放射性配体受体结合试验
放射性配体受体结合试验
1、定义:
放射性配基与受体结合分析简称为受体放射分析（radioassay of receptors），它是应用放射性核素标记配基与特异受体相结合，研究受体的亲和力和受体的数量，以及研究受体亚型的常用方法。
2、原理:
1）、放射性标记配基（激动剂或拮抗剂）和组织、细胞，或含有受体的制剂一起温育，使受体和配基充分结合，形成受体-配基复合物，终止反应后，用过滤或离心的方法除去未被结合的标记物，测定滤膜或沉淀物中的放射性，即可计算出和配基结合的受体的量。
2）、放射配基与受体制备物（含受体的组织或细胞制备物）作用时，其结合形式有两种，一种是配基与受体的特异性结合，其特点是亲和力高；且由于受体有限，故具有饱和性。另一种是配基与受体制备物的非受体分子的结合，称为非特异性结合。其特点是亲和力低但结合点多，不易饱和。用放射性配基研究特异性受体时，必须设法减除非特异性结合。一般采用的方法是制备总结合管和非特异结合管，两者计数之差即为特异性结合量。
总结合管：将放射性配基与受体制备物反应，除去游离的放射性配基，测定结合的放射性配基的计数，（其中包含特异性结合与非特异性结合，称为总结合）。
非特异性结合管：将大量（一般为500－1000倍）非标记特异性配基与标记的放射性配基相混，然后共同与受体制备物反应。由于非标记配基与标记配基两者比例悬殊，所以受体几乎全部被非标记配基饱和，标记配基只能与组织制备物中的非特异结合位点结合。这时测出的标记配基的结合量，反映的是非特异结合量。用总结合管的计数减去非特异结合管的计数，即可得到特异结合计数。
3、分类：
RBA用放射性核素来标记配基，与相应的受体进行特异性结合反应，可对受体的性质进行定性和定量的分析。
1、定性RBA：是通过反应的量效关系的变化来判断受体的类型，单位点或多位点结合式，及受体与配体结合的特点，反应的可逆性、协作性等。
2、定量RBA：是在已知配体与受体反应性质的基础上，通过结合反应，给出一定量的组织或细胞中能与该放射性配体结合的受体数及结合的平衡解离常数或结合位点数（最大结合容量）。
4、实验材料:
动物组织
仪器（组织匀浆机、旋涡混合器、低温高速离心机、电热恒温水温箱、-80℃冰箱、制冰机、抽虑瓶、液闪仪等）
材料（ 2ml/6ml分离管、10ul/200ul/1ml枪头、微纤维滤纸等）
药品（放射性配基、各种非标计化合物等）
5、实验具体步骤：
1）、配制各种缓冲液及试剂
按处方配比配制各种缓冲液贮备液
配制各种非标记配体溶液
配制各种受试药物溶液
注意：该项操作所需试剂或仪器
仪器：分析天平、移液枪、烧杯、量筒、容量瓶、试管、EP管等
试剂：无水乙醇、超纯水、Tris 、抗血酸、优降宁、HCl 、NaCl、KCl、CaCl2、MgCl2 、DMSO 、甲苯、PPO 、POPOP、Methysergide 、Butaclamol及5HT 等
2）、制备膜受体
分离出目标组织
加10倍体积Tris-HCl溶液冰冷的缓冲液,用组织匀浆机匀浆3次，每次数秒钟，制成组织匀浆液组织匀浆液用低温高超离心机离心（12000转/分）3次，每次20分钟弃上清液，沉淀（膜受体）放-80度超低温冰箱保存备用。
注意：该项操作所需试剂或仪器
仪器：手术器械、组织匀浆机、制冰机、超低温冰箱、低温高超离心机
试剂：超纯水
3）、加样：
取出膜受体，加入一定体积的冰冷的缓冲液，混匀，使成一定浓度的膜受体溶液。
取放射性配体母液，用无水乙醇稀释成实验所需浓度
按以下顺序及比例加入各种反应液。
（1）总结合管：100ul膜受体 + 200ul缓冲液 + 10 ul 放射性配体（2）非特异管：100ul膜受体 + 100ul缓冲液 + 100ul非标记配体+ 10 ul 放射性配体
（3）受试物管：100ul膜受体 + 100ul缓冲液 + 100ul药物溶液 +
10 ul 放射性配体
注意：该项操作所需试剂或仪器
仪器：移液枪、烧杯、量筒、EP管等
试剂：超纯水、无水乙醇、放射性配体母液
4）、受体配体结合反应：
