生物化学复习提要含答案
生物化学复习提要（部分）
出品人：周贝贝李秦王洪亮游秋实友情助攻：范*阳
伙食赞助：蹲哥
此份答案仅供参考，如有错误，希望大家批评指正！
简答题
1.如何测定蛋白质一级结构？
改进的Sanger法
阶段一：测序前的准备工作
(1)确定蛋白质多肽链的数目
如果N-末端残基的摩尔数是蛋白质的2倍，则有2条肽链
(2)打开二硫键，拆分蛋白质分子的多肽链
用β-巯基乙醇还原二硫键，过甲酸氧化
(3)确定各多肽链的N-末端和C-末端及氨基酸组成
C-末端可用羧肽酶进行测定
肽链经强酸碱、完全水解后，用氨基酸自动分析仪分析
阶段二：多肽链的测序
(1).用两种不同的方法，特异性水解多肽链，产生适合测序大小的肽段：用相应的酶或化学试剂
(2).确定每一肽段的氨基酸序列：采用Edman降解法
阶段三：氨基酸顺序的拼接
利用重叠拼接法将两套不同肽段的氨基酸序列拼接成完整肽链氨基酸顺序
2. 肽键及肽平面的结构特征，多肽的性质及生物功能。
（1）一个氨基酸的羧基和另一个氨基酸的氨基脱水缩合形成的共价连接成为肽键。肽键具有大约40%的双键的特性，而且肽键所连接的原子处于同一平面；对于同一平面肽键，实际上存在着反式和顺式，反式构型中两个Cα处于肽键两侧，顺式构型中两个Cα处于肽键同侧。蛋白质中几乎所有肽键都是反式。
（2）组成肽键的四个原子和与之相连的两个α碳原子都处于同一个平面内，该平面称为肽平面。由于具有双键特性的肽键不能自由旋转，所以肽平面是一个刚性平面。
（3）多肽的性质：肽优于氨基酸，一是较氨基酸吸收快速；二是以完整的形式被机体吸收；三是主动吸收（氨基酸属被动吸收）；四是低耗，与氨基酸比较，肽吸收具有低耗或不需消耗能量的特点五是肽吸收较氨基酸，具有不饱和的特点；六是氨基酸只有20种，功能可数，而肽以氨基酸为底物，可合成上百上千种
多肽比完全游离氨基酸更易更快地被机体吸收利用，且蛋白质以多肽的形式被吸收。
4）生物功能：不仅提供机体生长、发育、新陈代谢等过程的营养需要，许多肽类物质对机体从细胞、组织到器官、系统，以致整体行为等均起到重要调节、平衡和协调作用，它们广泛存在于动、植物体内，担负着信息传递和功能调控作用。
3. 蛋白质三维结构的层次、特征及作用力。分子病和构象病分别指的是什么？
（1）蛋白质结构分为4个层次：一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。一级结构指的是蛋白质中通过肽键连接的氨基酸残基的排列顺序；二级结构指的是蛋白质分子中局部氨基酸残基有规律排列的构象；三级结构指的是蛋白质分子处于天然折叠状态下的三维构象；四级结构指的是具有三级结构的多肽链之间以适当方式聚合所呈现出的三维结构。
（2）稳定蛋白质结构的作用力
a.氢键：二级结构
b.疏水作用：形成球蛋白的核心
c.范德华力：稳定紧密堆积的基团和原子
d.离子键：三、四级结构
e.配位键：与金属离子的结合
另外二硫键也参与维系三级结构
(3) 分子病：由于基因突变导致机体合成的蛋白质一级结构发生改变，从而引起生物功能的障碍，而产生的先天性疾病。
（4）构象病：蛋白质的折叠发生错误，构象发生改变，蛋白质的功能受到影响从而产生的疾病。
4. 血红蛋白的别构效应，波尔效应，协同效应分别是什么，有什么生理意义？
（1）别构效应：一个配体与蛋白一个部位（或亚基）的结合影响另一个配体与该蛋白另一个部位（或亚基）结合的现象
生理意义：降低血红蛋白的氧亲和力，加大血红蛋白的卸氧量。
（2）波尔效应：增加CO2的浓度、降低pH能降低Hb对O2的亲和力，促进O2的释放。
波尔效应的生理意义：①维持血液中pH平衡：代谢旺盛的组织中CO2高，H+浓度增加，
促进O2的释放；而O2的释放又促进Hb与H+和CO2结合，H+浓度降低。②促进CO2的释放：在肺部，PO2 高，Hb与O2结合，促进CO2释放，而CO2的呼出又有利于Hb结合O2
（3）协同效应：一个寡聚体蛋白质的一个亚基与其配体结合后，影响其他亚基与配体结合能力的现象。促进作用称为正协同效应；抑制作用称为负协同效应。
生理意义：协同效应可增加血红蛋白在肌肉中的卸氧量，使它能有效地输送氧气。
5. 蛋白质分离纯化的方法有哪些，其分离的原理分别是什么？
（1）层析法/色谱法
a离子交换层析：利用各蛋白质的净电荷不同进行分离
b凝胶过滤层析：利用各蛋白质分子大小不同分离
c亲和层析：利用蛋白质与配体的亲和力不同进行分离
（2）电泳：带电颗粒在电场中移动的现象。根据蛋白质分子大小和所带净电荷的不同，利用其在电场中的迁移率差异进行分离。
a.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE
b.双向电泳：是一种将等电聚焦电泳（IFE）与SDS-PAGE结合的分辨力更高的一种电泳
6. 双向电泳的基本原理。
双向电泳是一种将等电聚焦电泳（IFE）与SDS-PAGE结合的分辨力更高的一种电泳。
（1）等电聚焦(IEF)电泳：使等电点不同的蛋白质得到分离
（2）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) ：使分子量不同的蛋白质得到分离
7.米氏常数Km及其意义。酶的抑制作用的类型，抑制剂的种类、特点。
（1）米氏常数Km是酶促反应速度v为最大酶促反应速度值一半时的底物浓度。
（2）米氏常数的意义：
①Km是酶在一定条件下的特征物理常数，与酶的性质有关。通过测定Km的数值，可鉴别酶。
②不同的酶有不同的Km值；对于同一个酶来说，每一个底物都有一个相应的Km值。
③一般情况下，1/Km可以近似地表示酶对底物的亲和力大小，1/Km愈大，表明亲和力愈大。（根据Km可判断酶的天然底物，Km最小的底物称该酶的最适底物或天然底物）
（3）酶的抑制作用分为不可逆抑制和可逆抑制。可逆抑制作用又可分为竞争性抑制作用、反竞争性抑制作用和非竞争性抑制作用。
（4）根据抑制剂与酶作用方式的不同，将抑制剂分为可逆抑制剂和不可逆抑制剂。可逆抑制剂通过非共价键与酶结合；不可逆抑制剂通过共价键与酶作用。其区别在于，可逆抑制剂可以通过透析或凝胶过滤从酶溶液中除去，使酶恢复作用，而不可逆抑制剂不能。
①不可逆抑制剂：很多为剧毒物质，如重金属、有机磷、有机汞、有机砷、氰化物等
②可逆抑制剂：
a、竞争性抑制剂，抑制剂与底物竞争性结合酶反应中心，使Km增大，而Vmax不变
b、非竞争性抑制剂，酶与抑制剂结合后还能与底物结合，但活性降低，使Vmax减小，而Km不变
c、反竞争性抑制剂，酶只能与底物结合后才能与抑制剂结合，Vmax与Km都减小
8.什么是酶的活性部位？酶催化作用的机制及影响酶活性的因素。
（1）活性中心（活性部位）：酶分子中结合底物并起催化作用的少数氨基酸残基，包括底物结合部位、催化部位
（2）机制：酶与底物结合时，由于酶的变形（诱导契合）或底物变形使二者相互适合，结合成中间产物，在酶分子的非极性区域内，由于酶与底物的邻近、定向，使二者可以通过共价催化、酸碱催化方式进行催化，从而大大降低反应所需的活化能，使酶促反应迅速进行。
（3）影响酶反应速度的因素有：温度、pH值、激活剂、抑制剂等
9.如何看待RNA功能的多样性？
1、控制蛋白质的合成
2、生物催化与其他细胞持家功能
3、RNA转录后加工与修饰
4、基因表达与细胞功能的调节
5、遗传信息的处理与进化
RNA主要是负责DNA遗传信息的翻译和表达，分子量要比DNA小得多。
mRNA (信使RNA):它的功能是将DNA的遗传信息传递到蛋白质合成基地–核糖核蛋白体。
tRNA(转移RNA):它在蛋白质生物合成中起翻译氨基酸信息，并将相应的氨基酸转运到核糖核蛋白体的作用。
10.真核生物新和成RNA的加工过程。
1、“戴帽”：5 ˊ端添加mGpppNm结构
2、剪接：去除“内含子”、连接“外显子”
内含子(intron)：DNA分子中的非编码序列，通常只被转录但不被翻译。
外显子（exon）：DNA分子中的编码序列，通常既被转录也被翻译
3、化学修饰：甲基化
4、“加尾”：3ˊ端添加poly A结构
加尾信号：AAUAA
11.简述电子传递链的构成和作用。
