MS培养基配制方法 new

MS 培养基

一、大量元素

母液1：大量A

母液2：大量B

母液3：Fe盐

注：配制顺序如下

1. 称取3.73 g Na2-EDTA?2H2O溶解于200 ml去离子水中，并置于70℃预热(A)；

2. 称取2.78 g FeSO4?7H2O溶解于200 ml去离子水中(B)；

3. 将B缓慢倒入A中混合，边倒边搅动，置于70 ℃水浴锅中螯合2 h；

4. 冷却后定容至1 L。

二、微量元素

母液4：微量

三、有机物质

母液5：有机（不含肌醇）

℃

注：配固体培养基可在调pH后加适量Agar或Phytagel；肌醇也可加入有机母液。

四、抗生素和激素母液

试剂名称配制方法母液浓度Amp（氨苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Km（卡那霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Str（链霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Cb（羧苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌250 mg/ ml 6-BA (6-苄基嘌呤) 1M NaOH或盐酸溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml NAA（萘乙酸）1M NaOH溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml IAA 95% 乙醇溶解，双蒸水定容，过滤灭菌 1 mg/ ml

五、乙酰丁香酮(Acetone-syringone, AS)

称取196.2 mg AS用10 ml DMSO溶解，母液浓度100 mM，-20℃避光保存，工作浓度100 ~ 200 μM

六、MS溶液的混合

5种母液分别依次加入到800 ml蒸馏水中，混匀后加入肌醇、蔗糖和能高压灭菌的激素（6-BA和NAA），定溶至1000 ml，用1M NaOH调pH至5.8。最后加Phytagel （Sigma）4.4g或Agar 10g。

灭菌完后，在培养基凝固前加入AS或抗生素及不能高压灭菌的激素（IAA）。

MS培养基的作用

MS培养基的作用 植物组织培养中常用的一种培养基是ms培养基。 ms培养基的配制步骤 这样每次使用时，取其总量的1/20(50ml)或1/200(5ml)，加水稀释，制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。 大量元素(母液Ⅰ)mg/l nh4no333000 kno338000 cacl2·2h2o8800mgso4·7h2o7400kh2po43400微量元素(母液Ⅱ)ki166h3bo31240mnso4·4h2o4460znso4·7h2o1720na2moo4·2h2 o50cuso4·5h2o5cocl2·6h2o5铁盐(母液 Ⅲ)feso4·7h2o5560na2-edta·2h2o7460有机成分(母液Ⅳ)Ⅳa肌醇20000Ⅳb烟酸100盐酸吡哆醇(维生素b6)100盐酸硫胺素(维生素

b1)20甘氨酸400以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。 上述几种母液都要单独配成1l的贮备液。其中， 母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1l。 母液Ⅲ的配制方法是：将称好的feso4·7h2o和na2-edta·2h2o 分别放到450ml蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混 合，并将ph调至5?5，最后定容到1l，保存在棕色玻璃瓶中。各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。 ms培养基中还需要加入：2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-d)、萘乙酸(naa)、6-苄基嘌呤(6-ba)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0?1mg/ml)。其配制方法是：分别称取这3种物质各10mg，将2，4-d

植物组织培养MS培养基配方

植物组织培养MS培养基配方 （一）母液配制与保存 配制培养基时，如果每次配制都要按着杨成分表依次称量，既费时，又增加了多次称量误差。为了提高配制培养基的工作效率，一般将常用的基本培养基配制成10～200倍，甚至1000倍的浓缩贮备液，即母液。母液贮存于冰箱中，使用时，将它们按一定的比例进行稀释混合，可多次使用，并在配制较多数量的培养基时，降低工作强度，也提高试验的精度。 基本培养基的母液有四种：大量元素（浓缩20倍），微量元素（浓缩100倍），铁盐（浓缩200倍），除蔗糖之外的有机物质（浓缩100倍） 1大量元素 配制大量元素母液时要分别称量，分别溶解，在定容时按表1中的序号依次加入容量瓶中，以防出现沉淀。倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保存。 表1大量元素母液（配1L20倍的母液） 序号成分配方浓度/（mg.L-1）称取量/mg 配1mL培养基吸取 量/mL 1 硝酸铵NH4NO3 1650 33000 50 2 硝酸钾KNO 3 1900 38000 3 磷酸二氢钾KH2PO 4 170 3400 4 七水合硫酸镁MgSO4.7H2O 370 7400 5 氯化钙无水CaCl2 440 6644 2微量元素母液 在配制微量元素母液时，也应分别称量和分别溶解，定溶时不分先后次序，可随意加入溶量瓶中定容（表2），一般不会出现沉淀现象。倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保有存。 表2微量元素母液(配制1L100倍母液) 成分配方浓度/(mg.L-1) 称取量/mg 配制1L培养基吸取 量/mL 碘化钾KI 0．83 83 10 硫酸锰MnSO4.H2O 22．3 2230 硼酸H3BO3 6．2 620 硫酸锌ZnSO4.7H2O 8．6 860 钼酸钠Na2MoO4.2H2O 0．25 25 硫酸铜CuSO4.5H2O 0．025 2．5 氯化钴CoCl2.6H2O 0．025 2．5 3铁盐母液 由于铁盐无机化合物不易被植物吸收利用，只有基螯合物才能被植物吸收利用，因此需要单独配成螯合物母液表3）。 配制方法：称取5.56g硫酸亚铁和7.46g乙二胺乙酸二钠，分别用450ml的去离子水溶解，分别适当加热不停搅拌，分别溶解后将硫酸亚铁溶液缓缓加入到乙二胺四乙酸二钠溶液中，将两种溶液混合在一起，最后用去离子水定溶于1000mL，倒入棕色贮液瓶中，贴好标签和做好记录后放入冰箱内保存。

