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可见紫外光分光习题

可见紫外光分光习题
可见紫外光分光习题

紫外可见分光光度法

一、选择题

1. 下述物质中,能吸收可见光产生分子能级跌迁的是 C

A. KMnO 4溶液

B. 基态K 原子

C. EDTA 溶液

D. K 2Cr 2O 7溶液

2. 显色反应一般在水相中进行,若显色产物不溶于水,可采用什么方法测定其吸光度

A. 萃取分光光度法

B. 双波长分光光度法

C. 胶束增溶分光光度法

D. 示差分光光度法

3. 在原子吸收法中,采用标准加入法定量可消除

A. 物理干扰

B. 电离干扰

C. 背景干扰

D. 化学干扰

4. 分子吸收可见-紫外光后,可发生哪类分子能级跃迁 D

A. 转动能级跃迁

B. 振动能级跃迁

C. 电子能级跃迁

D. 以上都能发生

5. 影响最大吸收波长λmax 的因素有 A

A. 物质的结构

B. 溶液的浓度

C. 温度

D. 溶剂的极性

6. 摩尔吸收系数(ε)与吸收系数(a )的换算关系是 A

A. ε=a ·M

B. ε=a /M

C. ε=a ·M /1000

D. ε=a /M ×1000

(M 为被测物质的摩尔质量)

7. 在分光光度法中,光度误差系指 D

A. 吸光度误差±1%时引起的浓度误差?C

B. 吸光度误差±1%时引起的浓度相对误差C C ?

C. 百分透光率误差±1%引起的浓度误差?C

D. 百分透光率误差±1%引起的浓度相对误差C C ?

8. 在相同条件下,用普通光度法测得Cd 标准溶液和含Cd 样品溶液的吸光度分别为0.65和0.88。如果采用示差法测定,用Cd 标准溶液作参比,则试液的吸光度为

A. 0.23

B. 1.53

C. 0.53

D. 1.23

9. 按照光吸收定律,对透光率与浓度的关系,下述说法正确的是 D

A. 透光率与浓度成正比

B. 透光率与浓度成反比

C. 透光率与浓度的负对数成正比

D. 透光率负对数与浓度成正比

10. 下述哪种情况会引起工作曲线不通过原点 B

A. 比色皿厚度选择不当

B. 空白溶液选择不当

C. 标准溶液浓度不准

D. 显色剂本身有颜色

11. 双光束分光光度计与单光束分光光度计相比其优点是 C

A. 灵敏度高

B. 分析速度快

C. 选择性好

D. 准确度高

12. 影响摩尔吸收系数的因素有 AB

A. 物质本性

B. 入射光的波长

C. 液层厚度

D. 溶液浓度

13. 测定某铜矿样品中微量锰时,在酸性溶液中用KIO 4(无色)氧化Mn 2+到-4MnO

进行分光光度法测

定(铜盐溶液为蓝色),应选择的参比溶液是

A. 去离子水

B. KIO 4溶液

C. 加KIO 4的试样溶液

D. 不加KIO 4的试样溶液

14. 分子量为156的化合物,摩尔吸收系数为6.74×103 L ·cm -1·mol -1,要使之在1cm 吸收池中透光率为30%,溶液浓度(g/L )应为多少?

A. 0.012

B. 0.020

C. 0.023

D. 0.032

15. 用双波长分光光度法测定样品含量时,若根据等吸收点法确定波长λ1和λ2,则必须符合下述条件

A. 被测组分在λ1和λ2处吸光度相等

B. 被测组分在λ1和λ2处吸光度差值应足够大

C. 干扰组分在λ1和λ2处吸光度相等

D. 干扰组分在λ1和λ2处吸光度差值应足够大

16.用光度法测定样品时,若测得吸光度读数大于0.8,可减小光度误差

A. 将样品溶液稀释

B. 选用厚度更大的比色皿

C. 另选测量波长

D. 采用示差光度法

17.某物质经显色反应后,其摩尔吸收系数越大,说明此显色反应的 C

A. 选择性越高

B. 灵敏度越低

C. 灵敏度越高

D. 选择性越差

18.下述测定方法中,可用于多组分样品测定的是

A. 示差分光光度法

B. 胶束增溶分光光度法

C. 双波长分光光度法

D. 导数光谱法

19. 溶液吸光度

A. 和透光度成正比

B. 和光密度成正比

C. 和消光度成正比

D. 和透光度的对数成正比

E. 以上都不是

20. 测定高浓度溶液可采用

A. 高吸光度示差法

B. 低吸光度示差法

C. 最精确吸光度示差法

D. 标准曲线法

E. 直接比较法

21. 测定低浓度的溶液可采用 A

A. 标准曲线法

B. 直接比较法

C. 最精确吸光度示差法

D. 高吸光度示差法

E. 低吸光度示差法

22. 在比色分析中,选择滤光片的原则是采用 D

A. 溶液本色的滤光片

B. 溶液透过光颜色的滤光片

C. 溶液颜色互补色的滤光片

D. 溶液吸收光颜色互补色的滤光片

E. 以上都不是

23. 分子特定的跃迂能?E B

A. 与分子内部结构有关

B. 与入射光波长有关

C. 与原子结构有关

D. 与溶液的浓度有关

E. 与液层厚度有关

24. 只有待测化合物有色,其它试剂均无色时应做A

A. 样品空白

B. 试剂空白

C. 溶剂空白

D. 平行操作空白

E. 不显色空白

25. 除待测化合物有色外,显色剂也有色,并在测定波长下对光有吸收,这时应用B

A. 溶剂空白

B. 试剂空白

C. 样品空白

D. 平行操作空白

E. 褪色空白

26. 溶液呈现不同颜色是由于A

A. 物质对光的选择性吸收

B. 物质本分发出光

C. 物质对照射光的反射

D. 物质对光的衍射

E. 以上都不是

27. 溶液的吸光度D

A. 与入射光强度成正比

B. 与透过光强度成正比

C. 等于透过光的对数

D. 等于透过光的负对数

E. 以上都不对

28. 一种溶液的吸光度A

A. 与比色槽厚度成正比B与比色槽厚度成反比 C. 与溶液体积成正比

D. 与入射光强度成正比

E. 以上都不对

29.可见光区的波长范围是D

A. 0.1~10nm

B. 10~200nm

C. 200~400nm

D. 400~760nm

E. 760~1000nm

30. 721型分光光度计的检测器是B

A. 滤光片

B. 光电管

C. 光栅

D. 棱镜

E. 光电池

31.示差法与普通分光光度法的主要区别在于

A. 溶剂

B. 参比溶液

C. 测定步骤

D. 测量仪器

E. 标准溶液

32.分光光度法测定,要抵消分析过程中引入的干扰应选择C

A. 试剂空白

B. 溶剂空白

C. 试样空白

D. 平行操作空白

E. 任意一种

33.朗伯—比尔定律的数学表达式是A

A. A=KbC

B. A= bC

C. A=abC

D. A=KC

E. A=KN0L

34. 721型分光光度计属于D

A. 双光束分光光度计

B. 双波长分光光度计

C. 光电比色计

D. 单光束分光光度计

E. 以上都不是

35. 当溶液中只有待测化合物在测定波长下有吸收,试剂(包括显色剂)和样品中其他成分均无吸收时,

可选用哪种参比溶液 B

A. 试剂空白

B. 溶液空白

C. 样品空白

D. 平行操作空白

36. 吸光系数主要与哪种因素有关C

A. 溶液浓度

B. 液层厚度

C. 溶液溶剂

D. 溶液温度

37. 分光光度分析法测得吸光度为下列何值时,光度误差最小C

A. 0.1

B. 0.368

C. 0.434

D. 1.0

38. 吸收定律成立的条件是:(1)入色光为单色光;(2)光度误差最小;(3)吸光系数不变;(4)比色

皿厚度不变。 D

A. (1)+(2)

B. (1)+(3)

C. (2)+(4)

D. (1)+(4)

39. KMnO4水溶液的吸收光谱是

A. 原子吸收光谱

B. 分子吸收光谱

C. 分子转动吸收光谱

D. 原子振动吸收光谱

E. 以上都不是

40. 用光电比色计测定KMnO4溶液时,可采用

A. 红色滤光片

B. 兰色滤光片

C. 绿色滤光片

D. 紫红色滤光片

E. 橙色滤光片

41. 适于利用朗伯—比尔定律测定的溶液是C

A. 悬浊液

B. 乳浊液

C. 稀真溶液

D. 胶体溶液

E. 高深浓度溶液

42. 光的吸收定律适用于C

A. 白光

B. 日光

C. 单色光

D. 锐线光

E. 以上都不是

43. 分光光度法所利用的是E

A. 光的发射

B. 光的散射

C. 光的衍射

D. 光的折射

E. 光的吸收

44. 为减少测定误差,待测溶液的透光率应控制在

A. 2%~5%

B. 5%~10%

C. 10%~80%

D. 80%~90%

E. 90%~99%

45. 吸光度误差最小的吸光度范围是A

A. 0.01~0.1

B. 0.1~1.0

C. 1.0~2.0

D. 2.0~3.0

E. 以上都不是

46.显色剂量对吸光度的影响如下图

最适宜的显色剂量是C A

A. 0.5ml

B. 1ml

C. 2ml

D. 4ml 显色剂量(ml)

1 2 3 4

47.有一吸收曲线如图,通常采用的波长是 E

A. λ= 440nm A

B. λ= 480nm

C. λ= 520nm

D. λ= 540nm

E. λ= 560nm λ

440 460 480 500 520 540 560 nm

48.时间对吸光度影响如下图,最适宜的时间是

A. 立即测定 A

B. 5分钟后

C. 10分钟后

D. 20分钟后

0 5 10 15 20 t(分)

