[VIP专享]OB细胞造骨治疗体系

OB细胞造骨治疗体系

【简介】股骨头坏死一直是一种让患者痛不欲生，医生束手无策的疾病，它是骨科医学界的三大难题之一，有“不死的病症”之称，致残率高。目前的常见治疗方法主要有中医活血化瘀、减压介入和晚期的股骨头置换手术治疗。而在实际的临床治疗病例中，因为此病早期难发现，致使确诊时通常已经较为严重，90%以上的股骨头坏死的患者不得不采用手术治疗。而且治疗方法费用昂贵，效果难以保证、复发率高。北京华科股骨头医院股骨头坏死最新科研成果、重大突破性医学发明技术“OB细胞造骨治疗体系”在临床应用取

得了非常好的效果。该技术已于2011年通过美国FDA批准上市，北京华科股骨头医院为解决广大股骨头缺血坏死病人的痛苦，面向全国推广这一国际领先的微创手术技术，希望能为广大股骨头坏死患者提供一种更加安全有效的治疗选择。特别需要提示的是股骨头坏死患者朋友们一定要尽早就医治疗，切勿错失最佳治疗时机。

“OB细胞造骨治疗体系”特色在于集合了“防、治、养”三大阶段，以股骨头坏死

的根本原因“血运”与“细胞”为出发点，涵盖了现代中医学、免疫学、生物细胞学、血液流变学、无创介入技术、细胞植入技术、脉冲磁化技术、现代中草药破壁技术等，是目前我国最科学最系统的防治养股骨头坏死治疗体系。

北京华科股骨头医院特聘原解放军307医院著名股骨头坏死专家代文新教授，组成权威股骨头坏死专家科研组。进行了长达数年的研究，研创出恢复股骨头坏死的最新方法——OB细胞造骨治疗体系。通过临床37690例患者观察证实，科学、系统、简单、方便、直接、有效。成为国际股骨头坏死治疗的“金标准”。

【常见治疗方法】

中医治疗——中草药方剂、针灸、敷贴、推拿

介入治疗——股动脉穿刺、导管

手术治疗——包括髓芯减压术、髓芯减压加血管束植入术、钽棒植入、骨移植术、截骨术、髋关节融合术、人工关节置换术(只适合少部分老年人)等。

西医非手术治疗（物理治疗）——高压氧、冲击波、西药

【OB细胞造骨治疗体系】

【主】中医——OB五行磁药活骨疗法

【辅】微创——超微创骨神经松解术

【辅】物理——OB脉冲电磁介入术

【辅】物理——OB光离子靶向细胞修骨术

【治疗方案】

【方案一】 OB五行磁药活骨疗法+ OB超微创骨神经松解术

【方案二】 OB五行磁药活骨疗法+ OB脉冲电磁介入术

【方案三】 OB五行磁药活骨疗法+ OB光离子靶向细胞修骨术

【适用范围】

√激素性股骨头坏死

√酒精性股骨头坏死

√创伤性股骨头坏死

√老年股骨头坏死

√儿童股骨头坏死

√肝肾亏虚型股骨头坏死

√手术后骨坏死

√Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期股骨头坏死

√各型股骨头坏死疾病。

【治疗体系4大特有功能】

清除骨毒：骨毒是一些骨骼垃圾和毒素形成的一些坚硬物质，“OB细胞造骨治疗体系”

独特的造骨技术可直接作用于钙化坏死的软骨组织，清除、杀灭坚硬的骨毒物质；将其溶解成离子状态，通过血脉快速排除，防止病情的进一步恶化，使患者关节部位顺畅，疼痛感彻底消失。

营养骨骼：“OB细胞造骨治疗体系”中的药物利用率和吸收率均在90%以上，可直达病灶，修复受损骨骼毛细血管，修复受损血脉，快速镇痛，使骨骼供血充足；同时大量的营养成分快速激活缺血的股骨细胞，有效遏制股骨头坏死病的进一步发展。

改善供血：股骨头周围血运得以畅通后，骨质得到足够的营养激活关节软骨再生，骨代谢逐渐恢复正常，使关节肿胀、疼痛、跛行症状减轻并消失。患者自身的免疫功能得到恢复，病人灰暗的面色变得红润、睡眠充足、食欲增强、精力旺盛。

再生新骨：再生细胞可以快速穿透，直达骨骼内部，促进骨骼再次生长，极大的促进了活性细胞的分裂增加，使剩余骨组织加速生长，最后形成健康的骨骼组织，使久治不愈的患者达到彻底康复，治愈后不再复发！

OB五行磁药活骨疗法

【治疗原理及治疗过程】

全身内环境（脏腑）异常也是股骨头局部病变的重要发病基础，因为在股骨头坏死的四大病因中，有三个（激素使用，酗酒和减压病）属于全身性因素，提高免疫力和促进代谢等作用机制无疑会对股骨头局部病变的治疗有所帮助。研究证实，现代中医疗法可以显

著提高股骨头坏死疗效的持久性，完全符合现代医学研究的发病机制，特别适合于早期坏死。

“OB五行磁药活骨疗法”是一种作用直接、创伤最小、安全性最好、疗效最显著康复最为稳定的现代中医的治疗方法。可配合体系内任何一种治疗方法同时组合进行治疗。整体调整人体内环境，活血化瘀、去腐生新，有效调理机体大循环，加速细胞分化和骨骼的重建。真正做到把中医"治欲病"与"治已病"完整、有效的结合于一体进行临床运用。

OB现代中医磁药介入技术——运用穴位与经络原理，将独特的磁药通过特殊介质作用于坏死区域的对应穴位，被磁化的药物分子循环刺激经络与穴位，清除骨杂质，疏通血运，快速缓解疼痛症状。磁药使药物和生物磁有机结合，磁场与药力相互作用，疗效效得以充分发挥，增强机体免疫力。经过阶段治疗人体免疫细胞逐渐被激活，免疫细胞会自动清除骨毒，疏通经络，恢复血液正常循环，加快新骨生成，自然抵御股骨头坏死。有效治疗同时达到预防股骨头病变反复发作，患者全面彻底恢复健康。是极具中医特色的现代股骨头坏死治疗方法。

OB现代中医破壁中草药——根据中医辨证理论，采用独家中药科学配方，所用中药有效成分全部超微化提取，利用率和吸收率均在95%以上，能和人体体液无缝匹配融合，可迅速

由血液渗透至股骨头病灶部位，濡养受损组织及股骨神经，使骨细胞焕活再生，从根源上解决股骨头血运受阻，修复完善受损股骨头毛细血管网，充盈血供，增加股骨头组织濡养。按疗程服用可增强机体体质与抗病能力，补充肝肾精血不足，活血化瘀，祛腐生新，辅以中药外敷方法，整体调节全身内环境协调统一，免疫能力增强。全面防治股骨头坏死。

【治疗特色】

1、有效渗透，疗效显著

高活性中药可有效渗透于病灶，使局部血管扩张，促进血液循环，改善周围组织的营养，从而起到行气活血、消炎止痛的作用。

2、吸收迅速，安全高效

纯天然中草试剂是依据人体必需营养成分的构成及浓度进行配比，保证药物无障碍无减损吸收，是普通药物吸收速率的5-7倍。

3、全面调理，增强免疫

通过不同药物的性味作用，由经脉入脏腑、输布全身、直达病所，借以达到补虚泻实、协调阴阳等作用而达到脏腑调和、增强免疫的目的。

【适用人群】

适用于股骨头坏死I期—V期的患者。

【临床疗效】

“OB五行活骨疗法”治疗3-5天，疼痛明显减轻，7-15天精神状况良好，失眠、便秘、流虚汗等现象消失，活动时间增多，活动量逐步增大，黄色分泌物消失。用药两个疗程疼痛完全消失，骨小梁体积，宽度，密度正常，新骨自然形成精神充沛，活动自如，生活质量提高。

