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内毒素对人脐静脉内皮细胞线粒动力学的影响论文

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人脐静脉内皮细胞的培养及鉴定

本课题为安徽省自然科学基金安科医药专项资助项目(01043708)作者单位:230001 合肥安徽省立医院普外科安徽医科大学2001级硕士研究生(傅斌生) 人脐静脉内皮细胞的培养及鉴定余继海许戈良汪建荚卫东傅斌生 [摘要] 目的探讨新生儿脐静脉内皮细胞的培养及鉴定方法,建立血管内皮细胞培养模型,为体外研究血管内皮细胞提供实验手段。方法采用胶原酶灌流消化法培养人脐静脉内皮细胞,当原代培养细胞80%以上汇合后,用胰蛋白酶消化传代;根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和分泌蛋白流式细胞术(F M 术)免疫荧光检查对细胞进行鉴定。结果种植在培养瓶中的内皮细胞12小时贴壁生长,48~72小时生长最快,7~10天汇合。内皮细胞呈接触抑制生长、呈鹅卵石样外观,FM 术检测CD31和V -R-Ag 均为阳性表达。结论消化酶灌注脐静脉消化内皮细胞是获取血管内皮细胞的一种好方法,可靠性大,成功率高,可以构建体外研究血管内皮细胞的模型。 [关键词] 内皮细胞;培养 C ulture and identif ication of human endothelial cells derived f rom umbilical veins Y u Jihai ,Xu Geliang,W ang J ian,et al A nhui Prouincial H osp ital,H ef ei 230001 [Abstract] Objective T o extablish the methods of culturing human endothelial cells (EC)and identifing the cells ac cording to t he antigens expressed and their morpholog ical aspect.Methods A fter digestion w ith t ype collagenase at 37!for 10minutes,the cells were centrifuged,and the cell pellet was resuspended in DEM E medium containing fetal bovine serum (10%vol/vol),seeded on gelatin(0.1%w t/vol)procoated dishes at aconcentr at ion of 10,000per square centimeter.T he medium was changed 1days later when the cells w er e attached and every 2days,until the cells reached confluence.Phase con trast microscopy and flow cy tometry with specific antisera against von willebrand factor and CD31were used to obser ve and i dentify the culturedcells.Results At confuluence (7~9days),the cultured cells had a cobbestone appear ance wit h a strict monolayer grow th and contact inhibition.T he mean fluorescence intensity of the cells was similar w ith both antibodies for the cultured cells vs controls.C onclusion T he cultured cells are endothelial cells,and the method of identification is practical and convenient. [Key words] Endot helial cells;Culture 我们采用胶原酶灌流消化法成功培养人脐静脉内皮细胞,根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和分泌蛋白流式细胞术免疫荧光检查对细胞进行鉴定,从而构建体外研究血管内皮细胞的模型,现报告如下。材料与方法一、材料与培养用液的配制 CK 型倒置显微镜(日本Olympus Tokyo 公司),流式细胞仪(Coulter 公司),BB 5060型CO 2培养箱(美国Heraeus),Cryfuge500S 型低温离心机,胎牛血清(FBS,100ml/瓶,H yclone 公司),人血管内皮生长因子(VEGF,10 g/支,Pepro Tech 公司),CD31PE 购自Becton Dickison 公司(编号:340297)。培养用液:(1)PBS 液:Nacl 8.5g 、Kcl 0.2g 、NaH 2PO 4H 2O 2g 、KH 2PO 40.2g 溶于1000三蒸水中,120!灭菌20m in,分装备用。(2)胶原酶(Gibco 公司,10mg/支)和胰蛋白酶(上海华美公司)分别溶于100ml PBS 中,浓度分别为0.1%和0.25%,抽滤消毒备用。(3)DMEM 培养基(购自BRL-Gibco 生命技术公司):按照说明书操作,将一袋干粉溶于1000ml 三蒸水中,抽滤消毒,加入胎牛血清终浓度为10%,4!贮存备用。二、方法 1.内皮细胞原代培养:无菌获取新生儿脐带,立即用生理盐水冲洗血迹,剪去钳痕和血肿部位,再用PBS 液冲净脐静脉内血迹。将脐带一端用丝线结扎固定,用注射器向脐静脉另一端内注满0.1%胶原酶液,止血钳钳夹后放入水浴锅内孵育15min 。取出脐带松开血管钳释放酶细胞混合液于离心管中,再用PBS 液冲洗脐静脉后一并收集于离心管中,1000rpm ?8min 。弃去上清液,转移至35cm 2 培养瓶(Falcon 公司)中,加入DM EM 培养液(内含10%胎牛血清,青霉

小鼠肺微血管内皮细胞使用说明

小鼠肺微血管内皮细胞小鼠肺微血管内皮细胞产品说明：为使客户能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。派瑞金提供的小鼠肺微血管内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。研发的小鼠肺微血管内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。小鼠肺微血管内皮细胞注意事项： 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。 3. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。 4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。 5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。小鼠肺微血管内皮细胞其他相关小鼠原代细胞：小鼠小肠粘膜上皮细胞小鼠大隐静脉平滑肌细胞小鼠肺微血管内皮细胞小鼠冠状动脉平滑肌细胞小鼠肺血管平滑肌细胞小鼠大隐静脉内皮细胞小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞小鼠冠状动脉内皮细胞小鼠气管上皮细胞小鼠骨细胞小鼠气管平滑肌细胞小鼠滑膜细胞小鼠肺成纤维细胞小鼠骨骼肌细胞小鼠支气管上皮细胞小鼠表皮细胞小鼠支气管成纤维细胞小鼠真皮成纤维细胞小鼠肺大静脉平滑肌细胞小鼠破骨细胞小鼠肺大动脉平滑肌细胞小鼠皮肤肥大细胞

