不同采收时期及不同部位绿凤藤茶中总黄酮含量比较与分析

不同采收时期及不同部位绿凤藤茶中总

黄酮含量比较与分析

（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）

作者：向东山刘晓鹏翟琨郑小江

【摘要】目的探讨恩施地区绿凤藤茶的最佳采收时期及采摘部位。方法采用分光光度法测定不同采收时期及不同部位绿凤藤茶中总黄酮的含量。结果不同采摘时间及不同采摘部位的绿凤藤茶中总黄酮含量具有明显的差别。结论不同时间采摘的藤茶以6月总黄酮含量为最高，不同采摘部位的藤茶总黄酮含量以茎尖为最高。

【关键词】绿凤藤茶；不同采收时期；不同部位；总黄酮Abstract：ObjectiveTo clarify the best harvest season and harvest part of A.grossedentata cv,lufeng in Enshi areas.MethodsSpectrophotometry was used to determine the content of total flavonoids in different parts of A.grossedentata cv,lufeng collected in different seasons.ResultsThe content of total flavonoids had significant differences in different seasons and different parts of A.grossedentata cv,lufeng. ConclusionThe content of total

flavonoids is the highest in A.grossedentata cv,lufeng collected in June. The content of total flavonoids is the highest collected in the stem tip.

Key words：A.grossedentata cv,lufeng; Different seasons; Different parts; Total flavonoids

藤茶Ampelsis为葡萄科（Vitaceae）蛇葡萄属Ampelopsis 药食两用的木质藤本植物显齿蛇葡萄A.grossedentata(Hand.-Mazz.)W.T.Wang，富含黄酮（二氢杨梅素）、氨基酸、多糖、多酚、维生素等多种有效成分。现代药理学与生物活性研究表明，藤茶黄酮具有抗氧化、护肝、降血糖、降血脂等多种生物活性［1～5］。绿凤藤茶A.grossedentata CV,lufeng,是郑小江等［6］经过多年选育的无性系，2003-12通过湖北省恩施州农作物品种审(认)定小组审(认)定和湖北省农作物品种审定委员会备案为推广品种，所含总黄酮、总氨基酸、维生素等都极显著高于显齿蛇葡萄［7］，是大量应用于医药、保健、功能性饮食品工业的优质原料。

目前，恩施州绿凤藤茶的种植面积约520 ha，并产生了较好的经济效益。在实际生产过程中，每年对藤茶的采摘至少在3次以上，但对于藤茶的采摘时间及采摘部位，各地区都不一样，没有统一标准。为了弄清绿凤藤茶的最佳采摘时间与采摘部位，笔者对不同采摘时期及不同部位绿凤藤茶的黄酮含量进行检测、分析与比较，为实

际生产提供理论依据。

1 材料与仪器

1.1 试验材料与试剂

试验材料采自湖北省恩施州来凤县藤茶生产基地，在4～10月7个月中每月下旬采样一次，采样间隔大约为30 d。主要试剂有无水酒精、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠，均为分析纯；对照品为芦丁，购于中国药品生物制品检定所。

1.2 仪器

超声波提取仪；UV-2550型紫外可见分光光度计。

2 方法

2.1 样品处理

所有采摘的样品均置鼓风干燥箱中60℃烘干，粉碎至全部通过60目筛孔，密封于干燥器中备用。

2.2 样品溶液的制备

称取样品粉末0.5 g左右，加入10 ml 75%的乙醇作为提取溶剂，置超声波提取仪中，于80℃超声提取30 min，离心，重复提取两次，合并提取液，定容至100 ml的容量瓶中即得样品溶液。

2.3 对照品溶液的配制

精密称取经充分干燥的对照品5.0 mg，置25 ml的容量瓶中，用75%的乙醇溶解，然后加75%的乙醇至刻度，摇匀，配制成浓度为0.2 mg/ml的对照品溶液。

2.4 标准曲线的制作

参照文献［8］的方法，以吸光度为横坐标，对照品的质量为纵坐标制作标准曲线（如图1），并求得曲线回归方程为Y=0.609 4X+0.005 1，相关系数R2=0.995。

2.5 样品中总黄酮含量的测定

取各样品溶液0.2 ml于具塞试管中，补加75%乙醇至2.5 ml，其它步骤同标准曲线的制作，分别测定其吸光度，通过回归方程计算各样品中总黄酮的含量。

3 结果与分析

3.1 不同采收时期绿凤藤茶中总黄酮含量的比较与分析

从4月起至10月止，在每月下旬采样1次，以藤茶叶片为原料，对不同采样时期样品中的总黄酮含量进行检测（见表1）。由表1可知，藤茶各不同部位总黄酮的含量以6月、7月和8月较高，5月及9月次之，4月及10月总黄酮含量较低。表1 不同采收时期绿凤藤茶中总黄酮含量（略）

3.2 不同采摘部位绿凤藤茶中总黄酮含量的比较与分析

以5月下旬所采收的各不同部位的藤茶为原料，对各样品中的总黄酮含量进行检测，其结果如表2所示。由表2可知，不同部位的藤茶中总黄酮含量相差较大，其中叶的含量比茎的高，新叶比老叶中的含量高。不同部位藤茶样品中总黄酮含量依次为：茎尖（龙须）15 d 左右的展叶25 d左右的展叶35 d左右的展叶15 d左右的嫩茎。

3.3 加标回收实验

按测定方法，对6份藤茶样品溶液分别加入一定量的芦丁对照品

溶液，测定吸光度，计算黄酮含量，结果如表3。由表3可知，不同样品的平均回收率为99.94%，相对标准偏差较小，说明本测定方法具有很好的准确度。表2 不同采收部位绿凤藤茶中总黄酮含量（略）表3 回收率实验结果（略）

4 结论与讨论

不同采摘时间及不同采摘部位藤茶中总黄酮含量具有明显的差别，不同采摘时间以6月总黄酮含量为最高，不同采摘部位以茎尖（龙须）为最高。

根据恩施地区的气候特点，结合不同采摘时间藤茶中总黄酮的含量来看，本地区藤茶全年可采摘3次。第1次采摘时间应在5月的中旬或下旬，此时藤茶各个部位中总黄酮含量都较高且产量高，若在4月采摘，藤茶中总黄酮含量低且产量低，若在6月采摘，虽然产量较高但老叶较多，老叶中总黄酮含量偏低，品质较差，且在6月采摘对后两次的采摘不利。第2次采摘时间应在7月的上旬或中旬，与第1次采摘的时间间隔大约50 d左右，因为这段时间气温适宜，藤茶生产较快，这样既可保证较高的产量，又可采摘到较多的新叶，保证其质量。第3次采摘时间应在9月的上旬或中旬，若采摘时间太晚，藤茶中总黄酮含量偏低，对其品质影响较大。

根据藤茶的生长特性，结合不同采摘部位藤茶中总黄酮含量来看，在进行采摘时，最好只采摘生长40 d以下的叶片和15 d以下的嫩茎。

这一是因为老叶中总黄酮含量较低，品质较差，二是因为要留一部分的老叶进行光合作用，为藤茶的生长提供必要能量。

【参考文献】

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［2］钟正贤,覃洁萍.广西藤茶总黄酮保肝的实验研究［J］.广西科学,2002,9(1):57.

