两色金鸡菊对糖尿病大鼠肾脏纤维化RhoAROCKNox4信号通路的影响

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两色金鸡菊对糖尿病大鼠肾脏纤维化

RhoA/ROCK/Nox4信号通路的影响

作者：姚蓝蒋洁王靖宣毛新民

来源：《中国中医药信息杂志》2019年第01期

中图分类号：R285.5;;; 文献标识码：A;;; 文章编号：1005-5304（2019）01-0057-06

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2019.01.014

两色金鸡菊Coreopsis tinctoria Nutt.又名“昆仑雪菊”，有清热解毒、活血化瘀、和胃健脾

功效。临床上用于治疗燥热烦渴、胃肠不适、食欲不振、痢疾及疮疔肿毒等[1-2]。两色金鸡菊主要化学成分为黄酮类化合物，也是发挥药效的主要成分[3]。现代药理研究表明，两色金鸡菊具有抗氧化、降血压、降血脂、降血糖等作用[4-5]。本研究采用高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素（STZ）诱导SD大鼠建立糖尿病（DM）模型，观察两色金鸡菊乙酸乙酯提取物对大鼠肾脏早期损伤标志物及肾脏纤维化物质沉积的影响，免疫组化检测大鼠肾组织

RhoA/ROCK/Nox4信号通路蛋白及纤维化成分平滑肌肌动蛋白-α（α-SMA）的表达，探讨其防治DM的作用机制。

1; 实验材料

1.1; 动物

SPF级SD大鼠60只，8～10周龄，体质量200～250 g，新疆医科大学实验动物中心提供，动物合格证号65000700000045。饲养于新疆医科大学实验动物中心，温度（20±2）℃，相对湿度（45±5）%，日照时间12 h，24 h保持通风状态。大鼠分笼喂养，每5只1笼，自由摄食饮水。正常组大鼠给予普通饲料喂养，高脂组大鼠喂养高脂高糖饲料（蔗糖20%、猪油10%、胆固醇2.5%、胆酸钠0.5%、基础饲料67%），新疆医科大学实验动物中心提供。

1.2; 药物及制备

两色金鸡菊头状花序采自新疆和田市民丰县，地理坐标为：东经82°22′00″～85°55′00″，北纬35°20′00″～39°30′00″。植物标本由新疆医科大学杨卫星教授鉴定为两色金鸡菊Coreopsis tinctoria Nutt.;盐酸二甲双胍片，中美上海施贵宝制药有限公司，批号20140212。取两色金鸡

菊干燥头状花序160 g，经粉碎后，置于4 L 55%乙醇中，80 ℃回流提取2次，每次2 h。提取液经过滤后，合并滤液并置于旋转蒸发仪中浓缩至1 L。浓缩液中加入等体积乙酸乙酯溶液进行萃取，萃取液进一步浓缩后，经减压干燥，得乙酸乙酯提取物粉末（提取率约为4.4%，

W/W）。称取适量两色金鸡菊乙酸乙酯粉末、阳性对照药，加入含0.5%羧甲基纤维素钠的蒸馏水溶液中，搅拌混匀，超声溶解4 h，直至药物呈均匀混悬液。