OB超微创骨神经松解术

【治疗原理及治疗过程】

常规的手术治疗包括髓芯减压术、血管束植入术、骨移植术、截骨术、髋关节融合术、人

工关节置换术(只适合少部分老年人)等，特点是费用昂贵，效果难以保证、复发率高。

“OB超微创骨神经松解术”是唯一可替代手术治疗股骨头坏死的微创技术。是一种新型超

微创介入技术。“超微创骨神经松解术”是利用空间医学与镭射反重力理论指导下，通过

只有0.02mm“超微纳米针刀”精确介入患者疼痛关节处穴位，刺入产生机械的刺激，松解

软组织的粘连，迅速驱散股骨头部位的疼痛感，减轻腔内压力，打通股骨头血管网，打通

周围血管堵塞，促进病灶血脉循环，从而起到减压止痛、消除炎症、恢复代谢的功效。最

后根据中医辨证理论从补气、补血、补肾、活络通脉着手，整体协调脏腑功能，双向调节

免疫，从根源上解决股骨头血运受阻，修复完善受损股骨头毛细血管网，充盈血供，增加

组织神经濡养，有效治疗同时达到预防股骨头病变反复发作，患者全面恢复健康。同时配

合OB超导光镜的探头直达病灶，治疗全程可视。

【治疗特色】

一、OB镜下可视系统，全景定位，精准定位病灶。

二、创伤小，不开刀，不置换股骨头。

三、“超微纳米针刀”直达病灶，直接有效减轻疼痛。

四、康复率高，无任何副作用。

五、术后科学康复，不易复发。

六、术后恢复快，疗效显著。

【适用人群】

“OB超微创骨神经松解术”适用于股骨头坏死Ⅰ期—Ⅳ期病人，能快速解决患者的疼痛，重建骨质结构，恢复和改善股骨病变区的血供，治疗效果显著、持久。

【临床疗效】

　“OB超微创骨神经松解术”自投入临床诊疗以来，为股骨头患者彻底摆脱了股骨头坏死

困扰，使他们恢复了正常生活和工作。配合“OB五行磁药活骨疗法”临床有效率高达97.9%，其应用3-8个月，疗效确切，无疼痛症状、关节功能正常或改善、抗压能力恢复正常，死

骨消失、新骨生成;中晚期患者治疗后无塌陷、跛行、残疾后遗症。

OB脉冲电磁介入术

【治疗原理及治疗过程】

生物电在骨代谢和骨重建中具有十分重要的意义，20多年来，许多科学家证实了电刺激能促进骨组织生长，脉冲电磁场疗法能改善骨质量和骨的力学性能，而且疗效肯定。国际领先的“OB脉冲电磁介入术”作为体系中不和或缺的主辅助生物电治疗手段，被广泛应用于治疗股骨头坏死，促进了骨坏死区骨修复，阻止和延缓股骨头坏死进展。

“OB脉冲电磁介入术”通过OB脉冲电磁场，脉冲电磁介入治疗是在X线电视监视下常规消毒，定位股骨头血供情况及病变部位，在脉冲电磁仪器的负电磁场对准侧股动脉股动脉循环脉冲治疗，X线监视下可见成骨细胞(oB)暴露于3Hz电磁场中，调节胞内钙离子浓度而改变细胞行为，从而提高股骨质量。脉冲电磁场的短期作用可以使软骨细胞免于遭受炎症的分解代谢，可有效对抗炎。症长期治疗可以促进骨再生继而防止小梁骨和软骨下骨塌陷。

配合超微介入技术分别在旋股外侧动脉和旋股内侧动脉处灌注扩血管药及溶栓药物，首先使供应股骨头血管扩张，继而溶解微栓子，使软骨下区血管数目增多、口径增粗，改善股骨头的供血情况，有控制局部炎症和促进组织修复的作用。有利于坏死骨质吸收，新生骨形成，患者在短时间就能收到明显的效果。

同时结合中医辨证施治，利用中药生物工程原理，在对股骨头坏死细胞进行精细修复的同时，立足于整体调整，真正做到标本兼治。

【治疗特色】

1、消炎祛痛，安全快速

2、改善供血，形成新骨

3、无副作用，不伤肝肾

4、标本兼治，中西并重

【适用人群】

适用于股骨头坏坏死Ⅰ期—III期的患者，疼痛减轻或消失。可双向调节股骨头功能，使受损的组织恢复运转。

【临床疗效】

经过临床病例验证，总有效率为98.6%，治愈率为92.7%。“脉冲电磁介入术”后随访1-6个月，Ⅰ、Ⅱ期患者关节疼痛逐渐消失，活动功能障碍明显好转，行走步态正常，活动范围正常，Ⅲ期患者关节疼痛有很大程度缓解，活动功能改善。CR检查以及CT检查，见骨小梁生成良好，坏死区明显减少。

OB光离子靶向细胞修骨术

【治疗原理及治疗过程】

OB光离子靶向细胞修骨术——国际关节软骨组织修复研究重大成果：通过快速清除坏死、病变的关节软骨，促进、滋养新软骨生成，重建股骨关节腔正常生理功能。

“OB光离子骨细胞理疗系统”是目前世界上先进的激光离子修复技术，可对髋关节、股骨头关节腔系统化理疗，该系统通过激光波导核心控制芯片，利用恒定波段的超导光波准确将能量聚集于外部股骨神经。这一智能技术能稳定保持激光波长在650纳米这一黄金光波长度上，不对邻近组织器官造成损害。促使压力和能量集中在坏死的组织，使缺血缺氧组织恢复血液供应，促进组织修复。光束中的光离子可穿透血液和肌肉组织靶向激活坏死细胞，产生活性自由基，大量活性自由基聚集于骨软组织，快速清除坏死、病变的关节软骨，并自动修复促进、滋养新软骨生成，重建股骨关节腔正常生理功能。一段时间后可明显的改善髋关节疼痛和功能。“OB光离子”同时可以迅速杀灭附着在坏死区域的病毒，病毒清理后，股骨细胞没有完全坏掉的部分，会自主补充上来，代替已损坏的细胞，明显促进了血管生成和骨重建。

【治疗特色】

1、直达病灶，靶向修复

2、无创无痛，绿色治疗

3、杜绝复发，无副作用

【适用人群】

适用于股骨头坏死I期—II期的患者，减少患髋负重和骨坏死修复期避免股骨头塌陷。能够减轻临床症状，改善髋关节的活动功能和减少手术治疗的可能。可能有防止股骨头塌陷和避免髋关节置换的作用。

【临床疗效】

“OB光离子靶向细胞修骨术”对于未参与人工股骨头置换手术的患者来说，是一种理想的治疗方式，疗效更稳定。一般当天即可见到效果，3天疼痛明显减轻。术后大约两周内，患者的股骨头内就有新血管生长，术后三周股骨头内的新骨形成，且未出现免疫排斥的并发症。

OB冲击波电磁技术

【治疗原理及治疗过程】

OB冲击波电磁技术在治股骨头坏死方面有独到之处：高能冲击波可激活成骨细胞、从而

促进新骨形成。

冲击波治疗电压在5.5~7.5kV，平均6.4 kV，冲击频率75次/分，找出压痛点并做好标记，将其置于仪器能量聚焦处，放电冲击次数为400~100次，平均750次，治疗时间7~15分钟，平均10分钟。由于冲击波的高速传播及能量的聚集，会使体内患部骨骼受到一定强度的应力挤压扩张和冲击振动，在骨组织增加应力可以得到极化电位，瞬变的应力压电效应改变了骨折处的电位，活化了细胞，促进骨痂生成。

