河南省犬细小病毒病的流行病学调查及诊疗研究_金霞
犬细小病毒病是由犬细小病毒（ＣＰＶ）感染幼犬引起的一种急性传染病，以剧烈的呕吐、出血性肠炎和白细胞显著减少以及心肌炎为主要特征，发病率高，传染性强，死亡率高（没有进行治疗的ＣＰＶ－２患犬的死亡率高达９１％），是危害我国养犬业最为严重的传染病之一。对于该病的诊断，以前多采用临床经验，往往耽误病程，影响治愈率。２００７年２月￣２００９年８月我们在河南省部分动物医院，采用韩国产ＣＰＶ快速检测试纸对临床疑似犬细小病毒病的患犬进行早期快速诊断，经３１５例统计数据分析表明，该诊断试纸较以往国产试纸具有更高的诊断率。细小病毒快速检测试纸具有灵敏度高、快速准确的特点，可用于临床细小病毒的早期诊断。
采用犬细小病毒单克隆抗体（ＣＰＶＭｃＡｂ）、重组犬干扰素α配合自拟中药犬痢康（合称三联疗法）对患细小病毒病的犬进行治疗，与以前的抗病毒药疗法、抗病毒血清疗法及单纯使用单克隆抗体的治疗方法比较发现，采用该法治疗不仅提高了治愈率（９５．２％），而且可缩短疗程。
本研究揭示了河南省犬细小病毒病的流行特点及防治措施，对今后犬细小病毒病的临床诊疗具有一定的指导意义。
１河南省犬细小病毒病的流行病学调查及诊断
１．１材料与方法
本研究从５个宠物医院就诊的疑似犬细小病毒犬中，选择经ＣＰＶ胶体金快速检测试纸确诊为犬细小病毒病的病例为调查对象，收治的３１５例病例全部为自然发病犬。流行病学调查内容为患犬年龄、发病季节、品种、免疫情况、病程、疗程、痊愈或死亡情况，诊断方法为临床诊断、病毒检测、寄生虫检查。
１．１．１临床诊断采用问诊、视诊、触诊、听诊等方法对病犬进行整体及一般检查，系统检查的重点是消化系统。
１．１．２病毒诊断主要采用犬细小病毒胶体金快速诊断试纸（韩国安捷公司生产）进行检测。
其操作方法为：用棉签从病犬肛门插入取出少许粪便或直接蘸取新鲜粪便；将棉签浸入装有１ｍｌ反应缓冲液的样品收集管，将棉签上的样品和反应缓冲液充分混匀。取出试纸，将它平放于宽敞和干燥的桌面；吸取被萃取过的样品混和液，向试纸条样品孔中缓慢地加入４滴，静置２￣３分钟，观察结果。阳性判断标准：Ｃ及Ｔ线对应处出现两条红线；阴性判断标准是：Ｃ线对应处出现一条红线则为阴性。只出现一条红线为非细小病毒感染或试纸条无效。
１．１．３粪便寄生虫检查取少许粪便，加入含有１滴生理盐水的载玻片中，混匀后，在显微镜１００倍镜检，观察有无虫卵。必要时将粪便用饱和盐水漂浮法，观察有无寄生虫虫卵。
１．２结果
１．２．１流行病学调查
犬是本病主要的自然宿主，其他犬科动物，如丛林犬、郊狼和食蟹狐等也可感染，各种年龄和不同性别的犬都有易感性，但小犬的易感性更高。成年犬一般只出现感染后的免疫反应，常不可见临床症状。本病主要由直接或间接接触而传染。感染犬和康复带毒犬是传染源。病犬从粪便、尿液、唾液和呕吐物中排毒；而康复犬可能从粪尿中长期排毒，污染饲料、饮水、垫草、食具和周围环境，一般认为传染途径主要是消化道。通过对３１５例感染犬细小病毒的犬进行详细的统计（详情见附录），发现犬细小病毒感染与年龄、季节、品种、预后以及免疫情况有着密切关系。
１．２．１．１犬细小病毒感染与年龄的关系
犬细小病毒感染与年龄的关系见表１。
表１犬细小病毒感染与年龄统计情况
