临床检验仪器学
一、名词解释:
灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器时所产生的响应信号值变化大小的反应能力,它反映仪器能够检测的最小被测量。
误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与标称值(即真值)之间的差异称为误差,误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。
噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(即输入为零)时,仪器输出信号的波动或变化范围即为噪音。
最小检测量:检测仪器能确切反映的最小物质含量。最小检测量也可以用含量所转换的物理量来表示。如含量转换成电阻的变化,此时最小检测量就可以说成是能确切反应的最小电阻量的变化量了。
重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。
分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输出量)的最小值。
测量范围:在允许误差极限内仪器所能测出的被检测值的范围。
线性范围:输入与输出成正比例的范围。也就是反应曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围。
示值范围:即所谓仪器量程,量程大则仪器检测性能好。
精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。
可靠性:仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下执行其功能的能力。它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。
响应时间:表示从被检测量发生变化到仪器给出正确示值所经历的时间。
频率响应范围:为了获得足够精度的输出响应,仪器所允许的输入信号的频率范围。
取样装置(加样装置):把待检测的样品引入仪器的装置。对于检测仪器来说,其取样装置就是进样器。
预处理系统:将样品先进性一系列处理,以满足检测系统对样品的各种状态要求的装置。
分离装置:将样品各个组分加以机械分离或物理区分的装置。
检测器:将样品组分的浓度或质量(含量)转换为电信号、并进行信号处理的一种传感装置。
信号处理系统:信号从检测器发出到显示出来过程中的一系列中间环节。
显示装置:它的功能就是把检测结果显示出来。一般有模拟现实和数字显示。
补偿装置:作用是消除或降低客观条件或样品的状态对检测的影响,特别是样品的温度、环境的压力、温度的波动对检
测结果的影响。
辅助装置:是为了确保仪器测量的精度、保证操作条件而设置的附加装置。
样品前处理系统(标本预处理系统):其功能包括样本分类和条码识别,自动装载和样本离心,样本质地识别、提示,样
本管去盖,样本再分注及标记。
二、简答题:
临床检验仪器常用性能指标:
灵敏度好、精度高;噪音、误差小;分辨率高,可靠性、重复性好;响应迅速;线性范围宽和稳定性好。
临床检验仪器主要部件:
取样装置、预处理系统、分离装置、检测器、信号处理系统、显示装置、补偿装置、辅助装置、样品前处理系统等。
简述医学检验仪器的发展趋势:
由计算机技术和通信技术相结合而发展的计算机网络,形成了多用户共享高精度、高速度、多功能、高可靠性的检验仪
器;临床检验仪器正朝着集大型机的处理能力和小型机的应变能力于一身,超小型、多功能、低价格、更新换代频繁、
床边和家庭型的方向迈进;模块式设计形成一个高质量多功能的检验系统,实现了一机多用;生物传感器和芯片的应用
将使检验仪器小型化,灵活多用,相应的检验仪器正在不断出现和发展;专家系统技术更趋完善,使临床检验仪器具有
更高级的智能;仪器更机器人化;自动化水平更高。检验结果标准化;仪器更个性化;仪器小型便携化。
一、名词解释:
光学显微镜:简称光镜,是利用日光照明将小物形成放大影像的精密光学仪器,由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成。光学系统由物镜和目镜组成,其核心是物镜和目镜中的两组透镜,其放大成像的机理是先由物镜形成放大的实像,再由目镜进一步放大成虚像,最后在人眼中形成实像。
荧光显微镜:是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。
相衬显微镜:是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,用于观察活细胞和未染色的标本的一种特殊显微镜。
暗视野显微镜:是利用特殊的聚光镜使照明光线斜射而不能直接进入物镜,形成暗视野,那些经过标本散射的光线才能进入物镜放大,在黑暗的背景中呈现标本明亮的轮廓的显微镜。
偏光显微镜:是利用光的偏掁特性,对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后分成两束折射光)的晶态、液晶态物质进行观察和研究的重要光学仪器。
激光扫描共聚焦显微镜:以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点,使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像,而焦面以外的漫射光不参加成像,改变焦平面,可获得细胞或原标本不同层次的图像,从而得到样品的三维结构图像。
倒置显微镜:当观测活体标本时,需要把照明系统放在载物台及标本之上,而把物镜组放在载物台器皿下进行放大成像的显微镜,又称生物培养显微镜。
紫外光显微镜:使用紫外光源进行照明的显微镜。
分辨率:也称分辨本领,指分辨物体细微结构的的能力。
放大率:或称放大倍数,是指显微镜经多次成像后最终所成(放大的)像的大小相对于原物体大小的比值。
数值孔径:又叫镜口率,是物体与物镜间媒质的折射率n与物镜孔径角的一半(β)正弦值的乘积。
显微摄影术:是利用显微照相装置,把显微镜视野中所观察到物件的细微结构真实地记录下来,以供进一步分析研究之
用的一种技术。
景深与焦长:在成一幅清晰像的前提下,像平面不变,景物沿光轴前后移动的距离称“景深”。景物不动,像平面沿光轴前后移动的距离称“焦长”。
视野:又称视场,是指通过显微镜所能看到的标本所在空间的范围。
齐焦:当某一物镜调焦清晰后,变换其它物镜时,也能基本保证焦距适当、成像清晰。
像差:光学仪器不可能使物点发出而进入系统的所有光线都是沿着高斯光学的理想光路成像,从而导致成像在形状方面
的缺陷,称之为像差。
色差: 是一种由白光或复色光在即使严格满足高斯条件下也存在的特殊类型的成像缺陷。
工作距离:是指从物镜前表面中心到被观察标本间满足工作要求的距离范围,不超过1mm。与物镜的数值孔径成反比。
一般情况下,物镜的数值孔径赿大,其工作距离赿小。
二、简答题:
安装普通光学显微镜的光学系统的操作过程及注意事项:
安装光学部件的要按自上而下的顺序进行。即先目镜、物镜再聚光镜、反射镜。物镜按照顺时针方向从低倍镜到中倍镜
再到高倍镜、油浸物镜。在安装过程中必须牢记部件之间的组装关系,避免错漏。注意保护光学元件不受损受污。
调焦的目的、要求、途径,方法:
目的:为了充分利用放大率和保证清晰成像条件。要求:使调节的系统沿着光轴方向做稳定的直线运动。途径:调焦可
以有升降镜筒移动物镜和升降载物台移动标本两种途径,实际使用中往往是双管齐下的。方法:先粗调迅速地得到标本
的像后再仔细微调获得满意的物像。
光学显微镜的工作原理:
显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统,是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们
提取物质微细结构信息的光学仪器。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜,而焦距较长,靠近眼睛、成
虚像的透镜组称为目镜。被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作
第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。
光学显微镜的结构组成:
光学系统:显微镜的主体部分,包括物镜、目镜、聚光镜及反光镜等组成的照明装置。机械系统:为了保证光学系统的
成像而配置的,包括调焦系统、载物台和物镜转换器等运动夹持部件以及底座、镜臂、镜筒等支持部件。照明设置的主要部件有光源、滤光器、聚光镜和玻片等。
显微物镜除了满足成象质量要求外还应该满足哪三个基本条件:
①同一台显微镜配用的一套物镜必须满足“齐焦”的要求。②凡物镜外壳上刻有盖波片厚度的,需要配用规定厚度的盖
玻片。③对物镜的细纹尺寸均采用同一规格,以利互换使用。
物镜要求:
①同一台显微镜配用的一套物镜必须满足“齐焦”要求。就是对同一套物镜当某一物镜调焦清晰后,变换物镜转换台的其它物镜时,能基本保证调焦适当,成像清晰。②凡物镜外壳上刻有盖波片厚度的,需要配用规定厚度的盖玻片。③对物镜的细纹尺寸均采用同一规格,以利互换使用。
目镜的“三面重合”:
在目镜的物方焦平面上设有限制物方视场的光阑,物镜所成放大的实像就成在光阑面上,用于观测的目镜上的分划板和目镜指针也安置在该光阑面上。
显微照明的方法:
反射照明:低档普通生物显微镜仅使用凹面反射镜反射自然光而不经聚光器直接给标本照明。也有使用聚光器的,同时使用凹面或平面反射镜,但光源是自然光。
临界照明:使用电光源,照明光经聚光器后再照亮标本。由于光源经聚光器透镜所成的像是和标本所在平面近于重合,既影响观察又可能会因像的亮度的不均匀使标本的照明不均匀。尽管它有着这样的缺点,但因有结构简单的优势而用于普通显微镜。
柯拉照明:可以克服临界照明的缺陷,保证标本的均匀照明。这是一种用在透射光与亮视场中的标准照明方式这种照明方式使物平面界限清晰、照明均匀,效果比较满意。
亮视场法:所谓亮视场法就是从照明器发出的光透过或经标本反射后直接射入物镜,在亮背景下显现出标本吸收或反射不良而变暗的部分,称为正反差。
暗视场法:和亮视场法相反,从照明器发出的光束不是直接射入物镜,从而造成足够暗的背景视场。标本经漫反射或以其倾角改变光的方向投射于物镜,显现出明亮的图像于暗背景之上,称为负反差。
斜照明法:当孔径光阑局部(直径的1/3~1/2)被遮并使入射光偏离其光轴则可显著地提高图像的反差,尤其是在观测线纹或划痕时效果更好。
显微镜光源照明要求:
①发射光谱接近自然光的光谱;②对物体的照明要适中、均匀;③光源不能传给镜头及标本太多的热量,以避免使它们受到损害。
光学显微镜的参数,关系:
参数:放大率、数值孔径、分辨率、视场、景深、镜像亮度、镜像清晰度、工作距离和机械筒长。
关系:显微镜的分辨率和放大倍数是两个不同的但又互相联系的性能参数。当选用的物镜数值孔径不够大、分辨率不够高时,显微镜不能分清物体的微细结构,此时即使过度增大放大倍数,得到的也只能是一个轮廓虽大但不够清晰的图像,这时的放大率称为无效放大倍数。反之如果分辨率很高而放大倍数不足时,显微镜虽已具备分辨的能力,但因图像太小仍然不能被人眼清晰地观察。所以,为了充分发挥显微镜的作用,应使显微镜物镜的数值孔径与显微镜的总放大倍数合
理匹配。同时,放大倍数与视野、景深和工作距离成反比,也会影响景象亮度。因此,显微镜的性能参数是相互联系、
相互制约的,在实际工作中,合理考虑显微镜各性能参数间的相互联系是十分重要的。
各种显微镜原理及应用对象限制:
双目显微镜: 利用一组复合棱镜把透过物镜后的光束分成强度相同的两束而形成两个中间像,分别再由左右目镜放大。必须满足:①分光后两束光的光程必须相同②两束光的光强度大小一致。
荧光显微镜: 以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到各种颜色荧光的一种光学显微镜。利用它可研究荧光物质在组织和细胞内的分布。
相衬显微镜:光线只有通过染色标本时其波长、振幅发生变化,人眼才能看见。活细胞和未染色的标本由于光的波长和振幅不发生变化,人眼看不到,但其相位有变化,因此利用光的干涉和衍射效应把透过标本不同区域的光波光程差转变成振幅差,使细胞内各种结构之间呈现清晰可见的明暗对比。
倒置显微镜:组成和普通显微镜一样,只不过物镜与照明系统颠倒,前者在载物台之下,后者在载物台之上,用于观察培养的活细胞,具有相差物镜。
暗视野显微镜:聚光镜中央有档光片,使照明光线不直接进入物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至4nm~200nm的微粒子,分辨率可比普通显微镜高50倍。
紫外光显微镜:利用紫外光源可以明显提高显微镜的分辨率,对于生物样品用紫外光照明还具有独特的效果。生物细胞中的原生质对可见光几乎不吸收,而蛋白质和核酸等生物大分子对紫外光具有特殊的吸收作用。因此,使用紫外光显微镜(ultraviolet microscope)可以研究单个细胞的组成与变化情况。
