文档库 最新最全的文档下载
当前位置:文档库 › 胡萝卜素和番茄红素的提取分离和测定

胡萝卜素和番茄红素的提取分离和测定

胡萝卜素和番茄红素的提取分离和测定
胡萝卜素和番茄红素的提取分离和测定

β—胡萝卜素和番茄红素的提取分离与测定

一,实验目的

1、学习柱色谱法、薄层色谱法的原理及其方法。

2、掌握从胡萝卜或番茄中分离提纯胡萝卜素和番茄红素的原理和方法。

3、学会用色谱法从胡萝卜或番茄中提取胡萝卜素和番茄红素并鉴定之。

4、初步了解胡萝卜素和番茄红素的来源以及生产方法。

二,实验原理:

胡萝卜素是最早发现的一个多烯色素。后来,又发现了许多在结构上与胡萝卜素类似的色素,于是就把这类物质叫做胡萝卜色素类化合物,或者叫做类胡萝卜素。这类化合物大都难溶于水,易溶于弱极性或非极性的有机溶剂,因此又把这类物质叫做脂溶性色素。

番茄红素是胡萝卜素的开链异物体。番茄红素在成熟的红色植物果实如番茄、西瓜、胡萝卜、草莓、柑桔等中含量最高,其中含量最多的是番茄。

β-胡萝卜素和番茄红素的分子式均为C40H56,分子量为536.85,β-胡萝卜素的熔点184℃,番茄红素的熔点174℃。β-胡萝卜素和番茄红素是不饱和碳氢化合物,难溶于甲醇、乙醇,可溶于乙醚、石油醚、正已烷、丙酮,易溶于氯仿、二硫化碳、苯等有机溶剂。

根据β-胡萝卜素和番茄红素的上述性质,故可利用石油醚、乙酸乙酯等弱极性溶剂将它们从植物材料中浸提出来。然后,根据它们对吸附剂吸附能力的差异,用柱色谱进行分离,用薄层色谱检测分离效果。并根据它们在可见光区有强烈吸收的性质,用紫外-可见分光光度法进行测定,β-胡萝卜素的最大吸收峰为451nm,番茄红素的最大吸收峰为472nm。

1、柱色谱法

柱色谱(柱上层析)常用的有吸附柱色谱和分配柱色谱两类。前者常用氧化铝、硅胶作固定相。在分配柱色谱中以硅胶、硅藻土和纤维素作为支持剂,以吸收大量的液体作固定相,而支持剂本身不起分离作用。

吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大,经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂。当待分离混合物溶液流过吸附柱时,各种成分同时被吸附在柱的上端。当洗脱剂流下时,由于不同化合物吸附能力不同,往下洗脱的速度也不同,于是形成不同层次,即溶质在柱中自上而下按对吸附剂亲和力大小分别形成若干色带,再用溶剂洗脱时,已经分开的溶质可以从柱上分别洗出收集;或者将柱吸干,挤出后按色带分割开,再用溶剂将各色带中的溶质萃取出来。对于柱上不显色的化合物分离时,可用紫外光照射后所呈现的荧光来检查,或在用溶剂洗脱是分别收集洗脱液,逐个加以鉴定。

2、薄层色谱法

薄层色谱法(Thin Layer Chomatography ,缩写TLC)是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也用于跟踪反应进程。它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。薄层色谱是在载玻片上才、均匀铺上一薄层吸附剂,制成薄板,用毛细管将样品点在起点处,把此薄层板置于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm,待展开剂前沿利顶端约1cm 附近时取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色,测定斑点位置,计算比移值(Rf)(方法同低色谱法)。由于层析是在薄层上进行的,故称为薄层层析。

薄层色谱常用的有吸附色谱和分配色谱两类。一般能用硅胶或活性氧化铝薄层色谱分开的物质,也能用硅胶或氧化铝柱色谱分开,凡能用硅藻土和纤维素作支持剂的分配柱色谱能分开的物质;也可分别用硅藻土和纤维素薄层色谱展开,因此,薄层色谱常用作柱色谱的先导。同时也可以用吸收剂非极性大孔吸附树脂,具本实验的类胡萝卜素具有末端带环的长链结构,故平均孔径为290~300A 的X-5大孔吸附树脂更利于他们的吸附和吸附过程中的传

质。

三、仪器和试剂

仪器:三角瓶(50ml)、分液漏斗(150ml)、蒸馏瓶(50ml)、普通蒸馏装置(或减压蒸馏装置)、漏斗、色谱柱、硅胶薄层板、量筒、烧杯、层析缸

试剂:丙酮、石油醚(bp30~60℃)、硅胶(层析用,200~300 目)、无水硫酸钠、石油醚(bp60~90℃)、丙酮:石油醚(1:9)(V/V)

材料:胡萝卜或番茄

四、实验装置图

五、实验步骤

1、(类胡萝卜素)含胡萝卜素和番茄红素的石油醚溶液的制备

方法一:

将新鲜胡萝卜洗净、擦干,切去尾部,切碎。称取碎鲜胡萝卜10g 于小研钵中,研碎。碎胡萝卜移至50mL 三角烧瓶中,每次用丙酮10mL 萃取2 次,再用石油醚(bp30~60℃)萃取固体两次,每次10mL。把石油醚溶液加到丙酮液中。在分液漏斗中将混合液与50mL 饱和氯化钠溶液振荡,分去下层,用蒸馏水洗涤上层液两次,每次50mL,分去水,用无水硫酸钠干燥石油醚液(约1h),把混合液倒入50mL 圆底烧瓶中,热水浴加热蒸馏,除去溶剂,得固体。在制得的固体物加入3mL 石油醚(bp60~90℃)拌硅胶1g,在通风橱内抽干,得黄色硅胶颗粒,待上柱。

方法二:

(1)称取20g新鲜番茄果肉,捣碎,置于50 mL三角瓶中,再加入5g食盐,用玻棒搅拌,使食盐与番茄果肉充分混合均匀,放置一定时间,便会看到果肉组织中水分大量渗出。脱水时间持续15~30 min。随后将脱除下来的水分滤入150 mL分液漏斗中。

(2)向经过食盐脱水的番茄果肉加入10 mL丙酮,用玻棒搅拌,并静置5~10 min。然后将丙酮提取液也滤入分液漏斗中。

(3)向经过丙酮处理的番茄果肉加入10 mL乙酸乙酯浸提5 min。浸提过程中应不时振摇三角瓶,使番茄果肉与溶剂充分接触;若室温过低,可将三角瓶置于温水浴中温热,但应注意不能使浸提溶剂明显挥发损失。5 min后将提取液也滤入分液漏斗中,并用玻棒轻压残渣尽量使溶剂流尽。再用乙酸乙酯重复提取2次,每次10 mL,合并提取液至分液漏斗中。

(4)充分振摇分液漏斗中的混合溶液,静置,完全分层后,分去水层,有机层(酯层)再用蒸馏水洗2次,每次8-10 mL,弃去水层。酯层自分液漏斗上口倒入干燥的小三角瓶中,

加入适量无水硫酸镁(或无水硫酸钠)干燥15 min(注意:应避光)。

(5)干燥后的酯层滤入50 mL干燥的蒸馏瓶中,水浴加热,小心蒸馏(最好减压蒸馏)浓缩至1-2 mL。所得浓缩液即为类胡萝卜素样品。

2、装柱和分离(装置如图1)

