动物细胞电转步骤

动物细胞电转化

1、细胞准备：

贴壁细胞，悬浮细胞

1、电转前1-2天，将细胞转移至75cm2细胞培养瓶，至转化前细胞汇合度约50-70%。此时细胞数约为2-10×106，而每次电转需约1-10×105个细胞。

2、12ml PBS缓慢冲洗细胞，吸出PBS，用0.4ml胰酶蛋白酶消化细胞，加入10ml含血清的培养基，中和胰酶。

3、离心收集细胞，用PBS、Hepes、无血清培养基等重悬细胞，使之密度为1-5×106ceell/ml。

2、电转化

1、设置电转程序：2.0KV，25uFD

2、将线性化的重组质粒加入电转杯，所需质粒根据细胞不同而定，一般起始浓度为10-50ug/ml

3、向电击杯中加入细胞，颠转电击杯使之混匀，细胞浓度和体积的使用参照下表

4、将电击杯放入电击槽中，脉冲电击一次。

5、将细胞转移至已含0.5ml培养基的孔中

6、轻轻晃动孔板，混匀细胞，电转24-48h后，基因瞬时表达。

（HEPES 缓冲液：10 mM Hepes；pH 7.3；40 mM NaCl ）

植物细胞与动物细胞的比较

植物细胞与动物细胞的比较 构成动物体或植物体的细胞有基本相同的结构体系与功能体系。很多重要的细胞器与细胞结构，如细胞膜、核膜、染色质、核仁、线粒体、高尔基体、内质网、核糖体、微管与微丝等，在不同细胞中不仅形态结构和成分相同，功能也一样。近年来在植物细胞内发现了类似动物细胞的中等纤维和溶酶体的结构，植物细胞的圆球体和糊粉粒具有类似溶酶体的功能。 植物细胞也有一些特有的细胞结构与细胞器是动物细胞所没有的，如细胞壁、液泡、叶绿体及其他质体。 细胞壁细胞壁是在植物细胞分裂过程中形成的，先在分裂细胞之间形成胞间层，主要成分是果胶质，再在胞间层之间形成有弹性的初生壁，有些细胞还形成坚硬的次生壁。细胞壁的主要成分是纤维素，还有果胶质、半纤维素与木质素等。细胞壁的某些部位有间隙，原生质可以由此沟通，形成胞间连丝。 液泡液泡是植物细胞的代谢库，起调节细胞内环境的作用。它是由脂蛋白膜包围而形成的，内部是水、无机盐、糖和色素等物质，溶液的浓度可以达到很高的程度。液泡是随着细胞的生长，由小液泡合并与增大而成为大液泡的。液泡还可以使植物细胞保持膨胀的状态。 叶绿体叶绿体是植物细胞内最重要、最普遍的质体，它是进行光合作用的细胞器。叶绿体利用叶绿素将光能转变为化学能，把二氧化碳与水转变为糖。叶绿体是世界上成本最低、创造物质财富最多的“生物工厂”。除叶绿体外，植物细胞中还有白色体、有色体等质体。

模拟制作植物细胞 1.除需准备制作动物模型的物品外，还应准备透明塑料小盒、小塑料食品袋、糖水。 2.在制作植物细胞模型时，先在小塑料袋内注入糖水，并用线扎紧。将小塑料袋放入已装有琼脂和果脯的较大塑料袋中，然后将较大塑料袋放在塑料小盒中盖好。 3.其余制作过程同动物细胞模型的制作。 在制作的植物细胞模型中，透明塑料盒相当于细胞壁，小塑料袋及其内的糖水相当于液泡。还可以增加若干颗绿色果脯(如青梅)，表示叶绿体。

动物细胞培养基本操作

实验一动物细胞培养 细胞培养是用无菌操作的方法将动物体内的组织(或器官)取出，模拟动物体内的生理条件，在体外进行培养．使其不断地生长、繁殖，人们借以观察细胞的生长、繁殖、细胞分化以及细胞衰老等过程的生命现象。 细胞培养的突出优点，一是便于研究各种物理、化学等外界因素对细胞生长发育和分化等的影响；二是细胞培养便于人们对细胞内结构(如细胞骨架等)、细胞生长及发育等过程的观察。因而细胞培养是探索和指示细胞生命活动规律的—种简便易行的实验技术，同时我们也不可忽略的另一个因素，那就是它脱离乐生物机体后的—些变化。 细胞培养技术目前已广泛地被应用于生物学的各个领域。如分子生物学、细胞生物学、遗传学、免疫学、肿痛学及病毒学等 为此有必要使学生在细胞培养方面得到一些初步的感性知识，了解动物细胞培养的基本操作过程，观察体外培养细胞的生长特征，对原代细胞与传代细胞有一个基本概念。 本实验分两次进行．即清洗与消毒和传代细胞的培养与观察。 Ⅰ清洗与灭菌 一、实验目的 能独立地进行用于细胞培养的各种器皿的清洗与消毒，掌握干热灭菌法、湿热灭菌法和滤过除菌法的操作，了解化学消毒法的使用方法。 二、实验原理 清洗与消毒是组织培养实验的第一步，是组织培养中工作量最大，也是最基本的步骤。体外培养细胞所使用的各种玻璃或塑料器皿对清洁和无菌的要求程度很高。细胞养不好与清洗不彻底有很大关系。清洗后的玻璃器皿，不仅要求干净透明，无油迹，而且不能残留任何物质。如有毒的化学物质，哪怕残留0．1个，也可能影响细胞生长。灭菌手段的选择十分重要，对不同的物品需采用不同的灭菌方法。假如选用的方法不对，即使达到了无菌却使被灭菌药品丧失了营养价值、生物学特性或其他使用价值也不行。以下在每种灭菌步骤中都介绍其使用范围。 三、实验材料、用品

