脱钙终点检测试剂盒(化学法)
钙镁含量测定
石灰石、石灰及白云石的测定 石灰石主要用于炼铁时造渣，石灰用于炼钢时造渣，而白云石经煅烧后主要以制作碱性炉和修补炉衬。石灰石主要成分为碳酸钙；白云石主要成分为碳酸钙和碳酸镁，它们经煅烧后失去二氧化碳，前者变为石灰，后者称为烧结白云石。 对石灰石．石灰，白云石常进行的分析项目有，二氧化硅．三氧化二铁．三氧化二铝，氧化钙，氧化镁，灼减量，吸附水等。硫、磷通常不进行分析。 一、二氧化硅、三氧化二铁、三氧化二铝、氧化钙、氧化镁联合测定的溶液制备 1．方法要点 将试样于铂坩埚中以无水碳酸钠-硼砂混合熔剂熔融，并用稀盐酸浸出熔物，制成试样溶渣。 2．试剂 (1)混合熔剂将1份无水碳酸钠与1份四硼酸钠混合研细备用。四硼酸钠应预先放在瓷坩埚中于700～750℃焙烧数小时，以除去结晶水。 (2)盐酸溶液(1+1)。 3．溶液制备方法称取0.5000g试样，置于铂坩埚中，加7～8g混合熔剂，用铂丝混合均匀，于950℃熔融至熔物呈透明的液体，取出小心旋转坩埚，使熔物附着于坩埚内壁。将坩埚移至250mL烧杯中，加60mL沸水，40mL盐酸溶液，混匀后加热使熔物溶解。用水洗涤坩埚，继续加热至试液透明，取下。将试液移入250mL容量瓶中，用水洗涤烧杯，冷却后以水稀释至刻线，摇匀备用。 4．附注 (1)一般四硼酸钠中含有10个结晶水，如预先不焙烧除去，会在熔融过程中由于水分激烈排除而崩溅，造成试样损失。 (2)烧结白云石与石灰极易吸水，故称样时要快。 (3)由于石灰石、白云石中含有大量二氧化碳，因此熔融时先以低温约400℃开始，逐渐提高温度，否则易崩溅。 二、二氧化硅的测定(硅钼蓝分光光度法) 1．方法要点 试样经碱分解，酸浸出，所形成的正硅酸在一定酸度下，加入钼酸铵使硅酸成为硅钼杂多酸，最后以亚铁还原成硅钼蓝．进行吸光度测定。 2．试剂 (1)钼酸铵(5％)。 (2)草酸-硫酸溶液 3份草酸溶液与2份硫酸溶液(1+3)混匀。 (3)硫酸亚铁铵溶液(4％) 每1L溶液中加5mL浓硫酸。 3．分析步骤 移取5mL试液，于100mL容量瓶中，并沿瓶颈加15mL水，5mL钼酸铵溶液，摇匀，放5min(或于沸水中加热30s)，使硅钼黄显色完全。加30mL水，20mL草酸－硫酸溶液，立即加入5mL硫酸亚铁铵溶液，以水稀释至刻线，摇匀。 用2cm比色皿，以水作参比液，在波长650nm处，测定吸光度。 4．标准曲线的绘制用3个以上同品种不同含量的标样，按上法同样操作，测其吸光度，绘制标准曲线。 5．允许差≤0.30％。 三、三氧化二铁的测定(磺基水杨酸分光光度法) 1．方法要点 在pH>8的氨性溶液中，磺基水杨酸能与三价铁形成稳定的黄色三磺基水杨酸铁配合物，其颜色深浅与 铁含量成正比，借此可进行吸光度测定。在此条件下，铝、钛(Ⅳ)、钙、镁与过量的磺基水扬酸生成无色配合物，不干扰铁的测定。 2．试剂
降钙素原测定试剂盒(荧光免疫层析法)产品技术要求万华普曼生物
降钙素原测定试剂盒（荧光免疫层析法） 适用范围：用于体外定量测定人血清或血浆样本中降钙素原（PCT）的浓度。1.1 包装规格 1人份/袋，25人份/盒； 1人份/袋，40人份/盒； 1人份/袋，100人份/盒。 1.2主要组成成分 试剂盒由检测卡、ID卡（1个/盒）组成。 其中：检测卡由降钙素原（PCT）测定试剂条和卡塞组成。试纸条上主要成分有硝酸纤维素膜、荧光标记一体垫金、吸水纸和PS板。硝酸纤维素膜包被羊抗人降钙素原多克隆抗体（T线）和羊抗鼠多克隆抗体（C线），荧光标记一体垫金包被荧光微球标记鼠抗人降钙素原单克隆抗体的玻璃纤维膜。 ID卡：贮存有试剂盒名称、批号、生产日期及对应定标曲线信息。 2.1物理性能 2.1.1外观：试剂盒应整洁，文字符号标识清晰，封装无破损，内容物齐全。 2.1.2膜条尺寸：不低于2.5mm。 2.1.3移行速度：液体在加样区与测试区之间的移行速度应≥10mm/min。 2.2 溯源性 应根据GB/T 21415《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源》及有关规定提供所用降钙素原企业标准品的来源、赋值过程以及测量不确定度相关内容。ID卡校准曲线可溯源至降钙素原企业标准品。 2.3 检出限：检出限应≤0.1ng/mL。
2.4 准确度：回收率应在85%-115%。 2.5 线性 在[0.1,100]ng/mL内，其线性相关系数(r)≥0.990。 2.6 重复性 用同一批次试剂盒对浓度为(0.5±0.05)ng/mL、(10.0±1.0)ng/mL的降钙素原样本进行测定，每个浓度样本重复测定10次，所得结果的变异系数（CV）应不大于12.5%。 2.7 批间差 随机抽取三个不同批号的试剂盒，分别对浓度为(0.5±0.05)ng/mL、(10.0±1.0)ng/mL的降钙素原样本进行测定，每个浓度样本重复测定10次，计算30次测定结果的变异系数（CV）应不大于 15.0%。 2.8 效期稳定性 4～30℃保存，有效期为24个月，产品应符合2.3～2.6的要求。
脱钙液的配制