49. 751型分光光度计检测器A

A. 光电管

B. 光电倍增管

C. 光电池

D. 紫外光度检测器

E. 以上都不是

50. 721型分光光度计的单色器是A

A. 棱镜

B. 光栅

C. 滤光片

D. 凸透镜

51. 溶液酸度对吸光度的影响如图所示,适宜的pH是 C

A. pH=1

B. pH=2

C. pH=6

D. pH=10

E. pH=12

2 4 6 8 10 12 pH

52. 分子吸收谱线的形状取决于B

A. 入射光的强度

B. 溶液的浓度

C. 液层的厚度

D. 分子的内部结构

E. 以上都不是

53. 分光光度法中,单色光不强一般给吸光度的测定B

A. 正误差

B. 负误差

C. 偶然误差

D. 没有误差影响

54. 分光光度法中空白溶液选择不当,造成A

A. 正误差

B. 偶然误差

C. 系统误差

D. 负误差

55. 比色分析中,两比色杯不匹配带来的误差为C

A. 系统误差

B. 偶然误差

C. 过失误差

D. 以上均不是

56. 根据Lambert-Beer定律,当入射光强度一定时,透光度与浓度的关系是

A. 成正比

B. 成反比

C. 浓度与透光度对数成线性

D. 浓度与透光度对数成反比

57.某吸光物质(分子量=230),%1

E480nm为1.25×103,则其ε480nm为

1

cm

A. 54.3

B. 543

C. 2.88×104

D. 2.88×103

58. 某分光光度度计的透光率读数误差?T为1%,在下列哪测定值时其光度误差最小

A. T=38.6%

B. T=0.434

C. A=0.386

D. A=0.434

59. 物质分子吸收紫外一可见光后发生

A. 电子能级跃迁

B. 振动能级跃迁

C. 转动能级跃迁

D. 以上三种跃迁均能发生

60. 显色剂在待测物质吸收波长处略有吸收时,可选用哪种空白

A. 溶剂空白

B. 试剂空白

C. 样品空白

D. 褪色空白

61. 摩尔吸光系统ε的大小与什么有关

A. 待测物分子结构

B. 入射光波长

C. 溶剂的性质

D. 与A,B和C均有关

62. 如果某试液用72型分光光度计(3.0cm吸收池)测得的透光率为10%,那末改用哪种吸收池能使光度误差较大地减少

A. 0.50cm

B. 1.0cm

C.2.5cm

D. 5.0cm

63. Lambert-Beer定律适用于下列哪种光度法

A. 紫外一可见光

B. 红外光

C. 原子吸收

D. 以上三种方法都能适用

64. 一般玻璃吸收池可用于

A. 紫外光区

B. 可见光区

C. 紫外一可见光区

D. 以上三种都可用

65. 根据朗伯一比耳定律分光光度法的灵敏度决定于

A. ε·C

B. b ·C

C. ε·b

D. ε·b ·C

66. 如果吸光度A=1.0,那末相应的透光率T 为

A. 100%

B. 50%

C. 10%

D. 1%

67. 如果透光率为10%,那末相应的吸光度A 为

A. 0.10

B. 0.20

C.1.0

D. 2.0

68. 在100ml 样品液中加入50ml 浓度为30ppm 的Pb 2+标准液,吸光度由0.26增加为0.52,那么样品液

中含Pb 2+

A. 60μg/ml

B. 30μg/ml

C. 7.5μg/ml

D. 3.8μg/ml

69. 用光电比色计测定CuSO 4溶液时,应选用的滤光片为

A. 红色

B. 黄色

C. 兰色

D. 绿色

70. 双光束分光光度计主要可消除

A. 比色皿不配对造成的误差

B. 试剂不纯造成的误差

C. 入射光不纯造成的误差

D. 光源强度不稳定造成的误差

71. 可见紫外分光光度法中,工作曲线斜率与什么有关

A. 物质的吸光系数

B. 吸收池光学性能的一致性

C. 空白溶液的选择

D. 标准液的浓度

72. 当采用分光光度法进行定量分析时,如果共存离子对测定无干扰,而试剂和显色剂带色,则选用 空以减小分析误差

A. 试剂

B. 溶剂

C. 试样

D. 平行操作

73. 采用分光光度法进行定量分析时,如果共存离子、试剂和显色剂均为无吸收,则选用 空白

A. 试剂

B. 溶剂

C. 试样

D. 平行操作

74. Lambert-Beer 定律透用下列哪种溶液

A. 液态

B. 气态

C. 固态

D. 以上三种溶液都能适用

75. 双波长分光光度法标准曲线的纵座标是

A. ?A

B. A

C. lg T

D. –lg T

76. 在分光光度分析中,如果只有试样基体有色,显色剂也不与样品基体显色,这时应选用哪种空白

A. 溶剂

B. 试样

C. 试剂

D. 平行操作

77. 一般比色法中,将比色液倒入比色杯时,应做到

A. 盛满杯子

B. 倒入杯高21处

C. 倒入杯高41处

D. 倒入杯高3

2处 78. 符合比耳定律的有色溶液稀释时,其最大吸收峰的波长位置

A. 向长波长方向移动

B. 向短波长方向移动

C. 不移动,但峰高值增大

D. 不移动,但峰高值降低

E. 不移动,峰高值不变

79. 光度分析法测得吸光度为下列何值时,光度误差最小的是

A. 0.368

B. 0.1~1.0

C. 0.434

D.0.2~0.7

E. 0.500

80. 可见光的波长范围是

A. 400~760nm

B. 500~600nm

C. 650~760nm

D. 200~800nm

E. 200~400nm

81. Lambert-Beer 定律的数学表达式之一是

A. T =I /I 0

B. A =lg I 0/I

C. A =-lg T

D. T =10-ab C

E. A =ab C

82. 朗伯—比尔定律只适用下列哪种范围

A. 白光、均匀、非散射、低浓度溶液

B. 单色光、非均匀、散射、低浓度溶液

C. 单色光、均匀、非散射、低浓度溶液

D. 单色光、均匀、非散射、高浓度溶液

E. 白光、均匀、非散射、任意浓度溶液

83. 今有两种均符合朗伯-比尔定律的不同有色溶液,测定时,若比色皿厚度、入射光波长和强度及溶液浓度均相等,试问以下几种情况何者正确

A. 透光率相等

B. 透射光强度相等

C. 吸光度相等

D. 以上说法均错误

E. 吸收光强度相等

84. 某物质的摩尔吸光系数ε大,表明

A. 该物质溶液的浓度大

B. 光通过该物质的液层厚度大

C. 该物质对该波长的光吸收能力强

D. 入射光的强度大

E. 该物质透射光强度大

85. 一有色溶液,测得其百分透光度T%=X,如果将此溶液的浓度增大一倍,其它条件不变,以下说法正确的是

A. 吸光度值A将增大一倍

B. 百分透光度T%将增大一倍

C. 百分透光度T%将减小一倍

D. 吸光度值A将减小一倍

86. 以下说法中,哪种不属于影响朗伯-比尔定律的因素

A. 非单色光的影响

B. 溶液的浓度很高

C. 溶液为胶体溶液

D. 单色光

87. 高浓度示差法和一般分光光度法不同点在于参比溶液不同,前者的参比溶液为

A. 待测溶液

B. 试剂空白

C. 比待测溶液浓度稍高的标准溶液

D. 比待测溶液浓度稍低的标准溶液

88.以下有关示差法的说法中,不正确的是

A. 高浓度示差法是选用比待测溶液浓度稍低的标准溶液作参比液,调A为0

B. 低浓度示差法是选用比待测溶液浓度稍高的标准溶液作参比液,调T%为100

C. 示差法实质就是扩展了百分透光度读数标尺

D. 示差法可以提高分析的灵敏度及准确度。

89. 一有色溶液,测得其百分透光度T%=X,吸光度A=y。如果将此溶液浓度增大一倍,其它条件不变,则以下说法正确的是

A. 吸光度值A=2y

B. 百分透光度T%=2x

C. 百分透光度T%=x/2

D. 吸光度值A=y/2

90. 在吸收光谱曲线中,能用来定性的参数是

A. 最大吸收峰的峰面积

B. 最大吸收峰波长 max

C. 最大吸收峰处的摩尔吸光系数

D. B和C

91. 使用紫外可见分光光度计在580nm波长下测定某物质含量时,应选用

A. 氢灯,石英吸收池

B. 钨灯,玻璃吸收池

C. 氢灯,玻璃吸收池

D. 钨灯,石英吸收池

92. 吸光系数的大小取决于

A. 溶液的质量

B. 溶液的物质的量浓度

C. 物质的本性和光的波长

D. 物质的吸光度大小

93. 摩尔吸光系数的大小与

A. 入射光波长无关

B. 吸光物质的性质无关

C. 溶液的温度无关

D. 溶液中吸光物质的浓度无关

94. 利用分光光度法测定某一物质,若除待测组分外,显色剂和其它试剂在测定条件下也有吸收时,应选择的空白溶液为

A. 试样空白

B. 试剂空白

C. 溶剂空白

D. 蒸馏水

95. 为了抵消在整个操作过程中由于试剂、器皿、水和空气等引入的待测组分和干扰杂质对分析测定的影响,应选用

A. 试样空白

B. 试剂空白

C. 溶剂空白

D. 平行操作空白

96. 波长200~400nm的电磁波称为

A. 红外光

B. 可见光

C. 紫外光

D. 无线电波

97. 物质的吸收光谱是由于分子的能级跃迁而产生,可见紫外吸收光谱产生于

A. 分子转动能级跃迁

B. 原子振动能级跃迁

C. 电子能级跃迁

D. 无法确定

98. 紫外—可见分光光度法主要涉及的光谱类型是

A. 分子的带状光谱

B. 分子的电子光谱

C. 分子的振动光谱

D. 分子的转动光谱

99. 紫外—可见吸收光谱的产生是由于

A. 物质分子内电子由基态跃迁到激发态产生的

B. 物质分子内电子由激发态回到基态产生的

C. 基态原子中电子由基态跃迁到激发态产生的

D. 原子中电子由激发态回到基态产生的100. 今有两种均符合郎伯-比尔定律的不同有色溶液,测定时若比色皿厚度,入射光波长和强度及溶液浓均相等,试问以下情况何者正确?

A. 透光率相等

B. 透射光强度相等

C. 吸光度相等

D. 以上说法均错

101. Lambert-Beer定律的数学表达式之一是

A. T=I/I0

B. A=lg I/I0

C. A=-lg T

D. T=10-abC

102. 在A=abC中,若光程以cm为单位,浓度以g/L为单位,则常数a称:

