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黄芪中总黄酮的含量测定方法_图文(精)

黄芪中总黄酮的含量测定方法_图文(精)
黄芪中总黄酮的含量测定方法_图文(精)

黄芩中总黄酮的含量测定 To determine the content of total flavonoids in Radix Scutellariae

班级 08级 2班

专业药学

姓名崔立靖

同组人陆晓娅关雪李娟张栋材

摘要目的:黄芩中总黄酮含量的测定。方法:采用紫外分光光度法测定黄芩中总黄酮的含量。结果:黄芩中总黄酮含量是 0.034mg/ml。

Abstract Objective :To determine the content of total flavonoids in Radix Scutellariae.

Methods :Ultraviolet spectrophotometry was used to To determine the content of total flavonoids content.

Results :Total flavonoids content of Radix Scutellariae reached 0.034mg/ml。

关键词黄芩;总黄酮;紫外分光光度法

Key WorldRadix Scutellariae; Total flavonoids ; uv-spectrophotometry

目录

要 ........................................................................................................................................... .. (1)

Abstract ................................................................................................................................. ............ 1关键

词 ...........................................................................................................................................

.... 1 Key

World .................................................................................................................................... ..... 1目

录 ........................................................................................................................................... .. (2)

1 绪

论 . ......................................................................................................................................... (3)

2 黄芩中总黄酮含量

测 . ................................................................................................................ 6 2.1仪器与试剂 . ........................................................................................................................ 6 2.1.1实验仪器 . ................................................................................................................. 6 2.1.2实验药品 . ................................................................................................................. 6 2.2试验方法 . ............................................................................................................................

6 2.2.1总黄酮成分提取 . .....................................................................................................

6 2.2.2定量实验总黄酮的含量测定 . .................................................................................

6 2.2.2.1线性关系考察 . (6)

2.2.2.2提取物含量的测定 . ...................................................................................... 7 2.3方法学检验 . ........................................................................................................................

7 2.3.1精密度实验 . .............................................................................................................

7 2.3.2稳定性考察 . .............................................................................................................

7 2.4黄芩根及粉末的显微图

像 . ................................................................................................ 7 2.4.1黄芩根的显微图像 . . (7)

2.4.2黄芩粉末的纤维图

像 . (7)

3 参考文

献 . (8)

1 绪论

【英文名】 Radix Scutellariae

【别名】山茶根、黄芩茶、土金茶根

【来源】本品为唇形科植物黄芩 Scutellaria baicalensis Georgi 的干燥根。春、秋二季采挖,除去须根及泥沙,晒后撞去粗皮,晒干。产于河北、辽宁、陕西、山东、内蒙古、黑龙江等地。

【植物特征】多年生草本,高 30~70厘米。主根粗壮,略呈圆锥形, 棕褐色。茎四棱形,基部多分枝。单叶对生;具短柄;叶片披针形,全线。总状花序项生,花偏生于花序一边;花唇形,蓝紫色。小坚果近球形,黑褐色,包围于宿萼中。花期 7~10月,果

期 8~10月。

【制法】

黄芩片除去杂质,置沸水中煮 10分钟,取出,闷透,切薄片,干燥; 或蒸半小时,取出,切薄片,干燥(注意避免曝晒。本品为类圆形或不规则形薄片,外表皮黄棕色至棕褐色,切面黄棕色或黄绿色,具放射状纹理。

酒黄芩取黄芩片,照酒炙法炒干。本品为类圆形或不规则形薄片,外表皮棕褐色,切面黄棕色,呈放射状纹理,略带焦斑,中心部分有的呈棕色。

【性状】本品呈圆锥形,扭曲,长 8~25cm ,直径 1~3cm 。表面棕黄色或深黄色,有稀疏的疣状细根痕,上部较粗糙,有扭曲的纵皱或不规则的网纹,下部有顺纹和细皱。质硬而脆,易折断,断面黄色,中间红棕色; 老根中心枯朽状或中空,呈暗棕色或棕黑色。气微,味苦。

【显微特征】横切面木栓层为数层至 20余层扁平细胞组成,其中散在嗜细胞。木栓组织外缘多破裂。皮层狭窄,散在纤维及石细胞。韧皮部较宽广,有多数纤维与石细胞,石细胞多分布于外侧,纤维单个散在或数个成群,多分布于内侧;形成层环状明显;木质部导管单个散在或数个成群,周围有木纤维束;木射线较宽。老根中

央有一至多个同心状的木栓组织环。薄壁细胞中还淀粉粒。

【粉末特征】粉末深黄色。①韧皮纤维微黄色,梭形,两端尖或斜尖, 长

51~200(~271 um, 直径 9~33um,壁木化,孔沟明显。②石细胞淡黄色, 类方形、类圆形、椭圆形或纺锤形,直径 24~48um,长约 85(~160 um , 壁厚至 24um 。③网纹及具缘纹孔导管多见。④木纤维细长,壁稍厚,具斜纹孔或具缘纹孔。另可见淀粉粒、木栓细胞。

【黄芩根横切】

【化学成分】含多种黄酮类化合物 , 主要为黄芩甙(baicalin , 黄芩素(baicalein , 汉黄芩甙(wogonoside , 汉黄芩素(wogonin , 7-甲氧基黄芩素 , 7-甲氧基去甲基汉黄芩素 , 黄芩黄酮Ⅰ, 黄芩黄酮Ⅱ。【鉴别】取粉末 1g ,加甲醇 20ml ,超声处理 20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇 1ml 使溶解,作为供试品溶液。另取黄芩对照药材 1g ,

同法制成对照药材溶液。再取黄芩苷对照品,加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B试验,吸取上述三种溶液各5μl ,分别点于同一以含 4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶 G 薄层板上,以醋酸乙酯 -丁酮 -甲酸 -水(5:3:1:1为展开剂,预平衡 30分钟,展开,取出,晾干,喷以 1%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;在与对照品色谱相应的位置上,显一相同的暗绿色斑点。

【含量测定】

照高效液相色谱法(附录Ⅵ D测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水-磷酸(47:53:0。 2 为流动相;检测波长为 280nm 。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于 2500。

对照品溶液的制备精密称取在 60℃减压干燥 4 小时的黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每 1ml 含60μg 的溶液,即得。

供试品溶液的制备取本品中粉约 0。 3g[同时另取本品粉末测定水分(附录ⅨH第一法 ],精密称定,加 70%乙醇 40ml ,加热回流 3 小时, 放冷,滤过,滤液置 100ml 量瓶中,用少量 70%乙醇分次洗涤容器和残渣,

洗液滤入同一量瓶中,加 70%乙醇至刻度,摇匀。精密量取 1ml,置 10ml 量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ l,注入液相色谱仪,测定,即得。本品按干燥品计算,含黄芩苷