高中生物(新教材)《动物细胞有丝分裂及 观察根尖分生区组织细胞有丝分裂实验》导学案+课后练习题

第2课时动物细胞有丝分裂及 观察根尖分生区组织细胞有丝分裂实验学习目标核心素养 1.通过比较分析，明白动植物细胞有丝分裂的异同。 2．说出无丝分裂过程、特点。 3．制作装片并观察根尖分生组织细胞的有丝分裂过程。1.科学思维：比较动植物细胞有丝分裂的异同。 2．科学探究：通过有丝分裂实验，掌握显微镜观察实验的基本操作方法，提高实践能力。 知识点一动物细胞有丝分裂 1．动物细胞有丝分裂过程 (1)动物细胞有由一对由中心粒构成的□01中心体，中心粒在□02间期倍增，成为两组。 (2)进入分裂期后，□03两组中心粒移向细胞两极，并在其周围发出放射状的□04星射线，形成纺锤体。 (3)动物细胞分裂的末期不形成□05细胞板，而是细胞膜从细胞中部向内凹陷，把细胞□06缢裂成两部分。 2．比较动、植物细胞有丝分裂的异同

3．细胞有丝分裂的意义 (1)将亲代细胞的□17染色体经过复制(实质为DNA的复制)之后，精确地平均分配到□18两个子细胞中。 (2)由于染色体上有□19遗传物质DNA，因而在细胞的亲代和子代间保持了□20遗传的稳定性。 易漏边角（P115） 1．正常细胞的分裂是在机体的精确调控之下进行的，在人的一生中，体细胞一般能够分裂□2150～60次。但是，有的细胞受到□22致癌因子的作用，细胞中□23遗传物质发生变化，就变成不受机体控制的、连续进行分裂的□24恶性增殖细胞，这种细胞就是□25癌细胞。 问题思考参与动、植物细胞细胞周期过程中的细胞器有哪些？ 提示：

问题思考鉴别一个正在进行有丝分裂的细胞是植物细胞还是动物细胞最可靠的方法是什么？ 提示：因在一些低等植物细胞里，也存在着中心体，分裂时也会出现星射线，因此最可靠的方法是根据有丝分裂过程中是形成细胞板，使细胞质分割为二，还是细胞膜内陷使细胞质分割为二作为鉴别依据。 2．无丝分裂 ①特点：分裂过程中不出现□26纺锤丝和染色体的变化。 ②过程 a.□27细胞核先延长，核的中部向内凹陷，缢裂成两个□28细胞核。 b．整个细胞从中部缢裂成两部分，形成两个□29子细胞。 ③实例：□30蛙的红细胞。 ,

高中生物 动物细胞培养和核移植技术教案 新人教版选修3

动物细胞培养和核移植技术 备课日期2014年 3 月 4 日课型新授课 教学目标 知识与技能 1\简述动物细胞养的含义。 2\说出动物细胞养的所需条件。 3\简述动物细胞培养的基本程序。 4\简述动物细胞核移植的概念。 过程与方法 情感态度 与价值观 1\通过学习基因工程的概念，使学生认识到科学研究需要的严谨，激 发为祖国而奋斗的精神。 2\通过学习基因操作的工具，使学生树立结构与功能相统一的辩证唯 物主义观念。 教学重点 1\动物细胞培养的过程及条件； 2\用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景 教学难点用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程 教学方法以探究法、谈话法、材料教学法相结合。 教学用具多媒体课件 课时安排1课时 教学内容设计与反思 板书设计:

教学内容设计与反思一、复习导入: 教师活动：投影幻灯片，引导学生思考、分析讨论。 （1）植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养 植物体细胞杂交 （2）植物体细胞杂交的结果是产生了？ （3）植物体细胞杂交过程中涉及的原理是？ 二、讲授新课: （一）动物细胞工程 动物细胞工程常用的技术手段 动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体、动物细胞培养 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 （二）动物细胞培养 1.发展历史: 单20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形 成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问 题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的 脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神 经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验 不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后， 在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物 细胞培养。 2、动物细胞培养的应用和概念： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关 的组织,将它分散成个细胞,然后,放在适宜的 培养基中,让这些细胞生长和增殖. 3、动物细胞培养过程： 引导学生阅读课文44--46面相关内容。

观察动物细胞和植物细胞)

第4节细胞（4 观察动物细胞和植物细胞） 一、填空题 1、观察自己制作的临时装片，发现视野中有许多黑色圆圈，这是由于原因造成的，需要重新盖或重新制作。 2、生理盐水的浓度是，但亚甲基蓝溶液的浓度是，并且它的作用是。 3、观察洋葱表皮临时装片时，发现细胞有严重重叠现象，这可能是由于洋葱表皮细胞撕得太，或者是洋葱表皮细胞未在载玻片上。 4、人的口腔上皮细胞所具有的结构是、、。 5、在显微镜下观察到的动物细胞和植物细胞在结构上的不同部分是，植物细胞具 有和，动物细胞则没有。 二、选择题 6、用显微镜观察的正确方法是（） A、右眼睁开左眼闭 B、左眼睁开右眼闭 C、左眼观察右眼也睁开 D、以上均可以 7、制作洋葱表皮细胞临时装片时，染色的正确方法是（） A、将碘液直接滴在洋葱表皮上 B、先滴上碘液，再盖上盖玻片 C、先盖上盖玻片，再将碘液滴在盖玻片的一侧，用吸水纸在另一侧吸 D、先在载玻片滴碘液，再将洋葱表皮展平在其中 8、取显微镜的正确方法是（） A、两手握镜臂 B、两手托镜座 C、右手握镜臂 D、右手握镜臂，左手托镜座 9、用普通的显微镜看不到洋葱表皮细胞的结构是（） A、细胞壁 B、细胞膜 C、液泡 D、细胞核 10、用镊子撕取少量洋葱表皮细胞制成的临时玻片标本属于（） A、临时切片 B、临时装片 C、临时涂片 D、永久装片 三、简答题 11、下面是“观察人口腔上皮细胞”的步骤，请在空白处填写正确答案。 用滴管在载玻片中央滴一滴______。 用凉开水把口漱净。用牙签从口腔______处轻刮几下。 把刮下的东西放在______的______中。 盖上______，注意不要留下______。 把制成的口腔上皮细胞装片用______染色，然后放在______下观察。 12、下面是制作洋葱表皮细胞装片过程中的几个主要操作步骤。①盖上盖玻片；②用滴管在载玻片中央滴上一滴清水；③用镊子撕下一小块洋葱表皮；④把洋葱鳞片切成小块；⑤用镊子把洋葱表皮展平。 以上步骤正确的顺序是 13、绘制一个自己所看到的洋葱表皮细胞，并注明细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、液泡等名称。