取20cm×1cm 色谱柱一根,垂直装置,以50ml 三角烧瓶作洗脱液的接受器。用镊子取少许脱脂棉放于干净的色谱柱底部,轻轻塞紧,再在脱脂绵上盖一层厚0.5cm 的海石砂(或用一张比柱内径略小的滤纸代替),关闭活塞,向柱内倒入石油醚(bp60-90℃)至约为柱高的3/4 处,打开活塞,控制流出速度为1 滴/s。通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入层析硅胶。用洗耳球轻轻敲打柱身,使填装紧密。当装填到3/4 时,再在上面加一层0.5cm 厚的海石砂,操作时一直保持上述流速,注意不能使液面低于砂子的上层。当液面流至离海石砂面1cm 时,立即从玻璃漏斗加入已制备好的含胡萝卜素的黄色硅胶,随后用0.5ml 石油醚洗下管壁的硅胶,如此连续2—3 次,直至洗净为止,然后在色谱柱上装上滴液漏斗,用石油醚(bp60-90℃)作洗脱剂进行洗脱,洗1 滴/s。当有一黄色的谱带分出,待黄色组分绝大部分洗出时,把洗脱剂换成1:9 丙酮一石油醚(bp60-90℃)混液作洗脱剂进行洗脱,控制流出速度如前(这混液洗脱剂有助于混合物中极性较大的组分移动),又可分出两个黄色组分。在45—90min 内,柱中物料将全部洗脱出来。观察这些物料通过柱子的移动情况。在三角烧瓶中收集3 份洗出液。用纸色谱、薄层色谱对各段洗出液进行色谱分析。

3.薄层色谱法

样品:柱色谱法中洗脱出的份样品液

展开剂:1:9 丙酮一石油醚溶液

薄层板的制备:取3 片载波体,洗净,晾干。

在50ml 烧杯中放置3g 硅胶G,逐渐加入0.5%cmC 水溶液8ml,调成均匀的糊状,将此糊状物倾于上述洁净的载玻片圣桑,用手将带浆的载玻片在水平的桌面上做上下轻微的颤动,并不时转动方向,制成厚薄均匀,表面光洁的平整的薄层板,然后放在水平桌面上,在室温放置晾干后放入烘箱中,缓慢升温至110℃,恒温0.5h,取出,稍冷后置干燥器中备用。

点样:取出上述制好的薄层板,分别在距一端点1cm 处用铅笔轻轻划一横线作为起始线。用毛细管吸取少量样品液,在一块板的起点线上点第一个色带的样品液,根据柱色谱分离的色带,依次点样,如果样点颜色较浅,可重复点样,重复点样前必须待前次样点挥干后进行。样点直径不超过2mm。

展开:待样点干燥后,小心地放入已加入展开剂的250ml 广口瓶中进行展开。在瓶的内壁贴一张高5cm,环绕周长4/5 的滤纸,下面浸入展开剂中,以使容器内被展开剂蒸气饱和。点样一端浸入展开剂0.5cm(样点不浸泡在展开剂中)。盖好瓶塞,观察展开剂前沿上升离板的上端1cm 处取出,尽快用铅笔在展开剂上升的前沿处划一记号,晾干后,量出展开剂和样点移动的距离,计算Rf 值。(在本实验条件下,薄层检测结果为:β-胡萝卜素,黄色,R f值为0.89;番茄红素,深红色,R f值为0.84。)

五、注意事项

1,本实验采取的工艺不同于其他工艺,体现在原料粉碎时加入了稳定剂(5ml 氨水和

35ml 乙醇)来防止β-胡萝卜素被氧化,由此可提高提取率。

2、色谱柱填装紧密与否,对分离效果很有影响。若柱中留有气泡或各部分松紧不匀(更

不能有断层或暗沟)时,会影响渗滤速度和显色的均匀。但如果填装时过分敲击,又会因太紧密而流速太慢。

3、加入砂子的目的是。在加料是不致把吸附剂冲起,影响分离效果。

4、为了保持色谱柱的均一性,使整个吸附剂浸泡在溶液或溶液中是必要的。否则当柱

中溶液流干是。柱身干裂,影响渗滤和显色的均一性。

5、若不用滴液漏斗,也可用每次倒入10ml 洗脱剂的方法进行洗脱

6、载玻片上涂层要均匀,既不应有纹路、带团粒,也不应有能看到玻璃的薄涂料点。

7、点样用的毛细管必须专用,不得弄混。

8、点样时,使毛细管液面刚好接触到薄层(滤纸)既可,点样过重可能会使薄层遭到破坏。

胡萝卜素的提取知识点

胡萝卜素的提取知识点-标准化文件发布号:(9556-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII

胡萝卜素的提取 了解胡萝卜素的基础知识和提取原理;学会提取胡萝卜素的技术和纸层析的操作要求。1.β-胡萝卜素在人体内可以被氧化成维生素A,因而胡萝卜素具有预防夜盲症等疾病。 另外还可以用作食品、饮料、饲料的添加剂。 2.胡萝卜素是橘黄色晶体,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。 3.提取天然胡萝卜素的方法有:从植物(如胡萝卜)中提取;从养殖的岩藻(如海带、马尾藻、裙带菜等)中提取;利用微生物发酵(如产氢红杆菌、工程菌等)生产。 【思考1】在蒸馏法、压榨法和萃取法中,由于胡萝卜素的水溶性和挥发性差,因而不能用蒸馏法提取;由于胡萝卜素的熔点高,因而不能用压榨法提取;由于胡萝卜素易溶于石油醚等有机溶剂,因而可用萃取法提取胡萝卜素。 二、实验设计 1.有机溶剂包括水溶性有机溶剂(如乙醇、丙酮等)和水不溶性有机溶剂(如石油醚、乙酸乙酯、苯、乙醚等)。 2.乙醇和丙酮不能(能、不能)用于胡萝卜素的萃取。原因是萃取中乙醇和丙酮能与水混溶而影响萃取效果。 3.在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳这五种有机溶剂中,由于石油醚的沸点最高,在加热萃取时不易挥发,所以最适宜用作萃取剂。 4.萃取效率的主要取决于萃取剂的性质和用量,其次还受到原料颗粒大小、紧密程度、含水量;温度、时间等条件的影响。 【思考2】从影响萃取效率的因素来看,应当如何控制萃取的过程条件? 用石油醚作为萃取剂,用量相对多一些;原料要粉粹、干燥;萃取温度高;萃取时间长。 1.填写萃取法提取胡萝卜素的实验流程: 2.实验步骤: ①原料加工:取500g新鲜胡萝卜,清水清洗、沥干、粉碎、烘干。 ②原料装填:将胡萝卜粉与200mL石油醚装入蒸馏瓶。 ③加热萃取:安装冷凝回流装置,沸水浴加热萃取30min。 ④过滤:待降温后,将萃取物进行过滤,除去固体物,得到萃取液。 ⑤浓缩:安装水蒸气蒸馏装置,加热萃取液,萃取剂挥发,得到胡萝卜素粗提物。