(C21H18O11)不得少于 9。0% 。【理化鉴别】 1. 取粉末 1 g, 加乙醇 10 ml, 温浸 15 分钟, 滤过, 取滤液 1 ml, 加醋酸铅试液 2~3 滴, 生成桔黄色沉淀;另取滤液 1 ml, 加镁粉少量与盐酸 3~4 滴, 显红色. 2. 薄层层析样品液:取粉末 1 g, 加乙醚40 ml 于索氏提取器中回流至无色, 浓缩至 2~5 ml, 供试.对照品液:取黄芩素和汉黄芩素配成溶液作为对照溶液.展开:0.5 N 草酸硅胶 G 板(硅胶 G+0.5 N 草酸溶液铺板), 以氯仿-甲醇(10∶1)展开 17 cm.显色:于 365 nm 紫外灯下观察, 供试品在与标准品的相同位置有相同的暗灰棕色荧光斑点.成分分析研究进展:略【药理作用】 1. 抗菌、抗病毒、抗真菌:煎剂对多种球菌、杆菌、耐药的金黄色葡

萄球菌、流感病毒、皮肤真菌有抑制作用. 2. 解热:煎剂及黄芩甙对实验性发热的家兔有解热作用. 3. 降压、利尿作用:黄芩甙给麻醉狗注射, 有明显的降压和利尿作用. 4. 抗炎、抗过敏:黄芩甙与黄芩素动物试验能抑制过敏性炎症渗出, 降低毛细血管通透性, 有抗组织胺与抗乙酰胆碱作用。【类药比较】 1)枯芩∶子芩黄芩分枯芩与子芩。枯芩为生长年久的宿根,中空而枯,体轻主浮,善清上焦肺火,主治肺热咳嗽痰黄。子芩为生长年少的子根,体实而坚,质重主降,善泻大肠湿热,主治湿热泻痢腹痛。 2)黄芩∶续断黄芩与续断均有安胎之功,用治胎动不安。 5

黄芩药性寒凉,清热泻火,安胎,用治胎热所致的胎动不安。续断药性微温,补肝肾,安胎,用治肝肾不足所致的胎动不安。 2 2.1 仪器与试剂 2.1.1 实验仪器黄芩中总黄酮含量测超声波清洗器、紫外可见分光光度计、分析天平、 100ml 容量瓶、 25ml 容量瓶、5ml 移液管、1ml 移液管、6 支试管、1 个试管架、洗耳球2.1.2 实验药品 70%乙醇、5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠、芦丁标准品、黄芩 2.2 试验方法 2.2.1 总黄酮成分提取取黄芩,粉碎。精密称取黄芩粉末约 1 g,放置 100 ml 容量瓶中,加 90ml 70%乙醇,超声波提取约 50min,用 70%乙醇稀释至刻度,得样品液。 2.2.2 定量实验总黄酮的含量测定 2.2.2.1 线性关系考察分别精密吸取芦丁对照液(0.1 mg/ml)0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、 5.00 ml 于试管中, 70%乙醇稀释至 5ml,用再分别加入 5%亚硝酸钠溶液 0.3 ml,摇匀,静置 6 min;再加 10%硝酸铝溶液 0.3 ml,摇匀,静置 6 min;再加 4%氢氧化钠溶液 4.00 ml,最后加 70%乙醇 0.4ml,摇匀,静置 12 min,以试剂作空白,于 510 nm 处测吸光度。以吸光度值 A 为纵坐标,芦丁浓度 C(mg/ml)为横坐标,进行线性回归,得回归方程 A=0.0832C+0.0004,r=0.9999。标准曲线见下图对照品标准曲线0.06 C(mg/ml 0.04 0.02 0 0 0.2 0.4 0.6 y = 0.0832x + 0.0004 A 0.8 6

2.2.2.2 提取物含量的测定精密吸取样品液 2.00 ml 于试管中,按标准曲线的制备操作测定吸光度,根据回归方程计算样品中总黄酮的含量。 2.3 方法学检验

2.3.1 精密度实验取黄芩样品液,重复测定吸光度 6 次,计算其相对标准偏差,结果 RSD 为 0.19%,本实验精密度良好。 2.3.2 稳定性考察精密吸取黄芩对照品溶

液,与 0,10,20,30,40,50,60min 测定吸光度值,RSD 为 0.92%(n=6),表明对照品溶液在 60min 内基本稳定。【2】 2.4 黄芩根及粉末的显微图像 2.4.1 黄芩根的显微图像 2.4.2 黄芩粉末的纤维图像 7

韧皮纤维石细胞导管木栓细胞淀粉粒木纤维 3 【1】参考文献国家药典委员会,中华人民共和国药典 2010 版(第一部)[S].北京:化学工业出版社,2005:211-212. 【2】李云鹏,黄云,魏春娥.紫外分光光度法测定黄芩中总黄酮含量[J]. 河北中医药学报,2007,22(l):36-37 收稿日期:2011-6-16 8

