实验：观察细胞有丝分裂

观察细胞的丝分裂

一、学习任务分析

本节内容选自浙科版必修一第四章第一节中的第一个活动，有丝分裂的实验是一个验证性的实验，要求学生通过有丝分裂各时期的观察，来验证学生在前面学到的知识，并加以巩固。因此在实验前，教师应让学生先回忆在细胞分裂过程中，各时期的染色体的形态和行为有哪些变化，以便在实验中能够准确的观察到各个时期的图像，并能区分出来。

二、学习者分析

在本次实验之前，学生已经做过了质壁分离复原的实验，对显微镜的操作已很熟悉，但不同以往的是有丝分裂的实验更复杂，每个步骤出错都可能导致观察不到实验现象，这就要求学生更加认真的完成，所以保持学生课堂专注度是关键，因此我们讲解过程要化繁为简，结合多种方法。

三、教学重难点

1、教学重点：

⑴制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片。

⑵识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长短。

2、教学难点：

制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片的过程中，涉及到的试剂以及对标本的处理时间，操作的先后顺序。

四、教学目标

1、知识与技能：

(1)能识别处于有丝分裂不同时期的植物细胞；

(2)能够描述出植物细胞有丝分裂的过程及各时期染色体的特点。

2、过程与方法：

(1)巩固显微镜的操作技能；

(2)初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技术和绘制生物图的方法。

3、情感态度与价值观：

实际动手操作制作装片、显微镜观察及绘图的全过程，培养学生独立操作的习惯、耐心细致的实验态度，提高学习生物学的兴趣和学习的积极性。、

五、教学过程

1、教学方法：实验前教师应要求学生先预习实验原理及方法步骤，简单的了解进行细胞分裂实验的各个过程，以便在实验过程中，能够按照老师事先设计好的思路进行教学，同时应把实验的关键点讲出来，以便引起学生在实验中注意这些问题。当然也可以由学生自己依照实验步骤进行实验操作，以锻炼其自主动手能力和分析问题的能力。在实验中，出现问题，分析问题出现的原因，以引起同学们的注意，并找出解决问题的方法。通过这种方法，能锻炼学生自主学习和合作学习的能力，以更好的完成本课的教学。

2、课前准备：

(1)教师准备好实验材料、用具及用于探究的问题。

(2)学生预习课本相关内容，了解该实验的实验原理、目的要求及实验操作的步骤，提出

与本课内容有关的问题。

3、课堂内容：

引言：通过前面的学习，我们知道了细胞有丝分裂过程中各个时期的特点及染色体的图像变化，今天我们在前面已有知识的基础上，来观察洋葱根尖分生组织细胞的有丝分裂。

(1)洋葱根尖的培养

师：怎样培养洋葱根尖？在培养过程中，应注意哪些问题？

生：在实验课前3～4天，取洋葱一个，放在广口瓶上，装满清水，让洋葱的底部接触瓶内的水面。把广口瓶放在温暖的地方培养。待根长约5 cm时，取健壮的根尖制成临时装片。注意的问题：应选择底盘大的洋葱做生根材料；剥去外层老皮，用刀削去老根，注意不要削掉四周的根芽；培养时注意每天换水1～2次，防止烂根。

(2)装片的制作

在制作过程中，学生结合着教师的提问，边回答边操作，从而知道在进行该操作中应注意的事项，以及如何进行该操作。由于解离、漂洗、染色三个步骤中，都有一段等待时间，教师应利用这些空隙，要求学生讨论在进行该操作时的注意事项，以保证该操作的顺利进行，也可做一些相关的题目，来巩固该部分的内容。

①取材与解离

师：取材的时间最好在什么时候进行？解离过程中，应注意哪些问题？解离后细胞是否仍保持活性？

生：在上午10时至下午2时，剪取洋葱根尖2～3 mm，立即放入盛有盐酸和酒精混合液（1:1）的玻璃皿中，在室温下解离

3～5 min，至根酥软为止。解离中，应注意时间的把握，不能太长也不能太短。解离太长使细胞的结构破坏，影响制片的效果，太短则不易使细胞分离，观察时细胞容易重叠。解离后细胞已被盐酸杀死，不具备活性。

②漂洗

师：为什么要进行漂洗？怎样进行漂洗？

生：由于染色剂是碱性染液，如不漂洗，酸碱发生反应，不利于着色；同时也是为了洗去药液，防止解离过度。用镊子把酥软的根取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min。

③染色

师：在细胞中，能被碱性染液染成深色的物质是什么？染色中，为什么要把握好染色的浓度和时间？

生：能被碱性染液染成深色的物质是染色体。染色时，染液的浓度和时间的把握要好，否则染色过深，不易观察细胞中的染色体。

④制片

师：实验中，要使细胞分离和分散开，需采取哪些措施？

生：先用镊子将根尖弄碎，盖上盖玻片；在盖玻片上加一片载玻片，用拇指轻压载玻片。压片时用力要适当，过重会将组织压烂，过轻则细胞不易分散。

(3)洋葱根尖细胞有丝分裂的观察

①低倍镜观察

在低倍镜下，先找到分生区细胞，观察细胞的形态特点。

②高倍镜观察

师：在一个视野中能不能观察到一个细胞有丝分裂的连续过程？能不能找全有丝分裂各时期的细胞？如何操作才能找全各个时期的细胞？

生：在一个视野中不能观察到一个细胞有丝分裂的连续过程，因细胞在解离时已经被杀死，不再进行细胞分裂了。不能，因在一个视野中，我们只能找到某一时期的细胞图像，要想看全各时期的细胞，应移动装片，在不同的视野中寻找。