课题2 胡萝卜素的提取过程

课题2胡萝卜素的提取 教材内容解读 要点1胡萝卜素 (1)性质 胡萝卜素是橘黄色结晶,化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于石油醚等有机溶剂。 (2)分类 根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类,β-胡萝卜素是其中最主要的组成成分。 (3)用途 一分子的β-胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官被氧化成两分子的维生素A,因此,胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病,如夜盲症、幼儿生长发育不良,干皮症等。胡萝卜素还是常用的食品色素,广泛地用作食品、饮料、饲料的添加剂。最近发现天然胡萝卜素还具有使癌变细胞恢复成正常细胞的作用。 要点2胡萝卜素的提取方法 提取天然胡萝卜素的方法主要有三种,一是从植物中提取,二是从大面积养殖的岩藻中获得,三是利用微生物的发酵生产。如果需要获得β-胡萝卜素,还需要对产物进行进一步的分离。 要点3实验设计 (1)提取方法 胡萝卜素易溶于有机溶剂,可以用萃取的方法提取。 (2)提取胡萝卜素的实验流程 胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素 (3)萃取剂的选择 胡萝卜素可溶于乙醇和丙酮,但他们是水溶性的有机溶剂,因能与水混溶而影响萃取效果,所以不用它们作萃取剂。在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳这五种溶剂中,石油醚的沸点最高,在加热萃取时不易挥发,所以石油醚最适宜用作萃取剂。 (4)影响萃取的因素 萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量,同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。一般来说,原料颗粒小,萃取温度高,时间长,需要提取的物质就能够充分溶解,萃取效果就好。 (5)胡萝卜素提取装置的设计 采用水浴加热,因为有机溶剂都是易燃物,直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸。在加热瓶口安装冷凝回流装置,目的是防止加热时有机溶剂挥发。 要点4实验案例 胡萝卜素的提取 提取胡萝卜素的主要步骤如下。 1.选取500 g新鲜的胡萝卜,用清水洗净,沥干、切碎,然后在40 ℃的烘箱中烘干,时间约需2 h,将干燥后的胡萝卜进一步粉碎过筛。注意胡萝卜的粉碎一定要彻底。 2.将样品放入500 mL圆底烧瓶中,加入200 mL石油醚混匀,按教科书中图6-7所示安装萃取回流装置,萃取30 min,然后过滤萃取液,除去固体物质。

最新 人教版 选修 胡萝卜素的提取 教案

2019-2020学年人教版选修胡萝卜素的提取教案 学习目标 1.了解胡萝卜素的价值、工业提取方法,掌握胡萝卜素的性质和作用。 2.掌握胡萝卜素提取的方法及实验装置。 3.掌握用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品。 一、胡萝卜素的性质及萃取要求

1.胡萝卜素的基础知识 (1)胡萝卜素的性质:胡萝卜素是橘黄色结晶,化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。 (2)种类划分:胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键,根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类,最主要的组成成分是_β-胡萝卜素。 (3)提取途径????? ①从植物中提取②从大面积养殖的岩藻中获得③利用微生物的发酵生产 2.提取胡萝卜素的基本原理 (1)萃取剂的选择 ①选择萃取胡萝卜素的有机溶剂的原则 a .具有较高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶。 b .萃取效率要高。 c .对人无毒性,不易燃,易与产品分离,不影响产品质量。 ②有机溶剂的分类 有机溶剂分为水溶性和水不溶性两种:a.乙醇和丙酮能够与水混溶,是水溶性有机溶剂;b.石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳等不能与水混溶,称为水不溶性有机溶剂。 (2)影响萃取的因素 ①主要因素:萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。 ②次要因素:萃取的效率受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。

1.提取胡萝卜素能否用乙醇或丙酮作为萃取剂?为什么? 提示不能。因为乙醇和丙酮都属于水溶性有机溶剂,而胡萝卜素应该用水不溶性有机溶剂进行提取,如石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳等。 2.为什么用于提取胡萝卜素的萃取剂要有较高的沸点? 提示有机溶剂的沸点较高,可以充分溶解胡萝卜素。 3.影响萃取效率的因素除了萃取剂的性质和使用量之外,还有哪些因素? 提示原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等。 4.萃取胡萝卜素时为什么要避免明火加热? 提示因为有机溶剂都是易燃物,直接使用明火加热容易引起燃烧或爆炸。 1.下列关于胡萝卜素的说法,不正确的是( ) A.胡萝卜素存在于叶绿体类囊体薄膜上 B.胡萝卜素可划分为α、β、γ三类,其中β-胡萝卜素是最主要的组成成分

胡萝卜素的提取

β-胡萝卜素的提取分离研究

β-胡萝卜素的提取 摘要:β-胡萝卜素是安全的、无毒的天然色素,在生物食品等领域均有展应 用。β-胡萝卜素的提取工艺众多,工艺各有特点。简要介绍了溶剂提取法提取胡萝卜素,柱色谱分离β-胡萝卜素,薄层色谱法检验分离效果的方法。学习柱色谱法、薄层色谱法的原理及其方法。掌握从胡萝卜中分离提纯β-胡萝卜素的原理和方法。学会用色谱法从胡萝卜中提取胡萝卜素并鉴定之。 关键词:β-胡萝卜素提取分离 引言: 胡萝卜是传统蔬菜和食用天然胡萝卜素的重要来源。β-胡萝卜素是500多种类胡萝卜素的一种。是橘黄色脂溶性化合物,它是一种重要的食用天然色素和营养强化剂,易溶于许多有机溶剂,如:乙酸乙酯、氯仿。几乎不溶于丙二醇、甘油、酸和碱‘不溶于水。β-胡萝卜素是一种非常安全的、无任何毒副作用的营养元素,具有解毒作用。是维护人体健康不可缺少的营养素。在抗癌、预防心血管疾病、白内障及抗氧化方面有显著的功能,可预防因老化引起的多种退化性疾病。另外,β-胡萝卜素在食品工业中的应用也日益广泛。 胡萝卜中含有丰富的胡萝卜素,是β-胡萝卜素含量最高的蔬菜之一。本文以胡萝卜为原料,采用色谱分离的方法研究了胡萝卜素的提取。 正文 1.1胡萝卜中的成分每100克胡萝卜中,约含蛋白质0.6克,脂肪0.3克,糖7.6~8.3克,铁0.6毫克,维生素A(胡萝卜素)1.35~17.25毫克,维生素B1 0.02~0.04毫克,维生素B2 0.04~0.05毫克,维生素C12毫克,热量150.7千焦,另含果胶、淀粉、无机盐和多种氨基酸。各类品种中尤以深橘红色胡萝卜素含量最高,各种胡萝卜所含能量在79.5千焦~1339.8千焦之间。胡萝卜是一种质脆味美、营养丰富的家常蔬菜,素有“小人参”之称。胡萝卜富含糖类、脂肪、挥发油、胡萝卜素、维生素A、维生素B1、维生素B2、花青素、钙、铁等人体所需的营养成分。

胡萝卜素的提取教学设计教案

教学准备 1. 教学目标 1、了解有关胡萝卜素的基础知识 2、掌握提取胡萝卜素的基本原理 3、掌握萃取法提取胡萝卜素的技术 4、学会纸层析的操作方法 2. 教学重点/难点 教学重点: 胡萝卜素的提取,纸层析的操作 教学难点: 胡萝卜素的提取 3. 教学用具 教学课件 4. 标签 教学过程 (一)引入新课 植物有效成分提取的方法有哪些?这一节我们再来学习萃取法提取胡萝卜素的原理、方法和提取技术。 (二)背景知识 1.基础知识 (1)胡萝卜素的性质:橘黄色晶体,化学性质稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等。 (2)胡萝卜素的来源:植物、岩藻、微生物发酵。