在冲击波传送路径中，介质含有微小气泡时，气体在冲击波的应力作用下，会以极高速度膨化。在股骨头治疗中，病灶范围内大量气泡的空化效应，是打通生理性关闭的微血管，有利于松解骨关节软组织粘连。

【治疗特色】

1、操作简单、治疗时间短。

2、抑制疼痛、无副作用。

【适用人群】

适用于股骨头坏坏死Ⅰ期—II期的患者，疼痛减轻或消失。可激活成骨细胞、从而促进新骨形成。

【临床疗效】

经过临床病例验证，总有效率为90%。随访1-3个月，Ⅰ、Ⅱ期患者关节疼痛消失，

活动功能明显恢复， CR检查以及CT检查，见骨小梁生成良好，坏死区明显减少。

OB下肢物理康复疗法

【治疗原理】

OB下肢物理康复疗法供股骨头下肢关节功能患者作康复辅助治疗用。此仪器能促进创伤后关节液的分泌和吸收的循环，促进软骨的再生，防止粘连，减少痛苦的作用。此康复一起采用集成电路元器件，并设大容量CPU中央处理器，软件编程，具有超力矩过载保护功能。此仪器有两种运动模式，膝关节运动模式和脚踝关节运动模式。通过调节按钮转换。膝关节状态下，拉出膝、踝关节功能转换按钮（左、右各一颗）旋转90°使之伸出固定，即可转换到脚踝关节模式。如须将踝关节运动变成膝关节运动，反方向旋转90度膝踝关节功能转换按钮，轻抬大小腿杆件，直至功能转换按钮自动缩入即可。

【适用人群】

适用于股骨头坏死下肢关节功能受损患者。

【临床疗效】

OB下肢物理康复疗法使用当天，下肢活动能力增强，4天后活动功能障碍明显好转，行走步态正常，活动范围正常，生活质量提高。

细胞房注意事项和管理范文

细胞房注意事项和 管理

细胞房注意事项和管理 一、常规操作 1. 穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套，可脱在门外的衣帽架上。 2. 穿着专用拖鞋。先在入室间换下自己的鞋子，穿着绿色拖鞋进入缓冲间；再在缓冲间换红色拖鞋。尽量避免在缓冲间走动、停留。 3. 细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。 4．离开细胞房前，要保证不使用的仪器及时关闭并拔下插头（离心机、水浴锅、日光灯），超净台开启紫外灯照射2h后关闭。 二、值日生工作职责 1. 每周值日生时间从周一开始，至周日结束。 2. 值日周开始时需做的事情：配制消毒用的75%的酒精，制作酒精棉球，给细胞房内添加足够的95%工业乙醇供酒精灯使用。 * 75%的酒精可用750ml95%的酒精加去离子水至950ml配制而成。 3. 值日周内每天需做的事情：开大紫外灯消毒细胞房15-30min后才能投入一天的使用，晚上开启紫外灯灭菌，第二天及时关闭；检查灭菌物品的储备情况，以便及时补充；及时安排人

员清洗回收培养器皿；检查培养液母液、血清、酒精等公用试剂的储备情况；至少每天倾倒细胞房垃圾、换垃圾袋；检查培养箱内水量是否足够。 4. 值日周结束前需完成的事情：星期五全方位打扫细胞房。包括拖地，擦桌子、柜子、清洁和整理抽屉，擦超净台、冰箱及桌上的仪器，给水浴锅加水或换水，洗细胞房专用的实验服和拖鞋，紫外消毒细胞房。更换培养箱内无菌水、检查硫酸铜溶液是否需要更换（一个月更换一次）！ 5. 每2周清洁一次培养箱：先将培养箱中的物品取出暂存于超净台内，对于比较敏感的细胞能够暂存于其它细胞房的培养箱；将培养箱内的不锈钢板取出，包括4块横板和左右2块立着的架子，用酒精棉球清洁钢板和培养箱内壁；打开培养箱清洁内壁时动作要迅速，避免长时间敞开门使得大量不洁净空气进入，缩短过滤器的寿命；用紫外灯照射培养箱内部15min，手提紫外灯放入培养箱前要用酒精棉擦拭干净。 .6.9培养箱使用注意事项 1. 从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。 * 培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 2. 培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精

细胞房注意事项和管理

细胞房注意事项与管理 一、常规操作 1、穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套,可脱在门外的衣帽架上。 2、穿着专用拖鞋。先在入室间换下自己的鞋子,穿着绿色拖鞋进入缓冲间;再在缓冲间换红色拖鞋。尽量避免在缓冲间走动、停留。 ３、细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。 4. 离开细胞房前,要保证不使用的仪器及时关闭并拔下插头(离心机、水浴锅、日光灯),超净台开启紫外灯照射2h后关闭。 二、值日生工作职责 1、每周值日生时间从周一开始,至周日结束。 2、值日周开始时需做的事情:配制消毒用的７5%的酒精,制作酒精棉球,给细胞房内添加足够的9５％工业乙醇供酒精灯使用。 ＊ 75％的酒精可用750ｍl９5%的酒精加去离子水至950ｍl配制而成。 3、值日周内每天需做的事情:开大紫外灯消毒细胞房15-3０miｎ后才能投入一天的使用,晚上开启紫外灯灭菌,第二天及时关闭;检查灭菌物品的储备情况,以便及时补充;及时安排人员清洗回收培养器皿;检查培养液母液、血清、酒精等公用试剂的储备情况;至少每天倾倒细胞房垃圾、换垃圾袋;检查培养箱内水量就是否足够。 4. 值日周结束前需完成的事情:星期五全方位打扫细胞房。包括拖地,擦桌子、柜子、清洁与整理抽屉,擦超净台、冰箱及桌上的仪器,给水浴锅加水或换水,洗细胞房专用的实验服与拖鞋,紫外消毒细胞房。更换培养箱内无菌水、检查硫酸铜溶液就是否需要更换(一个月更换一次)！ 5. 每２周清洁一次培养箱:先将培养箱中的物品取出暂存于超净台内,对于比较敏感的细胞可以暂存于其她细胞房的培养箱;将培养箱内的不锈钢板取出,包括4块横板与左右2块立着的架子,用酒精棉球清洁钢板与培养箱内壁;打开培养箱清洁内壁时动作要迅速,避免长时间敞开门使得大量不洁净空气进入,缩短过滤器的寿命;用紫外灯照射培养箱内部15min,手提紫外灯放入培养箱前要用酒精棉擦拭干净。 ２０１4、6、９