［3］钟正贤,覃洁萍.广西藤茶总黄酮降血糖的实验研究［J］.中国中药杂志,2002,27(9):687.

［4］刘翠娥,王海玉,王亚东,等.藤茶辅助降血脂作用的研究［J］.食品科学,2005,26(11):237.

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食品科学,2007,28(9):453.

［8］邓素兰,余继宏,管林.杜仲不同部位总黄酮含量的测定［J］.生物质化学工程,2007,41(3):37.

藤茶降血压作用研究

藤茶降血压作用研究 廖寅平1，王硕2，安丰轩1，葛智文1，兰毅1，张征1* （1.柳州市农业技术推广中心，广西柳州 545002；2.广西药用植物研究所，广西南宁 530023） 摘要：藤茶学名为显齿蛇葡萄，英文名称为vine tea，葡萄科蛇葡萄属落叶藤本植物，广西柳州市的融安、融水、三江等县均有大量野生资源分布。中国医学科学院药用植物研究所广西分所姚新生院士实验室通过对大鼠饲喂藤茶水溶液，以研究藤茶对大鼠血压的影响。研究结果表明，藤茶对实验大鼠具有较好的降血压作用，但对心率并无显著性影响。 关键词：藤茶；降血压；研究；心率 藤茶，学名为显齿蛇葡萄[Ampelopsis grossedentata (Hand-Mazz)W.T.Wang]，英文名称为vine tea，是葡萄科(Vitaceae Michx)蛇葡萄属(Ampelopsis)的一种野生木质落叶藤本植物，属于典型的类茶植物，主要分布于我国湖南、湖北、云南、贵州、广东、广西、福建等地。据调查，广西柳州市的融安县分布大量野生藤茶资源，分布面积约2万亩，具有很好的开发价值。 资料显示，藤茶具有清热解毒、抗菌消炎、祛风除湿、强筋骨、降血压、降血脂、降血糖、保肝护肝等功效。目前，运用药理研究的方法对藤茶的降血压作用进行研究还鲜有报导，中国医学科学院药用植物研究所广西分所姚新生院士实验室用藤茶水溶液饲喂实验大鼠的方法，研究了藤茶对大鼠血压的影响。 1 实验材料 1.1 样品来源及处理：藤茶，广西柳州市农业技术推广中心提供。将藤茶分别按1:10和1:6的比例用开水浸泡30min，然后再煮沸5min，过滤，将两次滤液合并，置于热水浴上浓缩至0.5g/ 1ml。 1.2 实验动物：SPF级SD大鼠，体重150～180g，雄性，共50只。湖南斯莱克达实验动物有限公司生产，合格证号：SCXK2009 -0004号。实验温度：23～25℃，相对湿度：6 5%～7 0%。 1.3 饲料 普通基础饲料：配方略。 1.4 剂量分组

总黄酮、多酚含量的测定

燕麦总黄酮含量的测定 一、仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、100mL烧瓶、10mL离心管10个、试管架2个 二、药品 芦丁标准品40mg、无水乙醇1000mL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g 三、实验步骤 （一）、样品处理及总黄酮的提取 1. 将样品籽粒分别称取 2.5 g置于小信封里，80℃烘干24 h。 2. 研成粉末，称取500±2 mg样品于10 mL离心管中，使样品位于试管底部（重复3次）。 3. 每管加4 mL 60％乙醇，放水浴锅60℃浸提2 h。6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于10 mL容量瓶中。 4. 再向离心管中加4 mL的60％乙醇，放水浴锅60℃浸提1 h。6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于相应的10 mL容量瓶中。60％乙醇定容至10 mL，待测。 （二）、标准曲线绘制 1. 精确量取浓度200 μg/mL芦丁标准溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、 2.0 mL 分别置于10 mL容量瓶中。 2. 向容量瓶中分别加60％乙醇5、4.8、4.6、4.2、 3.8、3.4、3.0 mL。 3. 然后加5％亚硝酸钠0.3 mL，摇匀，静置6 min。 4. 再加10％硝酸铝0.3 mL，摇匀，静置6 min。 5. 加4％氢氧化钠4.0 mL，用60%的乙醇定容至刻度，摇匀，静置12 min。 6. 于510 nm波长下测定吸光度，并以芦丁标准浓度值为纵坐标，以吸光度为横坐标，绘制标准曲线。 （三）、样品提取液总黄酮含量的测定 准确吸取总黄酮提取液2.0 mL于10 mL容量瓶中，按二的方法测定吸光度，

总黄酮含量测定方案

总黄酮含量测定 一样品溶液的制备 70%乙醇溶液，料液比1﹕8 ，80度下回流2h。取10g样品放入圆底烧 瓶中加入80ml 70%乙醇溶液回流2h,抽滤定容至100ml备用。使用时先离心再用70%乙醇稀释10倍做样品溶液。 二芦丁标准品的配置 精密称取芦丁2mg，加无水乙醇定容至10ml。制得浓度为0.2mg/ml芦 丁标准品溶液。 三显色方法的确定 1 扫描原液分别取芦丁溶液和样品溶液各1ml，加无水乙醇定容至25ml，空白对照，全波扫描。 2硝酸铝显色法分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加5%亚硝酸 钠溶液（1.25g亚硝酸溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml, 摇匀，放置6min，加10%硝酸铝溶液(4,4014g硝酸铝.九水溶于无水乙醇中定容到25ml 容量瓶中) 1ml，摇匀，放置6min，加4%氢氧化钠试液(2g氢氧化钠溶于无水乙醇中定容到50ml容量瓶中）10ml, 再加无水乙醇定容至25ml，摇匀，放置15min，空白对照，全波扫描bb 。 3氯化铝显色法分别取芦丁对照溶液和样品溶液各5ml ,加1%的氯化 铝溶液（1g氯化铝溶于无水乙醇中定容到100ml容量瓶中)10ml，摇匀放置10min，空白对照，全波扫描。 4 氢氧化钾显色法分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加3ml10% 氢氧化钾溶液（2.5g氢氧化钾溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中）， 充分摇匀显色5min后，用无水乙醇定容至25ml, 摇匀，空白对照，全波 扫描。 四显色条件的确定 五标准曲线的绘制 分别取1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,6ml芦丁对照品溶液，按所选的显色方法测定吸光度，绘制标准曲线。 六精密度实验 按标准曲线绘制方法，分别准确量取1.0ml芦丁标准液5份，按所选显色剂和所确定的最优显色条件在所选波长下测定吸光度。