实验室常用实验方法-人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养 1.将15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的PBS 溶液中储存。（注：4℃下最多贮存24 小时，室温下不超过6 小时，否则废弃） 2.用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的PBS 溶液冲洗3-5 次，将污血冲洗干净为止。 3.用手术钳夹紧脐带下端，加入15m l的胶原酶（1m g/ml）室温下消化15-20 分钟，并不时上下摇动脐带。 4.消化完后，将下端手术钳松开，消化液流入一个50 m l无菌离心管中，用无菌的PBS 溶液冲洗脐带2-3 次。 5.将收集液离心（2000 转/分）3 分钟。 6.倒去上清，加入10m l M199培养基（加入10U/m l的bF G F），用弯管吹散细胞，将所有液体转入一个用明胶包被好的培养瓶中，37℃培养。（注：每个培养瓶中加入3-4ml 无菌的1%的明胶溶液，摇匀使得明胶溶液完全铺满瓶底，放入37℃孵育，最少2 小时，用前将明胶溶液倒了即可，明胶包被有利于细胞贴壁。） 7.培养24 小时后，倒掉培养基，并用无菌的PBS 溶液清洗2-3 次，洗掉红细胞和死细胞，加入10 m l新鲜的M199培养基。 8.以后每2 天换一次培养基（每次换掉2/3 的培养基）。 9.一般培养5-7 天，细胞可长满至80-90%单层，这时可以传代。 10.倒掉培养基，用无菌的PBS溶液清洗2-3 次，加入2-3m l消化液（0.25%胰酶 +0.1%EDTA）消化细胞，在显微镜下观察，一旦细胞变圆，即加入2-3 倍的——————————————————————————————————————————————

影像诊断学三基三严试题

医学影像诊断考试试卷（二）一. 单项选择题（总分40分，每题1分，每题只有一项正确答案） 1. 下列哪一项不属于基底节结构（） A. 尾状核 B. 豆状核 C. 屏状核 D. 丘脑 2. 小脑桥脑角区最常见的肿瘤为（） A. 胆脂瘤 B. 脑膜瘤 C. 听神经瘤 D. 垂体瘤 3. 对于椎管内肿瘤，为明确病变的部位及其性质，最佳检查方法为（） A.X 线平片 B.CT C.MRI 及增强MRI D. 脊髓造影 4. 脑梗死是按什么分布的（） A. 脑实质 B. 脑白质 C. 脑叶 D. 脑血管分布区 5. 高血压出血常见的部位是（） A. 壳核出血 B. 丘脑出血 C. 基底节出血 D. 内囊出血 6.男性患者，30 岁，搏动性耳鸣，蓝色鼓膜，传导性耳聋2年，CT 示鼓室内软组织肿物，最可能的诊断是( ) A. 胆脂瘤，中耳炎 B. 胆脂瘤，听骨链破坏 C. 面神经瘤，听骨链破坏 D. 血管球瘤，颈内静脉裸露 7.CT 对甲状腺肿瘤的诊断评价，下列说法哪项不正确( ) A. 定位较准确 B. 有无钙化是鉴别良恶性的依据 C. 判断有无淋巴结转移 D. 判断有无邻近组织受累 8. 鼻咽癌的好发部位为( ) A. 咽鼓管圆枕 B. 鼻咽顶壁 C. 梨骨后缘 D. 咽隐窝 9. 对肺的描述，正确的是( ) A . 右肺分2叶 B . 肺底突向下 C . 右肺窄长，左肺宽短 D . 肺呈圆锥形 10 . 下列肺部病变好发部位的描述，错误的是( ) A . 支气管肺炎：双下肺 B . 肺结核：上叶尖后段或下叶背段 C . 肺隔离症：右肺上叶 D . 中央型肺癌：肺门附近 11 . X 线平片正常肺门阴影的最主要解剖结构是( ) A . 肺动脉. 肺静脉. 支气管. 淋巴结 B . 肺动脉. 上肺静脉. 支气管. 淋巴结 C . 肺动脉. 上肺静脉. 支气管 D . 肺动脉. 肺静脉 12. 指出胸腔积液X 线表现叙述错误者( ) A . 胸腔积液区为透过度增加区 B . 胸腔积液为均匀透过度减低区 C . 积液面不超过第四前肋为少量积液 D . 液面超过超过第四前肋，但未超过第二前肋为中量 13 . 浸润型肺结核X 线特征叙述，哪项错误？( ) A . 病变好发于锁骨上下区 B . 病灶常为多发性. 多种形态和多种性质 C . 进展期病灶边界清晰 D . 有空洞时易发生支气管播散 14 . 关于肺转移瘤的叙述，哪一项错误( ) A . 转移途径主要有血行和淋巴转移

