植物组织培养期末考试习题参考答案

仅供参考

植物组织培养复习题

一、名词解释

1植物细胞全能性：任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植珠所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。

2初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体从植物体上分离下来的第一次培养的过程。

3继代培养：初代培养后，将组织转移到新的培养基上进行培养的都称为继代培养。

4体细胞胚：植物组织培养过程中能够产生与正常合子胚相似的结构，由体细胞发育而成，也称为胚状体。

5胚的培养：在无菌条件下将胚从胚珠或种子中分离出来，置于培养基上进行离体培养的方法。

6外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。

7驯化现象：植物组织经长期继代培养，要加入生长调节物质，其后加入少量或不加入生长调节物质就可以生长，这种现象称为“驯化”现象。

8玻璃化苗：当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常称为玻璃化，这种出现玻璃化现象的试管苗成为玻璃化苗。

9愈伤组织：在人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团无定形的疏松排列的薄壁细胞，类似分生组织。10脱分化：已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。

11再分化：脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。

12人工种子：人工种子是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。

13褐化现象：褐化是指在接种后，外植体表面开始褐化，释放出褐色物质，有时甚至会使整个培养基褐化的现象。

14器官培养：以植物器官作为外植体进行离体培养，包括离体的根、茎、叶、花器和果实的培养。

15原生质体培养：用酶及物理方法除去细胞壁，对所得到的原生质体进行培养的方法。

16基本培养基：人工配制的仅能满足外植体最基本生长需要的培养基，如MS、MT、White培养基。

17完全培养基：在基本培养基的基础上添加各种各样的附加物（激素、有机物质等），具备可使其最大限度地生长和繁殖的条件，含有满足各种营养要求的培养基

二、填空、选择、判断、简答、问答

1植物组织培养的定义、特点、发展简史

（1）定义：把无菌操作分离植物体的一部分，接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。

（2）特点：①培养条件可以人为控制②生长周期短，繁殖率高③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制

（3）发展简史：

(一)探索阶段（上世纪初至上世纪30年代中）

1902年德国著名的植物生理学家和植物学家哈伯兰特（Haberlandt）在Schleiden和Schwann的细胞学说的推动下，提出了高等植物细胞全能性理论，是植物组织培养的理论依据，对植物组织培养的发展起了先导作用。

☆Haberlandt：观点——高等植物的组织和器官可以分割成单个细胞。贡献——提出细胞全能性、首次进行离体细胞培养

1904年，Hanning培养萝卜和辣根菜的胚成功；

1912年，Haberlandt的学生科特（Kotte）和美国的罗布林（Robins）在根尖培养中获得了组织培养的成功，形成了一些缺绿的茎和根。

(二)奠基阶段（上世纪30年代中至上世纪50年代末）

1934年美国的怀特（White）由番茄根建立了第一个活跃生长的无性繁殖系

1937年建立了第一个组织培养的综合培养基White培养基，包括3种B族维生素，即吡哆醇、硫胺素和烟酸1934高特里特（Gautheret）提出了B族维生素和生长素对组织培养的重要意义，于1939年连续培养胡萝卜根形成层获得首次成功。

Gautherer，White和Nobecourt一起被誉为组织培养学科的奠基人。

40年代斯库克（Skoog）和崔徵发现，腺嘌呤或腺苷可以解除培养基中生长素(IAA)对芽形成的抑制作用，而能诱导形成芽，从而明确了腺嘌呤与生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一：即这一比例高时，产生芽；这一比例低时，产生根；相等则不分化。

1952年，莫雷尔（Morel）和马丁（Martin）通过茎尖分生组织的离体培养，从已受病毒侵染的大丽花中首次获得无病毒植株；

1953-1954年缪尔（Muir）使单细胞培养获得初步成功。

1955年米勒（Miller）等人发现了激动素。激动素可以代替腺嘌呤促进发芽，效果增加3万倍。

1957年，Skoog和Miller提出植物激素控制器官形成的概念

1958年，斯图尔德（Steward）等人，用胡萝卜根韧皮部的细胞进行培养，得到了完整植株，并且这一植株能够开花结实。首次证实了Haberlandt在关于细胞全能性的预言

1958年，Wickson和Thimann指出，应用外源细胞分裂素CTK可促成在顶芽存在的情况下打破腋芽的休眠。

71958-1959年，Reinert和Steward分别在胡萝卜愈伤组织培中形成体细胞胚。

(三)迅速发展阶段（上世纪50年代末至今）

1960年，科金Cocking开创植物原生质体培养和体细胞杂交研究工作。同年，Kanta植物试管受精首次成功。

1960年，Morel提出了一个茎尖离体无性繁殖兰花的方法——迅速建立起兰花工业；

1964年印度Guha和Maheshwari由花粉诱导得到单倍体植株，从而促进了花药和花粉培养的研究

1971年，Takebe证明了无壁的原生质体同样具有全能性，而且在实践上为外源基因的导入提供了理想的受体材料。

1973年Carlson等通过两个烟草物种之间原生质体融合，获得了第一个体细胞杂种

2.再分化分为四个水平，分别是什么？

（1）细胞水平的分化

（2）组织水平的再分化

（3）器官水平的再分化

（4）植株水平的分化

3.植物组织培养实验室的组成、无菌操作室、超净工作台种类及使用注意事项、化学实验室包括那些实验室？培养室定义及要求

●实验室的组成（1）准备室：器具的洗涤、干燥、消毒（2）配置室：进行药品的保存、配置、消毒、分装（3）

灭菌室：培养基及使用器具的消毒与灭菌（4）接种室：材料接种，内置超净工作台或接种箱。外设缓冲间, 放置拖鞋、工作服、工作帽（5）培养室：将接种的材料进行无菌培养生长的场所（6）细胞学观察实验室：进行培养材料的组织学、细胞学观察照相等。

●无菌操作室：干净无菌、密闭、光线好

●超净工作台：用于培养物的无菌操作（由鼓风机、滤板、操作台、紫外灯和照明灯组成），分水平式和垂直式两种型号。

●化学实验室：包括洗涤室、药品室、称量室、培养基配制室、灭菌室

●培养室：将接种到试管等的培养材料进行培养生长的场所。要求：需配有固定培养架、旋转式培养架、摇床和转床、控温、控光设备，以满足器官（芽、茎、花药）、愈伤组织、细胞和原生质体的固体和液体培养的需要。

4.植物组织培养的最适温度、光照、光周期、强度、湿度、培养基的pH值

（1）温度：大多数组织培养在23～27℃之间进行，一般采用25±2℃。低于15℃时培养，植物组织会表现生长停止，高于35℃时对植物生长不利。

（2）光照：光照强度1000lx—1500lx；黑暗条件利于细胞、愈伤组织的诱导增殖；光照条件利于器官的分化。组织培养最常用的光暗周期是16h的光照，8h的黑暗

（3）湿度：一般要求70%-80%的相对湿度，常用加湿器或经常洒水的方法来调节湿度。

（4）渗透压：通常1-2个大气压对植物生长有促进作用，2个大气压以上就对植物生长有阻碍作用，而5-6个大气压植物生长就会完全停止，6个大气压植物细胞就不能生存。

（5）pH制不同的植物对培养基最适PH值的要求也是不同的, 大多在5—6.5左右，一般培养基皆要求5.8，一般来说pH值高于6.5时，培养基会变硬；低于5时，琼脂不能很好地凝固。因为高温灭菌会降低pH值（约0.2-0.3个pH值）因此在配制时常提高pH值0.2-0.3单位

5.常用灭菌方法及其适用范围、培养基的灭菌方法及注意事项

灭菌：是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类

（1）物理方法：

湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)——用于培养基的灭菌。完全排除锅内空气，使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底灼烧灭菌——用于无菌操作的器械灭菌，包括镊子、剪子、解剖刀等。在无菌操作时，把器械浸入75%的酒精中，使用之前取出用酒精灯火焰灼烧灭菌，冷却后，立即使用。

干热灭菌——用于玻璃器皿及耐热用具灭菌。干热灭菌的物品要预先洗净并干燥，工具等要妥为包扎，以免灭菌后取用时重新污染。

过滤灭菌——用于一些生长调节剂，如赤霉素、玉米素、脱落酸等的灭菌。防细菌滤膜的网孔的直径为0.45μm以下，当溶液通过滤膜后，细菌的细胞和真菌的孢子等因大于滤膜直径而被阻。过滤器先灭菌，灭菌温度不

超过121℃。溶液先进行初滤(滤膜?0.65um)

射线处理：紫外线灭菌——在接种室、超净台上或接种箱里用紫外灯进行空间灭菌。只适于空气和物体表面的灭菌，而且要求距照射物以不超过1.2m为宜，时间为20-30min。

