的。（自己编的，不知道怎么表达比较准确，供参考吧）

3、重组PCR定位突变的具体步骤。

答：变异部位位于基因中间时，在需要诱变的位置合成一对含有变异碱基的互补引物，然后分别与5’、3’引物进行pcr，这样便可得到两个PCR产物，分别含有变异碱基，由于二者中间有一段序列彼此重叠，在重叠部位经重组pcr就能得到变异的pcr产物。

变异部位在末端时，直接设计含有突变碱基的引物扩增。

4、对细菌染色体进行突变有哪些方法？以Mini-Tn5和pKO3质粒为例，分别说明。

（还没整明白）

附pKO3质粒介绍

1) pK03 has a temperature sensitive Psc101 replication orgin. Strains harboring the plasmid must be grown at 30 deg C under chloramphenicol selection.

2) SacB appears to be mildly stressful to the cell even without added sucrose. It is a good idea not to carry the plasmid for too many generations in a single strain as you will accumulate mutations either in the sacB gene or in the bacterial genome to bypass this toxicity.

3) Make sure you test your plasmid for all of the markers (ts, sacB, cat) before you clone anything into it. We generally check each batch of pK03 before shipping. In the absence of selection the ts and sacB markers are basically stable. The pK03 strain has "very-slow-growth" (NOT "no-growth") at 43 deg or on sucrose, so streak tests are not recommended. Instead, we take a pK03 "test-colony" and serially dilute and plate for single colonies at both 30 and 40 degrees. If the 43 degree colonies are smaller than the 30 degree colonies then the "test-colony" is "ts". When performing the knock-out protocol, we only pick the large colonies on the 43 deg plates. We do the same serial dilution with sucrose/LB versus LB plates to test for SacB.

4) We are not prepared to advise researchers on the use of this plasmid in any other species or using any cloning sites other than those used in the J. Bact. Paper. All other uses are at you won risk.

5) The pSC101 plasmid is considered to be low copy and is present at 5-10 copies per cell. You may need to adjust your plasmid prep protocols to increase your yield.

5、克隆载体的基本要求是什么？

（1）必须有独立复制功能，要有独立的复制子；

（2）必须有供外源DNA片段插入的限制性内切酶位点，并且这些位点位于载体复制的非必需区；

（3）必须有可供选择的遗传标记，如抗生素抗性基因，便于对阳性克隆的鉴别和筛选。（课件P13）

6、质粒克隆载体的优点是什么？

.独立的复制起点，较小的相对分子量，较高的拷贝数，便于选择的标记，易于导入细胞，安全性、含有多种限制酶的单一识别位点。

7、柯斯质粒载体与噬菌体克隆载体的共同点和不同点是什么？

共同点：都含有来自λ噬菌体粘性末端的DNA片段即cos位点

不同点：不形成子代噬菌体，仅以质粒形式存在并复制（从别人那儿抄的，没找到）

附：

柯斯质粒载体（cosmid vector）即粘粒载体，是由λ噬菌体的cos位点和质粒DNA共同构建而成的载体。柯斯质粒载体含有来自质粒的一个复制起点、抗药性标记、一个或多个限制酶单一位点，以及来自λ噬菌体粘性末端的DNA片段，即cos位点。它对于将DNA包装成λ噬菌体粒子是必需的。

柯斯质粒载体的优点：

①具有噬菌体的高效感染力。而在进入宿主细胞后不形成子代噬菌体仅以质粒形式存在。

②具有质粒DNA的复制方式。重组DNA注入宿主细胞后，两个cos位点连接形成环状DNA分子，如同质粒一样进行复制。

③具有克隆大片段外源DNA的能力。这是柯斯质粒的最大优点。柯斯质粒本身一般只有5～7kb左右，而它克隆外源DNA片段的极限值竟高达45kb，远远超过质粒载体及λ噬菌体载体的克隆能力。

（噬菌体克隆载体我不确定是不是指λ噬菌体载体）

8、什么是多克隆位点？

多克隆位点（multiple cloning site, MCS），是包含多个（一般大于20个）限制性酶切位点（restriction site）的一段很短的DNA序列。也称为多位点接头（polylinker），是基因工程中常用到的载体质粒的标准配置序列。MCS中，一个限制性酶切位点通常是唯一的，即它们在一个特定的载体质粒中只出现一次（百度百科）

9、什么是载体的选择标记？原核克隆载体和真核克隆载体一般选用什么样的选择标记？

选择标记的定义……自己编吧

抗生素抗性基因原核

营养代谢基因真核（课件P20）

基因工程2：

1、什么是限制修饰系统？

利用限制酶降解进入细胞内的外源DNA，同时用甲基化酶修饰细菌本身DNA，以避免被酶降解。（课件上没有涉及，课本P281）

2、什么是同尾酶、同裂酶？

同裂酶：来源不同，但识别和切割序列相同。

同尾酶：来源不同，识别和切割序列也不相同，但切出来的粘性末端一样。

3、克隆外源DNA的宿主的选用需要注意哪些方面？

（1）能够高效吸收外源DNA；

（2）具有使外源DNA进行高效复制的酶系统；

（3）限制修饰系统缺陷；

（4）重组缺陷（RecA-）；

（5）便于进行基因操作和筛选；

（6）安全性，对人、畜、农作物无致病性（课本P283）

4、什么是a互补？

即蓝白斑法的原理．某些载体上携带有lac Z’基因一段序列，其编码β－半乳糖苷酶的α肽，而宿主细胞为lac ZΔM15的突变株．当将上述载体的转化细胞培养与含有IPTG-X-Gal的平板中时，由于基因内互补作用，产生有生物活性的β－半乳糖苷酶，将培养基中无色X-Gal分解成为半乳糖和蓝色物质使菌落呈蓝色．

如外源DNA插入载体上lac Z’序列，则会使α肽基因失活，失去α-互补作用，使菌落为无色．（原理来自网上，课本P281有所涉及）

5、举例说明利用插入失活来筛选阳性克隆？

（是指蓝白斑筛选么？）

6、原核表达载体中，对启动子有什么要求？

要有合适的强启动子，而且是诱导型的。

lac启动子，受lac I阻遏蛋白调控，IPTG诱导

trp启动子是色氨酸启动子受trp R编码阻遏蛋白调控

tac启动子有lac启动子的-10区和trp启动子的-35区融合而成，汇合了两种启动子的优点，同样受lac I调控。

P L P R是lamda噬菌体左右向启动子，其温度敏感的阻遏蛋白受温度调控；

T7噬菌体启动子，非常强的启动子，只被T7RNA聚合酶调控。（P287）

7、tac启动子受何种调控？P L P R受何种调控？lacI q是什么？cIts857是什么？

Lacl q是超表达laci的突变基因

Clts857：cI温度敏感突变基因

以上两题或者参考课件

1 常用启动子：足够强，并且是诱导型的

（1）lacUV5启动子，受LacI阻遏蛋白的调控，IPTG诱导；

（2）trp启动子，受trpR阻遏蛋白的调控；

（3）tac启动子，trp+lac，受LacI调控，IPTG诱导；

常与染色体或质粒编码的lacI q配搭。

（4）P L、R启动子，受cI阻遏蛋白的调控；

cI阻遏蛋白通常是温度敏感型，高温失活，P L、R启动子开始表达。

（5）T7噬菌体启动子

常把T7 RNA聚合酶基因插入到宿主染色体上。

后三种比较常用。（课件P12）

8、用T7启动子表达外源蛋白的表达载体对宿主有什么要求？

T7启动子的表达非常强，以致使正常宿主基因不能表达．外源蛋白的过量表达必将影响细胞生长．因此宿主细胞的生长和外源基因的表达应该分为两个阶段进行．第一阶段使含有外源基因的宿主细胞迅速生长直至获得足够量的细胞，第二阶段是启动调节开关，使所有细胞外源基因同时高效表达，产生大量有价值的基因表达产物．（p288）