实验动物大鼠原代脑微血管内皮细胞

实验动物（大鼠）原代脑微血管内皮细胞产品编号：RAT-iCELL-n001 产品规格：>5×105细胞数产品价格：3750 包装规格：T-25培养瓶细胞详述：脑微血管内皮细胞是血脑屏障的主要组成成分，能够限制可溶性物质和细胞等从血液进入大脑。大脑微血管内皮细胞与外周内皮细胞相比具有一些相同特性。脑微血管内皮细胞存在许多细胞间紧密连接，产生很高的跨内皮阻抗，延迟细胞旁的通量；脑微血管的内皮细胞间衔接得十分紧密，不象其他组织的血管内皮细胞那样有较大的缝隙脑微血管内皮细胞缺乏内皮细胞的窗孔结构，其液相物质胞饮水平较低；脑微血管内皮细胞具有不对称定位酶和载体介导转运系统，从而产生“两极分化”的表现型。与外周内皮细胞相同，大脑微血管内皮细胞表面表达细胞粘附分子，调控白细胞进入大脑。由于微血管内皮细胞的器官特异性，内皮细胞通常取源于疾病研究的相关组织。细胞特性: 1)组织来源于实验动物的脑动脉组织。 2)细胞鉴定：血管假性血友病因子（vWF）免疫荧光染色为阳性。 3)经鉴定细胞纯度高于90%。 4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 5)细胞生长方式：铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养。产品的运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。推荐培养基：我们推荐使用iCell原代内皮细胞培养体系（产品编号：PriMed-iCELL-002）作为体外培养原代脑动脉血管内皮细胞的培养基。产品使用： 1)本产品仅能用于科研 2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核 3)本产品未通过用于活体诊断的审核

人脐静脉内皮细胞的体外分离培养及鉴定.

人脐静脉内皮细胞的体外分离培养及鉴定作者：秦明春，王若光，秦莉花，刘小丽，李春梅，刘惠萍，叶赞【摘要】目的探讨人脐静脉内皮细胞的原代培养方法，提高体外分离培养血管内皮细胞的成功率。建立血管内皮细胞培养模型，为体外研究血管内皮细胞提供实验基础。方法取2根脐带（至少20 cm）冲净淤血，采用加工穿刺针固定脐静脉灌注消化液, 一根用0.2％胶原酶Ⅱ，另一根用0.1％胶原酶Ⅰ和0.25％胰酶等比混合消化液，比较两种酶的消化效果。收集细胞并用含有10 ng/mL的VEGF的培养基中培养，观察细胞的生长及传代。并在倒置显微镜下观察细胞的形态学特点，同时用免疫组织化学的方法对所得细胞进行鉴定。用流式细胞术观察细胞周期。结果两种消化酶方法均获得了相当数量的人脐静脉内皮细胞，胶原酶Ⅱ的消化效果稍优于混合消化酶，且比较理想的消化时间均为13 min，细胞接种后4～5 h开始贴壁生长，1周左右可生长成单层，光镜下呈多角形，“铺路石”样排列，免疫组织化学法可见内皮细胞胞浆中人第Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应。细胞周期显示约有50.6%的细胞处于G0/G1期。结论胶原酶Ⅱ和胶原酶Ⅰ与胰酶等比混合消化液灌注法是获得脐静脉内皮细胞的一种可取方法，而胶原酶是分离培养脐静脉内皮细胞的首选消化液，成功率高，可靠性大，可成功构建体外研究血管内皮细胞的模型。【关键词】人脐静脉内皮细胞；细胞培养；流式细胞术；细胞周期；分离；鉴定 Cultivation and in vitro identification of endothelial cells from human umbilical vein 〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕ＯｂｊｅｃｔｉｖｅTo explore the primary culture method of human vascular endothelial cells(ECs) from umbilical vein, enhance the succes s rate of separating and culturing ECs in vitro, establish the model of human vascular ECs, and provide an experimental method for research of ECs. Methods The umbilical veins in human umbilical cords, 20 cm long, were fixed and filled the digestive fluids, 0.2% collagenenaseⅡin one cord and t he complex enzyme of 0.25% trypsin and 0.1% collagenaseⅠin an other, and the digestive results were compared. All the cells were collected and cultured in fluid with 10 mg/mL VE GF, their procreation and generation were observed, the morph ologic characteristics of ECs were observed with light micros copy and immunohistochemistry under inverted microscope, and t he cell cycle was observed by flow cytometer. Results Enough

临床影像学试题100100

医学影像学本科毕业考试试题一、多选题（每小题１分）：Ａ型题： ━━━━━━ １、骨巨细胞瘤的表现不包括：d Ａ、长骨骨端溶骨性破坏；Ｂ、骨破坏区内出现肥皂泡样骨性间隔；Ｃ、骨皮质菲薄，向外膨隆；Ｄ、骨膜增生明显；Ｅ、易合并病理性骨折。２、周围型肺癌的主要表现为： B Ａ、肺门肿块Ｂ、肺野肿块Ｃ、阻塞性肺炎Ｄ、阻塞性肺不张Ｅ、支气管狭窄３、有关原发性纵隔肿瘤，下列哪项错误：A Ａ、转移性肿瘤较原发性肿瘤为多；Ｂ：需与肺部肿瘤作鉴别Ｃ、肿瘤类型与发生区域有关Ｄ、肿瘤内出现牙齿状钙化为畸胎瘤的特征性表现Ｅ、恶性淋巴瘤对放疗敏感，可以治愈。４、脊椎转移性骨肿瘤的Ｘ线表现，选择一项错误的：D Ａ、骨质破坏可单发或多发Ｂ、以溶骨性破坏多见Ｃ、椎弓根往往受破坏Ｄ、椎体破坏可压缩变扁Ｅ、椎间隙变窄５、男性，２５岁，正常小腿照片，哪项描述为正常：Ａ、胫骨近端骨骺清晰可见；Ｂ、胫骨近端初期钙化带稍变模糊Ｃ、胫骨近端骨性关节面光滑；Ｄ、胫骨近端骨骺板宽达０、５厘米Ｅ、胫骨近侧干骺端轮廓清楚。６、股骨头骺缺血性坏死具有早期诊断的Ｘ线征象是：Ａ、关节肿胀；Ｂ、股骨头头下骨质疏松Ｃ、股骨头轻度外移Ｄ、股骨头关节面下弧形透亮影，头骺变扁平，密度增高Ｅ、股骨颈粗短，髋臼变浅而不规则。７、下列关于右上叶大叶性肺炎的描述，哪项是错误的：Ａ、右上肺野致密阴影，形态、范围与右上叶相符Ｂ、致密阴影下缘边界模糊Ｃ、实变区内看不到肺纹理Ｄ、有空气支气管征

