D10糖化血红蛋白分析仪 SOP 文件
1.检验申请
单独检验项目申请:HbA1c(糖化血红蛋白)测定。
组合项目申请:糖尿病测定组合。
临床医生根据需要提出检验申请。
2.标本采集与处理
2.1采血前受检者保持安静、放松状态、环境温暖、防止静脉挛缩。一般采用坐姿采血。
2.2用一次性无菌注射器或抗凝真空采血管采静脉血1.0ml,置于含150g/L EDTA-K2(或
肝素)小溶液10ul的塑料试管或硅化玻璃试管中,加盖后颠倒混匀抗凝,及时送检。
2.3检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.4采血后一般4小时内完成检测,检测前标本置室温即可。
3.方法原理:
D10采用阳离子交换色谱法,根据HbAlc与非糖化血红蛋白带电量不同进行分离。非糖化血红蛋白带正电荷,而糖化血红蛋白几乎不带电,根据他们带电性质的不同,利用弱酸性阳离子交换色谱法将其分离。使用的固定相为弱酸性阳离子交换固定相,该固定相带有可交换的阳离子基团,能与带正电荷的非糖化血红蛋白通过静电作用相结合,而糖化血红蛋白不带电,故不能与固定相结合。在选定低浓度条件下洗脱,糖化血红蛋白首先被洗脱;再用高浓度洗脱液洗出非糖化血红蛋白,被分离出来的血红蛋白洗脱液通过415nm波长检测吸光度,得到相应的血红蛋白层析谱。
4.试剂:
每试剂包中含有下列试剂:
试剂A:2000ml×2;试剂B:1000ml×1;
溶血素:2000ml×1;层析柱1只;
稀释杯100只;
5.适用仪器
生产商:Bio-Rad
仪器名称:D10糖化血红蛋白分析仪
6.标准与质控
标准:每个试剂的批号会有向对应的定标品,每盒定标品的定标值在kit内可以找到。
定标时将kit内的值通过软盘或者手动输入到仪器内即可。
质控:Bio-Rad公司有740糖化血红蛋白测试质控,可以适用不同的仪器及测试方法。
7.标本测定步骤:
装载试剂→执行定标/输入校正值→执行质控→输入样本ID→加载标本→报告。
8.结果计算:
仪器根据校正曲线自动给出检测结果,测定结果以%表示。
9.分析参数:
5ul全血(末梢血或抗凝血)+1500ul溶血素混合后检测。
10.仪器性能:
线性测定范围:HbA1c 4%-18% CV<3%
11.参考值
正常人参考值:4%-6%(NGSP)
12.临床意义:
12.1由于HbA1c反映测定前2-3个月血糖控制的平均水平,它不受偶尔一次血糖升高
或降低的影响,很少发生低于正常值的情况。
12.2 HbA1c主要用于判断血糖控制情况,对糖尿病患者血糖控制的长期观察有十分重
要的意义,有助于降低糖尿病患者并发症的危险性。
12.3 用于糖尿病的辅助诊断。
12.4用于应激性高血糖的鉴别诊断:各种应激如心肌梗塞和脑血管意外可使血糖升高,
但这种高血糖HbA1c不一定升高,若为糖尿病,HbA1c则升高。两者的鉴别对指导
治疗和判断预后有一定价值。
12.5孕期高血糖的控制
13.有关引用程序与文件
13.1 《D10糖化血红蛋白测试系统操作手册》
13.2 叶应妩、王毓三《全国临床检验操作规程》—东南大学出版社1997.172-173
14.参考文献
14.1 《糖尿病及糖调节受损的诊断标准及其变迁》—高志红2006.26.2
14.2 《空腹血糖和糖化血红蛋白用于筛查糖尿病的研究》—周翔海、纪立农2005.13.3
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