文档库 最新最全的文档下载
当前位置:文档库 › 经典液相色谱法和色谱技术练习题

经典液相色谱法和色谱技术练习题

经典液相色谱法和色谱技术练习题
经典液相色谱法和色谱技术练习题

经典液相色谱法和色谱技术

一、单项选择题

1.在一定温度和压力下,某组分在两相间的分配达到平衡时,其在固定相与流动相中的浓度之比称为

A、分离度

B、分配系数

C、容量因子

D、相对保留值

E、保留值2.分离性质及其相似的物质的最佳方法是

A、萃取法

B、蒸馏法

C、滴定法

D、色谱法

E、沉淀法

3.液固吸附柱色谱法中吸附剂含水量越高则

A、吸附力越强

B、活性级数越小

C、活性越高

D、吸附能力不受含水量的影响

E、吸附力越弱

4.在吸附柱色谱中,吸附常数K值大的组分

A、被吸附得牢固

B、迁移速度快

C、溶解度大

D、在柱内保留时间短

E、极性小

5.在分配柱色谱中,分配系数K值小的组分在柱中

A、被吸附得牢固

B、在流动相中浓度低

C、迁移速度慢

D、迁移速度快

E、在柱内保留时间长

6.下列说法错误的是

A、色谱法是一种依据物质的物理化学性质的不同而进行的一种分离分析方法

B、在分配柱色谱中,固定相是一种液体

C、纸色谱与分配柱色谱的分离原理是相同的

D、吸附色谱法的原理是吸附与解吸附原理

E、色谱过程是一个物理过程

7.关于色谱,下列说法正确的是

A、色谱过程是一个差速迁移的过程

B、分离极性强的组分用极性强的吸附剂

C、各组分之间分配系数相差越小,越易分离

D、纸色谱中滤纸是固定相

E、分离极性强的组分用极性弱的流动相

8.在吸附柱色谱中,分离极性大的物质应选用

A、活性级别大的吸附剂和极性小的洗脱剂

B、活性高的吸附剂和极性大的洗脱剂

C、活性低的吸附剂和极性大的洗脱剂

D、活性级别小的吸附剂和极性小的洗脱剂

E、中等活性的吸附剂和极性小的洗脱机

9.气-液色谱和液-液色谱皆属于

A、吸附色谱

B、凝胶色谱

C、分配色谱

D、离子色谱

E、分子排阻色谱10.分配系数K是指在一定温度和压力下,某一组份在两相间的分配达到平衡时的浓度比值,色谱机制不同,K的含义不同,在吸附色谱中,K称为

A、吸附平衡常数B、交换系数C、渗透系数D、分配系数E、溶解平衡常数

11.吸附色谱法是依据物质的哪种性质而进行的分离分析方法

A、极性

B、溶解性

C、离子交换能力

D、分子大小

E、熔沸点

12.下列物质不能作吸附剂的是

A、硅胶

B、氧化铝

C、羧甲基纤维素钠

D、聚酰胺

E、活性炭

13.分配柱色谱的分离原理

A、吸附与解吸附原理

B、萃取原理

C、离子交换原理

D、分子排阻原理

E、毛细管电泳原理

14.下列哪种活性级别的硅胶吸附性最强

A、Ⅰ

B、Ⅱ

C、Ⅲ

D、Ⅳ

E、Ⅴ

15.在吸附柱色谱中,被分离组份的极性越弱,则

A、在柱内保留时间越长

B、被吸附剂吸附的越不牢固

C、吸附平衡常数越大

D 、应选择极性大的洗脱剂

E 、被吸附剂吸附的越牢固

16.色谱法分离混合物的可能性决定于试样混合物在固定相中的差别

A 、沸点

B 、熔点

C 、凝固点

D 、吸光度

E 、分配系数

17.下列各吸附剂中属于非极性吸附剂的是

A 、氧化铝

B 、硅胶

C 、聚酰胺

D 、活性炭

E 、离子交换树脂

18.色谱法作为分析方法的最大特点是

A 、能进行定量分析

B 、能进行定性分析

C 、能进行半定量分析

D 、既可分离又可分析混合物

E 、能进行结构分析

19.吸附柱色谱与分配柱色谱的主要区别是

A 、柱子不同

B 、洗脱剂不同

C 、操作方式不同D、分离原理不同E 、加样方式不同

20.在色谱过程中,流动相对物质起着

A 、滞留作用

B 、洗脱作用

C 、平衡作用D、分解作用E 、控温作用

21.在色谱过程中,固定相对物质起着

A 、滞留作用

B 、洗脱作用

C 、平衡作用D、分解作用E 、控温作用

22.分离非极性化合物,选择非极性固定液,则

A 、低沸点组份先出柱

B 、高沸点组份先出柱

C 、极性强的组分先出柱

D 、极性弱的组分先出柱

E 、极性强的组分保留时间长

23.俄国植物学家茨维特在研究色素成分时,所采用的色谱方法是

A 、液-液分配色谱法

B 、液-固吸附柱色谱法

C 、离子交换柱色谱法

D 、空间排阻柱色谱法

E 、气相色谱法

24.A 、B 、C 三组分的分配系数K B < K A

A 、C

B 、B

C 、A

D 、A=B=C

E 、B < A

25.可用于分离碱性或中性化合物的氧化铝是

A 、碱性氧化铝

B 、中性氧化铝

C 、酸性氧化铝

D 、碱性和中性氧化铝 D 、酸性和中性氧化铝

26.色谱法分离不同组分的先决条件是

A 、色谱柱要长

B 、流动相流速要大

C 、待分离组分的分配系数不等

D 、有效塔板数要多

E 、流动相为强极性溶剂

27.色谱用的硅胶略显酸性,当其用于物质的分离时,

A 、只能用于分离酸性物质

B 、只能用于中性物质的分离

C 、可用于碱性物质的分离

D 、可用于碱性或中性物质的分离

E 、可用于中性或酸性物质的分离

28.某物质在流动相中的浓度为c m ,质量为m m ;而在固定相中的浓度为c s ,质量为m s ,则

该物质的分配系数(K )为

A 、m s c c

B 、s m c c

C 、m s m m

D 、m s c m

E 、s m

m m 29.色谱法中载体的作用是

A 、吸附被测离子

B 、支撑固定相

C 、增大展开剂的极性

D 、提高分离效率

E 、减小保留时间

30.在吸附薄层色谱中,当增大展开剂的极性时,则

A 、组分的Rf 值增大

B 、组分的Rf 值减小

C 、展开速度加快

D 、分离效果越好E、各组分的Rf 值不变

31.纸色谱属于

A 、吸附色谱

B 、分配色谱

C 、离子交换色谱

D 、气相色谱

E 、凝胶色谱

32.硅胶G 板和硅胶CMC-Na 板称

A 、干板

B 、软板

C 、硬板

D 、湿板

E 、以上都对

33.在纸色谱中,△R f 值较大的组分间

A 、组分间分离的较开

B 、组分间分离不开

C 、斑点离开原点较近

D 、斑点离开原点较远

E 、分离效果差

34.硬板的制备方法是

A 、将硅胶G 粉末进行干法铺板

B 、将硅胶H 粉末进行干法铺板

C 、将硅胶H 加纯化水研成糊状进行湿法铺板

D 、将展开剂与硅胶研成糊状进行湿法铺板

E 、将硅胶H加入CMC-Na 溶液研成糊状进行铺板