黄酮类化合物药理作用的分析

黄酮类化合物药理作用的分析 黄酮类化合物的基本结构构成为C-C-C方式,广泛存在于包括众多植物中,属于植物次级代谢产物。黄酮类化合物具有来源广、生物活性多、毒副作用小等特点,目前广泛应用于临床,古味伍绛木樨茶对其药理作用进行分析如下。 1 心血管系统作用 1.1 抗心律失常作用 动物实验表明,黄酮对心肌缺血再灌注损伤组织,可以有效地减少其心律失常发作次数,减轻发作频率,能对抗乌头碱、哇巴因和氯仿诱发的心律失常,其可能的机制为总黄酮可降低心室肌动作电位幅值(APA),延长动作电位时程(APD)。 1.2 抗动脉粥样硬化 动脉粥样硬化(AS)疾病进程的一个主要原因为,低密度脂蛋白(LDL)的氧化修饰,黄酮类化合物具有抑制LDL氧化作用,抗平滑肌增殖,清除自由基,从而有效地对抗动脉粥样硬化的损伤。 1.3 扩血管作用总黄酮具有血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)的作用,抑制血管内皮素(ET)的生成,扩张冠脉血管,改善心肌的血氧供应,对心血管系统起到改善作用,从而 起到血管扩张的作用。 1.4 抗凝血作用总黄酮体外给药可抑制花生四烯酸和胶原纤维引起的血小板聚集作用,改善血液流变性,延长凝血酶原时间。动物试验表明,大鼠皮下注射大剂量肾上腺素和冰水浸泡法,造出急性血瘀证大鼠模型,即血流变性呈轴稠状态的实验动物,通过饲喂山楂叶总黄酮(HLF),可显著降低红细胞(RBC)聚集指数、血浆比轴度,从而改善血瘀状态。银杏黄酮单独应用其抗凝作用不如蚓激酶,两者合用后抗凝效果加强,但溶栓作用并没有改善。 1.5 抗血脂作用维生素D3加脂肪乳剂造成大鼠高脂血症模型,在给予了麦胚总黄酮类后,可显著提高大鼠高密度脂蛋白胆固醇含量,降低实验性血清总胆固醇和三酚甘油含量。 2 抗炎调节免疫作用 黄酮类化合物具有显著的抗炎作用。作用机理为作用于细胞正常的有丝分裂过程,调节细胞间相互作用的分泌过程,抑制肥大细胞和嗜碱性细胞释放慢反应致炎物质,如中性粒细胞溶酶体酶、白三烯、组胺、前列腺素等,调节巨嗜细胞的吞噬功能,从而直到抗炎和免疫调节的作用。穿卜草中分离得到黄酮提取物可显著清除炎性因子,鸡蛋清致大鼠足肿胀、醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增加、二甲苯所致的小鼠耳肿胀等急性炎症反应,都有明显的抑制作用。 3 抗菌抗病毒作用 3.1 抗菌作用甘草黄酮提取物在体外,可有效抑制白色念珠菌、黑根霉、灰葡萄抱、意大利青霉等真菌。同时对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、新型隐球菌、枯草杆菌、绿脓杆菌、烟曲霉菌、白色念珠菌等均有抑制作用,亦能明显抑制的生长。 3.2 抗病毒活性黄酮类化合物对多种病毒具有抑制作用,芦丁能抑制流感病毒、脊髓灰质炎病毒。黄芪总黄酮对人疤疹病毒(HSV21)感染的豚鼠皮肤,具有较好的抗病毒治疗效果。异黄芪282甲醚能显著抑制流感病毒。总之黄酮类对于流感病毒、呼吸道合胞病毒、脊髓灰质炎病毒、疤疹病毒、登革热病毒、腺病毒、肝炎病毒、柯萨奇病毒、冠状病毒等都具有一定的抑制作用。 3.3 抗HIV活性许多黄酮类化合物均有抗匀陨灾活性,其作用的靶点均分别为作用于HIV逆转录酶、HIV 蛋白酶、HIV整合酶,作用于HIV启动子,没有明确作用点的黄酮类化合物等。其中黄芩素可对抗中逆转录酶。 4 抗肿瘤抗癌作用 黄酮类化合物对于肿瘤细胞的增长繁殖具有显著地抑制作用。其作用机理为促进抑癌基因表达、诱导肿瘤细胞凋亡、干预肿瘤细胞信号转导、促进抗肿瘤细胞增殖等。黄酮类化合物抗癌抗肿瘤作用的效果,主要体现为具有显著的抗氧化抗自由基作用,且二者之前具有显著相关性,抗自由基及氧化应激的能力强,则

总黄酮、多酚含量的测定

燕麦总黄酮含量的测定 一、仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、100mL烧瓶、10mL离心管10个、试管架2个 二、药品 芦丁标准品40mg、无水乙醇1000mL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g 三、实验步骤 (一)、样品处理及总黄酮的提取 1. 将样品籽粒分别称取 2.5 g置于小信封里,80℃烘干24 h。 2. 研成粉末,称取500±2 mg样品于10 mL离心管中,使样品位于试管底部(重复3次)。 3. 每管加4 mL 60%乙醇,放水浴锅60℃浸提2 h。6000 r/min离心10 min,离心后取上清液于10 mL容量瓶中。 4. 再向离心管中加4 mL的60%乙醇,放水浴锅60℃浸提1 h。6000 r/min离心10 min,离心后取上清液于相应的10 mL容量瓶中。60%乙醇定容至10 mL,待测。 (二)、标准曲线绘制 1. 精确量取浓度200 μg/mL芦丁标准溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、 2.0 mL 分别置于10 mL容量瓶中。 2. 向容量瓶中分别加60%乙醇5、4.8、4.6、4.2、 3.8、3.4、3.0 mL。 3. 然后加5%亚硝酸钠0.3 mL,摇匀,静置6 min。 4. 再加10%硝酸铝0.3 mL,摇匀,静置6 min。 5. 加4%氢氧化钠4.0 mL,用60%的乙醇定容至刻度,摇匀,静置12 min。 6. 于510 nm波长下测定吸光度,并以芦丁标准浓度值为纵坐标,以吸光度为横坐标,绘制标准曲线。 (三)、样品提取液总黄酮含量的测定 准确吸取总黄酮提取液2.0 mL于10 mL容量瓶中,按二的方法测定吸光度,

黄芪颗粒中总黄酮的含量测定(精)

第40卷第8期2012年4月广州化工 Guangzhou Chemical Industry Vol.40No.8April.2012 黄芪颗粒中总黄酮的含量测定 何 1,42,3 艳,陈华国,赵 2,3 超,周 2,3 欣,王 * 2,32,3垄,申海艳 (1贵阳中医学院,贵州贵阳550002;2贵州师范大学贵州省山地环境信息系统与 生态环境保护重点实验室,贵州贵阳550001;3贵州师范大学天然药物质量控制研究中心, 贵州贵阳550001;4贵州汉方制药有限公司,贵州贵阳550002)摘 要:建立了黄芪颗粒中总黄酮的含量测定方法:以芦丁为参照,利用紫外分光光度法在371nm 波长测定黄芪颗粒中总黄

RSD%酮的含量。芦丁在5.90 59.0μg /mL线性关系良好,线性方程为A =0.0103C +0.2707,γ=0.9963,平均回收率为98.65%, =0.85%。结果表明:紫外分光光度法测定黄芪颗粒中总黄酮的含量方法简便,快捷,准确,可用来做黄芪颗粒的质量评估的方法。 关键词:黄芪颗粒;总黄酮;紫外分光光度法中图分类号:O65 文献标识码:A 文章编号:1001-9677(2012)08-0133-03 Quantitative Determination of Total Flavonoids in Huangqi Granule by UV Spectrophotometry * 433333 HE Yan 1,,CHEN Hua -guo 2,,ZHAO Chao 2,,ZHOU Xin 2,,WANG Long 2,,SHEN Hai -yan 2,(1Guiyang College of Traditional Chinese Medicine ,Guizhou Guiyang 550002;2Key Laboratory for Information System of Mountainous Areas and Protection of Ecological Environment ,Guizhou Normal University ,Guiyang ,Guizhou Guiyang 550001; 3Research Center for Quality Control of Natural Medicine ,Guizhou Normal University ,Guizhou Guiyang 550001;4Guizhou Hanfang Pharmaceuticals Company ,Guizhou Guiyang 550001,China ) Abstract :A new method for determination the total flavonoids in Huangqi Granule was established.The total fla-vonoids in Huangqi Granule were determined by UV spectrophotometry using rutin as the reference at the wavelength of 371nm.The linear equation was A =0.0103C +0.2707,γ=0.9963,and linear range of calibration curve was 5.9 59μg /mL.The average reeovery rate was 98.65%with the relative