(完整word版)2015 动物细胞培养技术实验报告

一、实验目的 1、学习并掌握动物细胞培养的无菌操作技术。 2、学习并掌握细胞传代培养的方法。 3、学习并掌握用倒置荧光显微镜观察细胞细胞形态。 二、实验原理 细胞培养（cell culture）：细胞在体外条件下生长，细胞不再形成组织。 动物细胞培养（animal cell culture）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。由于细胞具有生长和自我复制的能力，为细胞体外培养和研究提供可能。 动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。 原代培养（primary culture）即直接从动物机体分离、获得组织细胞，在无菌条件下，用胰蛋白酶消化或机械分散等方法，将动物组织分散成单个细胞开始首次培养长出单层细胞的方法。 传代培养（subculture）当细胞生长增值达到一定密度，用胰蛋白酶将细胞消化分散成单细胞，将细胞转移到新的培养皿中扩大培养的方法。 高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内的功能活动是十分困难的，但如果把或细胞拿到体外培养、增殖并进行观察和研究，则方便简单的多。被培养的动物细胞是非常好的实验对象和实验研究材料，对体外培养的活细胞进行研究可以帮助人类探索防治各种疾病途径和机制，也可以人为地诱导和改变细胞的遗传性状和特性，因此，动物细胞体外培养技术是研究细胞分子机制非常重要的实验手段，被广泛应用于医学、生物技术、基因工程等研究领域。 三、细胞培养相关设施及材料 1、细胞培养室 无菌操作区：只限于细胞培养及其它无菌操作，与外界隔离。 孵育区：培养箱设定的条件为37℃，5%CO2。 制备区：培养液及有关培养用液体的制备，液体制备后应该在净化工作台进行过滤除菌。 储藏区：包括冰箱、干燥箱、液氮罐等。 清洗区和消毒灭菌区：清洗区为相对污染区，消毒灭菌区与清洗区分开。 2、细胞培养常用基本设施： 荧光显微镜、超净工作台、孵箱、电热鼓风干燥箱、冰箱、液氮罐、消毒器、恒温水浴槽、滤器等。 细胞培养常用器皿：培养瓶、培养板、培养皿，玻璃瓶、吸管，离心管、冻存管，注射器，烧杯、量筒等。 3、细胞培养用品的清洗、消毒 新玻璃器皿要用5%稀盐酸浸泡，以中和其表面碱性物质：刷洗： 硫酸清洁液浸泡：浓硫酸+重铬酸钾+蒸馏水； 冲洗：流水冲洗15-20次，蒸馏水冲洗3次，三蒸水漂洗1-3次。 所有需灭菌的器械、物品灭菌前均需包装，防止灭菌后污染。使用时放入超净工

生物人教版七年级上册制作动物和植物细胞的模型

第三节动物细胞 包头市第八中学陈晓燕 一、课标陈述 使用显微镜和制作临时装片。 区别动物细胞、植物细胞结构的主要不同点。 二、学习目标 1、通过复习制作洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片的步骤和阅读观察人口腔上皮细胞的实 验内容，说出制作人口腔上皮细胞临时在装片实验步骤的“七字诀”； 2、在观看视频演示实验的基础上，学生独立准确完成制作人口腔上皮细胞临时在装片的实验； 3、通过绘制人口腔上皮细胞的图，培养学生实事求是的科学态度； 4、观察多种生物细胞图片后，准确说出动植物细胞在结构上的主要区别，并认同细胞是构成生物体的基本单位； 5、通过阅读“施莱登、施旺与细胞学说”的阅读，了解细胞学说的主要观点，体会科学发展过程中科学家严谨的科学态度、科学与技术相互促进等。 三、课时：1课时 四、落实目标的评价方案 1、通过复习，学生准确说出对制作洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片步骤的“七字诀”，在通过阅读观察人口腔上皮细胞的实验内容，学生自己总结“七字诀”，并比较说出异同，就达成了目标1。 2、学生在观看演示实验视频后能独立、准确完成实验，并讨论回答问题，就达成目标2. 3、学生能从显微镜中观察到清晰的口腔上皮细胞，并实事求是画图（不能照教材画），即可达成目标3。 4、教师出示各种生物细胞的图片，学生能够仔细观察并说出动植物细胞的主要区别，并说出细胞是构成生物体的基本单位，也能说出病毒不具有细胞结构。这样即可达成目标4. 5、学生阅读“施莱登、施旺与细胞学说”，简述细胞学说的主要内容，能交流说出科学研究要有严谨的科学态度、科学与技术相互促进等就可达成目标5。 6、通过“开心选答”环节，继续巩固达成的目标1-4。 五、教学准备 视频（制作人口腔上皮细胞临时装片），多种动植物细胞的图片，细菌、真菌细胞的图片实验材料：生理盐水、稀碘液、体积分数为2%的蓝墨水、消毒牙签、滴管、纱布、镊子、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜。 六、教学设计 【旧知复习】 学生说出制作洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片的步骤“七字诀”及植物细胞的基本结构。 教师提问是不是所有的植物细胞都有叶绿体？（如洋葱鳞片叶内表皮细胞无叶绿体。）植物的细胞是看过了，想不想看看自己的细胞？ 【课件投影】教材P46-47的实验内容 1.仿照洋葱“七字诀”自己从实验步骤中找出口腔上皮细胞的“七字诀”。 2.对比两个实验步骤的异同，分析不同之处，简述为什么那样做。 教师可适时提问：①为什么滴生理盐水？（可在观察后说出原因）②为什么要漱口？ ③用什么刮？刮哪？④为什么轻涂几下？⑤怎样盖盖玻片？⑥怎样染色？