Ｅ、其它部份肺野可以正常８、骨囊肿的Ｘ线表现，下列哪项是错误的：Ａ、多见于青少年长骨骨干Ｂ、病变于骨髓腔，呈单房性，椭圆形骨质破坏Ｃ、周围有薄层硬化，边界清楚Ｄ、常易发生病理性骨折Ｅ、病变呈横轴发展。９、下列哪些不是左心房增大的表现：Ａ、左支气管抬高；Ｂ、左心缘四弓征Ｃ、主动脉窗消失；Ｄ、右心缘双弓征Ｅ、食管受压移位。１０、请指出桡骨远端骨折（柯氏骨折）中哪项是错误的：Ａ、桡骨远端２━３厘米以内骨折Ｂ、骨折段向背侧近侧移位Ｃ、骨折段向掌侧成角畸形Ｄ、骨折段向背侧成角畸形Ｅ、常伴尺骨茎突骨折１１、风心病和肺心病Ｘ线主要鉴别点在于：Ａ、有无主动脉弓缩小；Ｂ、有无心腰部突出Ｃ、有无左心房扩大；Ｄ、有无肺动脉扩张Ｅ、有无右心室增大１２、下列小肠绞窄性肠梗阻的Ｘ线表现中，哪项错误？Ａ、假肿瘤征Ｂ、小跨度蜷曲肠袢Ｃ、空回肠易位征Ｄ、长液面征Ｅ、结肠、小肠广泛性积气，并有小液平面，分布广泛。１３、下列关于胆石症的叙述，哪项错误？Ａ、胆石症有阳性结石或阴性结石Ｂ、胆石多数与胆囊炎并存Ｃ、胆囊及胆管结石多为阳性结石Ｄ、胆囊阳性结石为多发砂粒状Ｅ、胆囊造影时，阴性结石有时要与肠道内气影鉴别１４、正常内听道宽径测量，平均约为：Ａ、１ｍｍＢ、２ｍｍＣ、３ｍｍＤ、５、５ｍｍＥ、１０ｍｍ１５、引起左室右室增大的以右室增大为主，肺充血，主动脉结变小的疾病，可能为：Ａ、房缺Ｂ、室缺

甘肃省中医院骨肌系统试题最终版

骨肌 1、骨与关节系统最常用的影像学检查方法是： A A. X线平片 B. CT 检查 C. MRI 检查 D. 超声成像检查 E、ECT 2、骨质疏松是指单位体积内 A A、有机成分和钙盐都减少 B、有机成分减少，钙盐正常 C、有机成分正常，钙盐增多 D、有机成分正常，钙盐减少 E、有机成分正常，钙盐正常 3、骨膜增生是因 A A、骨膜外层纤维层增生 B、骨膜内、外层纤维层增生 C、骨松质增生 D、骨皮质增生 E、骨膜内层成骨细胞活动增加 4、骨内与软骨内钙化的典型X线表现是 A A、颗粒状、小环状无结构致密影 B、颗粒状、小环状有骨小梁结构 C、大片状无结构致密影 D、大片状有结构致密影 E、小环状有结构致密影 5、氟骨症引起骨质结构变化最明显的部位是 A A、躯干骨 B、上肢骨 C、头颅骨 D、下肢骨 E、全身骨 6、骨折对线不良是指 C A、骨折端内外移位 B、骨折端上下移位 C、骨折端成角移位 D、骨折端分离移位 E、骨折端重叠移位 7、关于骺离骨折的X线表现，不正确的是 C A、骺线增宽 B、骺与干骺端对位异常 C、横行骨折线 D、可见骨骺撕脱性骨折 E、可见干骺端撕脱性骨折 8、肌腱、韧带损伤最理想的检查方法是 A A、MRI B、CT C、X线片 D、超声成像 E、关节造影 9、化脓性骨髓炎最常发生的部位是 A A、胫骨与股骨 B、腓骨和肱骨 C、跟骨和髂骨 D、尺骨和桡骨 E、胫骨和腓骨 10、脊柱结核与转移瘤主要鉴别点是 B A、骨质破坏为主 B、椎间隙狭窄 C、椎体压缩变扁