从统计表上可以看出，６月龄以下幼犬发病率最高，３￣６月龄之间感染的犬共有２４２只，达到了总感染数的７６．８３％。其中１月龄犬由于哺乳的关系，受母源抗体的影响，感染率及发病率相当低，但随着年龄的增长，在２月龄以后，犬体内的母源抗体几乎消
·研究与探讨·
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失，而自身的免疫机能尚不健全，此时犬极易感染发病；６月龄及以上的犬的感染率较低，达到总感染数的４．７６％。这说明随着年龄的增长，犬的免疫系统已经完善，感染率呈下降的趋势。
１．２．１．２犬细小病毒感染与季节的关系
犬细小病毒感染与季节的关系见表２。
从统计表上可以看出，冬、春季节发病率最高，占全年发病犬的９５．２４％。
１．２．１．３犬细小病毒感染与品种的关系
在收治的３１５例病例中，其中外来名犬共有１８９例，本地犬只有１２６例，虽然有文献表明［９］，犬细小病毒感染与品种的关系不大，但是经统计发现在相同的条件下外来犬的感染率明显比本地犬高，见表３。这可能是因为本地犬的抵抗力以及适应力明显高于外来犬。
表３犬细小病毒感染与品种统计情况
犬细小病毒感染与免疫情况有很大的关系，在统计的３１５例病犬中可以发现，８５％以上都没有接受过免疫，只有１５％的犬接收过疫苗注射，见表４。这说明，及时预防接种犬细小病毒疫苗是控制本病流行的唯一途径。此外，科学的日常护理、尽是减少幼犬相互接触也是减少本病发生的关键之一。
１．２．１．５感染日龄与预后
对统计的３１５例病例中，我们发现动物的年龄与治疗效果密切相关。其平均治愈率为８０％左右。４月龄以内幼犬共有１８９头，其中治愈１２６头，治愈率为６７％（其中多数病死犬前来就诊时就已经严重脱水）；４月龄以上的犬共有１２６头，治愈率达１００％。由于４月龄以内的幼犬体质较差，很容易因剧烈呕吐、腹泻或便血而导致脱水，最终因脱水衰竭死亡；随着年龄的增加，动物机体抵抗力较强，免疫力相应增强，经一段时间的治疗症状基本消失。所以说，随着年龄的增加，其治愈率也相当高。
从本研究调查的３１５例临床资料来看，在早期由于易感性高和犬密集，大小犬都感染，可导致暴发性流行。病程较短，病死率较高。几个月后，则只有在小犬中发生新病例。该病多感染４月龄以内的幼犬，其它年龄的犬只也可发生，但数量相应较少。统计发现断乳前后的仔犬易感性最高，往往以同窝暴发为特征，死亡率相当高，其发病率和死亡率都高于其他年龄组；４月龄以内感染率及发病率较高，死亡率达３３％；４月龄以上感染率也较高，但治愈率高达１００％。本地土种狗发病相对较少，引进品种或混血犬发病较多。
１．２．２诊断
１．２．２．１临床诊断
本研究获取的３１５例患犬细小病毒的犬均为肠炎型。目前已很少见心肌炎型，因普遍存在母源抗体之故。初发时病犬有呕吐现象，食欲减退，精神稍差，４￣１２小时后精神沉郁，不食。体温升高到３９．０￣４１．５℃便呈糊状，无血，味臭。发病８￣１２小时后，粪便呈米汤状，带血，颜色呈铁锈色或深红色，味腥臭，最后粪便呈血水样。腹泻次数初为１￣２小时１次，后可达每小时数次，严重病例肛门失禁，血水顺肛门外流不止。病犬迅速脱水、消瘦。可视粘膜苍白，心音减弱，心跳加快，间或有节律不齐。肠音亢进，蠕动加快。排尿减少，色深黄或棕黄。如不及时采取综合措施救治，往往很快因迅速脱水、衰竭而死亡。病犬症状见照片１￣４。