黄芪

黄芪 中药材黄芪为豆科草本植物蒙古黄芪、膜荚黄芪的根,具有补气固表、利水退肿、托毒排脓、生肌等功效。黄芪的药用迄今已有2000多年的历史,现代研究,黄芪含皂甙、蔗糖、多糖、多种氨基酸、叶酸及硒、锌、铜等多种微量元素。有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗应激、降压和较广泛的抗菌作用。但表实邪盛,气滞湿阻,食积停滞,痈疽初起或溃后热毒尚盛等实证,以及阴虚阳亢者,均须禁服。 分布区域:华北、东北、内蒙古和西北,主产于山西、黑龙江、辽宁、河北等省 基本信息 别名大全 《本草纲目》称黄芪,《神农本草经》称戴糁。《名医别录》称戴椹,独椹,蜀脂,百本。《药性论》称王孙。李时珍说,耆是长的意思,黄耆色黄为补药之长,故名。今俗称黄芪。 处方名:黄芪,绵芪,棉芪,口芪,北芪,生黄芪,炒黄芪,炙黄芪等。 处方中写黄芪、绵芪、棉芪,口芪、北芪均指生黄芪。为原药材去杂质,润透切片,生用入药者。 炒黄芪为黄芪片用麸炒至深黄色,筛出晾凉人药者。健脾和胃功效增强。 炙黄芪又名蜜炙黄芪,蜜黄芪。为黄芪片用蜂蜜拌匀,炒至不粘手时

取出摊晾,而后入药者。补气润肺功效增强。 编辑本段历代医家论述 黄芪主要功用及机制 ①倪朱谟:“黄芪,补肺健脾,实卫敛汗,驱风运毒之药也。故阳虚之人,自汗频来,乃表虚而腠理不密也,黄芪可以实卫而敛汗;伤寒之证,行发表而邪汗不出,乃里虚而正气内乏也,黄芪可以济津以助汗;贼风之疴,偏中血脉而手足不随者,黄芪可以荣筋骨;痈疡之证,脓血内溃,阳气虚而不敛者,黄芪可以生肌肉,又阴疮不能起发,阳气虚而不愈者,黄芪可以生肌肉。”(《本草汇言》)②张景岳:“(黄芪),因其味轻,故专于气分而达表,所以能补元阳,充腠理,治劳伤,长肌肉。气虚而难汗者可发,表疏而多汗者可止。其所以止血崩血淋者,以气固而血自止也;故日血脱益气。其所以治泻痢带浊者,以气固而陷自除也,故曰陷者举之。”(《本草正》)③贾所学:“黄芪,性温能升阳,味甘淡,用蜜炒又能温中,主健脾,故内伤气虚,少用以佐人参,使补中益气,治脾虚泄泻,疟痢日久,吐衄肠血,诸久失血后,及痘疹惨白。主补肺,故表疏卫虚,多用以君人参,使敛汗固表,治自汗盗汗。诸毒溃后,收口生肌,及痘疮贯脓,痈疽久不愈者,从骨托毒而出,必须盐炒。痘科虚不发者,在表助气为先,又宜生用。”(《药品化义》)④张石顽:“(黄耆),入肺而固表虚自汗,入脾而托已溃痈疡。《本经》首言痈疽久败,排脓止痛,次言大风癞疾,五痔鼠瘘,皆用生者,以疏卫气之热。性虽温补,而能通调血脉,流行经络,可无碍于壅滞也。其治气虚盗汗自汗,

总黄酮含量测定方案

总黄酮含量测定 一样品溶液的制备 70%乙醇溶液,料液比1﹕8 ,80度下回流2h。取10g样品放入圆底烧 瓶中加入80ml 70%乙醇溶液回流2h,抽滤定容至100ml备用。使用时先离心再用70%乙醇稀释10倍做样品溶液。 二芦丁标准品的配置 精密称取芦丁2mg,加无水乙醇定容至10ml。制得浓度为0.2mg/ml芦 丁标准品溶液。 三显色方法的确定 1 扫描原液分别取芦丁溶液和样品溶液各1ml,加无水乙醇定容至25ml,空白对照,全波扫描。 2硝酸铝显色法分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml,加5%亚硝酸 钠溶液(1.25g亚硝酸溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml, 摇匀,放置6min,加10%硝酸铝溶液(4,4014g硝酸铝.九水溶于无水乙醇中定容到25ml 容量瓶中) 1ml,摇匀,放置6min,加4%氢氧化钠试液(2g氢氧化钠溶于无水乙醇中定容到50ml容量瓶中)10ml, 再加无水乙醇定容至25ml,摇匀,放置15min,空白对照,全波扫描bb 。 3氯化铝显色法分别取芦丁对照溶液和样品溶液各5ml ,加1%的氯化 铝溶液(1g氯化铝溶于无水乙醇中定容到100ml容量瓶中)10ml,摇匀放置10min,空白对照,全波扫描。 4 氢氧化钾显色法分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml,加3ml10% 氢氧化钾溶液(2.5g氢氧化钾溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中), 充分摇匀显色5min后,用无水乙醇定容至25ml, 摇匀,空白对照,全波 扫描。 四显色条件的确定 五标准曲线的绘制 分别取1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,6ml芦丁对照品溶液,按所选的显色方法测定吸光度,绘制标准曲线。 六精密度实验 按标准曲线绘制方法,分别准确量取1.0ml芦丁标准液5份,按所选显色剂和所确定的最优显色条件在所选波长下测定吸光度。

总黄酮、多酚含量的测定

总黄酮含量的测定 一、仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、100mL烧瓶、10mL离心管10个、试管架2个 二、药品 芦丁标准品40mg、无水乙醇1000mL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g 三、实验步骤 (一)、标准曲线绘制 1. 芦丁标准品40mg置于称量瓶中80℃烘干至恒重,取烘干后的20mg芦丁标准品用水定容至100mL,得200μg/mL芦丁标准贮备液,精确量取上述浓度芦丁标准贮备溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、 2.0 mL分别置于10 mL具塞试管中。 2. 向具塞试管中分别加60%乙醇5、4.8、4.6、4.2、 3.8、3.4、3.0 mL。 3. 然后加5%亚硝酸钠0.3 mL,摇匀,静置6 min。 4. 再加10%硝酸铝0.3 mL,摇匀,静置6 min。 5. 加4%氢氧化钠4.0 mL,用60%的乙醇定容至刻度,摇匀,静置12 min。 6. 于510 nm波长下测定吸光度,并以芦丁标准浓度值为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。研究表明芦丁标准品含量在0~0.5mg 范围内与吸光度具有良好的线性关系。 (二)、样品处理及总黄酮的提取(以60%乙醇提取为例) 1. 将样品在80℃烘干24 h,粉碎后过80目筛置于干燥器中备用。 2. 称取500±2 mg样品于25 mL具塞三角瓶中,使样品位于三角瓶底部(重复3次)。 3. 每瓶加4 mL 60%乙醇,放超声波提取器提取2 h。提取液转至10 mL具塞离心管中。 4. 再向具塞三角瓶中加4 mL的60%乙醇,放超声波提取器提取1 h,提取液转至相应10 mL具塞离心管中,6000 r/min离心10 min,离心后取上清液于相应