细胞房管理规章制度

细胞房管理规章制度 细胞房是进行各种细胞培养的净化级实验室，所有进入实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度。 第一章 总则 第一条 细胞房主要由团队内相关科研人员使用，原则上不对外开放，其他人员如确实需使用细胞房必须预先征得实验室负责人和细胞房负责人同意。 第二条 新养细胞的同学，需先跟随由负责人指定的人员学习，同时学习并熟记细胞房管理条例，最后通过细胞操作考核后，方可进入细胞房进行实验。严禁未经许可擅自进入细胞房或使用相关设备。 第三条 细胞房正常使用过程中，进出实验室的器械和样品需通过传递窗，严禁随身带入。实验用品应尽量一次带入，严禁将和实验无关的物品带入实验室，在细胞房内不得进行微生物等其它易污染物的培养，禁止从事任何高危生化实验。 第二章 条例 第一条 常规操作 穿着专用隔离服，实验人员必须在细胞房缓冲间内更换细胞房专用隔离服并戴上口罩，严禁不穿隔离服或直接穿着普通实验室实验服进入细胞房。 穿着专用拖鞋。在准备间换下自己的鞋子，尽量避免在缓冲间走动、停留。 细胞房最多可4个人同时使用。 实验过程中严禁喧哗，闲聊，反复进出培养室。 离开细胞房时应在缓冲室填写使用登记。 第二条 培养箱使用规则 1.从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。 注：培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 2.从培养箱拿取细胞时轻拿轻放，动作迅速，随手关紧培养箱门。未经允许，禁止翻看、移动他人细胞或样品，如有特殊需要的，请联系实验室负责人协调。 更换隔离服、戴口罩 更换拖鞋 进入细胞房

3.培养瓶/皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。 4.普通培养中的细胞，若非实验特殊需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。 注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。 第三条 显微镜使用规则 1.倒置相差显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。 2.短时间内需再次使用显微镜时，为避免频繁开关显微镜电源，可不必关闭显微镜电源，但须将亮度旋钮调到最低；较长时间不需使用或离开细胞房时，须按规定关闭显微镜电源。 第四条 超净台相关操作规则 1.超净台使用遵循预约原则。在细胞房入口处预约，细胞房内填写使用登记。 a ：无预约者若有必要在他人预约时段内使用，需先征得预约者的同意，否则应无条件让出工作台，以免耽误他人实验。 b ：预约内容请包括：预约时间、姓名、使用日期、使用时间段、实验内容 。 2.使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒，超净台内严禁堆放过多物品影响风路平衡，不同超净台内物品严禁频繁交换使用。 3.点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。 注：消毒用75%的酒精，酒精灯用95%以上的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。 4.超净台中应摆放废液缸，用于暂时存放废弃物，实验结束后将废液缸带走，废液垃圾倒入水池并同时用水冲释，固体垃圾倒入垃圾桶中 注：液缸应及时处理，严禁长时间放置，以免留有大量培养液滋生细菌。 5. 细胞实验后任何含有细胞培养污物的培养瓶，离心管，移液管等必须及时带出细胞房。 第五条 器具的清洗规则 预约超净台 检查酒精灯 酒精消毒（超净台+实验物品） 使用超净台 酒精消毒超净台 带走废品

细胞房注意事项和管理

细胞房注意事项和管理 一、常规操作 1. 穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套，可脱在门外的衣帽架上。 2. 穿着专用拖鞋。先在入室间换下自己的鞋子，穿着绿色拖鞋进入缓冲间；再在缓冲间换红色拖鞋。尽量避免在缓冲间走动、停留。 3. 细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。 4．离开细胞房前，要保证不使用的仪器及时关闭并拔下插头（离心机、水浴锅、日光灯），超净台开启紫外灯照射2h后关闭。 二、值日生工作职责 1. 每周值日生时间从周一开始，至周日结束。 2. 值日周开始时需做的事情：配制消毒用的75%的酒精，制作酒精棉球，给细胞房内添加足够的95%工业乙醇供酒精灯使用。 * 75%的酒精可用750ml95%的酒精加去离子水至950ml配制而成。 3. 值日周内每天需做的事情：开大紫外灯消毒细胞房15-30min后才能投入一天的使用，晚上开启紫外灯灭菌，第二天及时关闭；检查灭菌物品的储备情况，以便及时补充；及时安排人员清洗回收培养器皿；检查培养液母液、血清、酒精等公用试剂的储备情况；至少每天倾倒细胞房垃圾、换垃圾袋；检查培养箱内水量是否足够。 4. 值日周结束前需完成的事情：星期五全方位打扫细胞房。包括拖地，擦桌子、柜子、清洁和整理抽屉，擦超净台、冰箱及桌上的仪器，给水浴锅加水或换水，洗细胞房专用的实验服和拖鞋，紫外消毒细胞房。更换培养箱内无菌水、检查硫酸铜溶液是否需要更换（一个月更换一次）！

5. 每2周清洁一次培养箱：先将培养箱中的物品取出暂存于超净台内，对于比较敏感的细胞可以暂存于其他细胞房的培养箱；将培养箱内的不锈钢板取出，包括4块横板和左右2块立着的架子，用酒精棉球清洁钢板和培养箱内壁；打开培养箱清洁内壁时动作要迅速，避免长时间敞开门使得大量不洁净空气进入，缩短过滤器的寿命；用紫外灯照射培养箱内部15min，手提紫外灯放入培养箱前要用酒精棉擦拭干净。 2014.6.9培养箱使用注意事项 1. 从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。 * 培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 2. 培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。 3. 2-3人共用一层培养箱，按预定位置摆放培养器皿，方便查找，以免长时间敞开培养箱。普通培养中的细胞，若非实验需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。 * 频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。 超净台操作规则 1. 超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌，使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台前均应用酒精喷拭表面消毒。

细胞复苏步骤和注意事项

细胞复苏步骤注意事项： 【材料】 1. 常规细胞培养仪器设备恒温水浴振荡器。 2. 培养液（DMEM）胎牛血清（CBS）二甲基亚砜（DMSO） 【操作程序】 1. 细胞实验室进行常规消毒，紫外照射40min以上。 2. 培养液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶（Trypsin）恒温水浴箱370C预热20min，备用。 3. 二甲基亚砜（DMSO)在40C冰箱中冷藏30min，备用。 4. 从液氮保存罐中取出冻存管，立即放入400C水浴中，快速摇晃，直至冻存液完全融化。 5. 将细胞悬液移入15ml离心管，缓慢加入4ml培养液，离心（1000r/min，5min）。 6. 用培养液悬液混悬沉淀细胞，调整细胞浓度，方培养箱中培养。 7. 记录复苏日期。 【注意事项】 1. 取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。 2. 冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜（DMSO）对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在1-2min 内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜（DMSO）最好选择进口产品。 3. 离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。 4. 离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。 5. 细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml－15m培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。 6. 复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。 7. 加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是1％。所以如果你的冻存液的浓度是10％DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 一、原理 在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂，可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下，能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在－130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。

细胞房工作守则及注意事项

细胞房工作守则及注意事项 细胞房工作守则及注意事项 一、?常规操作 ??1.?穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套，可脱在门外的衣帽架上。 2.?穿着专用拖鞋。在缓冲间换下自己的鞋子，尽量避免在缓冲间走动、停留。 3.?细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。 二、?培养箱使用规则 三、??1.?从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。 四、注：?培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 五、 2.?培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。 六、 3.?2-3人共用一层培养箱，按预定位置摆放培养器皿，方便查找，以免长时间敞开培养箱。 七、 4.?普通培养中的细胞，若非实验需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。 八、注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。 九、 十、?显微镜使用规则 十一、??1.?显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。 十二、 2.?离开细胞房时或较长时间不需使用时，及时关上电源，延长灯泡寿命。尽量避免频繁开关显微镜电源。 十三、 十四、?超净台相关操作规则