师：在你的观察结果中，处于哪一时期的细胞最多？怎样确认一个细胞周期中各个时期的长短？

生：处于间期的细胞最多，因间期持续的时间最长。确认细胞周期中各时期的长短，就看在这一时期中观察到的细胞的多少。

(4)绘图

教师要求学生根据自己在实验中观察到的各时期的细胞特点，绘制有丝分裂前期、中期、后期的简图，并能区分各时期细胞的特点。

PI染色检测细胞周期

1、离心收集细胞，弃上清，用预冷PBS洗细胞两次。 2、加入预冷70%乙醇，于4℃固定过夜，或-20℃长期固定（4℃过夜一般隔天就进行检测，如果想推迟几天测，那就保存在-20℃，有资料说-20℃可以保存一个月，个人建议尽量在最短时间内检测，有些实验是在不同时间点上收细胞，这时我就等最后一次固定完了一块测，基本上也多在一周内检测完毕，没有特地去比较保存时间对检测结果的影响）。 3、细胞染色 离心收集细胞，以1mL的PBS洗细胞一次，加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭（PI），100ug/mL RNase A，0.2% Triton X-100，4℃避光孵育30分钟（PI我是直接用PBS配成工作浓度，然后加入细胞沉淀混匀，RNA酶现加，但有时不加发现对实验结果也没太大的影响）。 4、流式分析 以标准程序用流式细胞仪检测，一般计数2-3万个细胞，结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。 分析时，使用FL2-w和FL2-A显示，去除联体细胞，具体如下图。 细胞周期流式后一般分为G0/G1,S,G2/M期三部份，如果有凋亡，在G0/G1期前面有个凋亡峰(也称sub-G0期),而如果分析时细胞窗口没设置好，可能在最前面还有细胞碎片峰。 结果解读 G0/G1期细胞占总的61.2%，峰位于横座标的45.76 G2/M期占13.07，峰位于横座标的91.43 S期占25.73 G2/G1为2.0（即G2期为4倍体细胞，而G1期为2倍体细胞，比值为2） 峰的变异系数为4.54%（好） 细胞碎片为0.48%，细胞聚集体有0.06%。 总的细胞数（仪器检测到的）为17525个， 在细胞周期中分析的细胞数为17431个（即排除了碎片及聚集体后）

观察植物细胞的有丝分裂

实验五观察植物细胞的有丝分裂 一、目的要求 1.观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。 2.初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技术。 3.初步掌握绘制生物图的方法。 二、材料用具试剂 1.材料:洋葱(可以用蒜、葱代替)。 2.用具:显微镜/载玻片/盖玻片/玻璃皿3个/镊子/剪刀/滴管。 3.试剂:质量分数为15%HCl、体积分数为95%的C2H5OH溶液、质量浓度为0.01g/mL龙胆紫溶液(or 醋酸洋红液)。 三、重点难点 重点:有丝分裂过程中各个期的特征、各期图形的辨认，有丝分裂实验过程。 难点:观察有丝分裂实验过程中应注意的问题。 四、实验步骤 1.洋葱根尖的培养和取材(上午11:00) 2.制装片(解离→漂洗→染色→制片) 3.观察 ①低倍镜找分生区； ②高倍镜观察各个时期。 五、结论: 在显微镜的一个视野中看到的细胞，多数处于细胞有丝分裂的间期，因为在一个细胞周期中，间期所占的时间占整个细胞周期的90%～95%，时间与细胞数目成正比。另外，在一个视野中，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。 六、注意事项 (1)培养产生洋葱根尖的材料是洋葱鳞茎。鳞茎底部接触水，不能离开水，也不能被水淹。一般一天至少一次，还要提供适宜的温度。 (2)剪取洋葱根尖材料时，应该在洋葱一天之中分裂最活跃的时间，一般在上午1l点左右。如果因气温影响或不在上述时间做实验的话，可以在细胞有丝分裂最盛时取材，放人盛有固定液的培养皿中固定，即浸泡半天到一天。固定后用70%乙醇冲洗几次，再放人盛有70%乙醇的小广口瓶中保存。注意要等根尖长到1～5cm时才能切取，而切取的洋葱根尖长度是2～3mm。 (3)根尖培养好以后，装片制作是否成功，关键的步骤是解离。解离不充分，细胞重叠；解离过度，细胞会腐烂，所以解离要适度。 (4)漂洗的目的是洗去根中多余的解离液。如果不把多余的解离液洗去，一方面会影响染色效果，因为解离液中含HCl，而用染色的染料呈碱性；另一方面还会腐蚀显微镜的镜头。(5)染色时，染色液的浓度和染色时间必须掌握好。特别是染色不能过深，否则镜下一片紫色，无法观察。也不能过浅，否则染色质和染色体的形态和数目不易辨清。 (6)制片时，一方面要用镊子把洋葱根尖弄碎，另一方面要压片，这样可以使细胞分散开来。压片时，在盖玻片上再加一片载玻片的目的，一是避免压碎和污染盖玻片。二是使压力均匀，从而使组织细胞均匀分散。同时用力必须恰当，过重时会将组织压烂，过轻则细胞未分散开，二者都将影响观察。

PI染色检测细胞周期实验步骤

protocol : PI染色检测细胞周期 1、收集细胞：胰酶（含EDTA）消化收集对数生长期细胞（加热处 理后损失多的组宜多收集细胞保证细胞有 0.5-2 X 10*6个），吸取旧培养基到一个新离心管里；少量常温PBS （根据培养皿大小决定量，PBS洗可以保证消化效率）洗2次，清洗的PBS也要收集到上述离心管内【检测凋亡才需收集旧培养基及清洗的 PBS J ;然后胰酶消化 （注意一定要消化完全，显微镜下观察细胞呈单个，而不是成片脱落）后利用旧培养基中和胰酶；离心（1000r/300g 5mi n）收集细胞沉淀。 2、用预冷的PBS清洗细胞两次。 3、固定细胞：用0.5ml预冷的PBS重悬细胞沉淀，使细胞充分悬浮成单细胞，再将重悬细胞加入1.2ml预冷的99.7%无水乙醇（乙醇终浓度70%），吹打混匀以免细胞团聚，4C固定2H至过夜。 4、细胞染色：离心（1000r/300g 5min ）收集固定的细胞，以1.8 mL的PBS洗细胞一次，离心（第一次实验时用7000rpm才把细胞离心下来，但最后流式结果显示细胞没有碎）再次获取细胞沉淀后加入1 00卩IRNaseA 于37 C水浴30min，最后加入400卩lPI避光染色30 min （常温或4C 均可） 【有的试剂盒说明是：每个样本加入500uL染色剂（据样本数，用P BS 临时配好总量，其中 PI 50ug/ml、RNase A 100ug/mL、Trit on X-100 0.2% ） 4 C避光染色30分钟】 5、流式分析以标准程序用流式细胞仪检测，一般计数2-3万个细胞，结

果用细胞周期拟和软件ModFit分析。分析时，使用FL2-W和FL2-A显示，去除联体细胞。

观察植物细胞的有丝分裂_百度文库.