厚朴酚药理作用的最新研究进展

龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/d516963663.html, 厚朴酚药理作用的最新研究进展 作者：张勇唐方 来源：《中国中药杂志》2012年第23期 [摘要] 厚朴酚是常用传统中药厚朴的主要活性成分之一，既往研究证实其具有抗氧化、抗微生物、抗肿瘤等多种药理作用，近年来国内外对厚朴酚的研究与日俱增，该研究综述厚朴酚药理作用的最新研究进展，简要指出目前研究存在的主要问题和今后的发展方向。 [关键词] 厚朴；活性成分；厚朴酚；药理作用；抗氧化 厚朴Mangnolia officinalis是传统中医学和日本汉方医学（Kampo medicine in Japan）广泛使用的一味药物，临床多用来治疗细菌感染、炎症和胃肠道疾病等[1]。自1973年日本人藤田 先后从原药材中分离得到2种主要活性成分厚朴酚（magnolol）及其异构体和厚朴酚（honokiol）后，国内外学者便对这2种成分展开了诸多研究[2]。既往研究证实厚朴酚具有中 枢性肌肉松弛，中枢神经抑制，抗炎，抗菌，抗溃疡，抗氧化，抗肿瘤，激素调节等药理作用，本文就近年来厚朴酚药理作用的研究情况作一综述，以期为该成分今后的进一步研究开发提供指导。 1 厚朴酚的理化性质 厚朴酚的分子式为C18H18O2，相对分子质量为266.32，性状为白色精细粉末，单体为无色针状结晶，熔点为102 ℃，易溶于苯、氯仿、丙酮等常用有机溶剂，难溶于水，易溶于苛性碱稀溶液。 2 厚朴酚的药理作用 2.1 抗氧化作用 厚朴酚的酚羟基易被氧化，而含有烯丙基的酚类化合物多具有清除O2-或羟自由基的能力[3]，这些结构造就了厚朴酚具有出色的抗氧化能力，而这一特性也成为其他许多药理作用的基 础。 2.1.1 清除自由基 Zhao[4]等报道厚朴酚及和厚朴酚均可有效降低硝基自由基ONOO-和单线态氧1O2，清除ABTS+和DPPH自由基。Sun等[5]以总氧自由基清除能力分析法（TOSC）证实厚朴中的3种有效成分均有较强的自由基清除能力，其中以丁香苷最强，其次是和厚朴酚及厚朴酚。 2.1.2 对抗脂质过氧化 Li等[6]以TBHP（叔丁基过氧化氢）预处理NCI-H460细胞（人类非小细胞肺癌细胞），24 h后以20 μmol·L-1的厚朴酚干预，证实厚朴酚可以有效对抗TBHP引起

总黄酮、多酚含量的测定

总黄酮含量的测定 一、仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、100mL烧瓶、10mL离心管10个、试管架2个 二、药品 芦丁标准品40mg、无水乙醇1000mL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g 三、实验步骤 （一）、标准曲线绘制 1. 芦丁标准品40mg置于称量瓶中80℃烘干至恒重，取烘干后的20mg芦丁标准品用水定容至100mL,得200μg/mL芦丁标准贮备液，精确量取上述浓度芦丁标准贮备溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、 2.0 mL分别置于10 mL具塞试管中。 2. 向具塞试管中分别加60％乙醇5、4.8、4.6、4.2、 3.8、3.4、3.0 mL。 3. 然后加5％亚硝酸钠0.3 mL，摇匀，静置6 min。 4. 再加10％硝酸铝0.3 mL，摇匀，静置6 min。 5. 加4％氢氧化钠4.0 mL，用60%的乙醇定容至刻度，摇匀，静置12 min。 6. 于510 nm波长下测定吸光度，并以芦丁标准浓度值为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。研究表明芦丁标准品含量在0～0.5mg 范围内与吸光度具有良好的线性关系。 （二）、样品处理及总黄酮的提取（以60%乙醇提取为例） 1. 将样品在80℃烘干24 h，粉碎后过80目筛置于干燥器中备用。 2. 称取500±2 mg样品于25 mL具塞三角瓶中，使样品位于三角瓶底部（重复3次）。 3. 每瓶加4 mL 60％乙醇，放超声波提取器提取2 h。提取液转至10 mL具塞离心管中。 4. 再向具塞三角瓶中加4 mL的60％乙醇，放超声波提取器提取1 h，提取液转至相应10 mL具塞离心管中，6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于相应

银杏叶黄酮提取及含量测定

银杏叶黄酮提取及含量测定 一、实验目的 1、掌握银杏叶中黄酮的提取方法 2、了解银杏叶中黄酮的含量测定 二、实验原理 近几年来，随着对黄酮类化合物研究的日益深入与重视，黄酮类化合物提取技术的发展也得到了促进。目前提取黄酮类化合物的方法主要包括有机溶剂浸提法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法和酶提取法等。 １．１有机溶剂浸提法 目前国内外使用最广泛的银杏叶中黄酮的提取方法就是有机溶剂提取法，一般可用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇或某些极性较大的混合溶剂，如甲醇－水（１＋１）溶液。由于甲醇的毒性、挥发性较大，因此一般采用乙醇作为提取剂。银杏叶干燥粉碎后用有机溶剂浸泡、提取、过滤，滤液中的溶剂经减压蒸馏除去后得银杏叶浸膏粗提物。徐桂花等［１］提取银杏叶中黄酮类化合物时，采用乙醇（７０＋３０）溶液为提取剂，提取温度为７０℃，料液质量浓度比为１ｇ比４０ｍＬ，提取时间为４ｈ。由于乙醇提取工艺在安全性、溶剂成本、效率及杂质酚酸去除等方面都不能应对日益严酷的市场竞争，张林涛等［1］提出了以硼砂－ 氢氧化钙碱水为溶剂提取银杏叶黄酮，其黄酮提取率与文献值相近，但提取工艺时间缩短为１ｈ。 １．２超声波提取法 超声波提取法是利用搅拌作用、强烈的振动和空间效应、高的加速度等使药物有效成分进入溶剂，从而提高提取率，缩短提取时间，并能消除高温对提取成分影响的一种提取法。刘晶芝等［2］运用了超声波技术与水浸提取相结合的方法得出超声波提取的最佳工艺条件为：超声频率４０ｋＨｚ，超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比１００，提取温度３５℃，静置３ｈ，提取率为８１．９％。郭国瑞等［3］以水为介质，超声波提取银杏叶中黄酮苷，与常规水浸提法比较，超声波提取效率大大提高，确定超声波提取的最佳工艺为：超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比３０，提取温度５０℃，提取率为８２．３％。 １．３超临界流体萃取法 超临界流体萃取法是一种以超临界流体代替常规有机溶剂对有效成分进行萃取和分离的新技术。可作为超临界流体的物质很多，其中二氧化碳临界温度（ＴＣ＝３１．３℃）接近室温，且具有无色、无毒、无味、不易燃、化学惰性、价廉、易制成高纯气体等优点而被广泛应用，特别在中药材及其制剂中更显示出其独特、简便、快速、具有较高的选择性、提取杂质少、可直接进样分析的优点。邓启焕等［4］探讨了超临界萃取银杏叶有效成分的影响因素，最佳条件为萃取压力２０ＭＰａ、时间９０ｍｉｎ、粒度３．９ｍｍ、温度４０℃，经测定银杏叶黄酮的质量分数为２８％，高于国际公认标准。 １．４微波提取法 微波提取法是利用分子或离子在微波场中的导电效应直接对物质进行加热从而提取植物细胞内耐热物质的新工艺。曾里等［5］的研究表明以乙醇溶液作溶剂比以水作溶剂的效果好，最佳条件为以乙醇 （６０＋４０）溶液为提取剂，解冻处理２０ｍｉｎ。张鹏等［6］对微波法提取银杏叶中黄酮类物质进行了研究，最佳提取条件为以乙醇（５０＋５０）溶液