细胞有丝分裂过程

细胞的有丝分裂 一、真核细胞的分裂方式 真核生物的分裂方式主要有有丝分裂和无丝分裂两种，其中有丝分裂是真核生物增值体细胞的主要方式。 二、细胞周期 指连续分裂的细胞从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的整个过程。每一个细胞周期包括一个分裂期和一个分裂间期。细胞的分裂过程包括：细胞核的分裂和细胞质的分裂（胞质分裂）。 三、有丝分裂 1.过程（以动植物细胞为例） （1）细胞核的分裂 分裂间期：（复制合成非等闲）可见核膜核仁，染色体的复制（DNA复制、蛋白质合成）。 G1期：合成DNA所需蛋白质的合成和核糖体的增生 S期：DNA的复制 G2期：有丝分裂所必须的一些蛋白质的合成 前期：（膜仁消失现两体）核膜、核仁消失，染色体出现，散乱排布纺锤体中央，纺锤体出现 A.染色质经螺旋化形成染色体 B.植物细胞两极发出纺锤丝形成纺锤体 C.核膜解题，形成分散的小泡 中期：（形定数晰赤道齐）：染色体的着丝点整齐的排在赤道板平面上，染色体形态比较稳定，数目比较清晰，便于观察。 A.着丝粒整齐的排列在细胞中央的一个平面上 B.染色体缩短到最小程度，便于观察和研究 后期：（点裂数增均两极）着丝点分裂，姐妹染色单体分开，成为两条子染色体，由纺锤丝牵引着分别向细胞的两极移动，染色体数目暂时加倍。 A.染色体的着丝粒分裂,染色单体分开形成两条独立的染色体 B.染色体数目加倍，DNA数目不变 C.两套相同的染色体被拉向细胞两极 末期：（两体消失膜仁现）染色体、纺锤体消失，核膜、核仁出现，染色体变成染色质。 A.染色体伸展重新形成染色质状态 B.核膜重新形成 C.核内染色体数目与分裂前相同 注意：有丝分裂中各时期始终有同源染色体，但无同源染色体联会和分离。 (2)细胞质的分裂 时间：有丝分裂后期或末期

动物细胞培养技术 思考题

《动物细胞培养技术》复习思考题 1.动物细胞培养的实验器皿清洗要求为何较高？你认为该如何保证器皿中无杂质？如果 器皿中有杂质，会对细胞培养产生什么样的影响？ 答：①离体细胞对各种毒物都很敏感，若所用器材清洗效果未达到要求，各种毒物会损坏细胞影响实验。②器皿使用高压灭菌锅，121.3℃，20~30分钟，在取拿的时候用经过高压灭菌后的镊子取拿，避免造成污染。③ 2.叙述超净工作台的工作原理？ 答：超净工作台最主要的是空气循环过滤的过程，在这个过程中风机起到了心脏的作用。鼓风机驱动空气通过高效过滤器得以净化，净化的空气被徐徐吹过台面空间而将其中的尘埃、细菌甚至病毒颗粒带走，使工作区构成无菌环境。 3.正压过滤器为何会除菌？ 答：正压式过滤器没有内置灭菌灯，正压式过滤器利用的是两层0.22um孔的过滤膜，这层膜可以将细菌阻挡在膜上，过滤的液体流下去就基本上完成了灭菌过程 4.各种细胞培养用液的配制需要很精确吗？如果不精确，会导致什么后果？请举例说明。 你认为精确配制各种溶液？ 答： 5.配制后平衡盐溶液呈黄色意味着液体的pH发生了什么变化？ 答：配制后的液体应呈桃红色，PH值为7.4左右。苯酚红的变色域：1.2（橙）~3.0（黄），6.5（棕色）~8.0（紫色），若为黄色，则液体呈酸性，不利于细胞的生存。 6.用于分离细胞的消化液为什么宜用无Ca、Mg离子的D-Hanks液或PBS液配制 答：Ca＋2、Mg＋2是细胞膜的重要组分，具有使细胞凝聚的作用。因此，用于分离细胞的消化液宜用无Ca＋2、Mg＋2离子的D-Hanks液或PBS液。 7.L-谷氨酰胺在营养液中有何作用？ 答： L－谷氨酰胺是细胞的能量来源；是一种必须氨基酸，是使物体合成核酸、蛋白质、嘌呤、嘧啶的重要前体，也是蛋白质合成分解的调节物；是细胞内氨的清除剂，氨对一些细胞有毒性。 8.HEPES溶液的作用机理？ 答：它是一种氢离子缓冲剂。主要作用是防止培养基pH迅速变动 9.平衡盐溶液的组成与基本作用？小牛血清在细胞培养中有哪些作用？ 答：①平衡盐溶液主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH 稳定及提供简单的营养.主要用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。②作用：a提供能促使细胞指数生长的激素、基础培养基中没有或含量微小的营养物，以及某些低分子营养物质；b提供结合蛋白，识别维生素、脂类、金属离子，并与有毒金属和热源物质结合，起解毒作用；c是细胞贴壁、铺展生长所需因子的来源；d起酸碱度缓冲液作用； e提供蛋白酶抑制剂，细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受损伤。 10.营养液制备后为什么要小剂量分装？ 答：避免营养液被污染后，全部的营养液都被污染。 营养液一次用完过后，下一次的实验就不能用，会引起污染，影响实验，若冷冻营养液，则营养液的营养成分会有所损失，影响细胞的生长 11.10万U/mL单位青霉素、链霉素的配制方法？ 答：用注射器吸10毫升双蒸水溶解100万单位的链霉素，弃去2ml，用剩余的8ml链霉素溶解80万单位的青霉素，配制成每毫升青霉素、链霉素各10万单位的母液。

观察动物细胞和植物细胞教学设计

台州学院生命科学学院 09科学教育2班实验教案 实验名称：观察动物细胞和植物细胞 姓名：____________ 参与人员：景双双钱志扬柳长隆郑如观察动物细胞和植物细胞教学设计