脱钙液配制 30%盐酸溶液1000 ml(10%中性福尔马林液700 ml+浓盐酸300 ml)加入140 g氯化钠,待其完全溶解后再加入20 ml冰醋酸。 在日常病理技术工作中,有多种对骨骼的脱钙方法和脱 钙组织切片的制作方法,本文所述脱钙方法和脱钙液从脱钙 速度,对组织的损伤程度以及切片染色等方面效果都比较理 想,这种脱钙液与其他酸类脱钙液相比较,对组织损伤小,脱 钙时间短,并作用温和,其中30%的盐酸溶液对脱钙组织造 成的损害较小,对组织不膨胀,不至于导致脱钙过程缓慢,但 核染色不佳。加入氯化钠可以防止脱钙组织因经过盐酸脱 钙后导致的切片染色偏红,加入冰醋酸可使脱钙组织软化, 有利于切片,从而使制片效果更加理想。对照组以单纯30% 盐酸为主的脱钙液与新方法脱钙液对同等体积、大小、部位 相同的骨组织同时进行脱钙,前者制作的骨骼切片不平整, 染色偏红,胞核红染,核质不清晰,切片整体组织结构显示不 清。经新方法脱钙后所制作的切片组织结构显示清晰,切片中的软组织和骨组织结构均可完整显示,细胞染色清晰,核 质对比鲜明,制片中所用的固定剂、脱水剂、透明剂等都为日 常技术工作必备试剂,而且制作出的切片效果很好,在本方 法中所用的固定、脱水、透明、浸蜡、染色试剂都可以数次重 复使用,试剂配制和操作方法简单,值得临床推广应用。 王淑兰，制作骨骼组织切片的新脱钙液 改良的Plank·Rycho 脱钙液的配制: 氯化铝7g , 盐酸815ml , 甲酸5ml , 甲醛15ml ,TritonX-100 0.5ml ,蒸馏水100ml 。 为了保持良好的骨组织形态结构,达到脱钙目的,我们 在Plank·Rycho 脱钙液中加入甲醛和TritonX-100 ,更加充分发 挥各自的作用,使固定、脱脂、脱钙同时进行。甲醛不仅是优 良的固定剂,还可适度保护组织免受酸的侵蚀。TritonX-100 (聚乙醇辛基苯基醚) 是一种表面活性剂,虽不具备脱钙作 用,但能溶解脂质,改善细胞膜的通透性〔1 ,2〕,使骨组织中的 脂质在短时间内脱去,加快了脱钙速度。脂质被溶解后,组 织间隙疏通,脱钙液能顺利渗入骨组织内,有利于钙盐析出。 改良的脱钙液性质温和,虽然脱钙速度较强酸类脱钙液缓 慢,但能减少对细胞核的破坏,获得良好的组织学形态。 胥维勇，介绍一种改良的Plank·Rycho 脱钙液
鸡蛋壳中钙离子的含量测定
鸡蛋壳中钙离子含量的测定 一.实验目的 1 ?学习固体试样的酸溶方法； 2. 掌握络合滴定法测定蛋壳中钙方法原理； 3. 了解络合滴定中，指示剂的选用原则和应用范围。 二.实验原理 1鸡蛋的主要成分是碳酸钙，含钙量约90—98% 2.EDTA滴定原理：在pH>12.5时，Mg2+生成Mg（OH）2沉淀，在用沉淀掩蔽镁 离子后，用EDTA单独滴定钙离子。钙指示剂与钙离子显红色，灵敏度高，在 pH=12~13滴定钙离子，终点呈指示剂自身的蓝色。 其变色原理为： 滴定前Ca + In （蓝色）==Caln （红色） 滴定中Ca + 丫 == CaY 滴定时Caln （红色）+ 丫 == CaY + In （蓝色） 三.实验试剂及仪器 1. 1 HCI溶液1:1 HCl溶液5 ml 40g/L NaOH溶液钙指示剂三乙醇胺溶 液乙二胺四乙酸二钠CaCO3优级纯 2. 50 mL小烧杯100 ml容量瓶250ml锥形瓶*3 ; 500mL试剂瓶 钙指示剂 四.实验步骤 1、鸡蛋壳的溶解：称取0.22~0.23g左右鸡蛋壳洗净取出内膜，烘干，研碎称量其质量，然后将其放入50 mL小烧杯中，加入5ml 1 : 1 HCI溶液，微火加热将其溶解，冷却，然后将小烧杯中的溶液转移到100ml容量瓶中，定容摇匀。 2、（1）EDTA标准溶液的标定： a. 浓度为0.0200 mol/L的EDTA标准溶液的配置：称取EDTA二钠盐4.0000g 溶解于温水中，冷却后加入到试剂瓶中，稀释到500ml，摇匀。 b. 0.020 mol/L钙标准溶液的配置：准确称取0.2~0.22克的分析纯CaCO3固体试剂，置于50 ml烧杯中，先用少量水润湿，然后加1:1 HCl溶液2—3 ml，将溶液定量转移到100 ml容量瓶中，用去离子水稀释到刻线，摇匀。根据称取的CaCO3 质量计算出钙离子标准溶液的浓度。 c. EDTA标准溶液的标定：用移液管吸取25.00ml钙离子标准溶液，于250ml锥形瓶中，加入5 ml 40g/L NaOH溶液及少量钙指示剂，摇匀后，用EDTA溶液滴定至溶液由酒红色恰变为纯蓝色，即为终点，记下消耗的EDTA体积V1。按照以上方法重复滴定3次，要求其相对平均偏差不大于0.2 %，根据标定时消耗的EDTA溶液的体积计算它的准确浓度。 （2）Ca2+的滴定：用移液管移取25.00ml待测溶液于锥形瓶中，调节溶液pH 为12~13,充分摇匀，加入5滴钙指示剂，用EDTA标准溶液滴定至溶液由酒红色变为纯蓝色为终点，记下体积V2，重复滴定3次，记录消耗EDTA溶液的体积。
水中钙的测定
水质钙检测方法 1.目的 本方法规定了用乙二胺四乙酸二钠滴定法测定公司生产用水及生活饮用水中钙的含量。 2.范围 本方法适用于公司所有生产用水及生活饮用水。 3.原理 EDTA-Na与钙、镁离子都能生成溶于水的络合物，但EDTA-Na与钙离子生成的络合物有较高的稳定性。当pH>12.5时，镁离子生成氢氧化镁的沉淀，可用EDTA单独滴定钙离子。滴定以铬蓝黑R（钙指示剂）指示终点。铬蓝黑R在终点前显示它与钙的络合物的红色，终点时转变为它本身的蓝色。 4.安全及环保要求 4.1.配制化学品试剂及检测过程，必须遵照MSDS要求佩戴相关的PPE。 5.试剂 5.1.0.0100mol/L EDTA-Na标准溶液：配制与标定同总硬度。 5.2.钙指示剂（铬蓝黑R）：称取50mg钙试剂,加入25g氯化钾,在研钵中充分研磨成细粉后, 贮藏于密封的暗色瓶中，有效期2个月。 5.3.2mol/l NaOH溶液：称取80g氢氧化钠溶于纯水中并稀释至1000mL。此试剂贮存于玻璃瓶 或聚乙烯瓶中，有效期2个月 6.仪器 6.1.滴定管 6.2.移液管 6.3.三角瓶 7.操作规程