总黄酮测定含量

1 各批次药材含量测定 使用已经确定的总黄酮含量检测方法分别进行5个批次原料含量的测定 总黄酮含量测定：分别精密称取药材粗粉0.5g，置100ml锥形瓶中，加70%乙醇50ml，称定重量，超声60分钟，放冷，称定，加入70%乙醇补足减失重量，摇匀，过滤，弃去粗滤液，精密量取续滤液10.0ml上聚酰胺树脂，待充分吸附后，用乙醇进行洗脱，至流出液基本无色，以洗脱液定容至25ml量瓶中，备用。精密量取供试品溶液5ml，置10ml比色管中，加 5％亚硝酸钠溶液0.4ml，使混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置6 分钟，加2mol/L氢氧化钠溶液3ml，再加30%乙醇至刻度，摇匀，放置15分钟，照分光光度法（《中国药典》2010版一部附录Ⅴ B），在504nm 的波长处测定吸收度。 表1 不同批次药材总黄酮含量测定结果 批号含量（%） 1 2 3 X±S 20140516 0.16350.16480.17010.1661±0.0035 20140516紫外扫描色谱图 2 药材总黄酮转移率研究 2.1 单个药材转移率研究

2.1.1 单个药材的转移率测定 同一批次的各药材，分别按照产品生产工艺提取得单个药材的总黄酮浓缩液样品，进行总黄酮含量检测，与“1”项下同批药材的总黄酮含量相比得出单个药材的转移率（如下式），分别进行5批次药材测定。 黄芪、桑叶、黄精、山茱萸：分别取黄芪、桑叶、黄精、山茱萸各100g，加水煎煮两次（回流），第一次加水12倍量，煎煮2.0h，过滤；第二次加水10倍量，煎煮1.0h，过滤，合并滤液浓缩至100ml，备用。 黄芪不同浓缩程度的考查：取黄芪100g，加水煎煮两次（回流），第一次加水20倍量，煎煮2.5h，过滤；第二次加水20倍量，煎煮2.0h，过滤，合并滤液，重复试验三次，分别浓缩至50ml、100ml、200ml，备用。 精密量取上述溶液5ml，加乙醇15ml，摇匀，过滤，弃去粗滤液，精密量取续滤液10.0ml上聚酰胺树脂，待充分吸附后，用乙醇进行洗脱，至流出液基本无色，以洗脱液定容至25ml量瓶中，备用。精密量取供试品溶液5ml，置10ml 比色管中，加5％亚硝酸钠溶液0.4ml，使混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置6 分钟，加2mol/L氢氧化钠溶液3ml，再加70%乙醇至刻度，摇匀，放置15分钟，照分光光度法（《中国药典》2010版一部附录ⅤB），在504nm 的波长处测定吸收度。 表2 不同批次药材提取液总黄酮含量测定结果 批号含量（%） 1 2 3 X±S 20140516 0.16350.16480.17010.1661±0.0035

藤茶

藤茶- 中药材 【药名】藤茶烘干藤茶 【别名】霉茶叶。 【功效】清热利湿；平肝降压；活血通络 【科属分类】葡萄科 【主治】痢疾；泄泻；小便淋痛；高血压；头昏目胀；跌打损伤 【生态环境】生于海拔1300-1950m的山坡灌丛或山谷疏林中。 【资源分布】分布于西南及陕西、甘肃、湖北等地。 【出处】《中国中草药汇编》记载： 藤茶味甘淡，性凉，具有清热解毒，降暑生津，祛风湿，强筋骨，消炎利尿，抗心律失常，抗心肌缺血，缓解酒精作用等功效。长期饮用对皮肤癣癞，黄疸性肝炎，感冒风热，咽喉肿痛，急性结膜炎，痛疖，高血压，高血脂，高血糖，护扶养颜等都有极好作用。 藤茶- 喝藤茶的功效 “茶友”们相聚，一个话题——饮用藤茶的体会及种种妙处，常会被提及。渐渐地我萌发了一个念头，想进一步了解藤茶，认识藤茶，知其然还想知其所以然。经过一番寻觅探求，藤茶面貌逐渐清晰凸现。现将我所了解的藤茶的情况与诸君细细说来，供各位作保健养生之参考。 藤茶学名Ampelopsis grossedentata，中文植物名为显齿蛇葡萄，是属于葡萄科蛇葡萄属的一种野生藤本植物。地方名除了藤茶外，还有甘露茶、茅岩莓等。它主要分布在两广、两湖、云贵、江西、福建等省，生长在山坡混交林中，野生贮量大。 藤茶水浸出物中含有丰富的糖和氨基酸，包括人体必需的8种氨基酸，具有一定的营养保健作用。藤茶还含有大量的多酚及黄酮类化合物，这是藤茶具有某些医疗保健作用的重要的物质基础。 有学者研究认为：藤茶有消炎止咳祛痰作用，其祛痰止咳的作用与安妥明相似。实验表明，藤茶对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、大肠埃希菌、痢疾杆菌等有明显的抑制作用。对食品中常见细菌的抑制作用优于常用的防腐剂苯甲酸。此外，藤茶具有防止动脉粥样硬化及降血脂、降血糖等作用。藤茶中含有大量的黄酮类化合物，其主体物质为二氢杨梅素，它对自由基的清除率高达73.3%～91.5%，可减轻机体内氧化损伤，具有抗衰老的作用。藤茶还能减轻动物肝组织的变性和坏死程度，有保肝护肝之作用。 长期饮用藤茶有无毒副反应，这是“茶友”们曾经十分关心的一个问题。专家对广西藤茶所含的黄酮类化合物进行长期毒性试验，结果表明：在大鼠身上未发现与毒性有关的明显病变，停药后也未见药物延迟性毒性反应。事实上，我国南方一些少数民族地区长年累月饮用此茶，尚未见到饮用藤茶出现不良情况的报道。藤茶不含鞣酸，不会影响蛋白质的消化与吸收，不会夺取体内作为造血原料的铁质;藤茶也不含有咖啡因一类具有兴奋作用的化合物，故对于贫血、睡眠质量不高等人，且又喜欢饮茶而不敢饮茶者，藤茶也许是一种理想的代用品。 少数人饮藤茶后会出现一种微弱的催眠现象。有一友人描述如下：藤茶饮后犹如冬日坐在朝南无风的墙角，沐浴在金色的阳光中，慵懒舒适，伴随着一种淡淡的睡意。总之，藤茶既有普通保健之功，又对某些疾病有医疗或预防作用，长期饮用又比较安全。可以说藤茶是大自然给我们的一种恩赐，“甘露茶”的说法并非妄语。不过根据有些“茶友”个人体验认为：此物虽属平和，阴盛阳虚者还需谨慎饮用。 三降 降血粘：抑制血小板聚集，降低血浆纤维蛋白原浓度，增强红细胞变形能力而起降血粘