A. 百分吸光系数

B. 摩尔吸光系数

C. 吸光系数

D. 单位吸光度

103. 朗伯-比尔定律只适用于下列哪种范围

A. 白光、均匀、非散射、低浓度溶液

B. 单色光、非均匀、散射、低浓度溶液

C. 单色光、均匀、非散射、低浓度溶液

D. 单色光、均匀、非散射、高浓度溶液

104. 光度分析法测得吸光度为下列何值时,光度误差最少

A. 0.368

B. 0.1~1.0

C. 0.434

D. 0.2~0.7

105. 如果只有样品基体对测定波长的单色光有干扰吸收,应选来抵消影响比色分析的因素

A. 平行操作空白

B. 样品空白

C. 试剂空白

D. 溶剂空白

106. 波长为400~760nm范围的光谱名称

A. Far IR spectrum

B. Visible spectrum

C. Near UV spectrum

D. Vaccum UV spectrum

E.Near IR spectrum

107. 光具有二象性,其各参量的关系的数学表达式为

A. C=λ/T

B. ν=C/λ

C. E=hν

D. E=h·C/λ

108. 双光束分光光度计可消除下列哪种影响

A. 吸收池的透光性能的差异

B. 光源发射强度的波动

C. 非单色光引起的偏离

D. 光度误差

二、填空题

1.测定某溶液吸光度时,若溶液中存在固体悬浮颗粒,则测得的吸光度比实际吸光度。

2. 双光束分光光度计与单光束分光光度计相比,其优点是。

3.有色溶液的液层厚度越大,则透光率;而吸光度。

4.用2㎝比色皿测得某溶液的吸光度为1.0,欲减小光度误差,可采用以下两种措施:(1);(2)。

5. 光电倍增管的作用是,光电倍增管的放大倍数,取决于。

6. 某溶液透光率为T,若将其稀释一倍,在相同条件下测定,其透光率为。

7. 在分光光度计中常用的色散元件有和。

8. 采用1㎝比色皿,测得某溶液的透光率为80%。若改用4㎝比色皿,在相同波长下测定,其透光率为。

9.有一标准Ca2+溶液,浓度为6mg/L显色后,用1㎝比色皿测得其吸光度为0.450,则显色产物的吸光系数为。样品在同样条件下显色后,测得其吸光度为0.610,则样品中Ca2+含量为mg/L。

10.当双波长分光光度计以双波长单光束方式工作时,测得的吸光度读数为。

11.原子吸收分光光度法是基于中对光的吸收,属光谱;可见紫外分光光度法是基于中的对光的吸收,属光谱。

12.在紫外—可见分光光度法中,选择测量波长的原则是和。

13. 在紫外光谱区测量吸光度时,必须使用石英比色皿,是因为。

14. Lambert-Beer定律的适用范围是(1);(2)。

15. 光的吸收定律成立的条件是、。

16. 紫外可见光光度法中测量波长的选择原则是,这样才能使,测定时溶液的吸光度一般控制在以内,目的是。

17. 光光度法测定时工作波长的选择原则是、。

18. 分光光度计由、、、、组成。

19. 光的吸收定律适用范围是。

20. 吸光系数和无关,其大小取决于和。

21. 光的吸收定律是,其数学表达式为。

22. 某物质溶液在260nm有最大吸收峰,测定时应采用型分光光度计,使用光源,吸收池,光电管。

23. 影响显色反应的主要因素有。

24. 分光光度计一般由组成。

25. 在分类光度法中,常用的空白溶液有。

26. 根据吸收定律,当被测物质的量一定,被测量的体积越小,光程越长,得到的吸光度。所以,比色皿的光程/体积比越大越好。

27. 在紫外可见分光光度法计算中,摩尔吸光系数ε和和百分吸光系数%1

E之间的关系是。

1

cm

28. 分光光度法中,为减小测量的相对误差,通常将吸光度控制在范围内。

29. 722型分光光度计的光源是 ,测量波长范围为 ;752型分光光度计的光源是 ,测量的波长范围为 。

30. 分光光度法是基于 和 ,对物质进行定性和定量的分析方法。普通分光光度法是以 作参比,浓溶液示差分光光度法,是以 作参比;稀溶液分光光度法是以 作参比。

31. 在分光光度法中,对单一物质的定量常用方法有 , 。

32. 在可见分光光度法中,消除共存离子常用方法有(至少答二种)① ;② 。

33. 影响可见分光光度法的因素主要有: 、 、 、 等。

34. 只有在 和 和条件下,光的吸收才能严格遵守Lambert-Beer 定律。

35. 摩尔吸光系数ε与吸光系数a 的关系是ε= 。

36. 百分吸光系数与摩尔吸光系数两者关系是λ1%1cm

E = 。 37. 国产最常用的红敏光电管适用波长为 nm 。

38. 国产最常用的紫敏光电管适用波长为 nm 。

39. 在可见区及近紫外和红外光谱区,常用的光源是 。

40. 光电比色法中选择滤光片的原则是根据光的 关系。

41. 双波长分光光度法的定量公式?A= 。

42. 在可见分光光度法中,选择显色剂的要求是:

① ;

② ;

③ 。

43. 萃取分光光度法是提高吸光度法灵敏度最广用的方法,因为萃取不仅对吸光物质有 ,而且还可以提高吸光物质的 。

44. 在可见分光光度法中,显色反应时加入显色剂的量,必须是 、 、 的。

45. 显色反应多为 反应和 反应。

46. 将一符合朗伯-比耳定律的有色溶液稀释时,其最大吸收峰波长的位置将会 ,且其摩尔吸光系数将 。

47. 摩尔吸光系数ε的单位是 ,吸光系数a 的单位是 。

48. 根据光的吸收定律,当b 一定时,A 与C 呈 关系,但实验表明,当溶液浓度C 时,A -C 标准曲线则发生弯曲,为减小误差, 定量分析时 应在标准曲线的 范围内进行。

49. 一有色溶液,置于0.5cm 的吸收池中,测得其T %=10.0,如果换成1.0cm 的吸收池,其它条件不变,则这时的T %= ,A = 。

50. 某物质的最大吸收波长为248nm ,用751G 型分光光度计测定时,应选用 吸收池, 光电管。

51. 分光光度法测定时,主要选择的测量条件为。

52. 电磁辐射是一种。

53. 电磁波谱是。

54. 在紫外、可见、荧光和原子吸收分光光度计中,常用为检测器,而红外分光光度计则常用为检测器。

55. 紫外可见分光光度分析法中,入射光选择的原则是,吸光度通常控制

在。

56. 在紫外可见光谱中,电子跃迁类型主要有。

57. 分光光度法的误差来源主要有、、及。

三、名词解释

1. 电磁辐射

2. 吸收光谱

3. 吸光系数

4. 空白溶液

5. 单色光

6.溶剂空白(分光光度法)

7.样品空白(分光光度法)

8.光度误差

9. 试剂空白(分光光度法)

10. 吸光度

11. 单色器

12. 透光度

13. 百分吸光系数

14. 摩尔吸光系数

15. 比吸光系数

16. 色散率

17. 最大吸收波长

18. 吸收曲线

19. 注明吸光定律A=-lg T=εbC中各种符合所代表的意义

20. 紫外一可见光谱—吸收曲线

四、是非题

1. 有色溶液的液层厚度越宽,其透光率越小。

2. 分子能级跃迁的能量差愈大,其吸收光子的波长就愈长。

3. 摩尔吸收系数与溶液浓度、液层厚度无关,而与入射光波长、溶剂性质和温度有关。

4.如果用1cm比色皿测得某溶液的T%=10,为了减小光度误差,最方便的办法是改用3cm比色皿。

5. 高锰酸钾溶液呈紫红色是因为其吸收了可见光中的紫色光。

6. 光度法测定要求吸光度在0.2~0.8之间,因为在此范围内测定灵敏度高。

7. 分子吸收可见光后,只能产生电子能级的跃迁。

8. 有机化合物的电子跃迁类型中σ→σ*跃迁所需能量最大,所吸收辐射的波长最长。

9. 紫外可见吸收光谱是由于分子的转动能级跃迁而产生的。

10. 在分光光度法中,当显色剂有色干扰分析时,一般常采用溶剂空白。

11. 朗伯—比耳定律是在一定条件下,溶液的吸光度与溶液的浓度成正比。

12. 在分光光度法中,入射光波长不一定与最大吸收波长一致。

13. 用可见分光光度法测定KMnO4溶液的含量通常选用紫红色的滤光片。

14. 物质溶液的吸光系数大小和溶剂及物质浓度有关。

15. 某物质的摩尔吸光系数ε很大,则表明该物质溶液的浓度大。

16. 某物质的摩尔吸光系数ε很大,则测定该物质的灵敏度高。

17. 在一般的分光光度测定中,光度误差(被测物质浓度的相对误差?C/C)大小与透光度的绝对误差(?T)成正比。

18. 同样质量的两元素用二硫腙显色后配成体积相同的溶液,用2cm的吸收池,在同样的入射光波长下测定,所得吸光度应相等。

19. 紫外—可见分光光度计从光源发出的光经单色器分光,由出射狭缝投射到溶液的光,即为理论上要求的单色光。

20. 双光束分光光度计采用两个单色器,经由斩光器控制交替地通过试样溶液。

21. 光子的能量与频率成反比,与波长成正比。

22. 分光光度法所用检测器光电倍增管分为紫敏光电管和红敏光电管两种。

23. 紫外可见分光光度法和荧光分析法的定量依据是郎伯-比尔定律。

24. 在稀释溶液时,刻度吸管和容量瓶除了用蒸馏水洗净外,还要用欲取溶液洗两到三次。

25. 吸光系数的大小只取决于吸光物质与所用溶剂的性质。

26. 紫外吸收光谱与荧光光谱同为锐线光谱。

27. 如果只有样品基体对波长的单色光有干扰吸收,可选用样品空白来抵消其引起的干扰。

28. 光度误差单位吸光度引起的浓度相对误差。

五、简答题

1. 空白测定值的大小与哪些因素有关?说出三种常用的空白溶液。

2. 简述分光光度法所用空白溶液极其使用范围。

3.解释分子的紫外—可见光谱为何呈带状光谱?