姓名：景双双钱志扬柳长隆郑如学号：35 36 37 38 课题七年级上第二章第4节细胞（第三课时）观察动物细胞和植物细胞 2011版课程标准对本节内容的要求与活动建议1、学会制作简单的临时装片。 2、熟练掌握显微镜的使用，观察装片，学会绘制简单的生物图。 3、知道细胞的基本结构。 学习者的认知起点 学习者是七年级的学生，学生在之前的课中认识了生物，认识了生物的分类，也认识了微观的细胞和其结构。细胞作为生物体结构和功能的基本单位是生物学的基础知识，其重要性是显而易见的。上一节课也已经学习使用了显微镜，所以在本节课中要学会如何制作临时装片来进一步巩固显微镜的使用并且进一步对细胞进行观察以及学习生物实验绘图的方法。 基于学习者实际所设计的具体教学目标知识与技 能目标 1、熟练掌握显微镜的使用和观 察方法。 2、学习如何绘制生物绘图，并能 够掌握画图技巧。 3、进一步明确动植物细胞的区 别。 4、会根据植物细胞装片的制作 自己推出动物临时装片制作 的过程，并自己动手操作。 学习者 达到教 学目标 的证据 和表现 1、自己能够使用显微镜观 察装片，并且说出一些主 要步骤及注意事项。 2、能够观察装片并且具有 绘制生物图的能力。 3、能够在观察的基础上说 出动植物细胞的不同点 和相同点。 4、可以较好的完成动物临 时装片的制作。 过程与方 法目标 观察和分析实验及相关的实验注 意点的探究学习方式。 学生具有敏锐的观察和良好 的归纳能力，学会自己制作动 物细胞的临时装片。 情感态度 与价值观 目标 1、体会对事物的观察要透过现象 看本质； 2、感受科学的发展往往需要付出 几代人的共同努力，是一个长期 的过程，从而培养协作的精神； 3、初步感受物质世界的统一性和 多样性。 4、体会归纳思想的重要性，学会 自己去发现和解决问题。 1、能够理论联系实际，将之 前所学的动植物细胞的 结构与自己制作的临时 装片进行对比。 2、学会归纳思想，并且应用 到生活实际。 科学、技 术、社会 与环境 （STSE） 目标 知道细胞是生命活动的基本单 位，我们只有通过这样对微观世 界的学习才能更好的了解生命的 本质，为例如农业、生物等提供 一些本质性的帮助，为社会服务。 体会到细胞对于生命的 意义，学会透过现象看本质的 方法，科学地看待事物，更好 的为以后的学习和工作服务。

与动物细胞有丝分裂有关的结构是什么

与动物细胞有丝分裂有关的结构是什么？ 中心体、线粒体、细胞核、细胞膜、内质网、核糖体 细胞有丝分裂时，首先是细胞核内的与分裂有关的蛋白质的合成翻译、染色体和中心粒复制；中心体分别往细胞两极移动，伴随着细胞核膜消失，核仁消失；然后中心体形成纺锤丝，纺锤丝的一端连着中心体，一端连着染色体，纺锤丝和中心体合称纺锤体；然后纺锤丝牵引染色体向细胞两极移动；最后完成细胞膜的分裂。 与蛋白质合成和翻译有关的细胞结构有核糖体、内质网（由于蛋白质不需要分泌到细胞外，因此不需要高尔基体）。 在这过程中需要大量能量，这些能量都是由线粒体提供的。 所以动物细胞有丝分裂中涉及到的细胞结果有：中心体、线粒体、细胞核、细胞膜、核糖体、内质网。 什么是分泌蛋白？ 分泌蛋白是指酶、抗体、部分激素等在细胞内合成后分泌到细胞外起作用的蛋白质。分泌蛋白的合成过程在高中阶段没有具体的说明，而现在确实是考试的一个热点，因此在不少的参考书上出现了对选修课本的简单理解和搬抄出现了一些错误的表达，下面就简单的来介绍一下有关分泌蛋白的形成过程及相关细胞器的有关作用，希望能起到抛砖引玉的作用。 组成生物体的蛋白质大多数是在细胞质中的核糖体上合成的，各种蛋白质合成之后要分别运送到细胞中的不同部位，以保证细胞生命活动的正常进行。有的蛋白质要通过内质网膜进入内质网腔内，成为分泌蛋白；有的蛋白质则需穿过各种细胞器的膜，进入细胞器内，构成细胞器蛋白。那么这些蛋白质如何能够正确的的进行和运输和加工形成的呢? （一）蛋白质的引导: 蛋白质的运输尽管比较复杂,但是生物系统中的蛋白质的运输可以用一个比较简单的模式来解释。每个需要运输的多肽都很有一段氨基酸序列，称为信号肽序列，引导多肽到不同的转运系统。 信号肽及其作用机制 70年代初期，许多研究发现，在编码分泌蛋白的基因中，许多基因的5'端都有一段DNA编码的15～35个氨基酸的疏水性肽片段，这一位于蛋白质N——末端的肽段在成熟的分泌蛋白中并不存在，其功能在于引导随后产生的蛋白质多肽链穿过内质网膜进入腔内。这一段疏水性短肽在蛋白质的内质网——高尔基体——质膜分泌途径中具有重要作用，并被称之为信号肽。 1975年，布洛贝尔提出了信号肽假说。根据这一假说，在细胞质中，编码分泌蛋白的信使核糖核酸（mRNA）与游离的核糖体大小亚基结合而形成翻译复合体。从起始密码子开始，首先翻译产生信号肽，当转译进行到大约50～70个氨基酸之后，信号肽开始从核糖体的大亚基上露出，露出的信号肽立即被细胞质中的信号肽识别体（SRP）识别并与之相结合。此时，转译暂时停止，SRP牵引这条带核糖体的mRNA到达粗面内质网的表面，并与粗面内质网表面上的信号肽识别体受体（或称停泊蛋白）作用，这时，暂时被抑制的转译过程恢复进行，同时，内质网膜上某种特定的核糖体受体蛋白聚集，使膜双脂层产生孔道，带mRNA 的核糖体与其受体蛋白结合，转译出的肽链便通过孔道进入内质网腔内。 信号肽在穿越膜后即被内质网腔内的信号肽酶水解切除。当核糖体与其受体蛋白结合后，SRP与停泊蛋白便解离，各自进入新的识别、结合循环。当转译进行到mRNA的终止密码子时，蛋白质的合成结束，核糖体的大小亚基解聚，大亚基与核糖体受体的相互作用消失，核糖体受体解聚，内质网膜上的蛋白孔道消失，内质网恢复成完整的脂双层结构。进入内质网腔内的多肽链在信号肽被水解切除后即进行折叠及其他一系列修饰过程，最终形成成熟的

