细胞工程复习题及答案.
细胞工程复习题
一、名词解释
1.细胞工程：以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状,生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。
2.外植体：指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料
3.植物组织培养：将植物的器官、组织或细胞，在无菌条件下接种于人工配置的培养基上，使其细胞分裂、增值、分化、发育，甚至形成完整植株的方法。
4.愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。
5．离体无性繁殖:简称离体繁殖，是指利用组织培养方法进行植物离体培养，在短期内获得大量遗传性一致个体的方法。
6．继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织.芽等）。
7.体细胞杂交：（原生质体融合）指在人工控制条件下不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。
8 细胞分化：即由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变，或发育方式改变的过程。
9 细胞脱分化：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。
10 细胞再分化：即脱分化后的分生细胞在特定的条件下，重新恢复细胞分化能力，并经历器官发生形成单极性的芽或根，或经历胚胎发生形成双极性的胚状体，进一步发育成完整植物体，这一过程成为细胞再分化。
11 人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。
12 植物细胞全能性：指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息，具备发育完整植株的潜在能力。
13 胚状体：在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。
14 单倍体植物：单倍体是指具有配子体染色体数的孢子体(植物个体)。具有单套染色体的细胞在人工离体条件下培养，使其单性发育成植物体。这种具有单套染色体的植物称为单倍体植物。
15 离体受精：（离体授粉）在无菌条件下培养未受精脂肪或胚珠和花粉，使花粉萌发进入胚珠，完成受精作用。
16 悬浮培养：是将植物游离细胞或细小的细胞团，在液体培养基中进行培养的方法。
17 看护培养：是用一块活跃生长的愈伤组织来促进培养细胞持续分裂和增值的方法。
18 突变体筛选：
19 原生质体：指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞。
20 传代：将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养
21细胞分裂指数
22克隆化：一个克隆的细胞群体是从一个单一母细胞繁殖而来。分离单一细胞并使其繁殖为一细胞群体的方法
23原代培养：也称初代培养期。从体内取出组织接种在培养瓶中培养到第一次传代前阶段，一般持续1-4周。
24有限细胞系：经继代培养后细胞系即使培养条件均能满足细胞繁殖生长，它们也只能在有限的时间内生存，经过运动世代后细胞将逐渐死亡。
25永久细胞系:大多数细胞系在有限的代数内以不变的形式增殖，当超过有限世代后，在体外永久存活下来发育成永久细胞系或称连续细胞系
26细胞系：经过再培养后而形成的具有增殖能力、特性专一、类型均匀的培养细胞
27细胞株：将所得到的纯净细胞群，以一定的密度接种在lmm厚的薄层固体培养基上，进行平板培养，使之形成细胞团，尽可能地使每个细胞团均来自一个单细胞，这种细胞团称为“细胞株”。
29克隆：指通过无性繁殖的手段，从一个动物细胞获得遗传背景相同的细胞群或个体群的过程。获得的细胞叫克隆细胞，个体群称为克隆动物。
30胞质体：是除去细胞核后由膜包裹的无核细胞。植物去核原生质体又称微质体或亚原生质体。
31细胞重组又叫细胞拆合是指从活细胞中分离出细胞器及其组分，后在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分进行重组，使其重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术。
32接触抑制：当细胞在基质上分裂增殖，逐渐汇合成片即每个细胞与其周围的细胞相互接触时，细胞就停止增殖，即细胞密度不再增加
33胚胎工程：在体外受精和体外早期胚胎发育的基础上，通过卵子切割、性别控制、嵌合体制作、细胞核移植、转基因操作等定向控制、改造和创造新遗传性状的技术统称为胚胎工程，又称发育工程。
34干细胞：干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，它可以化成多种功能细胞
35核质体：由原生质膜和薄层细胞质包围细胞核形成的小原生质体。也称为微小原生质体36胚胎干细胞：胚胎干细胞是由早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞分离出来的多潜能细胞。
二、问答题
1、植物细胞工程实验室的组成和基本要求有哪些？
基本操作室（洗涤区、灭菌区、贮藏区、培养基配制区）、无菌操作室（缓冲准备室、接种室）、培养室、鉴定分析室、温室
便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察
2、植物组培中有哪些灭菌方法，其适用范围如何？
干热灭菌法：各种玻璃器皿和器械
湿热灭菌法：培养基、蒸馏水、各种器械、棉塞
熏蒸灭菌：接种室和培养室
过滤灭菌：液体培养基
药剂灭菌：培养材料
烧灼灭菌：接种器械、瓶口、棉塞
射线灭菌：接种室空气和台面、花粉灭菌
抗生素抑菌
3、植物细胞和组织培养方法有哪几种？
固体培养、液体培养【摇瓶悬浮培养(小规模)、成批培养、半连续培养(大规模反应器)、连续培养】
4、单细胞培养包括哪几种培养方法？
a.液体浅层培养
b.微室培养
c.平板培养
d.看护培养
5、在离体培养中，胚状体发生有哪几种方式？
1、体细胞胚从外植体上直接发生
2、经过愈伤组织的体细胞胚发生
3、细胞悬浮培养的体细胞胚胎发生
6、影响植物细胞脱分化和再分化的因子有哪些？
（1）培养基组成对植物细胞脱分化和再分化的影响
1）培养基的营养组成2）培养基的渗透压3）培养基的酸碱度4）激素在细胞分化中的调控作用
（2）环境条件与植物细胞的脱分化和再分化：湿度条件、温度条件、光照条件
（3）光周期对植物细胞脱分化和再分化的效应
光周期的需要与否，应根据植物种类、培养目的来决定。
7、离体无性繁殖中有哪几种器官发生方式？
1、不定芽型，
2、器官型，
3、器官发生型，
4、类胚体发生型，
5、原球茎型
8、简述离体无性繁殖步骤。
1、无菌母株制备（制备方法：田间取材（嫩枝）----自来水冲洗-----消毒剂表面灭菌---无菌条件下切割成带1-2个芽的茎段--接种------诱导不定芽----产生丛芽。）
2、不定芽增殖（无菌母株——无菌条件——再次切割——继代培养——繁殖，使之在每个芽眼处形成丛芽——反复多次切割培养获得大量不定芽）
3、不定根的诱导，完整植株的形成（将继代增殖的幼嫩小植株——转移至生根培养基中诱导根的分化和根系的形成——完整小植株）
4、再生植株的锻炼和移栽（出管前一周打开瓶——洗净培养基——移栽——大田移栽。）
5、再生植株的鉴定（细胞学鉴定：形态鉴定）
9、简述药用植物组织培养常见问题和对策。
1、污染及控制
（1）材料带菌与控制控制方法：彻底灭菌
（2）接种污染与控制。
（3）培养过程感染与控制：对培养空间定期进行消毒处理，及时清除污染材料，转移继代材料。
（4）培养基的污染与控制：在培养基中加入抑菌剂
2、外植体褐化与控制
1）、与植物的种类与品种有关
控制的措施有：
（1）在外植体消毒灭菌前用流水冲洗一段时间，以清洗部分酚类化合物和底物；
（2）接种后在短时间内（1周内）多次转接到新鲜培养基上，直至褐化现象基本消失；（3）先短期用液体培养基进行震荡培养，待褐化现象减轻后再转入固体培养基进行培养。2）、与外植体的年龄有关
措施：切取幼龄的茎尖、顶芽分生组织、带芽茎段等做外植体接种较
3）、与外植体的取样时间有关
在春季切取的生长旺盛部位的外植体褐化较轻，
4）、与培养基有关：控制的措施：利用吸附剂减低或清除酚类产物，改变氧化—还原势。常用的还原剂有维生素c
5）、与培养方式有关
(1)调节外植体在培养基中的放置方式(2)改变培养方法。(3)缩短转瓶周期。(4)调节光照。3、试管苗的玻璃化与控制
常用的措施有：
(1)选择合适的外植体。(2)琼脂的调节。(3)碳源的调节。(4)激素调节。(5)湿度调节。采(6)温度调节。(7)光照调节. (8)改变供氮形式。9)氯离子调节。(10)尽量减少创伤乙烯产生。