(3)分类 根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类,β-胡萝卜素是其中最主要的组成成分。 (4)用途 一分子的β-胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官被氧化成两分子的维生素A,因此,胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病,如夜盲症、幼儿生长发育不良,干皮症等。胡萝卜素还是常用的食品色素,广泛地用作食品、饮料、饲料的添加剂。最近发现天然胡萝卜素还具有使癌变细胞恢复成正常细胞的作用。 (5)方法:萃取法。 影响因素:萃取剂性质、用量;原料颗粒大小、紧密程度、含水量;温度、时间等。 选择控制:溶剂:石油醚 原料:颗粒小、干燥。 条件:温度较高,时间长。 (三)胡萝卜素的提取 1.实验设计 1.1实验流程:阅读教材图6-6。 溶剂:应选择使用水不溶性有机溶剂,如石油醚(为什么?)。 选择溶剂应注意哪些因素?:(提取效率、水溶性与水不溶性、沸点高低、有无毒性、是否易于产品分离等) (1)提取方法 胡萝卜素易溶于有机溶剂,可以用萃取的方法提取。 (2)提取胡萝卜素的实验流程 胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素 (3)萃取剂的选择

类胡萝卜素的提取动力学研究实验报告

应用化学系本科化学实验报告 课程名称综合化学实验成绩评定 实验项目名称设计实验指导教师 实验项目类型综合化学实验实验地点食工楼楼室 班级实验者学号 实验时间2012年4月18日上午~4月18日下午温度℃湿度2012年4月25日上午~4月25日下午温度℃湿度 一、实验目的 .掌握类胡萝卜素的定性(薄层层析法); .定量测定方法(紫外可见分光光度法); 二、实验原理 . 类胡萝卜素()是自然界广泛存在的天然色素,包括一类碳氢化合物()及它们的氧化衍生物(),它们由个类异戊二烯单位组成。对天然类胡萝卜素进行分离纯化和结构鉴定是十分重要的基础研究工作之一。紫外可见吸收光谱()主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁,它是研究分子吸收波长范围内的吸收光谱,它不仅在有机化合物的结构鉴定中发挥重要作用,而且依此原理建立的紫外可见分光光度法是应用最广泛的定量分析方法之一。 . 实验室常用的薄层色谱,其原理是利用混和物中各组分在不相混溶的两相即流动相(展开剂)和固定相(吸附剂)中吸附和解吸的能力的不同,也可以说在两相中的分配不同,当混合物随流动相(展开剂)流过固定相(吸附剂)时,发生了反复多次的吸附和解吸的过程,从而使混合物分离成两种或多种单一的纯组分。利用萜类化合物的溶解度差异进行分离,含羟基、氧环则溶于醇,不含羟基、氧环

(多烯)则溶于石油醚。 三、试剂及器材 . 原料,试剂 胡萝卜干粉或新鲜胡萝卜;α和β胡萝卜素标准品、(和无水)乙醇、石油醚(沸程℃℃、℃℃)、丙酮、乙酸乙酯、苯、甲苯、乙醚、氯仿、正已烷、环己烷、抗坏血酸、、盐酸、氢氧化钠、硅胶层析板、氧化铝层析板和纯水。 . 仪器 数显恒温水浴锅(国华电器有限公司); 电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司); 8000A紫外可见分光光度计(上海元析仪器有限公司); 旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂); 四、操作步骤 . 试剂的配制 β胡萝卜素标准溶液:准确称β胡萝卜素标准物质于小烧杯中,加入抗坏血酸于小烧杯中,再先加入少量氯仿溶解后,再用石油醚定容至摇匀,即配成浓度为μ β胡萝卜素标准溶液的使用溶液,转移至棕色试剂瓶中贮存备用。吸收曲线和标准曲线的测绘 按表的比例要求移取不同体积的μβ胡萝卜素使用液,用石油醚(沸程要与提取胡萝卜素用的石油醚相同)稀释配制成体积为(或)的一系列不同浓度的标准溶液。取中间浓度的标准溶液,以含有相同浓度抗坏血酸的石油醚(沸程要与提取胡萝卜素用的石油醚相同)溶液为参比溶液,用比色杯,于紫外可见分光光度计在波段进行波长扫描,根据扫描结果从而可绘得β胡萝卜素的吸收曲线。也可以用同样的方法绘制从胡萝卜中提取得到的胡萝卜的吸收曲线,并比较和分析

类胡萝卜素的测定方法

类胡萝卜素的测定方法(高效液相色谱法) 本方法适用于各类食品中以羟基类胡萝卜素为主的多种类胡萝卜素的测定。 本方法最低检出量为:α-胡萝卜素为5ng/mL,β-胡萝卜素为 4.3ng/mL,γ-胡萝卜素为3.5ng/mL,番茄红素为2.7ng/mL,斑蝥黄素为1.0ng/mL。 1. 方法提要 样品以丙酮-石油醚(1+1体积比)混合溶剂反复萃取使类胡萝卜素与其他成分分离,在450nm 波长条件下进行HPLC分析检测,通过外标法计算各种类胡萝卜素的含量。 2. 仪器 (1)高效液相色谱仪。 (2)冷凝回流皂化装置。 (3)旋转蒸发仪。 (4)离心机(5000r/min)。 3. 试剂 本方法所使用试剂除特殊注明外,均为分析纯;所用水为重蒸馏水。 (1)丙酮-石油醚(1+1体积比)混合溶剂:取相同体积的丙酮、石油醚混匀。 (2)50% KOH甲醇-水溶液:称取250g氢氧化钾,用50mL适量水溶解后,用甲醇定容至500mL容量瓶,备用。 (3)无水硫酸钠(Na-2SO4)。 (4)二丁基羟基甲苯(BHT)。 (5)无水乙醇(C2H5OH)。 (6)流动相使用液:按乙腈+二氯甲烷+甲醇(85+10+5)比例准确量取各溶剂,并充分混匀,经.45μm微孔膜过滤后使用。 (7)类胡萝卜素标样:α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、γ-胡萝卜素、番茄红素、斑蝥黄素。(8)标准溶液:准确称取α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、γ-胡萝卜素、番茄红素、斑蝥黄素一定量,先分别用少量的乙酸乙酯溶解,再用甲醇配制成60~80ng/L的标准储备液(于-30℃冻箱保存),使用时再配成3.5~16.5mg/L的标准使用液。 4. 测定步骤 (1)样品处理: a. 皂化提取法(如牛奶等脂肪含量较高的样品):取250L鲜牛奶于2℃、5000r/min冷冻离心30min,取上层油脂于250mL皂化瓶中,加入50mL乙醇、40mL 50% KOH甲醇溶液、0.1g BHT,65~75℃回流皂化30min,用石油醚反复提取皂化液,多次水洗至中性后用无水硫酸钠脱水,定容至25mL容量瓶中,备用。 b. 直接提取法(如番茄等脂肪含量较低的样品):适量新鲜成熟番茄匀浆后称取5~10mg于小烧杯中,加入0.1g BHT,用丙酮-石油醚(1+1体积比)混合溶剂提取3次,合并、收集