（2）化学方法：

熏蒸灭菌——用于空间灭菌。加热甲醛、高锰酸钾、冰醋酸等化学药剂使其挥发杀菌，熏蒸时空间密闭。

喷雾灭菌——用于物品表面消毒。如桌面、墙面、双手、植物材料表面等，可用75%的酒精反复涂擦灭菌，l%-2%的来苏儿溶液以及0.25%—1%的新洁尔灭也可以。

消毒剂灭菌——用于植物材料表面灭菌。使用升汞、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精对外植体进行处理。

6.接种前的准备及接种操作

☆无菌操作前的准备步骤：

（1）在接种3天前用甲醛熏蒸接种室，并于接种前3小时打开其内紫外线灯进行杀菌；

（2）在接种前20分钟，打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯；

（3）接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换穿拖鞋等；

（4）上工作台后，用酒精棉球搽拭双手，特别是指甲处。然后搽拭工作台面；

（5）先用酒精棉球搽拭接种工具，再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍，然后反复过火尖端处，对培养皿要过火烤干；

（6）接种时，接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽等；

（7）接种完毕后要清理干净工作台，可用紫外线灯灭菌30分钟，若连续接种，每5天大强度灭菌一次

☆无菌接种步骤：

（1）将初步洗涤及切割的材料放入烧杯，带入超净台上，用消毒剂灭菌，再用无菌水冲洗，最后沥去水分，取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。

（2）材料吸干后，一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀，对材料进行适当的切割。（如叶片切成0.5cm2的小块；茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含1-2片幼叶的茎尖大小等。）在接种过程中要经常灼烧接种器械，防止交叉污染。

（3）用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。

7.培养基的大量元素、微量元素分别是什么，铁盐有什么特点，怎么配制，碳源主要是哪些，使用浓度；维生素有哪些；什么是肌醇，作用是什么；主要添加什么氨基酸；天然复合物有哪些？

（1）大量元素：一般指在培养基中的浓度大于0.5mmol/L的元素（或﹥100mg/L）。主要包括氮、磷、钾、钙、镁和硫六种。

（2）微量元素：小于0.5mmol/L的元素（或＜100mg/L），Fe、Mn、Cu、Zn、Cl、B、Mo、Co等

（3）铁盐：铁是一些酶（氧化酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等）的重要组分、叶绿素形成的必要条件，培

养基中的铁对胚的形成、芽的分化和幼苗转绿有促进作用，但由于Fe的特殊性质，即很不稳定、易沉淀，需要在酸性条件下才能比较稳定，故在培养基配制时常常把Fe盐单独配制，且以螯合物的形式存在。

（4）碳源：选用种类蔗糖（或葡萄糖、果糖）等，蔗糖浓度：2－3%，胚培养为4－15%

（5）维生素（浓度0.1－1.0mg/L）

VB1 (盐酸硫胺素) :促愈伤组织产生，提高活力VB6 (盐酸吡哆醇) :促根生长

Vpp (烟酸):与代谢和胚发育有关Vc (抗坏血酸): 防组织褐变

有时还使用生物素、叶酸、核黄素等。

（6）肌醇：促进糖类物质的相互转化和活性物质作用的发挥、促进愈伤组织生长以及胚状体和芽的形成、对组织细胞繁殖、分化的促进作用、使用浓度100 mg/L、用量过多则促褐变

（7）氨基酸：最常用的氨基酸是甘氨酸，其他的如精氨酸、谷氨酸、谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。

（8）天然复合物：如水解酪蛋白，水解乳蛋白，酵母提取物，胰蛋白胨，椰乳，西红柿汁，香蕉粉，橘子汁，可可汁等天然复合物以及活性炭，渗透调节剂等

8.琼脂的成分是什么，有什么特点，加入量通常是多少？活性炭有什么作用？

（1）琼脂是一种由海藻中提取的高分子碳水化合物，本身并不提供任何营养。

特性：溶解在热水中，成为溶胶，冷却至40℃即凝固为固体状凝胶。通常所说的“煮化”培养基，就是使琼脂溶解于90℃以上的热水。

浓度：琼脂的用量在6-10g／L之间，若浓度太高，培养基就会变得很硬，营养物质难以扩散到培养的组织中去。若浓度过低，凝固性不好。

（2）活性炭为木炭粉碎经加工形成的粉沫结构，有很强的吸附作用，可以吸附非极性物质和色素等大分子物质，包括琼脂中所含的杂质，培养物分泌的酚、醌类物质以及蔗糖在高压消毒时产生的5-羟甲基糖醛及激素等。

吸附外植体产生的致死性褐化物（初代培养）促进新梢的形成和伸长（新梢增殖阶段），但其作用有一个阀值，一般为0.1％-0.2％。促进生根（通过减弱光照保护了IAA），由于根的生长加快，吸收能力增强，反过来又促进了茎、叶的生长。活性炭可降低玻璃苗的产生频率，使用浓度一般0.3％。使用浓度通常为0.5-1mg／L，大量的活性炭加入会削弱琼脂的凝固能力

9.抗氧化物的作用及有哪些抗氧氧化剂？

抗酚类氧化常用的药剂有半胱氨酸及Vc。浓度50-200mg／L。

方法：洗涤刚切割的外植体表面或过滤灭菌后加入固体培养基的表层。

其他抗氧化剂：二硫苏糖醇、谷胱甘肽、硫乙醇、及二乙基二硫氨基甲酸酯等。

10.生长素类物质有哪些，作用分别是什么，怎样配制？细胞分裂素类物质有哪些，作用是什么，怎样配制？（1）生长素类

①IAA(吲哚乙酸)：是天然存在的生长素，亦可人工合成，其活力较低，是生长素中活力最弱的激素，对器官形成的副作用小，高温高压易被破坏，也易被细胞中的IAA分解酶降解，受光也易分解。

②NAA(萘乙酸)：在组织培养中的起动能力要比IAA高出3-4倍，且由于可大批量人工合成，耐高温高压，不易被分解破坏，所以应用较普遍。NAA和IBA广泛用于生根，并与细胞分裂素互作促进芽的增殖和生长。

③IBA (吲哚丁酸)：是促进发根能力较强的生长调节物质。

④2,4-D (2,4-二氯苯氧乙酸)：起动能力比IAA高10倍，特别在促进愈伤组织的形成上活力最高，但它强烈抑制芽的形成，影响器官的发育。适宜的用量范围较狭窄，过量常有毒效应。

生长素配制可先用少量95％酒精助溶，2,4-D可用0.1mol／L的NaOH或KOH助溶。生长素常配成1mg/ml 的溶液贮于冰箱中备用

（2）细胞分裂素

包括6-BA、Kt(kinetin)、玉米素ZT等。其中ZT活性最强，但非常昂贵，常用的是6-BA。细胞分裂素使用浓度：0.05-10mg／L。

作用：①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长。细胞分裂素与生长素相互作用，当组织内细胞分裂素／生长素的比值高时，诱导愈伤组织或器官分化出不定芽。

②促进细胞分裂与扩大。细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化、茎、苗的增殖，

③抑制根的分化。避免在生根培养时使用。

11.MS培养基、B5培养基、White培养基、N6培养基的发明时间、发明人及特点。

①MS培养基1962 、Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。

特点：无机盐离子浓度高，硝酸盐含量较高。广泛用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养

②B5培养基1968、Gamborg等为培养大豆根细胞而设计的。

特点：含有较低的铵，对不少培养物的生长有抑制作用。双子叶植物尤其木本植物组培可选择

③White培养基1943、White为培养番茄根尖而设计的。

特点：无机盐数量较低适于生根培养

④N6培养基1974、朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。

特点;成分较简单，KNO3和(NH4)2SO4含量高。适合花药培养

12.培养基的母液分几种，分别怎么配制？

(1)大量元素母液：可配成浓度20倍母液。(2)微量元素母液：可配成浓度1000倍的母液。

(3)铁盐母液：可配成100倍的母液，(4)有机物母液：可配成100倍的母液。

(5)激素母液：每种激素必须单独配成母液，浓度一般配成1mg／ml。用时根据需要取用。因为激素用量较少，一次可配成50ml或100ml。

母液配好后放入冰箱内低温保存，用时再按比例稀释。

13培养基配制的具体操作，高压蒸汽灭菌的原理；干热灭菌、过滤灭菌怎样操作及培养基的保存。

培养基配制的具体操作（1）在洁净的不锈钢锅里放入适量蒸馏水，加入所需要的琼脂和糖（2）加入储备液，按需要量加入植物激素（3）用蒸馏水定容到所需体积（4）调pH值。目标pH一般5.6-5.8，但经过高温高压灭菌会下降0.2个单位，因此应调高调高两个单位（5）加热熔化（6）培养基的分装，封口。（7）培养基的高压灭菌。