MS培养基配方

MS 培养基配方 1、配置MS母液 母液配置：加热都是用温水浴加热，全部都要避光保存，用装乙醇的棕色瓶来保存在4度即可 表2.1大量元素母液 药品20x g/L 500ml（20 x）KNO338g 19g NH4NO333 g 16.5g MgSO4?7H2O7.4 g 3.7g CaCl2 6.644g 3.322g KH2PO4 3.4g 1.7g 溶于200ml蒸馏水,定容至500ml 需要加热才能完全溶解 CaCL2.2H2O 4.4g/L 表2.2微量元素母液 药品100x g/L 500ml（100x g/L） KI H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O GuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 0.083g 0.62 22.3 g 0.86 g 0.025 g 0.0025 g 0.0025 g 0.0415 g 0.31 g 1.115 g 0.43 g 0.0125 g 0.00125 g 0.00125 g 溶于100ml蒸馏水,定容至500ml 表2.3有机母液 药品100x 1L500ml(100x)肌醇10g5g

烟酸0.05g0.025g VB60.05g0.025g VB10.1g0.05g 甘氨酸0.2g0.1g 表2.4铁盐母液 药品100x g/L500ml FeSO4?7H2O 2.78g 1.39g Na2-EDTA. 2H2O 3.73g 1.865g 铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于100ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，加水定容至500ml，置于小口瓶中，贴上标签 2、固体MS培养基材料 ?找到4种母液：大量元素，微量元素，有机微量元素，铁盐母液 ?蔗糖，琼脂锥形瓶 MS培养基配方：母液都稀释至1x MS培养基配方（1L） 母液体积或重量(1L) 200ml 大量元素20x50mL 10ml 铁盐100x 微量100x 10mL 2ml 10mL 2ml 有机100x10mL 2ml 蔗糖15g（15g/L）3g

MS培养基配方及培养基简介

MS培养基成分(1962)（单位：mg/L) 无机盐含量有机物含量 PH值NH4NO4 1650 肌醇 100 5.8 KNO3 1900 烟酸 0.5 CaCl2·2H2O 440 盐酸吡哆醇 0.5 MgSO4·7H2O 370 甘氨酸 2 KH2PO4 170 盐酸硫胺素 0.1 KI 0.83 蔗糖 30g/L H3BO3 6.2 琼脂 4~8g/L MnSO4·4H2O 22.3 ZnSO4·7H2O 8.6 Na2MoO4·2H2O 0.25 CuSO4·5H2O 0.025 CoCl2·6H2O 0.025 FeSO4·7H2O 27.8 Na2·EDTA·2H2O 37.3

一个完善的培养基配方中，应该包括一下几个部分，分别为：无机营养成分、有机营养成分、植物激素，琼脂，其他成分。 大量元素：氮，磷，钾，硫，钙，镁等。（1）无机营养成分： 微量元素：硼，锰，锌，钼，铜，铁，钴等。（国际植物生理学会建议，植物所需要的元素浓度大于0.5mmol/L的为大量元素，而小于0.5mmol/L的则为微量元素） （a）维生素类：如：硫胺素（维生素B1）, 吡哆醇（维生素B6),烟酸（维生素B3） 抗坏血酸（维生素C) (b) 氨基酸类：如甘氨酸，丙氨酸，谷氨酸等 （2)有机营养成分：(c) 复杂的天然混合物：如：椰乳（CM）， 水解络蛋白（CH）,麦芽浸出物（ME), 番茄汁等 （d)作为碳源的糖：常用的碳源为蔗糖， 葡萄糖和果糖也是较好的碳源。 （e) 肌醇：肌醇在糖类的相互转化中起作 用，是细胞壁的构建材料。肌醇参与碳水化合物，磷脂代谢及离子平衡等生理活动，具有帮助活性物质发挥作用的效果，能促进愈伤组织生长，对胚状体和芽的形成也有良好的促进作用。肌醇一般用量为：50~100mg/L，在培养基中加入少量肌醇就能促进维生素B1效应的发挥。但肌醇常可由磷酸葡萄糖转变二次，并进 一步转化为果胶物质，因此，在快速繁殖中有时也可省去不用。