35.设某组份在薄层色谱中展开后,斑点中心到原点的距离为X ,起始线到溶剂前沿的距离为Y ,则该斑点的R f 值为

A 、y x

B 、x y

C 、y x x +

D 、y

x y +E 、以上计算方法都不对 36.下列有关薄层色谱法概念不正确的是

A 、薄层色谱法是在薄层板上进行的一种色谱法

B 、薄层色谱法中使用的吸附剂不与欲分离物质和展开剂发生化学反应

C 、薄层色谱法具有快速、灵敏、仪器简单、操作简便之特点

D 、薄层色谱法中用于定性分析的主要数据是各斑点的R f 值与R s 值

E 、吸附薄层色谱中吸附剂的颗粒度应比吸附柱色谱中的吸附剂颗粒度粗一些

37.下列各类型薄板不属于硬板的是

A 、氧化铝-G 板

B 、硅胶-G 板

C 、硅胶H 板

D 、氧化铝CMC-Na 板

E 、硅胶CMC-Na 板

38.不属于薄层色谱的操作时

A 、铺板 B、活化C、点样D、洗脱E、斑点定位

39.下列操作步骤中,不属于纸色谱和薄层色谱共有的操作是

A 、活化

B 、点样

C 、展开

D 、斑点定位

E 、定性与定量

40.液相色谱中,固定相极性大于流动相极性属于

A 、键合相色谱

B 、正相色谱

C 、反相色谱

D 、离子交换色谱

E 、分子排阻色谱

41.某样品在薄层色谱中,原点到溶剂前沿的距离为6.3cm ,原点到斑点中心的距离为4.2cm ,其R f 值为

A 、0.80

B 、0.67

C 、0.54

D 、0.15

E 、 0.33

42.薄层色谱中,软板、硬板的主要区别是

A 、吸附剂不同

B 、是否加粘合剂

C 、玻璃板不同

D 、粘合剂不同

E 、是否加荧光剂

43.在薄层色谱中,一般要求R f 值的范围在

A 、0.1~0.2

B 、0. 2~0.4

C 、0.8~1.0

D 、1.0~1.5

E 、0. 2~0.8

44.在薄层定性鉴别中,最常用的吸附剂是

A 、硅胶G

B 、微晶纤维素

C 、硅藻土

D 、氧化铝

E 、聚酰胺

45.薄层板活化的温度和活化时间一般为

A 、410℃烘60分钟

B 、310℃烘60分钟

C 、210℃烘60分钟

D 、110℃烘60分钟

E 、510℃烘60分钟

46.在吸附薄层色谱中,对于极性化合物,增加展开剂中极性溶剂的比例,可使比移值

A 、减小

B 、不变

C 、增大

D 、为零E、等于1

47.在薄层色谱法中,使用薄层玻璃板,最好使用

A、优质平板玻璃

B、钢化玻璃

C、有色玻璃

D、彩玻

E、艺术玻璃

48.应用薄层色谱法进行鉴别时,薄层板上起始点的点样直径不大于

A、5 mm

B、4 mm

C、3 mm

D、2 mm

E、1 mm

49.为防止薄层板的边缘效应,在展开之前应进行展开剂的

A、浸滞

B、预饱和

C、洗涤

D、配制

E、震荡

50.硬板进行展开时,通常采用的展开方式是

A、近水平展开

B、双向展开

C、上行展开

D、多次展开

E、双向展开、多次展开

51.进行斑点定位时,对于有色物质的定位通常采用

A、荧光检出法

B、浸滞显色法

C、直接喷雾法

D、直接观察

E、紫外光照法52.色谱所用的氧化铝

A、有碱性和酸性两种,其碱性使用最多

B、有碱性和酸性两种,其中酸性使用最多

C、有碱性、中性和酸性三种,而中性氧化铝使用最多

D、有碱性、中性和酸性三种,而碱性性氧化铝使用最多

E、有碱性、中性和酸性三种,而酸性氧化铝使用最多

53.在薄层色谱中,若铺在板上的吸附剂中是没有加入黏合剂,而将薄板称为

A、软板

B、塑料板

C、薄板

D、铝箔

E、硬板

54.薄层色谱分析中,定性的参数是

A、峰面积

B、分配系数

C、极限宽度

D、比移值Rf

E、斑点大小

55.纸色谱法是以下列哪种物质为固定相

A、纸

B、水

C、乙醇

D、盐酸

E、氯仿

56.在正相分配色谱中,下列首先流出色谱柱的组分是

A、极性大的组分

B、极性小的组分

C、挥发性大的组分

D、沸点低的组分

E、分子量小的组分

57.纸色谱的分离原理及固定相分别是

A、吸附色谱,固定相是纸纤维

B、分配色谱,固定相是纸上吸附的水

C、吸附色谱,固定相是纸上吸附的水

D、分配色谱,固定相是纸纤维

E、离子交换色谱,固定相是纸纤维

58.不影响薄层层析比移值Rf的因素是

A、展开剂使用的量

B、pH值的大小

C、展开时的温度

D、欲分离物质的性质

E、展开剂的性质

二、是非题

1.极性吸附剂氧化铝和硅胶中含水量越高,活性级别越低,吸附能力越强。()

2.在分配色谱中,所用的固定相与流动相必须事先相互饱和。()

3.薄层色谱的操作步骤有铺板、活化、点样、展开、斑点定位、定性和定量分析。()4.吸附柱色谱的基本操作为装柱、加样、展开、定性和定量分析。()

5.柱色谱中装柱要均匀,不能有气泡,否则影响分离效果。()

6.在吸附色谱中,分离极性大的组份,应选用极性大的吸附剂和极性小的洗脱剂。()7.在液-液分配色谱中,固定相是一固体。()

8.加粘合剂的铺板方法为干法铺板。()

9.极性吸附剂中含水量越多,活性级别越大,吸附活性越低。()

10.在薄层色谱和纸色谱的点样过程中,点样量越多越好。()

11.分离极性样品,首选极性固定液,极性小的组份先出柱。()

12.组分的分配系数越大,表示其保留时间越长。()

13.对于正相液相色谱法,流动相的极性大于固定液的极性。()

14.用于薄层色谱分析的玻板应光滑、平整,洗净后不附水珠。()

15.色谱法也称为色层法或层析法,是一种萃取技术。()

三、是非题

1.色谱法按分离过程的分离机理可分为、、、。

2.色谱法按操作形式可为、、。

3.液-固色谱中常用的吸附剂有、、。

4.柱色谱的操作过程为、、。

5.薄层色谱的操作过程为、、、和。

6.氧化铝分为、和三种。

7.在分配色谱法中,根据固定相和流动相的相对强弱将其分为分配色谱法和分配色谱法。

四、简答题

1.简述色谱法的分类方法及经典色谱法的特点。

2.简述薄层色谱法的基本操作步骤以及操作中应注意的问题。

3.简述液固吸附色谱法中,流动性的选择的一般原则。

4.色谱用氧化铝分为哪几种?各自使用范围是什么?

5.简述柱色谱法的基本操作步骤及操作中应注意的问题。

五、计算题:

1.某样品用纸色谱法展开后,斑点距原点8.5cm,溶剂前沿距原点14.5cm。求其R f值?2.在同一薄层板上将某样品和标准品展开后,样品斑点中心距原点9.5cm,标准品斑点中心距原点8. 0cm,溶剂前沿距原点16cm,试求样品及标准品的R f值和R s值?

