微生物
1、微生物按细胞结构分为哪几类？
答：1非细胞微生物;这类微生物体积微小，能通过细菌滤器，无细胞结构，无产生能量的酶系统，有单一核酸（DNA或RNA）和蛋白质衣壳组成2原核细胞型：由单细胞组成，细胞核的分化程度比较低，仅有始核，染色体仅为单个裸露的DNA分子，无核膜和核仁。3真核细胞型：大多有多细胞组成，细胞核分化程度高，有典型的核结构（有核膜、核仁和染色体），通过有丝分裂进行繁殖。2、细菌的大小单位是？细菌有哪几种基本形态？
答：细菌以微米为测量单位。细菌的基本形态有球形、杆形、螺形。
3、细菌细胞壁的基本组成是？G+和G-菌细胞壁结构的差异及其医学意义？
答：基本组成—肽聚糖，磷壁酸，脂多糖。
结构差异：G+菌的肽聚糖由聚糖骨架，四肽侧链和五肽桥组成，有15-50层，构成厚而坚韧的三维立体结构，磷壁酸是G+菌细胞的特有的成分。G-菌的肽聚糖由聚糖骨架。四肽侧链组成，仅有1-2层，形成薄而疏松的平面网状结构，远不如G+菌肽聚糖坚固，G-菌细胞壁特有外膜。医学意义：革兰阳性菌和革兰阴性菌由于细胞壁结构显著不同，故两类细菌在染色体、抗原性、致病性及对药物敏感性等方面有很大差异。
4、细菌有哪些特殊结构？各有什么功能和医学意义？
答：细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞
功能：1荚膜：具有抗原性；抗吞噬作用；抗杀菌物质作用；黏附作用；抗干燥作用。2鞭毛：是细菌的运动器官；鉴定细菌的依据；与致病性有关；3菌毛：普通菌毛有黏附作用；性菌毛可传递遗传物质4芽胞：芽胞是细菌的休眠状态，是细菌抵抗不良环境的的特殊生存方式。医学意义：荚膜：增强它的侵袭力，利于分类和鉴别。鞭毛：对细菌的分类和鉴定有意义；某些细菌的鞭毛与其致病有关。芽胞：鉴别细菌、易污染环境‘作为灭菌的参考指标。
5、什么叫L型细菌？它的形态、培养特性、抵抗力有何特点？
答：细胞在青霉素、免疫血清、补体、胆汁或溶菌酶等因素作用下，细胞壁缺损或完全丧失可形成细胞壁缺陷型细菌称为L型细菌。形态：缺乏完整的细胞壁，不能维持原有形态，呈现高度多形性。培养特性：L型细菌的培养要求与原菌基本相似，但在普通培养基中不易生长，必须提供高渗环境。生长较原菌缓慢，一般培养2～7天后在软琼脂平板上形成中间较厚四周较薄的荷包蛋样小菌落。抵抗力：它对物理因素如温度、射线、等的抵抗力比原菌弱。对作用于细胞壁的抗生素具有耐药性。
6、简述青霉素、溶菌酶、链霉素、红霉素的杀菌机制？
青霉素：干扰G+细菌四肽链D-丙氨酸与五肽桥之间的联络，使细菌不能合成完整的肽聚糖，细菌因失去细胞壁的保护作用而死亡。
溶菌酶：切断连接N-乙酰葡糖胺与N-乙酰胞壁酸的β-1，4-糖苷链，破坏聚糖骨架使细胞裂解。
链霉素和红霉素：分别与细菌核糖体30S和50S亚基结合，干扰细菌蛋白质合成，导致细菌死亡，但对人体细胞无影响。
7、细菌生长需要哪些生长条件？
细菌的生长繁殖，需要提供合适的环境条件，不同种类的细菌生长繁殖的条件不完全相同，个别种类要求特殊的环境条件。但其基本条件包括以下几个方面。营养—细菌所需的营养物质应按一定的方式配比提供，提供其需要不用，配比的
量也不同，以保证细菌在一定的条件获得充足营养和能量。
酸碱度—大多数病原菌生长繁殖的最适酸碱度为7.2-7.6，此时细菌的酶活性强，生长繁殖旺盛。
温度—最适温度为37度，故实验室中常用37度恒温箱培养细菌。
气体—氧气和二氧化碳，一般细菌在代谢过程中自身产生的二氧化碳即可满足需要。
8简述细菌生长繁殖的方式、速度及其规律？研究细菌的形态、药敏试验通常选择哪期的细菌？
繁殖方式—细菌以二分裂方式进行无性繁殖。革兰阳性细菌生长到一定时间，体积增大、染色体复制并与中介体相连，菌体中介体部位细胞膜内陷形成横膈，中介体一分为二时，染色体分数两个子细胞，最后细胞壁内陷，子细胞分离，完成一次分裂。革兰阴性细菌无中介体，染色体直接连接在细胞膜上，复制后附着在邻近，当细菌分裂完成，两团染色体被分割在两个子细胞中。
繁殖速度及其规律—细菌的繁殖速度与细菌的种类及其所处的环境条件有关，条件适宜时，细菌繁殖快。4个时期—迟缓期，对数期，稳定期，衰亡期。
9，细菌有哪些合成代谢产物，各有什么医学意义？
细菌通过合成代谢建造自身各种结构，以利于生长繁殖。同时也通过合成代谢，向外分泌一些产物，以保护自身或表现该生物体的特性。对医学有重要意义的合成代谢产物有以下5种。热源质，毒素和侵袭性酶，色素，抗生素，细菌素。10，正常菌群有哪些生理功能？正常情况下人体哪些部位是无菌的？
正常菌群对保持人体生态平衡和内环境那个的稳定有重要作用。1，营养和代谢作用2，免疫作用3，生物屏障与拮抗4，生长和发育，5，抗癌作用。
颅腔，胸腔，腹腔，骨髓，脊髓，血液，人体各组织内都无菌。
11，高压蒸汽灭菌法的方法，应用范围？普通营养琼脂常用哪种灭菌法？
适应于包括液体在内的各种不怕热的物品灭菌，是一种最有效的灭菌方法。在103.4/kPa蒸气压下，温度达121.3度，15-30分钟可杀死所有的细菌繁殖体和芽胞。此法可用于外科手术器械，注射用水，普通培养基及耐高温的玻璃制品等，是目前较理想的灭菌方法。
12，简述紫外线的杀菌机制及其适用范围。机制—1，对细菌核酸的破坏，细胞内DNA吸收紫外线，DNA一条链或两条链上相近的胸腺嘧啶之间形成而具体，改变了DNA的分子构型，从而干扰了DNA的复制2，对菌体蛋白质的破坏，由于氨基酸的结构受损使蛋白质失去生物学活性，从而导致细菌死亡。3，对菌体核糖的破坏—有学者发现核酸链中的核糖可以吸收紫外线而受到破坏，造成吸收链断裂，导致细菌死亡。
应用范围—因此只能用于物品表面和空气消毒。如手术室、传染病房、微生物学无菌室或不耐热的物品表面等。
13细菌有哪些常见的变异现象？各有什么实际意义？
形态和结构变异：菌体形态，细菌L型，特殊结构→对细菌的观察，染色性，致病性有关。
菌落变异－S→R，鉴定细菌，挑选菌落时应加以注意。
毒力变异－毒力的增强或减弱，用于检测对药物的敏感性，和细菌的致病性
酶活性变异－细菌遗传学研究。
耐药性变异－用于临床治疗，细菌耐药性。
14，什么叫质粒？医学上重要的质粒有哪些？
质粒存在于大多数细菌的胞质内，是细菌染色体外双股，环状，闭合的DNA。
医学上重要的质粒－F质粒，R质粒，Vi质粒，Col质粒
15病原菌的致病因素包括哪些？
毒力：侵入数量（侵袭力，毒素）－侵入门户与感染途径－机体的免疫力，环境因素等
16外毒素与内毒素的区别