高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸气不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.11MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸气温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。

干热灭菌：利用烘箱加热到160-180℃的温度来杀死微生物。由于在干热条件下，细菌的营养细胞的抗热性大为提高，接近芽抱的抗热水平，通常采用170℃持续90min来灭菌。

过滤灭菌：在需要过滤灭菌的液体量大时，常使用抽滤装置；液量小时，可用注射器。使用前对其高压灭菌，将滤膜装在注射器的靠针管处，将待过滤的液体装入注射器，推压注射器活塞杆，溶液压出滤膜，从针管压出的溶液就是无菌溶液防细菌滤膜的网孔的直径为0.45μm以下，当溶液通过滤膜后，细菌的细胞和真菌的孢子等因大于滤膜直径而被阻。过滤器要先灭菌，灭菌温度不超过121℃，溶液需先进行初滤(滤膜?0.65um)。

培养基的保存：暂时不用的培养基最好置于低温（冰箱中）条件下保存。如缺乏必要的设备或者培养基量大，需在常温下保存，应特别注意防尘、避光。冰箱中（4℃）保存培养基一般在两周内用完，最多不超过1个月；常温下保存培养基一般应在1周内用完。

14.外植体选择应注意哪些方面，外植体灭菌常用的化学药品有哪些，及使用浓度、使用时间；外植体灭菌的步骤及茎尖、茎段以及叶片的灭菌方法。

（1）注意事项：取材部位、取材季节、生理年龄、外植体的大小

（2）常用灭菌剂使用浓度及效果比较表

（3）外植体灭菌步骤：第一步，自来水冲洗；第二步，对材料的表面浸润灭菌；第三步，用灭菌剂处理材料；第四步，用无菌水刷洗材料。其中第二第三步都在超净台内完成。

（4）茎尖灭菌方法：将采集到的茎尖切成0.5-1.0cm长→→去叶（休眠芽预先剥除鳞片）→→流水冲洗2-4h →→ 75％的酒精中处理30s →→稀释20倍的次氯酸钠中浸5-8min(取自老枝条上的可适当延长时间）→→用无菌水冲洗数次，准备接种。

（5）茎段灭菌方法：当年生嫩枝→→去叶→→剪成5cm的小段→→自来水冲洗1-3h→→将材料切割成2-3cm长短→→无菌条件下用75％酒精灭菌30-60s →无菌水冲洗→→0.1％升汞浸泡3-8min（饱和漂白粉浸泡10-20min ）→→无菌水冲洗数次→切割成0.5cm→以备接种。

（6）叶片灭菌方法：取的幼嫩叶片，切割成2—3cm，在流水中冲洗干净。再用75％酒精浸泡约10s →→饱和漂白粉液中浸3-15min，或在0.1％升汞中浸3-5min →→无菌水冲洗数次→→无菌的干滤纸上吸干水分→→接种。

15.植物离体快繁的概念、意义及优点

●概念：所谓快速繁殖，就是利用组织培养的方法，使植物的部分器官、组织在人工控制的适宜条件下，迅速扩大培养，并移植到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法。

●优点：繁殖速度快；使用材料少，生产效率高，省时省工；节约空间有利于植物的工厂化生产；在无菌条件下进行，不受病虫害侵害。

●意义（1）加速某些难繁或繁殖速度低的植物，特别是一些珍稀名贵的花卉，需要发展的濒危植物的繁殖。（2）用有性繁殖的方法难以保持品种特性的异花授粉植物，如油棕、猕猴桃、非洲菊等。（3）适用于需要去除病毒的植物。（4）适用于原种很少，生产上又急需推广的植物

16.污染的来源、种类及如何防止

（1）污染主要来自两个方面：一是材料表面消毒不彻底，植物材料带入培养过程或是植物的内生菌随材料带入

培养过程。二是无菌操作过程中有外界环境进入培养容器造成

（2）污染种类：①细菌性污染、②真菌性污染

（3）污染的防止：①选择适合的植物材料、②严格消毒灭菌、

③合理安排繁殖程序、④规范操作，控制环境条件

17外植体的褐变的原因及克服措施；试管苗玻璃化的概念及特点及克服措施。

●褐变：

（1）外植体褐变是指在接种后，其表面开始褐变，有时甚至会使整个培养基褐变的现象.

（2）褐变产生的主要原因：

①植物品种。不同品种间的褐变现象是不同的。

②生理状态。幼嫩的组织在接种后褐变程度不明显，而老熟的组织在接种后褐变程度较为严重。

③培养基成分。浓度过高的无机盐会使某些观赏植物的褐变程度增加，此外，细胞分裂素的水平过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性，从而使褐变现象加深。

④培养条件不当。如果光照过强、温度过高、培养时间过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，加速被培养的外植体的褐变程度。

（3）防止、减轻褐变现象发生的措施：

①选择合适的外植体。最好选择生长处于旺盛的外植体，这样可以使褐变现象明显减轻。

②合适的培养条件。无机盐成分、植物生长物质水平、适宜温度、及时继代培养均可以减轻材料的褐变现象。

③使用抗氧化剂。在培养基中，使用半胱氨酸、抗坏血酸等抗氧化剂、0.1％-0.5％的活性炭能够较为有效地避免或减轻很多外植体的褐变现象。

④连续转移。对容易褐变的材料可每间隔12-24 h的培养后，再转移到新的培养基上。

●玻璃化

（1）概念：当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常称为玻璃化。

（2）特点：试管苗生长缓慢、繁殖系数有所下降。玻璃化为试管苗的生理失调症。呈现玻璃化的试管苗，其茎、叶表面无蜡质，体内的极性化合物水平较高，细胞持水力差，植株蒸腾作用强，无法进行正常移栽

（3）克服措施：①增加培养基中的溶质水平，以降低培养基的水势；②减少培养基中含氮化合物的用量；③增加光照；④增加容器通风，进行C02施肥（有明显的作用）；⑤降低培养温度，进行变温培养，有助于减轻试管苗玻璃化现象；⑥降低培养基中细胞分裂素含量，可以考虑加入适量脱落酸或少量聚乙烯醇。

18.试管苗的特点及提高移栽成活率的措施

试管苗特点

●形态解剖方面

（1）根：①无根毛②根与苗的输导组织不相连。

（2）叶：①叶的角质和蜡质层不发达，容易蒸腾失水。②无表皮毛，保水和反光能力差。③叶细胞结构疏松。

④叶气孔突出，张大。⑤叶存在排水孔。

●生理功能方面

（1）根：①生理功能低，吸水能力弱

（2）叶：①叶光和能力较低，CO2固定能力差②叶片表面极易散失水分③气孔不能关闭

提高移栽成活率的措施

（1）移栽要抓三个关键

①水分的平衡（不要失水过多）②温度和光照（不能太高）③光和能力逐步形成或加强

（2）提高移栽成活率的技术措施

①移栽前的工作，必须经过炼苗②移栽时应注意移栽基质与容器的选择

③移栽后要注意管理：防止菌类滋生、保持水分供需平衡、保证营养供应、一定的温、光条件

19.优良的愈伤组织有哪四个特点，愈伤组织分几个时期，特点是什么。

（1）特点：①高度的胚性和再分化能力；②容易散碎，以便建立优良的悬浮系，在需要时能从中分离出全能性原生质体；③旺盛的自我增值能力，以便能用这些愈伤组织建立大规模的愈伤组织无性系；④经过长期继代保存而不丧失胚性，以便有可能对它们进行各种遗传操作。

（2）三个时期：

①起动期（诱导期）：代谢活化了，细胞内的合成代谢迅速进行，但是细胞的大小仍然和外植体时一样，没有多大改变

②分裂期：一个明显特征是外层细胞进行分裂，而中间的细胞不分裂。另外还有细胞数目增加，体积变小；细胞核和核仁增到最大等。细胞分裂快，结构疏散，缺少有组织的结构，颜色浅而透明。

③形成期：，大而不规则、高度液泡化、整个组织松散；表面以下约5-10个细胞是细胞生长的中心，是愈伤组织的主要生长部位。

④分化期：分化结构的形成过程加速，超过了回复变化。外层细胞的分裂逐渐减慢，甚至停止，为次生生长所代替，大量次生结构出现。细胞的伸展和分裂处于平衡，故细胞的平均大小往往没有变化。

20.体细胞胚胎发生培养有什么意义，概念及含义，Haccius曾对体细胞胚胎做了组织学的定义有三点，分别是什么？体细胞胚与天然的合子胚的区别。

（1）概念：指非合子细胞在特定条件下，未经性细胞融合而通过合子胚胎发生类似的途径发育出新个体的形态发生过程。

（2）含义：①体细胞胚是组织培养的产物②体细胞起源于非合子细胞

③体细胞胚的形成经历胚胎发育过程

（3）组织学的三点定义：①体细胞胚最根本的特征是具有两极性；②体细胞胚的微管组织与外植体的该组织无解剖结构上的联系，而不定芽或不定根往往总与愈伤组织的微管组织联系；③体细胞胚微管组织的分布是独立的“丫”字形，而不定芽的微管组织无此现象。