4. 为减小光度误差,吸光度的读数范围应控制在0.2~0.8范围内.若吸光度读数不在此范围,可采用哪些方法进行调整?

5. 在你学过的仪器分析方法中找出两种可测定血清钙的方法。说出方法的名称、仪器名称及必需的条件。

6.影响显色反应的条件有哪些?

7.胶束增溶分光光度法能提高测定灵敏度的原因是什么?

8.偏离光吸收定律的因素有哪些?

9.分子吸收光谱为何呈带状光谱,而原子吸收光谱呈线状光谱。

10. 试述测定波长选择λmax的原因。

11.紫外—可见分光光度法对显色反应有哪些基本要求?

12. 试述空白溶液在可见紫外分光光度法和荧光分析法中的使用方法和作用各是什么?

13. 什么是朗伯—比耳定律?写出其数学表达式及适用范围。

14. 在分光光度法中,为了减少测量的相对误差,通常将吸光度控制在什么范围?如何控制?

15. 分光光度法与显色有关的影响因素有哪几种?何为光度误差?

16. 在可见分光光度法中,绘制标准曲线应注意什么?

17. 写出朗伯—比尔定律的公式,ε是什么?ε的高低反映了什么?

18. 试述紫外可见分光光度计的主要部件及其作用。

19. 画出某物质溶液的吸收曲线,并说明其实际意义作用。试述分光光度计的仪器、结构部件及作用。

20. 什么是吸光系数?它受哪些因素的影响?如何表示?

21. 什么是光度误差?在分光光度法中如何减少测量的光度误差?

22. 示差法为什么可以提高分光光度法测定的准确度。

23. 影响朗伯-比耳定律的主要因素有哪些?

24. 可见分光光度计的性能测试包含哪些内容?

25. 在邻菲罗啉分光光度法测定水中铁的实验中,你进行了哪些实验条件的选择?绘制了哪些曲线?

26. 简述空白溶液的种类和作用。绘制标准曲线时应注意哪几点?

27. 比色分析中,若样品的吸光度值较小时(A<0.1=应采取什么方法?

28. 光度分析中提高方法灵敏度和准确度的方法有哪些?

对于显色反应

(待测组分)(显色剂)(有色化合物)

简述如何选择R(显色剂)的浓度?

在紫外可见分光光度法中,提高分析灵敏度和准确度的方法主要有哪几种?

六、计算题

1. 0.100mg Fe3+离子在酸性溶液中用KSCN显色后稀释至500ml,在波长为480nm处用1cm比色皿测得吸光度为0.240,计算摩尔吸收系数及吸光系数(Fe的原子量为56.85)。

2.将已知浓度为2.00mg/L的蛋白质溶液用碱性硫酸铜溶液显色后,在540nm波长下测得其吸光度为0.300。另取样品溶液同样处理后,在同样条件下测得其T%为20.0,求样品中蛋白质浓度。

3.维生素D2的摩尔吸收系数ε264nm=18200,如果要控制T%在20~65范围内,应使维生素D2溶液的浓度在什么范围内?(用2.0cm比色皿测定)

4. 8.57克/升某溶液于525nm波长下,以蒸馏水为参比,测得其T%=21.6,然后将该溶液调节T%为100,接着测量另一高浓度的同种溶液,测得其T%=2

5.7,求高浓度溶液中样品的浓度。

5. 将精制的纯品氯霉素(相对分子质量为323.15)配成0.0200克/升的溶液,用1.0厘米的吸收池,在λmax 为278nm下测得溶液的透光度为24.3%,试求氯霉素的摩尔吸光系数ε278。

6.有一含A和B两化合物的混合液,已知A在282nm和238nm处的百分吸光系数%1

E分别为720和

cm

1

270;而B在上述两波长处吸光度相等,将此混合液置于1.0cm吸收池中,测得282nm和238nm处的吸光度分别为0.442和0.278,求混合液中A的浓度(mg/L)。

7. 利用分光光度法测定血清中镁的含量。取浓度为10.0mmol/L的镁标准溶液10.0μl与3.0ml显色剂进行显色后,测得吸光度为0.32,另取待测血清50.0μl与3.0ml显色剂显色后,测得吸光度为0.47,试计算血清中镁的含量。

8.称取纯铁0.5000g溶解后定容至1升,作为铁标准溶液。取其10.00ml稀释至100.0ml后,取5.00ml 显色并定容至50.0ml,测得吸光度为0.230。称取试样1.50g,溶解并定容至250ml。取5.00ml进行显色后,在相同条件下,测得吸光度为0.200,求试样中铁的含量。

9.以邻二氮菲光度法测定铁的含量,称取试样0.500g,经处理后最后定容至50.0ml,在波长510nm处用1.0cm比色皿测得吸光度为0.430,求试样中铁的百分含量(ε510=1.1×104 Fe的原子量:56.85)

10. 已知维生素B 12在361nm 处的吸收系数为20.7L/g ·cm 。今有两种浓度分别为20mg/L 和10mg/L 的维生素B 12标准溶液,试通过计算说明,测量哪个标准溶液时,光度误差较小?(比色皿厚度为1cm ,?T =1%)

11. 将某化合物配成0.0200g/L 的溶液,在最大吸收波长处用1.0cm 比色皿测得T %=24.04。今欲准确配制1升该化合物的溶液,使稀释200倍后用1.0cm 比色皿测得的吸光度为0.30,应称取该化合物多少克?

12. 物质A (C 20H 28O )在四氯化碳中的摩尔吸光系数为120000ε480nm λ==,将含有物质A 的四氯化

碳溶液放入1cm 比色杯中,在480nm 波长下测得的吸光度为1.20,试求该样品溶液1ml 中A 的含量。 (原子量 O :16, C :12, H :1)

13. 取10ml 尿样,用双硫腙一氯仿萃取分光光度直接比较法测量其中的铅含量,设测得标准液(1μg/10ml )A =0.511,试样A =0.451,平行操作空白A =0.011,求该尿中的铅含量(mg/L )

14. 已知纯胡萝卜素(分子量为536)的氯仿溶液ε463nm =1.18?105,现将纯胡萝卜素氯仿液置1cm 吸收池中于463nm 波长下测得A =0.412,求该试液中胡萝卜素的含量(μg/ml )。

15. 某试液用3cm 吸收池测量时,T =10%,若用1cm 或2cm 的吸收池测量,求A 1cm 及A 2cm 各为多少?

16. KMnO 4(分子量为158)溶液的ε525nm =2.5?103,现用5cm 吸收池测得某KMnO 4溶液的A =0.474,求该KMnO 4液的百分含量。

17. 已知硫氰酸铁水溶液的ε480nm =2.4?104,设仪器的可信测定值为A =0.01~0.80,求标当采用1cm 吸收池时的可测浓度范围。

18. 向50ml 水样中50ml 浓度为0.10μg/ml 的Cd 2+标准液,用同法处理后,吸光度由0.300增加到0.450,求该水样中Cd 2+的含量(mg/L)。

19. 在100ml 样品中加入50ml 浓度为30μg/ml 的Pb 2+标准液,用同法测得吸光度由0.260增加至0.520,求样品中含Pb 2+的量(μg/ml)

20. 设某分光光度计在读数A =0.180~0.700时光度误差较小。今在该计上测量维素D (分子量397)乙醇溶液(ε264nm =1.82?104),试预估维生素D 乙醇液的光度误差较小的百分浓度范围。吸收他为1cm 。

21. 精确称取维生素C 片的粉碎混合物0.1000g ,用适当酸度的硫酸溶液溶解并定容为100ml ,再吸此该液1ml 并用同一硫酸液稀释成100ml ,然后用1cm 吸收池于λ245nm 处测得A =0.551。已知维生素C 的1%1cm E 245nm=560。求维生素片中维生素C 的百分含量。

22. 某一酸性溶液含Fe 3+

0.088mg , 用硫氰酸钾试剂显色后, 用水稀释至50ml, 然后在480nm 波长下, 用1cm 吸收池, 以蒸馏水为空白, 测得吸光度为0.22, 求在此波长下, 硫氰酸铁的百分吸光系数?

23. 有一浓度为2.0mg/L 的双硫腙(分子量为256)氯仿溶液, 在610nm 波长下, 用2cm 吸收池测得其吸光度值为0.680, 求在此波长下双硫腙氯仿溶液的摩尔吸光系数? 如用0.5cm 吸收池, 于相同波长下, 测得吸光度为0.170, 此时摩尔吸光系数又是多少?

24. 有一化合物的分子量是125, 摩尔吸光系数为2.5×105 ,今欲准确配制1升该化合物的溶液, 使其在稀释200倍后, 放在1cm 厚的比色皿中测得的吸光度为0.60, 应称取该化合物若干克?

25. 称取含V itC 样品0.05g, 溶于100ml 的0.01mol/L 硫酸溶液中, 再量取此溶液2ml, 准确稀释至100ml, 取此溶液在1cm 厚的石英池中, 用245nm 波长测定其吸光度为0.551, 求样品中V itC 的百分含量? (1%1cm E 245nm=560)

26. 取适量V it D(C 28H 43OH)溶于乙醇中, 在264nm 处测得其摩尔吸光系数为1.82×104, 并在一个很宽的浓度范围内服从Labert —Beer 定律, 求(1)百分吸光系数?(2)若要求测量的吸光度限制在0.4~0.6范围内, 那么分析浓度范围是多少?

27. 称取0.500g 钢样, 溶于酸后, 使其中的锰氧化成高锰酸根, 在容量瓶中溶液稀释至100ml ,稀释后的溶液用2.0cm 厚度的比测皿, 在波长520nm 处测得吸光度为0.620, 高锰酸根离子在波长520nm 处的摩尔吸光系数为2235, 计算钢样中锰的百分含量?