MS培养基及配制注意事项

一、MS培养基母液的配制 注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。 2．微量元素母液的配制 按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，

定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。 3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。 5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。 1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。 2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。 ．生长调节剂母液配制： 为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。 不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。激动素（KT）和6-苄基嘌呤（BA）可溶于少量1mol/L的盐酸中，叶酸需用少量稀氨水溶解。 称取50mg生长调节物质，溶解后，在100ml的容量瓶中定容，配制的母液每毫升则含有生长调节物质0.5mg，配制后一般要求在低温（0~4℃）保存，配制培养基时如每升（1000ml）需添加的生长调节剂物质为0.5mg时，则取1ml母液即可。 二、培养基配制和灭菌 一．养培养基配制程序 (一).母液吸取量的计算 配制培养基的升数 公式1：母液吸取量= 母液体积（CC）×—————————— 母液浓缩倍数 培养基要求的含量 公式2：母液吸取量= ———————————（各种生长调节剂） 母液每CC的含量 （二）各种母液按顺序编号排列 A.大量元素； B.CaCl2.2H2O； C.微量元素； D.铁盐； E.有机物；F．生长素萘乙酸（NAA）：配制0.5mg/ml的NAA称取50mg ， NAA用少量95% 酒精溶解后加蒸馏水定容至1000ml；G..细胞分裂素、激动素（KT）配制0.5mg/ml的KT 称50mgKT 用少量1N HCL溶解后,加蒸馏水定容至100ml。 (三)配制培养基（1000ml） 1.琼脂: 称取5~7g琼脂，加入300ml蒸馏水，加热溶解直至完全溶解为止. 2.蔗糖3%用质量较好的白糖代替，称取30g白糖，溶于溶有琼脂的300ml蒸馏水中。 3.各种母液的吸取（培养基1L） （1）用50ml量筒量取大量元素母液（A）和CaCl2·2H2O母液（B）各100ml （2）分别用10ml移液管或吸管吸取微量元素（C），铁盐（D）母液各10ml

MS培养基的配制

MS培养基的配制 1、配制几种母液 （1）配制MS大量元素母液 一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。 分别称取 名称重量名称重量 NH4NO3165g KH2PO4 17g KNO3190g CaCl2·2H2O 44g MgSO4·7H2O 37g 各自配成1L的母液。各自倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 （2）配制MS微量元素母液 一般将微量元素配制成100倍母液。 依次称取（注：溶好一个后，再加下一个） 名称重量名称重量 KI 0.083g Na2MoO4·2H2O 0.025g H3BO3 0.62g CuSO4·5H2O 0.0025g MnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O 0.0025g ZnSO4·7H2O 0.86g 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 注：CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O 由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。 分别称取CuSO4·5H2O 0.05g，CoCl2·6H2O 0.05g 各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。 （3）配制MS有机母液 一般配制成100倍MS有机母液。 依次称取（注：溶好一个后，再加下一个） 名称重量名称重量 肌醇10g 盐酸硫胺素（VB1）0.01g 烟酸0.05g 甘氨酸0.2g 盐酸吡哆醇（VB6） 0.05g 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 （4）配制MS铁盐母液 一般配制成100倍MS铁盐母液。 依次称取EDTA二钠 3.73g，FeSO4·7H2O 2.78g（注：溶好一个后，再加下一个） 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 所以MS母液有5种大量元素母液，加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液，共8种母液。