以上各管在加完放射性配体后，立即放入37度的水浴锅中，孵育20分钟。20分钟后把各管放入冰中终止反应。
注意：该项操作所需试剂或仪器
仪器：恒温水浴锅，制冰机
试剂：无
5）、分离游离及结合的放射性配体
上述各管在反应结束后，分别倒入抽滤装置进行过滤，并用5-10ml 冰冷的缓冲液冲洗滤膜2次。滤膜放入85度烘箱中烘干，随后放入测试管中，关加入一定体积的闪烁液，浸泡过夜。
注意：该项操作所需试剂或仪器
仪器：抽滤器、烘箱、滤纸、移液枪、液闪杯
试剂：甲苯、PPO 、POPOP
6）、测定结合型放射配体每分钟放射计数
采用放射性计数仪，测定各测试管中结合型放射配体每分钟放射计数
注意：该项操作所需试剂或仪器
仪器：液闪仪
试剂：无
7）、数据处理
按以下公式计算各化合物对同位素配基结合的抑制率百分率：
抑制率(I %)=（总结合管cpm—化合物cpm）/
（总结合管cpm—非特异结合管cpm）×100%
化合物每次实验做两复管，进行两次单独实验。
8）、各种指标
IC50：半数抑制浓度
KD：平衡解离常数（mol/L），物理意义为受体有一半结合配基时所需要的配基浓度。
Bmax：受体最大结合容量（fmol /mg蛋白质）
nH：Hill系数
9）、Scatchard方程与作图（饱和实验）
简单单位点系统受体和配体结合反应（Clark模型）条件：
（1）配基与受体结合反应为可逆双分子反应；
（2）所有受体都是等效和独立的，同一受体的不同分子对配基的亲和力都相等，而且不受邻近受体分子结合配基与否的影响；
（3）配体本身不代谢，也不与其它位置结合；
（4）生物效应的强度与浓度近似于总配基浓度。
10）、饱和曲线
固定的受体数量，固定数量的非标和不同浓度体积的放射性配体1）饱和曲线
受体数量一定，当配体（一般是不同浓度体积的放射性配体与固定数量的非标）的浓度从零开始上升时，形成的复合物也逐渐增多。但由于受体数量有限，又是可逆反应，因此[RL]（受体配体复合物）的增加不是直线上升，而是一条上升先快后慢的曲线，最后绝大部分受体与配体结合时，[RL]的增加就非常缓慢，渐趋水平，即受体已经饱和了，此即饱和曲线。
2）曲线的高度取决于[RT]。在曲线起始段，曲线上升的快慢即曲线的斜率取决于配基与受体的亲和力，所以，KD越小 (亲和力越大)，饱和曲线上升越快，KD越大 (亲和力越小)，饱和曲线上升越慢。（即：亲和力越大，受体与配件结合速度越快，时间越短）
k1, v1
[R]+[L] －－－－ [RL]
k2, v2
KD＝K2/ K1=[R][L]/[RL]
饱和曲线的形状和KD有关（如图1）
图1 KD对饱和曲线的影响
饱和曲线曲线的高度取决于[RT]（如图2）。
图2 [RT]对饱和曲线影响
G 蛋白的分类
Gs: 激活AC cAMP ↑
Gi: 抑制AC cAMP ↓
Gq: PLC→IP3、DG
Go: 开启钾通道、抑制钙通道
Gt: 关闭钠通道
放射性配体受体结合实验方法介绍重点
TG 作用 , 这与袁淑云等 [1,3] 报道用家兔作为降脂试验动物的结果是一致的。本次试验同时显示纳豆胶囊毒理学两阶段毒性实验结果为阴性 , 表明此胶囊为实际无毒物质。 参考文献 : [1]袁淑云 . 纳豆激酶粗提液对小鼠实验性高脂血症的降 脂作用 . 现代医院 ,2005,15:10212. [2]武井直树 , 李麒 . 纳豆在保健和医疗上的应用价值 . 中国 微生态学杂志 ,2002,14:2432246. [3]段智变 , 江晓 , 江汉湖 . 纳豆粗提物抗兔高脂血症及抗氧 化作用的研究 . 营养学报 ,2004,26:2962299. [4]刘宇峰 , 王金英 , 孙岸 , 等 . 纳豆激酶制剂—恩开胶囊 的生产工艺中试研究 . 生物技术 ,2000,10:48249. (收稿日期 :2006-11-15 中图分类号 :R144文献标识码 :B文章编号 :1002-3127(2007 03-0231-02 ?方法研究? 放射性配体受体结合实验方法介绍 班婷婷 , 吴强恩 , (复旦大学公共卫生学院 ,