28. 在适量的维生素D(分子式:C28H43OH,摩尔质量:396)溶于乙醇溶液,在264nm处测得摩尔吸光系数ε=1.82×104,并在一个很宽的范围内服从Lambert—Beer定律,试计算:(1)该溶液的吸光系数a;(2)若要求测量时吸光度控制在0.2~0.8的范围内,其分析浓度范围应为多少(用mol/L表示)。给定用1cm的石英比色皿。

29. 将每升含Fe3+500μg的溶液,与邻二氮菲反应,生成橙红色配合物,在510nm波长,吸收池厚度为2cm时,测得吸光度为0.380,计算该配合物的摩尔吸光系数。

30. 已知某化合物的分子式为C11H12O,它的紫外光谱中可观察到两个吸收峰,取该化合物1.4mg溶解在10.0ml的环己烷中,稀释10倍后用0.5cm 吸收池测得λmax 为240nm时吸光度为0.7,λmax为285nm 时吸光度为0.15,求两处λmax的ε。

30. 某显色配合物,相对分子质量为125,在波长480nm时,ε=2.5×103,一样品含该物质15%,溶解后稀释至10.0ml,用1cm比色皿在分光光度计上测得T%= 50.1,问当时称取的该样品为多少克?

721可见分光光度计使用说明书

721可见分光光度计使用说明书 目次 1 仪器的主要用途..............................................(1) 2 仪器的工作环境..............................................(1) 3 仪器的主要技术指标及规格....................................(1) 4 仪器的工作原理..............................................(1) 5 仪器的光学系统..............................................(2) 6 仪器的电子系统..............................................(3)6.1 放大器线路简介...............................................(3)6.2 放大器稳压电源线路简介........................................(4) 6.3 钨灯稳压电源线路简介..........................................(4) 7 仪器的结构..................................................(9) 8 仪器的安装使用与维护.......................................(14) 9 仪器的调校与故障修理......................................(15)9.1 仪器的调校.................................................(15) 9.2 仪器使用问答................................................(17) 10 仪器的成套性...............................................(23) 11 仪器的保管及免费修理期限...................................(23) 产品执行标准的编号:Q/YXLZ41-2002 I

原子吸收分光光度计使用说明书

GGX-5型火焰原子吸收分光光度计使用说明书 1 GGX-5火焰原子吸收分光光度计的使用 1.1 仪器特点 原子吸收是指基态自由原子对光辐射能的共振吸收。通过测量自由原子对光辐射能的吸收程度而推断出样品中的某一元素的量大小,根据这一原理研制的分析测试仪器称原子吸收分光光度计。仪器主要由原子化系统、光学系统、信号检测放大输出系统及附属设备组成。下面先将仪器部分结构的性能和特点概述一下: (1) 元素灯, 光源稳定, 寿命较长,我站较常使用的铜、铅、镉、锰、铁、镍等元素灯, 使用五至六年后才更换(具体点灯时间没有统计) 。在使用期内光源是十分稳定的,当一旦出现光能量下降得利害且光源不稳时,需反接处理或更换元素灯。 (2) 原子化系统, 现在很多生产厂家采用石英玻璃喷雾器, 玻璃喷雾器具有耐腐蚀、干扰小的优点, 出厂前已将玻璃喷雾器出口的碰撞球的位置调节固定好, 无须使用者再调节球的位置。同时配有各种口径的毛细吸液管, 使用者可根据需要选择提升量大小, 以调节最灵敏、最稳定的雾化率达到理想的检测效果。(3) GGX-5型, 由于生产厂吸取了国外同行的先进电子线路和技术, 仪器的数据输出相当稳定, 工作曲线线性、数据重复性和准确性等技术指标都能达到比较理想的水平, 部分使用同型号仪器的用户亦有同感。 1.2 原子吸收分光光度计的开关机原则“先开后关, 后开先关”原则。如开机程序“电源→A 键→B 键→C 键”, 关机时必须是“C 键→B 键→A 键→电源”。气路必须先开空气压缩机, 待一定空气压力和流量后, 才能开乙炔气点火, 关机时必须关闭(切断) 乙炔气源后, 才关空气压缩机。如果开关机程序操作混乱, 极容易损伤或烧毁电气设备, 甚至发生严重安全事故。GGX-5型采用了燃气安全阀系统, 该系统只有当仪器主机电源开通后, 空气压力和流量达到一定的条件下, 燃气阀门才能撞开, 这种装备为安全使用仪器加了一道非常实用有效的防线。开关机除了要严格按程序外, 还必须严格地、准确地将各功能键调到应处的位置。要

752紫外可见分光光度计使用方法解析

752紫外可见分光光度计 一、仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的吸收效应,物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理—一比耳定律。 τ=I/Io log I/Io=KCL A= KCL 从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时.透过的光是根据溶液的浓度而变化的,752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。 二、仪器的安装、使用、安装 1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查,电源电压是否正常,接地线是否牢固可靠,在得到确认后方和接通电源使用。 2 仪器经过运输和搬运等原因,会影响波长准确度,应进行仪器调校后使用。 使用:仪器使用前需开机预热30min。 本仪器键盘共有4个键,分别为; 1 A /τ/C/F 1SD 2 ▽/0% 3?/100% 4 A /τ/C/F键:每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。 A——吸光度(Absorbance) T——透射比(Trans) C——浓度(conc) F——斜率(Factor) (2)F值通过按键输入(后面介绍如何设置) 5SD键:该键具有2个功能 a)用于RS232串行口和计算机传输数据(单向传输数据,仪器发向计算机)。 b)当处于F状态时,具有确认的功能,即确认当前的F值,并自动转到C,计算当前的C 值(C=F*A)。 6 ▽/0%键:该键具有2个功能 a)调零;只有在τ状态时有效,打开样品室盖,按键后应显示0.000。 b)下降键:只有在F状态时有效,按本键F值会自动减1,如果按住本键不放,目动减1会加快速度;如果F值为0后,再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。 7 ?/100%键;该键具有2个功能 a)只有在A、τ状态时有效,关闭样品室盖,按键后应显示0.000、100.0。 b)上升键:只有在F状态时有效,按本键F值会自动加1,如果按住本键不放,自动加1会加快速度,如果F值为1999后,再按键它会自动变为0,再往键开始自动加l。 例如:设置斜率为1500。 方法一 T)按A/τ/C/F键切换到F状态。 b)如果当前F值为1000,则按?/100%键,直到F值为1500。 C)再按SD键,表示当前的F值为1500,然后自动回到C状态,假如所测的A值为0.234,则此时显示C值为0351。

721可见分光光度计使用方法

721可见分光光度计使用方法 一、开机预热 仪器在使用前应预热30分钟。 二、波长调整 转动波长旋钮,并观察波长显示窗,调整至需要的测试波长。 注意事项:转动测试波长调100%T/0A后,以稳定5分钟后进行测试为好(符合行业标准及质监局检定规程要求)。 三、设置测试模式 按动“功能键”,便可切换测试模式。相应的测试模式循环如下:*开机默认的测试方式为吸光度方式 四、结果打印(721型无此功能) 在得到测试结果后按动“打印”键便可打印结果(需外接标准串行打印机)。 五、光源切换(适用于752、754、755B型) 因为仪器在紫外区和可见区使用不同的光源,所以需要波动光源切换杆来手动的切换光源。建议的光源切换波长为340nm,即200nm-339nm适应氘灯,340nm-1000nm使用卤素灯。 注意事项:如果光源选择不正确,或光源切换杆不到位,将直接影响仪器的稳定性。特殊测试要求除外。 六、比色皿配对性 仪器所附的比色皿是经过配对测试的,未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。适应比色皿一套两只,供紫外光谱区使用,置入样品架时,两只石英比色皿上标记Q或箭头方向要一致。玻璃比色皿一套四只,供可见光谱区使用。 石英比色皿和玻璃比色皿不能混用,更不能和其他不经配对的比色皿混用。用手拿比色皿应握比色皿的磨砂表面,不应该接触比色皿的头光面,即透光面上不能有手印或溶液痕迹,待测溶液中不能有气泡、悬浮物,否则也将影响样品的测试精度。比色皿在使用完毕后应立即清洗干净。 七、调T零(0%T) 1.在T模式时,将遮光体置入样品架(如图七所示),合上样品室盖,并拉动样品架拉杆使其进入光路。然后按动“调0%T”键,显示器上显示“00.0”或“-00.0”,便完成调T零,完成调T零后,取出遮光体。 注意事项:1.测试模式应在透射比(T)模式; 2.如果未置入遮光体合上样品室盖,并使其进入光路便无法完成调T零;

紫外-可见光分光光度计

紫外-可见光分光光度法 一、技术原理 紫外-可见分光光度法是在190?800mn波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmix。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。 二、浓度测定基本原理 朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法的基本原理。当一束单色光通过一均匀的溶液时,一部分被吸收,一部分透过,设入射光的强度为I0,透射光强度为I,则I/I0为透光度,用T表示。 当溶液的液层厚度不变时,溶液的浓度越大,对光的吸收程度越大,则透光度越小。 即:-lgT=a1*c(式中a1为常数,c为浓度) 当溶液浓度不变时,溶液的液层厚度越大,对光的吸收程度越大,则透光度越小。

即:- lgT=a2*b(b为液层厚度) 将以上两式合并可用下式表示:lgT=a*b*c 研究表明:溶液对光的吸收程度即吸光度(A)又称消光度(E)或光密度(OD)与透光度(T)呈负对数关系,即:A=-lgT 故A=a3*b*c(a3为吸光系数)。 上式为朗伯比尔定律,其意义为:当一束单色光通过一均匀溶液时,溶液对单色光的吸收程度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。 三、仪器的矫正和检定 1.波长矫正 常使用高氣酸钦溶液校正双光束仪器,以10%高氯酸溶液为溶剂,配制含氧化钬(Ho2O3 ) 4 % 的溶液,该溶液的吸收峰波长为241. 13nm,278. 10nm,287. 18nm,333. 44nm,345. 47nm,361. 31nm,416. 28nm,451. 30nm,485. 29nm,536. 64nm和640. 52nm。仪器波长的允许误差为:紫外光区±1nm,500nm附近±2nm。 2.吸光度的准确度 可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg,精密称定,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000mL,在规定的波长处测定并计算其吸收系数,并与规定的吸收系数比较,应符合表中的规定。