根据特征性临诊症状，先呕吐后出现急性出血性肠炎、白细胞显著减少等，再结合流行病学和病理学的特点，可以作出初步的诊断；在诊断的时候，要注意和其他同类疾病，如犬瘟热和犬传染性肝炎的
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鉴别诊断。
１．２．２．２病毒诊断
犬细小病毒胶体金快速诊断试纸。
１．２．２．３粪便寄生虫检查
在３１５份粪样中检出犬蛔虫卵２５份，犬鞭虫卵１５份，犬复孔绦虫卵１０份，球虫卵囊９份。
根据临床表现，ＣＰＶ快速诊断结果以及粪便寄生虫卵检查结果，可以对本病作出确诊。
２犬细小病毒病的治疗
２．１治疗方法
从河南省５个宠物医院各随机选取４０个犬细小病毒病确诊病例，共２００例，每１０个为一组，分为４个治疗组，即三联疗法组、二联疗法组、血清组、单抗组，各组均配合常规治疗。具体治疗方法如下：２．１．１三联疗法组：犬细小病毒单克隆抗体（ＣＰＶＭｃＡｂ）、重组犬干扰素α配合中药疗法。犬细小病毒单克隆抗体（世纪元亨）０．５￣１ｍｌ／ｋｇ，肌内注射，连用３天；犬用干扰素（世纪元亨）成犬每日肌注１～２支（１００万国际单位），幼犬每日０．５～１支，连续３～５天；中药犬痢康（自制），组方及用法见１．２。
２．１．２二联疗法组：利巴韦林配合中药疗法。
利巴韦林５～７ｍｇ／ｋｇ，皮下注射／肌内注射，每日１次。
中药犬痢康组方：双花１０ｇ、连翘１０ｇ、大青叶７ｇ、板蓝根７ｇ、黄连８ｇ、黄芩８ｇ、黄柏７ｇ、白头翁１０ｇ、栀子５ｇ、桔梗４ｇ、白术４ｇ、陈皮４ｇ、鸡内金５ｇ、柴胡３ｇ、薄荷３ｇ、黄菊花３ｇ、甘草３ｇ。
方中剂量适用于１０ｋｇ的病犬，临床应用时可依病犬体重、病情轻重酌情增减。
使用方法：每天一剂，上午将组方中药物共水煎，取汁，候温灌服，灌后留渣。下午间隔１０～１２ｈ后，将残渣再煎一次，并取汁灌服。
２．１．３血清组：犬细小病毒高免血清（长春军需大学），１￣２ｍｌ／ｋｇ皮下注射，连用５￣７天。
２．１．４单抗组：犬细小病毒单克隆抗体，用法同１．１。
２．１．５常规治疗包括对症治疗、支持疗法和控制继发感染。
２．１．５．１支持疗法：此病因为严重的呕吐、腹泻可使体内的水分及电解质大量丢失，最后因水、电解质平衡失调，并发酸中毒而于数小时至两天内死亡，因此，静脉补液、补钾、补碱是相当重要的。
补液：对脱水病犬的补液是非常重要的和必不可少的，对液体量、液体种类和输液速度要慎重选择，每天至少输液一次，必要时每天输两次，连续输液５～７天。只要是呕吐或者腹泻（或二者）未停止，补液就应持续。所需液体量＝已丢失液体量＋当日生理需要量＋当日丢失量。已丢失液体量按体重百分比计算，重度脱水，幼犬１０～１５％，成犬８％；中度脱水，幼犬５～１０％，成犬４～８％；轻度脱水，幼犬２～５％，成犬２％。当日生理需要量，按以下方法计算，成犬３０～４０ｍｌ／ｋｇ／ｄ，幼犬８０～９０ｍｌ／ｋｇ／ｄ，二月龄以下犬１００～１５０ｍｌ／ｋｇ／ｄ。当日丢失量可根据呕吐及拉稀的多少来计算。液体种类已丢失液体量，输２∶２∶１液或３∶４∶２液。当日生理需要量，成犬输３∶１，幼犬输４∶１液。０．９％氯化钠、林格氏液、５％糖盐水，因含氯较多，用于４月龄以下幼犬时，因其电解质浓度太多，可用其３倍的５或１０％葡萄糖溶液稀释后静滴。４月龄以下幼犬每日需要生理盐水量为每日所需液体量的１／３～１／４。输液速度２ｋｇ以下犬８滴／分钟，２～４ｋｇ１５滴／分钟，４～８Ｋｇ３０滴／分钟，８～１５ｋｇ４０～５０滴／分钟。心脏功能差、心率不齐病犬不能输得太多、太快，以免发生急性心衰死亡。