（4）体细胞胚与天然的合子胚的区别：

21.植物组织培养脱毒是哪一年建立的，无病毒苗概念及优点。

（1）热处理又称温治疗法，1889年印度尼西亚爪畦人发现，患枯萎病的甘蔗(现证明为病毒病)，放在50-52℃的热水中保持30min，甘蔗就可去病生长良好。以后此方法被广泛用于防治许多植物的病毒病。

（2）无病毒苗概念：是指不含该植物主要的危害病毒，即经检测主要病毒在植物体内的存在表现为阴性反应的苗木。

（3）优点：①去除病毒危害，提高作物品质与产量、增强作物的抗病性。

②减少药剂的使用，减少环境污染。

22.病毒侵染的特性、热处理脱毒的原理及方法；微茎尖脱毒的原理及操作方法；愈伤组织培养的脱毒方法原理与操作；珠心组织培养脱毒法的原理。

（1）病毒侵染的特性：局部或系统花叶、皱缩、卷叶、黄化，老叶上出现紫色边缘的褪绿斑，也有沿叶脉形成紫色羽状斑驳的，在春秋季比较明显。

（2）热处理脱毒法

①原理：当植物组织处于高于正常温度的环境中时，组织内部的病毒受热后部分或全部钝化，不能生成或生成病毒很少，以致病毒含量不断降低从而达到脱毒的目的

②方法：

☆温汤浸渍处理脱毒法

适用：休眠器官、剪下的接穗或种植的材料

方法：50℃左右的温水中浸渍10min至数小时

特点：方法简便易行，但易使材料受伤。

☆热空气处理脱毒法

适用：对活跃生长的茎尖效果较好

方法：将生长的盆栽植株移人温热治疗室(箱)内，一般在35~40℃下处理几十分钟至数月。

（3）微茎尖脱毒法

①原理：感染病毒植株的体内病毒的分布不均匀，病毒的数量随植株部位及年龄而异，越靠近茎顶端区域的病毒的感染程度越低，生长点(分生组织约0.1~1.0mm区域)则几乎不含或含病毒很少。

②方法：将带幼叶的茎芽叶片进行表面灭菌后，在解剖镜下，将外植体放在一个衬有无菌湿滤纸的培养皿内（防止茎尖变干），用解剖针将叶片和叶原基剥掉，当一个闪亮半圆球的顶端分生组织充分暴露出来之后，用解剖刀片将分生组织切下来，可带1~2枚幼叶，然后将其接种到培养基上。

（4）愈伤组织培养的脱毒方法

①原理:病毒复制的速度赶不上细胞增殖的速度、病毒复制的能力衰退或者丢失、继代培养的愈伤组织产生抗性变异。

②操作：植物各种器官或组织诱导产生出愈伤组织，愈伤组织多次继代，然后从愈伤组织再诱导分化芽，长成植株。

（5）珠心组织培养脱毒法的原理：病毒通过微管组织传播，珠心组织和维管束系统无直接联系。

23.脱毒苗的检测哪几种方法，生物鉴定法中的敏感植物的概念及鉴定方法；抗血清鉴定法的原理。

（1）指示植物法（敏感植物法或生物鉴定法）

①概念：利用病毒在其他植物（指示植物或鉴别寄主）上产生特定症状（枯斑和空斑）作为鉴别病毒存在与否和种类的方法

②敏感植物的概念：指对病毒极为敏感、一旦感染病毒就会在其叶片乃至全株上表现特殊的病斑的植物

③局限性：它只能鉴定靠汁液传染的病毒。适用于草本与木本植物

④优点：灵敏、准确、可靠，操作方便。

⑤鉴定方法：

☆汁液涂抹法：从被鉴定植物上1~3g幼叶→研碎→过滤→取滤液涂抹于指示植物的叶面上→保温15~25℃→接种后2~6d 可见症状出现。

☆嫁接接种法：以指示植物作砧木，被鉴定植物作接穗，常用劈接法。

（2）抗血清鉴定法

①原理：植物病毒是由蛋白质和核酸组成的核蛋白，是一种较好的抗原，给动物注射后会产生抗体，抗体存在于血清之中称抗血清。不同病毒产生的抗血清有各自的特异性。用已知抗血清可以鉴定未知病毒的种类。

②鉴定方法：

抗原的制备→→抗血清的采收，分离→→把稀释的抗血清与未知的病毒植物的汁液在小试管内混合→→根

植物组织培养试题与答案(集合版)

植物组织培养练习题 1.植物组织培养：指要人工控制的条件下，将植物体的任何部分，或器官、或组织、或细胞， 进行离体培养，使之发育形成完整植物体。所谓人工控制的条件，即营养条件和环境条件； 植物体的任何一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。 2.愈伤组织培养：将外植体接种在人工培养基上，由于植物生长调节剂的存在，而使其细胞 脱分化形成愈伤组织，然后通过再分化形成再生植株。 3.外植体：植物组织培养中的各种接种材料，包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质 体等。 4.脱分化：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象。 5、接种：把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞，转放到无菌培养基上的 全部操作过程。 6、褐变：外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类 物质，这种致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色，而且还会抑制其他酶的活性，严重影响外植体的脱分化和器官分化，最后变褐而死亡的现象。 二填空 植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。 2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。 3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、单倍体育种、种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。 4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快速繁殖和脱毒培养两种类型。 5、一般组织培养的几道工序如下：培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和高压灭菌；无菌操作——材料的表面灭菌和接种，培养；试管苗的驯化、移栽与初期管理。 6、在进行植物组织培养室设计时，其设计应包括洗涤室、准备室、灭菌室、无菌操作室、培养室、细胞学实验室、摄影室等分室，另加驯化室、温室和大棚。 7、培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、PH。 8、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。 9、细胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 10、玻璃化现象是指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。

植物组织培养 考试复习题.doc

植物组织培养考试复习题 植物组织培养 绪论P1 第一章植物组织培养的基本原理P3 第二章植物组织培养的基本原理P6 第三章植物器官和组织培养P口 第四章胚胎培养及离体授粉P16 第五章花药和花粉培养P20 第六章植物细胞培养P24 第八章原生质体培养P27 第九章植物离体繁殖P30 第十章无病毒苗木培育P33 植物组织培养基本操作P35 1 绪论 植物组织培养的概念植物组织培养是在无菌和人工控制的环境条件 下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、 由于培养的植物材料已脱离母体，乂称为植物离体培养(Plant culture in vitro)o 广义：对植物的器官、组织、细胞及原生质体进行离体培养技术植物组织培养

狭义：对植物的组织(分生组织、表皮组织、薄壁组织等)及培养产生 的愈伤组织进行离体培养。 1.无菌：使培养器皿、器械、培养基和培养材料等处于无真菌、细菌、病毒等微生物的状态，以保证培养材料在培养器1111中正常生长和发育。 2.人工控制的环境条件：对光照、温度、湿度、气体等条件进行人工 控制，以满足植物培养材料在离体条件下的正常生长和发育。 3.外植体：由活体（in vivo）植物体上提取下來的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。（植物组织培养中，使用的各种器官、组织和 细胞统称为外植体。） 4.愈伤组织：外植体因受伤或在离体培养时，其未分化的细胞和已分 化的细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。 （在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。）植物组织培养的特点 植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体 的器官、组织和细胞。具体特点表现在： 1）组织培养的整个过程都是在无菌条件下进行的，外植体、培养基、接种环境都须经过无菌处理。 2）组织培养在多数情况下是利用成分完全确定的人工培养基进行的, 除少数特殊情况（进行营养缺陷型突变细胞的筛选）夕卜，素、微量元素、有机物和植物激素，培养基的PH和渗透压也是人为设定的。因此，在组织下也能再生完整植株。14）组织培养物通过连续继代培养可以不断增殖，