外毒素－由革兰阳性及部分革兰阴性菌分泌到菌体外或细菌崩解释放，成分为蛋白质，不耐热，在60－80度下30分钟可被破坏，免疫原性强，刺激机体产生抗毒素抗体，用甲醛液脱毒制成类毒素。毒性作用强，对组织器官有选择性损害，引起特殊的症状，分为细胞毒，神经毒，肠毒素
内毒素－是革兰阴性细菌的细胞壁成分，菌体崩解释放，成分为脂多糖，耐热，160毒下2－4小时被破坏，免疫原性弱，其抗体中和作用弱，不能用甲醛液脱毒制成类毒素。毒性作用较弱，对组织无选择性，各种内毒素毒性大致相同，引起发热，白细胞升高，休克，DIC等
17国际上普遍采用伯杰细菌分类系统。细菌的拉丁文双命名法前为属名，后为种名。
18不染色标本检查有哪些方法？主要用于观察什么？
常用方法有压滴法，悬滴法和毛细管法。常用于观察细菌动力及运动情况，也可用于观察细菌形态或做某些生化及血清学试验。
19革兰染色法的原理，方法，结果判断及意义是什么？
方法－细菌图片制好后用结晶紫初染1分钟，用流水轻洗至流下的水无色后用碘液媒染1分钟，再用水清洗干净后用百分之95的乙醇脱色30秒，接着轻洗后用稀释复红复染30到60秒，接着用流动水轻洗到流下的水滴无色，弄干后镜检。原理－目前尚未清楚，但有以下学说：等电点学说-G+菌因其等电点比G-菌的等电点低于是在同一条件下与带正电荷的碱性染料结合比G-菌更牢固，不易脱色。化学学说-G+菌含有大量核糖核酸镁盐可与结晶紫和碘牢固结合成大分子复合物，从而不易被乙醇脱色，G-菌因为所含此种物质量少，故意被乙醇脱色。细胞壁学结构说-G+菌细胞壁结构较致密，脂质含量低，乙醇不易透入，且乙醇使细胞壁脱水后使细胞壁间的间隙缩小，阻碍结晶紫与碘的复合物渗出物。而G+菌的细胞壁结构较疏松，含脂量多，易被乙醇渗透致使细胞壁通透性增高，细胞内的结晶紫与碘复合物被渗出而脱色。
结果判断-紫色为G+,红色为G-
意义－鉴别细菌，供临床选择药物参考，与致病性有关。
20抗酸染色法主要用于什么细菌的染色，其原理，方法及结果判断？
用于分枝杆菌属的细菌染色
原理-分枝杆菌细胞壁含有大量类脂，一般不容易着色，但经加温或延长染色时间着色后，能抵抗盐酸乙醇的脱色，从而被染成红色。
方法－将固定后标本用百分之5苯酚复红液加温染色5分钟，然后用百分之3
盐酸乙醇脱色至用乙醇冲洗标本膜，从膜上流下的乙醇无色为止，水洗后用亚甲蓝复染1分钟，水洗后吸干镜检。
结果判断：抗酸性细菌因能抵抗盐酸乙醇的脱色而保持红色，非抗酸性细菌则被染成蓝色。
21培养基物理性状分为液体，半固体和固体培养基
22细菌在各培养基上的生长现象。
固体培养基－细菌菌落的描述－大小，形状，突起或扁平或凹陷，边缘，颜色，表面，透明度，黏度。
有光滑型，粗糙型黏液型菌落。
与鉴定细菌有关的菌落特征－溶血常分为α溶血环β溶血环γ溶血环，色素，气味
液体培养基－大多数为均匀浑浊，链状排列菌为沉淀生长，专性需氧菌一般呈表面生长，常形成菌膜。
半固体－若在穿刺线两侧可见羽毛状或云雾状混浊生长，则为阳性。只能沿穿刺线呈明显的现状生长，穿刺线两边的培养基仍然澄清透明，为动力试验阴性。23IMViC KIA MIU 试验分别指什么？分别简述各项试验的原理及方法？
IMViC-I指靛基质试验，M指甲基红试验，Vi指V-P试验，C指枸橼酸盐试验。KIA-克氏双糖铁琼脂培养基试验
MIU-动力靛基质尿素酶试验。
靛基质试验—细菌内的色氨酸酶分解色氨酸产生吲哚，在加入对二甲氨基苯甲醛后生成玫瑰吲哚，为阳性。方法-将细菌接种蛋白胨水后在37度条件下恒温培养24小时后取出加入靛基质试剂0.5ml，观察两液面交界处，若有红色生成为阳性，无反应为阴性。
甲基红试验-细菌分解葡萄糖后产酸使培养基内的PH到4.4以下，则加入甲基红指示剂后甲基红变红，若细菌的产酸量少或将酸进一步分解为其它物质使PH到5.4以上，则加入甲基红后呈橘黄色。方法-将细菌接种至葡萄糖蛋白胨水后37度下培养24小时，取出后加入甲基红试剂，变红为阳性，黄色为阴性。
V-P试验-细菌使丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，乙酰甲基甲醇在碱性溶液中被氧气氧化成双乙酰，双乙酰在a-萘酚，肌酸作用下生成红色化合物。方法-将细菌接种于葡萄糖蛋白胨水中，在37度条件下培养24小时后加入肌酸和NaOH溶液，在48-50度下水浴两小时，充分振动后观察结果，红色为阳性。
枸橼酸盐-某些细菌能分解枸橼酸钠和铵盐，产生碳酸钠和氨，使溴麝香草酚蓝由淡绿变成深蓝。方法-接种含枸橼酸盐和铵盐及溴麝香草酚蓝的固体培养基，在37度培养24小时后培养基变成深蓝则为阳性，不变蓝则为阴性。
MIU-其琼脂量降低一倍，培养基中含有酚红指示剂，尿素，蛋白胨。琼脂量降低一倍后更有利于观察细菌动力，由于蛋白胨中含有色氨酸则含有色氨酸酶的细菌在分解色氨酸后产生吲哚，加入靛基质实际后生成玫瑰吲哚为阳性。若细菌中含有脲酶则在分解尿素后产碱使酚红指示剂变红为阳性。方法-取菌落穿刺接种于MIU培养基内在35度条件下培养24小时后取出，若细菌沿穿刺线混浊扩散生长，则为动力阳性，若培养基变红则为脲酶阳性，若加入靛基质试剂后生成红色则为靛基质试验阳性。
KIA方法-取菌落穿刺到KIA培养基深层，离管底3-5mm后沿穿刺线取出，在斜面上有下至上做曲线划线。接着在37度条件下培养24小时，观察结果。
24简述药敏试验K-B法的原理及方法。
将含有一定量抗菌药物的纸片贴在已经接种待测菌的琼脂平板表面，纸片中的药物吸收琼脂中的水分溶解后，不断地向纸片周围琼脂中扩散，形成递减的浓度梯度。在纸片周围抑菌浓度范围内待测菌的生长被抑制，形成透明的抑菌圈。根据抑菌圈的大小可判断待测菌对被测定药物的敏感程度。
方法-以无菌棉签沾取适量含菌的菌液后在M-H琼脂表面均匀涂布3次，最后一
次涂布完毕后沿培养皿壁涂一圈，贴药片时注意纸片分布均匀，各纸片中心距离大于24毫米，距平板内源应大于15毫米。在37度条件下培养24小时后观察结果。
25病原性球菌主要包括哪些种类？
革兰阳性球菌-葡萄球菌，链球菌，肺炎链球菌，肠球菌等，革兰阴性球菌-脑膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌和布兰汉菌等。
26在血平板上产生
α溶血环β溶血环及不溶血的化脓性球菌分别有哪些？
α溶血环-肺炎链球菌，甲型溶血性链球菌β溶血环-乙型溶血性链球菌，金黄色葡萄球菌，无溶血-表皮葡萄球菌，腐生葡萄球菌，脑膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌，丙型溶血性链球菌。