补钾：因病犬多日不吃，摄入钾少，且呕吐，腹泻，又使钾大量丢失，因而出现缺钾的典型症状，精神淡漠，肌肉软弱无力，疼痛，不愿行走或瘫痪。因此凡禁食３日以上者均应补钾。在无尿或少尿的情况下，为防止产生高血钾症，最好先适量输入生理盐水或５％葡萄糖液，待尿量增多，患犬开始排尿后再补钾较为安全。犬的需要量按０．１～０．２ｇ／ｋｇ／ｄ（１～ｌ／ｋｇ）计算，分２～３次补充。输钾的速度不能太快，缺钾较重犬可分数日补足，不可一日补完，以免发生高血钾症。，要控制稀释浓度和速度，其浓度一般不超过３％，即１０％氯化钾１０ｍｌ时，输液瓶中最少要有液体３００ｍｌ，不足时，要用５％～１０％葡萄糖溶液去补充。如病犬不呕吐时，采用口服法补钾较为安全。
补碳酸氢钠：在病的末期，因病犬长期不进食，加上本身消化液和体液大量丢失，大多数病犬都要引起酸碱平衡率乱，出现酸中毒。其症状为：病犬倦怠，呼吸加快加深、呼出的气体有醋酮味（烂苹果的气味），测尿液呈酸性，四肢抽搐，呆立，昏睡，其补救的方法是：静脉滴注５％碳酸氢钠，５ｍｌ／ｋｇ，因它是高渗溶液，静脉输液前要稀成等渗溶液，稀释方法，５％碳酸氢钠溶液加入２倍剂量的５％葡萄糖或１０％的葡萄糖溶液内，即成接近于等渗的溶液。
补钙：在纠正酸中毒过程中如能静脉滴注１０％葡萄糖酸钙，常能防止低钙抽搐的发生。剂量是１～２ｍｌ／ｋｇ。钙不能与碳酸氢钠混合滴注，以防产生碳酸钙沉淀。
２．１．５．２对症治疗：
止吐：止吐药有助于减少体液流失，减轻患犬痛
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苦，以及维持肠道营养。首选爱茂尔肌注，必要时用阿托品，胃肠道有出血者忌用胃复安。还可以用昂丹司琼或多拉司琼止吐。
止泻：鞣酸蛋白，施密达都有止泻作用，但因其呕吐，不适宜口服给药，用施密达深部灌肠效果较好。我们常用灌肠法，消除肠管内腐败内容物，防止自体中毒，如采用０．１％高锰酸钾灌肠。
止血：肾上腺色腙、安甲苯酸、安甲环酸、维生素Ｋ３均可用于止血，肌注效果不理想，采用联合用药肌注或静滴止血敏、氨甲苯酸有较好的疗效。如果止血无效，可静滴立芷雪、卡络磺钠。另外全血、血浆、代血浆也有止血作用。
心功能不全者：静滴生脉注射液１～１０ｍｌ；维生素Ｂ１２０．２５～０．５ｍｇ，肌苷５０～１００ｍｇ，混合肌注。
低蛋白血症：一些幼犬会出现低蛋白血症，输入全血将有助于这个问题的解决，但是如果不需要补充红细胞时，最好输入血浆。低蛋白造成水肿而且输入血浆后并未有所改善，应该考虑使用胶体羟乙基淀粉。理想的血浆蛋白浓度应该维持在２ｇ／ｄｌ或则更高。
贫血：有些幼犬严重贫血，这是由于细小病毒肠炎引起的胃肠道失血造成的，或者这个跟细小病毒没有关系的寄生虫引起的。幼犬严重贫血必须输血，全血对动物的贫血和低蛋白血症更有好处。
败血症和内毒素血症：在治疗早期可用糖皮质激素和氟尼辛葡甲胺可能有好处，在脱水被纠正之后不要使用，不要重复用药。
２．１．５．３控制继发感染