银杏叶黄酮提取及含量测定

银杏叶黄酮提取及含量测定 一、实验目的 1、掌握银杏叶中黄酮的提取方法 2、了解银杏叶中黄酮的含量测定 二、实验原理 近几年来,随着对黄酮类化合物研究的日益深入与重视,黄酮类化合物提取技术的发展也得到了促进。目前提取黄酮类化合物的方法主要包括有机溶剂浸提法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法和酶提取法等。 1.1有机溶剂浸提法 目前国内外使用最广泛的银杏叶中黄酮的提取方法就是有机溶剂提取法,一般可用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇或某些极性较大的混合溶剂,如甲醇-水(1+1)溶液。由于甲醇的毒性、挥发性较大,因此一般采用乙醇作为提取剂。银杏叶干燥粉碎后用有机溶剂浸泡、提取、过滤,滤液中的溶剂经减压蒸馏除去后得银杏叶浸膏粗提物。徐桂花等[1]提取银杏叶中黄酮类化合物时,采用乙醇(70+30)溶液为提取剂,提取温度为70℃,料液质量浓度比为1g比40mL,提取时间为4h。由于乙醇提取工艺在安全性、溶剂成本、效率及杂质酚酸去除等方面都不能应对日益严酷的市场竞争,张林涛等[1]提出了以硼砂- 氢氧化钙碱水为溶剂提取银杏叶黄酮,其黄酮提取率与文献值相近,但提取工艺时间缩短为1h。 1.2超声波提取法 超声波提取法是利用搅拌作用、强烈的振动和空间效应、高的加速度等使药物有效成分进入溶剂,从而提高提取率,缩短提取时间,并能消除高温对提取成分影响的一种提取法。刘晶芝等[2]运用了超声波技术与水浸提取相结合的方法得出超声波提取的最佳工艺条件为:超声频率40kHz,超声处理时间55min,料液质量比1比100,提取温度35℃,静置3h,提取率为81.9%。郭国瑞等[3]以水为介质,超声波提取银杏叶中黄酮苷,与常规水浸提法比较,超声波提取效率大大提高,确定超声波提取的最佳工艺为:超声处理时间55min,料液质量比1比30,提取温度50℃,提取率为82.3%。 1.3超临界流体萃取法 超临界流体萃取法是一种以超临界流体代替常规有机溶剂对有效成分进行萃取和分离的新技术。可作为超临界流体的物质很多,其中二氧化碳临界温度(TC=31.3℃)接近室温,且具有无色、无毒、无味、不易燃、化学惰性、价廉、易制成高纯气体等优点而被广泛应用,特别在中药材及其制剂中更显示出其独特、简便、快速、具有较高的选择性、提取杂质少、可直接进样分析的优点。邓启焕等[4]探讨了超临界萃取银杏叶有效成分的影响因素,最佳条件为萃取压力20MPa、时间90min、粒度3.9mm、温度40℃,经测定银杏叶黄酮的质量分数为28%,高于国际公认标准。 1.4微波提取法 微波提取法是利用分子或离子在微波场中的导电效应直接对物质进行加热从而提取植物细胞内耐热物质的新工艺。曾里等[5]的研究表明以乙醇溶液作溶剂比以水作溶剂的效果好,最佳条件为以乙醇 (60+40)溶液为提取剂,解冻处理20min。张鹏等[6]对微波法提取银杏叶中黄酮类物质进行了研究,最佳提取条件为以乙醇(50+50)溶液

总黄酮测定含量

1 各批次药材含量测定 使用已经确定的总黄酮含量检测方法分别进行5个批次原料含量的测定 总黄酮含量测定:分别精密称取药材粗粉0.5g,置100ml锥形瓶中,加70%乙醇50ml,称定重量,超声60分钟,放冷,称定,加入70%乙醇补足减失重量,摇匀,过滤,弃去粗滤液,精密量取续滤液10.0ml上聚酰胺树脂,待充分吸附后,用乙醇进行洗脱,至流出液基本无色,以洗脱液定容至25ml量瓶中,备用。精密量取供试品溶液5ml,置10ml比色管中,加 5%亚硝酸钠溶液0.4ml,使混匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液0.4ml,摇匀,放置6 分钟,加2mol/L氢氧化钠溶液3ml,再加30%乙醇至刻度,摇匀,放置15分钟,照分光光度法(《中国药典》2010版一部附录Ⅴ B),在504nm 的波长处测定吸收度。 表1 不同批次药材总黄酮含量测定结果 批号含量(%) 1 2 3 X±S 20140516 0.16350.16480.17010.1661±0.0035 20140516紫外扫描色谱图 2 药材总黄酮转移率研究 2.1 单个药材转移率研究

2.1.1 单个药材的转移率测定 同一批次的各药材,分别按照产品生产工艺提取得单个药材的总黄酮浓缩液样品,进行总黄酮含量检测,与“1”项下同批药材的总黄酮含量相比得出单个药材的转移率(如下式),分别进行5批次药材测定。 黄芪、桑叶、黄精、山茱萸:分别取黄芪、桑叶、黄精、山茱萸各100g,加水煎煮两次(回流),第一次加水12倍量,煎煮2.0h,过滤;第二次加水10倍量,煎煮1.0h,过滤,合并滤液浓缩至100ml,备用。 黄芪不同浓缩程度的考查:取黄芪100g,加水煎煮两次(回流),第一次加水20倍量,煎煮2.5h,过滤;第二次加水20倍量,煎煮2.0h,过滤,合并滤液,重复试验三次,分别浓缩至50ml、100ml、200ml,备用。 精密量取上述溶液5ml,加乙醇15ml,摇匀,过滤,弃去粗滤液,精密量取续滤液10.0ml上聚酰胺树脂,待充分吸附后,用乙醇进行洗脱,至流出液基本无色,以洗脱液定容至25ml量瓶中,备用。精密量取供试品溶液5ml,置10ml 比色管中,加5%亚硝酸钠溶液0.4ml,使混匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液0.4ml,摇匀,放置6 分钟,加2mol/L氢氧化钠溶液3ml,再加70%乙醇至刻度,摇匀,放置15分钟,照分光光度法(《中国药典》2010版一部附录ⅤB),在504nm 的波长处测定吸收度。 表2 不同批次药材提取液总黄酮含量测定结果 批号含量(%) 1 2 3 X±S 20140516 0.16350.16480.17010.1661±0.0035

黄芪中总黄酮的含量测定方法_图文(精)

黄芩中总黄酮的含量测定 To determine the content of total flavonoids in Radix Scutellariae 班级 08级 2班 专业药学 姓名崔立靖 同组人陆晓娅关雪李娟张栋材 摘要目的:黄芩中总黄酮含量的测定。方法:采用紫外分光光度法测定黄芩中总黄酮的含量。结果:黄芩中总黄酮含量是 0.034mg/ml。 Abstract Objective :To determine the content of total flavonoids in Radix Scutellariae. Methods :Ultraviolet spectrophotometry was used to To determine the content of total flavonoids content. Results :Total flavonoids content of Radix Scutellariae reached 0.034mg/ml。 关键词黄芩;总黄酮;紫外分光光度法 Key WorldRadix Scutellariae; Total flavonoids ; uv-spectrophotometry 目录 摘 要 ........................................................................................................................................... .. (1) Abstract ................................................................................................................................. ............ 1关键 词 ...........................................................................................................................................