构成：复合物Ｉ——NADH-CoQ 还原酶/ (NADH脱氢酶) 辅助因子：FMN，Fe-S 复合物II--琥珀酸-CoQ 还原酶/ (琥珀酸脱氢酶) 辅助因子：FAD，Fe-S
复合物III---CoQ-细胞色素c还原酶辅助因子：Fe-S，血红素b,c1
复合物IV--细胞色素c氧化酶辅助因子：血红素a,a3，Cu离子
作用：合成A TP
12.痛风的发病原因和别嘌呤醇用于治疗痛风的机理。
痛风定义：由于尿酸生产过量或者排泄不充分造成堆积引起的一种疾病，常见的症状是突发的极为痛苦的关节炎。
发病原因：1）次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶活性的部分缺陷，结果使嘌呤回收下降，使得嘌呤分解生成更多的尿酸。
2）嘌呤生物合成调控的缺陷。
别嘌呤醇用于治疗痛风的机理：在细胞内别嘌呤醇在黄嘌呤氧化酶催化下转换为别黄嘌呤，别黄嘌呤是黄嘌呤氧化酶的一个很强的抑制剂，与酶紧密结合使酶失活，防止尿酸形
成！
13.氧化磷酸化、底物水平磷酸化的区别。
底物水平磷酸化：解代谢过程中，底物分子因脱氢、脱水等作用，能量在分子内部重排形成高能磷酸酯键，并转移给ADP形成A TP。
氧化磷酸化：代谢物脱下的氢原子经电子传递链传递给氧过程中释放的能量促使ADP磷酸化生成A TP。
区别：底物水平磷酸化中A TP的形成直接与一个代谢中间高能磷酸化合物上的磷酸集团的转移相偶联，不需要氧分子参与。
14.Watson和Crick解析的DNA双螺旋的结构特点。
1）DNA分子由两条DNA单链（反向平行。右手螺旋）组成。
2）DNA的双螺旋结构是分子中两条DNA单链之间基团相互识别和作用(碱基互补氢键、堆积力（范德华力）)的结果。
3）双螺旋结构是DNA二级结构的最基本形式。
15.参与原核生物染色体复制起始的酶和辅助因子有哪些，各起何作用？
①Dna A：识别起点序列，在起点特异位置解开双链；起始因子
②Dna B 解开DNA双链5-3解旋；
③Dna C：帮助Dna B结合于双链；
Dnat：帮c
dna连接酶：冈崎片段连接
⑤引物合成酶（Dna G）：合成RNA引物；
⑥单链DNA结合蛋白（SSB）：结合单链DNA
dna聚合酶3全酶：dna合成（链延伸）
⑧DNA回旋酶（拓扑异构酶②）：释放DNA解链过程中产生的扭曲张力（引入负，解超旋）
dna聚合酶1：切除rna引入，填充dna片段
10tus：终止
16.真核生物染色体DNA的端粒有何功能，它是如何合成的？
（1）定义：真核细胞染色体末端的特殊结构，由DNA及端粒结合蛋白组成。
作用：第一，保护染色体不被核酸酶降解；
第二，防止染色体相互融合；
第三，为端粒酶提供底物，解决DNA复制的末端隐缩，保证染色体的完全复制；（2）合成过程：端粒是由端粒酶合成的，端粒酶首先通过本身的RNA与端粒重复序列互补作用结合到端粒DNA上，然后以RNA为模板使端粒DNA3’末端延伸，在完成一段DNA合成后，端粒酶再移动到延伸的新的3’末端，再进行端粒DNA3’末端的延伸反应，由于不断移位、延伸，可以添加许多端粒重复序列。以新合成的3’末端序列作为模板，由细胞的常规DNA复制“机器”（先合成RNA，再合成DNA序列）合成互补链的5’末端DNA序列，达到互补链5’末端的原长度。
17.真核DNA聚合酶的种类及功能？原核DNA聚合酶的种类及功能？
真核DNA聚合酶α（定位于胞核，参与复制引发，不具5'－3'外切酶活性）
β（定位于核内，参与修复，不具5'－3'外切酶活性）
γ（定位于线粒体，参与线粒体复制，不具5'－3'，有3'－5'外切活性）
δ（定位核，参与复制，具有3'－5'，不具5'－3'外切活性）
ε（定位于核，参与损伤修复，具有3'－5'，不具5'－3'外切活性）。
DNA聚合酶I（Pol I）：由基因polA编码，由928个氨基酸组成，分子量103.1kDa，结构类似球
状，直径约650nm，每个细胞约有400个分子。
DNA聚合酶II（Pol II）：在DNA稳定期的损伤修复中起作用。
DNA聚合酶III（Pol III）：在大肠杆菌DNA复制过程中起主要作用。
DNA聚合酶IV（Pol IV）：与DNA聚合酶II一起负责稳定期的损伤修复。
DNA聚合酶V（Pol V）：参与SOS修复。
18.遗传密码有哪些主要特性？
1）所有密码子都是有意义的。
2）密码子存在简并性。几种密码子编码一种氨基酸的现象称为密码子的简并性
3）序列类似的密码子往往表示同样的或化学性质类似的氨基酸。
4）变偶性（摇摆性）。密码子中第三位碱基与反密码子第一位碱基的配对有时不一定完全遵循A-U、G-C的原则，Crick把这种情况称为变偶性。
5）通用性和变异性：密码子在不同物种间几乎是完全通用的。
6）方向性：从mRNA的5’到3’
7）连读性。编码一个肽链的所有密码子是一个接着一个地线形排列，密码子之间既不重叠也不间隔，从起始密码子到终止密码子（不包括终止子）构成一个完整的读码框架，又称开放阅读框架（ORF）。
19.大肠杆菌中多肽的合成主要有哪些步骤？
？？
20.什么是逆转录酶？它有哪些功能？
逆转录酶是一类存在于部分RNA病毒中具有逆转录活性、能以单链RNA为模板合成DNA的酶。
由逆转录酶催化逆转录合成的DNA称为互补DNA（cDNA）。通常情况下，细胞内的转录是以DNA为模板合成RNA的，所得RNA为信使RNA（mRNA）供蛋白质合成作模板用。而在部分RNA 病毒中，要实现自身的扩增，必须具有DNA，因此先由RNA逆转录合成cDNA再由cDNA转录出RNA。逆转录酶可用于RT-PCR，将RNA转变为DNA后扩增，以获得RNA的序列。
问答题
1. 蛋白质和核酸都是生物大分子，分别举例说明其结构和功能的关系。
rRNA的结构：有大量的茎环（发夹）结构，形成核糖体的刚性骨架。
功能：（1）蛋白质合成的施工平台（骨架）
（2）催化肽键形成的转移酶活性存在于23SrRNA上。有人小心的去掉细菌核糖体的蛋白质组分，保持rRNA的相对完整性，发现蛋白质的合成仍可进行。
（3）参与tRNA与mRNA的结合可能的情况是：mRNA先识别16s rRNA的特定序列并结合固定下来,然后tRNA再识别rRNA的特定部位并固到，最后tRNA的反密码子才能与
mRNA密码子配对。
（4）在大小亚基的聚合中起重要作用
（5）在翻译的校正和翻译的调控方面有重要功能可结合调控因子
核糖体蛋白的结构：大多数核糖体蛋白呈纤维状（可能起骨架作用），少数呈球状（可能起生物功能）。
功能：(1)维持核糖体的结构(2)新发现：一些核糖体蛋白具有DNA结合功能（Helix—turn—Helix 模块）；还有些真核核糖体蛋白具有DNA修复功能
2. 糖酵解及柠檬酸循环的过程及其调节酶。
糖酵解
活化阶段——磷酸己糖的生成
1.活化阶段由3步反应：
⑴葡萄糖磷酸化生成6-磷酸葡萄糖
⑵G-6-P异构为6-磷酸果糖
⑶F-6-P再磷酸化为1,6-二磷酸果糖
己糖激酶/葡萄糖激酶（第一个限速酶）, 磷酸己糖异构酶, 磷酸果糖激酶-1（第二个限速酶）
2.裂解阶段——磷酸丙糖的生成
⑷F-1,6-P裂解为3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮
⑸磷酸二羟丙酮异构为3-磷酸甘油醛。
醛缩酶, 磷酸丙糖异构酶
3.放能阶段——丙酮酸的生成
⑹3-磷酸甘油醛脱氢并磷酸化生成1,3-二磷酸甘油酸
⑺1,3-二磷酸甘油酸脱磷酸，将其交给ADP生成A TP ；
⑻3-磷酸甘油酸异构为2-磷酸甘油酸；
⑼2-磷酸甘油酸脱水生成磷酸烯醇式丙酮酸
⑽磷酸烯醇式丙酮酸将高能磷酸基交给ADP生成A TP
3-磷酸甘油醛脱氢酶,GAPDH, 磷酸甘油酸激酶, 磷酸甘油酸变位酶，烯醇化酶，丙酮酸激酶
柠檬酸循环
见P318
3. 戊糖磷酸途径的过程及其生物学意义。
第一阶段（氧化阶段）：6-磷酸葡萄糖经脱氢、水化、氧化脱羧生成5-磷酸核酮糖、NADPH和CO2 第二阶段（非氧化阶段）：5-磷酸核酮糖经一系列基团转移反应生成3-磷酸甘油醛和6-磷酸果糖；意义：1. 是体内生成NADPH的主要代谢途径
2. 产生磷酸戊糖，参与核酸代谢