由于白细胞减少，肠上皮细胞损伤，大肠埃希菌和产气夹膜梭状芽孢杆菌容易造成病犬的继发感染，故应使用抗菌素。一般采取联合用药，氨苄青霉素（或头孢唑啉或头孢拉定）＋庆大（或卡那或丁胺卡那霉素）。喹诺酮类会引起幼犬软骨发育异常，应慎用。对有寄生虫混合感染的，可应用抗寄生虫药物如丙硫苯咪唑等。
２．２治愈标准
治愈：７日内精神转好，食欲恢复，１０天ＣＰＶ抗原检测结果为阴性（ＣＰＶ－２大量从粪便中排除的过程最多可持续７～１０天）。ＣＰＶ抗体检测结果为阳性（犬感染细小病毒后，机体会产生抗体以抵抗疾病，出现临床症状的时候，抗体水平已经在总体上升高了。滴度最早可于感染３￣４天时测到并有可能持续大约一年。故可用检查抗体来诊断疾病及推测预后，检测方法同抗原检测）。如果治疗前后细小病毒的抗体水平有所提高，则说明病犬在好转。反之，则治愈的成功率不大，抗体试纸的应用，对病犬的预后情况有了准确的判断。１５天后回访健康；
未愈：用药５天后基本无效，死亡或用其他方法治愈。
２．３治疗结果
用三联疗法治疗６３例病犬，治愈６０例，治愈率高达９５．２％，见表６。二联疗法组的治愈率为６２．２％、血清组的治愈率为７４．６％、单抗组的治愈率为８５．１％。对照组（犬主因经济或犬品种原因不用血清、单抗）治愈率４５．９％。
采用三联疗法对犬细小病毒病的治愈率最高，显著高于其他治疗方法的治疗效果。常规治疗包括对症治疗、支持疗法和控制继发感染也有一定的治愈率，说明输液及对症治疗也起重要作用。
表６不同年龄病犬三联疗法的治疗情况
３小结与讨论
３．１在对３１５例患犬病例的统计与分析中，我们发现多数死亡的犬都在４月龄以内，这是因为４月龄以内的犬的母源抗体水平最低，且免疫功能仍未健全，而随着年龄的增长，动物机体的免疫系统已经完善，感染率呈明显下降趋势；外来犬的感染率明显高于本地犬，因为外来犬的抵抗力以及适应力低于本地犬；患犬中未免疫犬的感染率高于已免疫的，表明合理防疫有效降低其发病率，因为在未合理防疫的情况下，抵抗力低下且极易感染犬细小病毒的犬很快脱水衰竭死亡，但有２０例４月龄左右的犬经过三次防疫仍发病的情况，可能为免疫失败，其原因是ＣＰＶ－２出现了抗原性漂移
在统计中还发现４月龄以内幼犬共有１８９头，其中治愈１２６头，治愈率为６７％（其中多数病死犬前来就诊时就已经严重脱水）；４月龄以上的犬共有１２６头，治愈率达１００％。这表明随着年龄的增加其治愈率也增高。因为随着年龄的增加，动物机体的抵抗力较强，免疫力相应增强，经一段时间的治疗症状基本可以消失，而幼小的犬体质较差，感染后很快脱水衰竭死亡。
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３．２胶体金试纸条是国内外检测ＣＰＶ最为简便、快速的方法。我们在临床检测中发现，在表现出典型的细小病毒感染症状的犬，其粪便的阳性检出率均比较高，而且方便快捷，可用于临床细小病毒的早期诊断。进口快速检测试纸比较国产快速检测试纸要准确且快捷。