7.1. 吸取适当体积的水样（50mL ）于三角瓶中，加入2mL 氢氧化钠溶液，或适当体积氢氧化钠 溶液使水样的pH ≈12.5。 7.2. 加入0.1～0.2g 钙指示剂粉末，立即用EDTA-Na 标准溶液滴定至由红色转变至纯蓝色即为 终点。滴定时要不断摇荡，将近终点时，滴定要慢。(同时做空白试验) 8.结果和方法可靠性的表述 计算公式： ρ(Ca)=12()40.081000 V V c V -??? 式中：ρ(Ca)—水样中钙的质量浓度，mg/L ； V 1—滴定中所消耗EDTA-2Na 溶液的体积，mL; V 2—空白所消耗EDTA-2Na 溶液的体积，mL ； c —EDTA-2Na 溶液的浓度，mol/L ； 40.08—与1.00mLEDTA-2Na 标准溶液相当的以克表示钙的质量； V —所取水样的体积，mL 。 9.附注 10.附件 文件历史记录
降钙素原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求huachengyuan
降钙素原检测试剂盒（胶体金免疫层析法） 适用范围：本产品适用于体外半定量检测人血清/血浆/全血中的降钙素原的含量。 1. 产品型号/规格及其划分说明 1.1产品型号 产品型号及分类如下表1： 表1 产品型号及分类 U系列（卡型）G系列（条型）宽度(mm) U2 G2 2.5 U3 G3 3.3 U4 G4 4.0 U5 G5 5.0 注：产品相同系列不同型号间除试剂条宽度外，其余完全一致。 U系列是在G系列试剂条的基础上加卡壳，其余完全一致。 1.2 包装规格 卡型：1人份/盒、1人份/袋； 条型：100人份/盒、50人份/盒、25人份/盒、1人份/袋。 1.3主要组成成分
（1）检测试剂卡/条由样品垫、金结合物垫（金垫上固定胶体金标记的PCT鼠源单克隆抗体）、硝酸纤维素膜（T线包被PCT鼠源单克隆抗体，C线包被有羊抗鼠IgG抗体）、吸水纸、PVC胶板构成。 （2）干燥剂。 2. 性能指标 2.1 物理性状 2.1.1 外观 a）试剂盒的外观应平整、边缘无毛刺； b）测试块与基底片固定应紧密、不能有缺损或脱落； c）测试块外观整齐、色泽均匀、不能有色斑或污渍。 2.1.2膜条宽度 试纸条宽度应U2、G2不小于2.5mm；U3、G3不小于3.3mm；U4、G4不小于4.0mm；U5、G5不小于5.0mm。 2.1.3液体移行速度 液体移行速度应不低于10mm/min。 2.2 重复性及准确性 分别用浓度为0.4ng/ml、0.5ng/ml、2.0ng/ml、10ng/ml的降钙素原质控液重复测试20次，检测结果与相应质控液标示值相差同向不超过一个量级，不得出现反向相差。阳性质控液不得出现阴性结果，阴性质控液不得出现阳性结果，各浓度检测结果一致性不低于90%。 2.3 HOOK效应
病理检验技术(1)
荧光原位杂交 FISH 用DNA探针与组织切片上互补的DNA杂交，通过观察荧光信号在染色体上的位置和颜色来反映相应基因的情况。 第一章病理检验技术概述 病理学的作用： 1、研究疾病的病因、发病机制，认识 疾病的发生发展规律 2、为临床诊断疾病、治疗疾病、分析预 后提供依据等。 病理检验的定义： ------在临床医疗实践中，通过对患者病变组织或细胞进行检查，以协助临床诊断疾病的方法称为病理检验。 一、病理检验的主要任务 （一）确定疾病的诊断 （二）为临床选择治疗方案提供依据 （三）提供有关预后因素的信息。（最正确、最可靠、最后的诊断） （四）了解疾病的发展及分析疗效 （五）为科学研究积累资料 （六）为提高临床诊断水平服务 二、病理检验分类 （一）细胞学检验（脱落细胞、细针穿刺吸取） （二）组织学检验---最后的诊断 活体组织检验、手术标本检验、手术中病理检验 （三）尸体剖验 病理学技术： 在病理学临床及科学研究工作中使用的各种技术方法统称为病理学技术。病理检验技术的质量和水平是临床病理诊断工作中至关重要的因素。“技术是病理学之母。” 第二节、病理检验技术常规工作 收发工作 协助取材和尸体剖检工作 制作制作切片及细胞学涂片 病理资料管理及检索 药品、物资的管理及仪器维护 大体标本的收集和制作 第六章组织制片技术 P39 常规石蜡切片制作程序
组织固定→取材→固定→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→染色→封片→观察 第一节组织块的处理 （一）组织切片制作过程中的各种操作： 1、取材与固定：合理取材、及时固定； 2、洗涤、脱水、透明； 4、浸蜡、包埋； 5、切片、贴片（展片、捞片）和染色： 6、封片：长期保存。 一、取材： -------按照病理检查的目的和要求，切取适当大小和数量的组织块，用于制作组织切片的过程。 注意事项： 部位、大小、形状、方向 二、固定和固定液 固定：将组织浸入某些化学试剂，使组织细胞内的物质尽量保持在生活状态时的形态结构和位置过程。 （一）固定目的： （1）防止组织、细胞的自溶与腐败；（2）凝固或沉淀细胞内物质； （3）增加组织硬度，便于制片； （4）产生不同的折光率，有利于染色后观察辨认。 （二）固定方法： 1、浸泡固定法：病理外检一般均用此法； 2、注射、灌注法：体积过大或整个脏器或尸体的固定； 3、微波固定法：应用于临床病理快速诊断，微波固定组织温度至关重要。微波固定介质可用 生理盐水或10%甲醛。 4、蒸汽固定法：为了固定组织中可溶性物质、 血液、细胞涂片等； （三）固定液的特性： 1、渗透力强，迅速渗入组织内部 2、不会使组织过度收缩或膨胀 3、能硬化组织，保持细胞形态和位置 4、使组织对染料产生亲和力，产生折光率（四）组织固定注意事项： 1、及时固定 2、固定容器宜大 3、固定液应足量：固定组织体积的10-20倍 4、防止组织变形 5、确定恰当的固定时间 （五）组织固定液 常用固定液： 1、4%甲醛（福尔马林）：配置为市售的40%甲醛1份加水9份混合即成； 2、酒精（乙醇）：高浓度组织硬化显著，先用80%固定数小时，再用95%固定； 3、中性缓冲甲醛液：可提高免疫组化阳性率。 4、酒精-甲醛液（A-F固定液）： 5、Zenker固定液： 1、4%甲醛（福尔马林）： 久置能产生白色沉淀（三聚甲醛），容易氧化变成甲酸，严重影响细胞核着色。