3. 提供多种C3~C7的糖，为其他物质合成提供碳架来源
4. 糖酵解和葡糖异生途径的生理意义及其关系。
糖酵解
1.是生物体对不良环境条件的一种适应能力，在无氧和缺氧条件下迅速获能，作为糖分解供能的
补充途径
2.是红细胞和某些组织细胞的主要供能方式；
3.在工业、农业生产中具有重要的实践意义
葡糖异生途径
1．在饥饿情况下维持血糖浓度的相对恒定，对脑和红细胞等依靠血糖供能的组织尤为重要。2．补充肝糖原：进食后，大部分葡萄糖先在肝外细胞中分解为乳酸或丙酮酸等三碳化合物，再进入肝细胞异生为糖原。
3．糖异生有利于体内氨基酸和脂肪的氧化分解供能
5. 简述化学渗透学说。有哪些证据支持化学渗透学说？
1.该学说认为氧化呼吸链存在于线粒体内膜上，当进行电子传递时，H 通过质子泵的作用被排到线粒体内膜外侧（膜间腔），从而在内膜两侧形成跨膜的pH梯度和跨膜电位梯度（二者共同构成电化学梯度，即质子动力势）。
2.当质子顺浓度梯度回流时，这种形式的“势能”（H 梯度渗透能）可以被位于线粒体内膜上的A TP 合酶利用，用于合成A TP。
实验证据
完整的线粒体内膜是氧化磷酸化必须的
线粒体内膜对H 等离子具不通透性
电子传递时H 由内向外泵出
在A TP形成时, H 由外向内流动
解偶联剂解除H 不通透性，则A TP合成解除
6. 脂肪酸β-氧化的过程及能量生成。
（1）脂酰CoA在线粒体的基质中进行氧化分解。进行一次β-氧化，需要经过氧化、水合、氧化和硫解四步反应，反应产物是比原来的脂酰CoA减少了2 个碳的新的脂酰CoA。如此反复进行，直至脂酰CoA全部变成乙酰CoA。
（2）①脂肪酸β-氧化时仅需活化一次，消耗1个A TP的两个高能键
②β-氧化包括脱氢、水化、脱氢、硫解4个重复步骤，每循环一次产生1个FADH2、1个
NADH、1 个乙酰-CoA，经电子链传递和氧化磷酸化产生1.5+2.5+10=14A TP
7. 动物体内脂肪酸合酶的组成及其催化的反应。
（1）脂肪酸合酶复合体：胞液中合成脂肪酸的多酶复合体由乙酰转移酶、丙二酸单酰转移酶、β-酮脂酰合酶、β-酮脂酰还原酶、水化酶、烯酰还原酶、硫酯酶，共计7种酶和酰基载体蛋白组成。（2）见P390
8. 生物体中氨基酸分解产生的氨的排泄方式有哪些？
（1）重新生成氨基酸
（2）谷氨酰胺和天冬酰胺的生成
（3）尿素的生成——尿素循环
（4）合成其他含N物质
9. 短跑运动员坚持吃低糖、高蛋白的食物一段时间后能否提高其成绩？为什么?
不会有效。
短跑运动员在快速冲刺过程中对高能量的需求几乎完全由糖酵解提供，这时需要糖原分解以补充葡萄糖进入糖酵解。故此应该吃高糖食物，利于糖原贮存，而蛋白质降解的氨基酸主要通过TCA 进入代谢，难以产生大量的糖原
10. 大肠杆菌乳糖操纵子的作用机制。
(1)乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列O，一个启动子P和一个调节基因I。
(2)阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时，I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶；有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以，乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。
(3)CAP的正性调节：在启动子上游有CAP结合位点，当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时，cAMP浓度升高，与CAP结合，使CAP发生变构，CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点，激活RNA聚合酶活性，促进结构基因转录，调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录，对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。
(4)协调调节：乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制，互相协调、互相制约。
生物化学复习资料
第二章糖类化学 1.糖的概念：糖类物质是多羟基的醇类或醛累化合物及其他们的衍生物或聚合 物。 2.糖的种类可以分为：单糖寡糖多糖结合唐糖的衍生物。 3.根据旋光性分类，可以将自然界中的糖分为D型和L型。规定，已距醛基或 酮基最远的的不对称性碳原子为准，羟基在右的为D型，羟基在左的为L型. 4.还原性二糖：由一分子糖的的半缩醛羟基与另一分子的糖的醇羟基缩合而 成。 5.非还原性二糖：由二分子糖的半缩醛羟基脱水而成。 6.淀粉、糖原、和纤维素的基本结构单元是葡萄糖。 7.凡是能被费林试剂还原的糖都称为还原糖。 8.糖类的生物学功能：提供能量，细胞间的碳骨架，细胞间的的骨架，细胞间 识别和生物分子识别。 第三章蛋白质 1.蛋白质的基本结构单元是氨基酸。 2.大多数蛋白质的含氮量接近16% 3.蛋白质的一级结构是多肽链中氨基酸的排列顺序。 4.氨基酸：分子中含有氨基的羧酸称为氨基酸。 5.氨基酸为两性电解质，当PH等于PI时，氨基酸为兼性离子。 6.肽键是蛋白质中的主要共价键，也称为主键。 7.必需氨基酸：人体中不能合成的，必须从食物中摄取的氨基酸称为必须氨基 酸。 8.必需氨基酸包括：赖氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、 色氨酸、苯丙氨酸。 9.极中性氨基酸包括：丝氨酸、酪氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、天冬 酰胺。 10.酸性氨基酸包括：天冬氨酸、谷氨酸 11.碱性氨基酸包括：组氨酸、赖氨酸、精氨酸 12.氨基酸的等电点（PI）：在一定PH值得溶液中，氨基酸所带的正负电荷相等， 净电荷为零，此时溶液的PH值称为氨基酸的等电点。（当PH＞PI,氨基酸带净负电荷，在电场中向正极移动；当PH＜PI，氨基酸带净正电荷，在电场中
生化实验操作考核要点(新)
【实验操作考核要点】 一、目的要求 1．掌握组织样品的制备方法，了解其注意事项。 2．了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项，掌握其操作方法。 3．正确操作使用刻度吸管和可调微量移液器。 4．熟练运用溶液混匀的各种方法（视具体情况，采用合适的混匀方法）。 5．正确掌握溶液转移的操作。 6．正确操作使用分光光度计。 二、操作考核内容 按百分制计。 1．吸量管操作（20分）； 2．可调式微量移液器操作（20分）； 3．溶液混匀操作（视具体情况，采用合适的混匀方法）（15分）； 4．溶液转移操作（10分）； 5．分光光度计比色操作（25分）。 6．整体表现（10分）。 三、操作考核标准 （一）吸量管操作（20分，每项操作5分） 1．执管 要求右手拿吸量管，左手拿橡皮球，只能用食指而不能用拇指按压吸量管上口来调节吸取液量的刻度；吸液、排液整个操作过程吸量管应始终保持垂直。 2．坐姿 要求腰、背保持竖直，看刻度时眼睛保持平视。 3．吸取溶液 吸量管插入液面深度约0.5cm，不能一插到底，也不能插入过浅而吸进空气致使溶液进入橡皮球内；调控吸量管吸取液量的刻度时，吸量管尖应离开液面靠在容器内壁上。 4．排出液体