(11)在培养基中可附加聚乙烯醇(PV A)、活性炭等，降低玻璃苗的产生。
4、变异：（1）选择适宜的再生途径（2）植物生长物质选择（3）离体培养和继代时间的调节
5、材料死亡
6、黄化
7、增殖率过低或过高
8、组培苗瘦弱或徒长
10、植物组织培养所需培养基包括哪些成分？植物组织培养培养基有哪些种类？
（一）无机营养成分大量元素微量元素
（二）有机营养成分1）糖类2）维生素3）氨基酸类和酰胺类
（三）生长调节物质
（四）附加成分
1、高无机盐含量的培养基
2、较高硝酸钾含量培养基
3、中等无机盐含量的培养基
4、低无机盐含量的培养基
11、简述植物激素的应用规律。
①先生长素处理，后细胞分裂素处理，有利于细胞分裂，但细胞不分化。
②先细胞分裂素处理，后生长素处理、细胞分裂也分化（可能是内源生长素起了作用）。
③生长素和细胞分裂素同时处理，分化频率提高。两者同时存在的用量比值可以改变形态建成的方向。生长素／细胞分裂素：比值高：有利根分化，抑制芽形成；比值低：有利芽分化，抑制根形成；比值适中：促进愈伤组织生长。
12、哪些因素会影响培养物的遗传变异？
培养基和培养方式继代培养的次数
13、体细胞无性系变异的诱导和选择方法。
1.自发突变
2.诱变：物理诱变、化学诱变、转座子插入诱变、复合因子诱变
直接选择法（正、负选择法）、间接选政法、绿岛法
14、试述离体无性繁殖的程序。
1、无菌母株制备
2、不定芽增殖
3、完整植株的形成
4、再生植株的锻炼和移栽
5、再生植株的鉴定
15、离体无性繁殖中，小植株的驯化要掌握什么样的原则？
驯化中要掌握逐步过渡的原则，才能收到良好的效果。
移栽前首先要进行日光锻炼，通过“晒苗”措施恢复叶绿体光合作用功能。使小苗由异养逐步过渡到自养。第二步进行湿度锻炼，使小苗逐步适应周围环境的湿度。
16、当前脱除植物病毒的方法有哪些？
物理方法：高温处理、低温处理
化学方法：利用化学药品处理
生物方法：茎尖培养脱毒法；微体嫁接离体培养脱毒法；珠心组织脱毒法；愈伤组织脱毒法。
17、如何检测再生植株的脱毒效果？
（l）直接测定法（2）指示植物法（生物鉴定法、敏感植物鉴定法）（3）抗血清鉴定法（4）电子显微镜鉴定法（5）分子检测法
18、花粉孢子体的发育途径有哪几种？
A途径（营养细胞发育途径）：花粉孢子体第一次有丝分裂，起源于花粉的营养细胞（营养核），营养细胞继续分裂形成胚状体或愈伤组织。
B途径（生殖细胞发育途径）：生殖细胞持续分裂形成胚状体，而营养细胞可能不分裂或只分裂数次形成一个胚柄状的结构附着在由生殖细胞起源的胚的胚根一端。
C途径（营养细胞和生殖细胞共同发育途径）：营养核和生殖核先发生核融合，然后再进行花粉孢子体的第一次有丝分裂，发育成花粉植株。C途径的特点是生殖核和营养核共同参与花粉孢子体的形成，生殖核是有功能的。
19、花粉植株的形态发生方式有哪几种类型？
1）来自花粉诱导形成的胚状体；2）来自花粉的愈伤组织。
20、试述花粉单倍体植物的培养程序。
1)材料准备；2)诱导花粉脱分化形成愈伤组织或胚状体；3)愈伤组织的植株分化或胚状体的正常生长；4)完整植物体的形成；5)再生植株的驯化和移植。
21、花药培养中花药为什么要经过低温处理？
可以激发花粉母细胞产生两个相等核，而不是一个营养核一个生殖核；
保持高比例的强生活力花粉，同时延缓体细胞组织的衰老；
激发花粉产生原胚；促使细胞同步分裂。
22、花药培养时为什么要用较高浓度蔗糖和较低浓度的激素？
高糖预处理效应：接种前采用高糖预处理花药，一定时间后，再转移至适宜的糖浓度下培养，对诱导小孢子脱分化、再分化起促进作用，可大幅度地提高愈伤组织和胚状体的诱导率。
23、人工诱发单倍体发生方式有哪些？
①孤雄生殖②孤雌生殖
人工诱发单倍体以孤雄生殖为主，目前在育种中应用最广泛的也是这种类型的单倍体。24、植物胚胎培养包含哪些内容？
1、胚培养（l）成熟胚培养（2）幼胚培养
2、胚珠培养——指未受精或受精后的胚珠离体培养。
3、子房培养——指授粉和未授粉的子房培养
4、胚乳培养——指处于细胞期胚乳的离体培养
5、试管受精——指培养未受精的胚珠并在试管内撒播花粉，使其受精形成具有生活力的种子。
25、胚龄与胚性发育有着怎样的关系？
不同发育时期的幼胚，离体培养成功率差异很大。一般胚龄越大成功率越高，相反胚龄越小成功率越低。处于原胚期的幼胚即使采用胚珠预培养的方法，也仅有少数植物种能够成功，如烟草。矮牵牛、朱顶红、棉花。
离体培养中幼胚培养的成功率主要取决于培养基的组成。
26、幼胚培养的关键技术是什么？剥离技术
27、胚乳培养选择的最佳时期是何时？细胞期
28、一个好的悬浮细胞系有哪些特征？用于建立悬浮细胞系的愈伤组织有何要求？
（l）能大量提供均匀的植物细胞，也就是同步分裂的细胞。
（2）细胞增殖速度快，适应于大规模工业化生产。
（3）需要特殊的设备，如大型摇床、转床、连续培养装置、倒置式显微镜等，成本较高。1）疏松易碎的愈伤组织以幼胚为最佳
2）悬浮细胞培养基组成一般同愈伤组织培养基相似
29、影响单细胞培养的因素有哪些？
1、细胞的起始密度
2、培养周期（在一个培养周期中，细胞数目、总重量（鲜重、干重）和DNA含量的变化，呈一个“S”型曲线）
3、培养基（（1）条件培养基（2）生长调节剂（3）酸碱度）
30、悬浮培养比固体培养有哪些优点，影响悬浮细胞生长的因素有哪些？
一、增加培养细胞与培养液的接触面，改善营养供应；二、在振荡条件下可避免细胞代谢产生的有害物质在局部积累而对细胞自身产生毒害；三、振荡培养可以适当改善气体的交换。起始愈伤组织的质量；接种细胞密度；培养条件：方式、温度；继代周期
31、简述植物细胞培养生产次级代谢产物的工艺过程。
愈伤组织
外植体植物细胞细胞悬浮培养
原生质体培养
细胞扩大培养分离纯化产物
32、简述药用植物细胞大量培养步骤。
1）愈伤组织的诱导和悬浮细胞系的建立
2）筛选高产细胞系
3）在生物反应器中大量培养细胞或细胞团
33、简述悬浮培养细胞的同步化方法。
（1）分选法（2）饥饿法（3）抑制剂法（4）低温处理
34、、建立悬浮细胞系的关键技术有哪些？
35、、目前用做原生质体分离的材料有哪些？
幼嫩叶或无菌试管苗叶片、下胚轴和子叶、培养细胞（愈伤组织、细胞悬浮培养物）、花粉细胞。一般认为由叶肉组织分离的原生质体，遗传性较为一致
36、原生质体的分离方法有哪些？
（l）机械分离法（缺点：获得完整的原生质体的数量比较少，能够用此法产生原生质体的植物种类受到限制。优点：该方法可避免酶制剂对原生质体的破坏作用。）（2）酶解分离法（优点：酶解法可以获得大量的原生质体，而且几乎所有植物或它们的器官、组织或细胞均可用酶解法获得原生质体。缺点：这些酶制剂均含有核酸酶、蛋白酶、过氧化物酶以及酚类物质。用酶法降解细胞壁，会影响所获原生质体的活力。）
37、、原生质体纯化有哪些方法？
沉降法、漂浮法、不连续梯度法
38、原生质体的培养方法有哪些，各有何优缺点？
（1）固体培养法（平板培养法）（优点有利于对单个原生质体的胞壁再生和对细胞团形成的全过程进行定点观察。）
（2）浅层液体培养法
（3）双层培养法（优点：使培养基保持很好的湿度，不易干涸。同时还可以定期注入新鲜培养基。原生质体长壁速度和分裂速度很快。）
39、影响原生质体培养的因素有哪些？简述原生质体培养的程序。
（1）原生质体的活力（2）原生质体起始密度（3）细胞壁再生速度（4）培养基营养（5）培养条件（6）供试材料的基因型和生理状态
原生质体分离——原生质体纯化——原生质体培养——原生质体胞壁再生——细胞团形成——器官形成、植株再生。
40、试述植物细胞融合的程序。
1、植物原生质体分离（l）双亲原生质体制备（2）采用酶法分离原生质体（3）影响原生质体活力的各种因素
2、原生质体纯化（1）筛网过滤（2）采用不连续梯度法纯化原生质体（3）质膜稳定剂和渗透压稳定剂
3、原生质体融合（l）盐融合法（2）高钙和高pH值法（3）聚乙二醇法（4）聚乙二醇和高钙、高pH值结合法（5）电融合法
4、细胞杂种的选择（1）互补选择法：白化互补、遗传互补、营养互补（2）可见标志选择法：凹穴培养皿法、微吸管法
5、愈伤组织形成器官分化植株再生（1）基本培养基筛选（2）激素种类和浓度调节（3）渗透压调节
6、杂种植物鉴定（1）与亲代形态特征比较（2）杂种植物核型分析（3）同工酶谱分析41、植物细胞杂种选择的方法有哪几种？
（l）互补选择法①白化互补选择法②遗传互补选择法③营养代谢互补选择法
（2）机械选择法（可见标记法）A．凹穴培养皿分离法B．微吸管分离法
42、细胞大规模培养有哪些培养系统？
成批培养、半连续培养、连续培养
43、悬浮细胞系在继代培养中其群体生长规律。
45、用于制备人工种子的繁殖体主要有哪些？
46、控制胚性细胞同步分裂的方法有哪些？
（l）抑制剂法——用DNA抑制剂处理细胞培养物（2）低温法——低温处理调控胚状体的同步生长（3）渗透压法——利用渗透压调控胚状体的同步生长不同发育阶段的胚，具有不同的渗透压要求。（4）分离过筛法（5）通气法——利用气体调控胚状体的同步发生
47、人工种子的应用前景如何？需要解决那些问题?