9、除了启动子以外，需要考虑的序列元件有哪些？

核糖体结合位点（特别是SD序列）、终止子、密码子的偏爱性（P288）

10、酵母表达载体都是穿梭质粒，其上有哪些针对原核宿主和真核宿主的关键元件？这样构建的原因是什么？（课件P17-18）

1 启动子

诱导型启动子：GAL、PHO5

启动子激活蛋白负调节蛋白诱导物

GAL GAL4 GAL80 半乳糖（激活）

PHO5 PHO4 PHO80 无机磷（抑制）

负调节蛋白与激活蛋白结合，抑制激活蛋白的激活作用，每细胞中转录产物

少于1个；当诱导信号存在时，如有半乳糖（对GAL启动子）或缺乏无机磷

（对PHO5启动子），负调节蛋白与激活蛋白分离，激活蛋白行使激活功能，

mRNA丰度能达到总poly A mRNA的1%以上。

组成性启动子：mRNA丰度能达到总poly A mRNA的1%以上。

ADH1（乙醇脱氢酶I）

PGK（3-磷酸甘油酸激酶）

2 终止子

有终止子提高mRNA的稳定性及蛋白质表达量。

3 复制子

2m质粒复制子，每个细胞维持10～40个拷贝，不表现质粒不相容性。

4 选择性标记

URA3、LEU2、HIS3和TRP1。

宿主酵母菌必须是相应营养缺陷突变株。

5 有用的蛋白结构域

信号肽序列：可引导表达产物分泌到细胞外；

核定位序列：把表达产物转运到细胞核中；

抗原决定表位多肽序列：可用于免疫性检测和纯化。

原因是为了在E.coli中扩增，在酵母中表达

11、比较非融合蛋白表达和融合蛋白表达的优劣。（课件P21）

6.

表达非融合蛋白的优缺点

优点：得到天然的外源蛋白。

缺点：容易被宿主蛋白酶降解，降低产量。

融合蛋白的表达

优点：

容易高效表达；N端宿主基因产物大多是宿主体内高表达蛋白质。

融合蛋白在宿主细胞内比较稳定。

7.在需要诱变的位置合成两个带有变异碱基的互补引物，分别与5’引物与3’引物作PCR,得到两个分别带有变异碱基的PCR产物．而后退火使之彼此重叠，在重叠部分经重组PCR即可得到诱变的PCR产物

8.同源重组法

质粒载体去除法：ori温度敏感突变／自杀质粒

微生物工程

1、诱变处理应注意哪些条件？

细胞均匀分散

细胞中的细胞核越少越好孢子、芽孢

细菌对数生长期

孢子稍微萌发

诱变剂的剂量最适剂量

什么是正选择标记、负选择标记？

微生物育种：筛选的方法（正选择和负选择）。

正选择标记：抗阻遏和抗反馈突变型

诱变处理后，选育结构类似物抗性突变株。

要得到的产物是阻遏或反馈因子，野生细胞内产量有限。

通过诱变，得到选择性的结构类似物抗性突变株。

负选择标记：营养缺陷型突变株

（1）青霉素浓缩法

（2）饥饿法

在分支代谢途径中，利用营养缺陷型突变株，解除协同反馈抑制，有效地

使另一途径中的终产物积累。

抗阻遏、抗反馈突变型提高产物产量的原因是什么？筛选抗阻遏、抗反馈突变型的策略是什么？

筛选出对阻遏或反馈调节不敏感的菌株，其合成反应不能被阻遏蛋白或产物的反馈调控组织，可以不断地积累产物。

策略是使用正选择标记。（……我实在是不知道怎么描述了）

苏氨酸缺陷型突变株体内容易积累L-赖氨酸的原因是什么？用此突变菌株进行发酵培养时要注意的是什么？

原理是赖氨酸和苏氨酸与苏氨酸的合成共用一种前体－天冬氨酸以及第一个酶天冬氨酸激酶。苏氨酸和赖氨酸协同抑制天冬氨酸激酶。如果筛得苏氨酸合成缺陷型，那么这种突变菌株里赖氨酸可以积累。

需要注意：要加适当苏氨酸，使细胞能正常生长，但不致引起反馈。

用大肠杆菌二氨基庚二酸缺陷型为出发菌种筛选各种氨基酸缺陷型的原理是什么？

原因：大肠杆菌二氨基庚二酸缺陷型有赖氨酸，蛋白质合成继续，但细胞壁合成仍停止，这种代谢不平衡导致细菌细胞破裂。

如果二氨基庚二酸缺陷型细胞经诱变处理发生另一个氨基酸缺陷型突变，那么它又丧失了合成蛋白质的能力，代谢作用又恢复平衡状态，这时即使给以赖氨酸也不会死亡。所以在含有赖氨酸的培养基中可以分离得到各种氨基酸缺陷型。

什么是DNA shuffling技术？（BBS上资料）

筛选机制

先将来源不同但功能相同的一组同源基因，用DNA核酸酶I进行消化产生随机小片段，由这些片段组成一个文库，使之互为模板和引物，进行PCR扩增，当一个基因拷贝片段作为另一个基因拷贝的引物时，引起模板转换，重组因而发生，导入体内后，选择正突变体作新一轮的体外重组。

什么是代谢工程？（课件P12）

主要是通过基因组学、转录组学这些“新显微镜”，寻找存在于微生物体内的不同代谢途径之间的基因调控网络，进而找到影响调节微生物体内“目的代谢产物”产量的关键因子，最后通过现代分子生物学手段，对其进行改造或引入新的代谢途径，最终提高“目的代谢产物”产量。

代谢工程的三个基本策略及三个基本步骤。（课件P14）

策略：

改变代谢途径

扩展代谢途径

引入新的代谢途径

三个基本步骤：

代谢流分析

代谢途径合成

优化的重组菌株

微生物思考题(一)

微生思考题（一） 一、微生物在生物六界中的地位？ 病毒界 原核生物界 真核生物界 真菌界 动物界 植物界 二．微生物的主要特点？ 1．形态微小，结构简单 2．代谢旺盛，繁殖快速 3．适应性强，易变异 4．种类繁多，分布广泛 三．细菌的基本形态，细菌的染色观察 细菌的基本形态：球状 ：(a)单球菌 (b)双球菌 (c)四联球菌 (d)八叠球菌 (e)葡萄球菌 (f)链球菌 杆状： (a)球杆菌 (b)单杆菌 (c)双杆菌 (d)链杆菌 螺旋状：(a) 螺菌 (b)螺旋体 (c)弧菌

四．细菌细胞壁结构与功能？革兰氏染色机理如何区别革兰氏阳性和阴性细菌？ 细菌细胞壁结构 革兰氏阳性菌特点：细胞壁厚度大，20~80 nm；化学组分简单，一般含90%肽聚糖和10%磷壁酸。 革兰氏阴性菌特点：肽聚糖层很薄（仅2~3nm），在肽聚糖层外还有一个外膜，成分较复杂，个壁厚度较G+菌薄，机械强度较G+菌弱。 细胞壁功能：①固定细胞外形和提高机械强度，保护细胞免受外力的损伤；②为细胞生长、分裂和鞭毛运动所必需；③阻拦酶蛋白或抗生素等有害物质进入细胞； ④赋予细菌特有的抗原性和致病性(如内毒素)，并与细菌对抗生素和噬菌体的敏感性密切相关。 革兰氏染色机制 G-：细胞壁薄,肽聚糖含量少,交连程度低,网孔大.又由于有机物质含量高,乙醇溶解了脂类后,网孔更大.所以:结晶紫和碘易被从细胞中抽提出来,速度快,而呈复染沙黄的颜色-红色.