3.已知化合物A在薄层板上从试样原点迁移7.2 cm,试样原点至溶剂前沿14.4 cm,试计算:

(1)化合物A的R f值是多少?

(2)在相同的薄层板上,展开系统相同时,试样原点至溶剂前沿16.8 cm,化合物A的斑点应在此薄层板上的何处?

高效液相色谱法-考试习题Word版

高效液相色谱法 (总分60, 考试时间90分钟) 一、单项选择题 1. 欲测定聚乙烯的分子量及分子量分布,应选用下列( )。 A 液-液分配色谱 B 液-固吸附色谱 C 键合相色谱 D 凝胶色谱 答案:D 2. 分离下述化合物,宜采取以下哪些方法?( ) (1)聚苯乙烯分子量分布(2)多环芳烃(3) Ca2+、Ba2+、Mg2+ A (1)分配色谱(2)反相色谱(3)阴离子色谱 B (1)凝胶色谱(2)反相色谱(3)阴离子色谱 C (1)凝胶色谱(2)反相色谱(3)阳离子色谱 D (1)凝胶色谱(2)正相色谱(3)阳离子色谱 答案:C 3. 下列哪对固定相/流动相可用来分离溶液中的Ca2+、Mg2+、Cl-和?( ) 答案:B 4. 在液-液分配色谱中,下列哪对固定相/流动相的组成符合正相色谱形 式?( ) A 甲醇/石油醚 B 氯仿/水 C 石蜡油/正己烷 D 甲醇/水 答案:C 5. 高效液相色谱仪上清洗阀(放空阀)的作用是( )。 A 清洗色谱柱 B 清洗泵头与排除管路中的气泡 C 清洗检测器 D 清洗管路 答案:B 6. 用液-固色谱法分离极性组分,应选择的色谱条件是( )。 A 流动相为极性溶剂

B 吸附剂的含水量小些

C 吸附剂的吸附活性低些 D 用非极性溶剂做流动相 答案:D 7. 离子交换色谱适用于( )分离。 A 无机物 B 电解质 C 小分子有机物 D 大分子有机物 答案:A 8. 大多数情况下,为保证灵敏度,高效液相色谱常选用哪种检测器?( ) A 荧光检测器 B 二极管阵列检测器 C 紫外-可见检测器 D 蒸发光散射检测器 答案:C 9. 下列检测器中,系列答案中两个都属于通用型检测器的是( ) A PDA、RI B RID、ELSD C UV-Vis、PDA D FD、UV-Vis 答案:B 10. 在液相色谱中,范第姆特方程式的哪一项对柱效能的影响可以忽略?( ) A 涡流扩散项 B 分子扩散项 C 移动流动相的传质阻力 D 滞留流动相的传质阻力 答案:B 11. 衡量色谱柱对分离组分选择性的参数是( )。 A 调整保留值 B 相对保留值 C 保留值 D 分配比 答案:B 12. 衡量色谱柱对被分离组分保留能力的重要参数是( )。

高效液相色谱法简介

高效液相色谱法简介 “色谱”一词是由俄国科学家斯威特提出的。色谱法是基于补充物质在相对运动物的两相之间分布时,物理或物理化学性质的微小的差异而使混合物相互分离的一类分离或分析方法。发展与上世纪初,飞速发展于五十年代,有超过30位科学家家因为它而获得诺贝尔奖,其有自己的理论和研究方法,同时也有众多的应用领域。 色谱法常见的方法有:柱色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。 柱色谱:柱色谱法是最原始的色谱方法,这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中,将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端,以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种,一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱,一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法,一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液,另一种方法是烘干固定相后用机械方法分开各个色带,以合适的溶剂浸泡固定相提取组分分子。柱色谱法被广泛应用于混合物的分离,包括对有机合成产物、天然提取物以及生物大分子的分离。 薄层色谱:薄层色谱法是应用非常广泛的色谱方法,这种色谱方法将固定相图布在金属或玻璃薄板上形成薄层,用毛细管、钢笔或者其他工具将样品点染于薄板一端,之后将点样端浸入流动相中,依靠毛细作用令流动相溶剂沿薄板上行展开样品。薄层色谱法成本低廉操作简单,被用于对样品的粗测、对有机合成反应进程的检测等用途。

气相色谱:GC主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离。待分析样品在汽化室汽化后被惰性气体(即载气,也叫流动相)带入色谱柱,柱内含有液体或固体流动相,由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同,每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于载气是流动的,这种平衡实际上很难建立起来。也正是由于载气的流动,使样品组分在运动中进行反复多次的分配或吸附/解吸附,结果是在载气中浓度大的组分先流出色谱柱,而在固定相中分配浓度大的组分后流出。当组分流出色谱柱后,立即进入检测器。检测器能够将样品组分的与否转变为电信号,而电信号的大小与被测组分的量或浓度成正比。当将这些信号放大并记录下来时,就是气相色谱图了。气相色谱被广泛应用于小分子量复杂组分物质的定量分析。 高效液相色谱:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9-107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。高效液相色谱(HPLC)是目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,为了减低柱压高效

经典液相色谱法习题

第10章经典液相色谱法习题 (一)选择题 单选题 1.组分在固定相中的质量为m A(g),在流动相中的质量为m B(g),而该组分在固定相中的浓度为c A(g/mL),在流动相中的浓度为C B(g/mL),则此组分的分配系数是( )。 A m A/m B B m B/m A C m A/(m A +m B) D C A/C B 2.在柱色谱法中,可以用分配系数为零的物质来测定色谱柱中的( )。 A 流动相的体积(相当于死体积) B 填料的体积 C 填料孔隙的体积 D 总体积 3.在以硅胶为固定相的吸附柱色谱中,正确的说法是( )。 A 组分的极性越强.被固定相吸附的作用越强 B 物质的相对分子质量越大,越有利于吸附 C 流动相的极性越强,组分越容易被固定相所吸附 D 吸附剂的活度级数越小,对组分的吸附力越大 4.纸色谱法与薄层色谱法常用正丁醇-乙酸-水(4:1:5,体积比)作为展开剂,正确的操作方法是( )。 A 三种溶剂混合后直接用作展开剂 B 三种溶剂混合、静置分层后,取上层作展开剂 C 三种溶剂混合,静置分层后,取下层作展开剂 D 依次用三种溶剂作展开剂 5.离子交换色谱法中,对选择性无影响的因素是( ). A 树脂的交联度 B 树脂的再生过程 C 样品离子的电荷 D 样品离子的水合半径 6.下列说法错误的是( )。 A 用纸色谱分离时,样品中极性小的组分R f值大 B 用反相分配薄层时,样品中极性小的组分R f值小 C 用凝胶色谱法分离,样品中相对分子质量小的组分先被洗脱下来 D 用离子交换色谱时,样品中高价离子后被洗脱下来 7.在一硅胶薄板上用不同的溶剂系统分离咖啡碱和氯原酸,结果如下,从中选出最好的溶剂系统是( )。 A 氯仿-丙酮(8:2):咖啡碱的R f为0.1,氯原酸的R f为0.0 B 氯仿-丙酮-甲醇-乙酸(7:2:1.5:0.5):咖啡碱的R f为0.48,氯原酸的R f为O.05