动物细胞培养及应用发展史

细胞培养技术

细胞培养发展史及其应用 （一）前言 20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harriso n)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。 所谓动物细胞培养(亦称组织培养)既有别于植物细胞培养，又与微生物的培养完全不同。所谓动物细胞培养是指离散的动物活细胞在体外人工条件下的生长、增殖过程，在此过程中细胞不再形成组织。 由于动物细胞培养是在人工条件下进行的，便于调控和观察，因而成为现今研究动物的物质代谢过程、染色体的形态变化、以及遗传物质的表达调控等高难领域的既便利而又有效的新方法。同时，随着现代生物化学、分子生物学、分子遗传学、以及现代医学的发展，细胞培养也在许多应用领域充分展示了其巨大的发展潜力，并已为世人所关注。尽管如此，动物细胞培养仍是一门年轻的新学科，在发展之初被混淆于动物组织培养之中。 （二）细胞培养技术及其历史 细胞培养的历史最早可追溯到19 世纪末，据可考证的资料记载W ilhelm Roux是第一个进行动物组织培养实验的人。 1885年Wilhelm Roux 将鸡胚髓板放置于温热盐水中使之维持存活了数天，是有记录的第一个体外移植成功的例子。 1887年Arnold把恺木的木髓碎片接种到蛙的身上。当白细胞侵入这些木髓碎片后，他把这些白细胞收集在盛将盐水的小碟中，接下来观察到这些白细胞在运动，并存活了一个短的时间。

动物细胞培养技术实验

实验十五动物细胞培养技术及其应用 一．实验目的 通过本实验使学生掌握细胞培养、细胞检测和细胞表达等成套技术的原理和方法。 二. 实验内容 1.培养基配制、细胞培养、细胞冻存与复苏等基本技术； 2.细胞生长曲线测定、细胞活性检测等常用技术； 3.细胞污染检测方法与技术； 4.病毒在细胞中的感染与增殖、重组病毒异源蛋白的细胞表达等实用技术。 三．实验用品 1. 材料：Sf 细胞、Hi5 细胞等 2. 器材：CO2培养箱、超净工作台、倒置显微镜、培养基抽滤装置、电泳仪、离心机、pH 计、液氮罐（含液氮）、水浴锅、温度计、培养瓶、血清瓶、5 ml和10 ml 移液 管、不锈钢移液管筒、大小不锈钢饭盒、酒精灯、吸耳球、血球计数板、96孔板、 24孔板、无菌冻存管、离心管、记号笔、一次性过滤器、微量加样器、精密pH 试纸、酒精棉球等 3. 试剂与药品：Grace培养基、胎牛血清、甘油、DMSO、双抗（青霉素、链霉素）100 u/ml、 Hank’s液、胰蛋白酶、台盼蓝、液氮、分析纯无水酒精、95%医用酒精、Tris 碱、硼酸、EDTA、琼脂糖粉（电泳用）、dNTPs、Taq酶、支原体检测试剂盒、 DNA提取试剂盒DNeasy Blood & Tissue kit （Qiagen）等。 四．实验方法与步骤 （一）培养基配制、细胞培养、细胞冻存与复苏 1. 缓冲液及培养基配制 Hank’s液：KH2PO4 0.06g，NaCl 8.0g，NaHCO3 0.35g，KCl 0.4g，葡萄糖1.0g，Na2HPO4·H2O 0.06g，加H2O至 1000ml，高压灭菌。4℃下保存。 胰蛋白酶液： 称取0.25克胰酶蛋白酶（活力为1：250），加入100ml无Ca2+、Mg2+的Hank’s 液溶解，滤器过滤除菌，4℃保存，用前可在37℃下回温。 4%台盼蓝染液：称取台盼蓝4克，加双蒸水至100 ml。 MTT溶液：MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液或无酚红的Hank’s液中。4℃下保存。Grace培养基：取一份GIBCO公司的Grace培养基粉剂，按说明用量加入1000ml三蒸水100单位／毫升青、链霉素，充分混匀使溶解，调节pH值至6.8左右。 0.22 μm 滤膜抽滤除菌，4℃下保存。此为基础培养基。使用前加入10%胎牛 血清。 细胞冻存液：基础培养基加入10%DSMO，20%胎牛血清，用前配制。 PBS缓冲液：137 mmol/L NaCl, 2.7 mmol/L KCl, 8.1 mmol/L Na2HPO4, 1.5 mmol/L KH2PO4,

常用的五种动物细胞培养方式

?一、半连续式培养 1.半连续式培养又称为重复分批式培养或换液培养。采用机械搅拌式生物反应器系 统，悬浮培养形式。在细胞增长和产物形成过程中，每间隔一段时间，从中取出部分培养物，再用新的培养液补足到原有体积，使反应器内的总体积不变。这种类型的操作是将细胞接种一定体积的培养基，让其生长至一定的密度，在细胞生长至最大密度之前，用新鲜的培养基稀释培养物，每次稀释反应器培养体积的1/2~3/4，以维持细胞的指数生长状态，随着稀释率的增加培养体积逐步增加。或者在细胞增长和产物形成过程中，每隔一定时间，定期取出部分培养物，或是条件培养基，或是连同细胞、载体一起取出，然后补加细胞或载体，或是新鲜的培养基继续进行培养的一种操作模式。剩余的培养物可作为种子，继续培养，从而可维持反复培养，而无需反应器的清洗、消毒等一系列复杂的操作。在半连续式操作中由于细胞适应了生物反应器的培养环境和相当高的接种量，经过几次的稀释、换液培养过程，细胞密度常常会提高。 2.半连续式特点： ·培养物的体积逐步增加； ·可进行多次收获； ·细胞可持续指数生长，并可保持产物和细胞在一较高的浓度水平，培养过程可延续到很长时间。该操作方式的优点是操作简便，生产效率高，可长时期进行生产，反复收获产品，可使细胞密度和产品产量一直保持在较高的水平。在动物细胞培养和药品生产中被广泛应用。 二、连续式培养 1.连续式培养是一种常见的悬浮培养模式，采用机械搅拌式生物反应器系统。该模 式是将细胞接种与一定体积的培养基后，为了防止衰退期的出现，在细胞达最大密度之前，以一定速度向生物反应器连续添加新鲜培养基；同时，含有细胞的培养物以相同的速度连续从反应器流出，以保持培养体积的恒定。理论上讲，该过程可无限延续下去。