随着研究的深入，限制其在商业应用中的问题将逐步得到解决，实现其诱人的应用前景，必将对作物遗传育种、良种繁育和栽培等起到巨大的推进作用。
1、贮藏问题人工种子含水量大，常温下易萌发，也易失水干燥。
2、体细胞无性系变异，
3、成本问题目前限制人工种子的商业利用的最大问题是成本，
4、繁殖体生产技术和人工种皮材料的研制
48、人工种子利用有何优点？
离体繁殖所具备的优势，可贮藏、因而可周年生产；可直接播种，减少了试管苗移栽在操作和管理上的困难，可机械化操作和常规的田间管理；可长距离运输，因此可建立相对集中的大型生产企业，实现资源和技术优化。
49、什么是动物细胞、组织培养技术？
50、动物细胞工程技术有哪些？那种技术是动物细胞工程的基础？
51、动物细胞培养基成分有哪些？
（1）氨基酸类（2）维生素类
（3）大量元素----是调节培养液渗透压的主要成分。
（4）微量元素-----由血清提供的，在低血清或无血清培养液中，则需添加铁、铜、锌、硒等微量元素。
（5）葡萄糖----能量来源之一，也是某些氨基酸合成的原料。
（6）有机类（7）激素类----血清中含有许多激素。
（8）生长因子类
52、动物细胞培养基有哪几种？无血清培养基成分有哪些？
平衡盐溶液、天然培养基、合成培养基、无血清培养液（由基础培养液和附加成分组成。取代血清的补充物：1）激素和生长因子；2）结合蛋白类； 3）低分子量营养因子；4）贴壁和铺展因子等。）
53、动物细胞冻存和复苏的原则是什么？慢冻快融
54、动物细胞体外培养的形态特征是怎样的？
55、动物细胞、组织培养的方法主要有哪些？
56、简述动物原代和传代培养方法
57、对体外培养细胞进行常规检查主要有那几方面内容？
细胞健康状况、培养液pH、微生物污染、细胞交叉污染、化学物质污染
58、动物细胞大规模培养的方法主要有哪些？
1．悬浮培养2．微载体培养3．包埋和微囊培养4、中空纤维法
59、怎样利用原生质体融合与培养技术制造新物种？
60、动物细胞培养过程中细胞生长要经过哪几个阶段？
原代培养期、传代期、衰退期
61、动物细胞培养过程中细胞一代生长要经过哪几个阶段？
潜伏期、指数生长期、平台期、衰退期
62、任选一培养技术叙述从外植体到再生植株的完整实验过程。
63、根据其发育阶段，干细胞可以分为哪几种类型，根据其分化潜能的大小，又可分为哪几种类型？
胚胎干细胞、成体干细胞
①全能干细胞②多能干细胞③定向干细胞
64、人工诱发动物细胞融合方法有哪些？动物杂交细胞的分离方法有哪些？
1、生物诱导细胞融合
2、化学方法诱导细胞融合
3、物理方法诱导细胞融合
4、激光诱导融合
非选择性筛选、选择性筛选
65、简述利用杂交瘤技术进行单克隆抗体大规模生产的技术步骤与要点。
1.亲本细胞的准备（致敏B淋巴细胞、骨髓瘤细胞的准备）
2.细胞融合形成杂交瘤细胞
3.杂交瘤细胞的筛选（采用HAT（含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)）选择性培养基）
4.可分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞的筛选：对每个含有杂交瘤细胞集落的生长孔中的上清液进行抗体检测，筛选出能够稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交细胞。检测方法：放射免疫测定、酶联免疫技术测定等
5.杂交瘤细胞的克隆化培养：有限稀释法或软琼脂平板法
66、最常用的杂交瘤细胞杂交瘤细胞克隆方法有那些？（有限稀释法或软琼脂平板法）
67、什么是胚胎工程？其核心技术有哪些？
在体外受精和体外早期胚胎发育的基础上，通过卵子切割、性别控制、嵌合体制作、细胞核移植、转基因操作等定向控制、改造和创造新遗传性状的技术统称为胚胎工程，又称发育工程。
体外受精、胚胎移植是胚胎工程的核心技术。
68、如何正确应用动物克隆技术?
（1）培育优良畜种和生产实验动物；（2）生产转基因动物；（3）生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法；（4）复制濒危的动物物种，保存和传播动物物种资源
70、什么是细胞核移植技术？克隆的基本方法有哪些？
核移植技术——又称细胞质工程、核质杂交，是利用显微操作技术将称为供体的一种动物细胞的细胞核移植到称为受体的同种或异种的另一种细胞中，或者将两个细胞的细胞核（或细胞质）进行交换，形成核质杂种，并使受体细胞得以继续分裂和发育的方法。
（1）胚胎干细胞核移植；（2）胚胎细胞核移植；（3）胎儿成纤维细胞核移植；（4）体细胞核移植
71、什么是细胞重组，细胞重组的技术方法有哪些？
细胞重组——又叫细胞拆合是指从活细胞中分离出细胞器及其组分，后在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分进行重组，使其重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术。
细胞重组的方式基本分为三种：
（1）胞质体与完整细胞重组形成胞质杂种；（2）微细胞与完整细胞重组形成微细胞异核体；（3）胞质体与核体重新组合形成重组细胞。
72、你如何看待动物克隆问题？
克隆技术对人类来说，是一把“双刃剑”。一方面，它能给人类带来许多益处，诸如保持优良品种、挽救濒危动物、利用克隆动物相同的基因背景进行生物医学研究等；另一方面，它将对生物多样性提出挑战，生物多样性是自然进化的结果，也是进化的动力，有性繁殖是形成生物多样性的重要基础，而“克隆动物”则会导致生物品系减少，个体生存能力下降。
73、多莉羊是怎样培育出来的？为什么说她是克隆技术的里程碑？
将动物体细胞经过抑制培养，使其处于休眠状态，利用细胞核移植技术将其导入去核卵母细胞，发育成胚胎后移植至受体，妊娠产仔，克隆出成体动物。
它是世界上第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研究的巨大突破。在理论上证明了，分化了的动物细胞也具有全能性，在分化过程中细胞核中的遗传物质没有不可逆变化；在实践上证明了，利用体细胞进行动物克隆的技术是可行的
它是通过特殊的体外操作（显微注射、电融合、体外培养等），对哺乳动物特定发育阶段的核供体（胚胎卵裂球或体细胞）及相应的核受体（成熟的卵母细胞）进行体外重组，从而不经过有性繁殖过程而达到扩繁同基因型哺乳动物胚胎及其种群的目的。
74、哺乳动物的克隆方法有哪些？
（1）胚胎干细胞核移植；（2）胚胎细胞核移植；（3）胎儿成纤维细胞核移植；（4）体细胞核移植
细胞模拟试题及答案
一、填空（每空一分，共25分）
1.实验室的物理防护是由隔离的设备、实验室的设计、实验实施等三个方面组成，根据其密封程度的不同，分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。
2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一细胞群体。
3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。
4.干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞的增殖特性为缓慢性和自稳性。
5.培养细胞的生长特点为贴附、接触抑制和密度抑制。
6.植物细胞培养的原理是基于动物细胞的全能性。
7.植物细胞悬浮培养的方法为分批培养法、连续培养法和半连续培养。
8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中，消毒的基本原则是既要杀死附着其上的微生物又不损伤材料。
9.细胞生长测定的一般方法为：细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。
10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞和非贴附型细胞。
11.人工种子的组分包括胚状体、人工胚乳和人工种皮。
12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核融合几
个步骤。其中细胞桥形成是最关键的一步。
13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续发育，获得人们所需要的成体动物。
15.人工诱导单倍体形成的方法包括：远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药培养等。二、单项选择题（每题1分，共10分）
1.人参皂甙粉是人参中重要的药用成分，以前只能从人参中提取产量极低，因而价格昂贵。目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取（B） A．基因工程 B．植物组织培养 C．植物体细胞杂交 D．发酵工程
2.下列有关动物细胞培养的叙述不正确的是（C） A．通过动物细胞培养可获得大量的细胞分泌蛋白 B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理，以使细胞分散 C．细胞癌变都发生于原代培养过程中
D．目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的，以保持其正常核型
3. 尽管各种合成培养基给动物细胞培养带来极大方便，但许多实验表明，单纯使用合成培养基细胞的贴壁增殖效果常常不理想。因此，在使用时通常仍然需要加入一定量的 (C) A．平衡盐溶液 B. 琼脂糖 C. 动物血清 D. 甘露醇
4.制备人工种子的关键是控制(A)
A.胚状体的同步发育
B.人工种皮的同步发育
C.胚状体的单独发育
D.人工种皮的单独发育 5.细胞融合中使用（C）方法可以在显微镜下直接定向诱导细胞融合。 A.仙台病毒法 B.PEG诱导
C.电融合诱导法
D.高Ca+和pH诱导法
2.下列有关动物细胞培养的叙述不正确的是（C） A．通过动物细胞培养可获得大量的细胞分泌蛋白 B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理，以使细胞分散 C．细胞癌变都发生于原代培养过程中
D．目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的，以保持其正常核型
3. 尽管各种合成培养基给动物细胞培养带来极大方便，但许多实验表明，单纯使用合成培养基细胞的贴壁增殖效果常常不理想。因此，在使用时通常仍然需要加入一定量的 (C) A．平衡盐溶液 B. 琼脂糖 C. 动物血清 D. 甘露醇
4.制备人工种子的关键是控制(A)
A.胚状体的同步发育
B.人工种皮的同步发育
C.胚状体的单独发育
D.人工种皮的单独发育 5.细胞融合中使用（C）方法可以在显微镜下直接定向诱导细胞融合。 A.仙台病毒法 B.PEG诱导
C.电融合诱导法
D.高Ca+和pH诱导法
6.中胚层来源的细胞在体外培养时一般表现为哪种形态（A）
A.成纤维细胞型细胞
B. 多形型细胞
C.上皮型细胞
D.游走型细胞
7.在每一代贴附生长细胞的生长过程中,哪一个时期的细胞数随时间变化成倍增长,活力最佳,
最适合进行实验研究（D）
A.稳定期
B.衰亡期
C.潜伏期
D.对数生长期
8.以下哪种方法或技术适合进行动物细胞的大规模培养？（D）
A.悬滴培养法
B.培养瓶培养法