高效液相色谱习题和答案

高效液相色谱法习题 一、思考题 1.从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。2.液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些? 与气相色谱相比较, 有哪些主要不同之处? 3.在液相色谱中, 提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径是什么? 4.液相色谱有几种类型? 5.液-液分配色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么?6.液-固分配色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么? 7.化学键合色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么? 8.离子交换色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么? 9.离子对色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么? 10.空间排阻色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么?11.在液-液分配色谱中,为什么可分为正相色谱及反相色谱? 12.何谓化学键合固定相?它有什么突出的优点? 13.何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱?试述它们的基本原理 14.何谓梯度洗提?它与气相色谱中的程序升温有何异同之处?15.高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有和不同之处? 16.以液相色谱进行制备有什么优点? 17.在毛细管中实现电泳分离有什么优点? 18.试述CZE的基本原理 19.试述CGE的基本原理 20.试述MECC的基本原理 二、选择题 1.液相色谱适宜的分析对象是()。 A 低沸点小分子有机化合物 B 高沸点大分子有机化合物 C 所有有机化合物 D 所有化合物 2.HPLC与GC的比较,可忽略纵向扩散项,这主要是因为()。 A 柱前压力高 B 流速比GC的快 C 流动相钻度较小 D 柱温低 3.组分在固定相中的质量为MA(g),在流动相中的质量为MB(g),而该组分在固定相中的浓度为CA(g·mL -1),在流动相中浓度为CB(g·mL-1),则此组分的分配系数是( )。 A mA/m B B mB/mA C CB/CA D CA/CB。 4.液相色谱定量分析时,不要求混合物中每一个组分都出峰的是_。 A 外标标准曲线法 B 内标法 C 面积归一化法 D 外标法 5.在液相色谱中,为了改善分离的选择性,下列措施()是有效的? A 改变流动相种类 B 改变固定相类型 C 增加流速 D 改变填料的粒度 6.在分配色谱法与化学键合相色谱法中,选择不同类别的溶剂(分子间作用力不同),以改善分离度,主要是()。 A 提高分配系数比 B 容量因子增大 C 保留时间增长 D 色谱柱柱效提高 7.分离结构异构体,在下述四种方法中最适当的选择是()。 A 吸附色谱 B 反离子对色谱 C 亲和色谱 D 空间排阻色谱 8.分离糖类化合物,选以下的柱子()最合适。 A ODS柱 B 硅胶柱 C 氨基键合相柱 D 氰基键合相柱 9.在液相色谱中,梯度洗脱适用于分离()。 A 异构体 B 沸点相近,官能团相同的化合物 C 沸点相差大的试样 D 极性变化范围宽的试样 10.在高效液相色谱中,采用254 nm紫外控制器,下述溶剂的使用极限为()。 A 甲醇210 nm B 乙酸乙醋260 nm C 丙酮330 nm 11吸附作用在下面哪种色谱方法中起主要作用()。 A 液一液色谱法 B 液一固色谱法 C 键合相色谱法 D 离子交换法 12.当用硅胶为基质的填料作固定相时,流动相的pH范围应为()。

(完整word版)高效液相色谱法习题答案

第二十章高效液相色谱法 思考题和习题 1.简述高效液相色谱法和气相色谱法的主要异同点。 相同点:均为高效、高速、高选择性的色谱方法,兼具分离和分析功能,均可以在线检测不同点: 分析对象及范围流动相的选择操作条件 GC 能气化、热稳定性好、且沸 点较低的样品,占有机物的20% 流动相为有限的几种“惰 性”气体,只起运载作用,对 组分作用小 加温常压操作 HPLC 溶解后能制成溶液的样品, 高沸点、高分子量、难气化、离 子型的稳定或不稳定化合物,占 有机物的80% 流动相为液体或各种液 体的混合。它除了起运载作用 外,还可通过溶剂来控制和改 进分离。 室温、高压下进行 2.何谓化学键合相?常用的化学键合相有哪几种类型?分别用于哪些液相色谱法中? 采用化学反应的方法将固定液键合在载体表面上,所形成的填料称为化学键合相。优点是使用过程不流失,化学性能稳定,热稳定性好,适于作梯度淋洗。 目前常用的Si-O-Si-C型键合相,按极性分为非极性,中等极性与极性三类。①非极性键合相:常见如ODS键合相,既有分配又有吸附作用,用途非常广泛,用于分析非极性或弱极性化合物;②中等圾性键合相:常见的有醚基键合相,这种键合相可作正相或反相色谱的固定相,视流动相的极性而定:③极性键合相:常用氨基、氰基键合相,用作正相色谱的固定相,氨基键合相还是分离糖类最常用的固定相。 3.什么叫正相色谱?什么叫反相色谱?各适用于分离哪些化合物? 正相色谱法:流动相极性小于固定相极性的色谱法。用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质,用于含有不同官能团物质的分离。 反相色谱法:流动相极性大于固定相极性的色谱法。用于分离非极性至中等极性的分子型化合物。 4.简述反相键合相色谱法的分离机制。 典型的反相键合色谱法是用非极性固定相和极性流动相组成的色谱体系。固定相,常用十八烷基(ODS或C18)键合相;流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相色谱系统,用弱极性或中等极性的键合相和极性大于固定相的流动相组成。 反相键合相表面具有非极性烷基官能团,及未被取代的硅醇基。硅醇基具有吸附性能,剩余硅醇基的多寡,视覆盖率而定。对于反相色谱的分离机制目前,保留机制还没有一致的看法,大致有两种观点,一种认为属于分配色谱,另一种认为属于吸附色谱。分配色谱的作用机制是假设混合溶剂(水十有机溶剂)中极性弱的有机溶剂吸附于非极性烷基配合基表面,组分分子在流动相中与被非极性烷基配合基所吸附的液相中进行分配。吸附色谱的作用机制可用疏溶剂理论来解释。这种理论把非极性的烷基键合相,看作是在硅胶表面上覆盖了一层键合的十八烷基的"分子毛",这种"分子毛'有强的疏水特性。当用水与有机溶剂所组成的极性溶剂为流动相来分离有机化合物时,一方面,非极性组分分子或组分分子的非极性部分,由于疏溶剂作用,将会从水中被"挤"出来,与固定相上的疏水烷基之间产生缔合作用,其结果使组分分子在固定相得到保留。另一方面,被分离物的极性部分受到极性流动相的作用,使它离开固定相,减小保留值,此即解缔过程,显然,这两种作用力之差,决定了分子在色谱中的保留行为。一般说来,固定相上的烷基配合基或被分离分子中非极性部分的表面积越

