胎牛血清的沉淀问题

关于沉淀的解答说明

----CellMax俱乐部

说明一:血清非人工产品,有些东西沉淀出来系自然现象

●纤维蛋白原(主要)

●盐析出。如磷酸钙等

●胆固醇和脂肪酸

●蛋白析出

说明二:沉淀在下列情况下还会增加:

●热灭活

●37℃培养(常常由此引发歧异)

●反复冻融

●溶解过程中没有摇匀

●gamma 照射

●长期存放在2-8°C

另外:

●血清加入到RPMI 1640中时,沉淀往往会发生或增加

●pH 升高时,沉淀会增加

●在培养板或培养皿中,因为培养基的蒸发也会导致沉淀的增加说明三:沉淀不会影响其对细胞的促生长作用

●Hyclone技术人员对此问题的深入研究证明

●我们的客户试验确认

●请注意一个例外:沉淀影响巨噬细胞的培养

说明四:这种现象发生在所有的血清中,包括进口血清

●Invitrogen的网站上说“GIBCO 的胎牛血清没有预老化,如果存放在2-8℃,血清中的各种蛋白或酯类有可能会凝聚析出,出现沉淀或混浊. 这种现在不会影响血清对对细胞的促生长作用.我们建议把血清存放在–20℃,并避免反复冻融。

●Sigma胎牛血清说明书中说: “在熔化过程中混浊多絮状沉淀,这中现象对多数血清来说是正常的,并不影响其使用质量。但它影响血清的外观,影响瓶与瓶之间的一致性

说明五:血清并没有被污染.

●检测血清是否被污染最好的方法是将血清接种到血酯板上,培养后看是否有菌落形成.

●在1000x显微镜下,有经验的微生物学家通过观察有无格兰仕染色的细菌,也可以判断血清是否被污染

说明六:兰州民海在细胞培养领域有非常丰富的经验

CellMax依托兰州民海生物和西北民族大学生物细胞工程学院,有16年的供应世界上最大的细胞培养企业之一的经验(hyclone 南美胎牛血清)

民海生物不但生产血清培养基,自己也有R&D部门,可以为客户提供驯化培养好的细胞以及无血清培养基等多项服务

同样民海在处理血清上有非常丰富的经验,我们对我们的产品充满信心。

如何去除血清中的沉淀?

●如想去除这些絮状沉淀物,可将血清分装到无菌离心管中,以400g 离心,上清液即可直接加入到培养液中。

●不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物,因为可能阻塞滤膜。

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