C.旋转管培养法
D.多孔载体培养技术
9.单克隆抗体制备选择亲本时应选择（A）
A.骨髓瘤细胞系和免疫动物属于同一品系
B.骨髓瘤细胞系和免疫动物属于不同品系
C.
B.B淋巴细胞和骨髓瘤属细胞属于不同品系
D.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞无亲缘关系
10. 下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（D）
A．卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 B．胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割
C．胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点 D．胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取三、多项选择（每题3份，共15分）
1.由外植体或单个细胞形成愈伤组织一般要经过三个步骤（ABD）
A.启动期
B.生长期
C.分裂期
D.分化期 2.植物单细胞培养方法有（ABCD）
A.平板培养法
B.看护培养与饲养层培养法
C.液体浅层静置培养法
D.细胞悬浮培养法
3.动物细胞培养室，无论细胞种类和供体的年龄如何，在细胞的全生长过程中大致都要经过三个主要阶段（ABC）
A.原代培养期
B.传代期
C.衰退期
D.稳定期 4.干细胞从所具有的分化功能上分为（ABC） A.单能干细胞 B.多能干细胞 C.全能干细胞 D.胚胎干细胞 5.动物多倍体育种的方法有（ABC）
A.温度休克法
B.水静压法
C.细胞松弛素B
D.秋水仙素四、简答题(共35分)
1. 二级生物安全适用于处理什么材料，具体要求有哪些（8分）
答：适用于：（1）来自于来自于灵长类动物的材料和细胞系
(2)接触过灵长类的病毒或被其转化了的细胞系 (3)含有支原体的细胞系。
要求：
（1）所有可能产生气溶胶的操作都应使用垂直层流生物安全小室；（2）所有污染物都应放入装满蒸馏水的防漏的不锈钢桶中；（3）大的塑料器皿盖紧后放入高压消毒袋中进行高压消毒；（4）在处理或冲洗用过的器皿前，应先进行高压消毒；（5）进行操作时要带乳胶手套。
2. 原生质体分离的方法有哪些，各有何优缺点（6分）
答：（1）机械法
优点：可避免酶制剂对原生质体的破坏。
缺点：获得完整原生质体的数量少，使用此法的植物种类有限。
（2）酶解法
优点：可获得大量原生质体，条件温和，原生质体完整性好，几乎所有植物都
可用此法。
缺点：影响原生质体的活力。
3. 植物组织培养的基本步骤（6分）
答：（1）培养材料的采集（2）培养材料的消毒
（3）制备外植体（4）接种和培养（5）根的诱导
（6）组织苗的练苗移栽
4.细胞系和细胞株的鉴定指标及方法（8分）
答：鉴定指标：（1）纯度：分析以何种细胞为主，所占比例为多少，混杂有哪些其他细胞。（2）细胞生物学特征：细胞形态、结构、染色体组型、生长曲线、分裂指数、倍增时间是否与来源细胞一致。
（3）稳定性：传代过程中细胞学特征是否发生变化。（4）污染情况：检查是否有微生物或其他细胞系的污染。
鉴定方法：细胞形态学观察；绘制生长曲线，计算分裂指数；染色体组型和带型分析；同工酶谱检测
4. 植物细胞固定化的方法及特点
答：吸附法：利用固体吸附剂将细胞吸附在其表面而使细胞固定化的方法。
包埋法：将细胞包埋在多孔载体内部而制成固定化细胞的方法。
特点：（1）由于载体的保护作用，减小剪切力作用，提高细胞存活率和稳定性。（2）细胞束缚在一定空间内，不易聚集成团，促进代谢产物的分散。（3）可简便地在不同培养阶段更换不同的培养液。
（4）固定化植物细胞可连续反复使用，可缩短生产周期，提高生产效率。（5）容易与培养液分离，有利于产品的分离纯化，提高产品的质量。
五、综合分析题（15分）
植物单细胞培养的程序及各步中应注意的事项答：1.建立细胞株
（1）材料准备
a. 确定植物种类品种
b. 选择单细胞或愈伤组织或叶肉、下胚轴等
c. 借助酶处理：酶的种类、浓度、处理时间都对材料有一定影响
（2）制备细胞悬浮液
a. 培养基成分筛选
答：吸附法：利用固体吸附剂将细胞吸附在其表面而使细胞固定化的方法。
包埋法：将细胞包埋在多孔载体内部而制成固定化细胞的方法。
特点：（1）由于载体的保护作用，减小剪切力作用，提高细胞存活率和稳定性。（2）细胞束缚在一定空间内，不易聚集成团，促进代谢产物的分散。（3）可简便地在不同培养阶段更换不同的培养液。
（4）固定化植物细胞可连续反复使用，可缩短生产周期，提高生产效率。（5）容易与培养液分离，有利于产品的分离纯化，提高产品的质量。
五、综合分析题（15分）
植物单细胞培养的程序及各步中应注意的事项答：1.建立细胞株
（1）材料准备
a. 确定植物种类品种
b. 选择单细胞或愈伤组织或叶肉、下胚轴等
c. 借助酶处理：酶的种类、浓度、处理时间都对材料有一定影响
（2）制备细胞悬浮液
a. 培养基成分筛选
b. 悬浮培养，振荡次数为80~90次/min
c. 用200~300目钢网过滤盒离心沉降
2.选择细胞株平板筛选
a. 细胞起始密度（0.5-2.5）*105个/ml
b. 固体薄层培养基
c. 按目标反复进行测定
3.扩大培养（或分化培养）（1）扩大培养（悬浮）（2）分化培养（固体）抗性分析（生化分析）
4.鉴定分析
（1）扩大培养：鉴定提取：多次重复测定（生化分析）（2）分化培养：植株再生
鉴定遗传分析：抗性测定、生化分析、遗传分析
细胞工程试题及答案
专题2细胞工程 一、选择题 1.运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种,操作过程中能形成愈伤组织的是( )。 ①植物组织培养②植物体细胞杂交③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A.①②③ B.①②④ C.①③④ D.①②③④ 2.生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是( )。 A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体 B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体 C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,经孕育培育成新个体 D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体 3.下列关于细胞工程的叙述,错误的是( )。 A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同 4.用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织,下列叙述错误的是( )。 A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B.该愈伤组织的细胞没有全能性 C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的 D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构 5.名为“我的皮肤”的生物活性绷带自从在英国诞生后,给皮肤烧伤病人带来了福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本,再让其在特殊的膜片上增殖。5~7天后,将膜片敷在患者的伤口上,膜片会将细胞逐渐“释放”到伤口,并促进新生皮肤层生长,达到加速伤口愈合的目的。下列有关叙述中,不正确的是( )。 A.“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程 B.人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降 C.种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人 D.膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口,加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的糖蛋白有关 6.既可用于DNA重组技术又可用于细胞融合技术的是( )。 A.病毒 B.纤维素酶 C.聚乙二醇 D.质粒 7.培育农作物新品种的过程中,常利用植物组织培养技术。下列叙述正确的是( )。 A.培育转基因的外植体得到的新个体属于基因突变个体 B.在植物组织培养过程中用理化因素诱导可获得大量有益突变体 C.单倍体育种中经减数分裂和组织培养两个过程能获得纯合二倍体 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 8.下列与细胞工程技术相关的表述中,不正确的是( )。 A.植物体细胞杂交技术可以克服常规的远缘杂交不亲和障碍 B.动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分基本相同 C.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 9.经植物组织培养技术培养出来的植物一般很少有植物病毒危害,其原因在于( )。 A.在组织培养过程中经过了脱分化和再分化,进行的是快速分裂和分化
上海交大细胞工程期末试题2008b
一、选择题（每题1分，共计12分） 1、体外培养in vitro包括那三个层次（ABD）。 A细胞培养B组织培养 C大规模培养D器官培养 2、现在一般皆公认（B）为“组织培养之父”动物细胞培养的奠基人，因为他的实 验表明，为细菌学家早已应用的凹玻片悬滴制备细胞培养技术，不仅可以维持组织上体外生长数周，而且是一种能对生物学知识做出十分重要贡献的研究方法。 A Wilhelm Roux B Ross Granville Harrison C M.T.Burrows D Alexis Carrel E W.H.Lewis 3、培养的哺乳动物细胞一定要防止污染，特别是生物学污染，常见的生物学污染主要 是（ABC）。 A真菌B细菌C支原体 D炭疽菌E放线菌F病毒 4、在每一次传代培养过程中，培养物将首先被蛋白酶消化而被制备成细胞悬液，再用 于种植。种植后的细胞都要经历相似的恢复和生长过程。根据每一次传代培养的细胞生长变化的过程，习惯上把每一代细胞的生长过程分为（ABC）三个阶段。 A潜伏期B指数生长期C停滞期 D衰退期E贴壁黏附期F铺展期 5、“生物导弹”是指（D）。 A单克隆抗体 B杂交瘤细胞 C产生特定抗体的B淋巴细胞 D在单抗上连接抗癌药物