G+：细胞壁厚,肽聚糖含量高,网孔小,经乙醇脱水后,使网孔更小,结晶紫,碘不能被抽提出来,速度慢,而呈紫色. 五．细胞内膜系统，细胞质及其内含物 1．细胞内膜系统 间体——细胞膜向内延伸或折叠形成的一种管状、层状或囊状结构. 载色体——光合细菌的膜囊结构 羧酶体——某些硫杆菌细胞内散布着由单层膜围成的多角体，其内含1，5-二磷酸核酮糖羧化酶. 2.细胞质及其内含物 细胞质（cytoplasm）:是细胞质膜包围的除核区外的一切半透明、胶体状、颗粒状物质的总称，是进行物质代谢及合成核酸蛋白质的场所。 细胞质组成: 水分(约80％)、蛋白质、核酸、脂质、糖类、无机盐 细胞内含物（inclusion body）：储藏物、核糖体、羧酶体等。 1. 核糖体： 合成蛋白质的场所，每个细菌约有1万个70S的核糖体，由30S和50S两个亚基组成。 2. 贮藏性颗粒： 通常较大，为单层膜包围，营养物质过剩时积累，营养物质贫乏使动用。 ①多糖（糖原和淀粉）：碳源和能源贮藏物。细菌在碳源过量而氮源限量的条件下生长是会大量积累糖原。

微生物学课后习题及答案

第一章 一.微生物有哪些主要类群？有哪些特点？ 答：类群：1.真核细胞型；2.原核细胞型：细菌，放线菌，衣原体，支原体，立克次式体； 3.非细胞型：病毒。 特点：1.体小，面积大 2.吸收多，转化快3.生长旺，繁殖快4.分布广，种类多 5.适应强，易变异二.你认为现代微生物学的发展有哪些趋势？ 答：研究领域有制药、治理环境污染等，微生物的基因科学，微生物病毒学，现代微生物学已发展出很多的分支学科，如病毒学，微生物基因组学，应用微生物（生物农药，浸矿微生物等），病源微生物（主要指细菌），海洋微生物，古细菌等，现代微生物学的研究主要集中在菌种的遗传背景，市场化应用等，食品微生物快速检测技术、食用菌的生产、功能性成分的提取等。 三.简述微生物与制药工程的关系。 答：1.人类除机械损伤外的疾病都是由微生物造成的 2.微生物又是人用来防治疾病的常用方法 3.微生物在自然环境中分布广泛来源很多 4.微生物的代谢产物相当多样，可用于生物制药 5.微生物和人之间的关系，涉及人、微生物、植物的协同进化 6.遗传学与生态学 名词对照： 古菌域：Archaea 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，古菌域为其中一大类别。（不确定）细菌域：bacteria 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，细菌域为其中一大类别。（不确定）真核生物域：Eukarya 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，真核生物域为其中一大类别。（不确定） 微生物：microorganism 是所有形态体积微小的单细胞或者个体结构简单的多细胞以及没有细胞结构的低等生物的通称。 第二章 一.比较下列各队名词 ①.原核微生物与真核微生物：原核微生物没有明显的细胞核，无核膜，核仁，无染色体，其细胞核为拟核，细胞内么有恒定的内膜系统，核糖体为70S型，大多为单细胞微生物。真核微生物有明显细胞核，有各种细胞器，核糖体为80S型。 ②.真细菌与古菌：相同点：以甲硫氨酸起始蛋白质的合成，核糖体对氯霉素不敏感，RNA聚合酶和真核细胞的相似，DNA具有内含子并结合组蛋白。 不同点：细胞膜中的脂质是不可皂化的，细胞壁不含肽聚糖等。 ③.原生质体与球形体：原生质体是脱去细胞壁的细胞，是由原生质分化而来，具体包括细胞膜和细胞质以及细胞器；球形体：指在螯合剂等存在的条件下用溶菌酶部分除去革兰氏阴性菌的细胞壁而形成的缺损型细胞。 ④.鞭毛、菌毛和性菌毛：鞭毛是一端连于细胞膜，一端游离的、细长的波形纤丝状物。菌毛为一些菌体表面的非鞭毛的细毛状物，菌毛是许多革兰氏阴性菌菌体表面遍布的比鞭毛更为细、短、直、硬、多的丝状蛋白附属器。其化学组成是菌毛蛋白，菌毛与运动无关；性菌毛在少数革兰阴性菌，比普通菌毛略微稍粗，一个菌体只有1～4根，通常由质粒编码。带有性菌毛的细菌具有致育能力。 ⑤.芽孢与孢子：芽孢是有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。孢子是细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。 二.比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构，并说明革兰氏染色的原理。

大学微生物学试题及答案

第一章绪论 一、名词解释 1、微生物 2、微生物学 二、填空题 1、微生物学的先驱者是____，微生物学的奠基人是_____，细菌学的奠基人是_____ 。 2、微生物都是些个体微小、构造简单的低等生物，包括属于原核类的细菌(____和古生菌)、放线菌、蓝细菌、____、立克次氏体、____；属于真核类的真菌（____、____和蕈菌）、原生藻类和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和____（____、拟病毒和____）。 3、微生物由于其体形都极其微小，因而导致了一系列与之密切相关的五个重要共性，即体积小，____；____，____；生长旺，繁殖快；____，____；____，____。 4、微生物的种类多主要体现在________、生理代谢类型的多样性、代谢产物的多样性、________、________等五个方面。 5、微生物学是一门在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态构造、生理代谢、________、________和分类进化等生命活动基本规律，并将其应用于工业发酵、医药卫生、生物工程和环境保护等实践领域的科学。 6、按是否具有细胞结构，微生物可分为________型微生物和________型微生物。 7、细胞型微生物根据其细胞结构特征又可分为________微生物和________微生物。 8、按照Carl Woese 的三界论，微生物可分为________、________和________。 9、原核微生物主要包括________、________、________、________、________、________和________。 10、微生物的主要特点有：________、________、________、________和________。 三、选择题 1、适合所有微生物的特殊特征是( )。 A.它们是多细胞的 B.细胞有明显的核 C.只有用显微镜才能观察到 D.可进行光合作用 2、第一位观察到微生物的科学家是( )。 A. Robert Hooke B. Louis Pasteur C. Joseph Lister D. James T.Watson 3、细菌学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 4、Louis Pasteur对微生物学的贡献在于他( )。 A. 发现了病毒 B. 提出了自然发生说理论 C. 抨击了进化论 D. 号召人们关注微生物在日常生活中的重要性 5、Louis Pasteur采用曲颈瓶试验来( )。 A. 驳斥自然发生说 B. 证明微生物致病 C. 认识到微生物的化学结构 D. 提出细菌和原生动物分类系统 6、微生物学中铭记Robert Koch是由于( )。 A. 证实病原菌学说 B. 在实验室中成功地培养了病毒 C. 发展了广泛采纳的分类系统 D. 提出了原核生物术语 7、微生物学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 四、是非题