27金黄色葡萄球菌的鉴定依据？
镜下形态为革兰阳性球菌，葡萄状排列；菌落特点为血平板上为中等大小，圆形突起，光滑湿润，有透明的β溶血环，金黄色菌落；生化反应，血浆凝固酶试验，发酵甘露醇，耐热核酸酶试验为阳性。
29葡萄球菌属与链球菌属如何鉴别？
30简述脑膜炎球菌与淋病奈瑟菌的标本采集注意事项，这两种细菌镜下形态特点，常用的分离培养基是？其初次分离培养需要什么条件？其菌落特点？
脑膜炎标本采集后应立即送检，或用预温平板进行床边接种后立即置37度培养。镜下观为—中性粒细胞内，外有革兰阴性双球菌。初次分离时需5到10%二氧化碳才能生长，分离培养基为巧克力平板，圆形，凸起，光滑，湿润，灰褐色的菌落。
淋病标本采集后应立即送检，在冬季运送过程中应采取保温措施。镜下观为中性粒细胞内有革兰阴性双球菌。初次分离需供给5%二氧化碳，只能在巧克力平板和专用选择培养基中生长，圆形，凸起，灰白色，直径0.5-1.0mm的光滑型菌落。31血浆凝固酶试验的原理及意义？
原理-致病性葡萄球菌可产生两种血浆凝固酶，一种是与细胞壁结合的凝固酶，称凝聚因子，可作用于血浆中的纤维蛋白原来使其变成纤维蛋白，玻片法检测。意义-用于鉴定金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌，常作为鉴定葡萄球菌致病性的主要依据之一。金黄色葡萄球菌为阳性，表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌为阴性。32写出葡萄球菌的微生物学检验程序。
采集脓汁，渗出液，血液，尿液，分辨，痰液以及脑脊液等在血平板和普通平板上接种后在37度条件下进行24小时的分离培养。取可疑菌落进行药敏试验和涂
片染色镜检，血浆凝固酶试验，爱惹核酸酶试验，API葡萄球菌鉴定试剂盒，staph-aurex胶乳凝集试验。最后进行报告。
33肠杆菌科有哪些共同特性？肠道杆菌中无动力的细菌是？
均为革兰阴性杆状或球杆状，中等大小，无芽胞，多数有鞭毛，能运动。致病菌株有菌毛。抗原主要包括0抗原，H抗原和表面抗原3种。在普通培养基上生长良好，兼性厌氧。生化反应中触酶，硝酸盐还原为阳性，氧化酶阴性。发酵葡萄糖并产酸。抵抗力不强，加热60度，30分钟即被杀死，不耐干燥，对一般化学消毒剂均敏感。对低温有耐受力。能耐胆盐，能抵抗染料的抑菌作用。遗传变异型-S-R变异，H-O变异，抵抗力不强。
志贺菌，克雷伯菌，鼠疫耶尔森菌
35，肠道杆菌常用的选择培养基有哪几种，其鉴别用糖是什么？
SS,乳糖，KIA，葡萄糖，EMB乳糖，MAC，乳糖。
38引起肠道感染的大肠埃希菌有哪几种？其中那种与痢疾杆菌的生物学特性和致病特点相似，可通过哪些试验鉴别。
五种：肠毒素型，肠致病型，肠侵袭型，肠凝聚型，肠出血型。
肠侵袭型-EIEC，引起肠炎，主要侵犯肠粘膜细胞，在粘膜上皮细胞内增殖，并破坏上皮细胞，出现发热腹痛，水泻或典型的菌痢样症状，出现脓血黏液便
志贺菌的特点：无动力，赖氨酸阴性，发酵糖产酸，不产气，分解黏多糖，在醋酸盐和枸橼酸盐琼脂上产碱。
39肥达反应的原理，结果分析及意义？
用已知伤寒沙门菌O抗原和H抗原以及甲乙和丙型副伤寒沙门菌H抗原与受检血清做试管或微孔板定量凝集试验，来测定受检爱你这血清中有无响应抗体及其效价的试验。
结果分析-正常值：通常是沙门菌O凝集效价≥1：80，H凝集效价≥1：160，或副伤寒沙门菌H效价≥1：80有诊断意义。动态观察：若效价逐次递增或恢复其效价比初次≥4倍以上，则具有诊断意义。O抗体与H抗体的诊断意义，少数病例在整个过程中肥大反应结果未见异常，其原因可能是早期使用抗生素治疗，或患者免疫功能低下所致。
40伤寒沙门菌与甲乙丙型副伤寒沙门菌如何鉴别。
用沙门菌D 抗原多家血清与D,H,Vi抗原的银子血清判定沙门菌血清型，用抗血清对所分离菌种的D抗原，Vi抗原第1，2相H抗原进行凝集试验。先用多家抗D血清（A-F）进行分群，95%以上都属于A-F群，再分别用单价因子血清定群，用H因子血清检查H抗原,综合D,H及Vi因子血清的检查结果进行判断。
41何谓外斐反应？变形杆菌在SS平板上的菌落有何特点，与哪种肠道致病菌相似，可通过什么试验鉴别？
临床上以变形杆菌X菌株O抗原与立克次体病患者血清做定量凝集试验，辅助诊断立克次体病。
产碱，产硫化氢菌株菌落，中心呈黑色。
与沙门菌相似，硫化氢阳性，苯丙氨酸脱氨酶阳性，脲酶阳性。
42弧菌有哪些共同特点？
菌体直或微弯，具有端极鞭毛，动力阳性，氧化酶试验阳性以及葡萄糖利用为发酵型的革兰阴性细菌。
43霍乱弧菌分哪几型？其镜下形态与培养各有什么特点，常用的增菌培养基及选择培养基有哪几种？
古典生物型和El-Tor生物型。
镜下观为革兰阴性菌，菌体弯曲成弧形或逗点状，细菌首位相接，平行排列呈鱼群状。
霍乱弧菌为碱性厌氧菌，营养要求不高，在普通培养基上生长良好，生长温度为18-37度，耐碱不耐酸，在PH8.5-9.2的碱性蛋白胨水或碱性琼脂平板上生长良好。
用碱性蛋白胨水做增菌培养，用TCBS培养基和庆大霉素琼脂做选择性培养基。44霍乱弧菌的标本采集有哪些注意事项？
以米泔水样便为主在患者用药之前采集，为避免因粪便发酵产酸而使细菌失活，采集的标本应及时立即接种于适宜的培养基，若不能立即接种，则需将标本放入碱性蛋白胨水或卡-布保存液中送检。
45霍乱弧菌鉴定常用的生化实验有哪些？
氧化酶试验，吲哚试验，硝酸盐试验，霍乱红试验，黏丝试验为阳性，能发酵葡萄糖，麦芽糖，蔗糖，甘露醇，半乳糖，左旋糖和可溶性淀粉产酸不产气，发酵乳糖，不产生硫化氢，赖氨酸脱羧酶和鸟氨酸脱羧酶试验为阳性。
46副溶血性弧菌的生物学特性和致病各有何特点？
革兰阴性菌，形态常为弧状，杆状，丝状等多形态。无芽胞和荚膜，菌体一端有单鞭毛，运动活泼。营养要求不高，但有嗜盐性，在碱性蛋白胨水中经35度培养6-9小时后，呈均匀混浊生长，并能形成菌膜。在35g/LNACL营养琼脂上呈蔓延生长，菌落边缘不整齐，凸起，光滑湿润，不透明，TCBS撒谎那个形成蓝绿色菌落。能在海水中生存近50d。
致病性：致病物质-耐热直接溶血素，耐热相关溶血素。可导致人类食物中毒或急性肠胃炎，还可引起浅表创伤感染，败血症等
47幽门螺杆菌的快速诊断试验有哪些？
直接染色镜检，快速脲酶分解试验，碳标记呼吸试验，血清学诊断，分子生物学技术。
48什么叫非发酵菌？非发酵菌的分群依据是什么？其与肠道杆菌的主要鉴别试验是?