分光光度计说明

722可见分光光度计使用说明书 1.仪器的主要用途 722可见分光光度计能在近紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量的的分析。仪器可广泛地应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制等部门,是理化实验室常用的分析仪器之一 2.仪器的工作环境 2.1仪器应安放在干燥的房间内,使用温度为5℃~35℃,相对湿度不超过85%。 2.2使用时放置在坚固平稳的工作台上,且避免强烈的震动或持续的震动。 2.3 室内照明不宜太强,且避免直射日光的照射。 2.4 电扇不宜直接向仪器吹向,以免影响仪器的正常使用。 2.5 尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 2.6供给仪器的电源电压为AC220V±22V,频率为50Hz±1Hz,并必须装有良好的接地线。推荐使用交流稳压电源,以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为1000W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。 2.7 避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀气体的场所使7 避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐 蚀气体的场所使用。 3 仪器的主要技术指标及规格 3.1 光学系统:单束光、衍射光栅。 3.2 波长范围:330nm~800nm。 3.3 光源:钨卤素灯12V30W。 3.4 接收元件:光电池。 3.5 波长准确度:≤±2nm。

3.6 波长重复性:1nm。 3.7 光谱带宽:<6nm。 3.8 杂散光:0.7%τ(在360nm处)。 3.9 透射比测量范围:0.0%τ~100.0%τ。 3.10 吸光度测量范围:0.000A~1.999A。 3.11 浓度直读范围:0000~1999。 3.12 透射比准确度:±1.0%τ。 3.13 透射比重复性:0.5%τ。 3.14 噪声:≤0.3%τ。 3.15 稳定性:亮电流≤0.5%τ/3min, 暗电流≤0.2%τ/3min。 3.16 电源:AC220V±22V,50Hz±1Hz。 3.17 外型尺寸:570mm×400mm×260mm。 3.18 净杂散光测量范围:18 净重:22kg。 4.仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的吸收效应,物 质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理--比耳定律。 τ=I/I0 logI0/I=KCL A=KCL

721分光光度计分解

1 仪器的主要用途 721可见分光光度计是专供工厂、矿山、医院以及各科研单位的化验室,在可见光谱区范围内(360nm~800nm)进行定量比色分析用。仪器在410nm~710nm之间可增加消光片或采用有色溶液作被测溶液的陪衬代空白,以便提高分析灵敏度和提高消光读数范围。 2 仪器的工作环境 该仪器应安放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强,热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发光不稳。尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀性气体的场所使用。推荐使用交流稳压电源,以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为100W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。 3 仪器的主要技术指标及规格 a)波长范围:360nm~800nm。 b)波长准确度:360nm~600nm±3nm;600nm~700nm±5nm;700nm~800nm±8nm。 c)透射比准确度:±2%。 d)透射比重复性:≤0.5%。 e)稳定性:暗电流漂移不超过0.5%/3min。 f)仪器外形尺寸:480mm长×370mm宽×210mm高。 g)仪器净重:18kg。 4 仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光吸收的效应,物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理——比耳定律。 τ=I/I o logI o/I=KCL A=KCL 其中:τ透射比I o 入射光强度 I 透射光强度 A 吸光度 K 吸收系数L 溶液的光径长度 C 溶液的浓度

721型分光光度计使用及波长的检测与校正

在目标:1.掌握比色分析的基本原理 2.规范使用721型分光光度计及利用镨钕滤光片法对其波长的检测实验用品:721型分光光度计、镨钕滤光片、5%CuSO 4液、纱布、比色杯等内容: 一、721型分光光度计的使用 【原理】 利用被测物的有色溶液对某一特定波长的光谱具有选择性吸收的特性,将吸收的光谱按不同强度转变相应的电能,再将电量的变化用检流计显示出来,将显示的电量以光量强度(D或A)计算,根据朗伯-比尔定理,即D=KCL,即吸光度与溶液的浓度与厚度的乘积成正比关系。 【操作步骤】 接通电源→选择波长→粗调透光度T“O”(开盖)和透光度T“100%”(关盖)→预温20min→放入被测液→精确调节透光度T“O”(开盖)和透光度T“100%”(关盖)→测定,读取各管吸光度→收场(关电源、罩仪器罩、登记、清洗比色杯和纱布等) 【注意事项】 1.仪器需防震、防潮、避光。 2.比色时,手拿比色杯的毛面,液体倒杯高的或,比色杯不能用硬毛刷刷洗,也不能用高温烘烤。 二、721型分光光度计波长的检测与校正(镨汝滤光片法) 1.在比色槽的光路上放一张小白纸,调节波长至580nm。 2.旋动光量T100%的旋钮至最大,在小白纸上应看到桔黄色的光斑。 3.若光斑不是橘黄色,左右旋转波长调节旋钮使之出现橘黄色的光斑,粗略判断波长偏离的程度,选择检测的起始波长。

4.调节波长至起始波长,用蒸馏水或空气调T“0”和T“100%”。 5.将镨汝滤光片推入光路中,记录T或A值,退出镨汝滤光片。 6.调节波长至另一值,用蒸馏水或空气调T“0”和T“100%”。 7.再将镨汝滤光片推入光路中,记录T或A值,退出镨汝滤光片8.如此反复测定直至T值为最小或A值为最大,记录此点的指示波长。 9.将A值最大时的波长减去镨汝滤光片最大的吸收波长529nm,即得被校比色计的波长误差。 10.如波长精度超出允许误差. (360~600nm≤3nm;600~700≤5nm;700~800≤8nm),打开分光光度计左侧调节窗口盖板,用螺丝刀试调波长的调节杆。具体位置详见仪器使用说明书。 11.试调波长的调节杆后,再按步骤3~8操作,直至分光光度计的波长精度误差在其允许范围内即可。

722可见光分光光度计操作规程

722可见光分光光度计操作规程 环境要求 1、仪器应安装在无震动,无强烈电磁场干扰、无强光照射的室内工作台上,避免灰尘及腐蚀性气体。 2、室内环境温度为5-35℃,相对湿度小于85%。 3、电源电压220V±22V,频率50HZ±1HZ。 操作要点: 1、插上电源,打开开关,打开试样室盖,按“A/T/C/F”键,选择“T%”状态,选择测量所需波长,预热20分钟。 2、调节波长旋钮至测定波长,并稍等几分钟。 3、开始测量前要先调节仪器的零点,方法为: 保持在“T%”状态,使光路通畅,当关上试样室盖时,屏幕应显示“100.0”,如否,按“T100%”键;打开试样室盖,屏幕应显示“000.0”,如否,按“0%”键,重复2-3次,仪器本身的零点即可调好,可以开始测量。 以标准对比法为例: 3、用空白溶液润洗一个比色皿,装样到比色皿的3/4处(必须确保光路通过空 白溶液中心),用吸水纸吸干比色皿外部所沾的液体,将比色皿的光面对准光路 放入比色皿架,用同样的方法将所测样品装到其余的比色皿中并放入比色皿架中。4、将装有待测溶液的比色皿拉入光路,关上试样室盖,按“A/T/C/F”键,调 到“Abs”,按“Abs0”键,屏幕显示“0.000”,将其余测试样品一一拉入光路,记下测量数值即可(不可用力拉动拉杆)。 5、测量完毕后,将比色皿清洗干净(最好用乙醇清洗),擦干,放回盒子,关 上开关,拔下电源,罩上仪器罩,并打扫卫生,才可离开。 6、本操作要点只针对测量吸光度而言。 注意事项: 1、仪器使用前需开机预热20分钟。 2、开关试样室盖时动作要轻缓。 3、不要在仪器上方倾倒测试样品,以免样品污染仪器表面,损坏仪器,一定 要将比色皿外部所沾样品擦干净,才能放进比色皿架进行测定。 4、每套仪器所配套的变色皿,不能与其它仪器上的比色皿单个调换。 5、如大幅度改变测试波长,在调整“0”和“100%”后稍等片刻,稳定后重新调整即可工作。 6、仪器表面宜用温水擦拭,请勿使用酒精、丙酮等溶剂清洁,不使用时请加防尘罩。比色皿每次使用后应清洗干净,并用镜头纸轻拭干净,存于比色皿盒中备用。 7、有任何疑问请报告指导老师。

可见分光光度计使用说明

722可见分光光度计 使 用 说 明 书 上海精密科学仪器有限公司

目录 第一章设计原理与主要用途 2 第二章仪器的工作环境 2 第三章仪器的安装 3 第四章主要技术指标及规格 3 第五章仪器视图与构件名称 3 第六章仪器使用操作说明 4 第七章仪器的应用问题解决方案11 附录A 仪器验收13

第一章 设计原理与主要用途 一、原理 分光光度计的基本原理是:物质在光的照射下会产生对光吸收的效 应,而且物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同物质都具有其 各自的吸收光谱。因此不同波长的单色光通过溶液时其光的能量就 会被不同程度的吸收,光能量被吸收的程度和物质的浓度有一定的 比例关系,即符合比耳定律。 0I I T = abc T I I A ===1lg lg 0 其中:T —透射比 A —吸光度 I 0—入射光强度 a —吸收系数 I —透射光强度 b —溶液的光程长度 c —溶液的浓度 由上式可以看出当吸收系数a 与光程长度b 不变时,吸光度与溶液 浓度成正比。本仪器正是依据这一原理而设计的。 二、用途 本仪器可供物理、化学、医学、生物学等学科进行科研或供化学工 业、食品工业、制药工业、冶金工业、临床生化、环境保护部门进 行各种物质的定性定量分析。 第二章 仪器的工作环境 一、仪器的运输和存储 本仪器在运输过程中必须防雨淋、曝晒及剧烈冲击。 本仪器存储时应包装完好的存储于有遮蔽的仓库内,周围无酸性气 体、碱及其它有害物质。仓库的环境温度在-25℃~40℃之间,相对 湿度不大于85%。 二、仪器的使用环境 避开阳光直射的场所和有较大气流流动的场所。 请不要安放在有腐蚀性气体及灰尘多的场所。 应避开有强烈振动和持续振动的场所。 应远离发出磁场、电场和高频电磁波的电气装置。 仪器应放在可载重的稳定水平台面上,仪器背部距墙壁至少15cm 以 上,以保持有效的通风散热。 避开高温高湿环境 使用温度: 室温 5℃~40℃