偏光显微镜:利用光的偏振特性,对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后分成两束折射光)的晶体、液晶态物质进行观察和研究的重要光学仪器。可以清楚地观察到纤维丝、纺锤体、胶原、染色体、卵巢、骨骼、毛发、活细胞的结晶或液晶态的内含物、神经纤维、肌肉纤维、植物纤维等的细微结构,从而可以分析细胞、组织的变化过程。
激光扫描共聚焦显微镜:在荧光显微镜成像的基础上装有激光扫描装置,以单色激光作为光源,使样品被激发出荧光,利用计算机进行图像处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。在显微镜载物台上加一个微量步进马达,使载物台上下移动,改变焦平面,不同层次的光切面图像经计算机图像三维重组,就能获得样品的立体结构图像。共聚焦显微镜利用激光扫描束经照明孔形成点光源对标本内焦平面上的每一点扫描,由于照明孔与检测孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明孔和检测孔,焦平面以外的点不会在检测孔处成像,可获得标本清晰的光学切面图,克服了普通光镜图像模糊的缺点。
干涉相衬显微镜:利用偏振光,有四个特殊的光学组件:偏振器、棱镜、滑行器和检偏器。
偏振器使光线发生线性偏振。在聚光器中安装了石英Wollaston棱镜,可将一束光分解成偏振方向不同的两束光(x和y),二者成一小夹角。聚光器将两束光调整成与显微镜光轴平行的方向。最初两束光相位一致,在穿过标本相邻的区域后,由于标本的厚度和折射率不同,引起两束光发生光程差。使细胞的内部结构。特别是一些较大的细胞器,如细胞核、线粒体等。立体结构特别强,因此适合应用于显微操作技术。
近场扫描光学显微镜:微探头是一个中空、针状、顶部小于150nm、内孔直径为50nm的玻璃微管,管壁镀铝膜,最终使光线只能从直径为50nm(可见波长的1/10左右)的内孔射入,微管的尾部接上十分灵敏的光量子探测器测量进入内孔的光量。近场扫描光学显微镜技术将对研究活体中的病毒和染色体等生物物质的结构和形态发挥作用。
一、名词解释:
离心现象:物体远离圆心运动的现象称为离心现象,也叫离心运动。
重力沉降:液体中的微粒受重力的作用,较重的微粒下沉与液体分开,这个现象称为重力沉降。
沉降速度:在强大离心力的作用下,单位时间内物质的运动的距离。
扩散现象:在介质中,扩散是由于微粒的热运动而产生的质量迁移现象,主要是由于密度差引起的,这种现象称为扩散现象。
R·C·F:相对离心力,是指在离心力场中,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度“g”。
沉降系数:颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度,其单位为秒。
K系数:是用来描述在一个转子中,将粒子沉降下来的效率。也就是溶液恢复成澄清程度的一个指标。
最大转速:指离心转头可达到最大转速,单位是rpm。
最大离心力:指离心机可产生的最大相对离心力场R·C·F,单位是g。
最小离心力场: 离心管顶部到旋转中心的距离为最小离心半径R min,该处承受的离心力场为最小离心力场。
最大离心力场:离心管底部到旋转中心的距离为最大离心半径R max,该处承受的离心力场称为最大离心力场。
最大容量:指离心机一次可分离样品的最大体积,通常表示为m×n。
调速范围:也叫转速设置范围,指离心机转头转速可调整的范围。
温度控制范围:指离心机工作时可控制的样品温度范围。
工作电压:一般是指离心机电机工作所需的电压。
电源功率:通常是指离心机电机的额定功率。
差速离心法:是利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别,在同一离心条件下,通过不断增加相对离心力,使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分步沉淀的离心方法。所以这个方法又称为分步离心法。
密度区带离心法:又称为区带离心法,是样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡,在一定离心力下把颗粒分配到梯度液中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。
速率区带离心法:速率区带离心方法是根据分离的粒子在离心力作用下,在梯度液中沉降速度的不同,离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内形成几条分开的样品区带,达到彼此分离的目的。
等密度区带离心法:当不同颗粒存在浮力密度差时,在离心力场下,颗粒或向下沉降,或向上浮起,一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上(即等密度点)形成区带,称为等密度区带离心法。
离心沉降:①在离心机中,离心管放于离心转头里,当离心机开动时,离心管绕离心转头的轴旋转,作圆周运动,在离心管内的样品颗粒将同样运动。②对于离心管而言,样品颗粒由顶位移到了A位,也就是由离心管顶部移到了底部,这与重力场中的由高处落到低处相似。这种颗粒在圆周运动时的切线运动称为离心沉降。
二、简答题:
使用低速离心机时特别注意的地方:
①离心机移动后,最好4h后再使用。转子长期不用时,应取出。使用时在旋转轴上涂抹润滑油。②使用离心机应使用天平确实平衡离心管,离心管放入转子时应注意位置平衡对称,否则会损坏离心机。机器运行前检查转子盖、机器盖是否盖好。③使用离心机时不可超过离心机或转子的最高转速。④离心机使用完毕,应将离心机转头室及转子清理干净归位,
以维持离心机及转子之寿命及平衡。转子严禁带离本室。
离心机的工作原理:
①离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差异进行分离、浓缩和提纯生物样品的一种方法。②悬浮液在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒以一定的速度沉降,从而使溶液得以分离。③颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。④微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态、密度、重力场的强度及液体的黏度有关。⑤离心机就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力,迫使液体中微粒克服扩散加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。
怎样克服微粒在沉降中所发生的扩散现象:
扩散现象是不利于样品的分离的,离心就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力,迫使液体中微粒克服扩散加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。
离心力的数学表达公式:
公式:Fc=m 2r=m(2πN/60)2r=(4π2N2rm/3600)式中ω是旋转角速度,N是每分钟转头旋转次数,r为离心半径,m为质量。
常用的离心方法分几类:平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法。
差速离心法的优、缺点是什么:
优点:操作简单;分离时间短、重复性高;样品处理量大。缺点:分辨率有限、分离效果差;壁效应严重;颗粒被挤压,离心力过大、离心时间过长会使颗粒变形、聚集而失活。
分析型超速离心机的工作原理及应用范围:
工作原理:其工作原理与一个普通水平转子相同。分析室有上下两个平面的石英窗,离心机中装有的光学系统可保证在整个离心期间都能观察小室中正在沉降的物质,可以通过对紫外光的吸收(如对蛋白质和DNA)或折射率的不同对沉降物进行监测。后一方法的原理是:当光线通过一个具有不同密度区的透明液,在这些区带的界面上产生光的折射。在分析室中物质沉降时重粒子和轻粒子之间形成的界面就像一个折射的透镜,结果在检测系统的照相底板上产出一个“峰”,由于沉降不断进行,界面向前推进,故“峰”也在移动,从峰移动的速度可以得到物质沉降速度的指标。
应用范围:测定生物大分子的相对分子重量;生物大分子的纯度估计;分析生物大分子中的构象变化。
离心机的分类方法,类型:
三种分类方法:按用途分、按转速分、按结构分。按用途:制备型、分析型和制备分析两用型;按转速:低速、高速、超速等离心机;按结构:台式、多管微量式、细胞涂片式、血液洗涤式、高速冷冻式、大容量低速冷冻式、台式低速自动平衡离心机等。
低速离心机、高速离心机、超速离心机的应用范围:
低速离心机:主要用作血浆、血清的分离及脑脊液、胸腹水、尿液等有形成份的分离;高速离心机:主要用于临床实验室分子生物学中的DNA、RNA的分离和基础实验室对各种生物细胞、无机物溶液、悬浮液及胶体溶液的分离、浓缩、提纯样品等;超速离心机:主要用于亚细胞器的分级分离,还可以分离病毒、核酸、蛋白质和多糖等。
超速离心机按用途分类:制备型、分析型及分析制备两用型。
各种离心机结构:
低速:电动机、离心转盘(转头)、调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件。高速:转动装置、速度控制系统、温度控制系统、真空系统、离心室、离心转头及安全保护装置等。超速(冷冻):驱动和速度控制、温度控制、真空系统和转头。
离心机转头的分类、用途:
①固定角转头:用于分离沉降速度有明显差异的颗粒样品。②甩平式转头:又分为敞开式和封闭式两种。敞开式主要用于样品的初分离。封闭式主要用于线粒体、细胞核等的分离和密度梯度离心。③连续流动转头:用于悬浮介质中高速分离较小的颗粒物质。④区带转头:用于大容量的密度梯度离心。⑤垂直转头:用于样品在短时间作密度梯度离心。
对使用离心方法的选择要求:
差速离心法的选择:若样品中存在两种以上质量和密度不同的样品颗粒,可采用差速离心法。密度梯度离心法的选择:对于有密度梯度差异的样品介质,可采用密度梯度离心法,使沉降系数比较接近的物质得以分离。等密度梯度离心法的选择:若不同样品颗粒的密度范围在离心介质的密度梯度范围内,离心时密度不同的物质颗粒因浮力差异或向下沉降,或向上漂浮,一直移到它们各自密度恰好对应的位置(等密度点),形成区带。可采用等密度梯度离心。
离心机分离样本时的离心时间、温度和pH的确定,意义:
离心时间的确定:依据离心方法的不同有所差别。对于差速离心来说,是指某种颗粒完全沉降到离心管底的时间;对等密度梯度离心而言,是指颗粒完全到达等密度点的平衡时间;密度梯度离心所需的离心时间则是指形成界限分明的区带的时间。温度和pH值的确定:是为了防止欲分离物质的凝集、变性和失活,除了在离心介质的选择方面加以注意外,还必须控制好温度及介质溶液的pH值等离心条件。
在使用离心机时应注意哪些问题:
①使用各种离心机时,必须事先平衡离心管和其内容物,要对称放置,转头中绝对不能装载单数的管子,以便使负载均匀地分布在转头的周围:②装载溶液时,使用开口离心机时不能装得过多,以防离心时甩出,造成转头不平衡、生锈或被腐蚀。制备型超速离心机的离心管,则要求必须将液体装满,以免离心时塑料离心管的上部凹陷变形。严禁使用显著变形、损伤或老化的离心管:③离心过程中应随时观察离心机上的仪表是否正常工作,如有异常的声音应立即停机检查,及时排除故障。未找出原因前不得继续运转。
离心机转头的使用、消毒及保养方式:
转头是离心机中须重点保护的部件,每次使用前要严格检查孔内是否有异物和污垢,以保持平衡;每次使用后,必须仔
细检查,并用温水(500C-600C)及中性洗涤剂浸泡清洗或定期用消毒液消毒(每周消毒一次),最后用蒸馏水冲洗,软布擦干后用电吹风吹干、上蜡、干燥保存。每一转头都应有使用档案,记录累积的使用时间,若超过了该转头的最高使用时限,则须按规定降速使用。
离心机的保养:在日常使用离心机的过程中,每隔三个月应对主机校正一次水平度,每使用5亿转处理真空泵油一次,每使用1500小时左右,应清洗驱动部位轴承并加上高速润滑油脂,转轴与转头接合部应经常涂酯防锈,长期不用时应涂防锈油加油纸包扎,平时不用时,应每月低速开机1-2次,每次0.5小时,保证各部位的正常运转。
离心机电机不转时应怎样进行检查:
(1)主电源指示灯不亮,检查保险丝是否熔断,电源线、插头、插座是否接触良好。(2)主电源指示灯亮而电机不能启动。①检查波段开关,瓷盘变阻器损坏或其连接线是否断脱。②检查磁场线圈的连接线断脱或线圈内部短路③检查真空泵表及油压指示值。
离心机机体震动、响声异常,常见的原因:
①离心管重量不平衡,放置不对称;②转头孔内有异物,负荷不平衡或使用了不合格的试管套;③转轴上端固定螺帽松动,转轴摩擦或弯曲;④电机转子不在磁场中心会产生噪音;⑤机座上减震弹簧的固定螺丝松动或其中一根弹簧断裂;
⑥转子本身损伤。
离心分离技术在实际工作中应用的范围:
离心分离技术已成为常规的分离、纯化、鉴别各种生物大分子的不可缺少的方法。高(超)速离心机已成为生物、医学、化学、农业实验室必不可少的实验设备。在生物化学领域,超速离心技术广泛应用于蛋白质、酶、激素、核酸和病毒的研究。
简述国内外新型离心机的类型及应用特点:
我国研制的SS型三足式离心机是一种过滤式离心机,结构简单、操作方便、分离时颗粒不易破坏,已广泛应用于各行业和科研实验室。国外研制的P2离心机将拥有更强大的转子,旋转速度更快,浓缩能力更强的新式离心机。俄罗斯利萨马拉医科大学的专家,已研制了使下肢骨折患者更快地康复的新型医用离心机并应用于临床治疗。
离心方法目前发展的现状:
目前,离心方法已逐渐走向规范化、标准化、专业化。各种专用离心机不断出现,对所分离样品由计算机自动控制程序设定了一定的转速、相对离心力及离心时间等。
一、名词解释:
激发光谱:将激发光的光源用单色器分光,连续改变激发光波长,固定荧光发射波长,测定不同波长的激发光照射下,物质溶液发射的荧光强度的变化,以激发光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标作图,即可得到荧光物质的激发光谱。从激发
光谱图上可找出发生荧光强度最强的激发波长λex。
荧光光谱:选择λex作激发光源,并固定强度,而让物质发射的荧光通过单色器分光,测定不同波长的荧光强度。以荧光波长作横坐标,荧光强度为纵坐标作图,便得荧光光谱。荧光光谱中荧光强度最强的波长为λem 。荧光物质的最大激发波长(λex)和最大荧光波长(λem)是鉴定物质的根据,也是定量测定中所选用的最灵敏的波长。
光谱分析:对物质发射辐射能的能谱分析或对辐射能与物质相互作用引起的能谱改变的分析均称为光谱分析。
吸收光谱:光照射到物质时,一部分光会被物质吸收。在连续光谱中某些波长的光被物质吸收后产生的光谱被称作吸收光谱。每一种物质都有其特定的吸收光谱,因此可根据物质的吸收光谱来分析物质的结构和含量。
发射光谱:一部分物质分子或原子吸收了外来的能量后,可以发生分子或原子间的能级跃迁,所产生的光谱称为发射光谱,包括线状光谱、带状光谱及连续光谱。通过测定物质发射光谱可以分析物质的结构和含量。
摩尔吸光系数(ε):摩尔吸光系数表示在一定波长下测得的液层厚度为1cm, 溶液浓度c为1mol/L时的稀溶液吸光度值。吸光系数与入射光波长、溶液温度、溶剂性质及吸收物质的性质等多种因素有关。当其它因素固定不变时,吸光系数只与吸收物质的性质有关,可作为该物质吸光能力大小的特征数据。
分光光度计:能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器称为分光光度计。它具有分析精密度高、测量范围广、分析速度快和样品用量少等优点。根据所使用的波长范围不同可分为紫外光区、可见光区、红外光区以及万用(全波段)分光光度计等。
荧光:某些物质吸收光能量后,可发射波长与激发光波长相同或不同的光,当激发光源停止照射试样,再发射过程立即停止,这种再发射的光称为荧光。按照来源不同可分为分子荧光和原子荧光。荧光的发生和强度与物质的分子(或原子)结构有着密切的关系。通过测定物质分子产生的荧光强度可进行物质的定性与定量分析。
基态原子:气态分子在高温下吸收热量,由于热分解呈原子状态。
朗伯-比尔定律:是比色分析的基本原理,表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。当用一束单色光照射吸收溶液时,其吸光度A与液层厚度b及溶液浓度的乘积c成正比,此即朗伯-比尔定律。数学表达式为: A =kbc。它适用于分子吸收和原子吸收。适用范围:单色光、稀溶液。
单色器:将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束的装置,是分光光度计的关键部件。主要由入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜组成。
吸收池:又称为比色皿、比色杯、样品池或液槽等,是用来盛放被测溶液的器件,同时也决定着透光液层厚度,可用塑料、玻璃、石英或熔凝石英制成。在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;在紫外区,需用能透紫外线的石英或熔凝石英制作。
外光电效应:光照射在某些金属表面,会有光电子从金属表面逸出,这种光电效应称为外光电效应。利用外光电效应可以制成光电管和光电倍增管。
内光电效应:光深入到物体内部,将物体内部原子中的一部分束缚电子激发成自由电子,但这些电子并不逸出物体,而是
留在物体内部从而使物体导电性增强,这种效应称为内光电效应。利用内光电效应,可制成光敏电阻(阻值随光照强度而明显改变)、光敏二极管(二极管接上反向电压,没有光照时呈反向截止状态,有光照射时,反向电流明显增大,经三极管放大后再推动继电器工作)以及光电池。
光电管:利用碱金属的外光电效应制成的光电转换元件。按电极结构不同可分为中心阳极式、中心阴极式和平行平板式几种,按管内充气与否又可分为真空光电管与充气光电管两种。光电管的质量取决于阴极灵敏度、线性范围、最大、最小可测能量等几个重要技术指标。
光电倍增管:利用外光电效应与多级二次发射体相结合而制成的光电元件,由一个表面涂有光敏材料的阴极和若干个(通常为9个~13个)二级电子发射极(打拿极)组成,其灵敏度比光电管高200多倍。有三个重要指标:波长效应、灵敏度和噪声水平。
光电二极管阵列:检测器为多道光检测器,可同时检测多个波长的光强度。它是由一行光敏区和二行读出寄存器构成。光电二极管阵列不怕强光、耐振动、耐冲击、重量轻、耗电少、寿命长、光谱响应范围宽、量子效率高、可靠性高、读出速度快。
光电池:某些半导体材料受光照射时,背光面和受光面之间会产生电位差。在两面之间可检测到电流。这种光电转换元件即为光电池。常用的有硒光电池、硅光电池等。光电池所产生的光电流与入射光强成正比。光电池的优点是结实、便宜、使用方便,不用外接电源,只要受光照射,便能产生电流,应用起来很方便。缺点是容易受潮而使其产生的电流大小不稳定。
电荷耦合器件:一种新型固体多道光学检测器件,是在大规模硅集成电路工艺基础上研制而成的模拟集成电路芯片。它可以借助必要的光学和电路系统,将光谱信息进行光电转换、储存和传输,在其输出端产生波长-强度二维信号,信号经放大和计算机处理后在末端显示器上同步显示出人眼可见的图谱,无须感光板那样的冲洗和测量黑度的过程。
波长准确度:指仪器波长指示器上所示波长值与仪器此时实际输出的波长值之间的符合程度。可用二者之差来衡量分光光度计的准确性。
波长重复性:是指在对同一个吸收带或发射线进行多次测量时,峰值波长测量结果的一致程度。通常取测量结果的最大值与最小值之差来作为衡量分光光度计的准确性指标之一。
光度准确度:指仪器在吸收峰上读出的透射率或吸光度与已知真实透射率或吸光度之间的偏差。该偏差越小,光度准确度越高。
光度线性范围:指仪器光度测量系统对于照射到接收器上的辐射功率与系统的测定值之间符合线性关系的功率范围,也就是仪器的最佳工作范围。在此范围内测得的物质的吸光系数才是一个常数。这时候仪器的光度准确度最高。
分辨率:指仪器对于紧密相邻的峰可分辨的最小波长间隔,它是分光光度计质量的综合反映。单色器输出的单色光的光谱纯度、强度以及检测器的光谱灵敏度等是影响仪器分辨率的主要因素。
光谱带宽:指从单色器射出的单色光(实际上是一条光谱带)最大强度的1/2处的谱带宽度。它与狭缝宽度、分光元件、
准直镜的焦距有关,可以认为是单色器的线色散率的倒数与狭缝宽度的乘积。
基线稳定度:指在不放置样品的情况下,分光光度计扫描100%T或0%T时读数偏离的程度,是仪器噪声水平的综合反映。一般取最大的峰缝之间的值作为绝对噪声水平。如果基线稳定度差,光度准确度就低。
基线平直度:指在不放置样品的情况下,扫描100%T或0%T时基线倾斜或弯曲的程度,是分光光度计重要性能指标之一。在高吸收时,0%线的平直度对读数的影响大;在低吸收时,100%线的平直度对读数的影响大。光学系统的失调、两个光束不平衡、仪器振动等都影响基线平直度。基线平直度不好,可使样品吸收光谱中各吸收峰间的比值发生变化,给定性分析造成困难。
原子化器:原子化器是在原子吸收光谱仪中提供能量将液态试样中的待测元素干燥蒸发使之转变成原子态蒸气的部件。常用的有火焰原子化器和无火焰原子化器两种。火焰原子化器常用的是预混合型原子化器,无火焰原子化器常用的是石墨炉原子化器。
特征浓度:指产生1%吸收或0.0044吸光度时所对应的被测元素的浓度或质量。可作为原子吸收光谱仪对某个元素在一定条件下的分析灵敏度。特征浓度S值越小,表示分析灵敏度越高。
检出限:表示在选定的实验条件下,被测元素溶液能给出的测量信号3倍于标准偏差时所对应的浓度(单位:mg/L)。无火焰光谱法中常用绝对检出限表示,单位为g。它是原子吸收光谱法中一个很重要的综合性技术指标,既反映仪器的质量和稳定性,也反映仪器对某元素在一定条件下的检出能力。检出限越低,说明仪器性能越好,对元素的检出能力越强。原子发射光谱法:根据处于激发态的待测元素原子回到基态时发射的特征谱线对待测元素进行分析的方法。
摄谱仪:用光栅或棱镜做色散元件,用照相法记录光谱的原子发射光谱仪器。根据色散元件的不同把摄谱仪分为棱镜摄谱仪和光栅摄谱仪两种。
光电直读光谱仪:用光电倍增管接收和记录谱线的原子发射光谱仪器称为光电直读光谱仪。光电直读光谱仪与摄谱仪的区别在于用光电倍增管和有关电子电路代替感光板。分为多道直读光谱仪、单道扫描光谱仪和全谱直读光谱仪三种。前两种仪器采用光电倍增管作为检测器,后一种采用固体检测器。
原子荧光光谱分析法:利用原子荧光谱线的波长和强度进行物质的定性与定量分析的方法。在一定实验条件下,被测元素的浓度与荧光强度成正比,因而可据此对物质进行定量分析。
二、简答题:
用紫外-可见光光度计进行样品浓度测定的主要注意事项:
①使用稀溶液,选用特征波长测定;②彻底清洗比色皿;③使用前注意调“0”和“100%”。
原子吸收分光光度计中原子化器的种类和作用:
常用的原子化器有火焰原子化器、无火焰原子化器和氢化物原子化器。作用是将试样中的待测元素转变成原子态的蒸气。原子吸收分光光度法进行定量分析的基本原理:
待测元素的化合物在高温中被解离成基态原子,形成原子蒸汽。光源灯发射出的特征波长辐射,通过基态原子蒸汽,被选择吸收,吸收程度的大小与基态原子数成正比。
荧光分光光度计RF—540在结构上克服光源灯的光强度变化所带来的测量误差:
设计有监控用的光电检测元件。当光源灯的光强随电压增加而增大时,监控用的光电管检测到这一变化后,通过负反馈系统,降低用光电检测元件(光电倍增管)上的负高压,使得光电流不随光强增加而增加。当当光源灯的光强随电压减少而降低时,监控用的光电管检测到这一变化后,通过负反馈系统,增加检测用元件(光电倍增管)上的负高压,使得光电流不随光强减少而降低。
紫外-可见光光度计的透过率由于读数大小引起误差的情况:
①当T%读数为36.8%时,浓度测量的相对误差最小。
②当T%读数在70%--10%,浓度测量的相对误差较小且变化不大,一般为1%--2%。
③当T%读数小于10%或T%读数大于70%时,浓度测定的相对误差急剧增大,准确度变得很差。
光吸收定律(朗伯比尔定律)的物理意义及使用范围:
是比色分析的基本原理,表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。其内容是:当用一束单色光照射溶液时,其吸光度A与液层厚度b及溶液浓度c的乘积成正比。即A=kbc。
朗伯-比尔定律的适用条件为:①入射光为单色光。波长范围越大,单色光纯度越低,对朗伯-比耳定律的偏离越大;②要求稀溶液。当溶液浓度很大时,由于溶液分子的相互干扰,该定律不再成立。
紫外-可见分光光度计的基本结构及各部分功能:
紫外-可见分光光度计基本结构由光源、单色器、样品池、检测器和放大显示系统等五部分组成。光源提供入射光,单色器的作用是将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束。吸收池用来盛放被测溶液,检测器作用是把光信号转换为电信号,信号显示系统是把放大的信号以适当的方式显示或记录下来。
影响紫外-可见分光光度计的因素有哪些:
①由于单色器的类型和质量不同造成的单色性不纯,②由仪器中光学、机械零件的反射和散射以及由仪器的光学系统设计制作缺陷引起的杂散光,③吸收池的质量,④电压、检测器负高压波动,造成光源光强波动和检测器噪声增大,⑤其它如吸光度读数刻度误差、仪器安装环境(如振动、温度变化)、化学因素(如荧光、溶剂效应等)等因素的影响。
简述原子吸收光谱仪的主要结构、性能指标、特点及框图:
主要结构:光源、原子化器、分光系统及检测系统。性能指标:波长精度、分辨率、对某个元素的特征浓度和检出限等。特点:原子吸收分光光度计能测量近70种金属和半金属元素,从超微量到高浓度都能准确和精确地测定。具有测量灵敏度高、干扰少、测量手续简便等特点。框图:空心阴极灯→原子化器(样品)→分光系统→检测器→记录器。
简述原子发射光谱仪的主要结构及特点:
主要结构:光源、分光系统、检测系统三部分构成。特点:原子发射光谱仪灵敏度高、选择性好、分析速度快、用样量少、能同时进行多元素的定性和定量分析,是元素分析最常用的方法之一,目前主要是用来对70余种元素的原子光谱进行分析。但原子发射光谱反映的是原子或离子所发射的特征谱线,与其来源的分子状态无关,只能用来确定被测物质的元素组成与含量,不能给出物质分子的有关信息。
荧光光谱仪的主要结构及特点:
荧光光谱仪属于发射光谱分析仪器。其结构包括五个基本部分:激光光源,单色器,样品池,检测器和记录显示系统。特点:灵敏度高(可达10-12g数量级);选择性强,有利于分析复杂的多组分混合物;用样量少、特异性好、操作简便。不足之处一是对温度、pH值等因素变化比较敏感,二是应用范围较窄,只能用来测量发荧光的物质,或与某些试剂作用后发荧光的物质。
影响荧光强度的主要因素:
强荧光物质在分子结构上往往具有以下一些特征:①若共轭体系越大,越容易产生荧光。大部分荧光物质都有芳香环或杂环,芳香环越大,荧光强度也往往较强;②如果物质的分子结构具有刚性平面结构,则为强荧光物质;③若取代基是给电子取代基,则荧光强度增加。
紫外-可见分光光度计的有哪些基本类型:
紫外-可见分光光度计按其光学系统可分为单波长分光光度计(包括单光束和双光束)和双波长分光光度计。
单波长双光束分光光度计的框图:
光源→单色器→斩光器→参比池、样品池→检测器→参比池→记录仪。
原子吸收光谱仪的工作原理:
原子吸收光谱仪的结构与普通的分光光度计相似,只是用锐线光源代替了连续光源,用原子化器代替通常的吸收池。其工作原理是测定气态的自由原子对某种特定光谱的吸收。空心阴极灯或无极放电灯发生相应待测元素特征波长的射线,它穿过火焰,把试样的溶液以细粒子流的形式喷射到火焰上,部分射线被吸收。这一部分正比于试样的浓度,测量吸收量将其与标准溶液进行对比,从而确定浓度。
原子发射光谱仪的测试原理:
原子发射光谱仪是根据处于激发态的待测元素原子回到基态时发射的特征谱线对待测元素进行分析的仪器。气态离子或分子受热或电激发时会发生紫外和可见光域内的特征辐射。发射光谱就是提供足够能量的光源,使试样蒸发并将各组分转变成气态原子或离子,然后引起气体中各基本粒子的电激发,被激发的原子或离子回到基态时发射出每个元素的特征谱线,研究特征谱线的波长和强度就可以对被测试样进行定性和定量分析。由于待测元素原子的能级结构不同,因此发射谱线的特征不同,据此可对样品进行定性分析;而根据待测元素原子的浓度不同,因此发射强度不同,可实现元素的定量检测。荧光光度计与紫外可见分光光度计结构上的区别:
第一个区别在于光源部分。紫外-可见分光光度计光源的基本作用是在所需波长范围的光谱区域内发射连续光谱,常用的光源有热辐射灯(钨灯、卤钨灯等),气体放电灯(氢灯、氘灯及氙灯等),金属弧灯(各种汞灯)等多种。荧光分光光度计的激光光源用来激发样品中荧光分子产生荧光。常用汞弧灯、氢弧灯及氘灯等。第二个区别在于紫外-可见分光光度计只有一个单色器,而荧光分光光度计有两个。一个是激发单色器,用于选择激发光波长;第二个是发射单色器,用于选择发射到检测器上的荧光波长。
物质的激发光谱和荧光光谱?关系:
激发光谱是将激发光的光源用单色器分光,连续改变激发光波长,固定荧光发射波长,测定不同波长的激发光照射下,物质溶液发射的荧光强度的变化,以激发光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标作图,即可得到荧光物质的激发光谱。从激发光谱图上可找到发生荧光强度最强的激发波长λex。荧光光谱是选择λex作激发光源,并固定强度,而让物质发射的荧光通过单色器分光,测定不同波长的荧光强度。以荧光波长作横坐标,荧光强度为纵坐标作图,便得荧光光谱。荧光光谱中荧光强度最强的波长为λem 。荧光物质的最大激发波长(λex)和最大荧光波长(λem)是鉴定物质的根据,也是定量测定中所选用的最灵敏的波长。
荧光分光光度计框图:
光源→激发单色器→样品→激发单色器→检测放大系统。
荧光光度计和荧光分光光度计的区别:
区别主要在单色器。荧光光度计的两个单色器都用滤光片,结构较简单但功能较差。荧光分光光度计的两个单色器采用棱镜或光栅为色散元件,结构较复杂,但许多功能较荧光光度计强得多,价格也远远高于荧光光度计。
使用荧光光谱仪时的注意事项:
①电源:供电电压必须与灯的要求相符,触发电压,工作电流,电源的稳定等须符合仪器的规定;②光源:待光源稳定发光后方可开始测试工作。若光源熄灭后需重新启动,则应等灯管冷却后方可。灯及其窗口必须保持清洁;③单色器:应随时注意防潮、防尘、防污和防机械损伤;④光电倍增管:加高压时切不可受外来光线直接照射,以免缩短光电倍增管的使用寿命或降低其灵敏度,应注意防潮和防尘;⑤样品池:荧光样品池清洁、透光面擦洗等方面要求严格,使用时应为同一个插放的方向,不能经常磨擦,新样品池使用前应认真清洗,最好用硝酸处理后,再用水冲洗干净,于无尘处晾干备用,不可用热吹风吹干;⑥防止眼睛损伤:操作者不能直视光源,以免紫外线损伤眼睛。
简述紫外-可见分光光度计的性能评价指标:
紫外-可见分光光度计分析结果的可靠性取决于仪器的性能是否达标。评价紫外-可见分光光度计的性能指标如下:①波长准确度和波长重复性;②光度准确度;③光度线性范围;④分辨率;⑤光谱带宽;⑥杂散光;⑦基线稳定度;⑧基线平直度。
仪器产生杂散光的原因:
指除了所需波长以外的其余所有光。它是测量过程中的主要误差来源,会严重影响检测准确度。原因:①仪器中光学、机械零件的反射和散射等原因使所采用的测定波长的光偏离正常光路,在不通过样品的情况下直接照射到单色器。这种杂散光波长与测定波长相同;②由仪器的光学系统设计制作缺陷引起。如不必要的反射面、光束孔径不匹配、光学元件表面的擦痕、光学系统的像差、不均匀色散以及由于机械零部件加工不良、位置错移、仪器内壁防眩黑漆脱落等。
简述紫外-可见分光光度计波长校正的意义和方法:
意义:波长误差对测量结果有很大影响,可以使定量分析造成误差,定性分析或结构分析判断错误。因此,在仪器安装完
毕或使用一段时间后要进行检查校正。
方法:波长校正不能只在个别点进行波长校正,应在整个波长范围的不同区域进行。近年来生产的高档紫外-可见分光光度计通常都有自检和波长自动校准系统,可按仪器使用说明书规定的方法进行校正。
一、名词解释:
色谱法:是一种物理分离技术,实质上是利用混合物中各个组分在互不相溶的两相(固定相和流动相)之间的分配的差异而使混合物得到分离的一种方法。
色谱仪:是利用色谱分离技术再加上检测技术,对混合物进行先分离后检测,从而实现对多组分的复杂混合物进行定性、定量分析的一种分析仪器。
色谱工作站:就是一种对微型计算机的软件和硬件进行扩充,使其具有处理色谱信号数据或控制色谱仪的功能的设备。固定相:一种固定在色谱仪中的具有大比表面积的固体或以某种方式固定了的液体。
流动相:色谱仪中一种能携带待分离混合物流过固定相的是气体或液体。
柱反压:高压的流动相流经色谱柱时,与固定相产生相互作用,固定相会形成一个与流动相流动方向相反的作用力,即构成一个与流向相反的压力,称之为柱反压。
色谱图:表明已被色谱柱分离的物质流过检测器的含量与时间的关系。
基线: 是色谱图中与时间轴平行的记录线。
基线稳定性:基线与时间轴平行或偏离的程度。
死时间:是指惰性物质组分,从注入到出现峰的最高点所需时间
死体积:色谱柱内流动相的体积,在实际中包括从进样系统到检测器的体积。
保留时间:从进样开始到出现色谱峰最大值所需的时间。
程序升温:程序升温就是使色谱柱的温度在分离的过程中按照预定的程序逐步增加。其目的是使样品中每个组分都在最佳的温度条件下流出色谱柱,以保持较好的峰形。
恒温(或定温)操作:即是在整个工作过程中始终把温度控制在一个设定范围内。
检测器:就是将样品组分的浓度或质量(含量)转换为电信号、并进行信号处理的一种传感装置。
电负性组分:即是具有亲负性离子的中性分子,或对电子具有较大亲和力易捕获电子的物质。
常液洗脱:是在样品的分离过程中从始至终采用相同的流动相和相同的流量来帮助样品的分离。
梯度洗脱:梯度洗脱是在色谱的分离过程中,把两种或更多的不同极性互溶洗脱液随时间按某种变化的比例混合,使流入色谱柱的洗脱液组成作连续的改变。其目的是让样品每一个组分都在最佳分配系数的条件下分离出来,以获得较好的峰形。
正向分离:是指用极性固定液和非极性流动相来分析极性化合物的色谱系统。
反向分离:是指用非极性固定液和极性流动相来分析非极性化合物的色谱系统。
鞘液流:流动室轴心至外壁的鞘液也向下流动,形成包绕样品流的流束称为鞘液流。
进样峰:进样时操作条件被干扰造成的,也可在进样时通过连动装置进行标记,它是色谱分离过程中时间的起点。
空气峰:由于空气等物质不被固定相吸收,最先被流动相冲洗出来到达检测器而形成的峰形。
色谱峰:混合物中分离出的各组分进入检测器,色谱流出曲线(色谱图中,检测器随时间绘出的响应信号曲线)就会偏离基线,检测器的输出信号会随流入组分的浓度或质量的变化出现一个个的峰形。
二、简答题
色谱仪的工作原理:
色谱是利用待分离的样品组分在两相中分配的差异而实现分离的。这个过程可以形象地看作是固定相对样品中各组分随流动相移动所产生的流动阻力不同,阻力小的组分跑得快,阻力大的组分跑得慢。经过一段距离后,各组分就可以分开了。
色谱仪的特点:
可以对混合物进行多组分分析或全分析。具有应用范围广、样品用量少、高选择性、高效能、高速度以及高灵敏度等优点。
气相色谱仪的组成,框图:
组成:气路系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统、温度控制系统、数据处理、记录系统及电源、电子线路。框图:载气源=减压阀=净化器=稳压阀=稳流阀=进样气化(温度控制系统)=色谱柱(温度控制系统)=检测器(温度控制系统)→放大器→记录仪。
气路系统的目的,基本组成:
目的:是为了向色谱柱提供质地洁净、流动平稳的流动相。基本组成:载气源、减压阀、净化器、稳压阀、稳流阀、柱子、全部连接管道。
进样系统的基本组成,要求:
基本组成:载气预热器、取样器、进样器化装置。要求:①准确定量,迅速注入。②气态或经气化的样品能在载气中形成一个窄带集中地进入色谱柱,否则测量结果将毫无意义。
注射器进样和多通进样阀进样的优缺点:
注射器进样的优点:死体积小,分析结果的精度高;缺点:定量不准确,重复性差。多通进样阀进样的优点:定量准确,重复性好;缺点:死体积较大,分析结果的精度较差。
气相色谱仪为什么必须进行稳定的温度控制:
在气相色谱仪的使用过程中,必须使用气态样品(如果是液态样品需要经过气化处理),这就决定了在大多数情况下气相色谱仪的温度操作。而温度控制的稳定与否直接与气相色谱仪的正常工作及其测量结果的可靠性有着密切的关系。首先,
温度对于固定相是十分重要的。操作时一定要知道所用固定相温度的极限,把全部操作保持在临界温度以下10?C~15?C 进行。这将有助于延长柱子的使用寿命和避免检测器与其他装置受固定相“流失”所造成的污染。其次,在气相色谱仪中,温度不仅对样品在色谱柱上的分离过程有很大影响,对许多检测器(如热导、电子捕获、示差折光等)的检测结果也有很大的影响。因此必须对色谱柱箱、检测器和气化室等实行稳定的温度控制。
气相色谱柱“老化”的处理步骤及目的:
老化处理就是在比操作温度高20?C的条件下,将色谱柱“烘烤”12h以上。将有助于除去填料中的污染物和减轻对检测器的污染。
程序升温的方式:机电式、电子式。
对恒温箱的基本要求:
①点温度的稳定性,即测量恒温箱箱体内部任意一点的温度,其精度一般应保持在±0.1~±0.5℃;②温度场的均匀性,要求恒温箱内部色谱柱的上、下端及沿柱(不单是一根柱)任意横断面平均温度的差值不超过±1℃;③恒温范围可以调节;④绝热性能好,从启动到稳定点的时间要短;⑤要有足够的可用恒温空间,供装色谱柱之用。
溶剂输送系统的主要部件,要求:
主要部件:储液槽(液源)、脱气装置、高压输液泵、流量控制器及梯度洗脱装置。要求:能有效地容纳所要求的溶剂,并将溶剂输送到系统的各个有关部位。它应具备宽的流速范围和入口压力范围,并能适用于所有的溶剂。
对高压输液泵的要求:
①能产生较高的压力推动流动相,且压力要平稳,脉动小。②能提供无脉动恒定流量。③输送流动相的流量能在较大范围内连续调节。④更换流动相方便。⑤便于实现程序控制。
高效液相色谱仪进样系统的要求、进样方式、进样装置:
要求:能将样品有效地注入到系统里去,而不破坏在色谱柱和检测器里所建立的流量平衡。由于考虑到高效液相色谱仪溶剂流动的特点是压力高、流速慢,样品在移动过程中的扩散作用更为明显。因此尽量降低进样器的死体积将有助于柱效率的提高。进样方式:停流动相、不停流动相。进样装置:注射器、多通进样阀。
液固吸附色谱选择流动相的原则,对分离过程的影响:
原则:①稳定性。主要是指柱效率或柱子的保留性质要长期不变。②适应所采用的检测器。③能溶解待分离样品。④清洗方便。⑤粘度要小一些。影响:流动相的改变会影响样品在两相中的分配的差异,其流速的变化会影响保留时间和峰形。
高效液相色谱仪的基本组成,框图:
基本组成:溶剂输送系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、温度控制系统、检测系统、数据处理与记录系统。框图:储
仪。
冲洗法的工作原理:
要求冲洗剂不被固定相吸附(固定相为固体吸附剂)或吸收(固定相是一种液体)或者其在固定相上的吸附或吸收的能力较混合物中诸组分弱得多,主要利用流动相的动力将样品各个组分从固定相上冲洗下来,并带着诸组分向前移动。由于固定相对混合物诸组分的吸附能力或吸收能力不同,造成对各个组分不同的流动阻力,因而使混合物中诸组分按吸附能力或吸收能力的大小依次由流动相带出柱管。吸附或吸收能力小的最先流出,大的最后被分离出来。
一、名词解释:
自动生化分析仪:是将生物化学分析过程中的取样、加试剂、去干扰、混合、保温反应、自动检测、结果计算、数据处理和打印报告,以及实验后的清洗等步骤自动化的仪器。它完全模仿并代替了手工操作。不仅提高了工作效率,而且减少了主观误差,稳定了检验质量。这类仪器一般都具有灵敏、准确、快速、节约和标准化等优点。
后分光:即光源光线直接透过样品,通过光栅,再进行吸光度的检测,可连续检测不同波长的反应。使用后分光技术,可以在同一体系中测定多种成分。无需移动仪器的任何部分,噪声低,分析精确度和准确度高,故障少。
全息反射式光栅:是在玻璃上覆盖一种金属膜后制得的光栅,有一定相差,易被腐蚀。
蚀刻式凹面光栅:是将所选波长固定刻在凹面玻璃上,无相差,抗腐蚀,耐磨损,是目前最先进的全息光栅。
多层涂抹技术:将多种反应试剂依次涂布在片基上,制成干片,用仪器检测,可以准确定量的一类技术。
工作单元:由一个标本管理器和一台(或多台)仪器组成。一个工作单元可实现分析前的样品存储、分析时标本向分析仪的传送和分析后存储在输出缓存区。
连续流动式自动生化分析仪:测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应,均在同一管道中经流动过程完成,又称管道式分析仪。
比例泵:是连续流动式自动生化分析仪结构的一部分,提供使样品在仪器内进行运动的压力以及向流经管道的液体注入空气。
离心式自动生化分析仪:将样品和试剂放在特制圆形转头内,装在离心机的转子位置,当离心机开动后,圆形反应器内的样品和试剂受离心力的作用而相互混合发生反应,经过一定时间的温育后比色计算结果。
同步分析:离心式自动生化分析仪在整个分析过程中,样品与试剂的混合、反应和检测等每一步骤,几乎都是同时完成的,称为同步分析。
顺序分析:分立式自动化分析仪各环节用转送带连接起来,按顺序依次操作,故称顺序分析。
(最多)分立式自动化分析仪:是指按手工操作的方式编排程序,并以有节奏的机械操作代替手工,各环节用转送带连接起来,按顺序依次操作。
(急诊)干化学式自动生化分析仪:将待测液体样品直接加到已固化于特殊结构的试剂载体上,以样品中的水将固化于载体上的试剂溶解,再与样品中的待测成分发生化学反应。常用测定方法为反射光度法和差示电位法。特点:所有的测
定参数均存储于仪器的信息磁块中,当编有条形码的特定试验的试纸条、试纸片或试剂包放进测定装置后,即可进行测定。操作简便,测定速度快,灵敏度和准确性与典型的分立式自动生化分析仪相近,尤其适用于急诊检测和微量检测。反射光度法:是指显色反应发生在固相载体,对透射光和反射光均有明显的散射作用,应使用Kuvelka-Munk理论,或以Williams-Clapper方程予以修正。
分析效率:是指在分析方法相同的情况下,自动生化分析仪的分析速度,取决于一次测定中可测样品的多少和可测项目的多少。
分析准确度:提供实验分析结果的精密度和准确度的基础,取决于分析方法的选择以及仪器各部的加工精确度和精确的工作状态。
单波长测定:是用一个波长检测物质的光吸收强度的方法。适用于测定体系中只有一种组分或混合溶液中待测组分的吸收峰与其他共存物质的吸收峰无重叠。
双波长测定:根据光吸收曲线选择最大吸收峰作为主波长,副波长的选择原则是干扰物在主波长的吸收与副波长吸光度越接近越好,测定时主波长的吸光度减去副波长的吸光度可消除溶血、浊度等干扰物的影响。
二、简答题:
分立式自动生化分析仪的基本结构,框图:
基本结构: 样品处理系统、检测系统及计算机系统构成。
框图:加样→加试剂→搅拌→保温反应→加试剂→搅拌→保温反应→比色分析→①打印结果②清洗比色杯。
根据不同分类标准,将自动生化分析仪分类:
根据仪器反应装置结构:连续流动式、离心式(严格讲也属于分立式范畴)、分立式和干片式。根据仪器的功能及复杂程度:小型、中型、大型及超大型。根据同时可测定项目数量不同:单通道和多通道,单通道每次只能检测一个项目,多通道可同时检测多个项目。根据自动化程度不同:全自动化和半自动化。
胶囊化学技术?特点:
即使用一种惰性氟甲烷液与样品和试剂同时吸到分析管中,在管道中形成一个封闭的壳,样品和试剂被包在其中,形成测试胶囊,并借助于吸进去的空气泡和蠕动泵的推动作用,使胶囊中的样品和试剂混合,不断流动的胶囊,经保温和化学反应后,在一定的测定站进行光学检测,完全克服交叉污染。
离心式自动生化分析仪的工作原理:
是将样品和试剂放在特制圆形反应器内,当离心机开动后,圆形反应器内的样品和试剂受离心力的作用而相互混合发生反应,经过一定时间的温育后,反应液最后流入圆形反应器外圈的比色凹槽内,垂直方向的单色光通过比色孔进行比色,最后计算机对所得吸光度进行计算,显示结果并打印。
连续流动式和分立式自动生化分析仪的结构区别:
分立式与连续流动式自动生化分析仪在结构上的主要区别为:前者各个样品和试剂在各自的试管中起反应,而后者是在
临床检验仪器复习题及 答案 集团文件版本号:(M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988)
《临床检验仪器学》 一、选择题 1.流式细胞仪检测细胞的大小的信号是.:前向角散射 2、VCS白细胞分类技术不包括:细胞化学染色技术 3.毛细管粘度计不适合检测:全血 4、尿液分析仪的测试项目中,与酸碱指示剂无关的项目是:尿葡萄糖 5.血细胞分析仪中对网织红细胞的检测原理: 光散射和细胞化学染色 6、关于光学显微镜的分辨率,下列有误的是:与照明光的波长成反比 7、流式细胞仪中的光电倍增管接收:荧光 8、前向角散射可以检测:被测细胞的大小 9、流式细胞仪测定的标本,不论是外周血细胞,还是培养细胞,首先要保证是:单细胞悬液 10、电阻抗型血细胞分析仪的缺点是只能将白细胞按体积大小分为:三个亚群或二个亚群 11、有关血细胞分析仪的叙述不正确的是:高档次血细胞分析仪白细胞的分类计数很准确 12、双磁路磁珠法中,随着纤维蛋白的产生增多,磁珠的振幅逐渐:减弱 13、毛细管黏度计工作原理的依据是:泊肃叶定律 14、尿蛋白定性干化学检测法只适用于检测:清蛋白 15、流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理是:应用流式细胞术和电阻抗 16、BacT/Alert血培养瓶的底部含一个传感器,用于检测:二氧化碳
17、密度梯度离心法又称为:区带离心法 18、根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是:等密度区带离心法 19、等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是:液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度 20、表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是:Rmin 21、pH玻璃电极对样本溶液pH的敏感程度取决于:电极的玻璃膜 22、PCO 电极属于:气敏电极 2 23、临床上大量使用的电解质分析仪,测量样本溶液中离子浓度的电极是:离子选择电极 24、通常血气分析仪中毛细管pH玻璃电极的pH测定范围是:0?10 25、为将血气分析仪气路系统所提供的气体饱和湿化,需经过的装置是:湿化器 26、世界上最早的自动生化分析仪是:管道式自动生化分析仪 27、具有空气分段系统的自动生化分析仪是:连续流动式自动生化分析仪 28、离心式自动生化分析仪特有的关键部件是:转头 29、自动分析仪中采用“顺序分析”原理的是:连续流动式自动生化分析仪 30、微孔板固相酶免疫测定仪器(酶标仪)的固相支持是:PVC微孔板 31、以空气为加热介质的PCR仪是:离心式实时定量PCR仪 32、能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为:原位PCR仪
第一章概论 一、名词解释: 1.灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器时所产生的响应信号值变化大小的反应能力,它反映仪器能够检测的最小被测量。 2.误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与标称值(即真值)之间的差异称为误差,误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。 3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(即输入为零)时,仪器输出信号的波动或变化范围即为噪音。 4.最小检测量:检测仪器能确切反映的最小物质含量。最小检测量也可以用含量所转换的物理量来表示。如含量转换成电阻的变化,此时最小检测量就可以说成是能确切反应的最小电阻量的变化量了。 5.精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。 6.可靠性:仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下执行其功能的能力它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。 7.重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。 8.分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输出量)的最小值。 9.测量范围:在允许误差极限内仪器所能测出的被检测值的范围。 10.线性范围:输入与输出成正比例的范围。也就是反应曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围 11.响应时间:表示从被检测量发生变化到仪器给出正确示值所经历的时间。 12.频率响应范围:为了获得足够精度的输出响应,仪器所允许的输入信号的频率范围。 第四章紫外——可见分光光度计 1.分光光度计:能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器称为分光光度计。它具有分析精密度高、测量范围广、分析速度快和样品用量少等优点。根据所使用的波长范围不同可分为紫外光区、可见区、红外光区以及万用(全波段)分光光度计等。 2.吸收光谱:光照射到物质时,一部分光会被物质吸收。在连续光谱中某些波长的光被物质吸收后产生的光谱被称作吸收光谱。每一种物质都有其特定的吸收光谱,因此可根据物质的吸收光谱来分析物质的结构和含量。 3.朗伯-比尔定律:是比色分析的基本原理,表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。当用一束单色光照射吸收溶液时,其吸光度 A 与液层厚度 b 及溶液浓度的乘积 c 成正比,此即朗伯-比尔定律。数学表达式为: A=kbc。它适用于分子吸收和原子吸收。 4.摩尔吸光系数(ε):摩尔吸光系数表示在一定波长下测得的液层厚度为 1cm, 溶液浓度 c 为1mol/L 时的稀溶液吸光度值。吸光系数与入射光波长、溶液温度、溶剂性质及吸收物质的性质等多种因素有关。当其它因素固定不变时,吸光系数只与吸收物质的性质有关,可作为该物质吸光能力大小的特征数据。 6.单色器:将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束的装置,是分光光度计的关键部件。主要由入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜组成。 7.吸收池:又称为比色皿、比色杯、样品池或液槽等,是用来盛放被测溶液的器件,同时也决定着透光液层厚度,可用塑料、玻璃、石英或熔凝石英制成。在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;在紫外区,需用能透紫外线的石英或熔凝石英制作。 8.光电管:利用碱金属的外光电效应制成的光电转换元件。按电极结构不同可分为中心阳极式、中心阴极式和平行平板式几种,按管内充气与否又可分为真空光电管与充气光电管两种。光电管的质量取决于阴极灵敏度、线性范围、最大、最小可测能量等几个重要技术指标。 9.光电倍增管:利用外光电效应与多级二次发射体相结合而制成的光电元件,由一个表面涂有光敏材料的阴极和若干个(通常为 9 个~13 个)二级电子发射极(打拿极)组成,其灵敏度比光电管高 200 多倍。有三个重要指标:波长效应、灵敏度和噪声水平。 10.波长准确度:指仪器波长指示器上所示波长值与仪器此时实际输出的波长值之间的符合程度。可用二者之差来衡量分光光度计的准确性。 11.波长重复性:是指在对同一个吸收带或发射线进行多次测量时,峰值波长测量结果的一致程度。通常取测量结果的最大值与最小值之差来作为衡量分光光度计的准确性指标之一。 12.光度准确度:指仪器在吸收峰上读出的透射率或吸光度与已知真实透射率或吸光度之间的偏差。该偏差