黄酮含量的测定方法

黄酮含量的测定方法 1、对照法 1） ①对照品制备：精密称取芦丁对照品20.8mg，置于100ml容量瓶中，加70%乙 醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。 ②样品溶液制备 精密称取样品0.50g，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，称定重量，用70%乙醇补足减失重量，即得。 ③标准曲线的制备 精密称取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于25ml比色管中，加70%乙醇10ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加1mol/L 氢氧化钠溶液10ml，加70%乙醇置刻度，摇匀，放置15分钟。各取10ml 置于50ml容量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度。在510nm的波长下测定吸光度。 2） ①样品溶液的制备： 分别精确称取80℃恒温干燥的样品用50%甲醇回流提取，料液比1：15,提取两次，每次30min，将两次提取液合并浓缩至一定体积，用30%甲醇定容至50ml 容量瓶中。从其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中，稀释至刻度，再从100ml 容量瓶中取出1.5ml溶液，放至10ml容量瓶中，定容，为待测样品液Ⅰa和Ⅱa。 ②最大吸收波长的选择：分别作样品液Ⅰa、Ⅱa及芦丁标准品的吸收曲线，均在350 nm 处有一强吸收，因此选择350 nm为测定波长。 ③标准曲线的制定： 精密称取芦丁对照品10.3mg，用少量30%乙醇溶解后，转移至50ml容量瓶，用蒸馏水定容至刻度。分别精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml芦丁溶液置于100ml 容量瓶中，于350 nm 波长处测定吸光值，以芦丁空白为参比，以芦丁浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线，提示在4.12～12.36mg／103ml浓度之间，吸光度值与浓度呈现良好的线性关系。 ④含量测定结果： 分别吸取2．2．1中Ⅰa和Ⅱa待测样品液各适量于石英比色池中，按标准芦丁一吸光度测定法，以样液空白参比，于350nm 波长下测定吸光值，计算各提取液中总黄酮含量。 计算公式为:样品总黄酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。 注:上式为通过回归方程转化而来，式中A为测得样品液的吸光度值，W为称样量。

丁香及其有效成分药理作用的实验研究(可编辑)

丁香及其有效成分药理作用的实验研究 维普资讯 ////0>. 丞堡匡堂瞳堂 . . . 细胞凋亡关系的研究.中国地方病防治杂志, 生出版社, .. , .,: . . 郭玲,钟学宽,周令望,等. 病毒致低硒低维 ,, : ? . 生素鼠心肌损伤的发病机制 .中国地方病防治 ,, ,. 杂志, ,: ? . 邓守恒,孙各琴.高硒情况下维生素对幼龄大鼠抗 .氧化作用的研究 .广东微量元素科学, ,:.,: ? .邹秋萍,侯淑萍,王瑞珍.病毒性心肌炎患儿血清肿卫文峰,张国成,许东亮,等.柴胡黄芩炙甘草对小瘤坏死因子一【的变化及维生素、的干预作用鼠心肌炎治疗作用的研究 .中国当代儿科 】.实用儿科临床杂志, , : ?. 杂志, ,: .苗艳波,师海波,孙英莲.高山红景天总甙的抗衰老王雪峰,郭津津,魏克伦,等.小柴胡汤分解剂抗柯萨奇病毒感染及其对心肌炎防治作用的研究 . 作用 .中药药理与临床, ,: ? .季宇彬.中药复方化学与药理 .第一版.人民卫中国医科大学学报, , : 一 . 收稿日期: 丁香及其有效成分药理作用的实验研究 臧亚茹 承德医学院附属医院,河北承德

【关键词】丁香;有效成分;药理作用 【中图分类号【文献标识码】【文章编号】 ? ? ? 十二碳三烯一卜醇, 一杜松油烯,【一石竹烯,对烯 丁香为桃金娘科植物丁香 基茴香醚等。此外,丁香中还含有山萘酚、鼠李素、齐墩的干燥花蕾,其味辛,性温,具有温中降逆,温肾助 果酸等黄酮成分。 阳之功效。现代药理研究表明,丁香具有抗菌、抗病毒、清 抗菌作用及机理 除自由基、镇痛、麻醉等作用,在疾病防治中具有良好的 丁香具有抗菌、消炎作用,且抗菌谱广泛。张西玲等 药理学基础和治疗作用。 通过对丁香、小茴香、肉桂、八角茴香四种中药挥发油 性状 体外抑菌实验发现:四种挥发油对大肠杆菌、痢疾杆菌、 本品略呈研棒状,长厘米,花冠圆球形,棕褐色 至褐黄色,质坚实,富油性,气芳香浓烈,味辛辣,有麻舌伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌在较低浓度时均有一定的抑 菌作用,对金黄色葡萄球菌抑菌作用最佳,以丁香、肉桂 感。 挥发油在体外抑菌效果最为显著,挥发油在较高浓度时 化学成分

设计实验 总黄酮的提取和测定

设计性实验： 银杏叶中总黄酮的提取和测定 小组人员：袁国明郎启国赵永仓王蓉 一、目的要求 1、探究不同浓度的乙醇和在不同时间下对黄酮类化合物提取率的影响。 2、掌握从银杏叶中提取总黄酮的操作步骤和测定方法。 3、了解提取银杏叶中黄酮类化合物制备的基本原理和方法。 二、实验原理 根据超声波具有空化、粉碎、搅拌等特殊作用，对银杏叶的细胞有破坏现象，使乙醇溶液能渗透到银杏叶中，以便让总黄酮溶解在乙醇中，在通过分离提纯的方法，来获得总黄酮的含量。 黄酮类是含酚羟基的化合物，能够和铝离子产生黄色络合物，在碱性条件下溶液呈红色。因此，本实验所采用的方法是在碱性溶液中加铝盐显色的分光光度法。其具体操作是在所测定的溶液中加入5％NaNO2；10%A1(NO3)3；5％NaOH溶液，在500nm波长下，用紫外分光光度法测定所提溶液中总黄酮的含量。 三、试剂和器材 1、试剂 芦丁标准品；5％NaNO2；10%A1(NO3)3；5％NaOH；30%、40%、50%、60%、70%、80％的乙醇（用95%的酒精31.91ml、42.55ml、53.19ml、68.83ml、74.47ml、85.11ml ）；及蒸馏水等。 2、材料 新鲜的银杏叶 3、器材 容量瓶25ml（×1） 100ml（×6）；吸管0.5ml（×2）1ml（×2），2ml（×1），5ml （×1）粉碎机；超声波清洗机；高速离心机；三角锥形瓶50ml（×6）；滤纸；分光光度