721G型可见分光光度计

1 适用范围 规范可见分光光度计的操作规程,保证仪器的正确运行和检测工作的顺利进行,维护仪器安全,适用于721G型可见分光光度计的使用、维护与保养、期间核查。 2安装环境要求 温度:5-35℃;湿度:≤85%; 电压:AC220V(±22V);电频:50HZ±1HZ; 3 操作方法 3.1 开机预热 仪器接通电源,微机进行系统自检,LCD显示窗口显示相应的产品型号后,仪器进入工作状态。此时显示窗口在默认的工作模式T。 注:为使仪器内部达到热平衡,开机预热时间不小于30分钟。 3.2 改变波长 通过旋转波长手轮可改变仪器的波长,并在波长观察窗的刻度选择所需的波长。 3.3 放置参比与待测样品 选择测定用的比色皿,把盛放参比和待测的样品放入样品架内,通过样品架拉杆来选择样品的位置。当拉杆到位时有定位感,到位时轻轻推拉一下以保证定位的正确。 3.4 调0%T、调100%T/0A 键和 键对仪器进行调零和调满度、吸光度零。 3.5显示方式的选择 本仪器具有四种显示方式,开机时仪器的初始状态为透射比显示方式(T)。 1.透射比(Trans) 2.吸光度(Absorbance) 3.浓度(Conc.) 4.浓度因子(Factor) 3.6 浓度直读设定 按键,选择浓度直读(C)方式,按和键输入用户 需要的标样浓度设定值。再放入标样后再按键确认,再进行未知样品的测试。此时浓度因子也会自动计算后相应的改变,用户可查看F值后记录,在以后的测试中直接以浓度因子设定来进行测试同样的样品,无需再用标样来进行标定。 注:在进行浓度直读设定时,应放入标准样品后设定。 4 维护和保养 4.1 平时注意保持仪器内光检测器的高度干燥,以维持具高灵敏度及信号的稳定性。 4.2 比色皿用毕,应立即用蒸馏水或清水冲洗清洁,并用干燥柔软的纱布或纸将水迹擦干,以防表面光 洁度的变化,影响光透光率。 4.3 保持仪器的清洁,为避免仪器积尘和玷污,在其不使用期间,应用布或塑料防尘罩盖住整台仪器; 4.4 仪器在长期间使用后或经运输中剧烈震动后,需检查仪器波长准确度(具体事项参考说明书); 5期间核查 5.1仪器检定周期为1年,每2次检定之间对本仪器进行1次期间核查。 5.2检查仪器各部件(开关、指示灯等)能否正常工作,各易损零部件有无松动、老化现象,及时更换。

72型分光光度计工作原理

72型分光光度计工作原理 72型分光光度计是可见光分光光度计,波长范围为420nm~700nm,它由三大部分组成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。 72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律,它是根据相对测量原理工作的,即先选定某一溶剂作为标准溶液,设定其透光率为100%,被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的,即让单色光分别通过被测试样和标准溶液,二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率。如图所示,白色光源经入射狭缝、反射镜和透光镜后,变成平行光进入棱镜,色散后的单色光经镀铝的反射镜反射后,再经过透镜并聚光于出射狭缝上,狭缝宽度为0.32nm。反射镜和棱镜组装在一可旋转的转盘上并由波长调节器的凸轮所带动,转动波长调节器便可以在出光狭缝后面选择到任一波长的单色光。单色光透过样品吸收池后由一光量调节器调节为适度的光通量,最后被光电电池吸收,转换成电流后由微电计指示,从刻度标尺上直接读出透光率的值。 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。 分光光度计的简单原理 分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被

吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。 事实上,分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和精确度。如EppendorfBiophotometer的准确度≤1.0%(1A)。这样多次测试的结果在均值 1.0%左右之间变动,都是正常的。另外,还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值,离子浓度等:在测试时,离子浓度太高,也会导致读数漂移,因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液,如TE,可大大稳定读数。样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素:由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒,尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了最大程度减少颗

721型分光光度计操作规程

721型分光光度计操作规程 一、适用范围: 本规程适用于721型分光光度计。 二、适用项目: 本仪器适用于在可见光谱区范围内(360-800nm)进行定量比色分析。 三、编制依据: 本规程依据仪器使用说明书编制。 四、仪器工作原理: 溶液中的物质在光的照射激发下,产生对光吸收的效应,物质对光的吸收具有选择性,各种不同物质都具有各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,符合郎伯-比耳定律。即:T=I/I0log I0 /I=KCL A=KCL;当入射光、吸光系数和溶液的光径长度不变时,透过光是根据溶液的浓度而变化的。通过测定吸光度就可得出被测溶液的浓度。 五、仪器技术参数: 1、电源电压:220V稳压电源,50 ±0.5Hz。 2、波长范围:360-800nm 3、波长精度:360~600±3nm;600~700±5nm;700~800±8nm。 4、仪器的重现性误差:不大于0.5% 六、操作步骤: 1、使用前先检查仪器的安全性、电源线接线是否正确、各个调节旋钮的起始位置是否正确、矽胶是否干燥等。 2、仪器尚未接通电源时,电表的指针必须位于“0”刻线上,否则可用电表上的校正螺丝进行调节。 3、接通电源开关,打开比色皿暗箱盖,选择需用的单色波长,灵敏度选择参照(4),调节“0”电位器使用电表指“0”,然后将比色皿暗箱盖合上,比色

皿座处于蒸馏水校正位置,使光电管受光,旋转调“100%”电位器使电表指针到满度附近,仪器预热约20分钟。 4、放大器灵敏度有五档,“1”最低,选择原则是保证能使空白档良好调到“100”的情况下,尽可能采用灵敏度较低档,以保证仪器有更高的稳定性。一般置“1”档,灵敏度不够时再逐渐升高,但改变灵敏度后须按(3)重新校正“0”和“100%”。 5、预热后,按(3)连续几次调整“0”和“100%”,即可以进行测定工作。 6、如果大幅度改变测试波长时,在调整“0”和“100%”后稍等片刻(钨灯在急剧改变亮度后需要一段热平衡时间),当指针稳定后重新调整“0”和“100%”即可工作。 注:a空白档可以采用空气空白,蒸馏水空白或其它有色溶液或中性消光片作陪衬,空白调节100%处,能提高消光读数以适应溶液的高含量测定。 b根据溶液含量的不同可以酌情选用不同规格光径长度的比色皿,目的是使电表读数处于0.8消光值之内。 七、注意事项: 1、为保证仪器稳定工作,电压波动较大的地方,220V电源要加稳压器。 2、当仪器工作不正常上时,如无输入,光源灯不亮,电表指针不动,应首先检查保险丝是否损坏,然后检查电路。 3、仪器要接地良好。. 4、保证仪器各部位防尘、防潮。 5、仪器工作几个月或搬动后,要检查波长准确性等方面,以确保仪器的使用和测定的准确。 八、本规程自发布之日起执行。

铜铝合金价电子结构的计算

第32卷第1期吉首大学学报(自然科学版) Vol.32No .12011年1月Journ al of Ji shou Universit y (Nat ural Science Edit ion)J an.2011 文章编号:1007-2985(2011)01-0052-04 铜铝合金价电子结构的计算 * 许万马,彭金璋,石长柏,廖劢鑫 (吉首大学物理科学与信息工程学院,湖南吉首 416000)摘要:采用余氏理论计算了铜铝合金在不同时效作用下析出相价电子结构,通过对键强的分析,从而发现相析出过程中合金强度逐渐得到强化. 关键词:余氏理论;铜铝合金;价电子结构 中图分类号:O469文献标志码:A 1理论分析 在室温和高温条件下铜铝合金具有良好的物理和化学性能,尤其含铜量为4~5%的高强度铸造铜铝 合金,其力学性能较优异,完全可替代部分钢,近年得到迅速应用[1-5].向纯铝金属加入适量铜经淬火后, 形成含铜量为4%的过饱和固溶体,再经时效作用可提高合金强度[4].过饱和固溶体在较低温度下经不同人工时效作用,可依次析出GP 区、亚稳相、和稳定相(Al 2Cu),其中亚稳相 、界面与基体基本上共格和半共格,稳定相界面与基体完全不共格[5],这些脱溶析出的合金相在不同温度下对合金基体作用不 同,有的起强化作用,有的起弱化作用,而强化与弱化作用均与析出相电子结构有关,特别是与析出相中原子周围局域电子成键特征有着紧密关系[6- 7].上世纪70年代,基于价键理论[8]和能带理论建立起来的固体与分子经验电子理论(EET),又称余氏 理论.在该理论基础上,刘志林等提供了键距差法(BLD),使得合金宏观性能的研究可实现追溯到价电子结构层次,从而为合金良性设计提供深层次理论指导.在固体与分子经验电子理论中采用了以下4个基本假设: 假设1在固体与分子中,每个原子一般由2个原子状态杂化而成,这2个状态称为始态和末态,即h 态和t 态,其中至少有一个态在基态或靠近基态的激发态.2个状态都有它们各自的共价电子数n c 、晶格电子数n l 和单键半距R(1).晶格电子是在由多个原子组成的固体体系内,处于有3,4个甚至6个以上的原子围绕的空间内价电子. 假设2 一般情况下,状态杂化是不连续的,若以C t 表示t 态成分,那么在多数结构中C t 近似地由下 式给出: k =l +m +n l +m+n l +m +n l +m+n l 3m 5n l 3m 5n ,C t =1k 2.(1)*收稿日期:2010-11-20 基金项目:湖南省自然科学基金资助项目(10JJ6068) 作者简介许万马(),男,安徽安庆人,吉首大学物理科学与信息工程学院硕士生,主要从事凝聚态物理研究 通讯作者彭金璋(63),男(土家族),湖南桑植人,吉首大学物理科学与信息工程学院教授,主要从事功能材料的物理特性研究:1980-:19-.