实验原理 在植物体中,有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞。高等植物细胞有丝分裂的过程,分为分裂问期和有丝分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍镜观察植物细胞有丝分裂的过程,根据各个时期细胞内染色体或染色质的变化情况,识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。细胞核内的染色体容易被碱性染料(如龙胆紫、醋酸洋红溶液着色。 目的要求 1.观察植物细胞有丝分裂的过程,识别有丝分裂的不同时期。 2.学会制作洋葱根尖有丝分裂装片的生物技术。 3.学会使用高倍镜和绘生物图的方法。 材料 洋葱(可以用蒜、葱代替。 用具 显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿3个,、剪刀,镊子,滴管。 药品 质量分数为15%的盐酸,酒精的体积分数为95%的溶液,龙胆紫的质量浓度为0.01 g/ mL的或 0.02 g/mL的溶液(或醋酸洋红液。 方法步骤 一、洋葱根尖的培养

在上实验课之前的3d~4d,取洋葱一个,放在广口瓶上。瓶内装满清水,让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方,注意经常换水,使洋葱的底部总是接触到水。待根长5 cm时,可取生长健壮的根尖制片观察。 二、装片的制作 1.解离下午2时是洋葱有丝分裂的高峰期,可在此时剪取洋葱的根尖 2 mm~ 3 mm,立即放入盛有氯化氢的质量分数为匕%的溶液和酒精的体积分数为95%溶液的混合液(1: 1的玻璃皿中,在室温下解离3 min~5 min后取出根尖。 2.漂洗待根尖酥软后,用镊子取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min. 3.染色把洋葱根尖放进盛有龙胆紫的质量浓度为 0.01g/mL或 0.02 g/mL的溶液(或醋酸洋红液的玻璃皿中,染色3 min~5 min。 4.制片用镊子将这段洋葱根采取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并且用镊子尖把洋葱根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。然后,用拇指轻轻地压盖玻片,这样可以使细胞分散开来。 三、洋葱根尖细胞有丝分裂的观察 1.低倍镜观察 把制作成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察,慢慢移动装片,要求找到分生巨细胞,它的特点是:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂。 2.高倍镜观察 找到分生区细胞后,把低倍镜移走,换上高倍镜,用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰,直到看清细胞物像为止。

PI染色检测细胞周期实验步骤

protocol：PI染色检测细胞周期 1、收集细胞：胰酶（含EDTA）消化收集对数生长期细胞（加热处理后损失多的组宜多收集细胞保证细胞有0.5-2×10*6个），吸取旧培养基到一个新离心管里；少量常温PBS（根据培养皿大小决定量，PBS洗可以保证消化效率）洗2次，清洗的PBS也要收集到上述离心管内【检测凋亡才需收集旧培养基及清洗的PBS】；然后胰酶消化（注意一定要消化完全，显微镜下观察细胞呈单个，而不是成片脱落）后利用旧培养基中和胰酶；离心(1000r/300g5min)收集细胞沉淀。 2、用预冷的PBS清洗细胞两次。 3、固定细胞：用0.5ml预冷的PBS重悬细胞沉淀，使细胞充分悬浮成单细胞，再将重悬细胞加入1.2ml预冷的99.7%无水乙醇(乙醇终浓度70%)，吹打混匀以免细胞团聚，4℃固定2H至过夜。 4、细胞染色：离心（1000r/300g5min）收集固定的细胞，以1.8 mL的PBS洗细胞一次，离心(第一次实验时用7000rpm才把细胞离心下来，但最后流式结果显示细胞没有碎)再次获取细胞沉淀后加入1 00μlRNaseA于37℃水浴30min，最后加入400μlPI避光染色30 min（常温或4℃均可） 【有的试剂盒说明是：每个样本加入500uL染色剂（据样本数，用P BS临时配好总量，其中PI 50ug/ml、RNase A 100ug/mL、Triton X-100 0.2%）4℃避光染色30分钟】 5、流式分析

以标准程序用流式细胞仪检测，一般计数2-3万个细胞，结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。分析时，使用FL2-w和FL2-A显示，去除联体细胞。

流式检测细胞周期要点

1.收集细胞； ～5000rpm离心5min，收集沉淀，重悬于200ul的PBS中，再次离心收集沉淀； ％冰冻乙醇（-20度保存）4度固定过夜or-20度固定1h； 4.离心收集沉淀，PBS洗一次（视沉淀量可忽略）； 5.沉淀重悬于200～500ul的PBS，加入Rnase A 37度水浴1h； 目纱布过滤至流式管，加入PI染色，4度避光30min-1h，上机器。 1、Q：要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查，但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查，请问：胃组织要怎样保存好呢？用低温保存，还是用乙醇固定？或者固定后再低温下保存？ A：我做过乳腺细胞的DNA含量测定，取得组织以后，先处理成单细胞悬液，然后再加70%冰乙醇固定，要保证冰乙醇的最终浓度为50%，这样固定的细胞悬液可以至少保存12小时，最多可保存一个月，上机检测前再加PI综合染液。我就是这样做的，保存了将近三个星期，结果还可以，变异系数为5%. 2、实验中想用PI分析细胞周期及凋亡率，请教几个问题： Q：（1）所用的RNAs酶用什么配制呢？用PBS配吗？ A：RNaseA用PBS配制没有问题，但是注意要沸水浴去除DNase的活性。 Q：（2）测细胞周期和凋亡率时都要用RNAs酶，可以一起检测吗？ A：用流式细胞仪测定时细胞周期和凋亡率是同时测定的，不用担心。 Q：（3）Triton－x－100是固定剂吧，用了70％的冷乙醇（是4℃吗？），是不是就不用Triton－x－100固定了？ A：Triton X-100是起透化作用的，不是固定剂，可以用75％的乙醇于-20度固定。 Q：（4）还要设什么内参标准（5％鸡红细胞）吗？

观察洋葱根尖有丝分裂实验

实验十一：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 一、实验目的： 1、制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片。 2、观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长短。 3、绘制植物细胞有丝分裂简图。 二、实验原理： 1、高等植物的分生组织有丝分裂较旺盛。 2、有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同，可用高倍显微镜根据各个时期内染色体的变化情况，识别该细胞处于那个时期。 3、细胞核内的染色体易被碱性染料（如龙胆紫）染成深色。 三、程序设计思路 1、洋葱根尖的培养在上实验课之前的3-4天，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方培养。待根长约5cm，取生长健壮的根尖制成临时装片观察。 2、装片的制作 制作流程为：解离—漂洗—染色—制片 解离上午10时至下午2时，剪去洋葱根尖2-3mm，立即放入盛入有盐酸和酒精混合液（1：1）的玻璃皿中，在温室下解离。 3-5min 用药液使组织中的细胞相互分离开来 漂洗待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛入清水的玻璃皿中漂洗。约10min 洗去药液，防止解离过度 染色把根尖放进盛有质量浓度为ml或ml的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中染色。3-5min 染料能使染色体着色。 制片用镊子将这段根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把根尖能碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻的按压载玻片。使细胞分散开来，有利于观察 3、观察 a低倍镜观察：找到分生区细胞，其特点是细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂b高倍镜观察：在低倍镜观察的基础上换高倍镜，直到看清细胞的物象为止 c仔细观察：先到中期，再找其余各期，注意染色体的特点 d移动观察：慢慢移动装片，完整地观察各个时期（如果自制装片效果不太理想，可以观察洋葱根尖固定装片） 4、绘图 5、记录 四、分析 1、取材分析 （1）取材及用具：a，取材：洋葱（可用葱.蒜代替），质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精，质量浓度为ml或ml的龙胆紫溶液（将龙胆紫溶解在质量分数2%的醋酸溶液中配制而成）或醋酸洋红液，洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片。 b、实验用具：显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，剪子，镊子，滴管。 c、取材分析：取材应为洋葱根尖分生区细胞根尖2-3mm，而且洋葱的根必须有活性。 (2)药品用法用量分析：解离液应为质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精按照1:1比例混合，而且解离时间要控制在3min-5min （3）过程分析：实验核心内容必须严格按照解离——漂洗——染色——制片四步进行