钙离子的测定——EDTA滴定法
钙离子的测定——EDTA 滴定法 本方法适用于循环冷却水和天然水中钙离子的测定。 1．0 原理 钙黄绿素能与水中钙离子生成莹光黄绿色络合物，在PH ＞12时，用EDTA 标准溶液滴定钙，当接近终点时，EDTA 夺取与指示剂结合的钙，溶液莹光黄绿色消失，呈混合指示剂的红色，即为终点。 2．0 试剂 2．1 1+1盐酸溶液 2．2 20%氢氧化钾溶液。 2．3 钙黄绿素酚酞混合指示剂 称取钙黄绿素酚酞置于研钵中，再加入20g 氯化钾，研细混匀，贮于广口瓶中。 2．4 LEDTA 标准溶液 3．0 仪器 3．1 滴定管：25mL 3．2 移液管：5mL 4．0 分析步骤 吸取经中速滤纸干过滤的水样50mL ，移入250mL 锥形瓶中，加1+1盐酸3滴，混匀，加热煮沸半分钟，冷却至50℃以下加5mL20%氢氧化钾溶液，再加约80mg 钙黄绿素酚酞混合指示剂，用L EDTA 标准溶液滴定至莹光黄绿色消失，出现红色即为终点。 5．0 分析结果的计算 水样中钙离子含量X （毫克/升，以CaCO3计），按下式计算： X=W V M V 10008.100??? 式中： V ——滴定时EDTA 标准溶液消耗体积，毫升； M ——EDTA 标准溶液浓度，摩尔/升； Vw ——水样体积，毫升； ——碳酸钙摩尔质量，克/摩尔。 6．0 注释 6．1 若测定时有轻度返色，可滴至不返色为止。 6．2 若返色严重可用慢速滤纸对水样进行“干过滤”。 6．3 也可采用钙指示剂或紫脲酸铵作指示剂。 7．0 允许差 水中钙离子含量在500mg/L （以CaCO3计）时，平行测定两结果差不大于2mg/L 。 8．0 结果表示 取平行测定两结果算术平均值，作为水样的钙离子含量。
罗氏诊断降钙素原(PCT)中文说明书
05056888 200 100测试 主要用途 用于体外定量检测人体血清或血浆中的PCT (procalcitonin)。 Elecsys BRAHMS PCT检测可辅助临床早期诊断相关的细菌感染。 Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。 临床应用 降钙素原（PCT）是由116个氨基酸组成的激素原，分子量大约为12.7kD。PCT由神经内分泌细胞（包括甲状腺、肺和胰腺组织的C细胞）表达，经酶切分解为（未成熟）降钙素、羧基端肽和氨基端肽。健康人血中仅含有少量的PCT1,2。细菌感染后PCT会明显升高。 动物模型试验显示机体发生脓毒血症时，多组织均能表达PCT３。脓毒血症患者体内的PCT只含有114个氨基酸，缺少氨基末端的Ala-Pro4。PCT水平升高见于细菌性脓毒血症，尤其是重症脓毒血症和感染性休克5,6,7,8,9,10。PCT可作为脓毒血症的预后指标8,11,12,13，也是急性重症胰腺炎及其主要并发症的可靠指标14,15。 对于社区获得性呼吸道感染和空调诱导性肺 炎患者，PCT可作为抗生素选择以及疗效判断的指标。 检测原理 双抗体夹心法，总检测时间：18分钟 ●第一次孵育：30μl样本、生物素化的单 克隆PCT抗体以及钌复合物标记a的单克隆 PCT抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复 合物。 ●第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠 微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素 和链霉素的作用结合。 ●将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁 珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通 过ProCell被去除。给电极加以一定的电 压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器 测量发光强度。 ●Elecsys软件自动通过定标曲线计算得到 检测结果。 a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-co mplex (Ru(bpy){ 2 3 }三联吡啶钌 试剂－工作溶液 M 包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶6.5ml；包被链霉亲和素的磁珠微粒， 0.72mg/ml；防腐剂。 R1生物素化的Anti-PCT抗体（灰色瓶盖），每瓶9ml：生物素化的Anti-PCT抗体（小鼠源）约 2.0μg/mL，磷酸盐缓冲液95 mmol/L，Ph7.5;防腐剂。 R2 钌复合物标记a的Anti-PCT抗体（黑色瓶盖），每瓶9ml：钌复合物标记a的Anti-PCT 抗体（小鼠源）5.6 μg/mL；磷酸盐缓冲液 95 mmol/L，pH7.5;防腐剂。 Cal1 冻干的PCT定标液1（白色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约0.10ng/mL; 防腐剂。 Cal2冻干的PCT定标液2（黑色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约54ng/mL; 防腐剂。 PC PCT1冻干的PCT质控品1（米色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约0.50ng/mL; 防腐剂。 