【高考生物】微生物实验思考题参考答案及知识要点

（生物科技行业）微生物实验思考题参考答案及知识 要点

微生物实验思考题参考答案及知识要点 （可能在整理时部分问题未能考虑全面，若有异议，请同学们自行从网络或课本上搜索查找）微生物实验思考题参考答案 一．酵母菌形态观察及死活细胞鉴别 1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 美蓝浓度高了，代谢不太活跃的活细胞也会被染色，从而使观察到的死细胞较多，活细胞较少；反之，则代谢微弱的细胞也能还原美蓝，不被染色，从而使观察到的死细胞较少，活细胞较多。 二.细菌的简单染色和革兰氏染色 1.革兰氏染色中那一步是关键?为什么？你是如何操作的？ 革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色（是脱色时间）。如果脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s）。2.固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同？ 自然死亡的菌体本身已经部分自溶，结构已经改变。固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。 3.不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？ 能。在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋），被酒精脱色为革兰

微生物学课后习题答案

微生物习题集 第一章绪论 一、术语或名词 1．微生物(microorganism)因太小，一般用肉眼看不清楚的生物。这些微小生物包括：无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)；具原核细胞结构的真细菌、古生菌以及具真核细胞结构的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、单细胞藻类、原生动物等。但其中也有少数成员是肉眼可见的。 2．微生物学(microbiology)研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学，分离和培养这些微小生物需要特殊技术。 3．分子微生物学(molecularmicrobiology)在分子水平上研究微生物生命活动规律的科学。4．细胞微生物学(cellularmicrobiology)重点研究微生物与寄主细胞相互关系的科学。 5．微生物基因组学(microbic genomics)研究微生物基因组的分子结构、信息含量及其编码的基因产物的科学。 6．自生说(spontaneousgeneration)一个古老的学说，认为一切生命有机体能够从无生命的物质自然发生的。 7．安东·列文虎克(AntonyvanLeeuwenhoek，1632—1723)荷兰商人，他是真正看见并描述微生物的第一人，他利用自制放大倍数为50～300倍的显微镜发现了微生物世界(当时被称之为微小动物)，首次揭示了一个崭新的生物世界——微生物界。 8．路易斯·巴斯德(LouisPasteur，1822—1895)法国人，原为化学家，后来转向微生物学研究领域，为微生物学的建立和发展做出了卓越的贡献，成为微生物学的奠基人。主要贡献：用曲颈瓶实验彻底否定了“自生说”，从此建立了病原学说，推动了微生物学的发展；研究了鸡霍乱，发现将病原菌减毒可诱发免疫性，以预防鸡霍乱病；其后他又研究了牛、羊炭疽病和狂犬病，并首次制成狂犬疫苗，证实其

4微生物复习思考题加答案

什么是微生物？有哪些主要类群？ 定义：微生物是所有形体微小、单细胞或结构较为简单的多细胞生物、甚至没有细胞结构的生物的通称。 种类：微生物类群十分庞杂，包括： 无细胞结构的病毒、类病毒、拟病毒等， 属于原核生物的细菌、放线菌、立克次氏体、衣原体等， 属于真核生物的酵母菌和霉菌，单细胞藻类、原生动物等。 非细胞：病毒、朊病毒 原核生物：细菌、支原体、放线菌 真核生物：酵母、真菌等 一些国家的微生物教学体系内容中还涉及藻、地衣、线虫、原生动物等 微生物有哪些主要特点？举例加以说明。 体形微小，结构简单 易变异，适应性强：变异率10－6 易于培养与繁殖：大肠杆菌20min/代 体积小，比表面积大：易于营养物质的吸收 种类多，分布广：海洋、硫矿、热泉 微生物的发展经历了几个阶段？各阶段的代表人物为谁？ 感性认识阶段（史前时期） 形态学发展阶段（初创时期）1664年，英国人虎克（Robert Hooke）曾用原始的显微镜对生长在皮革表面及蔷薇枯叶上的霉菌进行观察。 生理学发展阶段（奠基时期）法国人巴斯德（Louis Pasteur）（1822～1895）发现并证实发酵是由微生物引起的彻底否定了“自然发生”学说 德国人柯赫（Robert Koch））微生物学基本操作技术方面的贡献细菌纯培养方法的建立（1843～1910b）设计了各种培养基，实现了在实验室内对各种微生物的培养 微生物快速发展时期 青霉素的发现 大量抗生素的发现 发酵工业技术的发展 分子生物学发展阶段（成熟时期)微生物成熟时期 1950s DNA双螺旋的发现， 1970 基因工程技术、分子生物学发展 4.试述微生物学的奠基人及其贡献。 1676年，微生物学的先驱荷兰人列文虎克（Antonyvan leeuwenhoek）首次观察到了细菌他没有过大学，是一个只会荷兰语的小商人，但却在1680年被选为英国皇家学会的会员。巴斯德发现并证实发酵是由微生物引起的彻底否定了“自然发生”学说；免疫学——预防接种,首次制成狂犬疫苗巴斯德消毒法：60～65℃作短时间加热处理，杀死有害微生物 .柯赫（1）微生物学基本操作技术方面的贡献细菌纯培养方法的建立设计了各种培养基，实了在实验室内对各种微生物的培养流动蒸汽灭菌染色观察和显微摄影;对病原细菌的研究作出了突出的贡献,具体证实了炭疽杆菌是炭疽病的病原菌,发现了肺结核病的病原菌（1905年获诺贝尔奖,证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——著名的柯赫原则

微生物课件思考题 -

第二章 1、为什么说Koch等建立的微生物纯培养技术是微生物学建立与发展的基石？一般可用哪些方法获得微生物的纯培养？ 2、微生物的最显著特征就是个体微小，通常只能通过显微镜进行观察。试列举在显微观察中通过改变样品的反差以改善观察效果的技术及方法。 第四章： 试比较营养物质进入微生物细胞的几种方式的特点。 第五章 不同营养类型的微生物在不同条件下产生ATP和还原力的方式与特点。 第六章 细菌的生长繁殖与高等动植物的有哪些异同？ 其典型生长曲线可分几期，其划分依据是什么？ 第七章 思考题：试结合一步生长曲线分析病毒的特点，并与细菌进行比较。 第八章 1、如果二个不同营养缺陷标记（a - b - c + d + 和 a + b + c - d -）的菌株经混合后能产生在基本培养基平板上生长的原养型重组菌株，请设计一个实验来决定该遗传转移过程是转化、转导还是接合? 2、自然遗传转化与人工转化之间有什么关系?为什么在一般情况下它们转化质粒的成功率有如此大的差别? 第十章 1）基因工程的基本步骤是怎样的？其中哪些需涉及到微生物的参与？ 2）为什么说微生物学不仅为基因工程提供了理论基础，同时也提供了操作技术？ 第十一章 1）试论微生物与水体富营养化作用，你认为对此类污染该如何进行防治？ 2）试用一些典型例子说明微生物与生物环境之间的相互关系。 第十二章 1. 为什么能用生物大分子作为衡量生物进化的标尺？有哪些选用原则？建立16 S r RNA 系统发育树的意义何在？ 2. 为什么在现代微生物分类中，任何能稳定地反映微生物种类特征的资料，都有分类学意义，都可以作为分类鉴定的依据？你知道有哪些项目已被用于细菌学分类和鉴定？