细胞周期同步化

细胞周期同步化 在细胞培养过程中，细胞多处于不同的细胞周期时相中，其中有少数细胞在进行有丝分裂活动，其余细胞分别处于G1、S和G2各期。不同时相的细胞对药物干预存在不同反应，会影响实验的重复性，因此，需要获得周期一致性的细胞。利用细胞同步化技术可使细胞大量的处于同一细胞时期，并可获得该时期大量的物质，如细胞中期时的染色体。细胞周期同步化(synchronization)是指为了研究某一时相细胞的代谢、增殖、基因表达或凋亡，借助某种自然或人为的实验手段,使细胞群体中处于细胞周期不同时相的细胞停留在同一时相( 除了G0期的细胞)的现象。细胞同步化本质上包括用一定的方法获得一定数量的同步化细胞群和使细胞进入同步化生长的两层含义。 DNA 合成抑制法是通过抑制DNA合成将细胞同步于同一时期的方法。高浓度TdR(胸腺嘧啶核苷)双阻断法是目前常用的抑制DNA 合成的同步化方法。它可逆地抑制DNA 合成，而不影响其他时期细胞的转运，最终可将细胞群阻断在S 期或G1 /S 交界处。其原理是: Td Ｒ是细胞DNA 合成不可缺少的前体，但向培养基中加入过量TdＲ，可形成过量的三磷酸腺苷，后者能反馈抑制其他核苷酸的磷酸化，从而抑制DNA 合成。它将细胞同步于G1 /S期交界处，同步化程度高，适用于任何培养体系，可将几乎所有的细胞同步化，但是容易产生非均衡生长，个别细胞体积增大。TdＲ双阻断法因为简单易行且可逆，在肿瘤药理方面对细胞周期同步化的实验中得到了广泛的应用。羟基脲、5-氟脱氧尿嘧啶、阿糖胞苷、氨甲蝶呤和高浓度ADR、GDR也属于DNA合成抑制剂，它们与TdR作用相似，均可通过抑制DNA合成达到同步化的目的。 中期阻断法是利用破坏微管的药物将细胞阻断在M期从而得到同一时期细胞的方法，常用的药物有秋水仙素等。秋水仙素通过抑制微管的聚合，进而抑制有丝分裂装置的形成，将细胞阻断于有丝分裂中期然后再释放使细胞达到同步化。中期阻断法非平衡生长问题不明显，但可逆性比较差，当阻断时间过长时，许多细胞产生异常分裂。过去研究中也发现，同步后的细胞的生长能力明显不如撤去阻断剂后得到的S期细胞旺盛。秋水仙胺、Nocodazole也是目前常用的中期阻断剂。 经过同步化之后的细胞可以通过流式细胞术对其周期进行分析。将细胞用PI（碘化丙啶）染液进行染色，使用流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定，可分析细胞周期各时相的百分比。由于细胞的DNA含量在不同时期有显著的差异，因此可以将细胞分成

第十三讲观察根尖分生组织的有丝分裂(实验课)

第十三讲观察根尖分生组织的有丝分裂(实验课) 1．实验原理 2． 1．实验成功的关键及注意事项

2．关注洋葱在实验中的“一材多用” 命题点(一)考查实验材料的选择和试剂的作用 1．(2017·北京高考)洋葱根尖和小鼠骨髓细胞都能用于观察细胞有丝分裂，比较实验操作和结果，叙述正确的是() A．都需要用盐酸溶液使细胞相互分离 B．都需要用低倍镜找到分裂细胞再换高倍镜观察 C．在有丝分裂中期都能观察到染色体数目加倍 D．在有丝分裂末期都能观察到细胞板 2．(2014·全国卷Ⅰ)回答下列问题： (1)在观察大蒜根尖细胞有丝分裂的实验中，常用盐酸酒精混合液处理根尖，用龙胆紫溶液染色。实验中，盐酸酒精混合液的作用是__________________________；龙胆紫溶液属于________性染料，能够使细胞中的________着色。 (2)用光学显微镜观察细胞，可以看到细胞核。细胞核的功能可概括为：____________________________________________________________________________。 [归纳拓展]归纳盐酸和酒精的“同材异用”

(1)不同浓度酒精的用途： (2)3．在观察根尖分生组织细胞的有丝分裂实验中，下列处理及其目的恰当的是( ) A ．剪取根尖2～3 cm ，进行制片处理 B ．根尖放入盐酸和酒精混合液中解离，目的是使细胞分散开 C ．染色后，需用清水漂洗去浮色再观察 D ．制片时需在盖玻片上再放上一片载玻片，防止压碎盖玻片 4.(2018·泉州质检)在“观察洋葱根尖分生区细胞的有丝分裂”实验中，某同学观察到的一个视野图像如右。已知洋葱根尖分生区细胞一个细胞周期约12 h 。下列有关叙述最合理的是( ) A ．装片制作时使用甲基绿吡罗红混合染色剂进行染色 B ．向左上方移动装片可使该视野中M 细胞移到视野中央 C ．计算该视野中分裂后期细胞所占的比例，乘以12 h ，得出分裂后期的时长 D ．降低显微镜的放大倍数，有助于更精确比较不同分裂时期的时间长短 命题点(三) 考查细胞周期中各时期的计算 5．回答与观察细胞染色体实验有关的问题：(1)右图表示洋葱根尖细胞的细胞周期。假设洋葱根尖细胞的细胞周期大多开始于夜晚22：00时，若要观察洋葱根尖细胞有丝分裂过程，取材的最佳时间是____________。 (2)某同学检查了洋葱根尖6 000个处于有丝分裂中的细胞，其中有692个处于前期，105个处于中期，35个处于后期，168个处于末期。据此判断下列有关叙述错误的是( ) A ．分裂期中各时期相对持续时间是前期＞末期＞中期＞后期 B ．细胞周期中分裂期持续的时间比分裂间期要短 C ．分裂期中前期持续的时间最短 D ．分裂中期持续的时间约为0.21 h [归纳拓展] 细胞分裂时期与所观察细胞数目的关系及计算 (1)细胞周期中不同时期持续时间长短与处于该时期的细胞数呈正相关。 (2)某时期持续时间(t )＝处于该时期细胞数观察细胞总数 ×细胞周期(T )