吸量管尖应靠上受纳容器内壁，让管内溶液自然流出。不能用橡皮球吹压，而且在流净后吸量管尖停靠受纳容器内壁至少3秒。 （二）可调式微量移液器操作（20分，每项操作5分） 1．设定容量值 转动加样器的调节旋钮，反时针方向转动旋钮，可提高设定取液量。顺时针方向转动旋钮，可降低设定取液量。在调整设定移液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注意使取液器显示的数值不超过其可调范围。 2．吸液 （1）选择合适的吸头安放在取液套筒上，稍加扭转压紧吸嘴使之与套筒之间无空气间隙； （2）把按钮压至第一停点，垂直握持加样器,使吸头浸入液面下2~3毫米处,然后缓慢平稳地松开按钮，吸入液体，等一秒钟，然后将吸头提离液面，贴壁停留2-3秒，使管尖外侧的液滴滑落。 3．放液 （1）将吸头口贴到容器内壁底部并保持100°~40°倾斜； （2）平稳地把按钮压到第一停点，等一秒钟后再把按钮压到第二停点以排出剩余液体； （3）压住按钮，同时提起加样器，使吸头贴容器壁擦过，再松开按钮。按吸头弹射器除去吸头。 4．压放按钮时保持平稳；加样器不得倒转；吸头中有液体时不可将加样器平放。取液器吸嘴为一次性使用。实验完毕，将取液器读数调至最大量程值，竖立放于支架上。 （三）溶液的混匀（操作流程中下划实线的三处，每项操作5分，共15分）1．肝糖原的提取与鉴定操作中，肝匀浆上清液中加5ml 95%乙醇后的混匀最好用倾倒混匀，也可用滴管或吸量管吸、吹混匀，或用玻璃棒搅拌混匀。 2．肝糖原定量测定中，肝组织消化液沸水浴后全部转入100 ml容量瓶，加水至刻线后的混匀应采用倒转混匀。 3．肝糖原定量测定中，加蒽酮溶液后的混匀，可将试管倾斜约45o再作旋转混匀。因蒽酮溶液（浓硫酸配制）比重大于样品水溶液很多，一加入便沉于管
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《生物化学》题库 习题一参考答案 一、填空题 1蛋白质中的苯丙氨酸、酪氨酸和__色氨酸__3种氨基酸具有紫外吸收特性,因而使蛋白质在 280nm处有最大吸收值。 2蛋白质的二级结构最基本的有两种类型,它们是_α-螺旋结构__和___β-折叠结构__。前者的螺距为 0.54nm,每圈螺旋含_3.6__个氨基酸残基,每个氨基酸残基沿轴上升高度为__0.15nm____。天然 蛋白质中的该结构大都属于右手螺旋。 3氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成__蓝紫色____色化合物,而脯氨酸与茚三酮反应 生成黄色化合物。 4当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以两性离子离子形式存在,当pH>pI时,氨基酸以负 离子形式存在。 5维持DNA双螺旋结构的因素有:碱基堆积力;氢键;离子键 6酶的活性中心包括结合部位和催化部位两个功能部位,其中前者直接与底物结合,决定酶的 专一性,后者是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。 72个H+或e经过细胞内的NADH和FADH2呼吸链时,各产生3个和2个ATP。 81分子葡萄糖转化为2分子乳酸净生成______2________分子ATP。 糖酵解过程中有3个不可逆的酶促反应,这些酶是己糖激酶;果糖磷酸激酶;丙酮酸激酶9。 10大肠杆菌RNA聚合酶全酶由σββα'2组成;核心酶的组成是'2ββα。参
与识别起始信号的是σ因子。 11按溶解性将维生素分为水溶性和脂溶性性维生素,其中前者主要包括V B1、V B2、V B6、 V B12、V C,后者主要包括V A、V D、V E、V K(每种类型至少写出三种维生素。) 12蛋白质的生物合成是以mRNA作为模板,tRNA作为运输氨基酸的工具,蛋白质合 成的场所是 核糖体。 13细胞内参与合成嘧啶碱基的氨基酸有:天冬氨酸和谷氨酰胺。 14、原核生物蛋白质合成的延伸阶段,氨基酸是以氨酰tRNA合成酶?GTP?EF-Tu三元复合体的形式进 位的。 15、脂肪酸的β-氧化包括氧化;水化;再氧化和硫解4步化学反应。 二、选择题 1、(E)反密码子GUA,所识别的密码子是: A.CAU B.UG C C.CGU D.UAC E.都不对 2、(C)下列哪一项不是蛋白质的性质之一? A.处于等电状态时溶解度最小 B.加入少量中性盐溶解度增加 C.变性蛋白质的溶解度增加 D.有紫外吸收特性 3.(B)竞争性抑制剂作用特点是:
生物化学复习提纲2016
生物化学复习提纲2015 第一章蛋白质化学 1．蛋白质、氨基酸的基本知识，名称、分类，重要的鉴定反应：氨基的反应，PITC，肽段顺序推导 蛋白质的分类: 简单蛋白:除氨基酸以外不含其他成分的蛋白质(清蛋白,球蛋白,谷蛋白,醇溶谷蛋白,组蛋白,精蛋白,硬蛋白) 结合蛋白（conjugated protein）:除由氨基酸组成蛋白质部分外，还含有非蛋白成分，这些非蛋白成分，有时称辅基（prosthetic group）或配基(核蛋白,脂蛋白,糖蛋白,磷蛋白,卟啉蛋白,黄素蛋白,金属蛋白) 根据蛋白质的分子外形分类 ?球状蛋白质（globular proteins） ?纤维状蛋白质（fibrous proteins） 根据蛋白质功能分类 ?结构蛋白质（structural proteins） ?酶蛋白（enzymes） ?运输蛋白质（transport proteins） ?运动蛋白质（kinesis proteins） ?贮藏蛋白质（storage proteins） ?防御蛋白质（defensive proteins） 蛋白质的水解: 酸水解:优点是不容易引起水解产物的消旋化。缺点是色氨酸被沸酸完全破坏；含有羟基的氨基酸如丝氨酸或苏氨酸有一小部分被分解；天冬酰胺和谷氨酰胺侧链的酰胺基被水解成了羧基。 碱水解:由于水解过程中许多氨基酸都受到不同程度的破坏，产率不高。部分的水解产物发生消旋化。该法的优点是色氨酸在水解中不受破坏。 酶水解:应用酶水解多肽不会破坏氨基酸，也不会发生消旋化。水解的产物为较小的肽段。 2．氨基酸、多肽的等电点计算、光吸收性质、甲醛滴定的原理氨基酸等电点: 中性:对于侧链基团不解离的氨基酸有：pI = (pK 1+pK 2 )/2 酸性:pI=(pK 1+pK R )/2 碱性:pI=(pK R+pK2)/2 多肽等电点: 酸性:pI=1/2（pK’R+ pK’ -COOH） 碱性:pI= pK’ R +lg（等电点侧链解离数/未解离数） 甲醛滴定的原理: 向AA溶液中加入过量的甲醛，用标准NaOH滴定时，由于甲醛与Aa中 的-NH 2作用形成-NH.CH 2 OH -N (CH 2 OH) 2 等羟甲基衍生物而降低了氨基的碱 性，相对地增强了-NH 3+的酸性解离，使Pk' 2 减少了2-3个pH单位，NaOH 滴定的曲线A向pH低的方向转移，滴定终点也移动pH9附近。
大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案
大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案 一、选择题 1、下列实验仪器中，常用来取用块状固体药品的仪器是（）。 A. 药匙 B. 试管夹 C. 镊子 D. 坩埚钳 2、托盘天平调零后，在左盘衬纸上置氧化铜粉末，右盘衬纸上置1个5g砝码，游码标尺示数如下，此时天平平衡。则被称量的氧化铜质量为（）。 A. 8.3 g B. 7.7 g C. 3.3 g D. 2.7 g 3、用减量法从称量瓶中准确称取0.4000 g分析纯的NaOH固体，溶解后稀释到100.0 mL，所得NaOH溶液的浓度为（）。 A. 小于0.1000 mol/L B. 等于0.1000 mol/L C. 大于0.1000 mol/L D. 三种情况都有可能 4、已知邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）的摩尔质量为204.2 g/mol，用作为基准物质标定0.1 mol/L NaOH溶液时，如果要消耗NaOH溶液为25 mL左右，每份应称取邻苯二甲酸氢钾（）g左右。 A. 0.1 B. 0.2 C. 0.25 D. 0.5 5、NaHCO3纯度的技术指标为≥99.0%，下列测定结果哪个不符合标准要求？（）。 A. 99.05% B. 99.01% C. 98.94% D. 98.95% 6、精密称取马来酸氯苯那敏对照品12 mg，应选取（）的天平。 A. 千分之一 B. 万分之一 C. 十万分之一 D. 百万分之一 7、实验室标定KMnO4溶液，常用的基准物质是（）。 A. Na2CO3 B. Na2S2O3 C. Na2C2O4 D. K2Cr2O7 8、标定氢氧化钠常用的基准物质是（）。 A. EDTA B. K2Cr2O7 C. 草酸 D. 邻苯二甲酸氢钾 9、下列物质可以作为基准物质的是（）。 A. KMnO4 B. Na2B4O7·7H2O C. NaOH D. Na2S2O3 10、下列物质中，可以用直接法配制标准溶液的是（）。 A. 固体NaOH B. 浓HCl C. 固体K2Cr2O7 D. 固体Na2S2O3