黄芪化学成分及药理作用综述资料

摘要 近年研究表明黄芪的主要化学成分有黄芪多糖、皂苷类、黄酮类和氨基酸等;其药理作用为提高免疫功能, 增强抗氧化、抗辐射和抗癌作用, 保护心脑血管、肝脏、肾脏和肺脏作用, 保护脑细胞、提高记忆力, 舒张血管平滑肌, 激素样作用, 抗菌及抑制病毒作用, 降血脂、降血糖、减少糖尿病并发症等;临床上黄芪广泛用于治疗循环系统、神经系统、消化系统、呼吸系统、内分泌和血液系统疾病;临床上未见明显肝肾毒性,但有妊娠晚期误用致难产, 静滴黄芪制剂出现轻度过敏反应等临床报道。文中对近年来黄芪的化学成分及药理作用研究进展进行综述。 关键词: 黄芪,化学成分,药理作用

Abstract Recent studies have indicated that the main chemical compositions of Astragalus membranaceus include Radixastragali polysaccharide, saponin categories and amino acids. The experimental studies have shown that Astragalus membranaceus can imp- rove immune function; enhance resist an cetooxidation; exertanti-radiation and antic- ancer effects; protect cardiovascular, liver, kidney, lung, and braincells; improve me- mory; relax blood vessel smooth muscle; possess the hormone-like, antibacterial and antiviral effects; exert thehypolipidemic and hypoglycemic effects,And reduce comp- lications of diabetes. In clinic, Astragalus membranaceus is widely used in treating ci- rculation, nerve, digestion, respiration, endocrine and blood diseases. Astragalus me- mbranaceus shows noobvious liver and kidney toxicity, butoccasionally causes dysto- cia after misuse in late pregnancy, and mild allergic reactions due to application of the intravenous for mulations. This review summarized recent advances in the research of chemical compositions and the pharmacological effects of Astragalus membranaceus. Key words;Astragalus membranaceus,chemical composition,pharmacological effect

黄酮含量的测定方法

黄酮含量的测定方法 1、对照法 1) ①对照品制备:精密称取芦丁对照品20.8mg,置于100ml容量瓶中,加70%乙 醇使溶解并稀释至刻度,摇匀。 ②样品溶液制备 精密称取样品0.50g,精密加入70%乙醇50ml,称定重量,超声处理30分钟,称定重量,用70%乙醇补足减失重量,即得。 ③标准曲线的制备 精密称取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml,分别置于25ml比色管中,加70%乙醇10ml,加5%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀,放置6分钟,加1mol/L 氢氧化钠溶液10ml,加70%乙醇置刻度,摇匀,放置15分钟。各取10ml 置于50ml容量瓶中,用70%乙醇稀释至刻度。在510nm的波长下测定吸光度。 2) ①样品溶液的制备: 分别精确称取80℃恒温干燥的样品用50%甲醇回流提取,料液比1:15,提取两次,每次30min,将两次提取液合并浓缩至一定体积,用30%甲醇定容至50ml 容量瓶中。从其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中,稀释至刻度,再从100ml 容量瓶中取出1.5ml溶液,放至10ml容量瓶中,定容,为待测样品液Ⅰa和Ⅱa。 ②最大吸收波长的选择:分别作样品液Ⅰa、Ⅱa及芦丁标准品的吸收曲线,均在350 nm 处有一强吸收,因此选择350 nm为测定波长。 ③标准曲线的制定: 精密称取芦丁对照品10.3mg,用少量30%乙醇溶解后,转移至50ml容量瓶,用蒸馏水定容至刻度。分别精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml芦丁溶液置于100ml 容量瓶中,于350 nm 波长处测定吸光值,以芦丁空白为参比,以芦丁浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标准曲线,提示在4.12~12.36mg/103ml浓度之间,吸光度值与浓度呈现良好的线性关系。 ④含量测定结果: 分别吸取2.2.1中Ⅰa和Ⅱa待测样品液各适量于石英比色池中,按标准芦丁一吸光度测定法,以样液空白参比,于350nm 波长下测定吸光值,计算各提取液中总黄酮含量。 计算公式为:样品总黄酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。 注:上式为通过回归方程转化而来,式中A为测得样品液的吸光度值,W为称样量。

设计实验 总黄酮的提取和测定

设计性实验: 银杏叶中总黄酮的提取和测定 小组人员:袁国明郎启国赵永仓王蓉 一、目的要求 1、探究不同浓度的乙醇和在不同时间下对黄酮类化合物提取率的影响。 2、掌握从银杏叶中提取总黄酮的操作步骤和测定方法。 3、了解提取银杏叶中黄酮类化合物制备的基本原理和方法。 二、实验原理 根据超声波具有空化、粉碎、搅拌等特殊作用,对银杏叶的细胞有破坏现象,使乙醇溶液能渗透到银杏叶中,以便让总黄酮溶解在乙醇中,在通过分离提纯的方法,来获得总黄酮的含量。 黄酮类是含酚羟基的化合物,能够和铝离子产生黄色络合物,在碱性条件下溶液呈红色。因此,本实验所采用的方法是在碱性溶液中加铝盐显色的分光光度法。其具体操作是在所测定的溶液中加入5%NaNO2;10%A1(NO3)3;5%NaOH溶液,在500nm波长下,用紫外分光光度法测定所提溶液中总黄酮的含量。 三、试剂和器材 1、试剂 芦丁标准品;5%NaNO2;10%A1(NO3)3;5%NaOH;30%、40%、50%、60%、70%、80%的乙醇(用95%的酒精31.91ml、42.55ml、53.19ml、68.83ml、74.47ml、85.11ml );及蒸馏水等。 2、材料 新鲜的银杏叶 3、器材 容量瓶25ml(×1) 100ml(×6);吸管0.5ml(×2)1ml(×2),2ml(×1),5ml (×1)粉碎机;超声波清洗机;高速离心机;三角锥形瓶50ml(×6);滤纸;分光光度