高效液相色谱法习题

第12章高效液相色谱法习题 (一)选择题 单选题 1. 在高效液相色谱中影响柱效的主要因素是( ) A 涡流扩散 B 分子扩散 C 传质阻力 D 输液压力 2. 在高效液相色谱中,提高柱效能的有效途径是( ) A 提高流动相流速 B 采用小颗粒固定相 C 提高柱温 D 采用更灵敏的检测器 3. 高效液相色谱法的分离效果比经典液相色谱法高,主要原因是( ) A 流动相种类多 B 操作仪器化 C 采用高效固定相 D 采用高灵敏检测器 4. 在高效液相色谱中,通用型检测器是( ) A 紫外检测器 B 荧光检测器 C 示差折光检测器 D 电导检测器 5. HPLC与GC的比较,可忽略纵向扩散项,这主要是因为( ) A 柱前压力高 B 流速比GC的快 C 流动相黏度较小 D 柱温低 6.液相色谱定量分析时,要求混合物中每一个组分都出峰的是( ) A 外标标准曲线法 B 内标法 C 面积归一化法 D 外标法 7.下述四种方法中最适宜分离异构体的是是( ) A 吸附色谱 B 反离子对色谱 C 亲和色谱 D 空间排阻色谱 8.在液相色谱中,梯度洗脱适用于分离( ) A 异构体 B 沸点相近,官能团相同的化合物 C 沸点相差大的试样 D 极性变化范围宽的试样 9.在HPLC中,范氏方程中对柱效影响可以忽略不计的因素是( ) A 涡流扩散 B 纵向扩散 C 固定相传质阻力 D 流动相传质阻力 10.当用硅胶为基质的填料作固定相时,流动相的pH范围应为( ) A 在中性区域 B 5一8 C 1一14 D 2一8

11.高效液相色谱法中,常用的流动相有水、乙腈、甲醇、正己烷,其极性大小顺序为( ) A 乙腈>水>甲醇>正己烷 B 乙腈>甲醇 >水>正己烷 C 水> 乙腈>甲醇>正己烷 D 水>甲醇> 乙腈>正己烷 12.高效液相色谱法中,使用高压泵主要是由于( ) A 可加快流速,缩短分析时间 B 高压可使分离效率显著提高 C 采用了细粒度固定相所致 D 采用了填充毛细管柱 13.液相色谱的H-u曲线()。 A 与气相色谱的一样,存在着H min B H随流动相的流速增加而下降 C H随流动相的流速增加而上升 D H受u影响很小 14. 与气相色谱相比,在液相色谱中()。 A 分子扩散项很小,可忽略不计,速率方程式由两项构成 B 涡流扩散项很小,可忽略不计,速率方程式由两项构成 C 传质阻力项很小,可忽略不计,速率方程式由两项构成 D 速率方程式同样由三项构成,两者相同 15.液相色谱中不影响色谱峰扩展的因素是()。 A 涡流扩散项 B 分子扩散项 C 传质扩散项 D 柱压效应 16.在液相色谱中,常用作固定相又可用作键合相基体的物质是()。 A 分子筛 B 硅胶 C 氧化铝 D 活性炭 17.样品中各组分的出柱顺序与流动相的性质无关的色谱是()。 A 离子交换色谱 B 环糊精色谱 C 亲和色谱 D 凝胶色谱18.高效液相色谱法中,对于极性成分,当增大流动相的极性,可使其保留值()。 A 不变 B 增大 C 减小 D 不一定 19.在反相色谱法中,若以甲醇-水为流动相,增加甲醇的比例时,组分的容量因子k与保留时间t R的变化为()。 A k与t R增大 B k与t R减小 C k与t R不变 D k增大,t R减小 多选题 20.下列检测器中,不属于高效液相色谱中的检测器是() A 紫外检测器 B 氢火焰离子化检测器 C 荧光检测器 D 氮磷检测器 E 示差折光检测器 21.化学键合固定相具备下列何种特点() A 固定液不易流失 B 选择性好 C 不适用于梯度洗脱 D 柱效高 E 易和组分形成氢键吸附

经典液相色谱法习题教学教材

经典液相色谱法习题

第10章经典液相色谱法习题(一)选择题 单选题 1.组分在固定相中的质量为m A (g),在流动相中的质量为m B (g),而该组分在固 定相中的浓度为c A(g/mL),在流动相中的浓度为C B(g/mL),则此组分的分配系数是( )。 A m A /m B B m B /m A C m A /(m A +m B ) D C A /C B 2.在柱色谱法中,可以用分配系数为零的物质来测定色谱柱中的 ( )。 A 流动相的体积(相当于死体积) B 填料的体积 C 填料孔隙的体积 D 总体积3.在以硅胶为固定相的吸附柱色谱中,正确的说法是( )。 A 组分的极性越强.被固定相吸附的作用越强 B 物质的相对分子质量越大,越有利于吸附 C 流动相的极性越强,组分越容易被固定相所吸附 D 吸附剂的活度级数越小,对组分的吸附力越大 4.纸色谱法与薄层色谱法常用正丁醇-乙酸-水(4:1:5,体积比)作为展开剂,正确的操作方法是( )。 A 三种溶剂混合后直接用作展开剂 B 三种溶剂混合、静置分层后,取上层作展开剂 C 三种溶剂混合,静置分层后,取下层作展开剂 D 依次用三种溶剂作展开剂 5.离子交换色谱法中,对选择性无影响的因素是( ). A 树脂的交联度 B 树脂的再生过程

C 样品离子的电荷 D 样品离子的水合半径 6.下列说法错误的是( )。 A 用纸色谱分离时,样品中极性小的组分R f 值大 B 用反相分配薄层时,样品中极性小的组分R f 值小 C 用凝胶色谱法分离,样品中相对分子质量小的组分先被洗脱下来 D 用离子交换色谱时,样品中高价离子后被洗脱下来 7.在一硅胶薄板上用不同的溶剂系统分离咖啡碱和氯原酸,结果如下,从中选出最好的溶剂系统是( )。 A 氯仿-丙酮(8:2):咖啡碱的R f 为0.1,氯原酸的R f 为0.0 B 氯仿-丙酮-甲醇-乙酸(7:2:1.5:0.5):咖啡碱的R f 为0.48,氯原酸的R f 为 O.05 C 正丁醇-乙酸-水(4:1:1):咖啡碱的R f 为0.68,氯原酸的R f 为0.42 D 正丁醇-乙酸-甲醇(4:1:2):咖啡碱的R f 为0.43,氯原酸的R f 为0.40 8.假如一个溶质的容量因子为0.1,则它在色谱柱的流动相中的百分率是( ) A 9.1% B 10% C 9 0% D 91% 9. 在液相色谱中,某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力( ) A 组分与流动相 B 组分与固定相 C 组分与流动相和固定相 D 组分与组分 10. 在液相色谱中梯度洗脱最宜于分离( ) A 几何异构体 B 沸点相近、官能团相同的试样 C 沸点相差大的试样 D 容量因子(分配比)变化范围宽的试样 11. 指出哪个参数的改变会引起容量因子的增大( )

高效液相色谱习题及参考答案

高效液相色谱习题及参考答案 一、单项选择题 1. 在液相色谱法中,按分离原理分类,液固色谱法属于()。 A、分配色谱法 B、排阻色谱法 C、离子交换色谱法 D、吸附色谱法2. 在高效液相色谱流程中,试样混合物在()中被分离。 A、检测器 B、记录器 C、色谱柱 D、进样器 3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜? A、0.5μm B、0.45μm C、0.6μm D、0.55μm 4. 在液相色谱中,为了改变色谱柱的选择性,可以进行如下哪些操作? A、改变流动相的种类或柱子 B、改变固定相的种类或柱长 C、改变固定相的种类和流动相的种类 D、改变填料的粒度和柱长 5. 一般评价烷基键合相色谱柱时所用的流动相为() A、甲醇/水(83/17) B、甲醇/水(57/43) C、正庚烷/异丙醇(93/7) D、乙腈/水(1.5/98.5) 6. 下列用于高效液相色谱的检测器,()检测器不能使用梯度洗脱。 A、紫外检测器 B、荧光检测器 C、蒸发光散射检测器 D、示差折光检测器 7. 在高效液相色谱中,色谱柱的长度一般在()范围内。 A 、10~30cm B、20~50m C 、1~2m D、2~5m 8. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力() A、组分与流动相 B、组分与固定相 C、组分与流动相和固定相 D、组分与组分