D、椎旁软组织影 E、脊髓受压 11、关于良性骨肿瘤，不正确的说法是 A A、浸润性生长 B、可见病理性骨折 C、一般无骨膜反应 D、可以是多发性病变 E、压迫邻近组织器官 12、“骨片陷落征”常见于下列哪种疾病 C A、骨巨细胞瘤 B、内生软骨瘤 C、骨囊肿 D、骨转移瘤 E、骨软骨瘤 13、关于骨巨细胞瘤的X线表现，哪项叙述不正确E A、靠近骨端的偏心性骨破坏 B、骨皮质膨胀变薄形成骨性包壳 C、破坏区边缘有硬化 D、内有皂泡样骨嵴 E、可越过关节侵犯邻近骨骼 14、骨肉瘤的好发年龄是 B A、5～10岁 B、11～20岁 C、21～30岁 D、5～20岁 E、10～30岁 15、兼有膜化骨和软骨内化骨的骨骼是 C A、颅盖骨 B、骨盆 C、锁骨、下颌骨 D、四肢骨 E、颅底骨、筛骨 16、无骨髓水肿的病变是： A.外伤 B.应激反应 C.反射性交感神经营养不良 D.再障 E.一过性骨质疏松 17、骨质破坏系由A A、局部骨质为病理组织取代所致 B、骨折后所致 C、手术后所致 D、营养障碍所致 E、废用性所致 18、脑脊液鼻漏，常见于A A．筛骨骨折 B．蝶骨骨折 C颞骨骨折 D．鼻骨骨折 E.额骨骨折 19、颅内脊索瘤好发于 A A．蝶鞍部B．斜坡 C．中颅凹 D．桥小脑角区 E.大脑大静脉池 20、躯干骨不包括：E A．脊柱 B．肋骨 C．胸骨 D．骨盆E．颅骨 21、矢状位上，正常膝关节半月板边缘部形态为：C A.圆形 B.三角形 C.“弓带状”（bowtie）

毛细血管(二)

毛细血管（二）毛细血管（capillary）是管径最细，分布最广的血管。它们分支并互相吻合成网（图8－8）。各器官和组织内毛细血管网的疏密程度差别很大，代谢旺盛的组织和器官如骨骼肌、心肌、肺、肾和许多腺体，毛细血管网很密；代高血压较低的组织如骨、肌腱和韧带等，毛细血管网则较稀疏。图8-8 人胃粘膜血管铸型扫描电镜像示毛细血管网（一）毛细血管的结构毛细血管管径一般为6～8μm，血窦较大，直径右达40μm。毛细血管管壁主要由一层内皮细胞和基膜组成。细的毛细血管横切面由一个内皮细胞围成，较粗的毛细血管由2～3个内皮细胞围成。内皮细胞基膜外有少许结缔组织。在内皮细胞与基膜之间散在有一种扁而有突起的细胞，细胞突起紧贴在内皮细胞基底面，称为周细胞（pericyte）（图8－9，8－10）。周细胞的功能尚不清楚，有人认为它们主要起机械性支持作用；也有人认为它们是未分化的细胞，在血管生长或再生时可分化为平滑肌纤维和成纤维细胞。图8-9 毛细血管扫描电镜像示周细胞 P 周细胞胞体 1、2周细胞突起

图8-10 毛细血管电镜像左图连续毛细血管，中图有孔毛细血管，右图毛细血管扫描电镜像示内皮孔 E 内皮细胞，P周细胞，↑内皮细胞孔 (二)毛细血管的分类光镜下观察，各种组织和器官中的毛细血管结构相似，但在电镜下，根据内皮细胞等的结构特点，可以将毛细血管分为三型。 1．连续毛细血管连续毛细血管（continuous capillary）的特点为内皮细胞相互连续，细胞间有紧密连接等连接结构，基膜完整，细胞质中有许多吞饮小泡。连续毛细血管分布于结缔组织、肌组织、肺和中枢神经系统等处。肺和中枢神经系统内的毛细血管内皮细胞甚薄，含吞饮小泡较少（图8－10）。 2．有孔毛细血管有孔毛细血管（fenestrated capillary）的特点是，内皮细胞不含核的部分很薄，有许多贯穿细胞的孔，孔的直径一般为60～80nm（图8－10）。许多器官的毛细血管的孔有隔膜封闭，隔膜厚4～6nm，较一般的细胞膜薄。内皮细胞基底面有连续的基板。此型血管主要存在于胃肠粘膜、某些内分泌腺和肾血管球等处。肾血管球的内皮细胞的孔没有隔膜。 3．血窦血窦（sinusoid）或称窦状毛细血管（sinusoid capillary），管腔较大，形状不规则，主要分布于肝、脾、骨髓和一些内分泌腺中。血窦内皮细胞之间常有较大的间隙，故又称不连续毛细血管（discontinuous capillary）。不同器官内的血窦结构常有较大差别，某些内分泌腺的血窦，内皮细胞有孔，有连续的基板；有些器官如肝的血窦，内皮细胞有孔，细胞间隙较宽，基板不连续或不存在。脾血窦又不同于一般血窦，其内皮细胞呈杆状，细胞间的间隙也较大。（三）毛细血管与物质交换毛细管是血液与周围组织进行物质交换的主要部位。人体毛细血管的总面积很大，体重60kg的人，毛细血管的总面积可达6000m2。毛细血管管壁很薄，并与周围的细胞相距很近，这些特点是进行物质交换的有利条件。物质透过毛细血管壁的能力称毛细血管通透性（capillary permeability）。毛细血管结构与通透性关系的研究表明，内皮细胞的孔能透过液体和大分子物质，吞饮小泡能输送液体，细胞间隙则因间隙宽度和细胞连接紧密程度的差别，其通透性有所不同。基板能透过较小的分子，但能阻挡一些大分子物质。另外一些物质，如O2、CO2和脂溶性物质等，可直接透过内皮细胞的胞膜和胞质。