是指一群不利用或仅以氧化性是利用糖类的革兰阴性无芽胞杆菌。
分群依据是生化反应，有假单胞菌属，不动杆菌属，窄食单胞菌属，产碱杆菌属，莫拉菌属等。其与肠道杆菌的主要鉴别试验是在麦康凯培养基上的生长情况。49同绿假单胞菌菌落有什么特点，其生化反应特点？
在血琼脂，麦康凯琼脂培养基上，均可形成5种不同形态的菌落：典型型，大肠埃希菌样型，侏儒型，粗糙型。在普通琼脂培养基上可产生绿脓素和荧光素。氧化酶阳性，在O/F培养基上，能氧化分解葡萄糖和木糖产酸，精氨酸双水解酶阳性，能利用枸橼酸盐，并能还原硝酸盐。
50不动杆菌与其他非发酵菌的主要区别是？不动杆菌的主要鉴定依据是？
无动力，氧化酶阴性。
镜下观为革兰阴性成双排列的球杆菌，动力，硝酸盐，脲酶，靛基质试验为阴性，不发酵葡萄糖，乳糖。
51流感嗜血杆菌在巧克力琼脂平板上的菌落特点？
灰白色，光滑，湿润，似露滴状，有荚膜的菌株呈轻度粘稠。
52白喉杆菌有哪些主要生物学特性？
菌体细长或微弯，一端或两端膨大呈棒状。革兰染色阳性，异染颗粒为本菌的鉴
别特征。需氧或兼性厌氧，营养要求高，普通培养基上不生长或生长不良。常用培养基有吕氏血清斜面或凝固鸡蛋培养基。血琼脂培养基。亚碲酸钾血琼脂培养基。分解葡萄糖，麦芽糖，果糖，半乳糖，产酸不产气，不分解乳糖，大多数不分解蔗糖，不产生吲哚，不消化蛋白，不液化名叫，不分解尿素，触酶阳性，氧化酶阴性。热抵抗力不强，有变异性。
53碳疽芽胞杆菌有哪些主要生物学特性，其鉴别试验有哪些？
为致病性杆菌中最大的革兰阳性杆菌，两端平截，呈竹节状。为需氧或兼性厌氧，营养要求不高，普通琼脂培养基上形成灰白色，边缘不整齐的粗糙型菌落，在低倍镜下观察呈卷发状。分解葡萄糖，麦芽糖，蔗糖，果糖。产酸不产气，水解淀粉，还原硝酸盐为亚硝酸盐，VP试验不稳定，硫化氢及吲哚试验为阴性。卵磷脂酶弱阳性。抗原构造：炭疽霉素，菌体抗原，荚膜抗原，芽胞抗原，煮沸10分钟或者干热140度30分钟103.4KPA高压蒸汽15分钟才可杀死。
鉴别试验：青霉素抑制试验，串珠试验，青霉素和串珠试验，噬菌体裂解试验，NAHCO2毒力试验，植物凝集素试验。
54简述结合分歧杆菌的形态及培养特性？
为细长或略带弯曲的杆菌，在培养基中可呈球状或丝状，陈旧培养物或干酪化的淋巴结中可见到分枝状。
为专性需氧，8-12%二氧化碳可刺激其生长。培养温度适应范围较大35-40度均可生长，生长时还需一定湿度。固体培养基上一般2-4周才长出菌落。
55试述OT试验的原理，方法，结果，意义和应用原则。
57简述结合杆菌的致病物质，所致疾病
致病物质：脂质，蛋白质和多糖。通过呼吸道，消化道和受损伤的皮肤侵入易感机体，引起多种组织和器官的结核病。如肺结核，肠结核，结核性腹膜炎等。名词解释：
PPD：证明结核菌素是蛋白质成分，可激发机体的结核菌属反应。
麻风细胞：麻风分枝杆菌为典型的胞内寄生菌，有麻风分枝杆菌存在的细胞呈泡沫状。
抗酸杆菌：能抵抗3%盐酸乙醇的脱色作用的杆菌。
Much颗粒：曾在组织中发现的革兰阳性的非抗酸颗粒，接种动物可产生典型的结核病变。
串珠试验：将炭疽杆菌接种到含青霉素0.05-0.50U/ml的青霉素培养基中经37度六小时培养后，在显微镜下可见大而均匀的圆球体呈串珠状排列。
异染颗粒：指白喉杆菌菌体的染色性不均匀而出现的染色较深的颗粒。
卫星现象：指流感嗜血杆菌生长在金葡萄球菌周围处的菌落增大现象。
SPA-葡萄球菌A蛋白，存在于细胞壁表面，90%以上的金黄色葡萄球菌由此抗原。微生物：是一群个体微小、结构简单、肉眼不能直接看到，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百几千甚至几万倍才能看到的微小生物。
需氧菌—进行有氧呼吸的细菌。
厌氧菌—进行无氧呼吸的细菌。
兼性厌氧菌—既能进行有氧呼吸又能进行无氧呼吸的细菌。
正常菌群—对宿主一般无害，甚至有益的称为正常菌群。
条件致病菌—正常菌群在体内具有相对稳定性，一般不治病，只有当机体免疫力降低，集聚部位改变或菌群失调时方可致病。
菌群失调症—严重的菌群失调可使宿主发生一系列临床症状，临床上一般称为二重感染。
消毒—是指杀死物体上病原微生物的方法。
灭菌—是指杀死物体上所有微生物的方法。
无菌—不含活菌的意思。
无菌操作—为了防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。
噬菌体—是感染细菌，真菌，放线菌，螺旋体等微生物的一类病毒，因能导致宿主菌细胞裂解，故称噬菌体。
培养基－用人工配制的适合细菌等微生物生长繁殖的营养基质。
药敏试验—是指在体外测定药物抑制或杀死细菌或真菌的能力的试验。
菌血症-细菌在局部生长繁殖，偶尔或间歇性侵入血液，但不再血液中繁殖，所引起的全身症状。
败血症-细菌侵入血液，并在其中生长繁殖，引起严重的全身中毒症状。
毒血症-病原菌在局部生长繁殖本身不进入血液，只有其产生的外毒素进入血液，随血液循环到达敏感的组织细胞引起特殊的临床症状。
脓毒血症-化脓性细菌由原发感染侵入血液，并大量繁殖。随血液循环扩散到机体其他组织器官引起新的多发性化脓灶。
医院感染—指病人在医院内发生的感染。
常见的微生物检测方法
常见的微生物检测 方法
摘要：微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常见的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 概述： 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其它生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，一般情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长一般指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同
时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和她们的生长抑制紧密相关。因此有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，因此测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，能够从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 生长量测定法 体积测量法：又称测菌丝浓度法。 经过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法：
微生物标准操作流程
目录 生物安全柜操作规程及维护 (3) 实验室高压蒸气灭菌器操作程序 (6) 物体表面细菌监测 (8) 医护人员手指细菌监测 (9) 空气中细菌含量的监测 (10) 环境卫生学监测质控标准 (12) 使用中消毒剂与无菌物品保存液的质控程序 (13) 一次性医疗用品微生物监测 (14) 紫外线消毒质量控制程序 (15) 污水的细菌监测(总大肠菌群) (16) 正确洗手的手法 (18)
生物安全柜操作规程及维护 1.目的： 为了满足生物安全操作的要求，并且达到在操作时保护操作人员的目的，使细菌操作达到无菌操作的要求，便于操作的标准化。 2.原理： 通过使用空气超高过滤器（ULPA）的过滤，使仪器内部的空气洁净度达到100级，使细菌的一般操作限制在一个相对密闭的环境中，不但保护操作人员，还可满足操作的标准化。 3.工作条件： 环境温度：18－30℃相对湿度：<80% 安装的环境必须达到一定的洁净度；远离人员通道及有潜在干扰气流的位置；柜后及两侧各留30cm的空隙，顶部30-35cm空隙。 环境必须有良好的通风设备。 4、操作步骤： 生物安全柜的设置已经设置完全，如果需要重新设置请参看HFsafe生物安全柜使用说明。具体操作步骤为： 4.1将电源插头插入准备好的固定插座，连通电源。 4.2有系统管理员(即本室负责人)开启玻璃门门锁，并将总开关置于开位置“！”，此时系统开始上电。 4.3检查显示及按钮的各项功能，具体见后附注（注意：UV灯的测试除外，开启UV灯时必须将前玻璃门关闭）。 4.4当系统稳定后，对设备进行安全性检查。（检查项目包括：工作室平均垂直风速；工作室内可操作区域洁净度达到100级；设备的密封有没有被破坏。所有的安全检查项目中的洁净度建议由当地卫生防疫部门来进行尘埃粒子数、沉降菌和菌落数的检测，看是否符合其工作室的洁净度要求）。 4.5如果安全性测试通过，系统已经可以使用，请在《使用记录》上写下相应的信息。在使用时需要注意的是，操作必须在工作台板无孔区域进行，物品也必须放置于无孔区域。 4.6操作者应先把手臂放进安全柜内大约1分钟，以使柜子适应并且让气流扫过手臂手臂移入移出柜内应保持前门气流的连续性，应缓缓移入移出，并且方向和前门垂直；为使跨越前门的动作量降低，在实验开始前应把所需的物品放入柜子；柜子在开始工作前以及完成后至少要运行5分钟是，使柜子净化，以便于污染空气从柜内排出。实验操作方向应从清洁区到污染区，一般要求为左→右。 4.7 当工作完成后需要关机前，将试验使用的所有材料和其他物品从设备中取出。
微生物专业词汇汇总