关键词 :放射性配体受体结合法 ; 经验介绍 ; 作者简介 :班婷婷 , 硕士研究生 , 研究方向 :农药毒理学。 assays , RRA , RRA 系统时 , 恼 , 现根据我们实验室多年的经验 , 将部分内容方法操作步骤报道如下 , 以供同行参考。 1受体标本的制备和保存 一般有差速离心和蔗糖密度梯度离心 , 前者较为常用。应在脱离正常供血环境后迅速在 0~4℃条件下匀浆。有报道 , 脑组织标本切成小块后以原状态冻存于-70℃ ~-80℃ , 能保存 6个月以上 , 或者将组织块或所需组织的悬浮液保存在 -70℃可保存 6个 月 , 受体不失活 [122] 。 2降低非特异性结合的方法 我们用组织提取受体进行 3 H 2G ABA (γ2氨基丁酸实验时 , 吸附在滤纸上的游离型标记配体的含量较多 , 非特异性结合很高 , 可考虑如下几方面降低其含量 : (1 加样顺序 :最好先加膜受体饱和管以壁减少 3 H 2G ABA 在管壁上的吸附。若先加 3 H 2G ABA 则非特异 性结合管所加入的非标记性配体会将管壁的 3 H 2G ABA 置换出来 , 而使非特异结合管的每 min 放射性计数 (CPM 值偏高。 (2 用抽滤法分离放射性配体 2受体复
受体——百度百科
受体——百度百科 2014-5-1 摘编 受体是一类存在于胞膜或胞内的，能与细胞外专一信号分子结合进而激活细胞内一系列生物化学反应，使细胞对外界刺激产生相应的效应的特殊蛋白质。与受体结合的生物活性物质统称为配体（ligand）。受体与配体结合即发生分子构象变化，从而引起细胞反应，如介导细胞间信号转导、细胞间黏合、胞吞等过程。 中文名受体外文名 receptor 药理学概念糖蛋白或脂蛋白构成的生物大分子 存在位置细胞膜、胞浆或细胞核内 功能识别特异的信号物质等 特征结合的特异性、高度的亲和力等 目录 1简介 2功能 3特征 4分类 5概括 6本质 7特性 8与生理学和医学的关系 9药理 1简介 受体（receptor） 受体细胞 受体在药理学上是指糖蛋白或脂蛋白构成的生物大分子，存在于细胞膜、胞浆或细胞核内。不同的受体有特异的结构和构型。 受体在细胞生物学中是一个很泛的概念，意指任何能够同激素、神经递质、药物或细胞内的信号分子结合并能引起细胞功能变化的生物大分子。 受体是细胞膜上或细胞内能识别生物活性分子并与之结合的成分，它能把识别和接受的信号正确无误地放大并传递到细胞内部，进而引起生物学效应。 在细胞通讯中，由信号传导细胞送出的信号分子必须被靶细胞接收才能触发靶细胞的应答，接收信息的分子称为受体，此时的信号分子被称为配体(ligand)。在细胞通讯中受体通常是指位于细胞膜表面或细胞内与信号分子结合的蛋白质。 2功能 受体是细胞表面或亚细胞组分中的一种分子，可以识别并特异地与有生物活性的化学信号物质（配体）结合，从而激活或启动一系列生物化学反应，最后导致该信号物质特定的生物效应。 通常受体具有两个功能： 1、识别特异的信号物质--配体，识别的表现在于两者结合。配体，是指这样一些信号物质，除了与受体结合外本身并无其他功能，它不能参加代谢产生有用产物，也不直接诱导任何细胞活性，更无酶的特点，它唯一的功能就是通知细胞在环境中存在一种特殊信号或刺激因素。配体与受体的结合是一种分子识别过程，它靠氢键、离子键与范德华力的作用，随着两种分子空间结构互补程度增加，相互作用基团之间距离就会缩短，作用力就会大大增加，因此分子空间结构的互补性是特异结合的主要因素。同一配体可能有两种或两种以上的不同受体，例如
食品安全国家标准食品中放射性核素的高纯锗γ能谱分析方法编制说明