微生物学复习题和参考答案

微生物学复习题和参考答案（农学类) 涂国全编写 2010年05月 第一章绪论 一、复习题(30题） １.什么是微生物？简述其3大特点和所属类群。 ２.什么是马铃薯晚疫病?试述其在历史上对人类的一次严重危害。 3.如何理解“在近代科学中，对人类福利最大的一门科学要算是微生物学了”？ 4.人类认识微生物世界的主要障碍是什么？在微生物学发展早期,学者们是如何逐一克服的? 5．微生物学的发展经历了哪５个时期?各期的代表人物是谁? ６.试简介列文虎克(A．vanLeeuwｅｎhｏek，1６3２~17２3），并说明他对微生物学的贡献。 ７．巴斯德学派在微生物学发展中有何重大贡献? ８．科赫学派在微生物学发展中有何重大贡献？ 9.由巴斯德设计的著名曲颈瓶试验，有何重大的理论与实际意义？ 10.巴斯德、科赫等微生物学研究成果的“横向扩散”,产生了哪些分支学科?各学科的代表人物是谁？ 11.微生物学史上的“成熟期”始于何时、何人?试简述本期的特点。 12.在医疗保健事业的发展史中，与微生物学有关的“六大战役”是什么?它们对人类的进步起了什么作用? １３．在发酵工业和生物工程产业中有哪些关键性的工艺技术?试述青霉素的大规模生产对当代发酵工业和生物工程所产生的巨大影响。 １４.什么是生物工程(学)？它由哪5大具体工程组成？它们间的相互关系是怎样的？ 15．简述微生物在生态平衡和环境保护中的作用。 １６．微生物学对生物学基础理论的研究有何重大贡献?为什么微生物可以发挥这种作用？ 1７.为什么说微生物是基因工程的支柱?

１８.在经典遗传学发展为分子遗传学的过程中，微生物起了什么作用?为什么能起这种作用? 1９.微生物学有哪６类分科？试简述分类依据并各举数例。 20.试列举10项起源微生物学研究的特有操作技术。 ２1.试列举微生物学中3项最重要的独特技术，并分别说出其创始人、基本原理及其对发展微生物学的贡献。 2２.何谓科赫法则（Ｋｏch￠s Pｏstulaｔes)? 23．微生物的“生长旺、繁殖快”特性对发酵生产有何实际意义?试举例说明之。 2４.为什么说在微生物的５大共性中,“体积小、面积大”这一条是最根本的? 2５.微生物的“生长旺、繁殖快”特性对生物学基础理论的研究有何意义？试举例说明之。 26.微生物界有哪几项特点可称得上是“生物界之最”?(应答10项) ２7．当前人类正面临哪５大危机?解决危机的关键是什么？为什么说在解决这些危机中微生物可以发挥其不可替代的作用? 28简述现代微生物学发展的6大趋势。 2９．为什么说“2１世纪是生物学世纪”？ ３0．简述微生物学在那几方面的突出贡献使人类的平均寿命延长了几十年。为什么？ 二、参考答案(５４小题） １．答案定义:一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。 特点:个体微小(＜0.1 mm）；构造简单；进化地位低。 类群：原核类：细菌,放线菌，蓝细菌;立克次氏体,支原体，衣原体。 真核类：真菌（酵母菌，霉菌)，原生动物,显微藻类。 非细胞类:病毒,类病毒,朊病毒。（注:也可用表解法解答) 2．答案一种由病原性真菌引起的严重植物病害。1９世纪中叶，在欧洲发生了一场马铃薯晚疫病大流行，毁灭了5/6的马铃薯,个别地方甚至颗粒无收，并引起爱尔兰等地大量居民饿死或逃往北美。 起因：当地过分强调种植单一高产粮食作物~马铃薯;当时连年气候异常,长期阴雨,温湿度过高，十分有利于病原真菌的生长繁殖和传播。 3.答案不同的人群或个人有其不同的幸福观或福利观。 一般都集中在追求钱、权、利、名、业、健(健康长寿)等几个方面。 健康在幸福观上应居首位；在近代多门科学中,对人类健康的关系最为密切、已作出了重要贡献并将进一步作出更大贡献的科学就是微生物学。 4.答案主要障碍有以下几点： 个体微小：列文虎克利用其自制的显微镜,克服了肉眼的局限性，首次观察到多种微生物的个体形态；

微生物课件上思考题及答案

第一章细菌的形态与结构 1.细菌有哪3种形态 2.细菌的基本结构和特殊结构有哪些特殊结构各有何作用 +菌和G-菌细胞壁的结构由哪几部分组成 4.青霉素和溶菌酶为什么不能杀灭革兰阴性菌 5.简述革兰染色法操作步骤 参考答案 1 基本形态三种：球菌；杆菌；螺形菌 2基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞 荚膜功能：抗吞噬作用：是病原菌的重要毒力因子 抗杀菌物质损伤：如溶酶体、补体 粘附作用：形成生物膜与致病性有关 鞭毛功能；有鉴别意义, 鞭毛蛋白有抗原性：H抗原 某些细菌的鞭毛与致病有关 菌毛功能：细菌的黏附结构 介导细菌在局部定植 与细菌的致病性密切相关 性菌毛还能传递细菌的毒力和耐药性 芽孢功能：具有很强的抗高温、抗干燥、抗化学消毒剂和抗射线能力 3 革兰阳性菌：由肽聚糖和磷壁酸组成。其中肽聚糖又由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成三维立体结构。革兰阴性菌：由肽聚糖和外膜组成。肽聚糖仅由聚糖骨架、四肽侧链构成二维平面结构 4 G-有外膜阻止抗菌素进入；保护细胞壁组分肽聚糖不受溶菌酶分解 5 革兰染色法步骤： 涂片→固定→结晶紫初染→碘液媒染→95%酒精脱色→复红复染 观察结果：Ｇ＋菌：紫色Ｇ－菌：红色 第二章细菌的生理 2.细菌生长曲线分哪4个阶段 3.细菌根据对氧的需要程度分为哪几种类型 4.细菌合成代谢产物有哪几种 5.常用的消毒剂有哪些种类 6.简述化学消毒剂的杀菌机制 7简述紫外线杀菌的作用机制 8.在温度和时间相同的情况下，为什么湿热灭菌法的效果比干热法好 参考答案 2.迟缓期、对数期、稳定期、衰退期四阶段 3．专性需氧菌2）专性厌氧菌3）兼性厌氧菌4）微需氧菌 4．源质、毒素和侵袭性酶、抗生素、细菌素、维生素、色素等 5．①酚类②醇类③重金属盐类④氧化剂⑤表面活性剂 6.①使菌体蛋白质变性或凝固②破坏细菌的酶系统③改变细菌细胞壁或胞浆膜的通透性，导致细菌死亡7．其波长在200-300nm有杀菌作用，其中以265-266nm最强，这与细菌DNA吸收光谱一致。细菌DNA吸收紫外线后，使一DNA条链上两个相邻胸腺嘧啶公假结合成二聚体，改变了DNA分子构型，干扰了DNA 的复制和转录，导致细菌变异或死亡。