微生物学英语词汇 微生物学microbiology 病毒学virology 噬菌体学bacteriophagology 细菌学bacteriology 鉴定细菌学determinative bacteriology 系统细菌学systematic bacteriology 真菌学mycology 原生生物学protistology 原生动物学protozoology 普通微生物学general microbilogy 微生物分类学microbial taxonomy 微生物生理学microbial physiology 微生物生物化学microbial biochemistry 微生物遗传学microbial genetics 微生物生态学microbial ecology 古微生物学paleomicrobiology 土壤微生物学soil microbiology 水生微生物学aquatic microbiology 海洋微生物学marine microbiology 悉生生物学gnotobiology 医学微生物学medical microbiology 兽医微生物学veterinary microbiology 农业微生物学agricultural microbiology 工业微生物学industrial microbiology 石油微生物学petroleum microbiology 食品微生物学food microbiology 乳品微生物学diary microbiology 瘤胃微生物学rumen microbiology 诊断微生物学diagnostic microbiology 病原学etiology 国际微生物学会联合会International Union of Microbiological Societies, IUMS 中国微生物学会Chinese Society for Microbiology, CSM 世界培养物保藏协会World Federation for Culture Collection, WFCC 中国微生物菌种保藏管理委员会China Committee for Culture Collection of Microorganisms, CCCCM 美国模式培养物保藏所American Type Culture Collection, ATCC 自然发生说，无生源说spontaneous generation, abiogenesis 原界urkingdom 始祖生物progenote 古始生物界archetista 古细菌archaebacteria 原生生物protista 原生动物protozoan 原生植物protophyte 真核生物eukaryote 原核生物prokaryote 裂殖植物schizophyte 微生物microorganism 数值分类法numerical taxonomy 模式目type order 模式科type family 模式属type genus 模式种type species 模式株type strain 真菌fungi 捕食真菌predacious fungi 虫道真菌ambrosia fungi 地下真菌hypogeal fungi 虫生真菌entomogenous fungi 菌根真菌mycorrhizal fungi 木腐菌wood-decay fungi 霉菌mold, mould 半知菌imperfect fungi 子囊菌ascomycetes 粘菌slime mold, slime mould 壶菌chytrid 卵菌oomycetes 接合菌zygomycetes 担子菌basidiomycetes 核菌pyrenomycetes 盘菌cup fungi 块菌truffles 锈菌rust fungi 蘑菇mushrooms 毒蘑菇poisonous mushroom 酵母菌yeast 无孢子酵母菌asporogenous yeasts 有孢子酵母菌sporogenous yeasts 黑粉菌smut fungi
土壤微生物生物量的测定方法
土壤微生物生物量的测定方法1土壤微生物碳的测定方法（熏蒸提取----仪器分析法） 基本原理 新鲜土样经氯仿熏蒸后（24h），土壤微生物死亡细胞发生裂解，释放出微生 物生物量碳，用一定体积的LK 2SO 4 溶液提取土壤，借用有机碳自动分析仪测定微 生物生物量碳含量。根据熏蒸土壤与未熏蒸土壤测定有机碳的差值及转换系数（K EC），从而计算土壤微生物生物量碳。 实验仪器 自动总有机碳（TOC）分析仪（Shimadzu Model TOC—500,JANPAN）、真空干燥器、烧杯、三角瓶、聚乙烯熟料管、离心管、滤纸、漏斗等。 实验试剂 1）无乙醇氯仿（CHCL 3 ）； 2）L硫酸钾溶液：称取87g K 2SO 4 溶于1L蒸馏水中 3）工作曲线的配制：用L硫酸钾溶液配制10ugC/L、30ugC/L、50ugC/L、 70ugC/L、100ugC/L系列标准碳溶液。（其实一般情况下， 仪器会自带的标曲，一般不用自己做的） 操作步骤 土壤的前处理（过筛和水分调节略） 熏蒸 称取新鲜（相当于干土，这个可以根据自己土样的情况而定）3份分别放入25ml小烧杯中。将烧杯放入真空干燥器中，并放置盛有无乙醇氯仿（约2/3）的15ml烧杯2或3只，烧杯内放入少量防暴沸玻璃珠，同时放入一盛有NaOH溶液的小烧杯，以吸收熏蒸过程中释放出来的CO 2 ，干燥器底部加入少量水以保持容器湿度。盖上真空干燥器盖子，用真空泵抽真空，使氯仿沸腾5分钟。关闭真空干燥器阀门，于25℃黑暗条件下培养24小时。 抽真空处理 熏蒸结束后，打开真空干燥器阀门（应听到空气进入的声音，否则熏蒸不完
全，重做），取出盛有氯仿（可重复利用）和稀NaOH溶液的小烧杯，清洁干燥器，反复抽真空（5或6次，每次3min，每次抽真空后最好完全打开干燥器盖子），直到土壤无氯仿味道为止。同时，另称等量的3份土壤，置于另一干燥器中为不熏蒸对照处理。（注意：熏蒸后不可久放，应该快速浸提）※ 浸提过滤 从干燥器中取出熏蒸和未熏蒸土样，将土样完全转移到80ml聚乙烯离心管中，加入40ml L硫酸钾溶液（土水比为1:4，考虑到土样的原因，此部分熏蒸和不熏蒸土均为4g，即，4g土：16ml的硫酸钾溶液，当然这个加入量要根据TOC仪器的进入量决定）300r/min振荡30min，用中速定量滤纸过滤。同时作3个无土壤基质空白。土壤提取液最好立即分析，或—20℃冷冻保存（但使用前需解冻摇匀）（注意这部分很重要，有研究结果表明：提取液如果不立即分析，请保存在—20℃，否则将影响浸提液的效果，其次，过滤时不要用普通的定性或定量滤纸，以免长久杂质会堵塞仪器的管路，建议使用那种一次性塑料注射器，配一个的滤头，一个才1元）。 TOC仪器测定 吸取上述土壤提取液10ul（这个要根据仪器自己的性能决定，但是一般情况下，在测定土壤滤液时候，要对其进行稀释，如果不稀释，一方面超过原来仪器的标曲，另一方面可能堵塞仪器。）注入自动总有机碳（TOC）分析仪上，测定提取液有机碳含量。由于总有机碳分析仪型号较多，不同的型号则操作程序存在较大差异，这里以本实验室使用的有机碳分析仪（Shimadzu Model TOC---500,JAPAN）为例。 计算 SMBC=(E C CHCL3—E C CK)*TOC仪器的稀释倍数*原来的水土比/ 2 土壤微生物生物量氮（茚三酮比色法） 土壤微生物生物氮一般占土壤全氮的2%—7%，是土壤中有机—无机态氮转化的一个重要环节，关于土壤微生物氮的测定常见的熏蒸浸提法有两种，一是全氮测定法，另一个是茚三酮比色法，如下 基本原理（茚三酮比色法）
微生物计数方法
微生物的显微直接计数法 一、实验目的 了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法，掌握显微镜下直接计数的技能。 二、实验原理 测定微生物细胞数量的方法很多，通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。 显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质，常不易分辨。菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板，一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽（Petrof Hausser）细菌计数板。两种计数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，可以使用油镜观察。而血球计数板较厚，不能使用油镜，计数板下部的细菌不易看清。 血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个计数区（图21-1），计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。 计数区边长为1mm，则计数区的面积为l mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为1/4000mm3。 使用血球计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微生物细胞的数量。 已知：1mm3体积=10 mm×10 mm×10 mm= 1000mm3 所以：1mm3体积应含有小方格数为1000mm3/1/4000mm3=4×106个小方格，即系数K=4×106。 因此：每ml菌悬液中含有细胞数= 每个小格中细胞平均数（N）×系数（K）×菌液稀释倍数（d） 三、实验器材 1．活材料：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）斜面或培养液。 2．器材：显微镜、血球计数板、盖玻片（22mm×22mm）、吸水纸、计数器、滴管、擦镜纸。 四、实验方法 1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释到10-2），以每小格的菌数可数为度。 2．取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。 3．将酵母菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。也可以将菌悬液直接滴加在计数区上，不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高。然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。4．静置片刻，将血球计数板置载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。 5．计数时若计数区是由16个大方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个大方格（即100小格）的菌数。如果是25个大方格组成的计数区，除数上述四个大方格外，还需数中央l个大方格的菌数（即80个小格）。如菌体位于大方格的双线上，计数时则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。