《食品中放射性核素的高纯锗γ能谱分析方法》 编制说明 一、标准起草的基本情况 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所（以下简称“辐射安全所”）2008年向卫生计生委放射卫生防护标准专业委员会提出制定国家标准《食品中放射性核素的γ能谱分析方法》的建议书。2008年9月12日《卫生计生委办公厅关于加强2008年卫生标准制（修）订项目落实工作的通知》（卫办政法发函〔2008〕612号）将其列入2008年卫生标准制（修）项目。项目编号为2008-04-07。2008年9月签订卫生标准制修订项目委托协议书，正式启动起草工作。 参与协作单位、主要起草人及其所承担的工作 本标准修订送审稿由辐射安全所负责起草。 本标准修订送审稿主要起草人包括辐射安全所徐翠华研究员、拓飞副研究员、赵力助理研究员、李文红副研究员、张京副主任医师、任天山研究员。 简要起草过程：2008年9月制订本标准的任务正式下达后，起草人收集整理并全面阅读了与本标准有关的国内外技术资料(详见参考文献[1-20])和现行有效的我国放射性核素分析标准，逐渐形成了起草的基本思路和框架。由徐翠华执笔完成标准草案，编制组各位成员对草案提出修改完善意见，2011年4月20日形成征求意见稿。 2011年4月30日征求意见稿发出征求意见，共发函29份，征求意见对象包括卫生计生委放射性疾病诊断标准专业委员会委员、国家环境保护部核与辐射安全中心、中国计量科学研究院、国防科技工业电离辐射一级计量站、中国核工业集团公司相关单位、职业病防治院所、医科院放射医学研究所、疾控机构、大专院校、科研院所的有关专家，具有较广泛的代表性。 截至2011年5月20日，共收到反馈回函23件，其中：非放射卫生防护标准专业委员会组成成员专家回函17件；放射卫生防护标准专业委员会成员6件。 编制组对征集到的意见逐条进行了认真研究和汇总，吸收了大量富有建设性的意见和建议并进行了汇总处理，2011年5月30日形成本标准的送审稿。2011年6月18日经放射卫生防护标委会预审，编制组对标委会各位专家提出的意见逐条进行了认真研究和修改，2011年7月18日形成本标准的修订送审稿。2011年7月21日经放射卫生防护标委会终审，根据各位专家和主审人赵兰才研究员的意见，编制组进行了认真修改，2011年8月22日形成本标准的报批稿。 二、标准的重要内容及主要修改情况 1 总体结构 结构、格式对照新版《标准化工作导则第1部分标准的结构和编写》（GB/T 1.1-2009）的要求，应用标准编写模板（TCS 2009）编写全文。其中第1～3章为通用标题，即“范围”、“规范性引用文件”和“术语和定义”。第4～9章为本标准的主题内容，第4章为“γ能谱仪”，第5章为“γ能谱仪的刻度”，第6章为“样品采集”，第7章为“样品制备”，第8章为“测量”，第9章为“γ能谱分析”，第10章为“结果表述”。附录A为“各种食物样品灰样比”，附录B为“样品自吸收校正方法”，均作为资料性文件。附录之后列出规范性
环境样品的放射性核素含量的测量与分析(γ谱仪)剖析
实验十四环境样品的放射性核素含量的测量与分析（γ谱仪） 一、实验目的： 1、掌握放射性活度测量原理 2、了解土壤样品的采集方法 3、掌握本底扣除方法 4、掌握NaI效率刻度方法 5、掌握γ放射性活度分析 6、了解国内的法规和标准 二、实验原理： γ射线与物质相互作用主要产生三种效应：光电效应、康普顿效应、电子对效应。利用这三种效应的特性可以实现对γ射线的测量，从而实现放射性核素的测量与分析。 NaI (Tl)闪烁体探测器是常用的γ射线测量仪，闪烁体探测器由闪烁体、光电倍增管、 电子放大线路组成。 闪烁体将射线的能量转换成光能，是含有Tl的NaI晶体。 光电倍增管由光阴极、打那极、阳极组成。光照射光阴极产生光电子，光电子在各打那极上倍增，最后在阳极上收集并产生电压脉冲。 由于光电倍增管输出的脉冲幅度比较小、内阻较高，一般在探头内部安置一级射极跟随 器以减少外界干扰，同时实现现行放大器的输入端阻抗匹配。 线性放大器能将电信号放大10~1000倍，以便可以实现分析仪分析。 多道分析仪是将线性放大器的输出脉冲按高度分级，形成谱形。 对闪烁体探测器进行能量标定后，即可知道所测谱形上峰位对应γ射线的能量。对闪烁体探测器进行效率标定后可知道某一能量射线的探测效率。 