小鼠心肌微血管内皮细胞使用说明

小鼠心肌微血管内皮细胞小鼠心肌微血管内皮细胞产品说明: 为使能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。派瑞金提供的小鼠心肌微血管内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。研发的小鼠心肌微血管内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。注意事项： 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。 3. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。 4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。 5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。小鼠心肌微血管内皮细胞产品简介: 1、产品名称：小鼠心肌微血管内皮细胞 2、组织来源：小鼠心肌血管组织 3、产品规格：5×105cells / 25cm2培养瓶小鼠心肌微血管内皮细胞简介：小鼠心肌微血管内皮细胞分离自正常小鼠心肌血管组织，血管内皮细胞密切参与包括再生、发育、伤口愈合等一系列生理及炎症反应。本公司生产的小鼠心肌微血管内皮细胞，细胞总量约为5×105cells/瓶，细胞纯度可达80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。小鼠心肌微血管内皮细胞培养基信息：

西医综合骨科真题

2015年西医综合 49、类风湿关节炎滑膜内浸润的特征性细胞是 C A 、中性粒细胞 B 、巨噬细胞 C 、浆细胞和淋巴细胞 D、嗜酸性粒细胞 88、不属于腓总神经损失的临床表现： C A、足不能背屈，外翻，伸趾 B、马蹄内翻足 C、小腿前内侧区感觉障碍 D、行走困难，呈跨越步态 89、慢性骨髓炎的治疗不适当的处理： B A、清楚病灶，消灭死腔，伤口闭合 B、可将不重要部位的病骨整段切除 C、病程久不愈，可考虑施行截肢术 D、急性发作时，抗生素治疗，清除病灶 90、骨盆骨折最早最危险的并发症是： D A、膀胱，尿道破裂 B、坐骨神经损失 C、直肠损失 D、出血性休克（118-120共用题干）男，60 岁，左手麻木半年，双下肢乏力，行走不稳 3 个月，查体：左上肢桡骨膜反射减弱，左手拇指针刺觉减退，双下肢腱反射亢进，双侧Binski 征（+），初步诊断为脊髓型颈椎病。 118、病变平面：

A、颈4-5 B、颈5-6 C、颈6-7 D、颈7-胸1 119、对诊断最有意义的影像学检查： A、X 线 B、CT C、增强CT D、MRI 120、患者最终确诊颈椎单一节段椎间盘突出，相应节段颈椎管狭窄，颈脊髓变性，不宜采取的治疗是： A、颈椎前路手术 B、颈椎后路手术 C、颈椎前后路联合手术 D、按摩治疗 A、脊柱结核 B、脊柱恶性肿瘤 C、强直性脊柱炎 D、退行性脊柱骨关节病 149、X 线表现为骨破坏和椎间隙狭窄，常见于： A 150、X 线表现为“竹节样”改变，常见于： C 179、胸腰椎骨折的临床表现：ABC A、畸形，后凸，生理弧度消失 B、功能障碍 C、异常活动与骨擦音 D、疼痛及肿胀

人脐静脉血管内皮细胞

HUVEC 人脐静脉血管内皮细胞General Information: Culture Method:

具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，时和我们联系武汉普诺赛生命科技有限公司全国免费服务电话：400-650-3656 邮箱：techsupport@https://www.wendangku.net/doc/e26643541.html, sales@https://www.wendangku.net/doc/e26643541.html, 注意事项： 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。 3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留6~8mL 维持细胞正常培养，待细胞汇合度90%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通交流告知细胞的