微生物检测流程
食品微生物检测标准 受控状态： 文件编号：H-XM-PGZY-10 颁发部门：品管部 接收部门：品管部 发布日期：// 实施日期：//
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微生物检测目录
食品接触面微生物检测 一、目的： 检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，生产区域环境当中病原微生物的监控，达到规定标准，以控制食品成品的质量。 二、范围： 标准适用于盘锦兴牧肉联加工集团有限公司食品接触面微生物的检测。 三、采样与检测方法： 3.1、空气微生物采样（自然沉降法） 3.1.1、采样布点要求 (1)室内面积不足50m2的设置3个采样点，50m2以上的设置5个采样点。（2）采样点按均匀布点原则布置，室内3个采样点的设置在室内对角线四等分的3个灯分点上，5个采样点的按梅花布点。 （3）采样点距离地面高度1.2m-1.5m,距离墙壁不小于1m。 （4）采样点应避开通风口、通风道等。 （2）采样方法 采样时，将含平板计数琼脂培养基的平板(直径9 cm)置采样点并避开空调、门窗等空气流通处，打开平皿盖，使平板在空气中暴露5min(静态)，送检时间不得超过6h，若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24h。 3.1.2、菌落培养： （1）将已采集样品的培养基在6 h内送实验室，细菌总数于37℃±1℃培养
48h观察结果，计数平板上细菌菌落数。 （3）菌落计算： a) 记录平均菌落数，用“个/皿”来报告结果。用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，不可遗漏。 b) 若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2 个或2 个以上菌落计数。 c)计数每块平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数，检验 结果以每平皿菌落数（CFU/皿） 3.2、车间设备、工器具（作业前/后）表面采样与检测方法： 3.2.1、样品采集范围： a)在设备、工器具加工前/后进行擦拭检验，以便了解车间卫生清扫消毒情况。 b)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间可疑处进行擦拭，如有检验不合格点，整改后再进行擦拭检验。 c)对工作表面消毒产生怀疑时，进行擦拭检验。 d)正常生产状态的擦拭，每周一次。 3.2.2、采样方法： 用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面取25 cm2的面积，在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管待检。 3.3、车间工人手、手套（作业前、后）采样及检测方法 3.3.1、样品采样范围：各班组在线工人生产前/后手、手套进行抽检。
微生物检验手册(中文)
1、实验材料 2、试剂 氯化钠(Sigma) 平板计数琼脂PCA(DIFCO) 3次超纯水 3、试剂配制方法 （1）0.85%NaCl (250 ?) (2)Plate Count Agar （100 ?） Plate Count Agar(DIFCO) 2.35 g3次超纯水100 ?，121 ℃15分钟灭菌。 (3) 0.85% NaCl (100 ?) 4、实验步骤 所有微生物实验中，除均质在无菌室进行，其余的操作都要在超净工作台内。 （1）无菌操作取25g或25ml样品，加入225 ?灭菌生理盐水；均质2分钟。 （2）取1?样液加入到9 ?生理盐水试管中。 （3）依次做10倍梯度稀释。 （4）从合适的梯度中取1 ?加到无菌平板中（做2个平板），加入20 ?平板计数琼脂，混匀。
（5）冷凝后放到35±1℃培养箱中培养24~48h。 （6）菌落计数 ★菌落总数试验方法 ↓ ↓ 4．菌落计数(所有菌落定量实验都采取这种方法) 韩国方法中要求每个平板中30－300内的计数 参照GB/T 4789.2-2003 食品卫生微生物学检验菌落总数测定
定性实验： 1. 实验材料 2. 试剂 3. 试剂配制方法 (1) 0.85% NaCl (250 ?) (2) Brilliant Green Lactose Broth (100? ) (3) EMB Agar (DIFCO) (100? ) NaCl Brilliant Green Lactose Broth (DIFCO) EMB Agar (DIFCO) 营养琼脂 (DIFCO) 3次超纯水 革兰氏染色试剂条 (MERCK)
土壤微生物量碳测定方法
土壤微生物量碳测定方法及应用 土壤微生物量碳（Soil microbial biomass）不仅对土壤有机质和养分的循环起着主要作用，同时是一个重要活性养分库，直接调控着土壤养分（如氮、磷和硫等）的保持和释放及其植物有效性。近40年来，土壤微生物生物量的研究已成为土壤学研究热点之一。由于土壤微生物的碳含量通常是恒定的，因此采用土壤微生物碳(Microbial biomass carbon, Bc)来表示土壤微生物生物量的大小。测定土壤微生物碳的主要方法为熏蒸培养法（Fumigation-incubation, FI）和熏蒸提取法（Fumigation-extraction, FE）。 熏蒸提取法（FE法） 由于熏蒸培养法测定土壤微生物量碳不仅需要较长的时间而且不适合于强酸性土壤、加 入新鲜有机底物的土壤以及水田土壤。Voroney (1983)发现熏蒸土壤用·L-1K 2SO 4 提取液提取 的碳量与生物微生物量有很好的相关性。Vance等(1987)建立了熏蒸提取法测定土壤微生物 碳的基本方法：该方法用·L-1K 2SO 4 提取剂（水土比1：4）直接提取熏蒸和不熏蒸土壤，提取 液中有机碳含量用重铬酸钾氧化法测定；以熏蒸与不熏蒸土壤提取的有机碳增加量除以转换 系数K EC (取值来计算土壤微生物碳。 Wu等（1990）通过采用熏蒸培养法和熏蒸提取法比较研究，建立了熏蒸提取——碳自动一起法测定土壤微生物碳。该方法大幅度提高提取液中有机碳的测定速度和测定结果的准确度。 林启美等（1999）对熏蒸提取-重铬酸钾氧化法中提取液的水土比以及氧化剂进行了改进，以提高该方法的测定结果的重复性和准确性。 对于熏蒸提取法测定土壤微生物生物碳的转换系数K EC 的取值，有很多研究进行了大量的 研究。测定K EC 值的实验方法有：直接法（加入培养微生物、用14C底物标记土壤微生物）和间接法（与熏蒸培养法、显微镜观测法、ATP法及底物诱导呼吸法比较）。提取液中有机碳的 测定方法不同（如氧化法和仪器法），那么转换系数K EC 取值也不同，如采用氧化法和一起法 K EC 值分别为（Vance等，1987）和（Wu等，1990）。不同类型土壤（表层）的K EC 值有较大不 同，其值变化为（Sparling等，1988，1990；Bremer等，1990）。Dictor等（1998）研究表 明同一土壤剖面中不同浓度土层土壤的转换系数K EC 有较大的差异，从表层0-20cm土壤的K EC 为，逐步降低到180-220cm土壤的K EC 为。 一、基本原理 熏蒸提取法测定微生物碳的基本原理是：氯仿熏蒸土壤时由于微生物的细胞膜被氯仿破 坏而杀死，微生物中部分组分成分特别是细胞质在酶的作用下自溶和转化为K 2SO 4 溶液可提取 成分（Joergensen,1996）。采用重铬酸钾氧化法或碳-自动分析仪器法测定提取液中的碳含量，以熏蒸与不熏蒸土壤中提取碳增量除以转换系数K EC 来估计土壤微生物碳。 二、试剂配制 （1）硫酸钾提取剂（·L-1）：取分析纯硫酸钾溶解于蒸馏水中，定溶至10L。由于硫酸钾较难溶解，配制时可用20L塑料桶密闭后置于苗床上（60-100rev·min-1）12小时即可完全溶解。 （2） mol·L-1（1/6K 2Cr 2 O 7 ）标准溶液：称取130℃烘2-3小时的K 2 Cr 2 O 7 （分析纯）9.806g 于1L大烧杯中，加去离子水使其溶解，定溶至1L。K 2Cr 2 O 7 较难溶解，可加热加快其溶 解。 （3） mol·L-1（1/6K 2Cr 2 O 7 ）标准溶液：取经130℃烘2-3小时的分析纯重铬酸钾4.903g， 用蒸馏水溶解并定溶至1L。
微生物大小与数量的测定实验报告
山东大学实验报告2017年11月27日 ________________________________________ _________________________ 科目：微生物学实验题目：微生物大小与数量的测定姓名：丁志康 一、目的要求 1.学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法。 2.增强微生物细胞大小的感性认识。 3. 明确血细胞计数板计数的原理。 4. 掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。 二、基本原理 一）微生物大小的测定 1.微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。微生物 大小的测定，需要在显微镜下，借助于特殊的测量工具——测微尺，包括目镜测 微尺和镜台测微尺。 2.镜台测微尺是中央部分可有精确等分线的载玻片，一般是将1mm等分为100格每 格长0.01mm（即10μm）。镜台测微尺并不直接用来测量细胞的大小，而是用于 矫正目镜测微尺每格的相对长度。 3.目镜测微尺是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有 等分为50小格和100小格两种。测量时，需将其放在接目镜中的隔板上，用以 测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大 倍数不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也不一样。因此，用目镜测微尺 测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定大放 大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。