十五、??1.?超净台使用遵循预约原则。无预约者若有必要在他人预约时段内使用，需先征得预约者的同意，否则应无条件让出工作台，以免耽误他人实验。 十六、??2.?超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌，使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒。 十七、??3.?点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。 十八、注：?消毒用75%的酒精，酒精灯用95%的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。 十九、注：?酒精和酒精棉球由值日生负责补给，发现细胞房内存放量不足时请及时通知值日生。 二十、??4.?超净台中应摆放废液杯和废品杯各一只，用于暂时存放废弃物，实验结束后将杯内垃圾倒入水池或垃圾桶中，并冲洗晾干备用。 二十一、注：?将废弃的枪头、管子内的残留液体打（倒）入废液杯后再弃入废品杯中，以免垃圾桶内留有大量培养液滋生细菌。 二十二、??5.?可回收的移液管、离心管、培养瓶皿等，放入装有清水的塑料桶中浸泡，桶内需有足量的清水以没过浸泡物品。 二十三、注：?可回收器皿必要时先初步涮洗后再放入桶内，尤其是培养瓶或血清管中有大量高营养的液体残留时，容易使桶内的清水长菌。 二十四、保证浸泡的瓶、管内完全被清水充满，而不是在装有大量空气的情况下被压倒桶底。 二十五、塑料桶内物品由值日生每天负责送去清洗，使用者实验结束后若发现桶已装满，请通知值日生或顺手将塑料桶带出细胞房。 二十六、??6.?装培养液的瓶子、配培养液的器皿勿放入塑料桶内浸泡！应由使用者本人及时清洗晾干备用。 二十七、注：?因桶内物品通常要浸泡几小时以上才送去清洗，此时细菌可能已在桶中生长并释放内毒素。细菌内毒素很难通过常规湿热灭菌步骤去除干净，即使干烤也不能保证其完全失活。内毒素对细胞生长及多种实验均有较大影响。 二十八、?洗涤程序：洗洁精洗净，清水冲十次以上去除洗涤剂残留，然后冲去离子水3次，再用双蒸水1次，倒置于器皿柜中晾干。关上器皿柜的门防尘。 二十九、 三十、?培养液、试剂等相关操作规则 三十一、??1.?从冰箱取放物品动作要迅速，关门时要检查门是否关好。按类别存放试剂。

细胞房使用细则

细胞房使用细则 细胞间使用： 1.进细胞间作业要穿实验服，戴口罩，换鞋，随手关闭玻璃门；（口罩使用完毕后可自行 留着，以备下次使用，佩戴时间不超过10小时）。 2.在细胞间作业请保持安静，切勿高谈阔论； 3.严禁对着培养箱讲话；培养箱要轻开轻关，切勿产生剧烈震动； 4.显微镜使用完毕要立即关掉； 5.细胞实验所用实验服每两个月清洗一次；拖鞋每两个月更换清洗一次； 6.细胞间超净台负责人一个月负责清理一次；培养箱负责人每两个月负责清理一次，随时 查看水盘以确保水位不低于2/3； 7.里屋超净台切勿长时间照紫外（紫外时间不超过40分钟）如若超过将会被关闭；做完 实验照紫外半小时后主动关闭超净台以节约用电。此超净台在使用过程中确保不报警的情况下再进行操作，严禁在报警情况下作业； 8.细胞间的垃圾筒满后，实验人员请自觉清理； 9.血清，胰酶以及双抗的融化在4度冰箱内完成。 细胞房使用： 10.细胞房每两个星期大扫除一次，由做细胞实验人员完成，包括：扫地，拖地（含桌椅等 摆放物品下面），擦桌子（细胞房所有桌子）以及所放物品的摆放，最后开紫外灭菌1 小时； 11.细胞房值日生星期一早上给液氮罐中加液氮，清洗恒温水浴锅并换水，值日期间要保证 恒温水浴锅无异味，细胞房整洁；注意：配制PBS缓冲液时要换新瓶子，切勿重复利用！移液管清洗：84液及铬酸浸泡时间均不低于6小时，冲洗时间不低于4小时，如若发现有破碎及尖嘴部位极度发白的移液管请及时清理！ 12.细胞房冰箱使用完毕后要确保门是关闭状态；严禁放置除细胞实验以外的所有物品，一 经发现一律清除，后果自负！处理完的实验物品切勿长时间放置于冰箱，如若两天后仍发现没人处理将会被清除，后果自负！ 13.非做细胞实验时间，闲杂人等切勿在细胞房内逗留。 14.非细胞实验请勿使用细胞房离心机以及移液器。

细胞房房管理规章制度及细则

细胞房房管理规章制度及细则 第一项、所有使用人员要严格按照无菌标准进行操作。 第一条使用人员要严格执行无菌操作，保持实验室清洁。 ①每日第一个开门者，必须将开门时间记录在《细胞房预约登记表》上。 ②使用细胞房者，统一从604门口进入。一更处换鞋，脱外套。二更处穿隔离 衣、戴口罩，手套和帽子（头发必须全部进入帽子）。 ③进入风淋间，必须吹满10s，不允许急停。不可携带物品进入风淋间。 ④所有进出细胞房的物品，必须由传递口出入。洁净物品和污物各有一个传递 口，不允许污物放置于洁净物传递口内。洁净物、废液桶进入传递口必须先紫外照射10min。 ⑤废弃物不可留滞于细胞房。 ⑥超净台使用结束后，打开紫外灯15分钟，然后关闭。 ⑦气瓶间房门如无特殊情况，完全关闭，不允许随意打开。 ⑧如需观察气瓶供气和更换气瓶时，可打开602门，平时不允许随意打开。 ⑨每周日晚8点半之后停止使用细胞房，安排值日生打扫卫生。如有特殊情况 需要使用细胞房者，请提前向管理老师报备，并通知值日生。 第二条未培养过细胞的人员，不可独立使用细胞房。 ①必须在管理老师或者高年级研究生指导下进行操作。 ②考试合格后，方能独立使用细胞房。考试不合格者，不得独立使用细胞房。 ③如发现擅自使用细胞房，将追究其责任。 第三条未经管理老师许可，不得私自带外来人员使用细胞房和细胞房内仪器设备。不得在细胞房做任何与细胞培养无关试验。 第二项、细胞房使用实行预约制，使用人员必须提前预约。 使用人员须在《细胞房预约登记表》上预约使用房间、使用人员姓名、使用时间等信息。严格按照预约登记使用细胞房。 第一条如预约取消，必须及时将预约信息删除。 第二条未登记预约使用细胞房；或在预约时间内，无人使用细胞房等行为将视为违规。

《骨巨细胞瘤临床循证诊疗指南》要点

《骨巨细胞瘤临床循证诊疗指南》要点 1 方法学 证据推荐等级方法采用GRADE方法，内容见表1。 2 骨巨细胞瘤概述 骨巨细胞瘤（GCT）是一种原发交界性骨肿瘤，1818年由Copper首次描述，占所有原发性骨肿瘤的3%～5%，良性骨肿瘤的15%，在东亚人群中更为常见。骨巨细胞瘤好发于20～40岁。在四肢长骨中，股骨远端、胫骨近端、桡骨远端和肱骨近端最为多见，骨盆和脊柱等中轴骨也常受累。常规刮除术后有较高的局部复发率，肺转移率1%～9%。极少数病例可转化为高度恶性骨肉瘤，预后差。 3 诊疗概述 3.1 诊断 初始检查应包括病史、体格检查、原发病灶充分的影像学检查（X线片、CT和MRI）。CT有助于确定骨皮质破坏范围，而评估肿瘤侵犯周围软组织及神经血管时首选MRI。CT和MR增强扫描还可提供肿瘤的血供信息。