MS培养基配方

MS培养基母液的配制： 20×MS大量元素(1 L)：38 g KNO3，33 g NH4NO3，8.8 g CaCl2·2H2O，7.4 g MgSO4·7H2O，3.4 g KH2PO4。 200×MS微量元素(1 L)：0.166 g KI，1.24 g H3BO3，4.46 g MnSO4·4H2O，1.72 g ZnSO4·7H2O，0.05 g Na2MoO4·2H2O，0.005 g CuSO4·5H2O，0.005 g CoCl2·6H2O。 200×MS维生素和氨基酸(1 L)：20 g肌醇，0.1 g烟酸，0.1 g盐酸吡哆醇(VB6)，0.02 g盐酸硫胺素(thiamine hydrochloride, VB1)，0.4 g甘氨酸。 200×MS铁盐(1 L)：5.56 g FeSO4· 7H2O，7.46 g Na2EDTA· 2H2O，先溶于500 mL ddH2O，加热，调pH至5.5，定容至1 L。 注意： 配制大量元素母液时，为避免产生沉淀，要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用分析纯。化学药品先以少量重蒸馏水充分溶解后然后混合，混合时需注意边搅拌边混合。CaCl2·2H2O要在最后单独加入，在溶解CaCl2·2H2O 时，蒸馏水需加热沸腾，除去水中的CO2，以防沉淀。 配制铁盐母液时，FeSO4和Na2-EDTA 应分别加热溶解后混合，并置于磁力搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色(约加热20-30 min)，调pH值至5 .5，室温放置冷却后，再冷藏。 使用上述配好的母液，按照稀释倍数，配制基础MS培养液： 1×MS大量元素，1×MS微量元素，1×MS维生素和氨基酸，1×MS铁盐，蔗糖30 g/L，定容后调节pH至5.8，高温高压灭菌。固体培养基含植物凝胶3.5 g/L或琼脂9 g/L。 另MS基本培养基可用Murashige and Skoog Basal Salt Mixture (Sigma-Aldrich)快速配制。 播种方法： 将烟草种子在自然条件下进行浸种处理（无菌水中浸泡100h），自然晾干后依次用酒精（70%）和汞（0.1%）进行消毒处理，最后用无菌水洗涤3-5次，彻底清除残留于种子表面的汞。将消毒后的种子在无菌条件下播于MS固体培养基上，放入(25±2)℃的光照培养箱中培养。培养30d后取样测定。

实验一MS培养基的配制

实验一MS培养基的配制 一、实验目的： 了解MS培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程和分装方法。 二、实验材料与仪器： 电子天平、量筒、烧杯、玻璃棒、组培瓶、移液器、6种母液、白沙糖、琼脂、氢氧化钠、盐酸、酸度计或pH试纸。 三、实验方法与步骤 1、母液配制 （1）大量元素(母液Ⅰ) (2) 微量元素(母液Ⅱ) (3) 铁盐(母液Ⅲ) (4) 有机成分(母液Ⅳ) ⅣA 和ⅣB (5) 植物生长调节物质(6－BA，NAA)以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为100倍浓缩液。 2、1 L固体MS培养基配制 （1）用电子天平称出8 g琼脂粉和 30 g蔗糖放在烧杯中，加入少量的蒸馏水在微波炉中加热使之溶解。 （2）用量筒从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50 ml，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB 各10ml。 （3）最后用蒸馏水定容到1 L；用 2 mol/L NaOH 或 2 mol/LHCL 溶液调节培养基的 pH 值至 5.8～6.0。 （4）用量筒量取100ml液体培养基分装在组培瓶里，再用移液器取适量的6－BA和NAA放入组培瓶里。 （5）在 1.1kg/cm2 压力（约 121℃）高压灭菌锅中灭菌 15～20 min；灭菌后，放置于室温自然冷却凝固待用。 3、实验分组 本实验分五组，每组负责配制一组培养基组合： （1）MS+0.1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA （2）MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA （3）MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA （4）MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA （5）MS+3mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA 4、其他需要灭菌的实验材料 剪刀、镊子、蒸馏水、滤纸、培养皿、组培瓶。 四、分析 1.MS母液分得更加细，一般实验室只分大量元素、微量元素、铁盐、有机成分四大类。这里将大量元素中钙离子与硫酸根离子分开配，避免产生不溶物，将硼酸也单独列出来。另外，培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累。 2. 配固体MS培养基时一定要调pH值，如果pH值较小，培养基不易凝固。 3. 有些激素可以高压灭菌，如6-BA和NAA，有些则不能高压灭菌，如IAA 和玉米素(ZT)。

MS培养基配制

培养基的配制 植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。MS培养基的配制包括以下步骤。 培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时，取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀释，制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。 大量元素(母液Ⅰ) mg／L NH4NO3 33 000 KNO3 38 000 CaCl2·2H2O 8 800 MgSO4·7H2O 7 400 KH2PO4 3 400 微量元素(母液Ⅱ) KI 166 H3BO3 1 240 MnSO4·4H2O 4 460 ZnSO4·7H2O 1 720 Na2MoO4·2H2O 50 CuSO4·5H2O 5 CoCl2·6H2O 5 铁盐(母液Ⅲ) FeSO4·7H2O 5 560 Na2-EDTA·2H2O 7 460 有机成分(母液Ⅳ) ⅣA 肌醇20 000