大鼠脑微血管内皮细胞的培养与鉴定

相类似。本研究提示SARS 病毒并非来源于人工驯养的野生动物,而是来源于野生动物,其中蛇、鹰、蛤蚧、鳖最为可能。广西原发病例接触病死猫后发病,因而老鼠仍很可能是SARS 病毒的最原始宿主,但其极低携带率和极低病毒量不但难于直接传给人类,而且也难检测到阳性老鼠。SARS 抗体阳性的鹰,蛇、龟、蛤蚧均为食肉动物,而且高空飞翔的鹰和冬眠的蛇均有利于病毒繁殖和携带的低氧分压状态。这些野生动物通过对鼠等动物的猎食而感染、富集。然后在其体内繁殖和携带。当被人类猎捕后,在冬末早春气温较暖湿度大的南方,长途运输严重缺氧使病毒发生变异,形成毒力和侵袭力强的SARS 病毒,在贩运人员和厨师近距离接触和捕杀过程中受伤感染而发病,然后通过家人护理或就医的医院医护人员诊疗中密切接触造成人间传播和暴发流行。2003年我国成功扑灭SARS 的疫情,其中严格禁止捕猎贩运和宰杀野生动物是最主要的措施之一,与本研究结果相吻合。因此,应禁止捕猎贩运和宰杀野生动物、每年冬春季节加强对发热肺炎病人监测,尤其是捕猎贩运和宰杀野生动物史或实验室病源研究史的发热肺炎病人监测排查、同时大搞爱国卫生运动、降低甚至消除鼠类等传播疾病的病原媒介是防范SARS 的发生和控制扑灭SARS 疫情的首要措施。至于疑为SARS 病毒最原始宿主鼠类和蝙蝠及其通过食物链进入二级宿主野生动物的过程和机理仍有待以进一步的研究。(参加本文工作的还有杨庆利、钟革、蓝光华、冯向阳、熊绮梦、陈岳波、韦东禄、刘志高、石友盟、李建民、蒙世安,在此一并致谢) 参　考　文　献 1　王汉章,王茂武,王建伟,等主编1传染性非典型肺炎防治培训教材(修订版).北京:中国协和医科大学出版社, 2003.3210. 2　廖祯华主编.广西壮族自治区地图集.北京.星球地图出版社.2003.42247. 广西医科大学学报　2006Feb ;23(1) 3广西区卫生厅资助课题(Z2002098)收稿日期:2005202201 大鼠脑微血管内皮细胞的培养与鉴定3 滕晓茗　周微雅　黄　燕　周祥祯 (广西壮族自治区人民医院　南宁　530021) 摘要　目的:探讨大鼠脑微血管内皮细胞体外培养方法,为血管内皮细胞的研究打下基础。方法:用胶原酶消化大鼠脑皮质制成细胞悬液再进行培养;用光镜、电镜及免疫组化检测进行鉴定。结果:分离的大鼠脑微血管内皮细胞体外培养一周左右可长成单层,光镜下为多角形或扁平梭形,呈“铺路石样”排列,透射电镜可见Weibel 2Palade 小体。第Ⅷ因子相关抗原免疫组化测定阳性。结论:该分离细胞培养法可培养出大鼠的脑微血管内皮细胞。关键词　脑微血管;内皮细胞;体外培养中国图书资料分类法分类号　R331;R322113 THE METH ODS OF CU LTURING AN D IDENTIFYING CEREBRAL MICR OVASCU LAR EN 2DOTHE L IAL CE LL IN RATS Teng Xiaoming ,Zhou Weiya ,Huang Yan ,et al.(The People ’s Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region ,Nanning 530021China )Abstract Objective :To explore t he met hods of cult uring rat cerebral microvascular endot helial cells (RC 2M ECs ),so as to build up t he basis for t he st udies of vascular endot helial cells.Methods :After t he RCM EC were digested wit h collagenase Πto make suspension which are cultivated ,t he RCM EC were identified by immunohistochemical met hods and observed wit h light micro scope and elect ron microscope.R esult :Isolated RCM ECs grow to mo nolayer after one week of external cultivation.They present polygonal and arrange like pavement stones under light micro scope.Weibel 2Palade (W 2P )body can be seen under transmission e 2lect ron micro scope.Correlation antigens of Ⅷfactor are positive by fluorescent stain.Conclusion :The met hods for t he cultivation and identification of RCM ECs could cultivate cerebral microvascular endot helial cells. K ey w ords cerebral microvascular ;endot helial cell ;cultivation in external ? 05?广西医科大学学报　2006Feb ;23(1)

人脐静脉内皮细胞的原代传代冻存复苏及鉴定

人脐静脉内皮细胞的原代培养和传代、冻存、复苏及鉴定 1人脐静脉内皮细胞的分离及培养 1.1 原代血管内皮细胞的获取与培养在细胞的获取方法上，有机械刮取、组织块移植和酶消化法3种。前两种易混杂其他血管壁细胞,近年已逐渐被酶消化法取代。其中胰蛋白酶灌注法及胶原酶消化法获取原代人脐静脉血管内皮细胞的方法。 1.1.1胰蛋白酶消化法在无菌条件下取新生儿脐带，剪去钳痕和凝血块阻塞部分，找到脐静脉。一端插上带有胶管的玻璃管后结扎固定，经胶管接注射器，用生理盐水灌洗。待脐静脉内的残血除净后，用37℃磷酸盐缓冲液(浓度0.01 mol/L，pH=7.6)冲洗2次，将另一端用铁夹夹闭，向脐静脉内灌注0.25%胰蛋白酶8~10 mL，夹闭胶管放入已灭菌的大平皿中。37℃孵育12 min，在此期间经常翻动脐带，使酶溶液在血管内流动，促使内皮细胞与酶均匀接触。取出脐带轻轻挤压管壁，将含有内皮细胞的胰蛋白酶注入50 mL锥形离心管中，加入小牛血清2 mL终止酶反应，再以30 mL磷酸盐缓冲液冲洗管腔，流出液一并入离心管，1000 r/min离心10 min，弃上清(小牛血清及磷酸盐缓冲液)，加入含有10%小牛血清的IMDM培养液，充分混合制成细胞悬液。取0.1mL细胞悬液在血细胞计数板计数。最后调细胞数，以1×105mL接种至24孔培养板中，每孔1mL。置于5% CO2，37℃静止培养24 h更换培养液，以除去未贴壁的细胞。以后每隔2天换液1次，维持细胞的营养和内环境稳定。 1.1.2胶原酶消化法在无菌条件下取新生儿脐带，剪去钳痕和凝血块阻塞部分，用磷酸盐缓冲液