PC PCT2冻干的PCT质控品2（褐色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约10ng/mL; 防腐剂。 定标：不同批号试剂条码中编码有相应批号的定标值。 质控：不同批号的批特异性质控靶值和范围参见试剂盒附带的数值表。 警告和注意事项 仅用于体外诊断。 在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。 专业人员可要求获得安全数据报告。 所有人源性物质必须视为有潜在感染性。 所有产品由献血员单体提供，经特殊制备而成，经检测HB S Ag、HCV抗体、HIV抗体，均为阴性。 所应用的检测方法经FDA认可或符合欧洲法令98/79/EC附件II列表A。 但由于任何实验方法都不能绝对地排除潜在感染的危险，故该产品仍需视作病人样本一样仔细处理。接触者必须遵循健康专业机构相应的法规12，13。
EDTA脱钙液
EDTA脱钙液 产品简介： 一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切除完整的切片。对含钙组织最好固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游的实验，如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸（EDTA）以及电解法脱钙。 EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂，对组织结构影响最小，可以较好的保存组织的某些酶类， 经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢，一般脱需要数周至数月。 Leagene EDTA脱钙液优点：①经EDTA脱钙的组织染色结果好；②对组织的结构损害小；③用化学方法测试可以确定脱钙的终点。 Leagene EDTA脱钙液缺点：①脱钙速度很慢，不适合常规标本脱钙使用；②脱钙后组织会稍微变硬。 主要成分：主要由EDTA、磷酸盐等组成，用NaOH溶液调pH值为7.2。 自备材料： 1、PBS 2、蒸馏水 3、加热装置或微波炉 操作步骤（仅供参考）： 1、骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm。 2、组织固定后，用PBS清洗3次，每次20min。 3、组织用蒸馏水洗清洗3次，每次20min。 4、组织转移至20~30倍体积的EDTA脱钙液中，脱钙10～30天或更长时间。如果想加 快脱钙速度，可以置于37℃进行脱钙。如果必要，更换新的EDTA脱钙液继续脱钙，多数组织脱钙2周～3个月即可，每周更换一次，直至终点。亦可采用微波快速脱钙法：
微波炉设在200W左右的档位，每次加热5min，依据组织厚度和密度重复3～5min，中间间隔3～5min。 5、用蒸馏水冲洗数次。 6、常规脱水、包埋。 注意事项： 1、厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可。 2、适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37～40℃，温度过高容易使骨组织造成松散解体，尤其不可大于60℃。 3、脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。 4、脱钙用具避免使用金属容器，尽量使用玻璃容器。 5、骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的损伤程度。 6、每隔一段时间检测一次脱钙程度，避免脱钙过度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。 7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期：12个月有效。 附录： 脱钙终点的测定（物理法）：采用针刺、手掐、钳夹等方法，当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害， 尽量避免用力过大或反复检测。 相关产品： 产品编号 产品名称 DD0012甲酸脱钙液 DD0020电解脱钙液(2.5%甲酸) DD0028脱钙后碱处理液 DZ0029硫酸钠水溶液(5%) DH0006苏木素伊红(HE)染色液试剂盒 DZ0209脱钙终点检测试剂盒(化学法)
钙 EDTA滴定法
FHZHJSZ0014 水质 钙的测定 ＥＤＴＡ滴定法 F-HZ-HJ-SZ-0014 水质 ＥＤＴＡ滴定法 本方法等效采用IS06058水质EDTA 滴定法 １ 适用范围 本方法规定用EDTA 滴定法测定地下水和地面水中钙含量 适用于钙含量2~100mg/L(0.05~2.5mmol/L)范围 ２ 原理 在pH 12~13条件下以钙羧酸为指示剂与钙形成红色络合物不干扰测定游离钙离子首先和EDTA 反应 达到终点时溶液由红色转为亮蓝色 或纯度与之相当的水 2mol/L 溶液 盛放在聚乙烯瓶中 3.2 EDTA 二钠标准溶液 10mmol/L 2H 2O)在80 取出放在干燥器中 冷至室温在容量瓶中定容至1000mL ?¨?úD￡?? ???¨?è ó???±ê×?èüòo(3.3)标定EDTA 二钠溶液(3.2.1) 稀释至50mL 11 2 21………………………………………………= V V c c 式中mmol/L; V 2钙标准溶液的体积 V 1标定中消耗的EDTA 溶液体积 ３．３ 钙标准溶液 将一份碳酸钙(CaCO 3)在150取出放在干燥器中冷至室温 用水润湿避免加入过量酸 冷至室温 乙醇中)?úèYá????D?¨èY?á1000mL 3.4 钙羧酸指示剂干粉 ＮＣ10H 5(OH)COOH 羧基（２4 132-hydroxy-1-(2-hydroxy-4-sulfo-l-naphthyiazo)-3-naphthoic acid C 21H 14N 2O 7S]与100g 氯化钠(NaCl)充分混合装在棕色瓶 中