３．３本病的早期症状是厌食、绝食、呕吐食物及白色泡沫状液体，没有经验的犬主往往认为是采食过多，或吃脏东西所致，观察或口服多酶片、庆大、小儿安、霍香正气水就会康复，而不愿就诊，直到病犬出现拉稀拉血便症状后才到医院就诊。早期体温升高（４０℃左右），后期体温正常，甚至下降也是本病的特征之一。在使用抗病毒疗法注射犬高免血清时，有时出现过敏现象，为了防止这种现象的发生，可配合维生素Ｃ、地塞米松注射。呕吐、腹泻是本病的一个特征性症状，一般症状会持续５￣７天不等。治疗时，一般病犬可用６５４－２、止血敏、维生素Ｃ输液，健康犬血浆静脉滴注，配合细小病毒单克隆抗体、爱茂尔肌注，效果较好。液体量、液体种类和输液速度要慎重选择，每天至少输液一次，严重者每天输液两次，连续输液３￣５天。输液时应考虑补钾。补钾时，要控制稀释浓度和速度，其浓度一般不超过０．３％，输钾的速度不能太快，以免发生高血钾症。在病的末期，大多数病犬会出现酸中毒，在输液时复方氯化钠加入适量碳酸氢钠，对纠正酸碱平衡紊乱是非常有利的。对于病情严重的犬使用犬免疫球蛋白有较好的疗效。从治疗效果看，早期发现、早期治疗是提高治愈率的关键。该病病程５￣７天，只要坚持治疗，病犬的康复率是很高的。一些病例常在通过１￣２天治疗，病情有所好转后而中断治疗，使病程延长或转为晚期症状。本病在呕吐症状未消除之前，一般不进食，因而不宜使用口服药物。
３．４通过与以前以抗病毒药（利巴韦林）为主要药物、以抗犬细小病毒血清为主要药物以及单纯使用单克隆抗体为主的治疗方法的比较发现，采用犬细小病毒单克隆抗体（ＣＰＶＭｃＡｂ）、重组犬干扰素α配合自拟中药犬痢康（合称三联疗法）的综合性治疗明显地提高了治愈率。
３．５犬干扰素α和单克隆抗体或高免血清联合使用，是较好治疗病毒性感染方案。犬干扰素α从根本上抑制病毒增殖，减慢病毒侵害速度和程度，减缓病情发展。犬干扰素α可加速机体自身产生抗体，提高机体免疫力，特别是诱导机体产生变异病毒抗体，这些抗体对变异病毒更具针对性。
３．６犬痢康方解及药性分析：方中双花宣风散热，善清解血毒；连翘透达表里，宣扬血气，去上焦诸热；板蓝根、大青叶为解毒药，具清热凉血之功用，四味共济可解疫疠之热毒为主药。黄连解毒、善泻上焦之肺火；炒黄芩清热、善泻心、胃火；黄柏则善泻下焦之相火；白头翁清热解毒、凉血止血；栀子苦寒清降、入血分、清三焦之热，五味共用，有止吐、止痢、止血之功用，并具较强抗菌作用。陈皮理气健脾、白术燥湿补中、配以鸡内金健脾运止泻痢，能促使病犬食欲恢复，再佐以柴胡、薄荷、黄菊花辛凉解表、疏散风热，促使皮肤毛细血管扩张，迫使热邪从肌表而出，甘草协调诸药。
３．７犬细小病毒感染的治愈率
经过统计，犬细小病毒感染的治愈率在５０％￣９０％之间，进行积极有效治疗的患犬的存活率可能达到８０％～９５％，其治愈率同诊断水平、治疗方案选择、护理技术密切相关。
影响犬细小病毒感染的治愈率的主要因素有：
①免疫情况：完成免疫程序的犬只，不论采取的是主动免疫还是被动免疫，都能减轻发病症状。
②治疗时机：由于犬细小病毒感染发病急，症状严重，因此必须及早确诊及早治疗。耽误一天往往造成病情加重。
③执行医嘱：禁饮禁食，强制休息，保温措施以及康复调理是提高影响犬细小病毒感染的治愈率的几个关键；而隔离消毒，紧急免疫是防止影响犬细小病毒大规模流行的主要措施。
（作者单位：①南阳市卧龙区动物疫病预防控制中心；②舞钢市动物卫生监督所；③南阳市警犬基地；
④南阳农业学校；⑤南召县石门乡农业服务中心）
（责任编辑：徐玉生
）
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