胡萝卜素提取1

1.下列关于胡萝卜素的说法,不正确的是() A.胡萝卜素存在于叶绿体类囊体薄膜上 B.胡萝卜素可划分为α、β、γ三类,其中β-胡萝卜素是最主要的组成成分 C.胡萝卜素可用来预防肿瘤、癌症和心脑血管疾病等 D.β-胡萝卜素只存在于蔬菜中 2.萃取剂是萃取过程中必不可少的,故萃取剂的选择也是至关重要的,一般不考虑() A.萃取剂与萃取物的溶剂互不相溶 B.萃取物在萃取剂中的溶解度要大于在原溶液中的溶解度 C.萃取剂的沸点 D.萃取剂可分为水溶性和水不溶性两种 3.(2019·河北石家庄一中期末)下列有关提取胡萝卜素装置的叙述,错误的是() A.酒精灯加热的目的是促进有机溶剂的蒸发 B.酒精灯不可以对烧瓶直接进行加热 C.冷凝管的作用是使蒸发的有机溶剂重新回到烧瓶 D.可以利用蒸馏装置对萃取液进行浓缩 4.(2019·广东珠海一中高二期末)以下关于用层析法鉴定胡萝卜素样品过程的说法中,不正确的是() A.层析液不能没及样品原点 B.点样时,应快速细致,形成大小一致的圆点 C.点样完成后立即将滤纸卷成筒状,置于层析液中层析 D.层析用的玻璃瓶应加盖玻璃板密封 5.下图是玫瑰油提取的水蒸气蒸馏装置图和胡萝卜素提取的装置图,分析比较回答下列有关问题: (1)从装置上看,B装置中的水浴锅作用是________________________。 (2)A装置中提取物最后存在于________中,B装置中提取物存在于________中。 (3)两个装置出现差别是由于提取的方法不同,归根结底是由于提取物的分子结构不同、

理化性质不同。A装置中提取物一般具有____________________,B装置中提取物在石油醚等有机溶剂中有较高的________。 6.(2019·东北师大附中高二期中)下列有关胡萝卜素的叙述,错误的是() A.胡萝卜素的化学性质稳定,溶于水,不溶于乙醇 B.根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类 C.微生物的发酵生产是工业提取β-胡萝卜素的方法之一 D.胡萝卜可以作为提取天然β-胡萝卜素的原料 7.对比观察下列4个纸层析鉴定提取的胡萝卜素粗品的层析装置,正确的是() 8.下列胡萝卜素提取过程中的相关操作及目的对应关系不正确的是() A.胡萝卜块粉碎——使胡萝卜素能够充分溶解 B.干燥——除去胡萝卜中的水分 C.对萃取液蒸馏——提高萃取液中胡萝卜素浓度 D.萃取时加冷凝装置——防止胡萝卜素挥发 9.可通过纸层析鉴定胡萝卜素萃取样品的纯度。和标样相比,胡萝卜素萃取样品的层析结果是() A.萃取样品的层析带偏上 B.萃取样品的层析带偏下 C.萃取样品的层析带位置和条数不确定 D.萃取样品的层析带只有一条 10.(2019·四川达州诊断)三孢布拉霉能用来生产胡萝卜素,但受核基因控制的高产性状容易退化,需要定期筛选出高产菌株。研究表明菌体细胞内的[H]可将无色的TTC还原为红色复合物,且菌体细胞内[H]含量越高,还原能力越强,胡萝卜素合成能力也越强。请结合流程图回答问题: (1)三孢布拉霉菌体细胞内产生[H]的场所是________________________。 (2)萃取的效率主要取决于萃取剂的________,萃取的最佳温度和时间可以通过设置________来摸索。 (3)将菌液涂布到含TTC的培养基上,发现培养基上的菌落连成一片,为避免该现象应该采取的措施是________________。挑取单菌落时,若菌落周围________越深,则菌株合成

专题62胡萝卜素的提取

课题2 胡萝卜素的提取 ★课题目标 (一)知识与技能 1、了解有关胡萝卜素的基础知识 2、掌握提取胡萝卜素的基本原理 (二)过程与方法 1、掌握萃取法提取胡萝卜素的技术 2、学会纸层析的操作方法 (三)情感、态度与价值观 领悟科学探究的方法,形成严谨、创新以及勇于实践的科学态度 ★课题重点 胡萝卜素的提取,纸层析的操作 ★课题难点 胡萝卜素的提取 ★教学方法 启发式教学 ★教学工具 多媒体课件 ★教学过程 (一)引入新课 上一节课我们学习了提取植物芳香油的原理、方法和提取技术,这一节我们再来学习萃取法提取胡萝卜素的原理、方法和提取技术 (二)进行新课 1.基础知识 1.1胡萝卜素的性质:橘黄色晶体,化学性质稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石

油醚等。 1.2胡萝卜素的来源:植物、岩藻、微生物发酵。 1.3方法:萃取法。 影响因素:萃取剂性质、用量;原料颗粒大小、紧密程度、含水量;温度、时间等。 选择控制:溶剂:石油醚 原料:颗粒小、干燥。 条件:温度较高,时间长。 2.实验设计 2.1实验流程:阅读教材图6-6。 溶剂:应选择使用水不溶性有机溶剂,如石油醚(为什么?)。 2.2实验步骤: ①原料加工:取500g新鲜胡萝卜,清水清洗,沥干、粉碎、烘干。 ②原料装填:将胡萝卜粉与200mL石油醚装入蒸馏瓶。 ③加热萃取:安装萃取回流装置,沸水浴加热萃取30min。 ④过滤:将萃取物过滤,除去固体物,得到萃取液。 ⑤浓缩:安装水蒸气蒸馏装置,加热萃取液,萃取剂挥发,得到胡萝卜素。 *注意事项: 烘干胡萝卜时,温度过高、时间过长,胡萝卜素会分解。 2.3胡萝卜素的纸层析鉴定: ①制备滤纸条:取18×30cm滤纸条,于距底端2cm处划基线,取ABCD四个点。 ②点样:用最细注射器针头分别吸取标准样品和提取样品在AD和BC点样,吹干。 ③层析:将滤纸卷成筒状并固定,放到盛有1cm深石油醚的密封容器中层析。 ④观察:取出滤纸条,使石油醚充分挥发后观察层析带。 *注意事项: 滤纸条预先干燥处理; 点样时快速细致、样点圆点尽量细小; 滤纸筒的竖直边缘不能接触; 石油醚易挥发,注意层析容器要密封。