ⅣB 烟酸100 盐酸吡哆醇(维生素B6) 100 盐酸硫胺素(维生素B1) 100 甘氨酸400 以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。 上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。 母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O 分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。 各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。 MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0.1 mg/mL)。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。 配制培养液用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50 mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2，4-D 5 mL、NAA 1 mL，与各种母液一起放入烧杯中。 配制培养液时应注意：①在使用提前配制的母液时，应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液的瓶子，如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，应立即淘汰这种母液，重新进行配制；②用量筒或移液管量取培养基母液之前，必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次；③量取母液时，最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上，量取1种，划掉1种，以免出错。 溶化琼脂用粗天平分别称取琼脂9 g、蒸糖30 g，放入1 000 mL 的搪瓷量杯中，再加入蒸馏水750 mL，用电炉加热，边加热边用玻

MS培养基配制方法-new

MS 培养基 一、大量元素 母液1：大量A 母液2：大量B 母液3：Fe盐 注：配制顺序如下 1. 称取3.73 g Na2-EDTA?2H2O溶解于200 ml去离子水中，并置于70℃预热(A)； 2. 称取2.78 g FeSO4?7H2O溶解于200 ml去离子水中(B)； 3. 将B缓慢倒入A中混合，边倒边搅动，置于70 ℃水浴锅中螯合2 h； 4. 冷却后定容至1 L。 二、微量元素 母液4：微量 三、有机物质 母液5：有机（不含肌醇） ℃ 注：配固体培养基可在调pH后加适量Agar或Phytagel；肌醇也可加入有机母液。

四、抗生素和激素母液 试剂名称配制方法母液浓度Amp（氨苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Km（卡那霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Str（链霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Cb（羧苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌250 mg/ ml 6-BA (6-苄基嘌呤) 1M NaOH或盐酸溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml NAA（萘乙酸）1M NaOH溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml IAA 95% 乙醇溶解，双蒸水定容，过滤灭菌 1 mg/ ml 五、乙酰丁香酮(Acetone-syringone, AS) 称取196.2 mg AS用10 ml DMSO溶解，母液浓度100 mM，-20℃避光保存，工作浓度100 ~ 200 μM 六、MS溶液的混合 5种母液分别依次加入到800 ml蒸馏水中，混匀后加入肌醇、蔗糖和能高压灭菌的激素（6-BA和NAA），定溶至1000 ml，用1M NaOH调pH至5.8。最后加Phytagel （Sigma）4.4g或Agar 10g。 灭菌完后，在培养基凝固前加入AS或抗生素及不能高压灭菌的激素（IAA）。

实验三、MS培养基的配制

实验三、MS培养基的配制 一、目的要求 使学生掌握MS培养基配制、灭菌的基本程序。 二、材料与用具 配制MS培养基所需要的母液、药品、生长调节物质、天平、烧杯、量筒、蒸馏水、95%的酒精或0.1mol/L的NaOH、0.1mol/LHCL、三角瓶、培养瓶。 三、实验内容每组配制MS + 6-BA 1.0 mg/L 培养基1升 四、方法步骤 1. 准备工作：准备所需的母液、烧杯、量筒、移液管、玻棒、三角瓶（或其它容器）、橡皮筋、盖膜纸等物品。 2. 配制： ①称取琼脂（6~10g/L）加入总量80%的水中，置小铝锅中加热，边加热边搅拌，防止糊底。旺火煮开，再用文火加热，直至琼脂全部融化即清澈见底为度。 ②称取蔗糖（30g/L），待琼脂完全溶解后加入。 ③按需要量用移液管分别吸取各种母液及生长物质，在蔗糖后加入。（大量元素母液50ml、微量元素母液1ml、铁盐母液10ml、有机物母液10ml。 ④按配方移取6-BA母液） ⑤定容至设定量 ⑥调PH值为5.8（用0.1N NaOH或0.1N HCl） 3. 分装与封口 配好的培养基要趁热分装，100ml的容器每瓶约装入30~40ml培养基，（占培养容器的1/4~1/3）。分装时不要把培养基弄到管壁上，以免日后污染。 分装完成后及时用聚丙烯薄膜封口，并做好标记，写上培养基种类。 4、高压灭菌

（1）打开锅盖，加水至水位线； （2）将已装好培养基的三角瓶装入锅内，然后盖上锅盖，对角旋紧螺丝（不能漏气）； （3）接通电源加热，加压前打开放气阀，放尽锅内的冷空气； （4）加压至压力达到1.1~1.4Mpa（121℃以上）保持20分钟后，停止加热；（5）切断电源使压力锅内的压力降至“0”时，打开放气阀排除剩余蒸汽，然后打开锅盖，取出培养基，放于平台上冷凝，待用。 四、作业 (1) 培养基包括哪些成分?各有什么作用? (2) 简要说明MS培养基的基本组成? (3) 配制培养基时，为什么要先配母液?如何配制母液?