一选择题 (1)A型题(单项选择题,每题1分,共30分) 1.具有吞噬传递免疫信息在特异免疫中起重要作用的细胞是() A中性粒细胞 B 单核细胞 C淋巴细胞 D 嗜碱性粒细胞 E红细胞 2.冲液后,计数池每个大格的体积是() A 0.1u l B 0.01 ul C 1.0 ul D 0.0001 ul 3.血片经过瑞氏染色后,成熟红细胞呈鲜红色,白细胞核染色呈浅灰色, 其原因是PH为() A 5.4 -6 B 7.4-8 C 6.5-7 D 8.2-8.6 E 8.7-9.4 4.三种粒细胞区别的要点是() A细胞大小 B特异性颗粒 C染色质结构 D浆颜色 E核浆比例 5.下列除了哪种疾病外,均是中性粒细胞增加的疾病() A猩红热 B尿毒症 C 流行性感冒 D 铅中毒 E化脓性阑尾炎 6.嗜酸性粒细胞一般分叶核常为() A一叶 B二叶 C三叶 D四叶 E 五叶 7.在血液中,中性粒细胞杆状核以上幼稚细胞增多称为() A核左移 B核右移 C中毒颗粒 D 逆行性变化 E杜勒氏小体 8.一种血红蛋白衍生物是棕红色,在波长540nm处,有一较宽的吸光带, 它是() 9.大面积烧伤患者红细胞和血红蛋白相对增高的原因是() A红细胞生成增多 B红细胞寿命延长 C 红细胞破坏减少 D 血液浓缩 E白细胞生成减少
10.诊断铅中毒的最佳指标是() A.网织红细胞增多B低色素红细胞增多 C 靶红细胞增多D 点彩红细 胞增多 11使血沉明显加快的原因是() A红细胞数量增多 B 大红细胞贫血 C 镰刀形红细胞贫血 D 球形红细胞贫血 E 红细胞凝集成团 12.关于魏氏血沉发测定下列哪项是错误的() A.深静脉血1.6ml B 用血沉管吸抗凝血至零刻度 C与0.4ml抗凝剂混匀 D垂直立于血沉架上 E 室温静置半小时 13.关于血沉的说法下列哪项是错误的() A.正常男性血沉生理变化不大 B 新生儿血沉加快C妇女月经期血沉可 加快 D 年龄超过50岁的老年人血沉可加快E 高原地区的居民血沉低于平原地区的居民 14.欲中和A型血清的天然抗体,可加哪一种唾液() A A型分泌型唾液 B B型分泌型唾液 C O型分泌唾液 D A B型分 泌唾液 E 任何唾液 15.用标准血清鉴定血型,下列哪项的结果应判断为A型血() A与抗A不凝,抗B凝抗A+B凝 B与抗A凝,抗B不凝抗A+B凝 C 与抗A凝,抗B凝抗A+B不凝 D与抗A不凝,抗B不凝抗A+B凝 E与抗A不凝,抗B凝抗A+B不凝
第十五章流式细胞仪 一、名词解释 1.流式细胞仪:FCM是以激光为光源,集流体力学、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术、细胞荧光化学技术和单克隆抗体技术等为一体的新型高科技仪器。 2.流式细胞术:应用FCM对于处在快速直线流动状态中的生物颗粒进行快速的、多参数的定量分析和分选的技术称为流式细胞术,它是在单细胞水平上,对于这些生物颗粒进行多参数、快速的定量分析和分选的技术u,现已成为现代医学研究最先进的技术之一。 3.测量区:鞘液流和样品流在喷嘴附近组成一个圆柱流束,自喷嘴的圆形孔喷出,与水平方向的激光束垂直相交,相交点称为测量区。 4.样品流:将特异荧光染料染色的单细胞悬液放入样品管,在气体压力作用下,悬浮在样品管中的单细胞经管道进入FCM的流动室,沿流动室的轴心向下形成样品流。 5.鞘液流:鞘液流是一种稳定流动的液体,操作人员无法随意改变其流动的速度,样品流在鞘液流的环抱下形成流体动力学聚焦,使样品流不会脱离液流的轴线方向,并且保证每个细胞通过激光照射区的时间相等,从而得到准确的细胞信息。 6.延迟时间:从细胞通过测量区到水滴形成的时间大约为几十毫秒,这个时间成为延迟时间。 7.分选收获率:它指被分出的细胞占原来溶液中该细胞的百分比。 8.分选速度:它指每秒可提取所选细胞的个数,目前一般FCM的分选速度为300个/秒,高性能的FCM最高分选速度可达每秒上万个细胞。 9.分选纯度:它指FCM分选的目的细胞占分选细胞百分比,一般可达99%左右。 10.长通滤光片:长通滤光片使特定波长以上的光通过,特定波长以下的光不能通过。 11.短通滤光片:特定波长以下的光通过,特定波长以上的光被吸收或返回。 12.带通滤光片:带通滤光片允许一定波长范围的光通过。滤光片上有两个数值,一个为允许通过波长的中心值,另一个为允许通过光波段的范围。 二、选择题 【A型题】在五个选项中选出一个最佳答案。 1.流式细胞仪中的鞘液和样品流在喷嘴附近组成一个圆形流束,自喷嘴的圆形孔喷出,与水平方向的激光束垂直相交,相交点称为(B) A.敏感区 B.测量区 C.激光区 D.计算区
一、简答题 第一章 1、简述医疗器械的定义。 指那些单独或组合应用于人体的仪器、设备、器具、材料或其它物品,包括所需要的软件; 2、简述生物医学信号的基本特征。 不稳定性非线性概率性 3、简述医疗仪器的特殊性。 噪声特性、个体差异与系统性、生理机能的自然性、接触界面的多样性 操作与安全性 4、画出医学电子仪器的结构框图,简述各组成部分的作用 (1)被测量(被测对象):需要医学仪器测量的人体的物理量、化学量、特性和状态等。 (2)传感器:传感器是将一种能量转换成另一种能量的器件。 (3)生物信息的处理:为了从检测到的信号中获得更多的有用信息,同时使信息的特征更明确、更 准确、更直观 (4)生物信息的记录与显示系统:记录显示,供人可直接观察 5、简述医学仪器的主要技术指标。 准确度:衡量仪器测量系统误差的一个尺度 精密度:指仪器对测量结果区分程度的一种度量 输入阻抗:外加稳态作用力输入变量X1 (如电压、力、压强等)与相应稳态流速输入变量X2 (如电流、速度、流量等)之比为仪器的输入阻抗。 灵敏度:指输出变化量与引起它变化的输入变化量之比。 频率响应:仪器保持线性输出时,允许其输入频率变化的范围,它是衡量系统增益随频率变化的一个尺度 信噪比:定义为信号功率PS与噪声功率PN之比 零点漂移:仪器的输入量在恒定不变(或无输入信号)和恒定条件下,输出量偏离原来起始值而上、下漂动、缓慢变化的现象 共摸抑制比:放大差模信号和抑制共模信号的能力为共模抑制比 6、简述医学仪器的设计步骤。 (1)建立生理模型(2)系统设计(3)试验样机设计(4)动物实验研究 (5)临床试验(6)医疗仪器新产品的审批和注册
《临床检验仪器学》 一、选择题 I.流式细胞仪检测细胞的大小的信号是.:前向角散射2、VCS白细胞分类技术不包括: 细胞化学染色技术3.毛细管粘度计不适合检测:.全血4、尿液分析仪的测试项目中, 与酸碱指示剂无关的项目是:尿葡萄糖5.血细胞分析仪中对网织红细胞的检测原理:光散射和细胞化学染色6、关于光学显微镜的分辨率,下列有误的是:与照明光的波长成反比7、流式细胞仪中的光电倍增管接收:荧光8、前向角散射可以检测:被测细胞的大小 9、流式细胞仪测定的标本,不论是外周血细胞,还是培养细胞,首先要保证是:单细胞悬液 10、电阻抗型血细胞分析仪的缺点是只能将白细胞按体积大小分为:三个亚群或二个亚群 II、有关血细胞分析仪的叙述不正确的是:高档次血细胞分析仪白细胞的分类计数很准确 12、双磁路磁珠法中,随着纤维蛋白的产生增多,磁珠的振幅逐渐:减弱13、毛细管黏度计工作原理的依据是:泊肃叶定律14、尿蛋白定性干化学检测法只适用于检测:清 蛋白15、流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理是:应用流式细胞术和电阻抗16、BacT/Alert 血培养瓶的底部含一个传感器,用于检测:二氧化碳17、密度梯度离心法又称为:区带离心法18、根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是:等密度 区带离心法19、等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是:液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度20、表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是:Rmin 21、pH玻璃电极对样本溶液pH的敏感 程度取决于:电极的玻璃膜22、PCO2电极属于:气敏电极23、临床上大量使用的电解质分析仪,测量?样本溶液中离子浓度的电极是:离子选择电极24、通常血气分析仪中毛细管pH玻璃电极的pH测定范围是:0?10 25、为将血气分析仪气路系统所提供的气体饱和湿化,需经过的装置是:湿化器26、世界上最早的自动生化分析仪是:管道式自动生化分析仪27、具有空气分段系统的自动生化分析仪是:连续流动式自动生化分 析仪28、离心式自动生化分析仪特有的关键部件是:转头29、自动分析仪中采用“顺序分析”原理的是:连续流动式自动生化分析仪30、微孔板固相酶免疫测定仪器(酶标仪)的固相支持是:PVC微孔板31、以空气为加热介质的PCR仪是:离心式实时定量PCR 仪32、能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为:原位PCR仪33、PCR反应正确过程应为:变性一退火一延伸34、一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为:梯度PCR仪35、PCR基因扩增仪最关键的部分是:温度控制系统36、试剂空白变化速率:是在反应温度下试剂自身吸光度随时间的变化37、以下哪项不是微生物自动鉴定与药敏分析系统的性能特点:数据管理系统功能强大,但系统软件大多不可以不断升级。 38、全自动血凝仪中的免疫学方法,通常选用:免疫比浊法39、自动生化分析仪工作较长时间后个别项目出现系统误差,则首先考虑日因素是:.标准品是否变质40、比色杯清洗步骤中可以忽略的是:经吹干后可以继续循环使用41、使用(区带)转头离心时 不需要离心管,样品直接加至其中即可42、使用电阻加热和半导体冷却的PCR仪的恒 温方法属:变温金属块恒温法43、含2个加样针、灌注式加试剂装置、双圈反应盘的自 动生化分析仪的取样周期为6s,则测定单试剂法的工作效率为(1200 )测试/h 44、测最电流变化的电极是:P02电极45、血培养仪的检测信号不包括:温度46、按血凝仪检测原理,下述中不属于凝固法的是:免疫比浊法47、流式细胞术尿沉渣分析仪应用的原理是:流式细胞术和电阻抗原理48、含1个加样针、1个加试剂针、 单圈反应盘的自动生化分析仪的取样周期为 4.5s,贝删定单试剂法的工作效率为(800 ) 测试/h 49、关于底物消耗限额参数,不正确的是:目的是提高监测精密度50、全自动尿沉渣分析仪中F1几乎极低而Fsc大小不等可以为:红细胞51、以下哪项不是微生物自动鉴定与药敏分析系统的性能特点:数据管理系统功能强大,但系统软件大多不可以不断升
精心整理 临床检验基础病例分析题一 病例:患者,男,45岁,上腹饱胀,厌食,体重减轻,消瘦和进行性贫血,胃痛呈持续性,进食后加重。 查体:上腹部有肿块,质坚硬,有压痛,可移动,腹腔内有积液。 12患者4常,体重无变化。既往体健,个人史、家族史无特殊。 体检:T 39.5℃,P 98次/分,R 22次/分,BP 122/83mmHg 。发育正常,营养中等,神志清楚,无皮疹,浅表淋巴结不大,咽部无充血,扁桃体不大,颈静脉无怒张,胸廓无畸形,呼吸平稳,左上肺叩浊,语颤增强,有湿哕音,心界不大,心率105次/分,律齐,无杂音,腹软,肝脾未及。
实验室检查:RBC:5.5×1012/L,Hb 145g/L,WBC:12.5×109/L;分类Nsg 75%,E 1.5%,L 22%,PLT 205×109/L,尿常规(-),粪便常规(-)。 1.根据以上资料,请做出初步诊断并简述其诊断依据。 答:根据以上资料,初步诊断为:左侧肺炎(肺炎球菌性可能性大)。 其诊断依据为: ① ② ③ 2 天/28 查体: 苍白,贫血貌,皮肤粘膜无出血点,浅表淋巴结不大,巩膜无黄染,舌乳头正常,心肺无异常,肝脾不大。 实验室检查:血液检查:Hb:64 g/L,RBC:3.6×1012/L,MCV:78fl,MCH:18pg,MCHC:299g/L,HCT 28%,RDW 18%,外周血涂片红细胞以小红细胞为主;WBC:5.6
×109/L,分类:Nsg 68%,L 25%,M 2%,PLT:240×109/L,Reti 2.0%。尿蛋白(-),镜检无异常,大便隐血(-),血清铁9.5 μrnol/L(9~27μrnol/L)。1.根据以上资料,请做出初步诊断并简述其诊断依据? 答: (1)根据以上资料,该患者初步诊断为:①缺铁性贫血? ②月经过多原因待查? (2) :299g/L 2 答: 急诊。 查体:急性病容,巩膜疑有黄染。右上腹有明显压痛伴肌紧张: 实验室检查:WBC 12.4×109/L,中性粒细胞80%,淋巴细胞20%:B超:胆囊明显增大,囊壁增厚,可见反射很强的胆石数个,最大约1.5cm,提示胆囊炎、胆石症。