(完整版)胡萝卜素的提取

课题3 胡萝卜素的提取 一.学习目标 1.能够记住有关胡萝卜素的基础知识和提取胡萝卜素的基本原理。(重点、难点) 2.会说出胡萝卜素的提取技术和纸层析的操作方法。(重点) 二.学法指导 联系生活中炒胡萝卜的做法,尝试设计实验提取胡萝卜素;学会纸层析的操作方法,领悟科学探究的方法。 三.课前热身 1.胡萝卜素是_____________结晶,化学性质比较_________,不溶于_________,微溶于_________,易溶于_____________等有机溶剂。根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类。是其中最主要的组成成分。与β-胡萝卜素化学结构类似的胡萝卜素约有100多种,它们大多存在于蔬菜中。__________蔬菜是提取天然β-胡萝卜素的原料。 2.工业生产上,提取天然β-胡萝卜素的方法主要有三种,一是从__________ 中提取,二是从__________ 中获得,三是利用__________ 生产。本课题所提供的方法只能提取胡萝卜素的__________ ,若要获得β-胡萝卜素,还需要进一步的__________ 。 3.萃取胡萝卜素的有机溶剂应具有较高的________,能够_____________胡萝卜素,并且不与_________混溶。 4.萃取的效率主要取决于萃取剂的____________和_____________,同时还受到______________________、紧密程度、_________、萃取的__________和时间等条件的影响。 5.萃取过程的注意事项: (1)萃取过程应避免明火加热,采用_____________。 (2)为防止加热时有机溶剂_________,要在加热瓶口安装_______________________。 (3)萃取液的浓缩可直接使用__________________。 (4)浓缩前要进行_____________。 6.提取的胡萝卜素粗品的鉴定:_____________法。 原理:__________________与其他色素和杂质在层析液中的________不同,在滤纸中的________________不同。 步骤 量做基线:在18 cm×30 cm滤纸下端距底边处做一基线,在基线上取A、B、C、D四点 对照点样:A、D点上点,B、C点上点(点样后滤纸卷成筒状) 干燥层析:吹干,放入中层析(层析溶剂不能超过点样基线) 对比观察:对比观察点与点的异同 写出如下装置中各数字对应的名称 ①___________②__________ ③___________④___________ ⑤___________⑥___________ 四.课堂探究 1

胡萝卜素的提取学案(附答案)

专题6植物有效成分的提取 课题2 胡萝卜素的提取 1.了解有关胡萝卜素的基础知识和提取胡萝卜素的基本原理。 2.初步学会胡萝卜素的提取技术和纸层析的操作方法。 3.初步了解有机溶剂的相关知识。 【课题重点】胡萝卜素的提取,纸层析的操作。 【课题难点】胡萝卜素的提取 【知识准备】 叶绿体中的色素可以溶解于有机溶剂中,可以被层析液分离。 【学习过程】 一、基础知识 1.胡萝卜素是_____________结晶,化学性质比较_________,不溶于_________,微溶于_________,易溶于_____________等有机溶剂。根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类。是其中最主要的组成成分。与β-胡萝卜素化学结构类似的胡萝卜素约有100多种,它们大多存在于蔬菜中。等蔬菜是提取天然β-胡萝卜素的原料。2.工业生产上,提取天然β-胡萝卜素的方法主要有三种,一是从中提取,二是 从中获得,三是利用生产。本课题所提供的方法只能提取胡萝卜素的,若要获得β-胡萝卜素,还需要进一步的。 3.萃取胡萝卜素的有机溶剂应具有较高的________,能够_____________胡萝卜素,并且不与_________混溶。 4.萃取的效率主要取决于萃取剂的____________和_____________,同时还受到 ______________________、紧密程度、_________、萃取的__________和时间等条件的影响。 5.萃取过程的注意事项: (1)萃取过程应避免明火加热,采用_____________。 (2)为防止加热时有机溶剂_________,要在加热瓶口安装_______________________。 (3)萃取液的浓缩可直接使用__________________。 (4)浓缩前要进行_____________。 6.提取的胡萝卜素粗品的鉴定:_____________法。 (1)在18cm×30cm滤纸下端距底边_______处做一基线。在基线上取A、B、C、D四点。 (2)用最细的注射器针头分别吸取_____________溶解在石油醚中的_____________和提 取样品,在_________和_________点上点样。 (3)将滤纸卷成圆筒状,置于装有1cm深的___________的密封玻璃瓶中。

胡萝卜素的提取

胡萝卜素的提取 【课题目标】 本课题通过从胡萝卜中提取胡萝卜素,了解有关胡萝卜素的基础知识和提取胡萝卜素的基本原理,初步学会胡萝卜素的提取技术和纸层析的操作方法,并初步了 解有机溶剂的相关知识。 【课题重点与难点】胡萝卜素的提取,纸层析的操作。 【知识要点】1.胡萝卜素的性状; 2.胡萝卜素的提取方法 【导学诱思】 1. 胡萝卜素是______ ,化学性质比较______ ,不溶于水,微溶于____ ,易溶于等有机溶剂。根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为a、B、丫三类。是其中最主要的组成成分。与B -胡萝卜素化学结构类似的胡萝卜素约有100多种,它们大多存在于蔬菜中。_________________ 等蔬菜是提取天然B -胡萝卜素的原料。 2. _________________________________________________________ 工业生产上,提取天然B -胡萝卜素的方法主要有三种,一是从 _________________ 中提取,二是从_______________________ 中获得,三是利用 ________________ 生产。本课题所提供的方法只能提取胡萝卜素的________________ ,若要获得B -胡萝卜素,还需要进一步的________ 。 3. 提取胡萝卜素的实验流程 有____________ 、 ____________ 、 __________ 、__________ 、____________ 、思考:影响萃取的因素有哪些? 【疑难点拨】1、萃取剂的选择 根据胡萝卜素易溶于有机溶剂的特点,可以考虑有机溶剂萃取的方法。 有机溶剂分为水溶性和水不溶性两种。乙醇和丙酮能够与水混溶,是水溶性有机溶剂;石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳等不能与水混溶,称为水不溶性有机溶剂。 萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有很高的溶点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水溶。最佳萃取剂为石油醚。 思考:(1)乙醇和丙酮能够用于胡萝卜素的萃取吗?为什么? 解答:胡萝卜素可溶于乙醇和丙酮,但它们是水溶性有机溶剂,因萃取中能与水混溶而影响萃取效果,所以不用它们作萃取剂。 (2)在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳这几种溶剂中,哪种最适宜用来提取胡萝卜素? 解答:在这五种溶剂中,石油醚的沸点最高,在加热萃取时不易挥发,所以石油醚最适宜用作萃取剂。 2、纸层析的操作 (1)层析时注意选择干净的滤纸,为了防止操作时对滤纸的污染,应尽量避免用手直接接触滤纸,可以带手套进行操作。 (2)点样时应注意点样斑点不能太大(直径应小于0.5 cm),如果用吹风机吹干,温度不宜过高,否则斑点会变黄。 (3)将点好样的滤纸卷成筒状,卷纸时注意滤纸两边不能相互接触,以免因毛细管现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快,溶剂前沿不齐,影响结果。