计；烧杯；具塞刻度试管；分析天平；20ml量筒等 四、操作方法 1、银杏叶的处理 把新鲜的银杏叶低温烘干，使水分小于8％，制成干粉，待用。 2、制作标准曲线 准确称取芦丁标准品5mg，用80％乙醇溶解，定容于25mL容量瓶中，摇匀，得0.2mg ／mL的标准溶液。 移液管精确吸取标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml，分别置于10mL容量瓶中，加入5％NaNO2 0.4mL，摇匀，放置5min；加入10%A1(NO3)3 0.4mL，摇匀，放置6min；加入5%NaOH 4.0mL，再加蒸馏水至刻度，摇匀，在80℃水浴中保温10min。以试剂空白作为参比溶液。用1cm比色皿，在510nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线（标样浓度和吸光度的关系）。 表1-1 标准曲线制作 管号 1 2 3 4 5 6 7 芦丁标准液（mL）0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 5％NaNO2（mL）0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 放置时间(min) 5 5 5 5 5 5 5 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 10%Al(NO3)3 （mL） 放置时间(min) 6 6 6 6 6 6 6 5%NaOH（mL） 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 蒸馏水（mL） 5.2 5.0 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0 3、探究不同时间对黄酮提取的影响 分别称取6分1g的银杏叶粉末，放在50mL的三角锥形瓶中，并作相应标记，分别加入70%的乙醇溶液各20mL，在超声波清洗机（500W）超声30 min、35 min 、40min、45 min、50min、 55min将溶液用高速离心机离心后除去滤渣，得到粗产品，用量筒量体积做记录，等待备用。 4、探究不同浓度的乙醇对总黄酮提取的影响

丁香的药理研究现状

丁香的药理研究现状 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020

丁香的药理研究现状 【摘要】桃金娘科植物丁香Eugenic caryophyllata Thunb以其干燥花蕾入药，其味辛，性温，中医认为具有温中降逆，温肾助阳之功效。现代药理研究表明，丁香具有抗菌、抗病毒、清除自由基、镇痛、麻醉等作用，在疾病防治中具有良好的药理学基础和治疗作用，被我国列为重点研究开发药材之一。本文主要从丁香的主要化学成分，以及近些年来对丁香的药理作用研究进行综述。 【关键词】丁香丁香酚药理作用 【中图分类号】 R96 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-8801（2014）05-0259-01 丁香（Flos Caryophylli）系桃金娘科植物，通常当花蕾由绿转红时采摘，用其干燥花蕾入药，又称公丁香。味辛、性温，归脾、胃、肺、肾经，系常用药材，具温中降逆，补肾助阳之功效。中医上多用于脾胃虚寒，呢逆呕吐，食少吐泻，心腹冷痛，肾虚阳痿等症。丁香因萼筒中存在油室结构，富含油质，主要为丁香油15%～20%，丁香油中主要成分为丁香酚（eugenol ） 64%--85 %，低的含%～62. 7%，含乙酞丁香酚（acetyleugenol） 7 %～15%，β-T香烯（ Ei-caryophylene）占9. 12%，以及其他少量成分如甲基正戊酮、苯甲醛、水杨酸甲酯等。因此丁香油的药理作用主要由以上3种主要成份引起。现就近年来对丁香及其药理作用的研究概况综述如下。 1 丁香主要成分研究 丁香挥发油是丁香的主要成分。邱琴等采用水蒸气蒸馏法从广东饶平及印度尼西亚产丁香干燥花蕾中提取挥发油，采用气相色谱一质谱法进行化学成分的分析。结果：从广东饶平丁香挥发油中共分离出26种物质，鉴定22个成分，占挥发油总成分的84%以上；印度尼西亚产丁香鉴定26个成分。广东饶平丁香挥发油中，含量最高的组分是丁香酚，相

藤茶的研究进展

藤茶的研究进展1 平政，蒋才武 广西中医学院，南宁（530001） E-mail：pingzheng@https://www.wendangku.net/doc/d516963663.html, 摘要：本文从化学成分、药理作用和应用等方面概述了近年来对药食两用植物—藤茶的研究进展，提示了藤茶药用资源的研究开发前景。 关键词：藤茶，化学成分，药理作用，应用，研究进展 藤茶，学名为显齿蛇葡萄[Ampelopsis grossedentata (Hand-Mazz) W.T.Wang]，是葡萄科(Vitaceae Michx)蛇葡萄属(Ampelopsis)的一种野生木质落叶藤本植物，俗称山甜茶、甘露茶、白毛猴、白茶、白茶饼等，主要分布于我国湖南、湖北、云南、贵州、广东、广西、福建等地。我国壮族和瑶族百姓将其幼嫩茎叶，经揉制、干燥用于感冒、发热、风湿病、中暑、头晕、肠胃不适等症，至今已有数百年的历史。文献报道藤茶及其提取物有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗炎镇痛、广谱抗菌、降血糖、降血脂、保肝等作用。药理实验证明其功效主要是由黄酮类化合物尤其是二氢杨梅树皮素(Dihydromyricetin)和杨梅树皮素(Myricetin)所致。化学成分分析表明藤茶中黄酮总含量高达40%左右，其中二氢杨梅树皮素的含量20%以上，杨梅素的含量1.6%以上 [1]，这惊人的高含量预示着藤茶有极大的研究和应用前景。本文就近年来对藤茶的化学成分、药理作用和应用等方面进行的研究概述如下。 1. 化学成分研究 1.1 藤茶化学成分的种类 周天达[2]等从藤茶的乙醇提取物中分离出3,3’,5,5’7-六羟基-2,3-二氢黄酮醇，即二氢杨梅素(简称DMY}。何桂霞[3]等从藤茶的乙醇提取物中提取分离得另一种黄酮类化合物3,5,7,3,4,5－六羟基黄酮,即杨梅树皮素(简称MYR)。进一步从藤茶的乙醇提取物中分离出：4'-羟基－3－甲氧基异黄烷－7－0－a－L－鼠李糖(1→6)－β－D－葡萄糖甙即藤茶甙(grossedentataside)、橙皮素、二氢槲皮素、芹菜素、山萘酚[4][5]；从乙酸乙酯提取物中分离得到了槲皮素、槲皮素-3-O-?-D-葡萄糖苷，花旗松素、洋芹素、芦丁等黄酮类化合物和没食子酸、没食子酰-β-Ｄ-葡萄糖、没食子酸乙酯、棕榈酸、没食子酸甲酯[6][7]；从正定醇提取物中分离出4’-羟基-3’-甲氧基异黄烷－7－O－吡喃鼠李糖甙即藤茶素(grossedentatasin)[8]；从乙醚浸膏中分离得杨梅苷[9]；从石油醚提取物中分离得到?-谷甾醇、豆甾醇和齐墩果酸[4]。 显齿蛇葡萄中含有挥发油成分，从中分离出28种香气成分，主要有反-2-己烯醛、苯乙烯、三甲基－7－吡嗪、苯乙醛、α-萜品醇、水杨酸甲酯、香叶醇、紫罗酮、顺茉莉酮、雪松醇、6,10,14-三甲基地-十五烷酮等[10]；富含多种微量元素，Fe（245.00μg.g-1）、Cu(21.00μg.g-1）、Zn(56.60μg.g-1）、Ca(322.00μg.g-1）、Mg（2265.00μg.g-1）、Mn（600.00μg.g-1）、Se（0.18μg.g-1）、Na（62.50μg.g-1）、F（24.30μg.g-1）、I（0.21μg.g-1）、K（15625.50μg.g-1）及Co（0.50μg.g-1）[11]。熊皓平等[12]研究表明显齿蛇葡萄水浸出物近50％，多酚类化合物 1本课题得到国家自然科学基金(No. 20562002) 项目的资助。