生物化学试题带答案
一、选择题 1、蛋白质一级结构的主要化学键就是( E ) A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化( D ) A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物就是( B ) A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1,3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇式丙酮酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中,首先合成的就是( A ) A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 6、体内氨基酸脱氨基最主要的方式就是( B ) A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用 D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环,下列的叙述哪条不正确( D ) A、产生NADH与FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转 8、胆固醇生物合成的限速酶就是( C ) A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、乙酰乙酰COA脱氢酶 E、硫激酶 9、下列何种酶就是酵解过程中的限速酶( D ) A、醛缩酶 B、烯醇化酶 C、乳酸脱氢酶 D、磷酸果糖激酶 E、3一磷酸甘油脱氢酶
10、DNA二级结构模型就是( B ) A、α一螺旋 B、走向相反的右手双螺旋 C、三股螺旋 D、走向相反的左手双螺旋 E、走向相同的右手双螺旋 11、下列维生素中参与转氨基作用的就是( D ) A、硫胺素 B、尼克酸 C、核黄素 D、磷酸吡哆醛 E、泛酸 12、人体嘌呤分解代谢的终产物就是( B ) A、尿素 B、尿酸 C、氨 D、β—丙氨酸 E、β—氨基异丁酸 13、蛋白质生物合成的起始信号就是( D ) A、UAG B、UAA C、UGA D、AUG E、AGU 14、非蛋白氮中含量最多的物质就是( D ) A、氨基酸 B、尿酸 C、肌酸 D、尿素 E、胆红素 15、脱氧核糖核苷酸生成的方式就是( B ) A、在一磷酸核苷水平上还原 B、在二磷酸核苷水平上还原 C、在三磷酸核苷水平上还原 D、在核苷水平上还原 16、妨碍胆道钙吸收的物质就是( E ) A、乳酸 B、氨基酸 C、抗坏血酸 D、柠檬酸 E、草酸盐 17、下列哪种途径在线粒体中进行( E ) A、糖的无氧酵介 B、糖元的分解 C、糖元的合成 D、糖的磷酸戊糖途径 E、三羧酸循环 18、关于DNA复制,下列哪项就是错误的( D ) A、真核细胞DNA有多个复制起始点 B、为半保留复制 C、亲代DNA双链都可作为模板 D、子代DNA的合成都就是连续进行的
生物化学题库及答案.
生物化学试题库 蛋白质化学 一、填空题 1．构成蛋白质的氨基酸有种，一般可根据氨基酸侧链（R）的大小分为侧链氨基酸和侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两种，它们分别是氨基酸和氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是氨基酸和氨基酸。 2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。 3．丝氨酸侧链特征基团是；半胱氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是，除脯氨酸以外反应产物的颜色是；因为脯氨酸是α—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示色。 5．蛋白质结构中主键称为键，次级键有、、 、、；次级键中属于共价键的是键。 6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子β亚基的第六位 氨酸被氨酸所替代，前一种氨基酸为性侧链氨基酸，后者为性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7．Edman反应的主要试剂是；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是。 8．蛋白质二级结构的基本类型有、、 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的α-螺旋往往会。 9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是 和。 10．蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征是、。 11．在适当浓度的β-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。其中β-巯基乙醇可使RNA酶分子中的键破坏。而8M脲可使键破坏。当用透析方法去除β-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为。 12．细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是、。 13．在生理pH条件下，蛋白质分子中氨酸和氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而氨酸、氨酸或氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。 14．包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示为，单个肽平面及包含的原子可表示为。 15．当氨基酸溶液的pH＝pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在；当pH＞pI时，氨基酸
生物化学复习题+答案
生物化学复习题 一、单项选择题 1、蛋白质一级结构的主要化学键是E A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定（C） A．溶液的pH值大于pI B．溶液的pH值小于pI C．溶液的pH值等于pI D．溶液的pH值等于7.4 3、测得某一蛋白质样品的氮含量为0.4克，此样品约含蛋白质（ B ）克 A．2.00 B．2.50 C．6.40 D．3.00 4. 酶的Km值大小与：A A．酶性质有关B．酶浓度有关C．酶作用温度有关D．酶作用时间有关E．环境pH有关 5. 蛋白质一级结构的主要化学键是E A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 6. 各种细胞色素在呼吸链中传递电子的顺序是：B A．a →a3 →b →C1 →1/2 O2 B．b →C1 →C →a →a3 →1/2 O2 C．a1 →b →c → a →a3 →1/2 O2 D．a →a3 → b →c1 →a3 →1/2 O2 E． c →c1 →b →aa3 →1/2 O2 7. 属于底物水平磷酸化的反应是：A A．1,3-二磷酸甘油酸→3-磷酸甘油酸B．苹果酸→草酰乙酸C．丙酮酸→乙酰辅酶A D．琥珀酸→延胡索酸E．异柠檬酸→α-酮戊二酸 8. 糖酵解途径中生成的丙酮酸必须进入线粒体内氧化，因为：C A．乳酸不能通过线粒体膜B．为了保持胞质的电荷中性C．丙酮酸脱氢酶系在线粒体内D．胞质中生成的丙酮酸别无其他去路E．丙酮酸堆积能引起酸中毒 9. 糖原合成中葡萄糖的供体是（B）： A．CDP-葡萄糖B．UDP-葡萄糖C．1-磷酸葡萄糖D．6-磷酸葡萄糖 10. 6-磷酸葡萄糖脱氢酶的辅酶是：E A．FMN B．FAD C．NAD+ D．NADP+ E. TPP 11. 脂肪酸生物合成时所需的氢来自：C A. FADH2 B. NADH+H+ C. NADPH+H+ D. FMNH2 E.以上都是 12. 下面有关酮体的叙述错误的是B