实验一 MS培养基配制和灭菌

实验一MS培养基配制和灭菌 一．目的和要求： 1. 学会MS培养基的制作方法; 2. 掌握高压灭菌的方法和基本操作。 二、仪器与试剂 1. 仪器：灭菌锅、解剖刀、枪状镊子、烧杯（500ml）、培养皿、移液管等 2. 试剂：MS的Macro-e、Micro-e、有机母液、Fe盐、肌醇蔗糖，琼脂粉，1N NaoH 和1N HCl 三、方法步骤 （一）配方设计: 以MS为基本培养基（mg/L） （二）配制培养基 (1)溶化琼脂：量取300ml左右蒸馏水，加入4.8g琼脂粉，加热溶解直至完全融化。 (2) 各种母液的吸取：Macro-e 50ml Micro-e 1ml 有机成分1ml Fe盐5ml 肌醇10ml 加在一起，倒入烧杯（1L) （3）加入糖:称取30g 蔗糖，溶于溶有琼脂的300ml 蒸馏水中。

（4）根据实验设计，量取生长调节剂:加在一起，倒入烧杯。 （5）定容:加蒸馏水（用量杯）。 （6）调节pH至，用pH试纸进行测定，用1molHcl或1Mol NaoH调节。 （7）分装:30～40 ml/瓶6，培养基勿碰三角瓶口。 （8）用具清理和洗涤：各种母液按原位置摆整齐，用过的量筒，移液管、烧杯、铝锅等用水洗涤干净，然后按次序放回原处。 （三）灭菌：用高压蒸汽消毒器灭菌，其压力为～,温度为120～126℃，保持15~20 min。 具体操作步骤： 1. 加水； 2. 把包扎好的培养基装入高压锅； 3. 盖上热压锅盖,上紧螺帽(注意对角拧紧螺帽)关上气阀和安全阀； 4. 加热； 5. 排除冷空气； 6. 排除冷空气后,关闭放气阀，待压力升到1Kg位置时，开始计算灭菌时间，一般在1Kg 压力(121℃)下灭菌15~20 分钟即可，但要注意保持稳定压力。 7. 灭菌时间达到20 分钟后，停止加热，待压力自动降到0磅时，打开放气阀，打开热压灭菌锅盖(注意对角扭松螺帽)稍待冷后再把培养基取出。 四.作业 1. 总结配制培养基的注意事项。 2. 制作培养基前为何要提前配制母液

MS培养基配方

实验八MS培养基的配制和灭菌 一、实验目的： 了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程和分装方法。 二、实验材料： 天平、牛角匙、量筒、烧杯、搅拌机、胶桶、组培瓶、6种母液、白沙糖、活性炭、卡拉胶。 三、方法步骤 1、母液配制 大量元素(母液Ⅰ) mg／L 100ml。(2) 微量元素(母液Ⅱ) (3) 铁盐(母液Ⅲ) (4) 有机成分(母液Ⅳ) ⅣA 和ⅣB (5) 植物生长调节物质(2，4-D，NAA)以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为10倍浓缩液外，其余的均为100倍浓缩液。 其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。 母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。 各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。 MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0.1 mg/mL)。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。 2、培养基配制 （1）配制培养液用量筒从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为100 ml，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各10ml。再取2，4-D 10ml、NAA 2ml，与各种母液一起放入烧杯中。 （2）称取54g卡拉胶；300g蔗糖；活性炭1g。 （3）在胶桶中加入规定量的各种母液，包括生长调节物质。 （4）加水定容至1升，开搅拌机，搅匀混合液。定容至10升，搅匀。 （5）向母液混合物加入白沙糖，继续搅拌；然后停一下搅拌机再加卡拉胶，开搅拌机混匀；

ms培养基配制方法

MS培养基的配制 2005-12-22 23:49:26 阅读7485次 植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。MS培养基的配制包括以下步骤。 培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时，取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀释，制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。 大量元素(母液Ⅰ) mg／L NH4NO3 33 000 KNO3 38 000 CaCl2·2H2O 8 800 MgSO4·7H2O 7 400 KH2PO4 3 400 微量元素(母液Ⅱ) KI 166 H3BO3 1 240 MnSO4·4H2O 4 460 ZnSO4·7H2O 1 720 Na2MoO4·2H2O 50 CuSO4·5H2O 5 CoCl2·6H2O 5 铁盐(母液Ⅲ) FeSO4·7H2O 5 560 Na2-EDTA·2H2O 7 460