β—胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定

β—胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定 一、实验目的 1、学习从天然产物中提取有机化合物的方法。 2、学习用薄层层析法检验有机化合物的基本原理,点样,展开和计算Rf值的方法。 二.仪器和试剂 仪器三角瓶(50ml)、分液漏斗(150ml)、蒸馏瓶(50ml)、普通蒸馏装置(或减压蒸馏装置)、漏斗、色谱柱、硅胶薄层板、量筒、烧杯、层析缸。试剂胡萝卜、丙酮、石油醚(bp30~60℃)、硅胶(层析用,200~300 目)、无水硫酸钠、石油醚(bp60~90℃)、丙酮:石油醚(1:9)(V/V)。 三.实验方案 1、含类胡萝卜素石油醚溶液的制备 将新鲜胡萝卜洗净、擦干,切去尾部,切碎。称取碎鲜胡萝卜【1】10g 于小研钵中,研碎。碎胡萝卜移至50mL 三角烧瓶中,每次用丙酮10mL 萃取2 次,再用石油醚(bp30~60℃)萃取固体两次,每次10mL。把石油醚溶液加到丙酮液中。在分液漏斗中将混合液与50mL饱和氯化钠溶液【2】振荡,分去下层,用蒸馏水洗涤上层液两次,每次50mL,分去水,用无水硫酸钠干燥石油醚液(约1h),把混合液倒入50mL 圆底烧瓶中,热水浴加热蒸馏,除去溶剂,得固体。在制得的固体物加入3mL 石油醚(bp60~90℃)拌硅胶1g,在通风橱内抽干,得黄色硅胶颗粒,待上柱。 2、装柱和分离 取20cm*1cm 色谱柱一根,垂直装置,以50ml 三角烧瓶作洗脱液的接受器。用镊子取少许脱脂棉【3】放于干净的色谱柱底部,轻轻塞紧,再在脱脂绵上盖一层厚0.5cm 的海石砂(或用一张比柱内径略小的滤纸代替),关闭活塞,向柱内倒入石油醚(bp60-90℃)至约为柱高的3/4 处,打开活塞,控制流出速度为1 滴/s。通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入层析硅胶。用洗耳球轻轻敲打柱身,使填装紧密。当装填到3/4 时,再在上面加一层0.5cm 厚的海石砂,操作时一直保持上述流速,注意不能使液面低于砂子的上层。当液面流至离海石砂面1cm 时,立即从玻璃漏斗加入已制备好的含胡萝卜素的黄色硅胶,随后用0.5ml 石油醚洗下管壁的硅胶,如此连续2—3 次,直至洗净为止,然后在色谱柱上装上滴液漏斗,用石油醚(bp60-90℃)作洗脱剂进行洗脱,洗1 滴/s。当有一黄色的谱带分出,待黄色组分绝大部分洗出时,把洗脱剂换成1:9 丙酮一石油醚(bp60-90℃)混液作洗脱剂进行洗脱,控制流出速度如前(这混液洗脱剂有助于混合物中极性较大的组分移动),又可分出两个黄色组分。在45—90min 内,柱中物料将全部洗脱出来。观察这些物料通过柱子的移动情况。在三角烧瓶中收集3 份洗出液。用纸色谱、薄层色谱对各段洗出液进行色谱分析。 3.薄层色谱法

胡萝卜素的提取(最新整理)

1 课题3 胡萝卜素的提取 一.学习目标 1.能够记住有关胡萝卜素的基础知识和提取胡萝卜素的基本原理。(重点、难点) 2.会说出胡萝卜素的提取技术和纸层析的操作方法。(重点) 二.学法指导 联系生活中炒胡萝卜的做法,尝试设计实验提取胡萝卜素;学会纸层析的操作方法,领悟科学探究的方法。 三.课前热身 1.胡萝卜素是_____________结晶,化学性质比较_________,不溶于_________,微溶于_________,易溶于_____________等有机溶剂。根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类。 是其中最主要的组成成分。与β-胡萝卜素化学结构类似的胡萝卜素约有100多种,它们大多存在于蔬菜中。__________蔬菜是提取天然β-胡萝卜素的原料。 2.工业生产上,提取天然β-胡萝卜素的方法主要有三种,一是从 __________ 中提取,二是从 __________ 中获得,三是利用 __________ 生产。本课题所提供的方法只能提取胡萝卜素的 __________ ,若要获得β-胡萝卜素,还需要进一步的__________ 。 3.萃取胡萝卜素的有机溶剂应具有较高的________,能够_____________胡萝卜素,并且不与_________混溶。 4.萃取的效率主要取决于萃取剂的____________和_____________,同时还受到______________________、紧密程度、_________、萃取的__________和时间等条件的影响。 5.萃取过程的注意事项: (1)萃取过程应避免明火加热,采用_____________。 (2)为防止加热时有机溶剂_________,要在加热瓶口安装_______________________。 (3)萃取液的浓缩可直接使用__________________。 (4)浓缩前要进行_____________。 6.提取的胡萝卜素粗品的鉴定:_____________法。 原理:__________________与其他色素和杂质在层析液中的________不同,在滤纸中的________________不同。 步骤 :在 18 cm×30 cm 滤纸下端距底边 处做一基线,在基线上取A 、B 、C 、D 四点 A 、D 点上点 , B 、 C 点上点 (点样后滤纸卷成筒状) 干燥层析:吹干 ,放入 中层析(层析溶剂不能超过点样基线)对比观察:对比观察 点与 点的异同 写出如下装置中各数字对应的名称 ①___________②__________ ③___________④___________ ⑤___________⑥___________ 四.课堂探究

实验胡萝卜素的提取和分离.

实验胡萝卜素的提取和分离 摘要:本实验利用柱层析法提取和分离了胡萝卜素,并进行了一些实验改进,取得了良好的实验效果。 关键字:无水Na2SO4 研磨预处理 一、贵重仪器 旋转蒸发器 一台 UV-240型紫外-可见分光光度计 一台 电热干燥箱 一台 二、常规仪器 层析柱(20x700mm) 一根 铁架台 一套 锥形瓶 500ml 二个 50ml 五个 烧杯 500ml 二个 滴液漏斗 500ml

一个 量筒 500ml、50ml 各一个 玻璃棒 100cm 一个 20cm 二个 研钵 一套 滴管 二个 三、试剂 80-100目 柱层析硅胶 青岛海洋化工厂分厂 60-90℃ 石油醚 北京化工厂 AR 乙醇 北京化工厂 AR 乙酸乙脂 北京化工三厂 AR 无水Na2SO4 天津市塘沽邓中化工厂 CP

1% AgNO3水溶液(自制) pH试纸 胡萝卜(自备) 四、实验步骤 1、提取 2、柱层析 3、结构表征-胡萝卜素的UV分析 具体实验步骤见讲义2-3页有关内容。 五、实验记录及讨论 1、本实验在提取操作中进行了实验性尝试,在研磨过程中加入了3g的无水Na2SO4以增强研磨强度,有利于有效成分的提取。在选用提取液时未使用乙醇,而使用了15ml乙醚,10ml丙酮X2次,10ml石油醚X5次,采用在研钵中加提取剂,研磨,然后倾其上层液体抽滤。这样避免了将混合物全部倒入漏斗,造成抽滤难以进行的后果。 2、本实验中耗时最多的一步操作是硅胶的处理过程: 第一、硅胶的预处理,我们以浓盐酸浸泡硅胶14小时,然后用蒸馏水洗涤硅胶4次后,将起进行减压抽滤,后不断加蒸馏水冲洗。在1小时之后,抽滤的水呈中性,但仍然含有氯离子。经过4小时不断的冲洗才使得抽滤液中基本不含氯离子。晾干一周后,在110℃烘箱中活化2小时。 第二、活化后的硅胶加石油醚浸泡并搅拌均匀。在装柱时,宜使用口径较大的玻璃漏斗置于层析柱上部,注入1/2高的石油醚,打开下部活塞,然后尽量均匀地将硅胶倾入漏斗,这样可以防止层析柱中形成断层(这一步是实验的关键步骤)。 3、柱层析过程中得到了二个显色带,第一个带显橙黄色,第二个带显淡黄色。从加入洗脱剂到收集完第一个显色带耗时90分钟,使用洗脱剂(石油醚/乙酸乙脂=2/1V/V)120ml,收集到约50ml。然后加入95%的乙醇进行洗脱,耗时30分钟收集到了第二个显色带,约有30ml。由实验可知以极性大的洗脱剂洗脱速度较快,而且收集的显色带较集中。如果在层析柱中有气泡或断层将影响分离