动物细胞与植物细胞的区别 导学案

植物细胞与动物细胞的比较 复习总结课 一、知识回顾： 1.制作洋葱鳞叶表皮临时装片的步骤： 擦，滴，撕，展，盖，染，吸 2.制作人口腔上皮细胞临时装片的步骤： 擦，滴，刮，涂，盖，染，吸 3.植物细胞的基本结构是： 细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、线粒体、叶绿体、液泡 4.动物细胞的基本结构是 细胞膜、细胞质、细胞核、线粒体 5.植物细胞与动物细胞的区别： 动物细胞有的结构植物细胞都具有； 植物细胞特有的结构是：细胞壁、叶绿体、液泡 6.制作人的口腔上皮细胞临时装片时，漱口的目的是清除口腔中的食物残渣；用生理盐 水而不用清水的原因是保持细胞的正常形态，避免细胞吸水破裂；滴加碘液的目的是染色，便于寻找和观察细胞。 7.口腔上皮细胞呈椭圆形，染色后，显微镜下看到的细胞呈橘黄色。 二、达标测评： 1.请分析回答细胞临时装片制作、观察等相关问题： (1)制作人口腔上皮细胞临时装片过程中，应先在载玻片中央滴一滴______________； 染色时所用的染剂是____________________。 (2)若显微镜的目镜为5×，物镜为40×，则观察到的物像放大__________倍。

若视野内有污点，移动临时装片和转动目镜后，污点均不动，说明污点在 ____________ 上(3)人口腔上皮细胞结构与上图中的_______（填“甲”或“乙”）相同， 判断依据是______________。 2.黄瓜果肉细胞与人的口腔上皮细胞都有的结构是 ①细胞壁 ②细胞膜 ③细胞质 ④细胞核 ⑤线粒体 ⑥叶绿体 ⑦液泡 A ．①⑥⑦ B ．②③④⑤ C ．②③④⑤⑦ D ．①②③④⑤⑥⑦ 3.与植物细胞比较，动物细胞没有的结构是（ ） A.细胞膜 B.细胞质 C.细胞核 D.细胞壁 4.制作人的口腔上皮细胞临时装片时，用到的材料和用具有（ ） ①镊子 ②生理盐水 ③稀碘液 ④清水 ⑤消毒牙签 ⑥刀片 A.①②③⑤ B.①③④⑥ C.①②④⑤ D.②③⑤⑥ 5.如图甲和图乙“观察人的口腔上皮细胞”实验的部分操作，如图丙所示显微镜的结构，如图镜观察到的人的口腔上皮细胞，据图回答下列问题： （1）图甲中滴加的液体是_______________,目的是____________________________。 （2）图乙中滴加的液体是_______________,目的是_______________________ （3）使用显微镜观察时，先要转动[ ]______________，使镜筒缓缓下降，直到接近拨片标本，此时眼睛一定要注视着[ ]_____________ （4）如果要将图丁中左下方的细胞物象移到视野中央，应该向___________方移动装片． （5）为更好地观察口腔上皮细胞，需要将视野调暗，应当改用___________和平面反光镜． 6．下列能正确表达动物细胞各结构之间位置关系的是（ ） A B C D

动物细胞培养常用方法

一.细胞增殖周期（cell proliferatinal cycle）概念 细胞周期是描述细胞增殖和分化交替发生变化的概念。而细胞增殖周期主要是从细胞增殖角度赋予细胞活动的概念，两者不应混为一谈。细胞增殖周期是指细胞从一次分裂结束开始生长，到下一次分裂结束所经历的过程。根据细胞增殖周期不同时期的生化特点，划分为四个连续的时期，即G1期（DNA合成前期），S期（DNA合成期），G2期（DNA合成后期），M期（有丝分裂期）。如以G1期为起点，那么细胞增殖周期的各时期应循着G1-S-G2-M的顺序进行，G1、S、G2三期合称为细胞间期，此期完成细胞生长过程。M期完成遗传物质的分配。 因此，细胞增殖周期=间期（G1期+S期+G2期）+分裂期（M期）。 二.培养细胞生命期（life span of culture cells） 很多细胞特别是正常细胞，在体外的生存不是无限的，而是具有一个生命期。索维培养细胞生命期，是指细胞在培养中持续增殖和生长的时间。培养细胞的生命期与细胞的种类、性状和原供体的年龄、健康等情况有关。人胚二倍体成纤维细胞，在不冻存和反复传代条件下，科传30~50代，相当于150~300个细胞

增殖周期，能维持1年左右的生存时间，最后衰老凋亡。如供体为成体或衰老个体，则生存时间较短；其他细胞如肝细胞或肾细胞，生存时间更短，仅能传几代或十几代。只有当细胞发生遗传性改变，如获永生性或恶性转化时，细胞的生存期才可能发生改变。正常细胞培养时，不论细胞的种类和供体的年龄如何，在细胞生命的全过程中，大致都经历以下三个阶段：原代培养期、传代期、衰退期。 三.培养细胞一代生存期 培养细胞的生存空间和营养是有限的，当细胞增殖达到一定密度后，则需要分离出一部分细胞和更新营养液，否则将影响细胞的继续生存，这一过程叫传代（Passage或Subculture）。每次传代以后，细胞的生长和增殖过程都会受一定的影响。传代的频率或间隔与培养液的性质、接种细胞的数量和细胞增殖的速度等有关。接种细胞数量大，细胞基数大。相同增殖速度条件下，细胞数量增加与饱和速度相对要快（实际上细胞接种数量大时细胞增殖速度比稀少时要快）；连续细胞系和肿瘤细胞系比初代培养细胞增值快；；培养液中血清含量多时细胞增殖比少时快。以上情况都会缩短传代时间。 所谓细胞“一代”一词，仅指从细胞接种到分离培养时的一段时间，这已成