9. 在液相色谱中,为了改变柱子的选择性,可以进行()的操作 A、改变柱长 B、改变填料粒度 C、改变流动相或固定相种类 D、改变流动相的流速 10. 液相色谱中通用型检测器是() A、紫外吸收检测器 B、示差折光检测器 C、热导池检测器 D、氢焰检测器 11. 在环保分析中,常常要监测水中多环芳烃,如用高效液相色谱分析,应选用下述哪种检波器 A、荧光检测器 B、示差折光检测器 C、电导检测器 D、紫外吸收检测器 12. 在液相色谱法中,提高柱效最有效的途径是() A、提高柱温 B、降低板高 C、降低流动相流速 D、减小填料粒度 13. 在液相色谱中,不会显著影响分离效果的是() A、改变固定相种类 B、改变流动相流速 C、改变流动相配比 D、改变流动相种类 14. 不是高液相色谱仪中的检测器是() A、紫外吸收检测器 B、红外检测器 C、差示折光检测 D、电导检测器 15. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了() A、恒温箱 B、进样装置 C、程序升温 D、梯度淋洗装置 16. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是() A、贮液器 B、输液泵 C、检测器 D、温控装置 17. 高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用()水

通则0512高效液相色谱法

高效液相色谱法: 系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行分离测定的色谱方法。 注入的供试品,由流动相带入色谱柱内,各组分在柱内被分离,并进入检测器检测, 由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。 1.对仪器的一般要求和色谱条件 高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。 色谱柱内径一般为3.9~4.6mm,填充剂粒径为3~10μm。 超高液相色谱仪:是适应小粒径(约2μm)填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、 高灵敏度检测的高效液相色谱仪。 (1)色谱柱 反相色谱柱: 以键和非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等;常用的填充剂优十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。 正相色谱柱: 用硅胶填充剂,或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶 和氰基键合硅胶等。氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反向色谱。

离子交换色谱柱:用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。 手性分离色谱柱:用手性填充剂填充而成的色谱柱。 色谱柱的内径和长度,填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残留量,填充的致密与均匀程度等均影响色谱柱的性能,应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。 温度会影响分离效果,品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温,应注意室温变化的影响。为改善分离效果可适当提高色谱柱的温度,但一般不宜超过60℃。 残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱,流动相的pH值一般应在2~8之间。残余硅羟基已封闭的硅胶、聚合物复合硅胶或聚合物色谱柱可耐受更广泛pH值的流动相,适合于pH值小于2或大于8的流动相。 (2)检测器 最常用的检测器为紫外-可见分光检测器,包括二极管阵列检测器, 其他常见的检测器有荧光检测器、蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器等。 紫外-可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器为选择性检测器, 其响应值不仅与被测物质的量有关,还与其结构有关;

高效液相色谱法(HPLC)的概述

此帖与GC版的对应,是为了让大家更好的学习和了解LC 主要内容包括: 1.高效液相色谱法(HPLC)的概述 2. 高效液相色谱基础知识介绍(1——13楼) 3. 高压液相色谱HPLC发展概况、特点与分类 4. 液相色谱的适用性 5.应用 高效液相色谱法(HPLC)的概述 以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法(HPLC)。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱,经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器,由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理而得到分析结果。 由于高效液相色谱法具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、适用范围广(样品不需气化,只需制成溶液即可)、色谱柱可反复使用的特点,在《中国药典》中有5 0种中成药的定量分析采用该法,已成为中药制剂含量测定最常用的分析方法。 高效液相色谱法按固定相不同可分为液-液色谱法和液-固色谱法;按色谱原理不同可分为分配色谱法(液-液色谱)和吸附色谱法(液-固色谱)等。 目前,化学键合相色谱应用最为广泛,它是在液-液色谱法的基础上发展起来的。将固定液的官能团键合在载体上,形成的固定相称为化学键合相,不易流失是其特点,一般认为有分配与吸附两种功能,常以分配作用为主。C18(ODS)为最常使用的化学键合相。 根据固定相与流动相极性的不同,液-液色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法,当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法,主要用于极性物质的分离分析;当流动相

的极性大于固定相的极性时称反相色谱法,主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。 在中药制剂分析中,大多采用反相键合相色谱法。 系统组成: (一)高压输液系统 由贮液罐、脱气装置、高压输液泵、过滤器、梯度洗脱装置等组成。 1.贮液罐 由玻璃、不锈钢或氟塑料等耐腐蚀材料制成。贮液罐的放置位置要高于泵体,以保持输液静压差,使用过程应密闭,以防止因蒸发引起流动相组成改变,还可防止气体进入。2.流动相 流动相常用甲醇-水或乙腈-水为底剂的溶剂系统。 流动相在使用前必须脱气,否则很易在系统的低压部分逸出气泡,气泡的出现不仅影响柱分离效率,还会影响检测器的灵敏度甚至不能正常工作。脱气的方法有加热回流法、抽真空脱气法、超声脱气法和在线真空脱气法等。 3.高压输液泵 是高效液相色谱仪的关键部件之一,用以完成流动相的输送任务。对泵的要求是:耐腐蚀、耐高压、无脉冲、输出流量范围宽、流速恒定,且泵体易于清洗和维修。高压输液泵可分为恒压泵和恒流泵两类,常使用恒流泵(其压力随系统阻力改变而流量不变)。 (二)进样系统 常用六通阀进样器进样,进样量由定量环确定。操作时先将进样器手柄置于采样位置(L OAD),此时进样口只与定量环接通,处于常压状态,用微量注射器(体积应大于定量环体积)注入样品溶液,样品停留在定量环中。然后转动手柄至进样位置(INJECT),使定量环接入输液管路,样品由高压流动相带入色谱柱中。 (三)色谱柱 由柱管和填充剂组成。柱管多用不锈钢制成。柱内填充剂有硅胶和化学键合固定相。在化学键合固定相中有十八烷基硅烷键合硅胶(又称ODS柱或C18柱)、辛烷基硅烷键合硅