注该指示剂又名钙指示剂其钠盐称为钙羧酸钠NaO3SC10H5(OH)N 或C21H13N2O7S 可使用紫脲酸铵代替钙羧酸(见附录A). 3.5 氰化钠(NaCN) ?è?ˉ??ê??????·2éè?±?òaμ?·à?¤ 3.6 三乙醇胺[N(CH2CH2OH)3] 滴定管分刻度至0.10mL 采样前先将瓶洗净 再采集于瓶中 应先放水数分钟然后将水样收集于瓶中河可将采样设备浸入水中然后拉开瓶塞 水样采集后(尽快送往实验室)·??ò ６ 操作步骤 6.1 试样的制备 试样应含钙2~100mg/L(0.05~2.5mmol/L)ê1???¨?è?úé?ê?·??§?ú 如试样经酸化保存计算结果时 6.2 测定 用移液管吸取50.0mL试样于250mL锥形瓶中约0.2g钙羧酸指示剂干粉(3.4)?ú2?????ò???×?μ??¨1ü?óè?EDTA二钠溶液(3.2) ?ó?ü??μ?ê±ó|é??y并充分振摇 表示到达终点记录消耗EDTA二钠溶液体积的毫升数 在临滴定前加入250mg氰化钠(3.5)或数毫升三乙醇胺(3.6)掩蔽铜三乙醇胺能减少铝的干扰 试样含正磷酸盐超出lmg/Lè?μ??¨?ù?èì??y è?é?ê??éè??′?ü??3y±μ?ìμèà?×ó?éè?ê± ７ 结果计算 钙含量c(mg/L)用式(2)计算 c1EDTA二钠溶液浓度 V1滴定中消耗EDTA二钠溶液的体积 V o试样体积 A钙的原子质量(40.08) ?òDè2éó???êíòò×óF修正计算
降钙素原(PCT)测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法)产品技术要求puenguangde
降钙素原（PCT）测定试剂盒（磁微粒化学发光免疫分析法） 组成： 适用范围：用于体外定量测定人血清中降钙素原（PCT）的含量。 2.1 外观 2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏； 2.1.2 中文包装标签应清晰，无磨损。 2.2 空白限 空白限浓度应不高于0.05ng/mL。 2.3 线性 在[0.05,200]ng/mL区间内，线性相关系数（r）应不低于0.99，且线性区间[0.05,20.0]ng/mL内，绝对偏差应不超过±3.0ng/mL；线性区间(20.0,200]ng/mL内，相对偏差应不超过±15%。 2.4 重复性 分别用高、低浓度的样本各重复检测10次，其变异系数（CV）应不大于10%。
2.5 准确度 将纯品配制的溶液（A）加入到人源样本（B）中，其回收率应在85%～115%之间。 2.6 分析特异性 将下表规定浓度的干扰物质用试剂盒进行测定，检测结果的浓度值不得超过0.05ng/mL。 2.7 溯源性 根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容。校准品溯源至企业工作校准品，并与已上市产品比对赋值。 2.8 质控品赋值有效性 本试剂盒质控品的测定结果应在质控范围内。 2.9 批间差 用3个批号的产品分别检测同一份样本，3批产品间的相对极差（R）应不大于15%。 2.10稳定性 试剂盒在（2～8）℃储存条件下的有效期为12个月，试剂盒在规定的条件下保存，取到效期后的试剂盒进行检测，检验结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6的规定。
脱钙液
脱钙液 （一）酸性溶液脱钙法 1．硝酸-间苯三酚液：浓硝酸10ml，间苯三酚1g，通风橱内混合。 混合时会产生浓的棕黄色双硫磷烟雾。然后加10%硝酸100ml。 骨组织块5mm 厚脱钙时间12-24 小时。 优点：该液脱钙速度非常快，大概是所有脱钙液中速度最快的一种脱钙液。 缺点：（1）细胞核染色很差。 （2）如果脱钙时间太长对组织有较大的损害。 （3）用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少24小时。 （4）用化学方法测试不能确定脱钙的终点。 2．硝酸水溶液：浓硝酸5-10ml，蒸馏水加至100ml。厚度5mm 骨组织块脱钙12-24 小时。 优点：（1）硝酸水溶液是一种迅速的脱钙液。 （2）对组织损害较少，细胞核着色比福尔马林-硝酸液要好。 （3）组织可直接通过70%乙醇去除酸。 缺点：脱钙时间必需仔细控制防止过度脱钙损害组织。 3．福尔马林-硝酸液：40%甲醛5ml，浓硝酸10ml，蒸馏水85ml。 5mm 厚的骨组织块脱钙时间需要1-3 天。 优点（1）福尔马林-硝酸液是一种迅速的脱钙液。 （2）该液脱钙的组织比间苯三酚-硝酸液细胞核染色好。 （3）可作为紧急活检脱钙用。