计;烧杯;具塞刻度试管;分析天平;20ml量筒等 四、操作方法 1、银杏叶的处理 把新鲜的银杏叶低温烘干,使水分小于8%,制成干粉,待用。 2、制作标准曲线 准确称取芦丁标准品5mg,用80%乙醇溶解,定容于25mL容量瓶中,摇匀,得0.2mg /mL的标准溶液。 移液管精确吸取标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml,分别置于10mL容量瓶中,加入5%NaNO2 0.4mL,摇匀,放置5min;加入10%A1(NO3)3 0.4mL,摇匀,放置6min;加入5%NaOH 4.0mL,再加蒸馏水至刻度,摇匀,在80℃水浴中保温10min。以试剂空白作为参比溶液。用1cm比色皿,在510nm波长处测定吸光度,绘制标准曲线(标样浓度和吸光度的关系)。 表1-1 标准曲线制作 管号 1 2 3 4 5 6 7 芦丁标准液(mL)0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 5%NaNO2(mL)0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 放置时间(min) 5 5 5 5 5 5 5 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 10%Al(NO3)3 (mL) 放置时间(min) 6 6 6 6 6 6 6 5%NaOH(mL) 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 蒸馏水(mL) 5.2 5.0 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0 3、探究不同时间对黄酮提取的影响 分别称取6分1g的银杏叶粉末,放在50mL的三角锥形瓶中,并作相应标记,分别加入70%的乙醇溶液各20mL,在超声波清洗机(500W)超声30 min、35 min 、40min、45 min、50min、 55min将溶液用高速离心机离心后除去滤渣,得到粗产品,用量筒量体积做记录,等待备用。 4、探究不同浓度的乙醇对总黄酮提取的影响

植物总黄酮的提取与测定

试验植物总黄酮的提取与测定 摘要本实验采用紫外分光光度法测定芹菜体内总黄酮含量,利用黄酮类化合物与铝盐反应生成红色络合物。以芦丁为标准品在510nm处测定吸光度。得出标准曲线,然后计算样品的黄酮量。下面会就本实验出现的一些状况作出详尽想分析。 材料与方法 材料新鲜芹菜叶 方法 试剂的配制 标准品芦丁;甲醇;石油醚;磷酸;95%乙醇;硝酸铝;亚硝酸钠;氢氧化钠;去离子水 步骤 1 总黄酮提取称取新鲜芹菜叶子10.0g,研磨后于回流装置中用70ml 95%乙醇回流2h,过滤,然后用石油醚做溶剂萃取1~2次去脂溶物。溶剂用量为提取液的1/2,除脂后浓缩并定容至50ml。 2 芹菜黄酮含量的测定吸取10ml置25ml容量瓶中,加30%乙醇2.5ml,再加入5%亚硝酸钠溶液0.75ml摇匀,放置5min,加10%硝酸铝液0.75ml,摇匀,放置5min,再加1mol/L NaOH溶液10ml,摇匀,加30%乙醇至刻度,放置10min,在510nm波长处测定吸光度。同时,取上述稀释液10ml,置于25ml容量瓶中,

加30%乙醇至刻度,作为对照溶液。根据测得的吸光度得出标准曲线 3 标准溶液配制精确称取与120℃真空干燥至恒重的芦丁标准品20mg,置100ml容量瓶中,加60%乙醇溶液,稀释至刻度,精确量取25ml,置于50ml容量瓶中,稀释至刻度,摇匀既得每1ml 含芦丁0.1mg的标准溶液。 4标准曲线制作精确量取标准溶液0。0,2.5,5.0,7.5,10.0,12.5ml,分别置于25ml容量瓶中,加30%乙醇补足至12.5ml,加5%亚硝酸钠溶液0.75ml摇匀,放置5min,精确加入10%硝酸铝液0.75ml,摇匀,放置5min,再精确加入1mol/L氢氧化钠液10ml,用30%乙醇稀释至刻度,以第一管为空白,与510nm波长下测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准溶液。 结果 标准:A1=0.000;A2=0.121;A3=0.266;A4=0.394;A5=0.530;A6=0.673 样品:A(1)=0.000;A(2)=0.036

黄芪的功效与作用

黄芪的功效与作用 导读:黄芪,又名王孙、百药棉、箭芪,为豆科植物黄芪或内蒙黄芪的干燥根,主产于山西、甘肃、黑龙江、内蒙古等地。以粗长、表皮皱纹稀少、质坚而绵、粉性足、味甜者为优。中医学认为,黄芪的性味甘、微温,有补中益气、止汗、利水消肿、除毒生肌的作用。 黄芪的功效与作用一: 黄芪的`功效 黄芪有益气固表、敛汗固脱、托疮生肌、利水消肿之功效。用于治疗气虚乏力,中气下陷,久泻脱肛,便血崩漏,表虚自汗,痈疽难溃,久溃不敛,血虚萎黄,内热消渴,慢性肾炎,蛋白尿,糖尿病等。炙黄芪益气补中,生用固表托疮。 黄芪的作用 1.补气固表,利尿托毒,排脓,敛疮生肌。用于气虚乏力,食少便溏,中气下陷,久泻脱肛,便血崩漏,表虚自汗,气虚水肿黄芪圆片,痈疽难溃,久溃不敛,血虚痿黄,内热消渴、慢性肾炎、蛋白尿,糖尿病。 2.有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗应激、降压和较广泛的抗菌作用。能消除实验性肾炎蛋白尿,增强心肌收缩力,调节血糖含量。 3.增强机体耐缺氧及应激能力,促进机体代谢和改善心功能。 4.有降压的作用,调节血糖,可以作为糖尿病患者的辅助用药,

黄芪同时具有抗茵及抑制病毒作用。 5.用于气虚乏力,食少便溏,中气下陷,久泻脱肛,便血崩漏,表虚自汗,气虚水肿,痈疽难溃。 6.具有氧化性。黄芪的化学成分有:膜荚黄芪含黄酮、皂甙类成分黄酮类成分如芒柄花黄素、羟基芒柄花黄素(毛蕊异黄酮)及其葡萄糖甙等,其中有些成分具较强的抗氧化活性。 7.病弱体虚的人服用,可以增强体力,增强抵抗力,对病情恢复有一定的帮助。 黄芪的功效与作用二: 灌服黄芪的动物,增重快,血清总蛋白、白蛋白增高,游泳时间延长,尿量增加。黄芪还可降低动脉压,减慢心率,舒张冠状动脉,加强心肌收缩力,增加心输出量,防治循环衰竭。对实验性肾炎也有很好的疗效,可使肾脏病变减轻,尿中蛋白定量减少。 黄芪在中医临床上应用十分广泛。取黄芪泡水饮用,可治身体困倦,无力,气短。取黄芪加防风、白术、甘草、生姜、大枣适量煎服,防治免疫功能低下,反复感冒。取黄芪配伍牡蛎、浮小麦、麻黄根,可治盗汗。 以黄芪配白术、防己、生姜、大枣,可治水肿。黄芪与党参、白术、甘草、枳壳、升麻、柴胡同用,可治脱肛、子宫或内脏下垂。用黄芪配伍陈皮、麻仁、蜂蜜,可治老人或产后便秘,欲便不能。用黄芪加桂枝、白芍、甘草、生姜、大枣,既可治腹部冷痛、又可治关节、