微生物实验报告思考题参考答案

实验一、微生物的简单染色思考题 1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么？ 答：油镜在使用时必须在载玻片与物镜之间滴加镜头油。油镜使用过程中要注意两点：（1）、使用后镜头的清洁：镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度，用完油镜必须进行“三擦”（观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯（或者乙醇乙醚溶液）擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原）。 （2）、.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。 2、使用油镜时，为什么必须用镜头油？ 答：在使用普通显微镜时，当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。 3、镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？ 答：低倍镜视野比较大，能看到的范围大，容易找到观察的目标，然后在用放大倍数高的高倍镜或油镜有目的的观察。 实验二、革兰氏染色 （1）为什么必须用培养24 h以内的菌体进行革兰氏染色？ 答：24h以内的菌体处于活跃生长期，菌体细胞壁具有典型特征，而处于老龄的革兰氏阳性细菌壁结构开始发生变化，染色时会被染成红色而造成假阴性 （2）要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步是关键步骤？为什么？答：应注意如下几点： 其一，选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性； 其二，涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性； 其三，脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性 （3）当你对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠？ 答：当要确证未知菌的革兰氏反应时，可用已知菌进行混合涂片，使二者染色条件保持一致，如果已知菌的结果与预期相符，则证明操作操作正确，结果可靠。 实验三、微生物的显微镜直接计数法 1、在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点？ 答：1）优点：直观、快速、操作简单。 2）缺点：

微生物学复习思考题

名词解释： 微生物、微生物学、纯培养、纯培养物无菌技术、灭菌、消毒、过滤富集培养 简答题： 1、微生物的特点有那些？ 2、Mullis的贡献对我们有什么启发？ 3、列文虎克对微生物学有什么贡献？4 、巴士德和柯赫对微生物学的发展有什么贡献？5、柯赫证病律的具体内容是什么？6 、拂来明对微生物学的贡献是什么？7 、我国著名的微生物学家有那些？分别作出了什么贡献？8、干热灭菌和高压蒸汽灭菌有什么差别？9、举出几种常用的消毒药品和方法？10、纯培养有几种方法？11、为什么活菌记数和直接记数有很大的差别？12、按照功能和营养成分培养基有几种类别？13、菌种保藏的基本原理是什么？1 4、保藏微生物的基本方法有那些？1 5、已发现的微生物的形态有几种？1 6、芽孢杆菌和芽孢梭菌有何异同？1 7、举例说明非芽孢杆菌的特点？1 8、古细菌有那三大类？1 9、根霉、曲霉和青霉的形态特征如何？20、吃什么食用菌可以预防感冒？21、吃什么食用菌可以增加智力？22、原核微生物和原核微生物的主要类群有那些？23、球菌的基本形态有几种？24、细菌的基本结构组成有那些？25、细菌的特殊结构有那些？26、细胞壁及其功能是什么？27、肽聚糖的基本组成是什么？28、G+ 和G-细胞壁的结构有和异同？29、Gram染色的基本过程如何？30、细菌为什么可以分为G+ 和G-两种？31、无壁细胞有那几种？32、聚-B-羟丁酸有什么功能？33、气泡有什么功能？34、什么是糖被、根据物理特征不同可以分为几类？35、糖被的化学组成和功能是什么？36、鞭毛有何功能和种类？37、鞭毛的一般结构和基体的组成如何？38、什么是芽孢、有何特点？39、芽孢耐热的分子机制如何？40、为什么放线菌介于真菌和细菌之间而更接近于细菌？41、放线菌的繁殖方式有几种？42、在什么条件下使用火焰灭菌？43、稀释倒平板法和涂平板法有什么差别？

微生物实验报告思考题参考答案

实验一、微生物得简单染色思考题 1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么? 答:油镜在使用时必须在载玻片与物镜之间滴加镜头油。油镜使用过程中要注意两点：(１）、使用后镜头得清洁：镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度，用完油镜必须进行“三擦”(观察完毕,上悬镜筒,先用擦镜纸擦去镜头上得油,然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯（或者乙醇乙醚溶液)擦去残留得油,最后用擦镜纸擦去残留得二甲苯，后将镜体全部复原）。 (2)、、观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜,最后用油镜。当目视接目镜时,特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器,以免压碎玻片或损伤镜面. 2、使用油镜时,为什么必须用镜头油？ 答：在使用普通显微镜时，当光线由反光镜通过玻片与镜头之间得空气时，由于空气与玻片得密度不同,使光线受到曲折,发生散射，降低了视野得照明度。若中间得介质就是一层油（其折射率与玻片得相近）,则几乎不发生折射,增加了视野得进光量，从而使物象更加清晰。3、镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不就是直接用高倍镜或油镜观察？ 答：低倍镜视野比较大，能瞧到得范围大，容易找到观察得目标,然后在用放大倍数高得高倍镜或油镜有目得得观察。 实验二、革兰氏染色 (１）为什么必须用培养2４ｈ以内得菌体进行革兰氏染色？ 答：24h以内得菌体处于活跃生长期，菌体细胞壁具有典型特征，而处于老龄得革兰氏阳性细菌壁结构开始发生变化，染色时会被染成红色而造成假阴性 （2）要得到正确得革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步就是关键步骤?为什么? 答：应注意如下几点： 其一,选用活跃生长期菌种染色,老龄得革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性； 其二，涂片不宜过厚,以免脱色不完全造成假阳性; 其三,脱色就是革兰氏染色就是否成功得关键，脱色不够造成假阳性,脱色过度造成假阴性（3）当您对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠？ 答：当要确证未知菌得革兰氏反应时,可用已知菌进行混合涂片,使二者染色条件保持一致,如果已知菌得结果与预期相符，则证明操作操作正确，结果可靠。 实验三、微生物得显微镜直接计数法 1、在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点? 答:1）优点:直观、快速、操作简单。 2）缺点: 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌得计数; 需要相对高得细菌浓度； 个体小得细菌在显微镜下难以观察； 实验四、微生物大小得测定 1、在不改变目镜与目镜测微尺，而改用不同放大倍数得物镜来测定同一细菌得大小时,其测定结果就是否相同?为什么？ 答:相同；目镜测微尺就是一块圆形玻片,其中央刻有精确等分得刻度，有把５毫米刻成为50等分或把10毫米长度刻成100等分.测量时,将其放在接目镜中得隔板上来测量经显微镜放大后得细胞物象。由于在不改变目镜与目镜测微尺，而改用不同放大倍数得物镜来测定同一细菌得大小时，物象得放大倍数与每小格目镜测微尺所代表得长度在变化比例上就是同步得，

微生物学教程(第二版周德庆)-复习思考题答案+微生物学练习题

微生物学教程(第二版周德庆)-复习思考题答案+微生物学练习题

微生物学复习思考题 绪论 1、什么叫微生物？微生物包括哪些类群？ 微生物是一切肉眼看不见或者看不清的微小生物的总称。包括属于原核类的细菌（真细菌和古生菌）、放线菌、蓝细菌（旧称蓝绿藻或蓝藻）、支原体、立克次氏体、衣原体；属于真核类的真菌（酵母菌、霉菌和蕈菌）、原生动物和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒、拟病毒和阮病毒）。 2、了解五界系统、六界系统、三域学说及其发展，说明微生物在生物界中的地位。 五界系统：动物界、植物界、原生生物界（包括原生动物、单细胞藻类和粘菌等）、真菌界和原核生物界（包括细菌蓝细菌等）。 六界系统：1949年Jahn提出包括后生动物界、后生植物界、真菌界、原生生物界、原核生物界和病毒界；1977年我国学者王大耜提出动物界、植物界、原生生物界（包括原生动物、单 2

细胞藻类和粘菌等）、真菌界和原核生物界（包括细菌蓝细菌等）、病毒界；1996年美国的P.H.Raven提出包括动物界、植物界、原生生物界、真菌界、真细菌界和古细菌界。 三域学说：细菌域、古细菌域、真核生物域。 3、了解微生物学的发展史，明确微生物学研究的对象和任务。 整个微生物学发展史是一部逐步克服认识微生物的重要障碍，不断探究它们生命活动规律，并开发利用有益微生物和控制、消灭有害微生物的历史。它分为：史前期、初创期、奠基期、发展期、成熟期。 对象：在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态结构、生理代谢、遗传变异、生态分布和分类进化等生命活动基本规律。 任务：发掘、利用、改善和保护有益微生物，控制、消灭或改造有害微生物，为人类社会的进步服务。 4、微生物的五大共性（特点）是什么？表示微 3