植物细胞和动物细胞

植物细胞和动物细胞 一、选择题 1、下列有关番茄细胞结构功能的说法错误的是（） A．遗传物质主要存在于细胞核中 B．番茄汁中的酸味物质存在于液泡中 C．番茄的细胞壁具有支持保护和控制物质进出细胞的作用 D．番茄叶肉细胞中被称为能量转化器的结构有叶绿体和线粒体 2、在制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片时，可以直接将撕取的洋葱鳞片叶内表皮细胞置于载玻片上的清水中也不会使其因过度吸水而胀破，主要取决于洋葱鳞片叶内表皮细胞的哪个结构（） A．细胞膜B．细胞壁C．细胞质D．液泡 3、各种植物的细胞通常具有一定的形态，这主要是因为（） A．细胞壁的保护作用B．细胞壁的支持作用 C．细胞膜的保护作用D．细胞膜的支持作用 4、细胞是生物体结构和功能的基本单位．如图为植物细胞结构模式图．据图判断，正确的是（） A．②是细胞壁 B．⑤是细胞核，细胞生命活动的控制中心 C．切西瓜或削水果时流出的汁液通常来自于③ D．动、植物细胞都有①②③⑤ 5、小明用显微镜观察下列细胞，其中具有细胞壁但无叶绿体的是（） A．菠菜叶肉细胞B．洋葱鳞片叶内表皮细胞 C．人体口腔上皮细胞D．血涂片中的红细胞 6、在人体的细胞中，没有的结构是（） A．细胞壁、叶绿体、液泡B．细胞膜、细胞质、细胞核 C．细胞核、细胞质、线粒体D．细胞膜、细胞质、线粒体 7、小明用显微镜观察一个细胞，他判断为植物细胞，这是因为他看到了（） A．细胞膜、细胞核B．细胞核、芽孢 C．细胞质、细胞核D．细胞壁、叶绿体 8、洋葱鳞片叶表皮细胞与人的口腔上皮细胞都有的结构是（） ①细胞膜②细胞质③细胞核④细胞壁⑤线粒体⑥叶绿体⑦液泡． A．①②③④⑤⑥⑦B．①②③⑤C．①②③④⑥⑦D．④⑥⑦ 9、下列四个实验中都用到碘液，使用目的与其它三个实验不同的是（） A．观察人的口腔上皮细胞 B．观察洋葱内表皮细胞 C．观察酵母菌细胞 D．观察玉米种子的结构 10、制作人口腔上皮细胞的临时装片时，用于漱口的液体、载玻片上滴加的液体、染色用的液体分别是（） A．碘液、生理盐水、自来水B．碘液、生理盐水、凉开水 C．碘液、自来水、生理盐水D．凉开水、生理盐水、碘液

动物细胞培养心得

动物细胞培养·心得 在学习动物细胞培养的过程中，我了解到是动物细胞工程中最常用的技术手段，而且动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础点，细胞培养是生物医学中一项重要技术，应用较为广泛，目前已渗透到细胞生物学、生物化学、临床检验学等多个领域。在这次PPT 制作中，我对无脊椎动物和脊椎动物两大领域细胞培养取得的进展及应用作了较为详细的了解，并在此基础上探讨了动物细胞培养存在的问题以及未来的发展方向。为相关领域研究者探讨其他种类细胞系的建立及筛选合适的细胞系培养方法作为理论的参考依据 我了解到历史上组织培养技术创建于 18 世纪末，之后于 1907 年美国生物学家Harrison在无菌条件下，以淋巴液为培养基在试管中培养蛙胚神经组织宣告成功后，才逐渐发展成为一种从体内组织取出细胞，模拟体内生存环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使其生长繁殖并维持结构和功能的实验技术。这种技术为细胞学、遗传学、病毒学、免疫学的研究和应用做出了重要贡献。特别是随着近年来现代生物科学领域的迅速拓展，各种分子生物学实验诸如核移植、细胞杂交、DNA 介导的基因转移等，都是借助细胞培养技术而得以实现的。然而，在种类繁多的动物世界里，细胞培养实验技术的发展并不均衡，构建动物细胞培养体系的研究效率和效果上也存在较大的局限性。而动物细胞培养，在1907年，哈里森（Harrison）在无菌条件下用淋巴液作培养基，培养蛙胚神经组织存活数周，并观察到神经细胞突起的生长过程，由此创建了盖片覆盖凹窝玻璃悬滴培养法，奠定了动物组织体外培养的基础。之后，又有人将悬滴培养法改良为双盖片培养，提高了传代效率并减少了污染；1923年，卡雷尔（Carrel）设计了卡氏瓶培养法，扩大了组织生存空间。 1951年，厄尔（Earle）发明了体外培养动物细胞的人工合成培养基。1951年，波米拉（Pomerat）设计了灌流小室，使细胞生活在不断更新的培养液中，便于作显微摄影和细胞代谢的研究。1957年，格拉夫（Graff）用灌流技术进一步提高了细胞悬浮培养的效率。1957年，杜尔贝科（Dulbecco）等人采用胰蛋白酶消化处理和应用液体培养基的方法，获得了单层细胞培养。单层培养法的出现，对组织培养的发展起了很大的推动作用。此后单层培养成为组织培养普遍应用的技术。20世纪60年代后，动物细胞大规模培养技术开始起步，并逐步发展。20世纪80年代后，随着基因工程和其他细胞工程技术的发展，细胞培养技术已成为转基因技术、生物制药及其他许多技术的基础，在现代生物技术中发挥着重要的作用 我从资料查得根据细胞种类：原代细胞培养，传代细胞培养。原代细胞：将动物各种组织从机体中取出，经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA) 或机械方法处理，分散成单细胞，在合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。培养的细胞为正常的动物细胞，一般培养10代后不再增殖，死亡。传代细胞：传代培养是细胞培养常规保种方法之一，也是所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶，细胞才能继续生长，这一过程就叫传代。传代培养可获得大量供实验所需细胞。细胞传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细地无菌操作。培