经典液相色谱法习题.docx

第 10 章 经典液相色谱法习题 一)选择题 单选题 1.组分在固定相中的质量为 m A (g) ,在流动相中的质量为 m B (g) ,而该组分在固定相中的浓 度为C A (g /mL),在流动相中的浓度为 Q(g /mL),则此组分的分配系数是( ) 。 A m A /m B B m B / m A C m A /(m A +m B ) D C A / C B 2.在柱色谱法中,可以用分配系数为零的物质来测定色谱柱中的 ( )。 A 流动相的体积 (相当于死体积 ) B 填料的体积 C 填料孔隙的体积 D 总体积 3.在以硅胶为固定相的吸附柱色谱中,正确的说法是 ( )。 A 组分的极性越强.被固定相吸附的作用越强 B 物质的相对分子质量越大,越有利于吸附 C 流动相的极性越强,组分越容易被固定相所吸附 D 吸附剂的活度级数越小,对组分的吸附力越大 4.纸色谱法与薄层色谱法常用正丁醇 -乙酸-水(4:1:5 ,体积比)作为展开剂, 正确的操作方 法是 ( ) 。 A 三种溶剂混合后直接用作展开剂 作展开剂 C 三种溶剂混合, 静置分层后, 取下层作展开剂 剂 5.离子交换色谱法中,对选择性无影响的因素是 A 树脂的交联度 C 样品离子的电荷 6.下列说法错误的是 ( )。 A 用纸色谱分离时,样品中极性小的组分 R f 值大 B 用反相分配薄层时,样品中极性小的组分 R f 值小 C 用凝胶色谱法分离,样品中相对分子质量小的组分先被洗脱下来 D 用离子交换色谱时,样品中高价离子后被洗脱下来 7.在一硅胶薄板上用不同的溶剂系统分离咖啡碱和氯原酸,结果如下,从中选出最好的溶 剂系统是 ( )。 A 氯仿 - 丙酮 (8:2) :咖啡碱的 R f 为 0.1 ,氯原酸的 R f 为 0.0 B 氯仿-丙酮-甲醇-乙酸(721.5:0.5):咖啡碱的R f 为0.48 ,氯原酸的R 为0.05 B 三种溶剂混合、静置分层后,取上层 D 依次用三种溶剂作展开 ( ). B 树脂的再生过程 D 样品离子的水合半径

高效液相色谱习题及答案

高效液相色谱法习题 一、选择题 1.液相色谱适宜的分析对象是()。 A 低沸点小分子有机化合物 B 高沸点大分子有机化合物 C 所有有机化合物 D 所有化合物 2.HPLC与GC的比较,可忽略纵向扩散项,这主要是因为()。 A 柱前压力高 B 流速比GC的快 C 流动相粘度较大 D 柱温低 3.分离糖类化合物,选以下的柱子()最合适。 A ODS柱 B 硅胶柱 C 氨基键合相柱 D 氰基键合相柱 4.在液相色谱中,梯度洗脱适用于分离()。 A 异构体 B 沸点相近,官能团相同的化合物 C 沸点相差大的试样 D 极性变化范围宽的试样 5.在液相色谱中,提高色谱柱柱效的最有效途径是()。 A 减小填料粒度 B 适当升高柱温 C 降低流动相的流速 D 增大流动相的流速 6.如果样品比较复杂,相邻两峰间距离太近或操作条件不易控制稳定,要准确测量保留值有一定困难时,可选择以下方法()定性。 A 利用相对保留值定性 B 加人已知物增加峰高的办法定性 C 利用文献保留值数据定性 D 与化学方法配合进行定性 7.液相色谱中通用型检测器是()。 A 紫外吸收检测器 B 示差折光检测器 C 热导池检测器 D 荧光检测器 8.离子色谱的主要特点是()。 A 高压、高效、高速、高分辨率、高灵敏度 B 采用柱后抑制技术和电导检测,特别适合离子分析 C 采用了阴离子专用检测器,对阴离子分析有高灵敏度 D 采用紫外检测器合柱压衍生装置,对离子分析有高效 9.高压、高效、高速是现代液相色谱的特点,采用高压主要是由于()。 A 可加快流速,缩短分析时间 B 高压可使分离效率显著提高 C 采用了细粒度固定相所致 D 采用了填充毛细管柱 10.与气相色谱相比,在液相色谱中()。 A 分子扩散项很小,可忽略不计,速率方程式由两项构成 B 涡流扩散项很小,可忽略不计,速率方程式由两项构成 C 传质阻力项很小,可忽略不计,速率方程式由两项构成 D 速率方程式同样由三项构成,两者相同 11.在液相色谱中,下列检测器可在获得色谱流出曲线的基础上,同时获得被分离组分的三维彩色图形的是()。 A 光电二极管阵列检测器 B 示差折光检测器 C 荧光检测器 D 电化学检测器 12.不同类型的有机物,在极性吸附剂上的保留顺序是()。 A 饱和烃、烯烃、芳烃、醚 B 醚、烯烃、芳烃、饱和烃 C 烯烃、醚、饱和烃、芳烃 D 醚、芳烃、烯烃、饱和烃

高效液相色谱(HPLC)柱效测定

实验六高效液相色谱(HPLC)柱效测定 093858 张亚辉 一. 实验目的 1、学习高效液相色谱仪的基本操作方法。 2、了解高效液相色谱仪原理和条件设定方法。 3、了解高效液相色谱法在日常分析中的应用。 二. 实验原理 高效液相色谱法是以液体作为流动相,借助于高压输液泵获得相对较高流速的液流以提高分离速度、并采用颗粒极细的高效固定相制成的色谱柱进行分离和分析的一种色谱方法。 在高效液相色谱中,若采用非极性固定相,如十八烷基键合相,极性流动相,即构成反相色谱分离系统。反之,则称为正相色谱分离系统。反相色谱系统所使用的流动相成本较低,应用也更为广泛。 定量分析时,为便于准确测量,要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度(R)的计算公式为: R= 2[t(R2)-t(R1)] /1.7*(W1+W2) 式中 t(R2)为相邻两峰中后一峰的保留时间; t(R1)为相邻两峰中前一峰的保留时间; W1及W2为此相邻两峰的半峰宽。除另外有规定外,分离度应大于1.5。 本实验对象为邻苯二甲酸酯,又称酞酸酯,缩写PAE,常被用作塑料增塑剂。它被普遍应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、乙烯地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品,如指甲油、头发喷雾剂、香皂和洗发液等数百种产品中。但研究表明,邻苯二甲酸酯在人体和动物体内发挥着类似雌性激素的作用,是一类内分泌干扰物。待测物性质见表1。 表1色谱柱测试条件

如果要检测不同条件对谱图分离的影响,可按表1配制几种物质的混合溶液,在不同条件下进行HPLC分离检测。 三.仪器与试剂 1、仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪,50ul微量注射器。 2、试剂 甲醇(色谱专用),高纯水 四. 实验步骤 1、色谱条件 色谱柱:辛烷基硅烷键合硅胶(C8) 柱温:室温 流动相:初始为高纯水:20%,甲醇:80% 检测器:DAD检测器; 检测波长:220nm; 进样体积:20μl定量环,实际注射每次可控制在40μl。 2、待测溶液的配制 首先用甲醇做溶剂配制储备液:邻苯二甲酸二甲酯(0.3880g/L),邻苯二甲酸二乙酯(0.2770g/L),邻苯二甲酸二丁酯(0.3776g/L)。然后各取1mL储备液用水和甲醇(20:80)稀释至10mL,作为待测溶液。 3、色谱测定 (1) 按操作规程开启电脑,开启脱气机、泵、检测器等的电源,启动Agilent 1100在线工作软件,设定操作条件。流量为1.000ml/min。 (2) 待仪器稳定后,开始进样。将进样阀柄置于“LOAD”位置,用微量注射器吸取混合物溶液40ul,注入仪器进样口,顺时针方向扳动进样阀至“INJECT”位置,此时显示屏显示进样标志。 (3) 记下各组分色谱峰的保留时间及峰面积及分离比。 (4) 实验完毕,清洗系统及色谱柱。依次用甲醇-水(60:40)、甲醇-水(70:30)……直到纯甲醇作流动相清洗,每次清洗至基线走稳,至少清洗15min。 五.实验结果