《卫生微生物学试题及答案》

卫生微生物(一) 一、名词解释 1.指示微生物:就是在常规卫生监测中,用以指示样品卫生状况及安全性的(非致病)微生物(或细菌)。 2.消毒:就是指杀灭或清除传播媒介上病原微生物,使其达到无害化的处理。 3.生物战剂:在战争中用来伤害人、畜与毁坏农作物、植被等的致病微生物及其毒素称为生物战剂。 4.土著微生物:就是指一个给定的生境中能生存、生长繁殖、代谢活跃的微生物,并能与来自她群落的微生物进行有效的竞争。它们已经适应了这个生境。 5.高效消毒剂:可杀灭所有种类微生物(包括细菌芽胞),达到消毒合格要求的消毒剂,如戊二醛、过氧乙酸等。 6.微生物气溶胶:以固体或液体微小颗粒分散于空气中的分散体系称为气溶胶。其中的气体就是分散介质。固体或液体微小颗粒如尘埃、飞沫、飞沫核及其中的微生物称为分散相,分散悬浮于分散介质(空气)中,形成所谓微生物气溶胶。 7.水分活性值:就是指食品在密闭容器内的水蒸气压与相同温度下的纯水蒸气压的比值。 二、填空 1.微生物与环境相互作用的基本规律有限制因子定律、耐受性定律、综合作用定律。P12 2.菌落总数包括细菌菌落总数、霉菌菌落总数与酵母菌菌落总数。P43 3.紫外线消毒的影响因素有照射剂量、照射距离、环境温度。P68 4.生物战剂的生物学特性就是繁殖能力、可传染性、防治困难、稳定性较差。P86 5.生物战剂所致传染病的特点就是流行过程异常、流行特征异常。P90 6.用于食品霉菌、酵母菌计数的培养基为马铃薯-葡萄糖琼脂、孟加拉红与高盐察氏培养基P289 7.按微生物要求,将药品分为规定灭菌药品与非规定灭菌药品两大类。P233 8.我国评价化妆品细菌安全性指标包括、、与特定菌的检验 三、简答题 1、简述水微生物的生态功能。P101 答:水微生物的生态学功能大体可概括为以下几个方面:1)能进行光能与化能自养;2)能降解有机物为无机物,这些无机物可作为生产者的原料;3)能同化可溶性有机物并把它们重新引入食物网;4)能进行无机元素的循环;5)细菌可以作为原生动物的食物;6)土著微生物能攻击外来微生物,使后者很难生存。 2.鲜蛋的抑菌物质及其抑菌作用P181 答:禽蛋含有丰富的营养物质,就是微生物生长繁殖的良好环境。但就是禽蛋又具有良好的防御微生物侵入的结构及各种天然抑菌条菌物质。蛋壳有保护作用,蛋壳表面有壳胶膜,可保护鲜蛋不受微生物侵入。蛋白内含有许多溶菌、杀菌等作用的因子,如溶菌酶,这就是一种碱性蛋白,作用于革兰阳性菌的胞壁肽聚糖,使之裂解而溶菌。此外,在蛋白中还有一种伴清蛋白,它能螯合重金属离子,特别就是铁、铜、锌等离子,结果使这些离子不能被细菌利用,就是一种重要的抑菌物质。 四、问答

微生物思考题及参考答案

微生物思考题及参考答案 １、用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片与镜头之间加滴什么油？起什么作用？ 答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验得污染、操作时，先低倍再高倍、用完要擦掉油、加香柏油,作用就是增加折光率,也就就是增加了显微镜得分辨率、油得折光率与分辨率成反比（有公式)，同时与波长成正比、 ２、什么就是物镜得同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义? 答:在一般情况下，当物像在一种物镜中已清晰聚焦后，转动物镜转换器将其她物镜转到工作位置进行观察时，物像将保持基本准焦得状态，这种现象称为物镜得同焦。利用这种同焦现象，可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短得物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦，从而避免由于使用粗调节器时可能得误操作而损坏镜头或载玻片。 3、影响显微镜分辨率得因素有哪些? 答：物镜得NA值(物镜得数值孔径）与照明光源得波长、 ４、美蓝染色液作用时间得不同,对酵母菌死细胞数量有何影响，试分析原因 答：会造成更多得死细胞，在显微镜下观察,活得就是透明无色，衰老得就是淡蓝色，死亡得就是蓝色,如果美蓝染色液作用时间过长,会造成细胞脱水死亡并渗透染液，影响实验结果。 5、镜检时如何区分放线菌基内菌丝，气生菌丝以及孢子丝 一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮,可瞧到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体. 6、在进行细菌涂片时应注意哪些环节 １、载玻片应该冷却后再涂片. 2、如果就是涂布液体，可以用毛细管或接种环滴一小滴，然后轻轻抹开,一圈足够. ３、如果就是涂布菌落或菌苔,应该在载玻片上先滴一滴水,再将菌落或菌苔涂布上去，接种环得尖蘸一点点即可。 4、为了节省时间，可以将干燥与热固定合并成一步。但就是应该避免高温,因为温度一高，细菌会变形。 5、染色时间视染色液种类而定。如结晶紫只需几十秒，亚甲基蓝则需一到两分钟。 6、冲洗时，水流不能太大,而且尽量避免水流直接冲在涂片上。 7、冲洗后干燥，可以用酒精灯加热以节省时间,同样得，应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形. ７、进行细菌制片时为什么要进行加热固定?在加热固定时应注意什么? 固定得目得有三个：

微生物学复习思考题

《微生物学》复习思考题 第1章绪论 1.名词解释：微生物，微生物学 2.用具体事例说明人类与微生物的关系。 3.微生物包括哪些类群？它有哪些特点? 4.为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人? 5.试根据微生物的特点，谈谈为什么说微生物既是人类的敌人，更是人类的朋友？ 6.简述21世纪微生物学发展的主要趋势。 第2章原核微生物 1.名词解释：肽聚糖、溶菌酶、核区、异形胞 2.根据革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁通透性来说明革兰氏染色的机制。 3.什么是芽孢？它在什么时候形成？试从其特殊的结构与成分 说明芽孢的抗逆性。渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制的？ 4.立克次氏体有哪些与专性活细胞内寄生有关的特性？它们有什么特殊的生活方式？衣 原体与立克次氏体都为专性活细胞内寄生，两者有何差别？ 5.螺旋体和螺旋菌有何不同？ 6.什么是缺壁细菌？试简述四类缺壁细菌的形成、特点和实践意义。 7.举例说明细菌的属名和种名。 8.试述古生菌和细菌的主要区别。 9.试根据细菌和古生菌细胞结构的特点，分析并举例说明为什么它们能在自然界中分布 泛。 10.细菌（狭义）、放线菌、霉菌、酵母在繁殖方式上各有什么特点？ 第三章真核微生物 1.名词解释：真菌、霉菌、酵母菌、真酵母、假酵母。 2.举例说明霉菌与酵母菌与人类的关系。 3.试列表说明真核微生物与原核微生物的主要区别。 4.试图示真核生物“9+2型”鞭毛的横切面构造，并简述其运动机理。 5.细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同？ 6.试比较细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并讨论它们的原生 质体的制备方法。 7.丝状真菌的营养菌丝和气生菌丝各有何特点？它们可以分化出哪些特殊结构？ 8.试述真菌的孢子类型和特点。 第4章病毒 1. 名词解释：病毒粒子、烈性噬菌体、温和噬菌体、溶源性转变、前噬菌体、溶源性细菌、 裂解量、类病毒、朊病毒。 2. 病毒区别于其他生物的特点是什么? 根据你的理解，病毒应如何定义? 3. 试述病毒的主要化学组成及其功能。 4. 病毒壳体结构有哪几种对称形式? 毒粒的主要结构类型有哪些?