有机成分(母液Ⅳ) ⅣA 肌醇20 000 ⅣB 烟酸100 盐酸吡哆醇(维生素B6) 100 盐酸硫胺素(维生素B1) 100 甘氨酸400 以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。 上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。 母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5 5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。 各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。 MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L 的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。 配制培养液用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50 mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2，4 D 5 mL、NAA 1 mL，与各种母液一起放入烧杯中。 配制培养液时应注意：①在使用提前配制的母液时，应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液的瓶子，如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，应立即淘汰这种母液，重新进行配制；②用量筒或移液管量取培养基母液之前，必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次；③量取母液时，最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上，量取1种，划掉1种，以免出错。 溶化琼脂用粗天平分别称取琼脂9 g、蒸糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸馏水750 mL，用电炉加热，边加热边用玻璃棒搅拌，直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中，最后加蒸馏水定容至1 000 mL，搅拌均匀。 需要注意的是，在加热琼脂、制备培养基的过程中，操作者千万不能离开，否则沸腾的琼脂外溢，就需要重新称量、制备。此外，如果没有搪瓷量杯，可用大烧杯代替。但要注意大烧杯底的外表面不能沾水，否则加热时烧杯容易炸裂，使溶液外溢，造成烫伤。

MS固体培养基的配制

MS固体培养基的配制 一、实验目的 通过实验实训，掌握MS固体培养基的配制技术及操作技能。二、材料与用具 配制MS培养基的各种母液、生长调节物质母液、琼脂、蔗糖、蒸馏水、移液管、量筒、电饭煲、全自动高压灭菌器、pH试纸、0.1mol/L 的NaOH、0.1mol/L的HCl、培养瓶、标签、铅笔等。 三、方法与步骤 （一）按母液顺序和规定量，用吸管提取母液，放入盛有一定量（150-200ml）纯净水的量筒中。 母液一 30ml/L 母液二 15ml/L 母液三15ml/L 母液四 15ml/L 母液五30ml/L 母液六7.5ml/L 1-8组4人配1L，9-10组3人配1L。 （二）加入植物生长调节物质加入的具体调节物质与量视培养物不同而异（本次实验不加生长调节剂）。 （三）定容加纯净水定容至1000ml。 （四）倒入预先用铅笔标好刻度的电饭煲中。

（五）加糖、加热：加入蔗糖20g/L并开始加热。 （六）加琼脂粉12g/L：在电饭煲中给培养基加温至冒热气时均匀缓慢地加入琼脂粉，用玻璃棒不断搅拌至全部熔解并煮沸。 （七）调节pH值：煮沸后，用试纸测试pH值，用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl把培养基的pH调整到5.6—5.8；加水至预先标注的刻度处，煮沸1-2分钟。 （八）培养基分注把配置好的培养基用烧杯分注到培养瓶中，分注前用量筒量取30ml水倒入培养瓶测试，每瓶装30ml（3瓶/100 ml）左右。分注后立即加盖，贴上标签，注明培养基的名称、配制时间、配制人姓名。 （九）培养基灭菌，无菌水、无菌瓶、无菌纸片制作。 1.将蒸馏水注入灭菌腔，直至水流进入水位板中间的水位指示器。 2.将待灭菌的物品放入提篮中，将提篮放入灭菌腔中。 3.插上电源，打开开关。 4.旋紧“排汽旋钮”，关闭灭菌腔盖，直至指示灯“LOCKED”亮起。 5.选择灭菌程序，按“SET/ENT”键设置温度为121℃，保温时间20min。 6.长按“START”键开始灭菌。 7.灭菌结束时，所有程序执行完毕且温度低于80℃时，指示灯“COMP”闪烁，系统发出5声长声。 8.先旋松“排汽旋钮”，打开灭菌腔盖，待蒸汽散开戴上隔热手