6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（D）。 A容易产生各种变异B具有更强的全能性 C取材十分方便D分裂增殖的能力强 7、对细胞全能性的表述正确的是（D）。 A非离体植物细胞能够表现全能性 B动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现 C单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性 D花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现 E受精卵发育到囊胚阶段的内细胞团具有完全的细胞全能性 8、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（A）。 A经过免疫的B淋巴细胞 B没经过免疫的T淋巴细胞 C经过免疫的T淋巴细胞 D没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 9、引起大规模细胞培养过程中的细胞凋亡的主要直接因素有哪些？（ABC） A有毒物质或抑制因子产生B营养成分耗尽 C其他物理因素D细胞遗传物质突变 10、大规模细胞培养方法比较多，大致可分为（ABC）。 A悬浮培养 B固定化培养 C载体培养法 D培养瓶培养 E96孔板培养
大学细胞工程试题及答案
细胞模拟试题及答案 一、填空（每空一分，共25分） 1.实验室的物理防护是由隔离的设备、实验室的设计、实验实施等三个方面组成，根据其密 封程度的不同，分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一细胞 群体。 3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细 胞增殖形成的细胞群。 4.干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞的增殖特性为缓慢性和自稳性。 5.培养细胞的生长特点为贴附、接触抑制和密度抑制。 6.植物细胞培养的原理是基于动物细胞的全能性。 7.植物细胞悬浮培养的方法为分批培养法、连续培养法和半连续培养。 8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中，消毒的基本原则是既要杀死附着其上的微生物又 不损伤材料。 9.细胞生长测定的一般方法为：细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞和非贴附型细胞。 11.人工种子的组分包括胚状体、人工胚乳和人工种皮。 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核融合几 个步骤。其中细胞桥形成是最关键的一步。 13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续发育， 获得人们所需要的成体动物。 15.人工诱导单倍体形成的方法包括：远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药培养等。 二、单项选择题（每题1分，共10分） 1.人参皂甙粉是人参中重要的药用成分，以前只能从人参中提取产量极低，因而价格昂贵。 目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取（B） A．基因工程 B．植物组织培养 C．植物体细胞杂交 D．发酵工程
基因工程和细胞工程测试题(附答案,可用于考试)
5 高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级 （时间：90分钟分数：100分） 一．选择题（本大题包括25题，每题2分，共50分。每题只有一个选项符合题意。） 1．以下说法正确的是（） A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B．质粒是基因工程中惟一的运载体 C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不．相符的是（） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 3．有关基因工程的叙述正确的是（） A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4．能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是（） A.基因工程 B.组织培养 C.诱变育种 D.杂交育种 5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养人的B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 6．PCR技术扩增DNA,需要的条件是( ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体 A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥ 7．以下对DNA的描述，错误的是（） A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息 B.同种生物个体间DNA完全相同 C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达 D.一个DNA分子可以控制多个性状 8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（） A.氨基酸结构 B.蛋白质空间结构 C.肽链结构 D.基因结构 9．细胞工程的发展所依赖的理论基础是（） A.DNA双螺旋结构模型的建立 B.遗传密码的确立及其通用性的发现 C.生物体细胞全能性的证明 D.遗传信息传递的“中心法则”的发现 10．下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是：（） A.分子杂交技术 B.抗原—抗体杂交 C.抗虫或抗病的接种 D.基因枪法 11．在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（） A.植物组织培养 B. 单克隆抗体 C. 植物体细胞杂交 D.细胞核移植 12．动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是（） A.基本原理相同 B.诱导融合的方法类 C.原生质体融合 D.可用灭活的病毒作诱导剂 13．下列哪一项属于克隆（） A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞
2014--2016全国各省市高考真题细胞工程(附答案讲解)
细胞工程 一、选择题 1．下列关于细胞工程的叙述，正确的是() A．植物细胞必须先用胰蛋白酶处理获得原生质体 B．试管婴儿技术包括细胞核移植和胚胎移植两方面 C．经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状 D．用于培养的植物器官属于外植体 答案：D解析：植物细胞必须先用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体，A错误；试管婴儿技术包括体外受精和胚胎移植两方面，B错误；经细胞核移植培育出的新个体具有两个亲本的遗传性状(细胞核和细胞质中的遗传物质来自不同亲本)，C错误；外植体是指由活植物体上切取下来用于进行培养的那部分组织或器官，D正确。 2．(2015·江苏苏州质检)下图表示四倍体兰花叶片通过植物组织培养成植株的过程： 四倍体兰花叶片――→ ① 愈伤组织――→ ② 胚状体――→ ③ 植株 下列相关叙述中，正确的是() A．②和③阶段发生减数分裂 B．①阶段需要生长素而③阶段仅需要细胞分裂素 C．①阶段不仅有细胞增殖且细胞分化速度很快 D．此兰花的花药离体培养所得的植株体细胞中有两个染色体组 答案：D解析：图中①是脱分化，②是再分化，③是分化过程。②再分化和③分化过程都是进行的有丝分裂，不是减数分裂，A错误。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，B错误。离体的植物组织或细胞，在培养一段时间以后，会通过分裂形成愈伤组织，细胞没有出现分化，C错误。四倍体兰花的配子中有两个染色体组，花药离体培养所得的植株体细胞中有两个染色体组，D正确。
3．(2013·重庆卷)如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是 A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞 B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成 C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 答案：D解析：①应是效应B淋巴细胞，A项错误；②应使用诱导剂促进细胞的融合，动物细胞常用灭活的病毒，也可以用PEG(聚乙二醇)，B项错误；③是杂交瘤细胞，其既具有浆细胞分泌抗体的功能，又具有骨髓瘤细胞无限增殖的特点，C项错误。 4．如图为烟草在不同生长素、细胞分裂素浓度下的生长发育状况。据图判断下列分析合理的是()
细胞工程复习题 (2)
《细胞工程》复习题 一、选择题： 1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（Ｂ）A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同 2. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在 这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ C ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A．②④ B．①③⑤ C．①②③④ D．②③ 3．动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的有（ D ）
A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段完全相同 C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞 4.单克隆抗体是指（ C ） A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B．单个B淋巴细胞增殖产生的抗体 C．单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体 D．单个抗体通过克隆化，产生大量抗体 5.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（多选） （AC ） A．B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 B．B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体 C．骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体 D．骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 6.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是（ D ） A．在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖 B．在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体 C．每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应