然后根据微生物 细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计算出细胞的实际大小。 4.球菌用直径来表示其大小；杆菌则用宽和长的范围来表示。如金黄色葡萄球菌直 径约为0.8μm，枯草芽孢杆菌大小为0.7~0.8×2~3μm。 二）微生物数量的测定 1.微生物数量的测定有多种方法，本次试验中使用显微镜直接计数法。显微镜直接 计数法是将少量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻 片上(又称计菌器)，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前 国内外常用的计菌器有：血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器以及Hawksley 计菌器等，它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数，基本原理相同。 后两种计菌器由于盖上盖玻片后，总容积为0.02mm3，而且盖玻片和载波片之间 的距离只有0.02mm，因此可用油浸物镜对细菌等较小的细胞进行观察和计数。（除 了用这些计菌器外，还有在显微镜下直接观察涂片面积与视野面积之比的估算法， 此法一般用于牛乳的细菌学检查。)显微镜直接计数法的优点是直观、快速、操
微生物的分类
第十一章微生物的分类习题 一、填空题 1、以进化论为指导思想的分类学，其目的已不仅是物种的识别和归类，而主要是通过分类追溯系统发生，推断进化谱系，这样的分类学也称。（生物系统学） 2、大量资料表明：功能重要的大分子或功能重要的大分子区域比功能不重要的分子或分子区域进化变化的。（速率低） 3、微量多项试验鉴定系统，实际上是一类专门设计制作的特征检测卡。（生理生化） 4、《伯杰氏系统细菌学手册》第一版分卷出版，它将原核生物分成组。（4、 33） 5、微生物种的学名由和两部分构成。（属名种名加词） 6、分类学的内容涉及3个互相依存又有区别的组成部分，即、命名和。（分类，鉴定） 7、如果相似性系数（S ）等于1，说明所比较的两菌株rRNA序列， AB 值小于0.1，则表明两菌株亲缘关系。（相同，很远） 若S AB 8、API/ATB是微量多项试验鉴定系统，它包括众多的，共计有几百种生理生化反应，可鉴定几乎所有常见的。（鉴定系统，细菌）9、微孔滤膜菌落计数板是一种可携带的检测水中大肠菌数的大肠菌测试卡，因可以放在人体内衣口袋中培养，而适于工作和使用。（野外，家庭） 10、伍斯用寡核苷酸序列编目分析法对微生物的16S?rRNA序列进行比较后，提出将生物分成三界（域）：、、和。（古细菌真细菌真核生物） 11、伍斯为了避免把古细菌也看作是细菌的一类，他又把三界（域）改称为：、、和。并构建了三界（域）生物的系统树。（细菌古细菌真核生物） 二、选择题 1、《伯杰氏系统细菌学手册》第二版把葡萄球菌属和微球菌属分别放在不同的门中，最可能的原因是（ 4 ）。 （1）生理生化特征不同（2）DNA—DNA杂交同源性不同
微生物基础知识试题资料
微生物基础知识试题 部门：____________ 姓名：______________ 成绩：____________ 一、填空题（每空2分，共40分） 1、微生物的形体极度小，必须借助于_____________或______________放大数， 百倍、千倍至数万倍，常用______________、______________作为测量单位。 2、微生物分布广泛，存在于_________、_______、_________、______________ 、______________之表以及______________。 3、原核细胞生物由_____________构成，真核细胞生物多数由_____________组成。 4、利用某种微生物制成_____________或____________为人类预疾病。 5、活性粒子是夹带有大量_____________的粒子，非活性粒子是单纯的_____________粒 子。水是制药企业的____________或____________，由于水的污染，将直接导入污染源。 6、热力灭菌利用高温杀微生物可分为__________________、________________。 二、多项选择题（共15分） 1、来苏（甲酚皂）2%的水溶液用于（）消毒。 A．皮肤B、设备C、容器D、空气 2、常用的消毒剂75%的乙醇用于（）消毒。 A．皮肤工具B、设备C、容器D、空气 3、消毒剂用于表面活性剂0.1-0.2%的新洁尔灭液，用于（）消毒。 A．皮肤B、工具C、地漏D、容器 4、37-40%的甲醛液8-9ml/m3( )消毒。 A．皮肤B、工具C、地漏D、室内 5、常用的灭菌器主要有（） A．高压蒸汽灭菌器B、烘箱C、紫外线灯
土壤微生物生物量碳及其影响因子研究进展(精)
土壤微生物生物量碳及其影响因子研究进展3 黄辉(1陈光水(1谢锦升(1黄朝法(2 (1.福建师范大学福州350007;2.福建省林业调查规划院福州350003 摘要:笔者较为全面地综述了国内外土壤微生物生物量碳的研究成果。笔者针对土壤微生物生物量碳主要受到碳氮限制、树种类型、土地利用方式、管理措施、土壤湿度和温度、土壤质地等因素的影响,提出了今后的研究应集中在以下几个方面:(1加强不同尺度土壤微生物生物量碳的影响因子及调控机理研究;(2进一步加强不同土壤类型下土壤微生物生物量碳动态及调控机理研究;(3对影响土壤微生物生物量碳高低不确定性的因子进行深入研究;(4加强其他因子对土壤微生物生物量碳影响的研究;(5探讨全球气候变化对土壤微生物生物量碳的影响。 关键词:微生物生物量碳;土壤;影响因子;全球变化 Adva nces on Soil Microbial Biomass Ca rbon a nd Its Effect Factor Huang Hui(1Che n Gua ngshui(1Xie J ingsheng(1Huang Chaof a(1 (1.Fujia n N or mal U niversity Fuzhou350007;2.Fujian Provincial Forest ry Survey a nd Planning Institute Fuzhou350003 Abstract:The aut hors review current knowledge of t he p roperty and deter mination of soil microbial biomass carbon a nd several f act ors cont rolling its dynamics bot h at home a nd abroad.By now,t here are several f ac2 t ors influe ncing soil microbial biomass carbon w hich include inhere nt p roperties of t he soil like texture,mois2 ture and temp erature a nd etc.Besides t hese,external f act ors(C a nd N limitation,sp ecies typ e,ma nageme nt measures and diff ere nces in la nd usealso cont rol on soil microbial biomass carbon.Despite intensive resear2 ches in recent years,t he uncertainties of soil microbial biomass still re main f or f urt her studies:(1St re ngt he2 ning eff ect f act ors of soil microbial biomass carbon a nd its cont rol mecha nism at diff erent scale;(2Paying
微生物题库(周德庆完整版)考研必备
微生物学试题库 微生物学试题（一） 一、写出下列名词解释的中文翻译及作出解释 1.Gram positive bacteria 2.parasporal crystal 3 ,colony 4, life cycle 5,capsule6,endospore 二、简答题 1，试述微生物与当代人类实践的重要关系？ 2，简述革兰氏染色的机制？ 3.微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？ 三、填空(每空1分,共15分) 1.真核微生物核糖体类型为 _______ 。 2.大肠杆菌长为2.0μm,宽为0.5μm,其大小表示为_____ 。 3.研究细菌遗传、代谢性能常采用_____ 时期的细胞。 4.酵母菌细胞壁的主要成份_____和_______。 5.侵染寄主细胞后暂不引起细胞裂解的噬菌体称________ 。 6.微生物细胞的主要组成元素是______，_____，_______和_______。 7.食用菌是由 ______和 ____ 组成。 8.用物理或化学方法杀死物品上大部分微生物的过程称 ______ 。 9.细菌细胞的碳、氮营养比为______。 10.根瘤菌可与_________共生固氮 四、学名互译 1.A.niger 2.B.subtilis 3. B.thuringiensis 4. A.oryzae 微生物学试题（一）答案： 一，1，革兰氏阳性菌：细菌经革兰氏染色染色后最终染成紫色的菌 2，伴胞晶体：少数芽孢杆菌，在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形，方形，或不规则形的碱溶性蛋白质晶体称为半胞晶体 3，菌落：当单个细菌细胞或者一小堆同种细胞接种到固体培养基表面，当它占有一定的发展空间并处于适宜的培养条件下时，该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆，此即菌落。