生物化学实验技能大赛活动方案
生物化学实验技能大赛活动方案 一、活动目的 通过举办生物化学实验技能大赛，使广大学生树立崇尚科学，勇于创新，开拓进取，敢于实践的精神风貌，增强专业素养。在深化教育改革，推进素质教育的要求下，不断提高学生实验设计及实验操作的能力，从而提高广大学生学习《生物化学》这门课程的兴趣，推动生物化学实践教学的改革；增加同学们的合作交流，促进相互间的学习与沟通，拓展知识的应用范围，培养创新意识及团队精神，提高综合实验设计、分析和生物化学实验操作技能，提高大学生动手能力和实践技能，促进我校良好学风的建设，营造浓厚的学习、学术氛围，特此举行此次生物化学实验技能大赛。矚慫润厲钐瘗睞枥庑赖賃軔。 二、组织机构 主办单位：韶关学院教务处 承办单位：英东生命科学学院团委 三、参赛对象 韶关学院全日制在校学生均可参加，自行组队(可跨专业)，团队人数1至4人。 四、比赛流程： 1.初赛 各参赛队伍需上交报名表（附件1）并按照作品格式要求（附件2）独立完成实验设计，于2016年11月9日-11月20日将实验设计和报名表（放在同一文件夹压缩打包命名为：学院+实验课题+队长姓名+队长短号）发送至邮箱（）参加初赛，纸质版需上交到英东楼B309生科院辅导员办公室处。评委老师对实验设计进行评定后，筛选出约20支参赛队伍进入复赛。 2.复赛 2016年11月26日09:00—17:00为预实验阶段，实验室开放，各参赛队伍可在当天熟悉比赛场地或对所需材料、仪器、试剂等作实验前的预处理。 2016年11月27日09:00—17:00为正式复赛阶段，进入实验室按照实验设计进行操作，并当场完成实验报告，复赛分数根据实验过程及实验报告进行评定。 复赛评选出8支队伍进入决赛，决赛名单当场公布。 复赛地点：英东实验室 决赛 2016年12月3日19:00—22:30为决赛阶段，进行实验报告答辩，决赛分为四个环节：报告陈述、现场答辩、观众提问、专家点评。获奖的实验报告将在英东大厅展示15天。 决赛地点：图书馆学术报告厅 五、参赛要求 1.作品内容 （1）物质提取类 如从柑橘皮中提取果胶；从果蔬中提取类胡萝卜素；从芦荟中提取碳水化合物；从鸡蛋清中提取某蛋白；从三七中提取三七皂等。 （2）物质检验类 如检验市面上某几种品牌牛奶是否掺假；检验市面上某几种食品是否含有防腐剂；检验某品牌的食用植物油是否含胆固醇等。 （3）物质含量测定类 如洗衣粉磷含量分析；测定某品牌奶粉的蛋白质含量是否达标；比较几种饲料中某物质的含量等。
生物化学试题库(试题库+答案)
生物化学试题库及其答案——糖类化学 一、填空题 1.纤维素是由________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 2.常用定量测定还原糖的试剂为________________试剂和 ________________试剂。 3.人血液中含量最丰富的糖是________________,肝脏中含量最丰富的糖是 ________________,肌肉中含量最丰富的糖是________________。 4.乳糖是由一分子________________和一分子________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 5.鉴别糖的普通方法为________________试验。 6.蛋白聚糖是由________________和________________共价结合形成的复合物。 7.糖苷是指糖的________________和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛(或缩酮)等形式的化合物。 8.判断一个糖的D-型和L-型是以________________碳原子上羟基的位置作依据。 9.多糖的构象大致可分为________________、________________、 ________________和________________四种类型,决定其构象的主要因素是 ________________。 二、是非题 1.[ ]果糖是左旋的，因此它属于L-构型。 2.[ ]从热力学上讲,葡萄糖的船式构象比椅式构象更稳 定。 3.[ ]糖原、淀粉和纤维素分子中都有一个还原端,所以它们都有还原性。 4.[ ]同一种单糖的α-型和β-型是对映体。 5.[ ]糖的变旋现象是指糖溶液放置后,旋光方向从右旋变成左旋或从左旋变成右旋。 6.[ ]D-葡萄糖的对映体为L-葡萄糖,后者存在于自然界。 7.[ ]D-葡萄糖,D-甘露糖和D-果糖生成同一种糖脎。 8.[ ]糖链的合成无模板,糖基的顺序由基因编码的转移酶决定。 9.[ ]醛式葡萄糖变成环状后无还原性。 10.[ ]肽聚糖分子中不仅有L-型氨基酸,而且还有D-型氨基酸。 三、选择题
生物化学复习资料
什么是蛋白质的变性作用？引起蛋白质变性的因素有哪些？有何临床意义？在某些理化因素作用下, 使蛋白质严格的空间结构破坏，引起蛋白质理化性质改变和生物学活性丧失的现象称为蛋白质变性。引起蛋白质变性的因素有：物理因素，如紫外线照射、加热煮沸等；化学因素，如强酸、强碱、重金属盐、有机溶剂等。临床上常常利用加热或某些化学士及使病原微生物的蛋白质变性，从而达到消毒的目的，在分离、纯化或保存活性蛋白质制剂时，应采取防止蛋白质变性的措施。 比较蛋白质的沉淀与变性 蛋白质的变性与沉淀的区别是：变性强调构象破坏，活性丧失，但不一定沉淀；沉淀强调胶体溶液稳定因素破坏，构象不一定改变，活性也不一定丧失，所以不一定变性。 试述维生素B1的缺乏可患脚气病的可能机理 在体内Vit B1 转化成TPP，TPP 是α-酮酸氧化脱羧酶系的辅酶之一，该酶系是糖代谢过程的关键酶。维生素B1 缺乏则TPP 减少，必然α-酮酸氧化脱羧酶系活性下降，有关代谢反应受抑制，导致ATP 产生减少，同时α-酮酸如丙酮酸堆积，使神经细胞、心肌细胞供能不足、功能障碍，出现手足麻木、肌肉萎缩、心力衰竭、下肢水肿、神经功能退化等症状，被通称为“脚气病”。 简述体内、外物质氧化的共性和区别 共性①耗氧量相同。②终产物相同。③释放的能量相同。
区别：体外燃烧是有机物的C 和H 在高温下直接与O2 化合生成CO2 和H2O，并以光和热的形式瞬间放能；而生物氧化过程中能量逐步释放并可用于生成高能化合物，供生命活动利用。 简述生物体内二氧化碳和水的生成方式 ⑴CO2 的生成：体内CO2 的生成，都是由有机酸在酶的作用下经脱羧反应而生成的。根据释放CO2 的羧基在有机酸分子中的位置不同，将脱羧反应分为: α-单纯脱羧、α-氧化脱羧、β-单纯脱羧、β-氧化脱羧四种方式。 ⑵水的生成：生物氧化中的H2O 极大部分是由代谢物脱下的成对氢原子(2H)，经一系列中间传递体(酶和辅酶)逐步传递，最终与氧结合产生的。 试述体内两条重要呼吸链的排练顺序，并分别各举两种代谢物氧化脱氢 NADH 氧化呼吸链：顺序：NADH→FMN/（Fe-S）→CoQ→Cytb→c1→c→aa3 如异柠檬酸、苹果酸等物质氧化脱氢，生成的NADH+H+均分别进入NADH 氧化呼吸链进一步氧化，生成2.5 分子ATP。 琥珀酸氧化呼吸链：FAD·2H/（Fe-S）→CoQ→Cytb→c1→c→aa3 如琥珀酸、脂酰CoA 等物质氧化脱氢，生成的FAD·2H 均分别进入琥珀酸氧化呼吸链进一步氧化，生成1.5 分子ATP。 试述生物体内ATP的生成方式 生物体内生成ATP 的方式有两种：底物水平磷酸化和氧化磷酸化。