. D．每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 7.关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（D ） A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产 8. 以下不属于生长素的是(D) A IAA B NAA C 2,4- D D 6-BA 9.植物细胞有而动物细胞没有的结构是(D) A细胞质 B线粒体 C内质网 D叶绿体 10.拥有接触抑制的是(B) A原核细胞 B动物细胞 C植物细胞 D真核细胞 11.产生自胸腺的淋巴细胞是(A) A T淋巴细胞 B B淋巴细胞 C C淋 巴细胞 D G淋巴细胞
流式细胞仪的基本结构
流式细胞仪主要由以下五部分构成：流动室及液流驱动系统；激光光源及光束形成系统：光学系统；信号检测与存储、显示、分析系统；细胞分选系统(图4-3)。 1．流动室和液流系统是流式细胞仪的核心部件。流动室由样品管、鞘液管和喷孔等组成。常用石英等透明、稳定的材料制作。样品管储放样品，单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出；鞘液由鞘液管从四周流向喷孔，单细胞悬液在细胞流动室里被鞘液包绕通过流动室内的一定孔径的孔。由于鞘液的作用，被检测细胞被限制在液流的轴线上。检测区在该孔的中心，细胞在此与激光垂直相交，在鞘流液约束下细胞啦单行排列依次通过激光检测区。为了保证液流速度稳定。一般限制液流速度小于10 m／s。流动室孔径有60 μm、100μm、150μm、250 μm等多种。 2．激光源和光学系统经特异荧光染色的细胞需要合适的光源照射激发才能发出荧光供收集检测。常用的激光管是氩离子气体激光管，它的发射光波长488nm，此外可配备氦氖离子气体激光管(波长633nm)和(或)紫外激光管。光源的选择主要根据被激发物质的激发光谱而定。氩离子激光器的发射光谱中，绿光 514nm和蓝光488nm的谱线最强，约占总光强的80％；氪离子激光器光谱多集中在可见光部分，以647nm较强。免疫学上使用的一些荧光染料激发光波长在550nm以上，可使用染料激光器。将有机染料作为激光器泵浦的一种成分，可使原激光器的光谱发生改变以适应需要即构成染料激光器。例如用氩离子激光器的绿光泵浦含有Rhodanline 6G水溶液的染料激光器，则可得到550～650nm连续可调的激光，尤在590nm处转换效率最高，约可占到一半。 为使细胞得到均匀照射，并提高分辨率，照射到细胞上的激光光斑直径应和细胞直径相近。因此需将激光光束经透镜会聚。流式细胞仪的光学系统由若干组透镜、小孔、滤光片组成，大致可分为流动室前和流动室后两组。流动室前的光学系统由透镜和小孔组成，透镜和小孔的将激光光源发出的横截面为圆形的激光光束聚
动物细胞工程试题及详解
动物细胞工程试题 1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（C）A都须用液体培养基 B都需用培养箱 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 解析：动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物，植物体细胞离体培养体现的是全能性。植物体细胞是固体培养基。动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。 动物细胞培养： 1、动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 2、动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 3、动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。 4、动物细胞培养需要满足以下条件 (1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 (2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 (3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 (4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 5、动物细胞培养的过程： 取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2下列关于细胞工程的叙述，错误的是（D） A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 解析：A正确诱导原生质体融合的方法有物理法（离心振动电刺激）化学法（聚乙二醇PEG）生物方法（灭活的病毒）. B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖，又可产生特异性抗体。D错误，假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M，甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M；而甲乙品种杂交染色体数目是N+M。 3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（A） ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④ 解析：单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 4利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（D） A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
高中生物细胞工程试题
阶段质量检测(二) 细胞工程 (时间:45分钟,满分:100分) 一、选择题(每小题3分,共45分) 1.下列生物工程技术中,不属于细胞工程得就是( ) A.通过试管动物大量繁殖优良动物 B.利用含有人胰岛素基因得大肠杆菌生产胰岛素 C.通过体细胞克隆技术培养出克隆羊 D.将某人得肝癌细胞在实验室中繁殖成一个细胞系 2.下列关于植物体细胞杂交技术得叙述,错误得就是( ) A.获得原生质体得过程需要用到纤维素酶与果胶酶 B.利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株 C.植物体细胞杂交过程就就是原生质体融合得过程 D.可根据细胞中染色体数目与形态得差异来鉴定杂种细胞 3.植物体细胞杂交制备原生质体与动物细胞培养配制一定浓度得细胞悬浮液,所需要得酶依次就是( ) A.淀粉酶与磷脂酶 B.纤维素酶与胰蛋白酶 C.脂肪酶与二肽酶 D.过氧化氢酶与半乳糖苷酶 4.下列有关单克隆抗体制备得叙述,正确得就是( ) A.先利用特定得抗原蛋白饲喂小鼠,再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞 B.为避免病毒感染,只能用聚乙二醇、电激等处理来诱导骨髓瘤细胞与已免疫得B淋巴细胞融合 C.体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清与抗生素 D.经过选择培养基初次筛选得杂交瘤细胞即可进行体内或体外培养 5.(全国高考)关于动物细胞培养与植物组织培养得叙述,错误得就是( ) A.动物细胞培养与植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养与植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.烟草叶片离体培养能产生新个体,小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物脱除病毒 6.细胞工程中,选择合适得生物材料就是成功得关键。下列选择不合理得就是( ) A.选择高度分化得动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞 B.选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物得成功率 C.选择一定大小得植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
流式细胞基本知识
1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的？ FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度，FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用，用于去除粘连细胞。 2、流式同型对照怎样选择？ 同型对照（Isotype Control）：使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白，用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。如果一抗是多抗，可以用an normal serum（与一抗相同的正常血清）（must be the same species as primary antibody）。This control is easy to achieve and can be used routinely in immunohistochemical staining.这个可以咨询试剂商。同型对照为免疫荧光标记中的阴性对照。由于荧光标记单抗的组来源不同，应选用相同来源的未标记单抗作为同型对照来调整背景染色。举个例子：比如检测一抗为单抗的mouse anti rat CD11b，clone OX-42 purified IgG，那么它的isotype 是mouse IgG2a，所以可以用purified（纯化的）mouse IgG2a来做OX-42的同型对照（Isotype Control）。一般的的生物技术公司和国内的代理都有出售。 同型对照：是指与MoAb相同的、未免疫小鼠的免疫球蛋白亚类，若使用直接免疫荧光染色法，同型对照也应标记荧光色素，如IgG1 FITC、IgG2ａ、PE等。主要考虑了细胞的自发荧光、FC受体介导的抗体结合和非特异性抗体结合等影响因素。此外，同型对照与MoAb 所标记的荧光色素、浓度、F：P比值（标记的荧光色素与免疫球蛋白分子的比值）应该相同为最佳，这对准确设定阴性与阳性细胞的界标有重要意义，切忌使用与MoAb不相匹配的同型对照，最好为同一实验室、采用相同工艺或方法制备（如同一品牌）的产品。 3、流式细胞技术测定细胞内游离钙浓度为何要使用氯化钙.在文献及其他专业网站中都有测定游离钙的方法，具体如下： （1）钙荧光探针负载； （2）随机测定每管细胞悬液样品（以下简称样品）的单个细胞的荧光强度，记为F值。 （3）加入10%Triton X 100，（破膜用）；加入1 mmol/L氯化钙，（问题所在），吹打均匀，孵育1~10min，测定荧光即Fmax值。 （4）加入EGTA，20μl（钙螯合剂），孵育1~10min，激发波长488nm测定荧光，即Fmin值。 这个过程中的氯化钙的作用如何，请高人指点，谢谢。 因为正常血浆中Ca2＋浓度是1mM，细胞外液的Ca2＋对细胞内Ca2＋有影响。加0.1%triton 是增加膜通透性，使细胞外Ca2＋进入细胞内，作为最大值。加EGTA是为了螯合Ca2＋，作为最小值.生理环境中细胞内钙离子浓度远低于细胞外液（大约1：10000），细胞膜对钙的通透性变化对细胞内钙影响很大。 4、流式与werstern的区别，知道一些，不足之处请大家补充：