最新植物组织培养试题库

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植物组织培养试题库 一、名词 外植体：在植物组织培养过程中，由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子 等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。 热处理脱毒：利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同，选择适当的高温处理染病 植株，使植株体内的病毒部分或全部失活，而植株本身仍然存活。 平板培养法：是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合，平铺一薄层在培 养基底上的培养方法。 消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。 玻璃化现象：在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水
渍状，这种现象称为玻璃化。 脱毒苗：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在 表现阴性反应的苗木。 灭菌：是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，
即把所有生命的物质全部杀死。 褐变：是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化
成棕褐色的醌类物质，有时使整个培养基变褐，从而抑制其他酶的活性，影响 材料的培养。 微尖嫁接：指在人工培养基上培养实生砧木，嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗的技 术。主要程序：无菌砧木培养—茎尖准备—嫁接—嫁接苗培养—移栽。 植物细胞全能性：一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会 有一整套发育成一个完整植株的遗传基础，在适当的条件下可以通过分裂、分化 再生成一个完整的植株。 人工种子：将组织培养产生的体细胞胚或不定牙包裹在能提供养分的胶囊里，再 在胶囊的外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜，形成一种类似自然 种子的结构。 试管苗驯化：植物组织培养中获得的小植株，长期生长在试管或三角瓶内，体表 几乎没有保护组织，生长势弱，适应性差，要露地移栽成活，完成由“异养”到 “自养”的转变，需要一个逐渐适应的驯化过程。 器官培养：植物的根、茎、叶、花器（包括花药、子房）和幼小果实的无菌培 养。 微体嫁接：指将 0.1-0.2mm 的茎尖作为接穗，嫁接到由试管中培养出来的无菌 实生砧木上，继续进行试管培养，愈合成为完整的的植株。 快速繁殖(微繁殖): 用组织培养的方法,使植物的部分器官,组织迅速扩大培养, 并移植到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法. 脱分化:将已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体的抑制性影响下解脱出来, 恢复细胞的分裂活性.一个成熟的细胞转变为分生状态的过程叫脱分化. 原生质体融合(体细胞杂交):就是使分离下来的不同亲本的原生质体,在离体条 件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合,像性细胞受精作用那样互相融合 成一体的现象. 愈伤组织培养:是指将母体植株上的外植体,接种到无菌的培养基上,进行愈伤组 织诱导,生长和发育的一门技术
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《植物组织培养》综合复习题

植物组织培养综合测试题 一、填空题（每空0.5分） 1. 植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、__________、__________等几种类型. 2. 在分离原生质体的酶溶液内，需要加入一定量的_______其作用是保持原生质体膜的稳定，避免破裂. 3. 1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物_______的理论概念；1943年White提出植物细胞“_________”学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。 4. 用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_________℃的温度范围内，而若用它高温干燥灭菌则需在_________℃的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是_________℃. 5. 细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__________和__________的能力。

6. 1962年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__________培养基，其特点是__________浓度较高，且为较稳定的__________。 7. 7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进__________的生长，这时__________占主导地位；比值高促进__________的生长，这时__________占主导地位. 8. 植物组织培养按培养的方式分为_______培养和_______培养. 9. 组织培养的特点是：_______、_______、_______. 10. 1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得_________，这促进了花药和花粉培养的研究。 11. 在组织培养中，不耐热的物质用__________法灭菌，而培养基常用__________法灭菌. 12. 6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值__________促进根的生长，这时__________占主导地位；比值__________促进芽的生长，这时__________占主导地位。 13. 在组织培养中，非洲菊是靠__________的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以 __________的方式进行快繁的。

植物组织培养试题

农业生物技术第二章植物组织培养试卷 班级___________ 姓名___________ 得分______________ 一、单项选择题（60） 1．植物组织培养是（） A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织 B．愈伤组织培育成植株 C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体 D．愈伤组织形成高度液泡化组织 2．由于培养物脱离母株在试管内培养,故将植物组织培养又叫（） A.初代培养 B.继代培养 C．器官培养 D．离体培养 3．细胞形态和功能发生永久性变化过程称为（） A.分生 B.分化 C．脱分化 D．再分化 4．对外植体进行的第一次培养称为（） A.初次培养 B.器官培养 C．初代培养 D．继代培养 5．在人工培养基上通过诱导外植体而形成的一团无序的薄壁细胞团叫（） A.分生组织 B.保护组织 C．同化组织 D．愈伤组织 6．大量生产实践证明,通过（）可以有效地去除植物体内的病毒,获得无毒种苗. A.茎段培养技术 B.茎尖脱毒技术 C．组织快繁技术 D．转基因技术 7．植物体因受伤或生理上分离而失掉组织或器官后,恢复或复制失去的部分,形成新的完整植株的能力,称为（） A.植物细胞全能性 B.植物的极性现象 C．植物的再生功能 D．细胞的分化 8．下列关于细胞全能性叙述正确的是（） A.每个生物体内的所有细胞具有相同的功能 B.生物体内任何一个细胞可完成该生物体全部功能 C．生物体每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 D．生物体每个细胞都经过产生、分裂、生长、衰老、死亡的全过程 9．构成胚的所有细胞几乎都保持着未分化的状态和旺盛的分裂能力，称为（） A.脱分化细胞 B.成熟细胞 C．胚性细胞 D．再分化细胞 10．愈伤组织表面和内部形成很多胚状体，称为（） A.胚囊 B.胚泡 C．体细胞胚 D．合子胚 11．植物再生功能的产生是由于植物受伤组织产生了（） A.细胞分裂素 B.赤霉素 C．创伤激素 D．生长素 12．草莓茎尖在4℃黑暗条件下，可以保持生活力达（）年之久 A.4 B.5 C．6 D．8 13．脱毒培养指的是（） A.种苗消毒后的培养 B. 种苗及土壤消毒后的培养 C．外植体消毒后的培养 D．无毒茎尖的培养技术

植物组织培养技术习题

植物组织培养技术习题 植物组织培养技术绪论 课后讨论题： 1、对植物组织培养技术的展望。 2、植物组织培养发展史的各个时期，有哪些主要的培养技术获得成功？ 课外作业题： 1、什么叫植物组织培养技术？它有哪些类型？其理论依据是什么？ 2、从外植体到小植株有哪些培养途径？ 3、试述目前植物组织培养的应用。 第1章植物组织培养实验室的基本设备和一般技术课堂讨论题： 1、为了降低生产成本，组培室的设计应注意哪些问题？ 2、在高温高压灭菌过程中应该注意的哪些问题？ 课外作业题 1、简述培养基和器具的灭菌方法和技术。 2、简述植物材料消毒的一般过程。 3、常用灭菌剂有哪些？其消毒原理是什么？各有哪些优缺点？ 4、简述植物组织培养无菌操作技术的一般过程。 第二章培养基 课堂讨论选题： 植物生长发育的必需元素有几种？必需元素的条件是什么？其

在植物体内的生理作用主要有哪几方面？ 课外作业题： 1、常用培养基分为哪几类？各类的主要特点是什么？ 2、培养基的成分有哪些？各有什么作用？ 3、试述培养基选择的方法。 4、简述培养基配制的基本过程。 第三章细胞的全能性与器官发生 复习思考题： 1、简述植物细胞全能性、细胞分化、脱分化与再分化的概念。 2、再分化有哪几种方式？它们的特点是什么？ 3、愈伤组织形成的条件是什么？其形成过程分为哪几个阶段？ 4、试述优良愈伤组织应用具备的特点及获得优良愈伤组织的方法。 5、影响茎芽分化的因素有哪些？ 第四章体细胞胚胎发生 课外作业题： 1、植物体细胞胚胎发生的概念是什么？有哪些途径？ 2、影响体细胞胚胎发生的主要因子有哪些？ 3、长期培养物形态发生潜力丧失的可能原因有哪些？ 4、愈伤组织培养中存在哪两种类型的细胞？它们的特点是什么？ 5、简述制造单胚人工种子的方法和工业化生产人工种子的步骤。