高效液相色谱法的计算方法

高效液相色谱法的计算方法 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器,色谱信号由记录仪或积分仪记录。 1、对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应按各品种项下的规定。常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料,用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检测器时,所用流动相应符合紫外分光光度法(附录ⅣA)项下对溶剂的要求。 正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外,其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等,均可适当改变,以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。一般色谱图约于20分钟内记录完毕。 2、系统适用性试验 按各品种项下要求对仪器进行适用性试验,即用规定的对照品对仪器进行试验和调整,应达到规定的要求;或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度和拖尾因子。 (1)色谱柱的理论板数(N,用于定量表示色谱柱的分离效率,简称柱效)。 在选定的条件下,注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液,记录色谱图,量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间tR(以分钟或长度计,下同,但应取相同单位)和半高峰宽(W h/2),按n=5.54(t R/Wh/2)2计算色谱柱的理论板数,如果测得理论板数低于各品种项下规定的最小理论板数,应改变色谱柱的某些条件(如柱长、载体性能、色谱柱充填的优劣等),使理论板数达到要求。 (2) 分离度(R)

最新经典液相色谱法和色谱技术练习题

经典液相色谱法和色谱技术 一、单项选择题 1.在一定温度和压力下,某组分在两相间的分配达到平衡时,其在固定相与流动相中的浓度之比称为 A、分离度 B、分配系数 C、容量因子 D、相对保留值 E、保留值 2.分离性质及其相似的物质的最佳方法是 A、萃取法 B、蒸馏法 C、滴定法 D、色谱法 E、沉淀法 3.液固吸附柱色谱法中吸附剂含水量越高则 A、吸附力越强 B、活性级数越小 C、活性越高 D、吸附能力不受含水量的影响 E、吸附力越弱 4.在吸附柱色谱中,吸附常数K值大的组分 A、被吸附得牢固 B、迁移速度快 C、溶解度大 D、在柱内保留时间短 E、极性小 5.在分配柱色谱中,分配系数K值小的组分在柱中 A、被吸附得牢固 B、在流动相中浓度低 C、迁移速度慢 D、迁移速度快 E、在柱内保留时间长 6.下列说法错误的是 A、色谱法是一种依据物质的物理化学性质的不同而进行的一种分离分析方法 B、在分配柱色谱中,固定相是一种液体 C、纸色谱与分配柱色谱的分离原理是相同的 D、吸附色谱法的原理是吸附与解吸附原理 E、色谱过程是一个物理过程 7.关于色谱,下列说法正确的是 A、色谱过程是一个差速迁移的过程 B、分离极性强的组分用极性强的吸附剂 C、各组分之间分配系数相差越小,越易分离 D、纸色谱中滤纸是固定相 E、分离极性强的组分用极性弱的流动相 8.在吸附柱色谱中,分离极性大的物质应选用 A、活性级别大的吸附剂和极性小的洗脱剂 B、活性高的吸附剂和极性大的洗脱剂 C、活性低的吸附剂和极性大的洗脱剂 D、活性级别小的吸附剂和极性小的洗脱剂

E、中等活性的吸附剂和极性小的洗脱机 9.气-液色谱和液-液色谱皆属于 A、吸附色谱 B、凝胶色谱 C、分配色谱 D、离子色谱 E、分子排阻色谱 10.分配系数K是指在一定温度和压力下,某一组份在两相间的分配达到平衡时的浓度比值,色谱机制不同,K的含义不同,在吸附色谱中,K称为 A、吸附平衡常数B、交换系数C、渗透系数D、分配系数E、溶解平衡常数11.吸附色谱法是依据物质的哪种性质而进行的分离分析方法 A、极性 B、溶解性 C、离子交换能力 D、分子大小 E、熔沸点12.下列物质不能作吸附剂的是 A、硅胶 B、氧化铝 C、羧甲基纤维素钠 D、聚酰胺 E、活性炭13.分配柱色谱的分离原理 A、吸附与解吸附原理 B、萃取原理 C、离子交换原理 D、分子排阻原理 E、毛细管电泳原理 14.下列哪种活性级别的硅胶吸附性最强 A、Ⅰ B、Ⅱ C、Ⅲ D、Ⅳ E、Ⅴ 15.在吸附柱色谱中,被分离组份的极性越弱,则 A、在柱内保留时间越长 B、被吸附剂吸附的越不牢固 C、吸附平衡常数越大 D、应选择极性大的洗脱剂 E、被吸附剂吸附的越牢固 16.色谱法分离混合物的可能性决定于试样混合物在固定相中的差别 A、沸点 B、熔点 C、凝固点 D、吸光度 E、分配系数 17.下列各吸附剂中属于非极性吸附剂的是 A、氧化铝 B、硅胶 C、聚酰胺 D、活性炭 E、离子交换树脂18.色谱法作为分析方法的最大特点是 A、能进行定量分析 B、能进行定性分析 C、能进行半定量分析 D、既可分离又可分析混合物 E、能进行结构分析 19.吸附柱色谱与分配柱色谱的主要区别是 A、柱子不同 B、洗脱剂不同 C、操作方式不同D、分离原理不同E、加样方式不同

高效液相色谱法习题答案

高效液相色谱法 思考题和习题 1. 简述高效液相色谱法和气相色谱法的主要异同点。 相同点:均为高效、高速、高选择性的色谱方法,兼具分离和分析功能,均可以在线检测 不同点: 2.离子色谱法、反相离子对色谱法与离子抑制色谱法的原理及应用范围有何区别? 离子色谱法(Ion Chromatography) :用离子交换树脂为固定相,电解质溶液为流动相。以电导检测器为通用检测器。试样组分在分离柱和抑制柱上的反应原理与离子交换色谱法相同。离子色谱法是溶液中阴离子分析的最佳方法,也可用于阳离子分析。 反相离子对色谱法(IPC 或PIC) :反相色谱中,在极性流动相中加入离子对试剂,使被测组分与其中的反离子形成中性离子对,增加k 和t R ,以改善分离。适用于较强的有机酸、碱。 反相离子抑制色谱:在反相色谱中,通过加入缓冲溶液调节流动相pH 值,抑制组分解离,增加其k 和t R ,以达到改善分离的目的。适用于极弱酸碱物质(pH=3~7弱酸;pH=7~8弱碱;两性化合物) 3.速率理论方程式在HPLC 中与在GC 中有何异同?如何指导HPLC 实验条件的选择? 解:液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动的流动相传质、滞留的流动相传质以及柱外效应。 在气相色谱中径向扩散往往比较显著,而液相色谱中径向扩散的影响较弱,往往可以忽略。另外,在液相色谱中还存在比较显著的滞留流动相传质及柱外效应。 在高效液相色谱中,对液液分配色谱,V an Deemter 方程的完整表达形式为 由此,HPLC 的实验条件应该是:①小粒度、均匀的球形化学键合相;②低粘度流动相,流速不宜过快;③柱温适当。 4.试讨论影响HPLC 分离度的各种因素,如何提高分离度? (1) 色谱填充性能 液相色谱柱分离性能的优劣,是由固定相粒度、柱长、由柱内径和填充状况决定的柱压降这三个参数度决定的。这三个参数度也决定了样品组分的保留时间,保留时间不仅与色谱过程的热力学因素k 有关,还直接与决定柱效与分离度的柱性能参数及流动相的黏度有关,这些参数都是影响色谱分离过程动力学的重要因素。但在高效液相色谱中,分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作,一般都

相关文档
相关文档 最新文档