4，生命周期：指的是上一代生物个体经过一系列的生长，发育阶段而产生下一代个体的全部过程。 5，荚膜：包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质 6，芽孢：某些细菌在其生长发育的后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形，厚壁，含水量低，抗逆性强的休眠构造。 二，1，①在微生物与工业发展的关系上，通过食品罐藏防腐，酿造技术的改造，纯种厌氧发酵的建立，液体深层通气搅拌大规模培养技术的创建以及代谢调控发酵技术的发明，使得古老的酿造技术迅速发展成工业发酵新技术； ②微生物在当代农业生产中具有十分显著的作用，例如，以菌治害虫和以菌治植病的生物防治技术；以菌增肥效和以菌促生长的微生物增产技术；以菌做饲料和以菌当蔬菜的单细胞蛋白和食用菌生产技术；以及以菌产沼气等生物能源技术。 ③微生物与环境保护的关系越来越受到当代全人类广泛的重视。微生物是占地球面积70%以上的海洋和其他水体中光合生产力的基础；是一切食物链的重要环节；是污水处理中的关键角色；是生态农业中最重要的一环；是自然界重要元素循环的首要推动者；以及是环境污染和监测的重要指示生物；等等。 ④微生物与在食品上的应用。调味品，发酵食品，酸乳，蔬菜加工。 ⑤微生物在医药方面的应用。抗菌素，维生素。 ⑥微生物在能源生产方面也有重要的作用。2，G+细菌由于其细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使得网孔缩小再加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫和碘的复合物牢牢留在壁内，使得其保持紫色。反之，革兰氏阴性细菌因其细胞壁较薄，外膜层内酯含量高，肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出，因此细胞退成无色。这时，再经沙黄等红色燃料复染，就使革兰氏阴性细菌呈现红色。而革兰氏阳性细菌则保留最初的紫色。3. 微生物的五大共性：（一）体积小，面积大 （二）吸收多，转化快 （三）生长旺，繁殖快 （四）适应强，易变异 （五）分布广，种类多 其中最基本的是微生物的多样性，原因是：微生物因其体积小，重量轻和数量多等原因，可以到处传播以至达到“无孔不入”的地步。不论在动，植物体内外，还是土壤，河流，空气，平原，高山，深海，污水，垃圾，海底淤泥，冰川，盐湖，沙漠，甚至油井，酸性矿水和岩层下，都有大量与其相适应的各类微生物在活动着。 三．填空 1. 80S 2. 0.5μm x2.0μm3对数生长 4.葡聚糖和甘露聚糖。 5.温和噬菌体6蛋白质，核酸，类脂和碳水化合物 7. 营养菌丝,生殖菌丝豆科植物共生固氮 8 灭菌。9. 6/1 10.豆科植物 四．1.黑曲霉 2. 枯草芽孢杆菌 3. 苏云金芽孢杆菌4. 米曲霉 微生物学试题（二） 是非题（共10分。只需注明“对”或“错”） 1.大多数嗜热菌的G-C含量高于中温菌。 2.大肠杆菌属低等原核生物，所以其遗传物质只是一条松散的环状双链DNA，不存在DNA高级结构。 3.当菌体生长、氧吸收和糖利用的比速度下降时，青霉素的合成达到最高值。 4.初生F’菌株和次生F’菌株都属于部分二倍体。 5.分批培养时，细菌首先经历一个适应期，此期间细胞处于代谢活动的低潮，所以细胞数目并不增加。 6.渗透酶( permease)属于诱导酶，而其它种类的酶往往属于组成酶。 7.恒化培养与恒浊培养的区别在于前者的培养物群体始终处于对数生长期。 8.将HR病毒的外壳蛋白与TMV病毒的RNA混合，去感染烟草，则会出现TMV型病灶。若在感染前，用TMV抗体处理，则会钝化病毒，不出现TMV型病灶。 9.霉菌的基因重组常发生于准性生殖时，较少出现在有性生殖过程中。 10.营养物跨膜的主动运输必需依靠载体和能量，而被动扩散不需要载体和能量。 二填充题（30分） 1 突变率10-10表示_ _ _ _ a_ _ _ 。 2 我们常采用_ _ a_ _ _ 浓度的NaCl 或0.1M_ _ _ b_ _ _ 来稀释菌液或清洗菌体细胞。因为_ _ c_ _ _ 。 3 在有机物为基质的生物氧化反应中，以氧为电子传递最终受体的方式称_ _ _ _ a_ _ _ _ ；以无机氧化物为最终电子受体的称_ _ b_ _ ；以有机物为最终电子受体的称_ _ _ _ c_ _ _ _ 。 4 常见的菌种保藏方法有_ _ _ _ a_ _ _ _ 、_ _ _ b_ _ _ 和_ _ _ c_ _ _ 等，其中_ _ _ d_ _ 方法保藏菌种的时间最长久。
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第一模块微生物学基础知识 第一章微生物概述 一. 什么是微生物 微生物是一类肉眼不能直接看见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能观察到的微小生物的总称。 微生物具有形体微小、结构简单；繁殖迅速、容易变异；种类繁多、分布广泛等特点。 二. 微生物的分类： 根据微生物有无细胞基本结构、分化程度、化学组成等特点，可分为三大类。1. 非细胞型微生物无细胞结构，无产生能量的酶系统，由单一核酸（DNA/RNA）和蛋白质衣壳组成，必须在活细胞内增殖。病毒属于此类微生物。 2. 原核细胞型微生物细胞核分化程度低，只有DNA盘绕而成的拟核，无核仁和核膜。这类微生物包括细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌。 3. 真核细胞型微生物细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体，能进行有丝分裂。如真菌、藻类等。 三. 微生物的作用及危害 1. 微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。 2. 微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 从药品生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。
第二章微生物的类群和形态结构 一. 细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。 1. 细菌的形态与结构 观察细菌最常用的仪器是光学显微镜，其大小可以用测微尺在显微镜下测量，一般以微米为单位。细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺形菌三类。 （1）球菌多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排列方式，分为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。 （2）杆菌形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球杆菌等。 （3）螺形菌菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆菌。 细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结构。 2. 细菌的繁殖 二分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延长菌体，染色体复制为二，然后垂直于长轴分裂，细胞赤道附近的细胞质膜凹陷生长，直至形成横隔膜，同时形成横隔壁，这样便产生两个子细胞。 细菌生长速度很快，一般约20min分裂一次。若按此速度计算，细菌群体将庞大到难以想象的程度。但事实上由于细菌繁殖中营养物质的逐渐消耗，有害代谢产物的逐渐积累，细菌不可能始终保持高速度的无限繁殖。经过一段时间后，细菌繁殖速度逐渐减慢，死亡菌数增多，活菌增长率随之下降并趋于停滞。 3. 细菌的菌落 单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。细菌菌落常表现为湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致等。 二. 真菌
土壤微生物生物量的测定(滴定法)(精)
1. 土壤微生物生物量的测定 (滴定法 一、实验目的和内容 土壤微生物生物量是指土壤中体积小于5~10μm 3活的微生物总量, 是土壤有机质中最活跃的和最易变化的部分。耕地表层土壤中,土壤微生物量碳(Bc 一般占土壤有机碳总量的 3%左右,其变化可直接或间接地反映土壤耕作制度和微生物肥力的变化,并可以反映土壤污染的程度。近 30年来,国外许多学者对土壤微生物生物量的测定方法进行了比较系统的研究,但由于土壤微生物的多样性和复杂性,还没有发现一种简单、快速、准确、适应性广的方法。目前广泛应用的方法包括:氯仿熏蒸培养法(FI 、氯仿熏蒸浸提法(FE 、基质诱导呼吸法(SIR 、精氨酸诱导氨化法和三磷酸腺苷(A TP 法。 氯仿熏蒸浸提法(FE 的原理是:土壤经氯仿熏蒸处理,微生物被杀死,细胞破裂后, 细胞内容物释放到土壤中,导致土壤中的可提取碳、氨基酸、氮、磷和硫等大幅度增加。通过测定浸提液中全碳的含量可以计算土壤微生物生物量碳。 二、实验材料和用具 仪器:培养箱;真空干燥器;真空泵;往复式振荡机(速率 200次每 min ; 1L 广口玻璃瓶;定量滤纸;紫外分光光度计; LNK-872型消煮炉(江苏省宜兴市科教仪器研究所试剂: 1. 无乙醇氯仿:市售的氯仿都含有乙醇(作为稳定剂 ,使用前必须除去乙醇。方法为:量取 500ml 氯仿于 1000ml 分液漏斗中,加入 50ml 硫酸溶液[ρ(H2SO 4=5%], 充分摇匀, 弃除下层硫酸溶液, 如此进行 3次。再加入 50ml 去离子水, 同上摇匀, 弃去上部的水分,如此进行 5次。将下层的氯仿转移存放在棕色瓶中,并加入约 20g 无水 K 2CO 3,在冰箱的冷藏室中保存备用。 2. 硫酸钾溶液 [c(K2SO4=0.5mol·L -1]称取硫酸钾(K 2SO 4,化学纯 87.10g ,先溶于