人教版高二生物选修一学案:6.2胡萝卜素的提取

课题2 胡萝卜素的提取 学习目标: 1.了解有关胡萝卜素的基础知识和提取胡萝卜素的基本原理。 2.初步学会胡萝卜素的提取技术和纸层析法的操作方法。 [预习案] 阅读课本P77-79完成《优化方案》P65-66预习导学·思维启动 [问题导学] 阅读《优化方案》P66-67完成主题1和主题2,思考如下问题。 1.提取胡萝卜素能否用乙醇或丙酮作为萃取剂?为什么? 2.为什么用于提取胡萝卜素的萃取剂要有较高的沸点? 3.影响萃取效率的因素除了萃取剂的性质和使用量之外,还有哪些因素? 4.萃取胡萝卜素时为什么要避免明火加热? 5.鉴定胡萝卜素采用的纸层析法,该方法中采用哪种液体作为层析液? 6.如果提取的胡萝卜素中含有杂质,则层析的结果会是怎样的? 7.如何根据层析结果判断胡萝卜素提取实验是否成功? [典题训练] 1.如图为提取胡萝卜素的装置图,分析下图,完成下列问题。 (1)萃取剂可分为________和________两种,乙醇和丙酮属于 ________萃取剂。在提取β-胡萝卜素时,常采用的原料是 ________,因为其不仅________,而且________________。 (2)萃取的效率主要取决于____________,同时也受到 _______________等条件的影响。 (3)萃取过程中,第一步需______________,以提高效率。因为___________________,所以应避免明火加热,而采用水浴加热的方法。通过加热处理,β-胡萝卜素溶解在萃取剂中,再经________得到萃取液,经过__________后,可________得到纯净的β-胡萝卜素。 2.下图为胡萝卜素粗品鉴定装置示意图,请据图回答下列问题。

类胡萝卜素的提取动力学研究实验设计

类胡萝卜素提取动力学的研究实验方案(常规组) 一、实验目的 主要运用溶剂提取法方法对类胡萝卜素进行提取动力学研究。对β-胡萝卜素的定性和定量进行测定,并了解类胡萝卜素的理化性质(特别是光谱性质和色谱性质)。 二、实验设计 2.1原料与试剂 胡萝卜干粉(4 kg)、胡萝卜素标准品(1.0 g)、(95%和无水)乙醇(10 L)、无水甲醇、石油醚(沸程30~60℃、60~90℃) 、丙酮、乙醚、乙酯乙酯、硫酸、盐酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、柠檬酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、硅胶层析板和氧化铝层析板(5×10、10×10和10×20)、定性滤纸、定量滤纸、高纯氮气、0.1%酚酞、0.1%甲基红、0.1%溴甲酚绿、pH试纸、0.1μm和1μm滤膜。注:试剂均为分析纯及以上规格。 2.2仪器设备 250mL成套索氏提取器;数显恒温水浴锅;分析天平;紫外可见分光光度计;烘箱;酸度计;旋光仪;偏光仪;红外光谱仪;高效液相色谱;薄层层析扫描仪(或层析用紫外线分析仪);旋转蒸发器+真空泵;成套抽滤器(含砂芯片漏斗);电化学分析仪;层析缸;点样器;喷雾器;50~100mm毛细管;烧杯;量筒;酸碱滴定管;电加热器 2.3提取方法 溶剂提取法将胡萝卜经过风干筛选后,用水出去杂质,防止阴凉处晾干粉碎待用。为防止叶绿素对胡萝卜素的影响,首先须通过皂化出去叶绿素。皂化完用紫外分光光度计测定得到的类胡萝卜素提取液450nm吸光度,计算类胡萝卜素的得率。 2.4测定方法 定性测定最大吸收波长确定将配置好的25ug/ml的类胡萝卜素的标准液置于比色皿中,以乙醚为参比液,用紫外分光光度计与400-600nm范围内扫描类胡萝卜素标准液,波长为450nm处有最大吸收,因此最大吸收波长定位450nm。 定量测定类胡萝卜素含量的计算将待测的类胡萝卜素提取液定溶,以乙醚为空白,在波长450nm处,1.0cm比色皿测定其吸光值,并求得类胡萝卜素浓度,计算类胡萝卜素的含量。胡萝卜干粉中类胡萝卜素的含量与浓度的关系式为:X=CVK/M 式中:X为胡萝卜干粉中雷胡萝卜素含量; C为类胡萝卜素浓度; V为提取液总体积; K为稀释因子; M为胡萝卜干粉的质量。 2.5类胡萝卜素的理化性质 光谱性质运用红外光谱仪进行分析。绝大部分类胡萝卜素的可见吸收光谱有三个最大峰,最大吸收峰的位置受测定时所用溶剂的影响,但溶剂固定时,不同类胡萝卜素的吸收光谱特性则取决于其发光团性质或分子环境,而吸收强度则

2019精品教育胡萝卜素的提取(教案)

胡萝卜素的提取教案 ★课题目标 (一)知识与技能 1、了解有关胡萝卜素的基础知识 2、掌握提取胡萝卜素的基本原理 (二)过程与方法 1、掌握萃取法提取胡萝卜素的技术 2、学会纸层析的操作方法 (三)情感、态度与价值观 领悟科学探究的方法,形成严谨、创新以及勇于实践的科学态度 ★课题重点 胡萝卜素的提取,纸层析的操作 ★课题难点 胡萝卜素的提取 ★教学方法 启发式教学 ★教学工具 多媒体课件 ★教学过程 (一)引入新课 天然胡萝卜素是国际癌症协会研究中心、美国癌学会推崇的防癌抗癌食品、保健品和药品。还可医治维生素A缺乏症、皮肤病、抗光敏症等疾病。科学研究证明,胡萝卜素能防治或延缓癌症,是具有广泛免疫功能的药物和不可缺少的饮料添加剂。胡萝卜素还可以在人体内转化成维生素A,因此可以用来治疗因缺乏维生素A引起的疾病。那么,对人体如此重要的胡萝卜素是如何提取的呢?上一节课我们学习了提取植物芳香油的原理、方法和提取技术,这一节我们再来学习萃取法提取胡萝卜素的原理、方法和提取技术。 (二)进行新课 1.基础知识(学生阅读) 1.1胡萝卜素的性质:橘黄色晶体,化学性质稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等。 1.2胡萝卜素的来源:植物、岩藻、微生物发酵。 岩藻提取法:通过大面积培养盐生杜氏藻提取β-胡萝卜素。目前我国相继形成了内蒙古吉兰泰盐场生物工程公司、天津兰太生物工程公司等少数几家养殖盐藻生产天然胡萝卜素的企业。盐藻提取法受外界环境影响特别大,要有盐湖场,需要长时期的高温和强烈光照,作为培养的海水要求具有10%以上的高盐浓度。 微生物发酵法:微生物发酵法是指利用微生物培养技术,通过微生物的培养,在其体内合成β-胡萝卜素,然后自微生物体内分离得到β-胡萝卜素的一种方

相关文档
相关文档 最新文档