微生物学考试题及标准答案详解

-/ 微生物学试题十二套 微生物学试题（一） 三、填空(每空1分,共15分) 1.真核微生物核糖体类型为 _ 80S _____ 。 2.大肠杆菌长为2.0μm,宽为0.5μm,其大小表示为__ 0.5μm x2.0μm ___ 。 3.研究细菌遗传、代谢性能常采用 _对数生长____ 时期的细胞。 4.酵母菌细胞壁的主要成份__葡聚糖和甘露聚糖____。 5.侵染寄主细胞后暂不引起细胞裂解的噬菌体称 __.温和噬菌体______ 。 6.微生物细胞的主要组成元素是_蛋白质_____，_核酸____，类脂和碳水化合物_。 7.食用菌是由 ___营养菌丝和生殖菌丝豆科植物共生固氮___ 组成。 8.用物理或化学方法杀死物品上大部分微生物的过程称 __灭菌____ 。 9.细菌细胞的碳、氮营养比为__ 6/1____。 10.根瘤菌可与 ___豆科植物______共生固氮 四、学名互译 1.A.niger.黑曲霉 2.B.subtilis 枯草芽孢杆菌 3. B.thuringiensis 苏云金芽孢杆菌 4. A.oryzae 米曲霉 微生物学试题（二） 一. 是非题（共10分。只需注明“对”或“错”） 1.大多数嗜热菌的G-C含量高于中温菌。 2.大肠杆菌属低等原核生物，所以其遗传物质只是一条松散的环状双链DNA，不存在DNA高级结构。 3.当菌体生长、氧吸收和糖利用的比速度下降时，青霉素的合成达到最高值。 4.初生F'菌株和次生F'菌株都属于部分二倍体。 5.分批培养时，细菌首先经历一个适应期，此期间细胞处于代谢活动的低潮，所以细胞数目并不增加。 6.渗透酶( permease)属于诱导酶，而其它种类的酶往往属于组成酶。 7.恒化培养与恒浊培养的区别在于前者的培养物群体始终处于对数生长期。 8.将HR病毒的外壳蛋白与TMV病毒的RNA混合，去感染烟草，则会出现TMV型病灶。若在感染前，用TMV抗体处理，则会钝化病毒，不出现TMV型病灶。 霉菌的基因重组常发生于准性生殖时，较少出现在有性生殖过程中。9. -/ 10.营养物跨膜的主动运输必需依靠载体和能量，而被动扩散不需要载体和能量。 二填充题（30分） 1 突变率10-10表示_ _ _ _ a_ _ _ 。 2 我们常采用_ _ a_ _ _ 浓度的NaCl 或0.1M_ _ _ b_ _ _ 来稀释菌液或清洗菌体细胞。因为_ _ c_ _ _ 。 3 在有机物为基质的生物氧化反应中，以氧为电子传递最终受体的方式称_ _ _ _ a_ _ _ _ ；以无机氧化物为最终电子受体的称_ _ b_ _ ；以有机物为最终电子受体的称_ _ _ _ c_ _ _ _ 。 4 常见的菌种保藏方法有_ _ _ _ a_ _ _ _ 、_ _ _ b_ _ _ 和_ _ _ c_ _ _ 等，其中_ _ _ d_ _ 方法保藏菌种的时间最长久。 5 对细菌简单染色法的一般步骤是_ _ _ a_ _ _ 。常用的染料有_ _ b_ _ 和_ _ c_ _ _ 等。 6 在混合菌样中获得纯菌株的方法主要有_ _ _ a_ _ _ 和_ _ b_ _ 等。

食品·微生物学实验思考题答案

食品微生物学技术思考题答案1.如何区别高倍镜和油镜 答：（1）油镜更接近标本片（2）油镜与标本间的介质是香柏油（3）油镜刻有“oil”或“Hi”字样，也刻有一圈红线或黑线为标记。 2．为什么在使用高倍镜及油镜是应特别注意避免粗调节器的错误操作答：使用高倍镜及油镜时镜头距离标片很近，而粗调节器的调节幅度较大，粗调节器的错误操作会使镜头大幅度向标本移动，很容易损坏标本和镜头。一般先用低倍镜找到物象后换到高倍镜，就只需要用细调节器了。 3.用油镜观察时应注意哪些问题在载破片和镜头之间加滴什么油起什么作用 答：（1）应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防止上次实验的污染，操作时，先低倍再高倍，用完要擦掉油。（2）在转换油镜时，从侧面水平注视镜头注视镜头与玻片的距离。使镜头浸入油中而不以压破载玻片为宜。（3）从目镜内观察，把孔径光阑开到最大，使其明亮。然后用微调将镜台下降，直至视野内物象清晰。如油镜已离开油面仍未见物象，需重复操作。加的是香柏油。作用是增加折光率，增加显微镜的分辨率。 4.在调节焦距时，往往出现一些疑似观察标本的物象点，物象点可能是目镜或物镜上的杂质，也可能是标本片上的观察对象，如何通过操作判断这些物象点是否在标片上 答：移动标本片，看物象点是否移动，如果不移动，则不在标本片上。 5．如果涂片未经热固定或固定温度过高、时间过长，会出现什么现象答：固定时间是杀死菌体，使菌体蛋白质凝固黏附于载玻片上，增加菌体对染色剂的结合力，易于着色。但是如果没固定，不容易着色，且容易被清水冲走。

温度过高会使细胞收缩变形，时间过长会导致菌体变形或形态破坏，难以着色，从而导致难以着色。 6.为什么要培养18-24h的细菌菌体进行革兰氏染色 答:此时菌体进入比较活泼的繁殖生长期，细胞壁比较好着色。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应，关键在于细胞壁的通透性的改变。如果菌龄过老，不便于显微镜下观察时阴性还是阳性菌。 7．如何操作才能保证革兰氏染色结果正确，其中的关键环节是什么答：具体操作步骤为（1）涂片，与简单染色法相同，要求薄而均匀。（2）干燥、固定，在空气中自然晾干，或将涂面朝上，在酒精灯微小火焰上干燥；在酒精灯火焰上通过3-4次，温度不宜过高。（3）染色，用结晶紫进行初染1min,然后水洗。用碘液进行媒染，用碘液覆盖染色部位1min,水洗。在涂有细菌的部位连续滴加95%乙醇，约30s，水洗脱色。用番红溶液复染1min,水洗。（4）干燥，自然干燥或用吸水纸吸干，也可以用电吹风吹干。（5）镜检。 关键环节是酒精脱色。 8．为何常用插片法培养放线菌观察个体形态 答：放线菌的营养菌丝生长在培养基表面或插入培养基里面，不易被接种针挑取制片。采用插片法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长时期的形态。 9.在显微镜下，如何区分基内菌丝和气生菌丝 答：一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到隔膜，继而断裂成球状或杆状小体。 10.放线菌与细菌的菌落最显着的差异是什么