（4）该液和5-10%硝酸水溶液一样对组织几乎没有损害。 缺点：（1）该液对细胞核作用较慢，使细胞核着色较差。 （2）用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少12小时。4．Perenyi’s 液：10%硝酸4 份，0.5%铬酸3 份，无水乙醇3 份。 5mm 厚的骨组织块脱钙时间需要2-7 天。 优点：（1）该液是一种温和的脱钙液，可能由于铬酸和乙醇的存在可以抑制组织泡软。 （2）细胞核和细胞浆细微结构着色均好。 （3）推荐该液作为常规脱钙使用。 （4）组织脱钙后不需要碱性液中和和流水冲洗。脱钙组织直接移到90% 乙醇中。 缺点：（1）脱钙较慢，因此，紧急情况下不能使用。 （2）用化学方法测试不能确定脱钙的终点。 5．Von Ebener’s 液：饱和水溶液氯化钠50ml，蒸馏水50 ml，浓盐酸8 ml。厚度5mm 骨组织块脱钙3-7 天。 优点：（1）细胞核染色相当好。 （2）不需要水洗，脱水时酸就会首先被脱出来。 缺点：使用化学方法测试不能确定脱钙的终点。 6．甲酸液：甲酸10ml，10%福尔马林盐90ml。厚度5mm 骨组织块脱钙时间需要3-7 天。 优点：（1）脱钙同时可以对组织固定。 （2）对细胞核染色比较好。
案例八葡萄糖酸钙制剂中钙含量的测定
案例一 尿素中氮含量的测定 尿素CO(NH 2)2经浓硫酸消化后转化为(NH 4)2SO 4，过量的H 2SO 4 以甲基红作指示剂，用NaOH 标准溶液滴定至溶液从红色到黄色。(NH 4)2SO 4为强酸弱碱盐，由于NH 4+ 的酸性太弱(K a =5.6×10-10 )，故不能用NaOH 标准溶液直接滴定。但NH 4+可与甲醛作用定量地生成六次甲基四胺盐和H +，反应式为： 4NH 4+ +6HCHO=(CH 2)6N 4H + +6H 2O+3H + 由于生成的(CH 2)6N 4H + (K a =7.1×10-6)和H +可用NaOH 标准溶液滴定，滴定终点生成的(CH 2)6N 4 是弱碱，，溶液的pH 值约为9，应选用酚酞为指示剂，滴定至溶液突现微红色即为终点。 试样中氮含量的计算式为：-3NaOH NaOH N N 10100%25.00250.0 C V M m ω?=??试样 案例二 阿司匹林药片中乙酰水杨酸含量的测定 阿司匹林的主要成分是乙酰水杨酸。乙酰水杨酸是有机弱酸(K a =1.0×10-3)，结构式，1r M 180.16g mol -=?，微溶于水，易溶于乙醇。在强碱性溶液中溶解并水解为水杨酸和乙酸盐，反应式如下： 乙酰水杨酸含量的计算式为： 3NaOH NaOH HCl HCl 1)M 10210100%10.00250.0 C V C V m ω-?-??=??乙酰水杨酸乙酰水杨酸试样（ 由于药片中一般都添加一定量的赋形剂如硬脂酸镁、淀粉等不溶物，不宜直接滴定，可采用返滴定法进行测定。将药片研磨成粉末状后加入过量的NaOH 标准溶液，加热一段时间使乙酰基水解完全，再用HCl 标准溶液回滴过量的NaOH ，滴定至溶液由红色变为接近无色即为终点。在这一滴定反应中，1mol 乙酰水杨酸消耗2molNaOH 。
降钙素原测定试剂盒(磁微粒化学发光法)产品技术要求meilianke
降钙素原测定试剂盒（磁微粒化学发光法） 适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清、血浆或全血样本中降钙素原(PCT)的含量。 1.1包装规格 10人份/盒 1.2主要组成成分 试剂盒由检测试剂条、质控品（冻干品）、校准品1（冻干品）、校准品2（冻干品）、盒签二维码组成。 表1 试剂盒主要组分 表2 单人份检测试剂条组分
2.1外观 试剂盒组分应齐全、完整；检测试剂条应无漏液、无破损、无污染；中文包装标签应清晰，易识别。
2.2 校准品溯源性 根据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，该校准品溯源至出厂商的工作校准品。 2.3准确度 将已知浓度的降钙素原（PCT）加入到低值人血清样本中，其回收率应在[85%,115%]范围内。 2.4检出限 检出限不高于0.08ng/mL。 2.5线性 在[0.08,100] ng/mL的线性范围内，相关系数r应≥0.990。 2.6重复性 测试（0.5±0.1）ng/mL和（10±1）ng/mL两个区间样本，CV≤10%。 2.7批间差 用三个批号的试剂盒测试（0.5±0.1）ng/mL和（10±1）ng/mL两个区间样本，CV≤15%。 2.8 特异性 浓度为1ng/mL的人降钙素、0.6ng/mL的人降钙素基因相关肽交叉反应率应小于5%。 2.9质控品赋值有效性 测定值在质控品质控范围内。 2.10校准品和质控品瓶间差 校准品和质控品瓶间差CV＜10% 2.11稳定性 2.11.1效期稳定性 取效期后的试剂盒检测外观、准确度、检出限、线性、重复性、特异性，应符合2.1、2.3～2.6、2.8的要求。 2.11.2 质控品复溶稳定性
缓冲液及组织固定液的配制
缓冲液及组织固定液的配制 1、磷酸盐缓冲液的配制 关于缓冲溶液PB的配制，好多参考书如生物技术实验的后面均附有缓冲溶液的配制配方，可以根据需要配制pH5.7～8.0的磷酸盐缓冲。磷酸盐缓冲液称简PB，加NaCl（氯化钠）的称PBS，加KCl（氯化钾）、NaCl（氯化钠）的称KPBS。S就是指氯化钠的含量，一般为0.85％，即是100ml里面加0.85克，这个时候的PBS的浓度是0.1M的。一般在免疫组化洗涤中采用0.01M的PBS，pH7.0～7.4。我们在实验中直接将0.1M的稀释十倍，即可。最好能现配现用。母液4℃可以保持1～2周，影响不大。 成份 分子量 （MW） 浓度（g/1000mL） 0.01M PBS①0.1M PBS0.1M PB Na2HPO4·12H2O 358.14 2.684 29.009 29.009 NaH2PO4·2H2O 156.01 0.39 2.964 2.964 NaCl 58.44 8.5 8.5~9 / pH值/ 7.4 7.4 7.4 注：①配方来自网上。 