生物实验报告观察植物细胞的有丝分裂》

精选范文:生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》(共2篇)一、实验目的1.观察植 物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。2.初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片 的技能。3.初步掌握绘制生物图的方法。二、实验原理在植物体中，有丝分裂常见于根尖、 茎尖等分生区细胞，高等植物细胞有丝分裂的过程，分为分裂间期和分裂期的前期、中期、 后期、末期。可以用高倍显微镜观察植物细胞的有丝分裂的过程，根据各个时期细胞内染色 体（或染色质）的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期，细胞核内的染色体容易 被碱性染料着色。三、材料用具洋葱根尖、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、培养皿、 铅笔、质量分数为15%的盐酸、体积分数为95%的酒精、质量分数为ml的龙胆紫（或紫药水） 四、实验过程（见书ｐ39） 1．洋葱根尖的培养（提前3—4天） 2．解离：5min 3．漂洗: 10min 4．染色: 5min 5．制片 6．镜检五、注意 1．解离充分是实验成功的必备条件。 解离充分，组织才能分散，细胞也不会重叠。 2 ．漂洗时间一定要足够，否则细胞染不上色。 3 ．染色时，染液的浓度和染色时间必须掌握好。特别是染色不能过深，否则镜下一片紫色， 无法观察。六、讨论1．制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么谈谈你自己的体会。物理 实验报告 ·化学实验报告 ·生物实验报告 ·实验报告格式 ·实验报告模板2．在观察清楚有 丝分裂各个时期的细胞以后，绘出洋葱根尖细胞有丝分裂的简图，并标明时期。 [生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》(共2篇)]篇一：生物实验报告观察植物细胞的 有丝分裂实验报告 生物实验报告《观察植物细 胞的有丝分裂》_实验报告 [生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》(共2篇)] 一、实验目的 1.观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。2.初步掌握制作 洋葱根尖有丝分裂装片的技能。3.初步掌握绘制生物图的方法。 二、实 验原理在植物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞，高等植物细胞有丝分裂的过 程，分为分 一、实 验目的 1.观 察 植 物 细 胞 有 丝

细胞增殖细胞周期的测定方法

苑中2011 届高三生物二轮专题复习学案 1 “细胞增殖”相关知识的建构（2 课时）一、减数分裂与基因的分离、自由 组合定律请画出能体现基因自由组合现象的细胞分裂图像 例1、（08 江苏）某种昆虫长翅（A）对残翅（a）为显性，直翅（B）对弯翅（b）为显性，有刺刚毛（D）对无刺刚毛（d）为显性，控制这3 对性状的基因均位于常染色体上。现有这种昆虫一个体基因型如下图所示，请回答下列问题。（1）长翅与残翅、直翅与弯翅两对相对性状的遗传是否遵 循基因自由组合定律，并说明理由。。（2）该昆虫一个初级精母细胞产生的精细胞的基因型为____________。（3）该昆虫细胞有丝分裂后期，移向细胞同一极的基因有。（4）该昆虫细胞分裂中复制形成的两个D 基因发生分离的时期 有______ 。（5）为验证基因自由组合定律，可用来与该昆虫进行交配的异性个体的基因型分别是 _______________________________________________ ____________________________ 。二、细胞分裂与可遗传变异请画出可遗传变异种类的概念图苑中2011 届高三生物二轮专题复习学案 2 1、基因重组（非同源染色体的自由组合、交叉互换）例2、（07 广东）在减数分裂中每对同源染色体配对形成四分体，四分体中的非姐妹染色单体 之间经常发生交换。实验表明，交换也可以发生在某些生物体的有丝分裂中，这种现

象称为有丝分裂交换。图39—1 是某高等动物一个表皮细胞发生有丝分裂交换的示意图，其中D 和d，E 和e，F 和 f 表示某对同源染色体上的三对等位基因。图39—1 交换 过程示意图（左：交换前的染色体；右：交换后的染色体）（1）请问该细胞在发生有丝分裂交换后，产生几种基因型 的子代表皮细胞？并分别写出基因型 _______________________________________________ __________________。（2）如果不考虑该生物产生配子时发生的交换，那么该生物产生的配子有几种基因型？并 写出基因型 _______________________________________________ _____________。（3）如果图39—1 是该生物的精原细胞在产生精细胞时发生减数分裂交换后的结果，请问由它产 生的配子类型有几种？并写出基因型 ______________________________。（4）如果细胞在减数分裂和有丝分裂中都发生交换，你认为哪一种分裂方式对于遗传多样性的贡献更大？为什么？ _______________________________________________。 2、染色体变异（染色体结构变异、染色体数目变异）例 3、（10 苏州高二期末）右下图表示某生物体的细胞进行减数 分裂过程中，其中联会的两对染色体之间出现异常的