骨扫描检查可用于除外多中心骨巨细胞瘤。PET或PET/CT是一种可选择的影像学技术，已应用于治疗前分期、监测肿瘤进展速度和评估辅助治疗疗效。胸部影像学对确定有无转移性病灶很重要。血清钙、磷水平和甲状旁腺激素水平测定可用于甲状旁腺功能亢进性棕色瘤的鉴别诊断。（1B 级） 活检是明确诊断的最重要手段，尤其在与甲状旁腺功能亢进性棕色瘤进行鉴别时。如活检结果提示恶变，应按照骨肉瘤的治疗方案处理。切开活检和穿刺活检（粗针或针吸）是骨与软组织肿瘤诊断的两种方法。切开活检是最准确的方法，它可以提供较多的标本来进行免疫组织化学或细胞遗传学检查。穿刺活检可以在局部麻醉下进行，需要或不需要镇静。当获得标本充分的时候，穿刺活检可作为切开活检的另一种选择，其诊断准确率为88%～96%。 3.2 治疗 无远处转移患者：若原发灶可以手术切除，建议手术切除。对于原发灶虽可手术切除但会导致严重并发症和功能损失、或中轴骨病变无法切除的患者，建议使用连续选择性动脉栓塞联合人源RANK配体单克隆抗体（Denosumab），同时还可合并使用干扰素或聚乙二醇-干扰素以及放疗。 就诊时已发生转移的患者：如原发灶可切除则按上述方案治疗；如果

细胞房注意事项

细胞房注意事项 1.进出细胞房必须换拖鞋，勿将细胞房内拖鞋穿出细胞房，房外拖 鞋也不可进入房内。进入细胞房换上细胞房专用白大褂和专用实验服，勿将一楼动物实验的白大褂带进细胞房。 2.实验结束后及时清理台面，勿将垃圾留在实验台面。整齐摆放各 类物品。实验室放置物品请写上姓名和标识。实验后及时清洗实验用品，勿将要洗的用品留在洗涤盆过夜。 3.实验后检查显微镜/酶标仪/培养箱/离心机/超净台（显微镜在关闭 电源前务必将光源调至最暗）。离心时保存两端平衡。 4.实验中用到毒害物质或者有感染物质的，请先进行汇报，得到同 意后才可进行实验。 5.注射器针头、玻璃等利器扔进利器盒，勿直接丢垃圾桶。丢弃到 实验室规定的盒子内。 6.培养瓶等放进培养箱前用，可用75%酒精消毒培养瓶表面，水平 放置。若有培养液渗出培养箱，一定要立即用75%酒精擦拭。7.培养箱内发现细菌等污染，立即将污染的培养瓶丢弃，并及时报 告实验室工作人员对污染区域进行消毒。 8.在使用酒精灯过程中，手上酒精挥发干后方可靠近酒精灯操作， 切勿将表面有酒精的物品靠近火苗。 9.值日人员检查：显微镜/酶标仪/培养箱/离心机/超净台。 10.写好预约本和登记本的各项登记。

细胞房工作人员职责： 定期检测下列项目： 1.CO2 钢瓶之CO2 压力 2.CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。 3.无菌操作台内之气流压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。 4.水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水。

骨巨细胞瘤

骨巨细胞瘤临床路径 （2017年版） 一、骨巨细胞瘤临床路径标准住院流程 （一）适用对象。 第一诊断为股骨远端骨巨细胞瘤（ICD-10D48.101） 行股骨远端肿瘤刮除、瘤壳灭活、植骨、内固定术（ICD-9-） （二）诊断依据。 1.病史：患病部位疼痛、肿胀等。 2.体格检查：病变部位可触及包块、压痛，患肢功能受限。 3.辅助检查：患肢平片、CT、MRI，全身骨扫描等。 4.病灶活检：提示骨巨细胞瘤诊断。 （三）进入路径标准。 1.第一诊断必须符合骨巨细胞瘤（ICD-10D48.101）。 2.全身情况允许手术。 3.除外侵袭性或严重病理性骨折无法保留完整股骨髁关节面的病例；除外其他引起巨细胞反应的病变。 4.首选肿瘤刮除、植骨、内固定术。 （四）标准住院日为≤10天。 （五）住院期间的检查项目。 1.必需的检查项目

（1）血常规、血型、尿常规、便常规； （2）电解质检查、肝功能测定、肾功能测定、凝血功能检查、感染性疾病筛查（乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病）、血沉； （3）胸部X线平片、胸部CT、心电图； （4）骨科X线检查、患肢CT、患肢MRI、全身骨显像、患肢动静脉血管彩超。 2.根据患者病情进行的检查项目 超声心动、肺功能、血气分析、肌电图等。 （六）治疗方案的选择 根据患者影像学显示病变范围及活检病理提示，选用刮除、植骨、内固定术。 前提：患者股骨髁关节面主要部分完整，未受肿瘤侵犯，尚有一定强度的骨质可以满足内固定物固定。 （七）预防性抗菌药物选择与使用时机。 1.建议使用第一、二代头孢菌素； 2.术前30分钟预防性用抗菌药物；手术超过3小时加用1次抗菌药物。 （八）手术日。 为入院后第1-3天。 1.麻醉方式选择腰-硬膜外联合麻醉或全身麻醉。 2.手术方式：股骨远端病灶刮除、瘤壳灭活、取髂

细胞房工作守则及注意事项

细胞房工作守则及注意事项 一、常规操作 1. 穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套，可脱在门外的衣帽架上。 2. 穿着专用拖鞋。在缓冲间换下自己的鞋子，尽量避免在缓冲间走动、停留。 3. 细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。 二、培养箱使用规则 1. 从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。 注：培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 2. 培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。 3. 2-3人共用一层培养箱，按预定位置摆放培养器皿，方便查找，以免长时间敞开培养箱。 4. 普通培养中的细胞，若非实验需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。 注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。 三、显微镜使用规则 1. 显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。 2. 离开细胞房时或较长时间不需使用时，及时关上电源，延长灯泡寿命。尽量避免频繁开关显微镜电源。 四、超净台相关操作规则 1. 超净台使用遵循预约原则。无预约者若有必要在他人预约时段内使用，需先

征得预约者的同意，否则应无条件让出工作台，以免耽误他人实验。 2. 超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌，使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒。 3. 点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。 注：消毒用75%的酒精，酒精灯用95%的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。 注：酒精和酒精棉球由值日生负责补给，发现细胞房内存放量不足时请及时通知值日生。 4. 超净台中应摆放废液杯和废品杯各一只，用于暂时存放废弃物，实验结束后将杯内垃圾倒入水池或垃圾桶中，并冲洗晾干备用。 注：将废弃的枪头、管子内的残留液体打（倒）入废液杯后再弃入废品杯中，以免垃圾桶内留有大量培养液滋生细菌。 5. 可回收的移液管、离心管、培养瓶皿等，放入装有清水的塑料桶中浸泡，桶内需有足量的清水以没过浸泡物品。 注：可回收器皿必要时先初步涮洗后再放入桶内，尤其是培养瓶或血清管中有大量高营养的液体残留时，容易使桶内的清水长菌。 保证浸泡的瓶、管内完全被清水充满，而不是在装有大量空气的情况下被压倒桶底。 塑料桶内物品由值日生每天负责送去清洗，使用者实验结束后若发现桶已装满，请通知值日生或顺手将塑料桶带出细胞房。 6. 装培养液的瓶子、配培养液的器皿勿放入塑料桶内浸泡！应由使用者本人及时清洗晾干备用。 注：因桶内物品通常要浸泡几小时以上才送去清洗，此时细菌可能已在桶中生长并释放内毒素。细菌内毒素很难通过常规湿热灭菌步骤去除干净，即使干烤也不能保证其完全失活。内毒素对细胞生长及多种实验均有较大影响。 洗涤程序：洗洁精洗净，清水冲十次以上去除洗涤剂残留，然后冲去离子水3次，