植物总黄酮的提取与测定

试验植物总黄酮的提取与测定 摘要本实验采用紫外分光光度法测定芹菜体内总黄酮含量，利用黄酮类化合物与铝盐反应生成红色络合物。以芦丁为标准品在510nm处测定吸光度。得出标准曲线，然后计算样品的黄酮量。下面会就本实验出现的一些状况作出详尽想分析。 材料与方法 材料新鲜芹菜叶 方法 试剂的配制 标准品芦丁；甲醇；石油醚；磷酸；95%乙醇；硝酸铝；亚硝酸钠；氢氧化钠；去离子水 步骤 1 总黄酮提取称取新鲜芹菜叶子10.0g，研磨后于回流装置中用70ml 95%乙醇回流2h，过滤，然后用石油醚做溶剂萃取1~2次去脂溶物。溶剂用量为提取液的1/2，除脂后浓缩并定容至50ml。 2 芹菜黄酮含量的测定吸取10ml置25ml容量瓶中，加30%乙醇2.5ml，再加入5%亚硝酸钠溶液0.75ml摇匀，放置5min，加10%硝酸铝液0.75ml，摇匀，放置5min，再加1mol/L NaOH溶液10ml，摇匀，加30%乙醇至刻度，放置10min，在510nm波长处测定吸光度。同时，取上述稀释液10ml，置于25ml容量瓶中，

加30%乙醇至刻度，作为对照溶液。根据测得的吸光度得出标准曲线 3 标准溶液配制精确称取与120℃真空干燥至恒重的芦丁标准品20mg，置100ml容量瓶中，加60%乙醇溶液，稀释至刻度，精确量取25ml，置于50ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀既得每1ml 含芦丁0.1mg的标准溶液。 4标准曲线制作精确量取标准溶液0。0，2.5,5.0,7.5,10.0,12.5ml，分别置于25ml容量瓶中，加30%乙醇补足至12.5ml，加5%亚硝酸钠溶液0.75ml摇匀，放置5min，精确加入10%硝酸铝液0.75ml，摇匀，放置5min，再精确加入1mol/L氢氧化钠液10ml，用30%乙醇稀释至刻度，以第一管为空白，与510nm波长下测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准溶液。 结果 标准：A1=0.000;A2=0.121;A3=0.266;A4=0.394;A5=0.530;A6=0.673 样品：A（1）=0.000；A（2）=0.036

总黄酮的测定方法

总黄酮的测定方法 黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物,种类繁多, 大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成苷,部分为游离态或与鞣质结合存在。黄酮化合物系色原烷或色原酮的2-或3-苯基衍生物, 一般具有C6-C3-C6的基本骨架结构。近年来, 黄酮类化合物以其广谱的药理作用倍受青睐, 人们对含有黄酮的化合物进行大量研究, 以期获得黄酮含量较高的中草药。因此黄酮的含量测定成为研究的关键步骤。 一、方法 （一）高效液相色谱法 1. 原理植物类样品用石油醚脱脂后，经甲醇加热回流提取，以高效液相色谱法分离，在紫外检测器360nm条件下，以保留时间定性、峰面积定量。 2．仪器和试剂（1）高效液相色谱仪（2）紫外检测器（3）层析柱（4）超声波清洗仪（5）索氏提取器 （6）微孔过滤器（滤膜0.45um）（7）甲醇（色谱纯）（8）芦丁标准品 （9）石油醚，盐酸，磷酸（分析纯）。（10）去离子水 （11）芦丁标准溶液：精确称取经105℃干燥恒重的芦丁标谁品15.0mg，加甲醇溶解并定容至100ml，配成150ug／ml的芦丁标准溶液 3. 操作步骤 （1）样品处理 1）固体样品：称取2.0g干燥的固体样品，研细，置于索氏提取器中，用石油醚（60～90℃）提取脂肪等脂溶性成分，弃去石油醚提取液，剩余物挥去石油醚，加人甲醇50ml和25％HC1 5ml，80℃水浴回流水解1h，取出后快速冷却至室温，转移至50ml容量瓶中，甲醇定容，经0.45um滤膜过滤，供分析用。 2）液体样品：准确吸取样品2.0ml，直接以石油醚萃取脱脂，挥去石油醚后， 以甲醇溶解并定容，经微孔滤膜（0.45um）滤过后供测定用。 （2）色谱分离条件 色谱柱：CLC－ODS，6mm×150mm，5um; 流动相：0.3％磷酸水溶液：甲醇（V:V）＝40:80，临用前用超声波脱气；流速：lml／min；柱温：40℃；检测波长：360nm；灵敏度：0.02AUFS；进样量：20ul。 （3）样品测定：准确吸取样品处理液和标准液各10ul，注入高液相色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的保留时间定性，以其峰面积计算出样品中总黄酮的含量。4、结果计算 （二）分光光度法

藤茶有效成分及功效的研究进展

学术 专业 人文 茶趣 2014年第三期 02 作者简介：周才碧，硕士研究生，主要研究方向为茶叶加工与综合利用。 *通讯作者：陈文品，副教授，副主任，主要研究方向为茶叶加工与安全。E-mail: cwptea@https://www.wendangku.net/doc/d516963663.html, 藤茶有效成分及功效的研究进展 周才碧，张敏星，穆瑞禄，陈文品* （华南农业大学园艺学院茶叶科学系，广东 广州 510642） 摘要：近年来，国内外对藤茶有效成分和功效的研究主要集中在：藤茶中黄酮类、蛇葡萄素和二氢杨梅素等有效成分的分离和提取，以及藤茶抗氧化、降血压和调节免疫等方面功效的研究。本文主要从藤茶有效成分及相关功效进行综述，以期为藤茶有效成分和相关功能作用机理的研究提供一定的参考。 关键词：藤茶；成分；功效 藤茶，学名为显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata W．T ．Wang)，是一种典型的类茶植物，俗称山甜茶、白茶、甘露茶、白毛猴等，主要分布于广西、广东、云南、贵州、湖南、湖北、江西、福建等省区[1, 2]。它是瑶族常用药之一，至今已有数百年的药用历史，入药以叶为主，带有少量的茎枝。 据《中国中草药汇编》记载，藤茶味甘淡、性凉。主要成分为蛇葡萄素[3]、杨梅素和双氢杨梅素[4]等，具有降血糖[5]、清热解毒、消肿止痛和散瘀破结等功效[6, 7]。1 藤茶的有效成分 藤茶含有丰富的黄酮类、多糖类和多酚类等化合物。1.1 黄酮类 藤茶中主要含有黄酮类成分 [8, 9] 。目前已从中分离得到将 近20个黄酮类成分，有二氢杨梅素[10, 11]、槲皮素、杨梅素 [11] 、橙皮素、洋芹素和蛇葡萄素 [12, 13] 等，其中3-二羟基槲 皮素和二氢杨梅素同分异构体[14]，以双氢杨梅素含量最高，为藤茶中的主要活性成分。 不同叶型，总黄酮的含量不同，以中叶型的含量最高为31.66% [15] ，嫩茎叶中高达 43.4～45.52％。采用不同提取方法， 黄酮类含量不同，浸提法[16, 17] 黄酮类为13.64%，超声法 [18] 总黄酮得率为35.86%；而采用HPD-100大孔树脂较适合分离纯化总黄酮，回收率达77.23%[19]。1.2 二氢杨梅素 1996 年周天达[20]等人首次从藤茶茎叶中分离出二氢杨梅素，它具有黄酮化合物的基本结构，含有6个羟基，其化学结构式 [21, 22] 见图1。 二氢杨梅素在藤茶的含量很高，在幼叶可达40%[23, 24]，其含量与地理、气候环境有关。采用热水提取法，结合活性炭脱色、多次重结晶的纯化，二氢杨梅素获得率4.0%，纯度为98% 以上[25]；藤茶粗提物经丙酮回流提取、浓缩、加水沉淀后得到晶体，晶体经重结晶4次后得到二氢杨梅素产品，其纯度可达91.3%，得率为4.2%[26]。1.3 多糖和多酚类 藤茶含有丰富的水溶性多糖[27]，以水为提取剂，粗提物结晶后的清液经过醇沉、2次Sevage 法除蛋白和干燥，得到藤茶多糖纯度为45.4%，得率为5.2%[28]。 水浸提法提取藤茶中多酚类，获得率为9.80%[16]；而采用溶剂提取法，最佳提取条件为体积分数50%丙酮溶液、料液比1:25、75℃提取1.5h，总多酚得率高达21.82%。2 藤茶的功效 民间认为，大凡中暑、便秘等症，泡饮藤茶，疗效明显。藤茶是清除人体内有害物质的“清洁剂”，长期饮用，能消除人体亚健康。2.1 抗氧化作用 藤茶提取物均有不同程度的体外抗氧化效果，其中最主要有黄酮类、多糖类[27, 29]，而杨梅素和二氢杨梅素为藤茶黄酮类化合物的主要抗氧化活性成分。杨梅素[30]对DPPH.的清除