721分光光度计的使用方法

721可见分光光度计仪器的使用方法 1.在接通电源之前,电表的指针必须位于“0”刻线上,否则应旋动电表上的校正螺丝调节到位。 2.打开比色皿室的箱盖和电源开关,使光电管在无光照射的情况下预热15分钟以上。 3.旋转波长调节器,选择测定所需的单色光波长。选择适当的灵敏度,一般先将灵敏度旋钮至中间位置,用零点调节器调节电表指针至T值为0%处。若不能调到,应适当增加灵敏度。 4.放入空白溶液和待测溶液,使空白溶液置于光路中,盖上比色皿室箱盖,使光电管受光,调节光量调节旋钮使电表指针在T值为100%处。 5.打开比色皿室箱盖(关闭光门),调节零点调节旋钮使针在T值为0%处,然后盖上箱盖(打开光门),调节光量调节旋钮使指针在T值为100%处。如此反复调节,直到关闭光门进和打开光门时指针分别指在T值为0%和100%处为止。 6.将待测溶液置于光路中,盖上箱盖,由此时指针的位置读得待测溶液的T值或A值。 7.测量完毕后,关闭开关取下电源插头,取出比色皿洗净擦干,放好。盖好比色皿暗箱,盖好仪器。 注意事项 1.使用比色皿时,只能拿毛玻璃的两面,并且必须用擦镜纸擦干透光面,以保护透光面不受损坏或产生斑痕。在用比色皿装液前必须用所装溶液冲洗3次,以免改变溶液的浓度。比色皿在放入比色皿架时,应尽量使它们的前后位置一致,以减小测量误差。 2.需要大幅度改变波长时,在调整T值为0%和100%之后,应稍等片刻(因钨丝灯在急剧改变亮度后,需要一段热平衡时间),待指针稳定后再调整T值为0%和100%。 3.当被测溶液浓度太大时,可在空白溶液处加一块中性滤光片(所谓中性是指它们在很宽的波长范围内的透光率基本相同),其A值有0.5,1,和1.5三种。所谓A值为1是标称值,实际在1左右,须经使用的仪器在实际使用的波长下测定其实际数值,例如:测得吸光片的实际数值为0.95,在空白溶液处加此吸光片后,被测溶液在电表上的读数为0.74,则该溶液的实际值为: 0.74+0.95=1.69 4.根据溶液的含量大小选择不同光程长度的比色皿,使用权电表读数A在0.1~1之间,这样可以得到较高的准确度。

721分光光度计操作规程

721分光光度计操作规程 一、操作基本规范 1、基本操作程序 1)按6.1说明开机预热(如为持续测试则免去此步骤)。 2)按6.2说明调整波长。 3)按6.3说明调整滤光片位置。 4)按6.4说明,打开样品室盖,将参比样品(或留一个空位)和测试样品放入槽架,拉动“比色皿槽架拉杆”调整比色皿槽架位置,是参比样品对准光路后,合上样品室盖。5)按6.5说明,选择透射比测试模式。如初开机可免选择。 6)按6.6说明,在样品室盖合上时,按100%键使仪器自动调整100%。 7)按6.7说明,打开样品室盖,按0%键使仪器自动调整0%。 如发现调整100%和调整0%相互有影响,可交替进行多次,直至成功。允许最后一位跳1。成功后测透射比可立即进行测试,要测吸光度可按“模式”键进入吸光模式测试。 2、测定非浑浊性液体样品的透射比 1)拉动比色皿槽架拉杆,使待测样品的比色皿对准光路,此时左侧有箭头指向“测量中” 并闪动,数据稳定后箭头消失,可由数据显示窗读出样品的透射比值,记录数据。 2)继续测试其它待测样品。测试结束,或转其它测试,关闭仪器电源。 3、绘制非常浑浊性液体样品的透射比图谱 1)在要求测量的波长范围内按所需波长间隔,每个波长执行7.1和7.2各步骤,记录每个波长的波长值和相应的透射比值。 2)取一坐标纸,横坐标(X轴)为波长,纵坐标(Y轴)为透射比,将要求的波长范围内每一组数据标记在坐标纸上,用曲线尺光滑地连接各数据点,得到待测样品的波长—透射比曲线图谱。 4、测定浑浊性液体样品的吸光度 1)按“模式”键,进入吸光度测试模式。 2)拉动比色皿槽架拉杆,使待测样品的比色皿对准光路,由数据显示窗读出样品的吸光度值,记录数据。 3)继续测定其它样品。测试结束,或转其它测试,或关闭仪器电源。 5、绘制非浑浊性液体样品的吸收图谱 1)按“模式”键,进入吸光度测试模式。 2)在要求测量的波长范围内按所需波长间隔,每个波长执行7.1和7.4各步骤,记录每个波长的波长值和相应的吸光度值。 3)取一坐标纸,横坐标(X轴)为波长,纵坐标(Y轴)为吸光度,将要求测量的波长范围内每一组数据标记在坐标纸上,用曲线尺光滑地连接各数据点,得到测量样品的波长---吸光度曲线图谱。 6、使用标准曲线对样品定量 1)配置系列标准样品溶液A、B、C…,分别注入比色皿。 2)每个标准样品执行7.1和7.4各步骤,记录每个标准样品的编号和相应的吸光度值。3)继续测量待测样品,记录其吸光度值。 4)如有多个待测样品,逐一进行测量并记录他们的吸光度值。 5)制作标准工作曲线:取一坐标纸,以横坐标(X轴)为浓度坐标,纵坐标(Y轴)为吸光度坐标,适当标定坐标标尺,在图纸上找出各个对应样品溶液浓度和相应吸光度值的坐标点,画一直线,使各坐标点分布在直线两侧,且与直线间的距离最小。直线是否通

分光光度计的原理分类

分光光度计的原理分类 一.分光光度计的一般原理是什么? 分光光度计是利用分光光度法,通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。 不同种类的分光光度计的基本原理相似,都是利用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源。光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,通过测量样品的吸光值,经过计算可以转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 二.分光光度计有哪些不同的类型,不同种类的应用领域有什么区别? 分光光度计有哪几种不同的分类方式: 1.分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为:(1)可见光分光光度计:测定波长范围为400~760 nm的可见光区;(2)紫外分光光度计:测定波长范围为200~400nm的紫外光区;(3)红外分光光度计:测定波长范围为大于760nm的红外光区;(4)荧光分光光度计:用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱;(5) 原子吸收分光光度计:光源发出被测的特征光谱辐射,被经过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收,通过测定特征辐射被吸收的大小,来求出被测元素的含量。 2.分光光度计按自动化程度分类:可分为手动、半自动、自动分光光度计。 3.分光光度计按软件可分为:带扫描、不带扫描。 三.分光光度计最常见的用途和常用波长有哪些? 1.核酸的定量 核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。利用260nm的波长可以定量测量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA的浓度。 除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度。如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

分光光度计使用方法

一、一、721型分光光度计使用方法 1.调整 (1)(1)未接电源之前,应先检查“0”和“100%”调节旋钮是否处在起始位置,如不是,则应分别按逆时针方向轻轻旋转至不能再动。电表指针 是否指“0”,如不指“0”,则应调节电表上的调整螺丝使指针指“0”。灵 敏度选择旋钮处于“1”挡(最低挡)。然后旋转波长调节旋钮,调至所需 波长。 (2)(2)开启电源开关。打开吸收池暗箱盖,此时光门关闭,调节调零旋钮,使电表指针指透过率“0”刻度,盖上吸收池暗箱盖,光门打开,调 节“100%”旋钮,使指针指透过率“100%”刻度处。然后打开吸收池暗 箱盖,仪器预热20min。 2.校正 (3)(3)将盛有空白溶液的吸收池放人暗箱中吸收池架(又叫比色皿架)的第一格内,盛待测溶液的吸收池放入其他格内。 (4)(4)盖上暗箱盖,光门打开,空白溶液正好在光路上,旋转“100%” 旋钮,使指针指透过率“100%”处,如指针达不到“100%”处,应旋转 灵敏度旋钮,使灵敏度提高一挡。再打开暗箱盖,检查指针是否指透过率 “0”刻度处。反复调节“0”和“100%”,待指针稳定,即可测定。 3.测定 (5)(5)拉出吸收池架,使待测溶液进入光路即可从电表上读出溶液吸光度值。必要时,可把吸收池架推回去,再把空白溶液置于光路上,调节“0” 和“100%”,然后再拉出吸收池架,依次测定待测溶液吸光度值。 (6)(6)换另外3份待测溶液时,空白溶液不可倒掉,应再用空白溶液调节“0”和“100%”,直到所有的待测溶液测定完为止,才可倒掉空白溶液。 4.结束 测量完毕,关闭电源,将各调节旋钮恢复至初始位置。取出吸收池洗净,晾干,存于专用盒内。 二、二、722型光栅分光光度计使用方法 1.调整 (1)(1)在接通电源前,应对仪器的安全性进行检查,电源线接线应牢固,接地线通地要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再接通电源。 (2)(2)将灵敏度旋钮调至“1”档(放大倍率最小)。调波长调节器至所需波长。 (3)(3)开启电源开关,指示灯亮,选择开关置于“T”,调节透光率[100%T]旋钮使数字显示[100.0]左右,预热20min . 根据溶液浓度大小,选择液层厚度合适的吸收池。 2.校正 (!)打开吸收池暗室盖(光门自动关闭),调节[0% T]旋钮,使数字显示为“00.0”,盖上吸收池盖,将参比溶液置于光路,使光电管受光,调节透光率[100% T] 旋钮,使数学显示为“100.0”。 (2)如果显示不到“100”,则可适当增加电流放大器灵敏度档数,但应尽可能使用低档数,这样仪器将有更高的稳定性。当改变灵敏度后必须重新校正“0”和“100”。 (3)按(1)连续几次调整“00.0”和“100.0”后,如将选择开关置于“A”,调节吸光度调零旋钮,使数字显示为“.000”,即可进行下面吸光度A的测量;如将选择开关置于“C”,将标准溶液推入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值,即可进行下面浓度c的测量。 3.测定 (1)(1)吸光度A的测量。将要测A的试样溶液推入光路,显示值即为待测样品的吸光度值A。 (2)(2)浓度c的测量。将要测c试样溶液推入光路,即可读出待测样品的浓度值c。

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