MS培养基配置操作步骤

MS培养基配置操作步骤 MS培养基是目前使用普遍的培养基、具有较高无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存和消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不会影响离子间的平衡。 MS固体培养基可用于诱导愈伤组织，也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养，液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。 MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适，足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此，一般情况下，不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。和其它培养基的基本成分相比，MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高，这是它的显著特点。（吉至试剂） 培养基配置步骤： 1、融化琼脂用粗天平分别称取琼脂9g蒸糖30g，放入1000ml的搪瓷量杯中，再加入蒸馏水750mL用电炉加热边加热边用玻璃棒搅拌，直到液体呈半透明状。然后在将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中，最后加蒸馏水定容至1000mL搅拌均匀， 2、在加热琼脂、制备培养基的过程中，操作者千万不能离开，否则沸腾的琼脂外溢，就需要重新称量、制备。此外、如果没有搪瓷量杯，可使用大烧杯代替。但要注意大烧杯底外表面不能沾水，否则加热时烧杯容易炸裂，使溶液外溢，造成烫伤。 3、PH用滴管吸取物质的量浓度为1mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入融

化的培养基中，边滴边搅拌，直到培养基PH为5.8. 4、培养基的分装、融化的培养基应趁热分装，分装时、现将培养基倒入烧杯中，然后将烧杯中的培养基倒入锥形（50mL或100mL）瓶中。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上，锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5-1/4.每1000mL培养基可分装25-30瓶。

MS培养基的配制,灭菌等注意事项

一、MS培养基母液

注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml 烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。 2．微量元素母液的配制 按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。 3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。 4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。 5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。 2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。 ．生长调节剂母液配制： 为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。 不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。激动素（KT）和6-苄基嘌呤（BA）可溶于少量1mol/L的盐酸中，叶酸需用少量稀氨水溶解。 称取50mg生长调节物质，溶解后，在100ml的容量瓶中定容，配制的母液每毫升则含有生长调节物质0.5mg，配制后一般要求在低温（0~4℃）保存，配制培养基时如每升（1000ml）需添加的生长调节剂物质为0.5mg时，则取1ml母液即可。 二、培养基配制和灭菌 一．养培养基配制程序 (一).母液吸取量的计算 配制培养基的升数 公式1：母液吸取量= 母液体积（CC）×——————————

MS培养基的配置

MS培养基的配置 一、母液的配制 母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。 优点：（1）保证各物质成分的准确性； （2）便于配置时快速移取； （3）便于低温保藏。 1、MS大量元素母液（50X） 称10升量溶解在200 ml蒸馏水中。配1升培养基取20 ml。 化学药品1升量10升量 ①NH4NO31650 mg/L 16．5g ②KNO31900 mg/L 19．0g ③CaCl2·2H2O440 mg/L 4．4g ④MgSO4·7H2O370 mg/L 3．7g ⑤KH2PO4170 mg/L 1．7g 注：CaCl2·2H2O单独配置 2、MS微量元素母液（100X） 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基母液10ml。 化学药品1升量10升量 ①MnSO4·4H2O （MnSO4·H2O）22．3 mg/L （21．4 mg/L） 223mg ②ZnSO4·7H2O8．6 mg/L 86mg ③CoCl2·6H2O0．025mg/L 0．25mg ④CuSO4·5H2O0．025 mg/L 0．25mg ⑤Na2MoO4·2H2O0．25 mg/L 2．5mg ⑥KI 0．83 mg/L 8．3 mg ⑦H3BO36．2 mg/L 62 mg 注：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10=2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0．25 mg的量。 3、MS铁盐母液（100X） 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基母液10ml。 化学药品1升量10升量 Na2·EDTA37．3 mg/L 373 mg FeSO4·7H2O27．8 mg/L 278 mg 注：配制时，两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。混合时，先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。 4、MS有机物母液（200X）

MS培养基的配制步骤

MS培养基的配制步骤 大量元素(母液Ⅰ) mg／L NH4NO3 33 000 KNO3 38 000 CaCl2·2H2O 8 800 MgSO4·7H2O 7 400 KH2PO4 3 400 微量元素(母液Ⅱ) KI 166 H3BO3 1 240 MnSO4·4H2O 4 460 ZnSO4·7H2O 1 720 Na2MoO4·2H2O 50 CuSO4·5H2O 5 CoCl2·6H2O 5 铁盐(母液Ⅲ) FeSO4·7H2O 5 560 Na2-EDTA·2H2O 7 460 有机成分(母液Ⅳ)ⅣA 肌醇 20 000 ⅣB烟酸 100 盐酸吡哆醇(维生素B6) 100 盐酸硫胺素(维生素B1) 100 甘氨酸 400 以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。 上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。其中， 母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。 母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5?5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。 MS培养基中还需要加入：2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、[烈宜醄NAA)、6-苄基嘌呤(6-BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0?1 mg/mL)。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)