10级植物组织培养试卷题库

一、填空题 1、植物组织培养成功与否，一方面取决于培养材料本身的性质；另一方面取决于培养基的种类和成分。 2.一个已停止分裂的成熟细胞转变为____分生______状态，并形成___细胞团_______的现象称为"脱分化" 3植物组织培养技术的三大难题分别为褐变，污染、和玻璃化。 4具有防止褐变作用的维生素是_____维生素C_________。 5病毒在植物体内的运转方式有短距离运转和长距离运转两种， 前者经过胞间连丝向邻近细胞中扩散，速度很慢。后者通过寄主植物韧皮部的疏导组织随着营养输送进行转移，速度很快。 6.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进_____根_____的生长，这时___分化_____占主导地位；比值高促进___苗____的生长，这时_____分裂___占主导地位悬浮培养的材料必须达到悬浮培养物质分散性多、细胞核较小均一性好和生长迅速等三个要求。 7、连续培养是指在培养过程中，以不断抽取用过的培养基并注入新鲜的培养基，使培养不断得到养分补充，保持其稳定状态的培养 8．培养基的母液一般是配成＿大量元素，微量元素，维生素＿＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿氨基酸＿＿４类存放备用。３．ＭＳ培养基中组成大量元素的盐类分别是＿＿硝酸钾＿＿＿和＿＿＿硝酸铵＿＿＿＿。 9．一般情况下，细胞分裂/生长素的比值高，有利于愈伤组织长＿＿芽＿＿，比值低有利于长＿根＿＿＿。 10．在植物的材料灭菌中，酒精的浓度用＿＿75%＿＿＿，处理时间一般在＿＿＿＿＿范围，是靠_________杀菌的；升汞的浓度一般用＿＿1%~2%＿＿＿，处理的时间在＿＿5~10min ＿＿＿范围，升汞是靠____hg2+_____杀菌的；杀菌剂中的次氯酸钠是靠_____Cl-____杀菌的。 11．培养植物适宜的温度大多在＿＿＿＿25度+-2＿＿，光照强度在＿＿＿＿＿＿，光照时间在＿＿＿。 12、进行热处理植物脱毒的温度在_______85度___左右。13、配制螯合态铁盐需要的成分是__7水硫酸铁_______和_____edta2钠_____。14、培养基中有机态N素营养主要是-______硝态氮_____和____铵态氮_______。 13原生质体的融合可实现_______体细胞___的杂交，其融合的方式分为_______自发融合_______和_______诱导融合_______两类。 14从再生植株倍性来看，小孢子培养通常产生单倍体植株，胚培养通常产生二倍体植株，胚乳培养通常产生三倍体植株。 15.具有防止褐变作用的维生素是______vc________。 18.进行植物组织培养最基本的前提条件是配置培养基_______。。 16离体叶片在诱导愈伤组织的培养基上培养，一般从叶缘或叶脉处容易发生愈伤组织。 17.某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行 高压蒸汽灭菌，而要进行过滤方法灭菌。 18配制培养基时，一般先配制母液，其目的在于__使用方便_________和_______用量准确____。 19分生区域内无维管束，病毒只能通过________胞间连丝____传递。 20在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成_________正比___，而与脱毒效果成_反比____________。 二、单项选择题 1、( c )可作为植物外植体的表面消毒剂是。 A. 漂白粉和水 B. 次氯酸钠溶液和聚乙二醇 C. 氯化汞和新洁尔灭 D.酒精和氯化钠 2、( b ）大多数植物组织培养最适温度一般为℃。 A.37±1℃ B.26±2℃ C.16±2℃ D.4±2℃ 3、( a )在适宜的培养条件下，还可使愈伤组织长期传代生存下去，这种培养称为 。A. 继代培养 B. 再分化培养 C.胚状体培养 D. 驯化 4、( b )大多数植物组织培养培养基最适pH为。 A.5.0-7.0 B. 5.0-6.0 C. 3.0-4.0 D. 7.0-8.0 5、( a ）外植体褐变的原因是。 A.外植体中的多酚氧化酶被激活，使细胞的代谢发生变化。 B. 外植体中的琥珀酸脱氢酶被激活，使细胞的代谢发生变化。 C. 外植体中的磷酸化酶被激活，使细胞的代谢发生变化。 D. 外植体中的三磷酸腺苷酶被激活，使细胞的代谢发生变化。 6．植物组培初代接种易污染的可能原因＿＿＿＿ A材料过嫩B材料过老C接种材料过大D每瓶接种数量太少 7.影响培养基凝固程度因素有_________。 A琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度； D 培养基的PH

植物组织培养习题及答案

0．填空 1.根据培养的材料,植物组织培养分:愈伤组织培养、(器官培养、细胞格养、原生质体培养(悬浮培养 2.植物组织培养的发展分为三个阶段:萌芽阶段、奠基阶段，快速发展和快速发展和应用阶段 3，1902年,Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说,1934年, White出版了《植物组织培养手册》培养等类型从而使植物组织培养为一门新兴学科。 一．填空、 1，组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、调机、_天平、显微镜、_蒸馏水，发生器，酸度计 养基成分主要包括①无机营养成分、②有机营养成分)、_③植物生长调节物质、_④碳水化合物、⑤其它物质 3、培养基最常用的碳源是_蔗糖,使用浓度在1%-5%常用3% 4、糖在植物组织培养中是不可缺少的,它不但作为离体组织棱以生长的碳源而且还能维持培养基渗透压 5、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物般用量6-10g/L之间 6.驯化的目的:在于于提高试管苗对外界环境条件的适应性,提高其光合作用的能力,促使试健壮,提高苗的移裁成活 7、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向,其比值高:有利于根的形成和愈伤组织的形成:低:有利于芽的形成 8、培养基灭菌一般在108kPa的压力下,锅内温度达_121℃C,维持_20-30min、 9.选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取适宜的大小。 10、诱导胚状体比诱导芽的优点:(1)数量多、(2)速度快、_(3)结构完整 11、试管苗的生态环境:高温且恒温、高湿、弱光、无菌 12、培养基中加入活性炭的目的:利用其吸附能力,减少一些有害物质的影响大 13、筛选培养基的方法:单因子试验法、多因子试验法、广谱实验法 14、植物培养技术:灭菌、接种种、培养、驯化四个环节 15、试管苗的驯化注意:基质、温、光、水、肥、气的综合管理 二．填空 1.绝大多数培养植物再生植株时都先经过愈伤组织阶段 2.愈伤伤组织形成大致经历诱导期、分裂期一和分化期三个时期 3、愈用植物生长调节物质时要注意:种类和浓度生长素和细胞分裂素的比值4.愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状体方式 5.组织培养细胞再分化包括四个水平:细胞水平的再分化、组织水平的再分化、器官水平的再分化(器宣发生)和植株水平的分化 三．填空: 1.植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。 2、茎尖培养根据培养目的和取材大小分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养两种类型。前者主要是对茎尖长度不超过,最小只有几十微米的茎尖进行培养,目的是获得无病毒植株:后者是对几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养,目的是离体快繁 3.不定芽产生的途径一是从外植体上直接产生二是从由外植体诱导产生的愈伤组织上产生 4.离体叶培养是指包括叶原基、叶栖、叶鞘、叶片、子吐等叶组织的无菌培养 5.在离体叶培养中,6-BA和KT利于芽的形成;24D利于愈伤组织的形成 四．填空 1、胚胎培养包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养 2、离体胚的培养分为二种类型:。成熟胚培养和_幼胚培养六

植物组织培养技术考试复习题

植物组织培养技术 考试复习题 一、填空题 1、组织培养的理论依据是：植物细胞的全能性。 2、根据培养的外植体材料不同，可将植物组织培养分为以下几种类型：愈伤组织培养、器官培养、胚培养、 细胞培养、原生质体培养、遗传转化。 3、植物组织培养实验室一般划分为洗涤室、培养基配置室、缓冲室、无菌接种室、培养室、观察室、驯化室等分室，其中植物组织培养实验室对无菌条件要求最严格的区域是无菌接种室。 4、培养基成分主要包水分、无机盐类、有机营养成、植物生长调节物质、天然物质、 pH 、凝固剂。 5、目前应用最广泛的组培基本培养基是 MS培养基。 6、培养基最常用的碳源是糖类物质，使用浓度在1%-5% 常用 3%。 7、培养基中加入活性炭的目的：减少外植体的褐变。 8、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向，其比值高则有利于根的形成；其比值低则有利于芽的形成。 9、一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为"__脱分化__" 10、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行(高压蒸汽 )灭菌，而要进行过滤方法灭菌。 11、确定花粉发育时期最简捷有效的方法是压片镜检法。

12、液体培养基和固体培养基最主要的区别是：固体培养基中添加了琼脂粉，而液体培养基一般不添加。 13、细胞悬浮培养的方法有分批培养和连续培养。 14、外植体灭菌常用的消毒剂是酒精，使用浓度一般为 70—75％。 15、具有防止褐变作用的维生素是抗坏血酸（维生素c）。 16、常用防止褐变的试剂有有机酸、硫代硫酸钠。 17、组培中按照污染的对象分，常见的污染类型有细菌性污染、真菌性污染。 18、在使用超净工作台进行无菌操作前，应先将借种器械放进超净工作台，并打开紫外线灯和风机组工作进行消毒20分钟左右。 19、配制培养基调节pH值时常用氢氧化钠溶液和稀盐酸溶液。 20、某溶液在使用前已配制成100倍的母液，在使用时，若需要配制1/2 L的培养基，则需要吸取母液的量是 5ml 。 21、原球茎是兰科植物特有的一种快繁方式。 22、组织培养植株的再生途径有两条，分别是：器官发生途径和胚胎发生途径。 23、一般进行外植体培养时，须诱导形成新的分生组织，即形成愈伤组织。 24、在使用完移液枪后，应注意调回至该移液枪最大量程。 25、植物组织培养快速繁殖技术的基本过程包括材料的初代培养、继代培养、生根培养、驯化培养。