生物化学实验技能大赛实验设计书
邻二氮菲法测定蔬菜中铁的含量 摘要 用邻二氮菲分光光度法直接测定蔬菜中的铁含量，方法简便、快速、准确，为指导人们合理食用蔬菜进行补铁及进一步开发蔬菜产品提供了可靠的理论依据[1 2]。 关键词蔬菜铁含量邻二氮菲 1.前言 铁作为必需的微量金属元素，对于人体的健康十分重要。铁是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其它酶系统的主要组分，可协助氧的运输，还能促进脂肪的氧化。蔬菜是人们摄取微量铁的主要途径之一，缺铁可造成贫血并容易疲劳，而过多则会导致急性中毒。所以，蔬菜中铁含量的测定具有重要的营养学意义，可为指导人们合理食用蔬菜进行补铁以防治缺铁性贫血，提供可靠的理论依据。 2.实验目的 综合运用所学知识，用仪器分析法测定金属元素含量；练习灵活运用各种基本操作和查阅资料的能力。 3.实验原理 蔬菜中金属元素常与有机物结合成难溶或难于解离的物质，常采用有机物破坏法是被测的金属元素以氧化物或无机盐的形式残留下来，以便测定。本实验采用有机物破坏法（干法），即在高温下加入氧化剂，使有机物质分解。根据不同浓度的物质具有不同的吸光度，采用分光光度法来测定蔬菜中的铁含量。在pH值4～6的条件下，以盐酸羟胺将三价铁还原为二价铁，二价铁再与邻二氮菲（phen）生成桔红色络合物［3］，用分光光度计在510nm测定蔬菜中铁的含量。 盐酸羟胺还原三价铁的反应如下： 2 Fe3++2NH2OH·HCl→2 Fe2++N2+2H2O+4H++2Cl- 邻二氮菲与二价铁的反应式如下： Fe2+ + 3(phen) =Fe(phen)3 4.实验器材 722型分光光度计（1台），电子天平（1台）蒸发皿（4个），100mL容量瓶(4个)，
2020年(生物科技行业)生物化学复习资料
（生物科技行业）生物化学 复习资料
生物化学复习资料 第壹章蛋白质 1，蛋白质含量=（总氮含量—无机氮含量）乘以6.25 2,氨基酸按含特殊基团的分类：a含羟基的氨基酸丝氨酸（Ser）酪氨酸（Tyr）b含巯基的氨基酸半胱氨酸（Cys） 3,氨基酸的分类:a非极性氨基酸丙氨酸（Ala）缬氨酸（Val）亮氨酸（Leu）异亮氨酸（Ile）苯丙氨酸（Phe）甲硫氨酸（Met）脯氨酸（Pro）色氨酸（Trp）b极性不带电荷甘氨酸（Gly）丝氨酸（Ser）苏氨酸（Thr）天冬酰胺(Asn)谷氨酰胺（Gln）酪氨酸（Tyr）半胱氨酸（Cys）c带负电荷天冬氨酸（Asp）谷氨酸（Glu）d带正电荷组氨酸（His）赖氨酸（Lys）精氨酸（Arg） 4，等电点调节氨基酸溶液的pH，使氨基酸分子上的氨基正离子和羧酸跟负离子解离度完全相同，即氨基酸所带净电荷为零。主要以俩性离子存在时，在电场中不向任何壹极移动，此时溶液的pH叫做氨基酸的等电点。 氨基酸在pH大于等电点的溶液中以阴离子存在，在pH小于等电点的溶液中主要以阳离子存在。 5，蛋白质的化学性质脯氨酸，羟脯氨酸和茚三酮反应生成黄色物质，其余а-氨基酸和茚三酮反应生成蓝紫色物质。 6，2，4—二硝基氟苯或丹磺酰氯测定蛋白质N端氨基酸。 7，壹个氨基酸的а—羧基和壹个氨基酸的а—氨基脱水缩合形成的共价键叫肽键由此形成的化合物称肽。 8，蛋白质的壹级结构指蛋白质中氨基酸的序列，氨基酸的序列多样性决定了蛋白质空间结构和功能的多样性。 9，稳定蛋白质空间结构的作用力主要是次级键，即氢键和盐键等非共价键，以及疏水
作用和范德华力。 10，蛋白质的二级结构指多肽主链有壹定周期性的，由氢键维持的局部空间结构。肽链形成螺旋，折叠，转角等有壹定规则的结构。 11，蛋白质的三级结构指球状蛋白的多肽链在二级结构，超二级结构，和结构域等结构层次的基础上，组装而成的完整的结构单元。 12，蛋白质的四级结构许多蛋白质有俩个或俩个之上的相互关联的具有三级结构的亚单位组成，其中每壹个亚单位称为亚基，亚基间通过非共价键聚合而形成特定的构象。蛋白质四级结构指分子中亚基的种类，数量以及相互关系。 13，蛋白质的变性指天然蛋白质因受理化性质的影响起分子内部原有的高度规律性结构发生变化，知识蛋白质的理化性质和生物学性质都有所改变但蛋白质的壹级结构不被破坏。变性的实质是肽链从卷曲变伸展的过程。 14，蛋白质变性的因素化学因素：强酸，强碱，尿素，胍，去污剂，重金属盐，三氯醋酸，磷钨酸，苦味酸，浓乙醇。物理因素：剧烈震荡或搅拌，紫外线及X射线照射，超声波等。蛋白质变性后的表现：①?生物学活性消失；②?理化性质改变：溶解度下降，黏度增加，紫外吸收增加，侧链反应增强，对酶的作用敏感，易被水解。蛋白质由于带有电荷和水膜，因此在水溶液中形成稳定的胶体。如果在蛋白质溶液中加入适当的试剂，破坏了蛋白质的水膜或中和了蛋白质的电荷，则蛋白质胶体溶液就不稳定而出现沉淀现象。沉淀机理：破坏蛋白质的水化膜，中和表面的净电荷。15，蛋白质的沉淀能够分为俩类：（1）可逆的沉淀：蛋白质的结构未发生显著的变化，除去引起沉淀的因素，蛋白质仍能溶于原来的溶剂中，且保持天然性质。如盐析或低温下的乙醇（或丙酮）短时间作用蛋白质。（2）不可逆沉淀：蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质变性而沉淀，不再能溶于原溶剂。如加热引起蛋白质沉淀，和重金属或某些酸类的反应都属于此类。
大学生生物化学实验技能大竞赛
生命科学学院 关于举办首届大学生生物化学实验技能竞赛的通知 一、竞赛目的 激励大学生自主学习，培养大学生创新意识和团队精神，增强综合实验设计能力，提高生化实验操作技能，营造浓厚学术创新氛围，促进良好学风的建设，选拔优秀项目和选手参加山东省第五届生物化学实验技能大赛。 二、竞赛组委会 组长：王宝山、魏成武 成员：戴美学、杨桂文、谭效忠、苗明升、张鸿雁、杜希华、王珂、原永洁三、参赛对象 生命科学学院在校本科生，不限年级和专业。参赛队伍2-3人为一队，每队一名指导教师。每个参赛队限提交一份实验设计书，每个指导教师指导的项目数一般不超过6项。 四、参赛作品内容及要求 （一）作品内容 1、物质提取类 如从柑橘皮中提取果胶；从果蔬中提取类胡萝卜素；从芦荟中提取碳水化合物；从鸡蛋清中提取某蛋白；从三七中提取三七皂等。 2、物质检验类 如检验市面上某几种品牌牛奶是否掺假；检验市面上某几种食品是否含有防腐剂；检验某品牌的食用植物油是否含胆固醇等。 3、物质含量测定类
如洗衣粉磷含量的分析；测定某品牌奶粉的蛋白质含量是否达标；比较几种饲料中某物质的含量等。 4、探索物质在某一方面的应用类 如探索蛋白酶对草菇保鲜的影响机理；探索木瓜蛋白酶在食物色氨酸测定上的应用等。 5、比较不同品牌物质的营养价值 如对不同品牌螺旋藻片营养成分测定和营养价值的评价测定；对不同品牌饲料中营养价值比较等。 6、其他参赛者感兴趣的方面 （二）作品要求 1、作品要求在保证安全性的前提下，具有一定的科学性、实用性、创造性，具有较强的实际意义，以创新及紧密联系生产生活实际为佳，同时在实验室内的可操作性强。 2、每组参赛队严格按照实验设计书设计格式要求撰写实验设计书，并提交至大赛邮箱，一经提交不得修改，违者则取消决赛资格。 3、参赛作品原则上不能与山东省大学生生物化学实验技能大赛前四届作品相同（前几届作品请参考大赛相关网站：http://202.194.131.160/G2S/ Template/View.aspx?action=view&courseType=0&courseId=282），亦不可抄袭外省比赛作品，否则取消参赛资格。 4、实验设计书设计的项目最好进行过预实验（可利用寒假在指导教师指导下利用实验室条件进行预实验），并在“生科院首届大学生生物化学实验技能竞赛报名表”中如实注明是否做过预实验。 5、实验设计内容应能在8小时内完成，便于决赛时在限定的时间内进行实验操作。
生物化学题库(含答案).