黄芪中总黄酮的含量测定方法

黄芩中总黄酮的含量测定 To determine the content of total flavonoids in Radix Scutellariae 班级 08级2班 专业药学 姓名崔立靖 同组人陆晓娅关雪李娟张栋材

摘要目的:黄芩中总黄酮含量的测定。方法:采用紫外分光光度法测定黄芩中总黄酮的含量。结果:黄芩中总黄酮含量是0.034mg/ml。 Abstract Objective:To determine the content of total flavonoids in Radix Scutellariae. Methods :Ultraviolet spectrophotometry was used to To determine the content of total flavonoids content. Results :Total flavonoids content of Radix Scutellariae reached 0.034mg/ml。 关键词黄芩;总黄酮;紫外分光光度法 Key World Radix Scutellariae;Total flavonoids ; uv-spectrophotometry

目录 摘要 (1) Abstract (1) 关键词 (1) Key World (1) 目录 (2) 1 绪论 (3) 2 黄芩中总黄酮含量测 (6) 2.1仪器与试剂 (6) 2.1.1实验仪器 (6) 2.1.2实验药品 (6) 2.2试验方法 (6) 2.2.1总黄酮成分提取 (6) 2.2.2定量实验总黄酮的含量测定 (6) 2.2.2.1线性关系考察 (6) 2.2.2.2提取物含量的测定 (7) 2.3方法学检验 (7) 2.3.1精密度实验 (7) 2.3.2稳定性考察 (7) 2.4黄芩根及粉末的显微图像 (7) 2.4.1黄芩根的显微图像 (7) 2.4.2黄芩粉末的纤维图像 (7) 3 参考文献 (8)

总黄酮的测定方法

总黄酮的测定方法 黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物,种类繁多, 大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成苷,部分为游离态或与鞣质结合存在。黄酮化合物系色原烷或色原酮的2-或3-苯基衍生物, 一般具有C6-C3-C6的基本骨架结构。近年来, 黄酮类化合物以其广谱的药理作用倍受青睐, 人们对含有黄酮的化合物进行大量研究, 以期获得黄酮含量较高的中草药。因此黄酮的含量测定成为研究的关键步骤。 一、方法 (一)高效液相色谱法 1. 原理植物类样品用石油醚脱脂后,经甲醇加热回流提取,以高效液相色谱法分离,在紫外检测器360nm条件下,以保留时间定性、峰面积定量。 2.仪器和试剂(1)高效液相色谱仪(2)紫外检测器(3)层析柱(4)超声波清洗仪(5)索氏提取器 (6)微孔过滤器(滤膜0.45um)(7)甲醇(色谱纯)(8)芦丁标准品 (9)石油醚,盐酸,磷酸(分析纯)。(10)去离子水 (11)芦丁标准溶液:精确称取经105℃干燥恒重的芦丁标谁品15.0mg,加甲醇溶解并定容至100ml,配成150ug/ml的芦丁标准溶液 3. 操作步骤 (1)样品处理 1)固体样品:称取2.0g干燥的固体样品,研细,置于索氏提取器中,用石油醚(60~90℃)提取脂肪等脂溶性成分,弃去石油醚提取液,剩余物挥去石油醚,加人甲醇50ml和25%HC1 5ml,80℃水浴回流水解1h,取出后快速冷却至室温,转移至50ml容量瓶中,甲醇定容,经0.45um滤膜过滤,供分析用。 2)液体样品:准确吸取样品2.0ml,直接以石油醚萃取脱脂,挥去石油醚后, 以甲醇溶解并定容,经微孔滤膜(0.45um)滤过后供测定用。 (2)色谱分离条件 色谱柱:CLC-ODS,6mm×150mm,5um; 流动相:0.3%磷酸水溶液:甲醇(V:V)=40:80,临用前用超声波脱气;流速:lml/min;柱温:40℃;检测波长:360nm;灵敏度:0.02AUFS;进样量:20ul。 (3)样品测定:准确吸取样品处理液和标准液各10ul,注入高液相色谱仪进行分离,以其标准溶液峰的保留时间定性,以其峰面积计算出样品中总黄酮的含量。4、结果计算 (二)分光光度法

黄酮类化合物用途综述

黄酮类化合物用途综述 黄酮类化合物是植物在长期自然选择过程中产生的一些次级代谢产物,广泛存在于蔬菜、水果、牧草和药用植物中1。目前,已于5000多种 植物中发现了8000多种黄酮类化合物,主要有黄酮及黄酮醇类,二氢 黄酮及二氢黄酮醇类,异黄酮及异黄酮醇类,花色素类,黄烷醇类, 查耳酮类,双黄酮类及其他黄酮类。黄酮类化合物药理作用广泛,具 有保护心血管系统、抗癌、抗炎、抗氧化、抗自由基、抗菌、抗病毒、镇痛等作用。笔者就近年来其药理作用研究进展作一综述。 1抗癌作用 黄酮类化合物主要是通过抑制癌细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、促进 抑癌基因表达、抗致癌因子、干预肿瘤细胞信号转导等途径来实现抗 癌作用。Billard等2研究表明,黄酮类化合物Flavopiridol可通过 抑制诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达,降低NO生成,进而诱导慢 性B淋巴细胞白血病细胞凋亡,其主要作用于S期与G2期,并能够与 细胞周期依赖型抗肿瘤药物产生协同作用。Haddad等3考察了26种黄酮类化合物对前列腺癌LNCaP细胞及PC-3细胞增殖的抑制作用,结果 发现多数黄酮类化合物在低浓度下都有抑制癌细胞增殖的作用。李兰 英等4研究表明,陈皮多甲氧基黄酮类成分可显著诱导人肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2凋亡,这可能与该成分作用于肿瘤细胞增殖周期 G2/M期,且能使G0/G1期细胞趋于同步化相关。Handayani等5研究 表明,大豆异黄酮提取物可显著抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,可通过 下调白介素-8(IL-8)表达,减少细胞周期蛋白A(cyclinA)表达, 并将细胞周期阻断在G2/M期,从而抑制肿瘤的转移。 2抗氧化、清除自由基作用 黄酮类化合物有很强的还原性,可清除各种自由基,发挥显著的抗氧 化作用。贾东辉等6研究表明,从构树叶中提取的黄酮,具有明显的 抗氧化活性,且其抗氧化活性随着提取物浓度的增加而逐渐增强。单 杨等7研究表明,橙皮苷具有较强清除活性氧能力。胡琴等8发现葛

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