植物组织培养试题及答案总结

《绪论》复习题及参考答案 一、填空： ★1、根据培养的材料，植物组织培养分：愈伤组织培养、器官培养、细胞培养、原生质体培养、悬浮培养等类型。 2、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。 3、1902年，Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说，1934年，White出版了《植物组织培养手册》从而使植物组织 培养为一门新兴学科。 二、名词解释： ★1、植物组织培养(plant tissue culture)：是指通过无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。由于培养材料已脱离了母体，又称为植物离体培养（Plant culture in vitro）。 2、脱分化（dedifferentiation）：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。 3、再分化（redifferentiation）：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养又可以重新分化成根或芽等器官，这一过程称为植物细胞的再分化。 ★4、外植体(explant)：由活体（in vivo)植物体上切取下来的，用于组织培养的各种接种材料。包括各种器官、组织、细胞或原生质体等 ★5、愈伤组织(callus)：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则的薄壁细胞，多在植物体切面上产生。 三、问答题： 1、简述植物组织培养的理论依据？ 植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说，即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。 ★2、植物组织培养有哪些特点？ （1）培养条件可以人为控制 （2）生长周期短，繁殖率高： （3）管理方便，利于工厂化生产和自动化控制： ★3、植物组织培养的分类？ （1）根据培养对象不同：组织培养、器官培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养等； （2）根据培养物培养过程：初代培养、继代培养； （3）根据培养基的物理状态：固体培养、液体培养。 ★4、植物组织培养主要应用于哪些方面？ （1）快速繁殖运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株； （2）种苗脱毒针对病毒对农作物造成的严重危害，通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗； （3）培育和创制新品种利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功，从而育成一些罕见的新物种； （4）大量生产次生代谢物质通过植物细胞培养获得的生物碱、维生素、色素、抗生素以及抗肿瘤药物不下50多个大类，其中已有30多种次生物质的含量在人工培养时已达到或超过亲本植物的水平。植物细胞次生物质的研制与生产硕果累累，后来居上。 （5）植物种质资源的离体保存植物组织培养结合超低温保存技术，可以给植物种质保存带来一次大的飞跃。因为保存一个细胞就相当于保存一粒种子，但所占的空间仅为原来的几万分之一，而且在-193度的液氮中可以长时间保存，不像种子那样需要年年更新或经常更新。 （6）人工种子人工种子便于贮藏和运输，适合机械化播种；繁殖速度快，不受季节和环境限制，利于工厂化生产；体细胞胚由无性繁殖体系产生，可以固定杂种优势。 第1章《实验室及基本操作》复习题及参考答案 一、填空： 1、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、天平、显微镜、蒸馏水发生器、酸度计等。 ★2、培养基成分主要包括①无机营养成分、②有机营养成分）、③植物生长调节物质、④碳水化合物、⑤其它物质。

植物组织培养复习题

植物组织培养复习题 植物组织培养复习题（习题） 一、名词解释 愈伤组织：在培养基上由培养物产生的无序生长且没有一定结构的薄壁细胞团。 外植体：在组织培养中，由植物体上取下来进行离体培养的那部分组织或器官 脱分化：由高度分化的植物器官，组织或细胞经过离体培养，产生愈伤组织的过程。 半连续培养：利用培养罐进行大量细胞培养的一种方式。 无性系变异：由任何形式的细胞培养所产生的植株所表现出来的差异。 胚状体：在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。 看护培养：用同种或异种材料的愈伤组织作为看护组织培养细胞的一种方法。 无融合生殖：由配囊中卵细胞以外的其他细胞发育成的单倍体植株。 种质：亲代通过生殖细胞活体细胞直接传递给子代并决定固有生物性状的遗传物质。 悬浮培养：将游离的植物单细胞或小细胞团，按一定的细胞密度在受到不断拉动或摇动的液体培养基中进行培养的一种方式。 早熟萌发：在培养后迅速萌发为幼苗，不继续进行胚状生长，超过正常发育阶段。 选择压：在2个相对性状之间，一个性状被选择而生存下来的优势。 细胞全能性：任何有完整细胞核的植物细胞具有全部的遗传信息，在一定条件下，均具有分化，发育成完整植株的潜在能力。 条件培养基：在培养集中加入高密度的细胞进行培养，经过一段时间后，这些细胞向培养基中分泌一些促进细胞生长的活性物质，使培养基条件化，使原来在合成培养基上不能分裂的细胞发生分裂。 离体授粉：将未授粉的胚珠，子房或柱头从母体上分离下来，进行无菌培养，并通过一定的方式授给菌花粉，使其在试管内实现受精的技术。 同步化培养：培养基中大多数细胞都能同时通过细胞周期的各个阶段。

专题三植物的组织培养技术练习题

专题三植物的组织培养技术 1.植物组织培养的培养基中加有激素。下表是培养基中两种激素在不同比例时的实验结果。 请分析完成问题： (1)6-BA属于________类激素，它的作用是________。 (2)IBA属于________类激素，它在本实验中的作用是________。 (3)在植物组织培养中，脱分化可用的激素组合是实验_______和实验_______中的激素浓度关系， 再分化时可用的激素组合是实验_______和实验_______中的激素浓度关系。 (4)植物组织培养的培养基中，除激素外，还必须含有_______，它的成分至少应该含有_____、____等。 (5)判断愈伤组织是否产生的依据是看是否产生了________________的细胞。 2.某株名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离。为了防止性状分离并快速繁殖，可以利用该植株的一部分器官或组织进行离体培养，发育出完整的植株，进行离体培养时不应采用该植株的 A．茎尖B．子房壁C．叶片D．花粉粒3.下图是植物组织培养的简略表示。请据此回答：

(1)①表示_______，它能被培养成④的根本原因是_________。 (2)②表示________。 (3)若想制作人工种子，应该选用________(填编号)。 (4)若①是花药，则④是_______，这项技术可用在________育种上。 (5)若①来自转基因抗虫棉的根，则经植物组织培养得到的④是否具有抗虫性状？______。 4.请回答相关问题。 (1)利用月季的花药离体培养产生单倍体时，选材非常重要。一般来说，在_______期花药培养的成功率最高。为了选择该期的花药，通常选择_________的花蕾。确定花粉发育时期最常用的方法有________法，但是对于花粉细胞核不易着色的植物，需采用_________法，该法能将花粉细胞核染成________色。 (2)若要进行兰花无病毒植株的培育，首先选择兰花的________作为外植体。从外植体到无病毒植株试管苗，要人为控制细胞的________和________过程。 (3)进行组织培养需配制MS培养基，在该培养基中常需要添加________、________等激素。欲利于根的分化，植物激素的用量比例应为_________________。 (4)不同植物的组织培养除需营养和激素外，____________等外界条件也很重要。 (5)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，下列各项中使用化学药剂进行消毒的是_________，采用灼烧方法进行灭菌的是______________。(答序号) ①培养皿②培养基③实验操作者的双手④三角锥形瓶⑤接种环⑥花蕾 5.如图为科学家将胡萝卜韧皮部的细胞培养形成胡萝卜植株的过程示意图(注：胚状体即等同于植物种子的胚的结构)。请据图完成下列问题：

植物组织培养复习题 (标准)

植物组织培养复习题 一、填空题： 1.植物脱病毒一般采用茎尖培养脱毒和热处理两种方法。 2.最典型的培养基是1962年发表的的一种适合于烟草愈伤组织快速生长的改良培养基，该培养基后来被称为MS培养基，现已广泛用于植物组织培养。 3.胚状体发育顺次经过原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷形胚期和子叶期。 4.具有防止褐变作用的维生素是Vc。 5.植物组织培养按培养对象分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培 养等几种类型。 6.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以0.3～0.5mm、带1～3个叶原基为好。 7.对植物组织培养的培养基灭菌时，一般情况采用的条件是121温度，保持时间是15～ 20分钟。 8.在幼胚培养基中，蔗糖的主要作用是维持渗透压、提供碳源和能源和防止幼胚早熟萌 发。 9.植物组织培养中，微量元素铁的用量较大，由于在较高pH下，易形成Fe(OH)3沉淀，难以被吸收，所以多用硫酸亚铁（FeSO4·7H20）和乙二胺四乙酸（Na2-EDTA）形成的螯合物，并且单独配制。 10.种质保存大致分为原地保存和异地保寸两种方式。 11.外植体选择的原则是：选择优良的种质、选择健壮的植株、选择最适时期、选取适宜 的大小。 12.细胞悬浮培养的方法有成批培养和连续培养等。 13.植物原生质体分离的方法有酶解法和机械法。 14.植板率是指已形成细胞团的单细胞与接种总细胞数的百分数。 15.花粉分离的方法有挤压法、磁搅拌法、漂浮释放法。 16.植物组织培养发展可分为三个时期：萌芽阶段、奠基阶段、快速发展和应用阶段。 17.一个年产4-20万株苗的商业性组织培养实验室，其总面积不应少于60平方米，可划 分为准备室、缓冲室、无菌操作室和培养室。 18.盐酸硫胺素VB1是脱羧酶辅酶，吡哆醛VB6是转氨酶辅酶。 19.愈伤组织形成大致经历三个时期，即：诱导期、分裂期、分化期。