细胞生物学试题整理(含答案)
细胞生物学与细胞工程试题 一：填空题（共40小题，每小题0.5分，共20分） 1：现在生物学“三大基石”是：＿，＿＿。 2：细胞的物质组成中，＿，＿，＿，＿四种。 3：膜脂主要包括：＿，＿，＿三种类型。 4：膜蛋白的分子流动主要有＿扩散和＿扩散两种运动方式。 5：细菌视紫红质蛋白结构的中部有几个能够吸光的＿基因，又称发色基因。6：受体是位于膜上的能够石碑和选择性结合某种配体的＿。 7：信号肽一般位于新合成肽链的＿端，有的可位于中部。 8：次级溶酶体是正在进行或完成消化作用的溶酶体，可分为＿，＿，及＿。 9狭义的细胞骨架（指细胞质骨架）包括＿，＿，＿，＿及＿。 10：高等动物中，根据等电点分为3类：α肌动蛋白分布于＿；β和γ肌动蛋白分布于所有的＿和＿。 11：染色质的化学组成＿，＿，＿，少量＿。 12：随体是指位于染色体末端的球形染色体节段，通过＿与＿相连。 13：弹性蛋白的结构肽链可分为两个区域：富含＿，＿，＿区段。 14：细胞周期可分为G1期，S期，G2期，G2期主要合成＿，＿，＿等。 二：名词解释（每个1分，共20小题） 1：支原体 2：组成型胞吐作用 3：多肽核糖体 4：信号斑 5：溶酶体 6：微管 7：染色单体 8：细胞表面 9：锚定连接 10：信号分子 11：荧光漂白技术
12：离子载体 13：受体 14：细胞凋亡 15：全能性 16：常染色质 17：联会复合体 18组织干细胞 19：分子伴侣 20：E位点 三：选择题（每题一分，共20小题） 1：细胞中含有DNA的细胞器有（） A：线粒体B叶绿体C细胞核D质粒 2：细细胞核主要由（）组成 A：核纤层与核骨架B：核小体C：染色质和核仁 3：在内质网上合成的蛋白质主要有（） A：需要与其他细胞组分严格分开的蛋白B：膜蛋白C：分泌性蛋白 D：需要进行修饰的pro 4:细胞内进行蛋白修饰和分选的细胞器有（） A：线粒体 B：叶绿体 C：内质网 D：高尔基体5微体中含有（） A：氧化酶 B：酸性磷酸酶 C：琥珀酸脱氢酶 D：过氧化氢酶6：各种水解酶之所以能够选择性的进入溶酶体是因为它们具有（）A：M6P标志 B：导肽 C：信号肽 D：特殊氨基序列7：溶酶体的功能有（） A：细胞内消化 B：细胞自溶 C：细胞防御 D：自体吞噬8：线粒体内膜的标志酶是（） A：苹果酸脱氢酶 B：细胞色素 C：氧化酶 D：单胺氧化酶9：染色质由以下成分构成（） A：组蛋白 B：非组蛋白 C：DNA D：少量RNA
植物细胞工程试题及详细解答
植物细胞工程试题及详细解答 1 植物组织培养的过程可以归纳为：①脱分化②再分化③→④，对 ）D 此叙述有错误的是（A．②→③的再分化过程中，细胞增殖的方式为有丝分裂 B．植物组织培养依据的原理是细胞的全能性 C．③→④过程指植物的营养生长和生殖生长阶段 D．将①经脱分化培养成②时，再植上人造种皮可获得人工种子E．从理论上讲①可以是植物体的每一个细胞 F．①→③的培养过程中，应在培养基中加入水，无机盐，蔗糖，氨基酸，植物激素等 解析：A、愈伤组织再分化形成胚状体，细胞增殖的方式为有丝分裂，A正确； B、植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能，B正确； C、植物的个体发育包括营养生长和生殖生长，C正确； D、只有将离体植物细胞或组织培养成具有生根发芽能力的胚状体结构③，包裹上人造种皮可获得人工种子，D错误．E.从理论上讲正确，但一般选择分化程度低全能性大的细胞。 ）D将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（2A. 具有完整细胞核的细胞
B. 一定的营养物质和植物激素 12 / 1 C. 离体状态 D. 导入特定基因 解析：植物细胞具有全能性的原因是每个细胞体细胞中都含有本物种体细胞的全套遗传物质。故A真确。在进行组织培养时需要立体的组织或细胞（具有完整的细胞核），若不离体只能选择性表达为不同的组织器官。故C正确。培养时还需要一定的遗传物质和植物激素（细胞分裂素生长素）B正确。而导入特定的基因是基因工程中的。）在下列各育种方式中，与组织培养技术无关的是（B3A．利用花药离体培养得到单倍体植株 B．秋水仙素处理二倍体幼苗，获得四倍体植株 C．通过组织培养培育人工种子 D．通过体细胞杂交培养“番茄一马铃薯”杂种植株 解析：花药离体培养时将花粉培育为新个体。A正确。秋水仙素处理二倍体幼苗，获得四倍体植株是利用染色体变异的原理。B错误。人工种子是将植物细胞经过组织培养形成胚状体再包装成人造种子C 正确。通过体细胞杂交培养“番茄一马铃薯”杂种植株采用了植物组织培养技术。D正确。 ）A4下列有关植物细胞与组织培养的叙述中，错误的是（A. 花药、胚不能作为组织培养的材料 B. 植物细胞具有全能性
专题2-细胞工程练习题(含答案解析)
第I卷（选择题） 1．利用植物组织培养技术将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，培育的过程中不需要 A. 导入外源基因 B.离体状态 C. 具有完整细胞核的细胞 D.一定的营养物质和激素 2．通过植物体细胞杂交可以获得“烟草—菠菜”——一种新型的烟草品种。下图为培育杂种植株过程的示意图,下列操作不是必需的是( ) A.在融合之前除去两种细胞的细胞壁 B.原生质体先进行脱分化处理再融合 C.原生质体融合后筛选杂种细胞继续培养 D.诱导杂种细胞形成愈伤组织再分化成植株 3．能克服远缘杂交不亲和技术的是( ) A．组织培养 B．细胞融合 C．动物胚胎移植 D．单倍体育种 4．下列有关现代生物科技的叙述中，错误的是（） A．植物体细胞杂交技术克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍 B．动物细胞融合技术开辟了制备单克隆抗体的新途径 C．利用基因工程技术可以使哺乳动物生产人类所需的药品 D．胚胎移植技术的优势是可以充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力 5．关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.给予适宜的条件，有的植物可在愈伤组织的基础上直接发育出花器官 D.细胞培养产生出变异的新植株，为选择有益性状的新作物创造了条件 6．利用生物工程技术能够实现对良种种畜的快速大量繁殖，以下哪项技术不具备此优点？ A．基因工程技术 B．细胞核移植技术 C．胚胎分割技术 D．试管动物技术 7．在细胞工程——植物体细胞杂交中，需要将营养细胞的细胞壁除去，通常是采用纤维素酶和果胶酶的酶解破壁法处理。如将去掉了细胞壁的成熟植物细胞置于清水中，细胞将（） A．皱缩 B．胀破 C．呈球形 D．保持原状 8．在生物体内，细胞没有表现出全能性而是分化为不同的器官，其原因是 A. 细胞丧失了全能性 B. 不同细胞中遗传信息的执行情况不同 C. 不同的细胞中遗传信息不完全相同 D. 在个体发育的不同时期，细胞内的遗传物质发生了变化 9．下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（） A．植物组织培养没有体现植物细胞的全能性 B．二倍体植株的花药经植物组织培养后得到稳定遗传的植株 C．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得
流式细胞学项目
目前已开展项目 电子申请项目（淋巴细胞亚群）收费收费抗体个数TBNK/CD4+25+127/CD8+28/CD20 400 10*40 淋巴细胞亚群分析全套440 11*40 TBNK/CD4+25+127/CD8+28 360 9*40 TBNK/CD4+25+127/CD8+28/HLA-DR 400 10*40 淋巴细胞亚群带绝对计数435 9*40+5*15 手工申请项目（淋巴瘤） 淋巴瘤680 17*40 收费代码 淋巴细胞免疫分析ID1：091014 ID2：250401029 15元 血细胞簇分化抗原（CD）系列检测（流式细胞仪法） ID1：091001 ID2：250404031a 40元 建议分院送检外周血，项目为“淋巴细胞亚群带绝对计数”，送检时间为每天早上8.30分至总院病理细胞室（每天抽取的新鲜血液可保存至4度冰箱，冷藏至第二天早上8.30送至总院，周五及节假日放假前最后一天不建议抽取）。 如有疑问请拨打细胞室分机号86318进行咨询
附件1 流式细胞学标本接收原则 1外周血标本 血细胞簇分化抗原检测的外周血标本(总院住院部)由公务员送至细胞室窗口,核对病人信息无误后签收.标本送至流式细胞室,由相关人员处理。门诊病人的标本每天9点至检验科窗口取并登记，送至流式细胞室，核对电子申请单中的病人信息无误后交由相关人员处理并录入LIST系统编辑“淋巴亚群”编号（FS**-*****）。标本均非患者送递。如有门诊患者询问报告时间，告知病人按门诊取报告收条上的打印时间，一般为第四个工作日。 2组织学标本 细针穿刺标本需先在显微镜下进行评估，保证淋巴细胞浓度大于50w个/ml，保存在1mlPBS中，2小时内送至细胞室进行处理。 凡有下列情况之一者拒收标本（流式）： 1、任何无标签的标本拒收。标本要贴有病人的姓名或编号和抽血的日期。 2、申请单上写明抽血日期，如无，联系相关人员填写日期，仍未获得日期， 拒收。 3、血和骨髓标本必须收集在肝素、EDTA抗凝管内，否则拒收。肝素抗凝管 内的标本超过48小时拒收，EDTA抗凝管内标本超过24小时拒收。 4、组织标本采集时间超过12小时拒收。 5、除了组织之外的任何标本，曾放过冰箱或放在冰上的拒收。 6、已凝结的血或骨髓标本拒收。 7、任何骨髓标本，如果太黏稠不能过滤的拒收。 8、任何肉眼可见溶血的标本拒收。 9、标本经过两次裂解仍无法裂解干净，视为无法评估并做记录。 10、发生明显坏死的标本拒收。 11、细胞过少的组织或细胞学标本拒收。
细胞工程期末试题库