细胞实验室安全管理制度

细胞实验室安全管理制度 一、实验室内严禁烟火，也不能在实验室内点火取暖，严禁闲杂人员入内。 二、充分熟悉安全用具，如灭火器、急救箱的存放位置和使用方法，并妥加爱护，安全用具及急救药品不准移作它用。 三、不得私自将药品带出实验室。 六、有危险的实验在操作时应使用防护眼镜、面罩、手套等防护 设备。 七、能产生有刺激性或有毒气体的实验不能进入细胞实验室。 八、浓酸、浓碱具有强烈的腐蚀性，用时要特别小心切勿使其溅 在衣服或皮肤上。废酸应倒入酸缸，但不要往酸缸里倾倒碱液，以免酸碱中和放出大量的热而发生危险。 九、实验中所用药品不得随意散失、遗弃，对反应中产生有害气体 的实验应按规定处理，以免污染环境，影响健康。 十、实验完毕后，对实验室作一次系统的检查，随时关好门窗，防火、防盗、防破坏。 上海第二工业大学附属龚路中学 化学实验室安全使用操作规程 19 / 1 为了顺利地做好化学实验，保证实验成功，保护实验仪器设备，特制

订本实验室安全操作防止一切实验事故，维护每个师生的安全，规程。 一、未进实验室时，就应对本次实验进行预习，掌握操作过程及原理，弄清所有药品的性质。估计可能发生危险的实验，在操作时注意防范。 二、实验开始前，检查仪器是否完整无损，装置是否正确稳妥。 实验进行时，应该经常注意仪器有无漏气、碎裂，反应进行是否正常等情况。 灯火还没熄灭时，灯火加热时要注意安全。在酒精灯快烧尽、三、千万不能注入燃料；酒精灯熄灭时，要用灯帽来罩，不要用口来吹，引起燃烧。不要用一个酒精灯来点燃，以免酒精溢出，防止发生意外；点燃的火柴用完后立即熄灭，不得乱扔。 点燃氢气前必须检查氢气的纯度。要严禁烟火，四、使用氢气时，使用易燃、易爆试剂一定要远离火源。 五、要注意安全用电，不要用湿手、湿物接触电源，实验结束后应及时切断电源。 以防液滴飞溅造成伤害。切勿俯视容器，六、加热或倾倒液体时，给试管加热时，切勿将管口对着自己或他人，以免药品喷出伤人。 七、嗅闻气体时，应保持一定的距离，慢慢地用手把挥发出来的气体少量地煽向自己，不要俯向容器直接去嗅。 19 / 2 八、凡做有毒和有恶臭气体的实验，应在通风橱内进行。 九、取用药品要选用药匙等专用器具，不能用手直接拿取。 十、未经许可，绝对不允许任意混合各种化学药品，以免发生意外事

细胞房管理规章制度

细胞房管理规章制度 【篇一：细胞房管理规章制度】 细胞房管理规章制度 细胞房是进行各种细胞培养的净化级实验室，所有进入实验室的人 员都必须遵守实验室有关的规章制度。 第一章总则 第一条细胞房主要由团队内相关科研人员使用，原则上不对外开放，其他人员如确实需使用细胞房必须预先征得实验室负责人和细胞房 负责人同意。 第二条新养细胞的同学，需先跟随由负责人指定的人员学习，同时 学习并熟记细胞房管理条例，最后通过细胞操作考核后，方可进入 细胞房进行实验。严禁未经许可擅自进入细胞房或使用相关设备。 第三条细胞房正常使用过程中，进出实验室的器械和样品需通过传 递窗，严禁随身带入。实验用品应尽量一次带入，严禁将与实验无 关的物品带入实验室，在细胞房内不得进行微生物等其它易污染物 的培养，禁止从事任何高危生化实验。 第二章条例 第一条常规操作 穿着专用隔离服，实验人员必须在细胞房缓冲间内更换细胞房专用 隔离服并戴上口罩，严禁不穿隔离服或直接穿着普通实验室实验服 进入细胞房。 穿着专用拖鞋。在准备间换下自己的鞋子，尽量避免在缓冲间走动、停留。细胞房最多可4个人同时使用。 实验过程中严禁喧哗，闲聊，反复进出培养室。 离开细胞房时应在缓冲室填写使用登记。 第二条培养箱使用规则 1.从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开 门时间和减少开门次数。 注：培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开 关培养箱，容易造成污染。 2.从培养箱拿取细胞时轻拿轻放，动作迅速，随手关紧培养箱门。 未经允许，禁止翻看、移动他人细胞或样品，如有特殊需要的，请 联系实验室负责人协调。

3.培养瓶/皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。 4.普通培养中的细胞，若非实验特殊需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。 第三条显微镜使用规则 1.倒置相差显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。 2.短时间内需再次使用显微镜时，为避免频繁开关显微镜电源，可不必关闭显微镜电源，但须将亮度旋钮调到最低；较长时间不需使用或离开细胞房时，须按规定关闭显微镜电源。 第四条超净台相关操作规则 1.超净台使用遵循预约原则。在细胞房入口处预约，细胞房内填写使用登记。 a：无预约者若有必要在他人预约时段内使用，需先征得预约者的同意，否则应无条件让出工作台，以免耽误他人实验。 b：预约内容请包括：预约时间、姓名、使用日期、使用时间段、实验内容。 2.使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒，超净台内严禁堆放过多物品影响风路平衡，不同超净台内物品严禁频繁交换使用。 3.点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。注：消毒用75%的酒精，酒精灯用95%以上的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。 4.超净台中应摆放废液缸，用于暂时存放废弃物，实验结束后将废液缸带走，废液垃圾倒入水池并同时用水冲释，固体垃圾倒入垃圾桶中 注：液缸应及时处理，严禁长时间放置，以免留有大量培养液滋生细菌。 5. 细胞实验后任何含有细胞培养污物的培养瓶，离心管，移液管等必须及时带出细胞房。 第五条器具的清洗规则 1.可回收的移液管、离心管、培养瓶皿等，放入装有碱液的塑料桶中浸泡，桶内需有足量的水以没过浸泡物品。 注：保证浸泡的瓶、管内完全被清水充满，而不是在装有大量空气的情况下被压倒桶底。

细胞房工作守则及注意事项

细胞房工作守则及注意 事项 Last revised by LE LE in 2021

细胞房工作守则及注意事项 细胞房工作守则及注意事项 一、 常规操作 1.穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套，可脱在门外的衣帽架上。 2. 穿着专用拖鞋。在缓冲间换下自己的鞋子，尽量避免在缓冲间走动、停留。 3. 细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。 二、培养箱使用规则 三、1.从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。 四、注： 五、培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 六、 2. 七、培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。 八、 3. 九、2-3人共用一层培养箱，按预定位置摆放培养器皿，方便查找，以免长时间敞开培养箱。 十、 4. 十一、普通培养中的细胞，若非实验需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。 十二、注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。 十三、显微镜使用规则 十四、1.显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。 十五、 2. 十六、离开细胞房时或较长时间不需使用时，及时关上电源，延长灯泡寿命。尽量避免频繁开关显微镜电源。 十七、超净台相关操作规则 十八、1.超净台使用遵循预约原则。无预约者若有必要在他人预约时段内使用，需先征得预约者的同意，否则应无条件让出工作台，以免耽误他人实验。十九、2.超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌，使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒。 二十、3.点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。 二十一、注： 二十二、消毒用75%的酒精，酒精灯用95%的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。 二十三、注：