2、组织固定液的配制 2.1、4%多聚甲醛-0.1M磷酸缓冲液[1]（pH=7.3）：多聚甲醛40g，置于三角烧瓶中，加入500~800mL 0.1M的磷酸缓冲液（PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）至粉末完全溶解，通常需要滴加少许1N NaOH才能使溶液澄清，最后补足0.1M PB至1000mL，充分混匀。该固定试剂适用于光镜免疫细胞化学研究，因较温和，适用于组织标本的较长期保存。 2.2、10%中性缓冲福尔马林固定液[2]：甲醛溶液（37~40%）100mL，蒸馏水900mL，NaH2PO4（磷酸二氢钠）4g，Na2HPO4（磷酸氢二钠）6.5g，混合摇匀后调pH至7.2~7.4。 2.3、10%福尔马林固定液配制[2]：甲醛溶液（37~40%）100mL，自来水900mL，混合后在溶液中加入碳酸钙使溶液呈中性或偏碱性。 2.4、10%中性甲醛液[3]：甲醛原液100mL，0.01M PBS 1000mL（磷酸缓冲液pH 7.4）。
钙的测定(EDTA滴定法)
钙的测定（EDTA滴定法） 1 概要 在强碱性溶液中（PH>12.5），使镁离子生成氢氧化镁沉淀后，用乙二胺四乙酸二钠盐（简称EDTA）单独与钙离子作用生成稳定的无色络合物。滴定时用钙红指示剂指示终点。钙红指示剂在相同条件下，也能与钙形成酒红色络合物，但其稳定性比钙和EDTA形成的无色络合物稍差。当用EDTA滴定时，先将游离钙离子络合完后，再夺取指示剂络合物中的钙，使指示剂释放出来，溶液就从酒红色变为蓝色，即为终点。 2 试剂 2.1 0.02MEDTA标准溶液：配制和标定方法见附录2。 2.2 2M氢氧化钠溶液。 2.3 钙红指示剂：称取1g钙红[HO（HO 3S）C 10 H 6 NNC 10 H 5 （OH）COOH]与100g氯 化钠固体研磨混匀。 3 测定方法 3.1 按表8-2-1取适量水样于250ml锥形瓶中用蒸馏水稀释至100ml。 3.2 加入5ml2M氢氧化钠溶液和约0.05g钙红指示剂，摇匀。 3.3 用EDTA标准溶液滴定至溶液由酒红色转变为蓝色，即到终点。记录EDTA 标准溶液用量（a）。 水样中钙（Ca）含量（mg/l）按下式计算： M·a×40.08 Ca = ————————×1000 V 式中 M——EDTA标准溶液的摩尔浓度，M。 a——滴定时消耗EDTA标准溶液的体积，ml； V——水样的体积，ml。 40.08——钙的原子量。 [注释] 1）在加入氢氧化钠溶液后应立即迅速滴定，以免因放置过久引起水样浑浊，造成终点不清楚。 2）当水样的镁离子含量大于30mg/l时，应将水样稀释后测定。 3）若水样中重碳酸钙含量较多时，应先将水样酸化煮沸，然后用氢氧化钠溶液中和后进行测定。 4）钙红又称钙指示剂。若无钙红时，也可用紫尿酸铵或钙试剂（依来铬蓝黑
钙试剂中钙含量的测定
钙试剂中钙含量的测定 一．实验目的 1.掌握配位滴定法测定钙试剂中钙含量的原理和方法及相关计算。 2. 掌握氧化还原滴定法测定钙试剂中钙含量的原理和方法及相关计算。 二．实验原理 EDTA制定溶液后，可用ZnO基准物标定。当用缓冲溶液控制溶液酸度PH=10，EDTA可与Zn2+反应生成稳定的配合物。铬黑T为指定剂，终点由酒红色变为纯蓝色。 用HCl调节试样,再用NaOH调节试样PH=12,CaCO3形成Ca2+,用EDTA标准滴定溶液可滴定Ca2+,钙指示剂在终点时由红色变为蓝色。 用HCl调节后,用KmnO4标准滴定溶液可滴定Ca2+。 KmnO4在强酸性条件下，可以获得5个电子还原成为Mn2+，利用其氧化性，在H2SO4介质中可以与基准物Na2C2O4发生反应，与KMnO4为自身指示剂。根据基准物Na2C2O4的质量及所有KMnO4溶液的体积，计算KMnO4标准溶液的浓度。 在弱碱性溶液中，Ca2+可被（NH4）2C2O4沉淀为CaC2O4。将沉淀滤出洗净后，溶于H2S0溶液中，然后用KMnO4标准滴定溶液滴定与Ca2+相当的C2O42-。 三．实验试剂 EDTA标准滴定溶液c(EDTA)=0.02mol.-1； 钙指示剂：钙指示剂1.0g与固体NaCl(干燥，研细)100g混合均匀。临用前配制； HCl（1+1）； NaOH溶液c(NaOH)=4mol/L：160g固体NaOH溶于500mL水中,冷却至室温,稀释至1000mL； 刚果红试纸； KmnO4标准滴定溶液c(KmnO4)=0.02mol.-1； 甲基橙指示液（1g.L-1）。 四．实验步骤 1.准确称取碳酸钙试样0.7~1.0g,置于250mL锥形瓶中,以5mL水润湿,加入刚果红试纸,加入HCl (1+1) 1~2滴,至试纸变蓝紫色为止,加入4mol.Ｌ-1的NaOH溶液４mL，再加少量钙指示剂，用EDTA标准滴定溶液滴定至溶液由红色变成蓝色，即为终点。记录消耗EDTA标准滴定溶液滴定至溶液的体积。平均测定３次。 ２. 准确称取碳酸钙试样0.１２～０.１５g，置于250mL锥形瓶中,以5mL水润湿,缓慢,滴加HCl (1+1) ３～５mL,同时不断摇动锥形瓶使之溶解。待溶解完全后，加20mL水，35mL （NH4）2C2O4溶液及２滴甲基橙指示液，加热近沸，滴加10%氨水至溶液呈橙黄色，保温30min,并随时搅拌,使沉淀陈化,放置冷却。 用中速滤纸以倾斜法过滤，用稀（NH4）2C2O4溶液（10mL上述试剂溶液稀释至100mL）以倾斜法将沉淀洗涤3~4次,再将沉淀全部转移到滤纸上,然后用水洗涤至流出液中不含Cl-为止(以AgNO3)检查. 再用KmnO4标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色，即为终点。记录消耗KmnO4标准滴定溶液滴定至溶液的体积。平均测定２次。 五．实验数据计算