初步清洗，找到脐静脉后，用50 mL注射器吸取磷酸盐缓冲液反复灌注冲洗，洗净残留的血液后用止血钳封住一端，用注射器从另一端灌入15mLⅡ型胶原酶。超净台内温度一般高于室温，此条件下胶原酶作用15min，期间可不时晃动。消化完毕打开止血钳，将消化液流入事先准备好的离心管中，用注射器吸取1倍于消化液体积的内皮细胞培养基灌洗消化后的血管，收集并与消化液合并，900 r/min离心10min，弃去上清，加入事先孵育至37℃的细胞培养液，吹打均匀。取明胶包被的六孔细胞培养板，吸去明胶，每孔加入内皮细胞悬液2.5mL，置于5% CO2饱和度的37℃孵箱中静置培养，24 h后更换培养液以除去未贴壁的细胞。然后每隔3d换液1次至生长汇合。 1.2 传代内皮细胞的培养原代内皮细胞融合后用培养液冲洗2次，然后用0.25%胰酶和0.25%乙二胺四乙酸以1：1的比例充分混匀后加入到内皮细胞中，每孔0.3 mL。边消化边在倒置显微镜下观察。细胞出现皱缩、边缘略变圆、彼此分离或呈大片状分离，此时即可吸弃消化液终止消化。加入含有10%小牛血清的培养液，用吸管吹打，制成细胞悬液，计数后按10个细胞/mL，并置于5% CO2饱和度的37℃孵箱中继续静置培养。每隔2~3d换液1次。 1.3 人脐静脉内皮细胞的冷冻和复苏传代细胞贴壁80%后0.25%胰酶消化，离心1200 r/min，5min，弃上清，加入冻存液(含10%甘油、90%细胞外基质)重悬后置4℃30 min，-20℃2 h，-80℃过夜后置入液氮中保存。复苏时在37.2℃水浴中迅速轻摇解冻，胎盘蓝染色，计算细胞存活率。 1.4 影响脐静脉内皮细胞体外生长的因素影响脐静脉内皮细胞体外生长的因素包括： 1培养液的pH值。最适pH值为7.0~7.2，脐静脉内皮细胞耐酶不耐碱，pH 值为7.4时贴壁困难，pH值7.6以上贴壁细胞脱落受损失去活力。

医学影像三基考试题3

医学影像三基考试题集(451-600) 451．确认小脑扁桃体延髓联合畸形，一般认为扁桃体低于枕大孔： ( ) A．10mm B．7.5mm C．6.0mm D．5.0mm E．4.0mm 452．脑血管畸形最常见的是： ( ) A．静脉畸形 B．烟雾病 C．动静脉畸形 D．海绵状血管瘤 E．毛细血管扩张症 453．颅咽管瘤和髓母细胞瘤都好发于： ( ) A．儿童 B．青壮年 C．中年 D．中老年 E．老年 454．脑转移瘤的常见CT表现不包括： ( ) A．多发 B．瘤周水肿显著 C．出血、坏死 D．不同形式的强化并存 E．钙化 455．CT脊髓造影示脊髓增粗，蛛网膜下隙变窄，定位诊断为： ( ) A．髓内 B．髓外硬膜外 C．髓外硬膜内 D．髓外硬膜内外 E．髓内和硬膜内 456．增强CT扫描，下列病变不增强的是： ( ) A．垂体腺瘤 B．动脉瘤 C．脑膜瘤 D．蛛网膜囊肿 E．髓质细胞瘤 457．由于血脑屏障破坏所致的肿瘤增强是： ( ) A．脑膜瘤 B．垂体瘤 C．听神经瘤 D．胶质瘤 E．三叉神经瘤 458．患者男，26岁。头颅外伤4h。CT轴位平扫示右颞骨骨折，头皮血肿，右颞部梭形不均匀高密度，中线结构左移。最可能的诊断为： ( ) A．右颞部急性硬膜外血肿 B．右颞部急性硬膜下血肿 C．右颞叶急性脑血肿 D．右颞叶脑挫裂伤伴硬膜下血肿 E．右颞部亚急性硬膜外血肿459．儿童最常见的脊髓肿瘤是： ( )

A．髓母细胞瘤 B．少突胶质细胞瘤 C．星形细胞瘤 D．生殖细胞瘤 E．畸胎瘤 460．脊髓损伤包括以下各项，错误的是： ( ) A．脊髓震荡 B．脊髓挫裂伤 C．脊髓压迫 D．脊髓横断 E．脊髓空洞 461．内耳道狭窄的诊断依据是内耳道小于： ( ) A．1mm B．3mm C．5mm D．7mm E．9mm 462．鼻咽癌常规X线检查位置为： ( ) A．鼻咽侧位 B．颅底位 C．颈侧位 D．汤氏位 E．鼻咽侧位+颏顶位 463．下列肾脏疾病中，常见不到钙化斑的是： ( ) A．肾结石 B．肾癌 C．肾囊肿 D．肾结核 E．肾错构瘤 464．色素沉着绒毛结节滑膜炎，最常见于： ( ) A．膝关节 B．踝关节 C．肩关节 D．肘关节 E．腕关节 465．痛风常引起的关节骨质破坏是： ( ) A．骶髂关节 B．第一跖趾关节 C．第五跖趾关节 D．远端指间关节 E．掌指关节 466．下列选项中，不是佝偻病活动期的X线表现的是： ( ) A．临时钙化带不规则 B．干骺端增宽，中心凹陷 C．骨骺出现延迟 D．下肢畸形 E．临时钙化带增厚 467．最常见的原发恶性骨肿瘤是： ( ) A．骨肉瘤 B．骨纤维肉瘤 C．软骨肉瘤 D．脊索瘤 E．骨髓瘤 468．关于骨巨细胞瘤，错误的是： ( ) A．常侵犯骨端 B．内可有骨嵴形成的分房 C．骨破坏呈偏侧性 D．肿瘤内常有钙化，有骨膜增生 E．肿瘤一般不穿破软骨