《临床检验仪器学》复习题 一、名词解释 灵敏度线性范围预处理系统K系数TEM SEM STM 灵敏度数值孔径离子选择性电极血细胞分析仪(BCA) 尿液分析仪自动生化分析仪自动化程度电化学分析技术流式细胞术噪音线性范围响应时间漂移电化学分析技术参比电极待测电极预处理系统实验室自动化系统全实验室的自动化(TLA)临床实验室信息系统(LIS) 医院信息系统(HIS) 化学电池离心现象离心技术扩散现象相对离心力沉降系数沉降速度沉降时间自动化程度通道差孔间差零点漂移ELISA 化学发光电化学发光发光免疫分析技术电化学性质POCT 二、填空 高速(冷冻)离心机的结构包括_________、_________、_________、________、____________、_________、_________等. 临床实验室常用的离心方法包括、和三类. 显微镜的分辨率表达式是。 流式细胞仪主要在通常在____ 和____ 这两个角度接收并检测细胞散射光强度。 电子显微镜包括_________、_________、_________ 、___________ 、____________五部分。 电子透镜包括____ 和____ 两种。 扫描隧道显微镜是根据量子力学原理中的和而设计。 STM 的两种工作模式分别是____ 和____ 。 尿液分析仪的测试原理包括、和三个原理。 尿液分析仪的反射率= 。 尿液分析仪由:、和三部分组成。 尿有形成分检验包括和两方面的检验。 流式细胞仪主要接受细胞的____ 信号和____ 信号。 流式细胞仪的基本结构由_________、_________、_________ 、___________ 、____________五部分构成。 常用参比电极主要有____ 和____ 两种 流式细胞仪中鞘液的作用是。 自动血培养系统主要由、和所构成。 电子显微镜根据成像方式的不同可以分为____ 和____ 两种类型。 生化分析仪的光路按照单色器的位置可以分为____ 和____ 两种。 自动生化分析仪的类型按反应装置的结构可分为4类:_______________、_______________、_______________、_______________。 目前临床上常用的三类免疫标记方法是______________、___________________、____________________。 临床电化学分析仪器包括____ 和____ 两种 血气分析仪的包括基本电极包括_______________、_______________、_______________、_______________四种。 血气分析仪的pH系统使用和两种标准缓冲液来进行定标;氧和二氧化碳系统用两种混合气体来进行定标。第一种混合气中含;第二种含。 电化学发光免疫分析的发光反应底物有____ 和____ 两种 生化分析仪的分析效率是指。 A/D转换的含义是。 LCD器的中文全称是。 自动生化分析仪采用后分光的含义是指。 自动生化分析仪中的通道数是指。 微生物自动化系统一般可分_______________________和____________________________ 两类。 临床电化学分析仪主要有_____________、_____________两种。 单色器包括________、_____________、_____________三种类型。 样品前处理系统占检验总工作量的。 离心机按照离心速度大小分为________、_____________、_____________。 FCM分选指标包括________、_____________、_____________。
第一章血液标本采集和血涂片检查 一、选择题 (一)、A1型题(标准型) 1.静脉采血法的采血部位首选: A. 肘部静脉 B. 手背静脉 C. 内踝静脉 D. 股静脉 E. 颈静脉 2.WHO推荐成人皮肤采血部位为: A. 无名指指端内侧 B. 中指和无名指指端内侧 C. 中指指端内侧 D. 耳垂 E. 大拇趾 3.血细胞分析中最常用的染色法为: A. 吉姆萨染色 B. 瑞氏染色 C. HE染色 D. 罗氏染色 E. PAS染色 (二)、A1型题(否定型) 3. 下列那一种抗凝剂不能与血液中的钙离子结合: A. EDTA-K2 B. 草酸钠 C. 草酸铵 D. 肝素 E. 枸橼酸钠 四、论述题 1. 试述瑞氏染色法的原理及PH值对其的影响? 参考答案 一、选择题 (一)、A1型题(标准型) 1.A 2.A 3.B (二)、A1型题3.D 四、论述题 1. ①瑞氏染色法的原理:瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料美兰组
成的复合染料。瑞氏染料溶于甲醇后,解离为带正电的美兰和带负电的伊红。由于各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力不同,因此染色后呈现不同的色彩。如血红蛋白和嗜酸颗粒为碱性可与酸性染料伊红结合染成红色。细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美兰或天青结合染成紫蓝色或蓝色。中性颗粒呈等电状态,与伊红和美兰均可结合染成紫红色。此染色过程既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。 ②PH值的影响:细胞各种成分均为蛋白质组成,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH值而定。在偏酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,染色偏红。在偏碱性环境中负电荷增多,易与美兰或天青结合,染色偏蓝。
1.以下不是人体生理信号的特点的是(D)A:低幅; B:低频; C:被检测对象难以接近,不易直接测量; D:信噪比高; E:人体的信号不稳定。 2.下列不是医学测量仪器的通用要求是(B)A:安全性; B:重复性; C:具有高稳定性与抗干扰性; D:高敏感、高特异、非侵入、非危害; E:记录与存储。 3.以下属于医学测量仪器的动态特性的是(E)A:灵敏度; B:精确度与准确度; C:误差; D:非线性度和漂移; E:对信号响应的快慢。 4.以下不是心电图术语表述的是(A) A:P波代表心房复极; B:QRS波群反映了左右两心室的除极过程; C:P-R间期; D:T波由心室得复极化产生; E:S-T间期。 5.下列不是正常脑电图的组成的是(D) A:α波; B:β波; C:θ波; D:ω波; E:α波阻断。 6.下列不是生物传感器的温度检测方法的是(C)A:热敏电阻法; B:PN结测温; C:CCD器件; D:热电偶测温; E:辐射测温法。 7.下列不是医学仪器常用的光电传感器的是(E)A:光电二极管;
B:光电倍增管; C:光电管; D:CCD; E:CRT。 8.关于心电图机的表述正确的是(D) A:心电图机分为普通电图、24小时静态心电图和遥测心电图等; B:心电图机的组成包括输入电路、心电放大、心电测量、记录与显示四大部分; C:心电图机的放大电路包括前置信号放大器、噪声放大器以及功率放大器等; D:动态心电图的英文全称为Dynamic Electro-Cardiogram; E:中央集中监护中下辖一个中央监护仪和床边监护仪。 9.以下关于血压测量的相关知识正确的是(B) A:血压测量学利用压力传感器包括电致收缩效应和负压电效应; B:心室收缩将血液射入动脉,通过血液对动脉血管壁产生侧压力,使血管扩张并形成动脉压; C:导管术法属于间接测量法的一种; D:示波法中的幅度系数完全由仪器厂商决定,大人小孩都一样通用; E:常用的测血压方法的导管术法、触诊法、示波法和染料法。 10.关于血流量测量的综述正确的是(E) A:单位时间内流过血管某一截面的血量称血流量,单位通常以m3/min; B:心输出量又称容积速度,表示每分钟泵的出的血量; C:创伤性测量的常用方法是热稀释法; D:非创伤性测量的常用方法是电磁流量法; E:染料法的最常用的方法是采用印度花青绿作为指示剂。 11.有关呼吸测量的表述正确的是(C) A:潮气量是指呼吸时,每次吸入或呼出的气量; B:呼吸系统的生理功能是指人体从外环境吸收代谢所消耗的CO2,排出代谢废物O2; C:呼吸机按通气频率的高低分常规频率、高频喷射以及高频振荡呼吸机; D:呼吸机结构包括传感器、电子电路、连接管路和气体回路; E:持续气道正压力的英文简称为PRVC。 12.超声诊断仪的表述下不正确的是(A) A:超声发出和接收的探头对应原理是负压电效应和电致伸缩效应; B:在一定范围内,超声探头的频率越低,能探测的深度就越深; C:人体组织的声特性阻抗越大,反射的能量越大; D:多普勒超声仪可以用来大致探知血流的方向和流速; E:通常相控阵超声探头都比较小,一般为2cm左右。 13.酸度计的相关表述不正确的是(B) A:pH含义是“氢离子指数”; B:酸度计的基本原理是通过参考电极测试一个自发原电池的平衡电动势;
第一章概论 1、一个优良的检验仪器应具有(P3):灵敏度、分辨率和精度高,噪音和误差小,可靠性、稳定性和重复性好,响应时间短,测量范围、示值范围、频率响应范围和线性范围宽等性能指标。 2、最小检测量与分辨率的区别?(P5) 答:①分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输入量)的最小值。 3、精确度与灵敏度的区别?(P3) 答:①灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器是所产生的响应信号值变化大小的反应能力,他反应仪器能够检测的最小被测量。②精确度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。③区别: 4、精确度(P5):对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。 5、重复性(P5):在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。 6、准确度和精确度的区别。(P5) 第二章离心机 1、简述分析型超速离心机的工作原理。(P26) 答:分析型超速离心机主要由一个椭圆形的转子、一套真空系统和一套光学系统所组成。该转子通过一个柔性的轴联接成一个高速的驱动装置,此轴可使转子在旋转时形成自己的轴。转子在一个冷冻的真空腔中旋转,其容纳了两个小室:分析室和配衡室。配衡室是一个经过精密加工的金属块,作为分析室的平衡用。分析室的容量一般为1ml,呈扇形排列在转子中,其工作原理与一个普通水平转子相同。分析室有上下两个平面的石英窗,离心机中装有的光学系统可保证在整个离心期间都能观察小室中正在沉降的物质,可以通过对紫外光的吸收(如对蛋白质和DNA)或折射率的不同对沉降物进行监测。在分析室中物质沉降时重粒子和轻粒子之间形成的界面就像一个折射的透镜,在检测系统的照相底板上产出一个“峰”。
临床检验仪器的常用性能指标:灵敏性,误差,噪音,最小检测量,精确度,可靠性,重复性,分辨率,测量范围和示值范围,线性范围,响应时间,频率响应范围。 光学显微镜的工作原理:利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。由两组会聚透镜组成光学折射成像系统。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组成为物镜;焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。相对于物镜的成像条件及最后二次成像于观察者的明视距离等条件的满足,是通过仪器的机械调焦系统来实现的。 光学显微镜的基本结构:包括光学系统(物镜、目镜、聚光镜及反光镜)和机械系统(聚光镜升降、调焦系统、载物台和物镜转换器等运动夹持部件以及底座、镜臂、镜筒等支持部件) 光学显微镜照明设置部件:光源、滤光器、聚光镜、玻片。 光的吸收定律:即郎伯-比尔定律,是比色分析的基本原理。表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的函数关系。A=-lg I/I0=lg I0/I=lg 1/T=kbc 电阻抗型血细胞分析仪的计数原理:血细胞与等渗的电解质溶液相比为不良导体,其电解质比稀溶液大。当血细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,其内外电极之间的恒流电路上的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号。脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积成正比。根据欧姆定律,在恒电流电路上,电压变化与电阻变化成正比,电阻值又同细胞体积成正比,血细胞体积越大,电压越高,产生信号的脉冲幅度就越大。各种大小不同的细胞产生的脉冲信号分别被送入仪器的检测通道,经计算机处理后,以体积直方图显示出特定细胞群中的细胞体积和细胞分布情况。最后得出WBC、RBC、PLT。(该原理称库尔特血细胞检测原理 血细胞分析仪测定Hb的原理:除干式离心分层型、无创型外,各种BCA对Hb测定都采用光电比色原理。血细胞悬液中加入溶血剂后,RBC溶解释放出Hb,后者与溶血剂中有关成分形成Hb衍生物,进入Hb测试系统。在特定波长(多为530~550nm)下进行光电比色,吸光度值与所含Hb含量成正比。与不同型号BCA配套的溶血剂不同,形成Hb衍生物也不同,吸收光谱也有差异,但最大吸收峰都接近540nm,因为国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的氰化高铁(HiCN)法的最大吸收峰在540nm,仪器Hb的校正必须以HiCN值为标准。 尿液分析:是临床诊断泌尿系统疾病的重要措施之一,通过对尿液的物理学检查和化学检查,可观察尿液物理性状和化学成分的变化。在尿沉渣检查中能够看到的有形成分为红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、巨噬细胞、肿瘤细胞、细