细胞培养室工作守则及注意事项

细胞培养室工作守则及注意事项 一、常规操作 1. 穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套，可脱在门外的衣帽架上。 2. 穿着专用拖鞋。在缓冲间换下自己的鞋子，尽量避免在缓冲间走动、停留。 3. 细胞室最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。 4. 不允许带无关人员进入，禁止往实验室带小鼠，食物等。 二、培养箱使用规则 1. 从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。注：培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 2. 培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。 3. 2-3人共用一层培养箱，按预定位置摆放培养器皿，方便查找，以免长时间敞开培养箱。 4. 普通培养中的细胞，若非实验需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。 注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。 三、显微镜使用规则 1. 显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。 2. 离开细胞室时或较长时间不需使用时，及时关上电源，延长灯泡寿命。尽量避免频繁开关显微镜电源。 四、超净台相关操作规则 1. 超净台使用遵循预约原则。无预约者若有必要在他人预约时段内使用，需先征得预约者的同意，否则应无条件让出工作台，以免耽误他人实验。 2. 超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌，使用前、后需用酒

精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒。 3. 点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。 注：消毒用75%的酒精，酒精灯用95%的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。 注：酒精和酒精棉球由值日生负责补给，发现细胞室内存放量不足时请及时通知值日生。 4. 超净台中应摆放废液杯和废品杯各一只，用于暂时存放废弃物，实验结束后将杯内垃圾倒入水池或垃圾桶中，并冲洗晾干备用。 注：将废弃的枪头、管子内的残留液体打（倒）入废液杯后再弃入废品杯中，以免垃圾桶内留有大量培养液滋生细菌。 5. 可回收的移液管、离心管、培养瓶皿等，放入装有清水的塑料桶中浸泡，桶内需有足量的清水以没过浸泡物品。 注：可回收器皿必要时先初步涮洗后再放入桶内，尤其是培养瓶或血清管中有大量高营养的液体残留时，容易使桶内的清水长菌。 保证浸泡的瓶、管内完全被清水充满，而不是在装有大量空气的情况下被压倒桶底。 塑料桶内物品由值日生每天负责送去清洗，使用者实验结束后若发现桶已装满，请通知值日生或顺手将塑料桶带出细胞室。 6. 装培养液的瓶子、配培养液的器皿勿放入塑料桶内浸泡！应由使用者本人及时清洗晾干备用。 注：因桶内物品通常要浸泡几小时以上才送去清洗，此时细菌可能已在桶中生长并释放内毒素。细菌内毒素很难通过常规湿热灭菌步骤去除干净，即使干烤也不能保证其完全失活。内毒素对细胞生长及多种实验均有较大影响。 洗涤程序：洗洁精洗净，清水冲十次以上去除洗涤剂残留，然后冲去离子水3次，再用双蒸水1次，倒置于器皿柜中晾干。关上器皿柜的门防尘。

细胞培养的过程及注意事项

36细胞培养的过程及注意事项细胞的培养过程及注意事项；根据培养过程中是否需要分割培养物进行再培养而将细；一、原代培养；（一）过程；原代培养的基本过程包括取材、培养材料的制备、接种；1、组织块培养法；(1)基本操作过程；1）、用培养液湿润所取组织材料，并用锋利的眼科剪；2）、用湿润的吸管吸取切碎的组织块，清清 (1)基本操作过程 1）、用培养液湿润所取组织材料，并用锋利的眼科剪将附在其上的脂肪和结缔组织去除干净。再用平衡液（PBS）或Hanks液漂洗；用锋利的眼科弯剪将组织块剪成小块；再用PBS或Hanks液漂洗多次，直至液体不浑浊、无油滴、清亮为止。

2）、用湿润的吸管吸取切碎的组织块，清清吹到培养瓶皿中，并将其按一定间距均匀放在培养瓶底壁上，量不要过多，要将组织块切面贴在培养瓶底壁上； 3）、将培养瓶翻转，使瓶底朝上，在种植了组织块一侧的对侧面加足培养液，勿使组织块与培养液接触，塞紧瓶塞； 4）、将种植了组织块的一侧朝上，静置于37℃培养箱中；待组织块贴壁1 4）、为促进组织块尽快粘贴在培养瓶皿上，可以在种植前先将胶原薄层涂在培养瓶底壁上。细胞培养过程中，胶原中的促细胞贴附因子先吸附于培养瓶底壁上，悬浮的圆形细胞再与已吸附有促贴物质的底壁附着。 2、分离细胞培养法—贴壁型细胞培养

（1）基本操作过程 1）、首先用细胞分散法收获细胞，随时吸取少量消化液在镜下观察，并根据组织是否分散成细胞团或单个细胞，采取终止消化措施。用筛网滤掉未消化的组织块。 2）、低速离心细胞悬液，弃掉上清液，加入含血清的培养液，轻轻吹打制 然 但 足，也很难使细胞适应从体内的组织环境到被分散后进入独立生存环境的变化过程。如果接种的细胞密度过大，会导致营养物质供应不足，代谢废物积累较快需要经常换液和传代。 2）原代培养时初始培养在组织分散和分离细胞时细胞可能会受到严重的损伤。适当增大原代培养接种的细胞密度，给培养的细胞提供更多的类似于在体内

细胞房管理规章制度

细胞房管理规章制度集团文件版本号：（M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988）

细胞房管理规章制度 细胞房是进行各种细胞培养的净化级实验室，所有进入实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度。 第一章总则 第一条细胞房主要由团队内相关科研人员使用，原则上不对外开放，其他人员如确实需使用细胞房必须预先征得实验室负责人和细胞房负责人同意。 第二条新养细胞的同学，需先跟随由负责人指定的人员学习，同时学习并熟记细胞房管理条例，最后通过细胞操作考核后，方可进入细胞房进行实验。严禁未经许可擅自进入细胞房或使用相关设备。 第三条细胞房正常使用过程中，进出实验室的器械和样品需通过传递窗，严禁随身带入。实验用品应尽量一次带入，严禁将与实验无关的物品带入实验室，在细胞房内不得进行微生物等其它易污染物的培养，禁止从事任何高危生化实验。 第二章条例 第一条常规操作 穿着专用隔离服，实验人员必须在细胞房缓冲间内更换细胞房专用隔离服并戴上口罩，严禁不穿隔离服或直接穿着普通实验室实验服进入细胞房。 穿着专用拖鞋。在准备间换下自己的鞋子，尽量避免在缓冲间走动、停留。 细胞房最多可4个人同时使用。 实验过程中严禁喧哗，闲聊，反复进出培养室。 离开细胞房时应在缓冲室填写使用登记。

第二条培养箱使用规则 1.从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。 注：培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。 2.从培养箱拿取细胞时轻拿轻放，动作迅速，随手关紧培养箱门。未经允许，禁止翻看、移动他人细胞或样品，如有特殊需要的，请联系实验室负责人协调。 3.培养瓶/皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。 4.普通培养中的细胞，若非实验特殊需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。 注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。 第三条显微镜使用规则 1.倒置相差显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。 2.短时间内需再次使用显微镜时，为避免频繁开关显微镜电源，可不必关闭显微镜电源，但须将亮度旋钮调到最低；较长时间不需使用或离开细胞房时，须按规定关闭显微镜电源。 第四条超净台相关操作规则 1.超净台使用遵循预约原则。在细胞房入口处预约，细胞房内填写使用登记。 a：无预约者若有必要在他人预约时段内使用，需先征得预约者的同意，否则应无条件让出工作台，以免耽误他人实验。 b：预约内容请包括：预约时间、姓名、使用日期、使用时间段、实验内容。 2.使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒，超净台内严禁堆放过多物品影响风路平衡，不同超净台内物品严禁频繁交换使用。 3.点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。 注：消毒用75%的酒精，酒精灯用95%以上的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。