观察有丝分裂实验学案

【总第28】实验《观察根尖分生组织细胞的 有丝分裂》学案 课题：实验《观察根尖分生组织细胞的有丝分裂》 1、实验原理：（1）细胞核中的染色体易被碱性染料着色，便于在显微镜下观察。 （2）高等植物的根尖、芽尖的分生区细胞在适宜的条件下有丝分裂旺盛。 （3）同一组织细胞，其分裂并不同步进行，可观察到处于不同时 期的细胞。 2、方法与步骤： 过程：解离---漂洗----染色-----观察 步骤： 一：取材：取生长健壮白色的洋葱根尖剪取洋葱根尖部分2mm—3mm。（提示：上午10点至下午2点时细胞分裂活跃，处于分裂期的细胞较多，此时取材最合适） 二. 解离：将剪取的根尖放入盛有盐酸和酒精(1:1)的培养皿中，在温室下解离3min—5min， 解离的目的，用药液使组织中的细胞相互分离开来。 (提示：注意解离时间。时间过短，则细胞不易被压散，时间过长，则细胞容易被压碎，影响染色) 三漂洗：待根尖酥软后（用镊子试），用镊子取出根尖，放入盛有清水的玻璃杯中漂洗10min。 漂洗的目的：洗去药液，防止解离过度而影响染色 四染色：把根尖放入盛有0,01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液中，染色3-5min，使染色体着色 五制片：用镊子取染色的根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上盖玻片，再加一片载玻片，然后，用拇指轻轻按压载玻片，使细胞分散开有利于观察 六观察：先用低倍镜找到分生区，再换高倍镜观察。 （提示：1.分生区细胞呈正方形，排列紧密。2.注意根据染色体的特征，分辨又是分裂的不同时期。3.同一视野中所有分裂期细胞不能全部看到，慢慢移动装片，找到各个时期的细胞） 跟踪训练 1、下列可以用来观察植物细胞有丝分裂的是（） （A）番茄果实（B）洋葱鳞片叶（C）洋葱根尖（D）叶表皮细胞2下列叙述正确的一组是（） ①实验中使用的盐酸的质量分数为15% ②使用的酒精的体积分数为65% ③使用的龙胆紫染液的质量浓度为0.01g/mL ④解离液的两种液体的配制比例为1:1 ⑤解离的时间为10～15min ⑥漂洗的时间约为10min ⑦染色的时间为3～5min （A）①③④⑥⑦ （B）①②③④⑤ （C）①④⑤⑥⑦ （D）②③④⑥⑦3、在观察根尖分生组织细胞的有丝分裂实验中，制作装片的正确顺序是 （） （A）染色→解离→漂洗→制片（B）解离→漂洗→染色→制片 （C）漂洗→解离→染色→制片（D）解离→染色→漂洗→制片 4、经过漂洗的洋葱根尖放入盛有质量浓度为0.01g/mL的龙胆紫溶液的玻璃皿 中染色，被染色的是 （A）整个细胞（B）整个细胞核（C）核仁（D）染色质和染色体 5、观察根尖分生组织细胞有丝分裂实验时，需要解离根尖的原因是（）（A）龙胆紫使细胞染色（B）酒精使细胞变软 （C）使组织细胞分散（D）根脱水变软 6、用光学显微镜的低倍镜观察洋葱根尖细胞有丝分裂装片时，在同一个视野里数目最多的是处在 的细胞。因为。 7、在低倍镜下，观察到的洋葱根尖分生区细胞形态是（） 8、一同学观察洋葱根尖细胞有丝分裂装片时发现被观察的材料边缘为浅蓝色，中间为白色。下列有关对这一现象的分析，正确的是（） A染色时间过长 B染色时间过短 C解离不充分 D漂洗不彻底 9、（2012山东）某小组进行观察洋葱根尖分生组织细胞有丝分裂的实验，下列关于该实验的叙述正确的是 A.盐酸和酒精混合液主要起固定作用 B.碱性染料吡罗红（派洛宁）可用于染色体染色

人教版高中生物必修1观察植物细胞的有丝分裂

观察植物细胞的有丝分裂 教材分析 本实验既是对有丝分裂过程中染色体行为的验证，也是对高倍显微镜操作要领的巩固；既是在诸章节中发生迁移的重点内容，也是历年来各种考核的热点话题。因此，本实验的成功与否，关系重大。 教材首先介绍了该实验的“实验原理”。以高等植物细胞为例，从观察部位、分裂过程、工具选择、观察目标等诸方面做了详细的理论阐析。 教材接着说明了观察植物细胞有丝分裂的目的要求。要求学会识别有丝分裂的不同时期，掌握洋葱根尖有丝分裂装斤的制作技术。以达到培养学生观察能力、识别能力、判断能力和动于操作能力。 教材第三部分清楚地列出了该实验所需要的材料用具，特别是所列盐酸、酒精、龙胆紫或醋酸洋红等溶液，在实验过程中，一定要搞清他们的作用。 教材第四部分更为详细地介绍了该实验的方法和步骤。从装片的制作、分裂过程的观察、固定装片的演示，一直到绘图的要求点滴不漏地作了说明。 为此，我们必须对该实验的知识结构和操作事宜做到胸有成竹，以确保该实验的成功。教学目标 知识目标：1. 识记植物细胞有丝分裂的不同时期染色体的行为变化。 2. 学会洋葱根尖有丝分裂装片的制作过程和技巧。 3. 绘出有丝分裂中期的简图。 能力目标：1. 巩固显微镜的操作技能。 2. 理解相关溶液的作用机理，培养分析能力。 3. 通过根尖的培养、装片的制作、显微镜的使用，培养动手能力。 情感目标：1. 通过小组进行根尖培养及实验过程的相互配合，培养协作精神。 2. 通过细胞有丝分裂各时期染色体行为变化的辨别和判断，使学生 树立辩证唯物主义的世界观。 教学重点 1. 观察有丝分裂各时期的细胞特征，识别有丝分裂的不同时期。 2. 掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技术。 3. 理解各时期中染色体数和DNA数的变化规律和相互关系。 教学难点 洋葱根尖临时装片的制作。 实验原理 观察部位：植物体的根尖、茎尖等分生区的细胞（细胞分裂旺盛）。 分裂过程：高等植物细胞有丝分裂分为间期和分裂期的前期、中期、后期和末期，不同时期细胞染色体的行为变化有各自的特点。 观察过程：先用低倍镜找到根尖生长点的细胞（正方形、排列紧密、有的正在分裂），再用高倍镜辨别各时期的染色体(染色质)变化，并判断该细胞处于有丝分裂的哪个时期。 染色原理：细胞核内的染色体容易被碱性染料（龙胆紫或醋酸洋红等）着色。 材料用具： 材料：培养好的洋葱（或蒜葱）；质量分数为15%的盐酸溶液；体积分数为95%酒精溶液；质量浓度为0.01g/mL的龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）。 用具：显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，剪刀，镊子，滴管，解剖针等