第一章血液一般检验的基本技术 ㈠单项选择题(A型题) 1. 成人静脉采血时,通常采血的部位是(A1型题)"实践技能" A 手背静脉 B 肘部静脉 C 颈外静脉 D 踝静脉 E 股静脉 [本题答案] 2. 静脉采血时,错误的操作是(A1型题)“实践技能" A 从向外消毒穿刺部位皮肤 B 进针时使针头斜面和针筒刻度向上 C 见回血后松开压脉带 D 未拔针头而直接将血液打入容器 E 如需抗凝应轻轻混匀 [本题答案] 4. EDTA盐抗凝剂不宜用于(A1型题)“实践技能" A 红细胞计数 B 白细胞计数
C 血小板计数 D 白细胞分类计数 E 凝血象检查和血小板功能试验 [本题答案] 6. 枸橼酸钠的抗凝原理是(A1型题)"基础知识" A 阻止凝血酶的形成 B 阻止血小板聚集 C 除去球蛋白 D 与血液中的钙离子形成螯合物 E 除去纤维蛋白原 [本题答案] 7. 关于抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"专业知识" A EDTA-Na2溶解度大于 EDTA-K2 B EDTA盐与血浆中钙离子生成螯合物 C 肝素作为抗凝血酶Ⅲ的辅因子而抗凝 D 枸橼酸钠可用于红细胞沉降率测定 E 枸橼酸钠可用于输血保养液 [本题答案] 8. 对草酸盐抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"基础知识"
A 草酸铵可使血细胞膨胀 B 双草酸盐可用于血细胞比容测定 C 对Ⅴ因子保护差 D 过去用于凝血象的检查 E 可干扰血浆中钾,钠和氯的测定 [本题答案] 9. ICSH建议,血细胞计数时首选抗凝剂是(A1型题)"基础知识" A EDTA-K2 B EDTA C EDTA-Na2 D 肝素 E 枸橼酸钠 [本题答案] 11. 肝素抗凝主要是加强哪种抗凝血酶的作用(A1型题)"基础知识" A 抗凝血酶Ⅰ B 抗凝血酶Ⅱ C 抗凝血酶Ⅲ D 抗凝血酶Ⅳ E 抗凝血酶Ⅴ
临床检验仪器学第四讲第12章血细胞分析仪 (Blood Cell Analyzer) 南京医科大学第一临床医学院 临床医学工程处 刘坚
?血细胞分析仪(Blood Cell Analyzer)是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的 常规检验仪器。 ?血液分析仪主要完成以下两大功能: ⑴血细胞计数:红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白。 ⑵血细胞分类:白细胞中的淋巴、中性、嗜酸、嗜碱、单核、 幼稚细胞;红细胞中的网织红细胞。 ?根据计数/分类的测定值计算间接测定值 红血球容积比(HCT)、平均红血球血红蛋白含量(MCH)、 血小板容积比(PCT),等等
1947年Coulter 发明了小孔电阻抗法 通过测量细胞的体积大小对细胞进行分类计数 主要是用来计数红、白细胞 该技术一直被各种血液分析仪沿用至今 1953年库尔特家族研制出全世界第一台血细胞计数仪:Model A Wallace H. & Joseph R. Coulter
血细胞计数(Blood count) 早期的血液分析仪主要用来计数红、白细胞全血细胞计数(Complete Blood cell Count) 增加光电比色系统用来同时测定血红蛋白 血小板可在同一仪器上与红细胞一起计数 利用直接测量到的项目运算得到间接计算 项目(如血球压积等参数) 不包括白细胞分类计数 测定标本采用机外人工处理的预稀释方式
白细胞分类计数 (Differential Leukocyte Cell Count) 带电脑的显微镜下辨认细胞的图象识别技术 效率低,受制片、染色技术的影响大 在计数细胞数不多时,重复性较差 没有得到普遍推广 阻抗法仪器检测白细胞“二分群、三分群” 仪器内部结构的进一步完善 微处理器分辨力的进一步提高 特殊溶血剂的应用 无法对细胞内部结构进行分析,准确性有限
第一章血液一般检验的基本技术㈠单项选择题(A型题) 1. 成人静脉采血时,通常采血的部位是(A1型题)"实践技能" A 手背静脉 B 肘部静脉 C 颈外静脉 D 内踝静脉 E 股静脉 [本题答案] B 2. 静脉采血时,错误的操作是(A1型题)“实践技能" A 从内向外消毒穿刺部位皮肤 B 进针时使针头斜面和针筒刻度向上 C 见回血后松开压脉带 D 未拔针头而直接将血液打入容器 E 如需抗凝应轻轻混匀 [本题答案] D 4. EDTA盐抗凝剂不宜用于(A1型题)“实践技能" A 红细胞计数 B 白细胞计数 C 血小板计数 D 白细胞分类计数 E 凝血象检查和血小板功能试验 [本题答案] E 6. 枸橼酸钠的抗凝原理是(A1型题)"基础知识" A 阻止凝血酶的形成 B 阻止血小板聚集 C 除去球蛋白 D 与血液中的钙离子形成螯合物 E 除去纤维蛋白原 [本题答案] D 7. 关于抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"专业知识" A EDTA-Na2溶解度大于 EDTA-K2 B EDTA盐与血浆中钙离子生成螯合物 C 肝素作为抗凝血酶Ⅲ的辅因子而抗凝 D 枸橼酸钠可用于红细胞沉降率测定 E 枸橼酸钠可用于输血保养液 [本题答案] A 8. 对草酸盐抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"基础知识" A 草酸铵可使血细胞膨胀
B 双草酸盐可用于血细胞比容测定 C 对Ⅴ因子保护差 D 过去用于凝血象的检查 E 可干扰血浆中钾,钠和氯的测定 [本题答案] D 9. ICSH建议,血细胞计数时首选抗凝剂是(A1型题)"基础知识" A EDTA-K2 B EDTA C EDTA-Na2 D 肝素 E 枸橼酸钠 [本题答案] A 11. 肝素抗凝主要是加强哪种抗凝血酶的作用(A1型题)"基础知识" A 抗凝血酶Ⅰ B 抗凝血酶Ⅱ C 抗凝血酶Ⅲ D 抗凝血酶Ⅳ E 抗凝血酶Ⅴ [本题答案] C 13. 关于双草酸盐抗凝剂,错误的说法是(A1型题)"专业知识" A 草酸钾可使红细胞缩小 B 草酸铵可使红细胞胀大 C 不可用于血细胞比容测定 D 过去用于凝血象的测定 E 目前应用较少 [本题答案] C 14. 凝血象检查时,抗凝剂最好用(A1型题)"专业知识" A EDTA-K2 B 38g/dl枸橼酸钠 C 109mmol/L枸橼酸钠 D 肝素 E 草酸钠 [本题答案] C 16. 关于细胞成分的特性,正确的说法是(A1型题)"基础知识" A 嗜酸性颗粒为酸性物质 B 中性颗粒为酸性物质 C 细胞核蛋白为碱性物质 D Hb为碱性物质 E 淋巴细胞浆为嗜酸性物质
医学仪器原理学试题姓名:班级:学号: 一、选择题(每题分) 1、下列选项中哪一项不是影响医疗器械使用的使用环境:D A、温度 B、湿度 C、供电系统 D、操作人员性别 2、下列哪项不是临床使用的生物放大器所应满足的需求:B A、不影响所测部位的生理功能 B、测得信号存在畸变 C、能将信号和干扰分离 D、放大器能经受住大电流冲击 3、下列哪种设备不是治疗设备:D A、直线加速器 B、超声雾化器 C、呼吸机 D、显微镜 4、心电分析的依据不包括以下哪项:A A、QRS波的周期 B、QRS波峰方向 C、R-R间期 D、QRS波的幅度 5、床边监护仪的基本功能为:D A、无创血压 B、ECG C、体温测量 D、辅助呼吸 6、下列哪种设备不是用于电外科领域的:C A、氩气刀 B、超声刀 C、X刀 D、射频消融仪 7、呼吸机通气模式中不包括以下哪项:D A、控制通气 B、辅助通气 C、自主呼吸 D、部分控制通气 8、下列哪项是麻醉机日常使用中容易出现问题的部位:A
A、呼吸活瓣 B、挥发罐 C、监护仪 D、供气装置 9、心脏起搏器代替的是心脏哪一部分释放出电脉冲:A A、窦房结 B、希氏束 C、房室结 D、结间束 10、下列哪项不是人工心肺机的应用领域:D A、神经外科 B、一氧化碳中毒 C、心肺复苏 D、微创手术 11、医用直线加速器设备中产生电子束的部件是:B A、脉冲调制器 B、电子枪 C、加速管 D、治疗头 12、体外冲击波碎石机对冲击波源的要求中错误的是:D A、足够的能量 B、良好的方向性 C、对人体损伤较小 D、压力脉冲阶段稳定 13、激光束的特性不包括B A、方向性强 B、照射距离远 C、单色性好 D、能量密度大 14、X线物理特性不包括:A A、感光作用 B、穿透作用 C、荧光作用 D、电离作用 15、专门用于妇女乳腺检查的设备室:B A、移动X线机 B、钼靶机 C、C臂机 D、胃肠X线机 16、CT机的基本结构不包括:D A、X线产生系统 B、数据采集系统 C、图像显示系统 D、X 线防护系统 17、电磁波产生磁共振现象的基本条件不包括:D A、磁性原子核 B、静磁场 C、适当频率 D、高强度脉冲 18、超声设备中,完成电声的转换作用的组件是:B
第一章概论 1.临床检验仪器常用性能指标(可能考问答题) 1灵敏度 2 误差3噪声4最小检测量5精确度6可靠性7重复性8分辨率9测量范围和示值范围10线性范围11响应时间12 频率影响范围 1 灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比。 2 误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与真值之间的差异。 3 噪音:检测仪器在没有加入被检物品时,仪器输出信号的波动或变化范围。 4 最小检出量:检验仪器能确切的反应最小物质含量。 5 精确度:检测值偏离真值的程度。 6 可靠性:仪器在规定时期内及在保持运行不超限的情况下执行其功能的能力,反应仪器是否耐用的一项指标。 第二章离心机 1.离心技术:应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术 2. 离心机的工作原理:利用离心转子高速旋转产生的强大离心力,迫使液体中的微粒克服扩散,加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离。颗粒的沉降速度取决于离心机的转数、颗粒的质量、大小和密度。 3. 离心力:由于物体旋转而产生的力,物体作圆周运动所产生的向心力的反作用力。
4. 相对离心力:通常颗粒在离心过程中的离心力是相对于颗粒本身所受的重力而言,因此把这种离心力叫做相对离心力。 5. 离心机的分类:按转数分为:低速、高速、超高速。 6. 离心机的最大容量:离心机一次可分离样品的最大体积,m ×n,一次可容纳最多离心管×一个离心管容纳样品最大体积。 7. 沉降系数:颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度,其单位为秒。 8. 离心机的基本结构 低速离心机的结构较简单,由电动机,离心转盘(转头)、调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件构成。其最大转速在10000r/min以内,相对离心力在15000xg以内。 高速(冷冻)离心机最大转速为20000~25000r/min 超速(冷冻)离心机最大转速可达50000~80000r/min 9. 差速离心法:差速离心法又称分步离心法,根据分离物的沉降速度不同,采用不同的离心速度和时间分步离心的方法。10. 差速离心法的优缺点: 优点:操作简单,离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开,并可使用容量较大的角式转子;分离时间短、重复性高;样品处理量大。 缺点:分辨率有限、分离效果差,沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开,不能一次得到纯颗粒;壁效应严重,特别是当颗粒很大或浓度很高时,在离心管一侧会出现沉淀,颗