植物组织培养试题库

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植物组织培养试题库 一、名词 外植体：在植物组织培养过程中，由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子 等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。 热处理脱毒：利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同，选择适当的高温处理染病 植株，使植株体内的病毒部分或全部失活，而植株本身仍然存活。 平板培养法：是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合，平铺一薄层在培 养基底上的培养方法。 消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。 玻璃化现象：在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水
渍状，这种现象称为玻璃化。 脱毒苗：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在 表现阴性反应的苗木。 灭菌：是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，
即把所有生命的物质全部杀死。 褐变：是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化
成棕褐色的醌类物质，有时使整个培养基变褐，从而抑制其他酶的活性，影响 材料的培养。 微尖嫁接：指在人工培养基上培养实生砧木，嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗的技 术。主要程序：无菌砧木培养—茎尖准备—嫁接—嫁接苗培养—移栽。 植物细胞全能性：一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会 有一整套发育成一个完整植株的遗传基础，在适当的条件下可以通过分裂、分化 再生成一个完整的植株。 人工种子：将组织培养产生的体细胞胚或不定牙包裹在能提供养分的胶囊里，再 在胶囊的外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜，形成一种类似自然 种子的结构。 试管苗驯化：植物组织培养中获得的小植株，长期生长在试管或三角瓶内，体表 几乎没有保护组织，生长势弱，适应性差，要露地移栽成活，完成由“异养”到 “自养”的转变，需要一个逐渐适应的驯化过程。 器官培养：植物的根、茎、叶、花器（包括花药、子房）和幼小果实的无菌培 养。 微体嫁接：指将 0.1-0.2mm 的茎尖作为接穗，嫁接到由试管中培养出来的无菌 实生砧木上，继续进行试管培养，愈合成为完整的的植株。 快速繁殖(微繁殖): 用组织培养的方法,使植物的部分器官,组织迅速扩大培养, 并移植到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法. 脱分化:将已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体的抑制性影响下解脱出来, 恢复细胞的分裂活性.一个成熟的细胞转变为分生状态的过程叫脱分化. 原生质体融合(体细胞杂交):就是使分离下来的不同亲本的原生质体,在离体条 件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合,像性细胞受精作用那样互相融合 成一体的现象. 愈伤组织培养:是指将母体植株上的外植体,接种到无菌的培养基上,进行愈伤组 织诱导,生长和发育的一门技术
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植物组织培养复习测试题

植物组织培养题库 一、填空题（每空1分，共20分） 1、植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、 __________、__________等几种类型。 2、在分离原生质体的酶溶液内，需要加入一定量的_______其作用是保持原生质体膜的稳定，避免破裂。 3、1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物_______的理论概念；1943年White提出植物细胞“_________”学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。 4、用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_________℃的温度范围内，而若用它高温干燥灭菌则需在_________℃的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是_________℃。 5、细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__________和 __________的能力。 6、1962年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__________培养基，其特点是__________浓度较高，且为较稳定的__________。 7、 6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进__________的生长，这时__________占主导地位；比值高促进__________的生长，这时 __________占主导地位。 8、植物组织培养按培养的方式分为_______培养和_______培养。 9、组织培养的特点是：_______、_______、_______。 10、1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得_________，这促进了花药和花粉培养的研究。 11、在组织培养中，不耐热的物质用__________法灭菌，而培养基常用__________法灭菌。5、 6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值__________促进根的生长，这时__________占主导地位；比值__________促进芽的生长，这时__________占主导地位。 12、在组织培养中，非洲菊是靠__________的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以__________的方式进行快繁的。

《植物组织培养》试题及答案

试卷编号NO： 高等函授教育《植物组织培养》试题 学号：姓名： 一名词解释：（10*2分=20分） 1、植物细胞组织培养 2、细胞全能性 3、脱分化 4、外植体 5、试管苗驯化 6、间接不定芽发生 7、双极性 8、微体嫁接 9、人工种子 10、体细胞无性系变异 二填空：（30*1分=30分） 1、目前植物组织培养应用最广泛的方面是 和。 2、由脱分化的细胞再分化出完整植株有两种途径，一种叫做，另一种叫做。 3、培养用具的常用灭菌方法有、、 。 4、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行，而要进行。 5、一般来说，黑暗条件下有利于的增殖，而往往需要一定的光照。 6、植物离体授粉技术通常包括、、 三个方面。 7、一般液体培养的继代时间较短，继代一次；而固体培养继代时间可以长些，继代一次。 8、外植体器官发生的三种途径包括、、。 9、从再生植株倍性来看，小孢子培养通常产生植株，胚培养通常产生植株，通常产生三倍体植株。 10、脱毒苗鉴定与检测的主要方法有、、 、。 11、在生长素中，对于许多作物花粉的启动、分裂、形成愈伤组织和胚状体起着决定性作用，但是对却有抑制作用。 12、用平板培养法培养单细胞或原生质体时，常用 来衡量细胞培养效果。 13、用药剂处理是诱导染色体加倍的传统方法。 三计算题（1*10分=10分） 某培养基的配方是MS＋BA 2.0mg/L＋NAA 0.5mg/L＋2.5%蔗糖＋0.7％琼脂粉。MS母液的浓度分别是：大量元素２０倍，微量元素500倍，铁盐100倍，有机物５０倍；BA母液浓度1.0 mg/ml ，NAA母液浓度0.1mg/ml。要配制400ml 该培养基，需要吸取各种母液各多少ml？分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克？（要求写出计算步骤） 四简答题（5*5分=25分） 1、造成组织培养过程中发生污染的原因有哪些？如何有效控制污染？ 2、简述外植体消毒的一般步骤。 3、胚培养在科学研究及生产实践中有哪些应用？ 4、结合花粉培养，简述看护培养法。

植物的组织培养技术同步练习题

植物的组织培养技术同步练习题 一、单选题（2分×20=40分） 1．植物细胞表现出全能性的必要条件是（） A. 给予适宜的营养和外部条件 D.将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞 C.脱离母体后，给予适宜的营养和外部条件 B.导入其它细胞的基因 2．以下成为组织培养条件的是 ( ) ① C02②有机物③生长素④细胞分裂素⑤水⑥矿质元素 A. ①③⑤⑥ B. ②③⑤⑥ C. ②③④⑤⑥ D. ①②⑤⑥ 3．关于操作后出现培养物被污染的情况 , 正确的叙述是 ( ) ①可立即打开培养瓶 , 进行清洗②先将所有被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌 , 然后再打开培养瓶 , 进行清洗③按要求操作一定不出现培养物被污染④细菌污染可能是由接种人员未戴口罩、接种时说话等引起的⑤真菌污染可能是植物材料灭菌不当引起的（） A. ②③⑤ B. ②③④⑤ C. ①③④⑤ D. ②④⑤ 4．无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键 , 以下说法正确的是 ( ) ①由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差 , 对无菌操作的要求非常严格 ②对培养基及器械用高压蒸汽灭菌③对培养材料进行表面灭菌时一方面要考虑药剂的消毒效果 , 另一方面还要考虑植物材料的耐受能力④不同药剂、不同植物材料甚至不同

器官要区别对待⑤对培养材料可用高压蒸汽灭菌⑥如果不小心导致污染 , 将可能造成培养工作的前功尽弃 A. ①②③④⑤ B. ①②③④ C. ①②③④⑥ D. ①②③④⑤⑥ 5．愈伤组织分化过程中 , 当培养基中细胞分裂素 / 生长素的比值较低时 , 诱导分化的器官是 ( ) A. 根 B. 芽 C. 叶 D. 胚性细胞团 6．当先使用细胞分裂素 , 后使用生长素时 , 实验结果是 ( ) A. 有利于细胞分裂 , 但细胞不分化 B. 细胞既分裂又分化 C. 分化频率提高 D. 有利于细胞分化 , 但不分裂 7．影响植物组织培养的因素包括 ( ) 。 ①培养基的配制②外植体的选取③激素的运用④消毒⑤温度、 pH 、光照 A. ①②③④⑤ B. ①②③ C. ①②③④ D. ①②③⑤ 8.下列描述中，属于改变物种遗传性状的最根本的途径是（） A．胚胎移植B．基因导入C．克隆 D．组织培养 9．动物细胞培养与植物组织培养的重要区别是（） A．培养基不同B．动物细胞不需要在无菌条件下进行C．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能