有丝分裂实验过程

实验原理 在植物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞。高等植物细胞有丝分裂的过程，分为分裂问期和有丝分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍镜观察植物细胞有丝分裂的过程，根据各个时期细胞内染色体或染色质）的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。细胞核内的染色体容易被碱性染料（如龙胆紫、醋酸洋红）溶液着色。 目的要求 1．观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。 2．学会制作洋葱根尖有丝分裂装片的生物技术。 3．学会使用高倍镜和绘生物图的方法。 材料 洋葱（可以用蒜、葱代替）。 用具 显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿3个，、剪刀，镊子，滴管。 药品 质量分数为15％的盐酸，酒精的体积分数为95％的溶液，龙胆紫的质量浓度为0．01 g ／mL的或0．02 g／mL的溶液（或醋酸洋红液）。 方法步骤 一、洋葱根尖的培养 在上实验课之前的3d～4d，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方，注意经常换水，使洋葱的底部总是接触到水。待根长5 cm时，可取生长健壮的根尖制片观察。 二、装片的制作 1．解离下午2时是洋葱有丝分裂的高峰期，可在此时剪取洋葱的根尖 2 mm～ 3 mm，立即放入盛有氯化氢的质量分数为匕％的溶液和酒精的体积分数为95％溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，在室温下解离3 min～5 min后取出根尖。 2．漂洗待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min. 3．染色把洋葱根尖放进盛有龙胆紫的质量浓度为0．01g／mL 或0．02 g/mL的溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中，染色3 min～5 min。 4．制片用镊子将这段洋葱根采取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并且用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻地压盖玻片，这样可以使细胞分散开来。 三、洋葱根尖细胞有丝分裂的观察 1．低倍镜观察 把制作成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察，慢慢移动装片，要求找到分生巨细胞，它的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。 2．高倍镜观察 找到分生区细胞后，把低倍镜移走，换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，直到看清细胞物像为止。 3．仔细观察，可先找出处于细胞分裂期中期的细胞，然后再找出前期、后期、末期的细胞。注意观察各个时期细胞内染色体变化的特点。 4．在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。 5．如果自制装片效果不太理想，可以观察教师演示的洋葱根尖细胞有丝分裂的固定装片。

流式检测细胞周期和凋亡实验步骤

流式细胞技术检测细胞周期分布 1) 已转染miRNA mimics的细胞培养达到85％融合时，用胰酶消化细胞。1000 rpm，离心5min，收集细胞沉淀； 2) 已消毒的PBS重悬细胞，1000 rpm/min，离心5 min，收集细胞。重复此步骤2次，以除去胰酶； 3) 加入预冷的70%乙醇固定细胞过夜； 4) 第二天1000rpm，离心5 min，收集细胞沉淀，PBS重悬两次，以除去乙醇； 5) 离心后加入500ul PBS重悬细胞，加入碘化丙锭(PI)染色液(含50mg/L PI，1g/L Triton X-100，100g/L RNase)混匀，4℃避光孵育30min。 6）流式细胞仪FACStar (美国BD公司) 检测。接收的信号经Cellquest软件处理，对检测细胞的荧光强度进行分析。实验重复3次。 2.11流式细胞技术检测细胞凋亡水平 1) 已转染BART6-3p mimics的细胞培养达到85％融合时，将上清培养液收集至离心管内；常常 2）PBS清洗贴壁细胞3次，用胰酶消化细胞（注意：消化时不可过度），收集于第一步的离心管内； 3) 1000 rpm离心5min，弃上清收集细胞，PBS轻轻重悬后，加入195 ulAnnexin V-FITC结合液，吹打混匀，重悬细胞，加入5ul Annexin V，轻轻混匀。避光室温孵育15min； 4) 加入10 ul PI染色液，轻轻混匀，避光孵育； 空白：Annexin V—FITC结合液200ul 双染：185ul结合液+5 ulAnnexin V—FITC+10ul PI 单染：195ul结合液+5ul Annexin V—FITC 190ul结合液+10PI 5) 进行流式细胞仪检测，Annexin V-FITC为绿色荧光，PI为红色荧光。

高中生物观察有丝分裂过程实验优质课教案

观察有丝分裂过程实验 一.教材分析 细胞的有丝分裂是高中生物课程的核心内容之一，是在学生学习了细胞的分子组成、结构及代谢的基础，是学习的是学习生物体生长、发育等生命现象的重要基础。细胞的有丝分裂是细胞分裂的主要方式，也是后面学习减数分裂和遗传基本规律的基础。《观察根尖分生组织细胞的有丝分裂》是一个经典的高中生物实验。是在学生已了解了有丝分裂过程、意义的基础上进行的。教材突出的是实验步骤和显微镜操作技巧。要求学生学会制作大蒜根尖细胞有丝分裂装片，观察并验证植物细胞有丝分裂几个时期的细胞结构特点，加深理解细胞有丝分裂的过程。二.教学目标 （一）知识目标 1.观察植物细胞有丝分裂的过程识别有丝分裂的不同时期。 2.制作根尖有丝分裂临时装片。 （二）能力目标 1通过植物细胞根尖的临时装片制作,初步掌握植物根尖压片的基本方法以及使用高倍显微镜和绘生物图的基本技能。 2、通过实验操作并观察有丝分裂的过程帮助学生培养推理分析能力,解决问题能力,理解科学实验的素质。 （三）情感目标 1.通过小组进行根尖培养及实验过程的相互配合，培养学生的协助精神。 2.培养学生实事求是的科学态度和认真严谨的科学精神。 三.教学重点和难点 1.教学重点： 观察有丝分裂各时期的细胞特征，识别有丝分裂的不同时期。 掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技术。 理解各时期中染色体数和DNA数的变化规律和相互关系。 2.教学难点： 制作大蒜根尖细胞有丝分裂装片的过程中,涉及到的试剂以及对标本的处理时

间、操作的先后顺序。 四.教学方法 自制的多媒体课件 五.教学准备 1.教师准备好实验材料、用具。 2.学生预习课本相关内容，了解该实验的实验原理、目的要求及实验操作的步骤，提出与本课内容有关的问题。 六.教学过程 复习导入： 真核细胞的分裂方式主要有哪几 种？我们已经学习了有丝分裂的相 关知识，了解了有丝分裂各时期的 变化特点，这节课我们就自己动手来 完成植物细胞有丝分裂过程装片的制 作以及对各个时期细胞的观察。 我们今天用的材料是植物根尖组织 提问“根尖组织的结构还记得吗?” 那我们今天的目的是为了观察植物细 胞有丝分裂的各个时期，所以我们选 择观察的对象必须是具有完整的细胞 周期这样的细胞。 提问“在根尖的这些组织中，哪些细 胞是能具有细胞周期的？”

细胞有丝分裂和植物组织的观察

实验三细胞有丝分裂和植物组织的观察（3学时） 一、技能目标 1．学会实验用植物材料的培养技术。 2．了解植物细胞分裂的主要方式及生物学意义。 3．了解植物有丝分裂基本过程，掌握不同分裂时期细胞的特点。 4．了解各类植物组织的分布、形态结构特征、功能及相互区别。 二、实验器具与材料 显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、洋葱根尖纵切制片、蒸馏水、碘液、南瓜茎纵切制片、葡萄茎离析制片、蚕豆茎横切制片、椴树茎横切制片、杨树茎横切制片、天竺葵叶或其他叶片横切制片、天竺葵叶下表皮制片、鸢尾叶下表皮制片、新鲜白菜叶、新鲜梨果实等。 三、实验内容 1．有丝分裂：有丝分裂各时期特点如下： （1）前期：染色体且逐渐变短粗，核仁、核膜渐渐解体消失，前期末出现纺锤丝。 （2）中期：染色体继续缩短变粗，以着丝点排列在赤道板上。纺锤体形成。 （3）后期：构成每一条染色体的两条染色单体从着丝点处分离变成两组子染色体，且两组子染色体分别被纺锤丝拉向相反的两极。 （4）末期：核仁、核膜重新出现，新细胞壁形成，最后形成两个子细胞。 2．植物组织 （1）分生组织：取洋葱根尖纵切制片（示范） （2）薄壁组织：取各类叶横切制片观察叶肉细胞的同化组织。 （3）保护组织：保护组织分布植物体表，有保护作用。