一、名词解释 1.细胞工程：应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究、改造生物遗传特性和生物学特性，获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的科学。 2.动物组织工程：将干细胞与材料科学相结合，将自体或异体的干细胞经体外扩增后种植在预先构建好的聚合物骨架上，在适宜的生长条件下干细胞沿聚合物骨架迁移、铺展、生长和分化，最终发育成具有特定形态及功能的工程组织。 3.细胞全能性：一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力。 4.干细胞：动物体内具有分化潜能，并能自我更新的细胞，分为胚胎干细胞和组织干细胞。 5.全能干细胞：从早期胚胎的内细胞团分离出来的一种高度未分化的细胞系，可以无限增殖，可分化成为多种细胞类型，从而可形成任何组织、器官，具有形成完整个体的潜能。 6.多能干细胞：具有分化成多种细胞组织的潜能，但失去了发育成完整个体的能力，发育潜能受到一定限制。 7.植物细胞培养：指在离体条件下，对植物的单个细胞或小的细胞团进行培养使其增值的技术。 8.植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 9./ 10.细胞脱分化：一个已分化的细胞回复到未分化的状态或分生细胞的过程。 11.细胞再分化：指在离体的培养条件下，当细胞脱分化以后形成的无序生长的细胞或愈伤组织重新进入有序生长的过程。只有再分化才能再生个体。 12.体细胞杂交（融合）：指两个离体细胞通过一定的诱导技术使质膜接触而融合在一起，随后导致两个细胞核物质融合的技术。 13.细胞核移植：利用显微操作技术将细胞核与细胞质分离，然后再将不同来源的核与质重组，形成杂种细胞。 14.接触抑制：当两个细胞由于生长而相互靠近发生接触时，细胞不再移动，在接触区域的细胞膜褶皱样活动停止，这种由细胞接触而抑制细胞运动的现象称为接触抑制。 15.密度抑制：细胞接触汇合成片后，仍能进行增值分裂，但当细胞密度进一步增大，培养液营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养的枯竭和代谢物的影响，而发生密度抑制，导致细胞分裂停止的现象。 16.抗原：进入动物体内并对机体的免疫系统产生刺激作用的外源物质。 17.抗体：由抗原刺激B淋巴细胞转化为浆细胞后产生的，并能与相应的抗原特异性结合、具有免疫功能的球蛋白。 18.单克隆抗体：通过小鼠B细胞杂交瘤技术制备的高度均一、单一特异性，仅针对抗原上的某一个抗原决定簇产生的抗体。 19.多克隆抗体：用天然的抗原物质免疫动物，刺激多个B细胞克隆所获得的免疫血清，含有多种特异性抗体。 20.# 21.二倍体细胞培养法：始终维持培养细胞染色体倍数恒定为二倍体的细胞培养方法。 22.克隆培养法：又叫单细胞分离培养法，把从细胞悬液中获得的单个细胞用于培养，使之分裂增殖而产生一个细胞群的方法。 二、填空 1.广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官培养及细胞离体操作和培养技术。
大学 细胞工程试题及答案
细胞模拟试题及答案 一、填空(每空一分,共25分) 1.实验室得物理防护就是由隔离得设备、实验室得设计、实验实施等三个方面组成,根据其密 封程度得不同,分为P1、P2、P３、P4四个生物安全等级、典型得P４实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2、细胞系就是原代培养经初步纯化获得得以一种细胞为主得、能在体外长期生存得不均一细 胞群体。 ３.细胞株就是指从一个经过生物学鉴定得细胞系用单细胞分离培养或通过筛选得方法,由单细胞增殖形成得细胞群。 ４。干细胞就是一类具有自我更新与分化潜能得细胞。干细胞得增殖特性为缓慢性与自稳性。 5.培养细胞得生长特点为贴附、接触抑制与密度抑制。 6、植物细胞培养得原理就是基于动物细胞得全能性。 7、植物细胞悬浮培养得方法为分批培养法、连续培养法与半连续培养。 8。植物组织培养中培养材料得消毒过程中,消毒得基本原则就是既要杀死附着其上得微生物又不损伤材料、 9.细胞生长测定得一般方法为:细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10、体外培养得细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞与非贴附型细胞。 1１.人工种子得组分包括胚状体、人工胚乳与人工种皮、 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核融合几 个步骤。其中细胞桥形成就是最关键得一步、 13。花粉单倍体植株得鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14。胚胎工程主要就是对哺乳类动物得胚胎进行某种人为得工程技术操作,然后让它继续发育,获得人们所需要得成体动物。 １５.人工诱导单倍体形成得方法包括:远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药培养等、二、单项选择题(每题1分,共10分) 1。人参皂甙粉就是人参中重要得药用成分,以前只能从人参中提取产量极低,因而价格昂贵、目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取(B) A.基因工程 B.植物组织培养
(完整版)细胞工程测试题(1)
绝密★启用前 2015-2016学年度???学校3月月考卷 试卷副标题 xxx 注意事项： 1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息 2．请将答案正确填写在答题卡上 第I 卷（选择题） 请点击修改第I 卷的文字说明 一、选择题（题型注释） 1．下列关于植物组织培养的叙述，正确的是 A 、愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B 、二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C. 用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D. 植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得 2．动物细胞融合技术最重要的应用是（ ） A ．制备单克隆抗体 B ．制备大量的动物细胞 C ．制备胚胎 D ．进行细胞核移植 3．运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种，操作过程中能形成愈伤组织的是（ ）。 ①植物组织培养 ②植物体细胞杂交 ③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A ．①②③ B ．①②④ C ．①③④ D ．①②③④ 4．在现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是（ ）。 A ．对植物的离体组织进行培养，大规模培育优良品种 B ．将鼠的骨髓瘤细胞与已免疫的B 淋巴细胞融合，制备单克隆抗体 C ．利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜—甘蓝” D ．将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株 5．关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（ ） A ．可以制成诊断盒，用于疾病的诊断 B ．可以在生物体内生产，不能体外生产 C ．制备过程中一个重要的环节是细胞融合。 D ．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 6．植物组培与动物细胞培养的相同点是 A.都需要一定的气体环境 B.都存在脱分化现象 C.都存在细胞的接触抑制现象 D.都需要对培养材料进行细胞分散处理 7．单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是（ ）
大学细胞工程试题及答案
大学细胞工程试题及答 案 TTA standardization office【TTA 5AB- TTAK 08- TTA 2C】
细胞模拟试题及答案 一、填空（每空一分，共25分） 1.实验室的物理防护是由隔离的设备、实验室的设计、实验实施等三个方面组成， 根据其密封程度的不同，分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不 均一细胞群体。 3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方 法，由单细胞增殖形成的细胞群。 4.干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞的增殖特性为缓慢性和自 稳性。 5.培养细胞的生长特点为贴附、接触抑制和密度抑制。 6.植物细胞培养的原理是基于动物细胞的全能性。 7.植物细胞悬浮培养的方法为分批培养法、连续培养法和半连续培养。 8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中，消毒的基本原则是既要杀死附着其上的 微生物又不损伤材料。 9.细胞生长测定的一般方法为：细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞和非贴附型细胞。 11.人工种子的组分包括胚状体、人工胚乳和人工种皮。 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核 融合几个步骤。其中细胞桥形成是最关键的一步。
13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续 发育，获得人们所需要的成体动物。 15.人工诱导单倍体形成的方法包括：远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药 培养等。 二、单项选择题（每题1分，共10分） 1.人参皂甙粉是人参中重要的药用成分，以前只能从人参中提取产量极低，因而价 格昂贵。目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取（B） A．基因工程 B．植物组织培养 C．植物体细胞杂交 D．发酵工程 2.下列有关动物细胞培养的叙述不正确的是（C） A．通过动物细胞培养可获得大量的细胞分泌蛋白 B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理，以使细胞分散 C．细胞癌变都发生于原代培养过程中 D．目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的，以保持其正常核型3. 尽管各种合成培养基给动物细胞培养带来极大方便，但许多实验表明，单纯使用 合成培养基细胞的贴壁增殖效果常常不理想。因此，在使用时通常仍然需要加入一定量的(C) A．平衡盐溶液B. 琼脂糖 C. 动物血清 D. 甘露醇 4.制备人工种子的关键是控制(A) A.胚状体的同步发育 B.人工种皮的同步发育 C.胚状体的单独发育 D.人工种皮的单独发育