黄酮含量测定

一、黄酮含量的测定方法 1、样品的处理 取材料地上部分洗净，晾晒至表面无水分，置于干燥箱中，80℃下干燥至恒重，磨成粉末，过筛待用。 2、标准曲线的绘制 准确称取芦丁对照品20mg，置于100ml容量瓶中，加体积分数70%乙醇溶解至刻度，摇匀得0.2mg/ml的对照品溶液。然后，分别吸取0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4ml，分别置于7支试管中，加水补齐至2.4ml，分别加入5%亚硝酸钠0.4ml，摇匀，放置6min。再加入10%硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置6min。加入4.3%氢氧化钠溶液4ml，然后分别加2.2ml水，摇匀，放置15min。以空白试剂为参比，用紫外分光光度计在500nm波长处测定吸光度。 3、黄酮的提取（微波提取法） 准确称取干燥至横重的野生马齿苋粉末3份，每份1g，分别置于锥形瓶中，喷洒适量蒸馏水润湿，用中高火微波处理90s。加入一定量体积分数为70%的乙醇溶液，于80℃恒温水浴加热提取1.5h，趁热过滤，洗涤残渣，用70%乙醇定容于50ml容量瓶中，摇匀，得黄酮提取液。 4、黄酮含量的计算 吸取分别黄酮提取液1ml，加1.4ml蒸馏水，摇匀，加入5%亚硝酸钠0.4ml，摇匀，放置6min。再加10%硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置 6min。加入4.3%氢氧化钠溶液4ml。加入蒸馏水2.8ml，摇匀放置15min。

以蒸馏水代替黄酮提取液的空白试剂为参比，用紫外分光光度计在500nm波长出测定吸光度。带入标准曲线中，计算黄酮含量。 总黄酮含量（mg/g）= c*v/m 式中：c为1ml样品中测得的黄酮含量（mg）； v为提取液总体积（ml）； m为叶片干重。 二、矿质元素的测定 每份需0.2g

黄酮含量的测定

黄酮含量的测定 1.提取（以麦苗粉为例） 根据仿生学原理，人体胃、小肠、大肠的体液酸度最佳pH分别为2.0,7.5,8.3。称取1g麦苗粉末，选用乙醇-水作为浸取剂，模拟胃肠道的pH，分别调pH值2.0,7.5,8.3,在60℃下超声50min，合并3次提取剂，，定容。 工艺流程：1g麦苗粉末→一次提取（加入10ml70﹪的乙醇，乙醇pH2.0）→抽滤→留渣继续二次提取，滤液保存→二次提取（加10ml70﹪的乙醇，提取剂pH7.5）→抽滤→留渣继续三次提取，滤液保存→三次提取（加入10ml70﹪的乙醇，乙醇pH8.3）→合并三次滤液→定容至30mL→黄酮类化合物含量的测定分光光度法测吸光值。 麦苗汁的提取 直接从榨汁后定容至100ml的麦苗汁中取36.5ml，加入85.2ml无水乙醇，60℃超声提取150min。 2.试剂配置 芦丁标准液：准确称取芦丁标准品7.5mg，用50%乙醇溶解并定容至25mL，得到浓度为300mg/mL的芦丁标准溶液。 10% Al(NO3)3溶液：称取5g Al(NO3)3，用蒸馏水溶解并定容至50mL。 5% NaOH 溶液：称取2.5g NaOH，用蒸馏水溶解并定容至50mL。 5% NaNO2 溶液：称取2.5g NaNO2，用蒸馏水溶解并定容至50mL。 0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH=8.2)：0.1mol/L Tris 50mL，加入0.1mol/L HCl 22.9mL，混匀，稀释定容至100mL。 3 mmol/L 邻苯三酚-HCl溶液：准确称取0.0189g邻苯三酚，用10 mmol/L HCl溶解并定容至100mL。 9mmol/L水杨酸-乙醇：准确称取1.2430g水杨酸，用95%乙醇溶解并定容到1000mL 容量瓶中。 9mmol/L FeSO4：准确称取1.3680g FeSO4，定容到1000mL容量瓶中。 10mmol/L HCl：准确量取83.3mL分析纯HCl，定容到100mL容量瓶中。 8.8 mmol/L H2O2 溶液：吸取0.109mL 30% H2O2，用蒸馏水溶解并定容至500mL。 3.标准曲线的绘制 准确称取芦丁标准品15mg，用50%乙醇溶解并定容至50mL，得到浓度为0.3mg/mL的芦丁标准溶液。取7支试管编号，分别按表1中所给的量加入各种试剂，并测定其吸光值。 表6 芦丁标准曲线的绘制 试剂0(mL) 1(mL) 2(mL) 3(mL) 4(mL) 5(mL) 6(mL) 芦丁标准溶液0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 50%乙醇 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0 5% NaNO2 溶液0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 10% Al(NO3)3 溶液0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 5% NaOH 溶液 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 蒸馏水 2.2 2.2 2.2 2.2 2.2 2.2 2.2 加入5% NaNO2 溶液0.4 mL后，摇匀，放置6min ；加入10% Al(NO3)3 溶液0.4 mL