初生保护组织结构：观察双子叶植物表皮结构。 次生保护组织结构：取椴树茎或杨树茎横切制片观察周皮结构（皮孔）。 （4）机械组织：厚角组织与厚壁组织。 （5）输导组织：取南瓜茎纵切制片观察。观察各种类型的导管及筛管（6）分泌结构：取各类叶片横切制片（示范），观察叶表皮上有多细胞构成的腺毛结构，主脉薄壁细胞中有圆型空洞，即为分泌腔结构。 四、作业 1．绘洋葱根尖细胞有丝分裂各时期图。 2．绘1～2个网纹导管（或梯纹导管）和螺纹导管细胞图。 3．绘1～2个石细胞结构图。 4．绘筛管细胞和伴胞结构图。

观察植物细胞有丝分裂实验报告

观察植物细胞有丝分裂 实验报告 Document number：WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT

《观察植物细胞有丝分裂》实验报告 组员：肖石连、周小燕、汪小康、邹苗 执笔人：汪小康 一、实验原理 1.观察部位：植物体的根尖、茎尖等分生区的细胞。 2.分裂过程：高等植物细胞有丝分裂分为间期和分裂期的前期、中期、后期和末期，不同时期细胞染色体的行为变化有各自的特点.。 3.观察过程：先用低倍镜找到根尖生长点的细胞（正方形、排列紧密、有的正在分裂），再用高倍镜辨别各时期的染色体(染色质)变化，并判断该细胞处于有丝分裂的哪个时期。 4.染色过程：细胞核内的染色体容易被碱性染料（龙胆紫或醋酸洋红等）着色。 二、实验器材 大蒜、显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、刀片、镊子、烧杯等 15%的盐酸、95%的酒精、龙胆紫溶液等 三、实验步骤 1.前期培养：取大蒜若干放在装满清水的100ML烧杯上，让它的底部接触瓶内水面，把烧杯放在温暖地方培养。 2．解离：实验前一天，取大蒜根尖，使用卡诺氏固定液（乙醇：冰醋酸=3:1）进行24H固定，之后用蒸馏水冲洗，放入70%酒精中，在4℃冰箱中保存。待到实验时即可进行解离处理。取经过和未经过固定液处理的根尖各1-3个，剪根尖2CM，放入盛

有15%盐酸和95%酒精1:1混合液的培养皿中并盖好（以防盐酸挥发），解离3~5min,此时根尖变得酥软透明。 3.漂洗：用镊子夹住伸长区一端，从培养皿中取出根尖，放到盛有清水的培养皿中漂洗2~3min，可用镊子或玻棒轻轻搅动。 4．染色：用镊子夹住伸长区一端，从培养皿中取出根尖，放到干净的载玻片中央，用刀片切去根尖大概0.5mm，紧贴刚刚切的位置切下针尖大小的根尖，此处即为根尖分生区。利用准备好的染液进行染色，时间为3~5min。 5.压片：将被染上色的根尖盖上盖玻片（防止气泡产生），然后在盖玻片上放一层吸水纸，水平放在实验台上，用拇指稍用力对其按压，使根尖细胞呈云雾状散开，此时再把盖玻片周围染液吸拭干净即可。 6.观察：先用低倍镜观察，找到分生区细胞（体积小、排列紧密、整齐、近似正方形，有的细胞正在分裂）。找到视野后用高倍镜观察。 四、实验结果及讨论 从所做实验观察结果看来，处于间期的细胞最多，处于分裂时期的细胞较少。原因是细胞间期在细胞有丝分裂周期中占的比重大。此次实验观察到了有丝分裂各时期形态。比较成功

观察植物细胞有丝分裂实验报告

观察植物细胞有丝分裂实 验报告 一、实验原理 1.观察部位：植物体的根尖、茎尖等分生区的细胞。 2.分裂过程：高等植物细胞有丝分裂分为间期和分裂期的前期、中期、后期和末期，不同时期细胞染色体的行为变化有各自的特点.。 3.观察过程：先用低倍镜找到根尖生长点的细胞（正方形、排列紧密、有的正在分裂），再用高倍镜辨别各时期的染色体(染色质)变化，并判断该细胞处于有丝分裂的哪个时期。 4.染色过程：细胞核内的染色体容易被碱性染料（龙胆紫或醋酸洋红等）着色。 二、实验器材 大蒜、显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、刀片、镊子、烧杯等15%的盐酸、95%的酒精、龙胆紫溶液等

三、实验步骤 1.前期培养：取大蒜若干放在装满清水的100ML烧杯上，让它的底部接触瓶内水面，把烧杯放在温暖地方培养。 2．解离：实验前一天，取大蒜根尖，使用卡诺氏固定液（乙醇：冰醋酸=3:1）进行24H固定，之后用蒸馏水冲洗，放入70%酒精中，在4℃冰箱中保存。待到实验时即可进行解离处理。取经过和未经过固定液处理的根尖各1-3个，剪根尖2CM，放入盛有15%盐酸和95%酒精1:1混合液的培养皿中并盖好（以防盐酸挥发），解离3~5min,此时根尖变得酥软透明。 3. 漂洗：用镊子夹住伸长区一端，从培养皿中取出根尖，放到盛有清水的培养皿中漂洗2~3min，可用镊子或玻棒轻轻搅动。 4．染色：用镊子夹住伸长区一端，从培养皿中取出根尖，放到干净的载玻片中央，用刀片切去根尖大概0.5mm，紧贴刚刚切的位置切下针尖大小的根尖，此处即为根尖分生区。利用准备好的染液进行染色，时间为3~5min。 5.压片：将被染上色的根尖盖上盖玻片（防止气泡产生），然后在盖玻片上放一层吸水纸，水平放在实验台上，用拇指稍用力对其按压，使根尖细胞呈云雾状散开，此时再把盖玻片周围染液吸拭干净即可。 6.观察：先用低倍镜观察，找到分生区细胞（体积小、排列紧密、整齐、近似正方形，有的细胞正在分裂）。找到视野后用高倍镜观察。