蛋白质 一、填空R （1）氨基酸的结构通式为H2N-C-COOH 。 （2）组成蛋白质分子的碱性氨基酸有赖氨酸、组氨酸、精氨酸，酸性氨基酸有天冬氨酸、谷氨酸。 （3）氨基酸的等电点pI是指氨基酸所带净电荷为零时溶液的pH值。 （4）蛋白质的常见结构有α-螺旋β-折叠β-转角和无规卷曲。 （5）SDS-PAGE纯化分离蛋白质是根据各种蛋白质分子量大小不同。 （6）氨基酸在等电点时主要以两性离子形式存在，在pH>pI时的溶液中，大部分以__阴_离子形式存在，在pH 生物化学试题（1） 第一章蛋白质的结构与功能 [测试题] 一、名词解释：1．氨基酸 2．肽 3．肽键 4．肽键平面 5．蛋白质一级结构 6．α-螺旋 7．模序 8．次级键 9．结构域 10．亚基 11．协同效应 12．蛋白质等电点 13．蛋白质的变性 14．蛋白质的沉淀 15．电泳 16．透析 17．层析 18．沉降系数 19．双缩脲反应 20．谷胱甘肽 二、填空题 21．在各种蛋白质分子中，含量比较相近的元素是____，测得某蛋白质样品含氮量为15.2克，该样品白质含量应为____克。 22．组成蛋白质的基本单位是____，它们的结构均为____，它们之间靠____键彼此连接而形成的物质称为____。 23．由于氨基酸既含有碱性的氨基和酸性的羧基，可以在酸性溶液中带____电荷，在碱性溶液中带____电荷，因此，氨基酸是____电解质。当所带的正、负电荷相等时，氨基酸成为____离子，此时溶液的pH值称为该氨基酸的____。 24．决定蛋白质的空间构象和生物学功能的是蛋白质的____级结构，该结构是指多肽链中____的排列顺序。25．蛋白质的二级结构是蛋白质分子中某一段肽链的____构象，多肽链的折叠盘绕是以____为基础的，常见的二级结构形式包括____，____，____和____。 26．维持蛋白质二级结构的化学键是____，它们是在肽键平面上的____和____之间形成。 27．稳定蛋白质三级结构的次级键包括____，____，____和____等。 28．构成蛋白质的氨基酸有____种，除____外都有旋光性。其中碱性氨基酸有____，____，____。酸性氨基酸有____，____。 29．电泳法分离蛋白质主要根据在某一pH值条件下，蛋白质所带的净电荷____而达到分离的目的，还和蛋白质的____及____有一定关系。 30．蛋白质在pI时以____离子的形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以____离子形式存在，在pH 年等通过什么实验证明DNA是遗传物质的 答：肺炎球菌转化实验证明DNA是遗传物质。 2.核酸分为哪些类它们的分布和功能是什么 答：（1）核酸分为两大类，即：核糖核酸（RNA）、脱氧核糖核酸（DNA）（2）核酸的分布： DNA的分布：真核生物，98%在核染色体中，核外的线粒体中存在mDNA，叶绿体中存在ctDNA。 原核生物，存在于拟核和核外的质粒中。 病毒：DNA病毒 RNA的分布：分布于细胞质中。有mRNA、rRNA、tRNA （3）功能：的DNA是主要遗传物质 RNA主要参与蛋白质的生物合成。 tRNA：转运氨基酸TrRNA：核糖体的骨架 mRNA：合成蛋白质的模板 RNA的功能多样性。 参与基因表达的调控；催化作用；遗传信息的加工；病毒RNA是遗传信息的载体。 3.说明Watson－Crick建立的DNA双螺旋结构的特点。 答：（1）DNA分子有两条反向平行的多核苷酸链相互盘绕形成双螺旋结构。两条链围绕同一个“中心轴”形成右手螺旋，双螺旋的直径为2nm。 （2）由脱氧核糖和磷酸间隔相连而形成的亲水骨架在双螺旋的外侧，而疏水的碱基对则在双螺旋的内部，碱基平面与中心轴垂直，螺旋旋转一周约为10个碱基对（bp），螺距为，这样相邻碱基平面间隔为，并有一个36o的夹角，糖环平面则于中心轴平行。 （3）两条DNA链借助彼此碱基之间形成的氢键而结合在一起。根据碱基结构的特征，只能形成嘌呤与嘧啶配对。既A与T配对，G与C配对，A－T间有2个氢键，G－C间有3个氢键。 （4）在DNA双螺旋结构中，两条链配对偏向一侧，形成一条大沟和一条小沟。这两条沟特别是大沟对蛋白质识别DNA双螺旋结构上的特定信息非常重要，只 生物化学试题及答案（4） 第四章糖代谢 【测试题】 一、名词解释 1．糖酵解（glycolysis）11．糖原累积症 2．糖的有氧氧化12．糖酵解途径 3．磷酸戊糖途径13．血糖(blood sugar) 4．糖异生（glyconoegenesis)14．高血糖(hyperglycemin) 5．糖原的合成与分解15．低血糖(hypoglycemin) 6．三羧酸循环（krebs循环）16．肾糖阈 7．巴斯德效应(Pastuer效应) 17．糖尿病 8．丙酮酸羧化支路18．低血糖休克 9．乳酸循环（coris循环）19．活性葡萄糖 10．三碳途径20．底物循环 二、填空题 21．葡萄糖在体内主要分解代谢途径有、和。 22．糖酵解反应的进行亚细胞定位是在，最终产物为。 23．糖酵解途径中仅有的脱氢反应是在酶催化下完成的，受氢体是。两个 底物水平磷酸化反应分别由酶和酶催化。 24．肝糖原酵解的关键酶分别是、和丙酮酸激酶。 25．6—磷酸果糖激酶—1最强的变构激活剂是，是由6—磷酸果糖激酶—2催化生成，该酶是一双功能酶同时具有和两种活性。 26．1分子葡萄糖经糖酵解生成分子ATP，净生成分子A TP，其主要生理意义在于。 27．由于成熟红细胞没有，完全依赖供给能量。 28．丙酮酸脱氢酶复合体含有维生素、、、和。 29．三羧酸循环是由与缩合成柠檬酸开始，每循环一次有次脱氢、 - 次脱羧和次底物水平磷酸化，共生成分子A TP。 30．在三羧酸循环中催化氧化脱羧的酶分别是和。 31．糖有氧氧化反应的进行亚细胞定位是和。1分子葡萄糖氧化成CO2和H2O净生成或分子ATP。 32．6—磷酸果糖激酶—1有两个A TP结合位点，一是ATP作为底物结合，另一是与ATP亲和能力较低，需较高浓度A TP才能与之结合。 33．人体主要通过途径，为核酸的生物合成提供。 34．糖原合成与分解的关键酶分别是和。在糖原分解代谢时肝主要受的调控，而肌肉主要受的调控。 35．因肝脏含有酶，故能使糖原分解成葡萄糖，而肌肉中缺乏此酶，故肌糖原分解增强时，生成增多。 36．糖异生主要器官是，其次是。 37．糖异生的主要原料为、和。 38．糖异生过程中的关键酶分别是、、和。 39．调节血糖最主要的激素分别是和。 40．在饥饿状态下，维持血糖浓度恒定的主要代谢途径是。 三、选择题生物化学试题及答案(1)
生物化学复习题 (1)
生物化学试题及答案(4)