不同核素衰变放出的γ的能量是不同的，可以根据探测器探测到的γ射线的能量推断出该核素的种类，再根据探测器探测到该核素的总量和该核素的效率可知该核素的活度。 实验仪器： 三、实验仪器： NaIγ分析谱仪一套； 铅室一个； 标准物质样品一盒； 样品盒一个； 被分析的矿石若干； 四、实验内容： 定高压： 原则:<612v,137Cs在200道左右。 实际高压：619v 能量校准： 是在谱仪确定的条件下，建立γ或χ射线能量与其全能峰位在多道脉冲幅度分析器中的道址 的关系。如果能量刻度曲线获知，则对于一能量未知的全能峰的峰位，就可以确定该峰位的γ或χ射线能量，并根据其他参数（如半衰期、发射率）确定其来源于哪种核素。通常能量 刻度曲线的近似表示为： E（X p）=CX p+E0 式中：X p——峰位道址，E0——直线截距，C——直线斜率（KeV/道） 将含有60Co，137Cs的标准源进行能量校准，对标准源测量10min后用多道数据采集器
放射配体受体结合试验方法与技术
第五节放射配体受体结合实验方法与技术 一、基本概念 1、受体（receptor）一类介导细胞信号转导的功能蛋白质，可与周围环境中微量化学物质发生特异性结合，通过信息放大系统，触发后续的生理或药理效应。 2、配体（ligand）能与受体特异结合的物质，如神经递质、药物或激素等。 3、判断受体的标准真正的受体必须具备：饱和性、特异性、可逆性、高亲和性、结构专一性、立体选择性、区域分布性、亚细胞或分子特征、有内源性配体等。 4、受体的基本分类化学门控离子通道受体；G蛋白耦联受体。 5、受体调节的方式 1）共价调节（covalent modification）尤其是蛋白磷酸化反应在受体的脱敏过程中起了非常重要的调节作用。以乙酰胆碱受体为例，细胞内c AMP升高所引起的蛋白磷酸化可使乙酰胆碱受体对乙酰胆碱的脱敏速度增加8～10倍。 2）非共价调节（non-covalent modification）影响受体功能的非共价调节机制包括①膜电位的变化；②机械性改变受体的分布（斑片钳技术）；③受体和其他膜蛋白（如G蛋白）或某些小配体（阴离子，阳离子，核苷酸）之间的变构影响；④膜脂质环境的改变等。 3）协同性调节（coordinate regulation）已知不同受体可含有同源受体区如胰岛素受体和上皮生长因子-抗溃疡素受体中的酪氨酸激酶区。由此可推测一种受体被激活后可能通过一共同密码（code）来调节同一细胞上的其他许多受体。 4）链锁反应（receptor cascades）另外一种可能的调控机制，即一个受体被激活之后，可能会释放一种细胞外信使，激活第二个细胞表面受体。称之为放大性的链锁反应。 二、放射配体结合法的应用领域 1、阐明药物作用机制； 2、新药设计和药物筛选； 3、探讨疾病的病因、发病机理，提高临床合理用药和诊断水平； 4、测定组织或血液中药物浓度； 5、探寻新的受体、受体亚型和内源性配体。 三、放射受体结合实验技术简介 1、放射配体的选择需要非常高的选择性，并要求与靶受体有很高的亲和性，解离常数最好小于10nmol/L，还要考虑配体的生物学以及生物化学特征。拮抗剂性配体必须能阻断激动剂与靶受体结合引起的生物学效应。放射性受体结合试验中，最常用的放射性同位素是氚，[3H]配体的主要优点是氚化过程不影响配体的生物活性，使用较安全，其信号必须用闪烁技术加以放大。放射配体的另一个重要特性是特异性结合与非特异性结合的比率，理想的配体应有不少于99%的特异性结合。 2、组织的选择和制备用于放射受体结合试验的理想的组织应含有高密度的靶受体和低密度的与配体非特异结合的受体。用于放射受体结合试验的组织可取自脑、外周组织、天然表达或移植受体的细胞株等。 3、缓冲液最常用的缓冲液是50mmol/L，PH为7.4的Tris-Cl的缓冲液；重碳酸盐、磷酸盐和HEPES缓冲液亦可用于结合试验。 4、非特异性结合的测定非特异性结合的测定原理是加入大量的对靶受体具有药理活性的并可使受体饱和的非放射性配体。特异性结合量是指配体与靶受体结合量，可由总结合量中减去非特异性结合量求出。 5、孵育条件结合实验应该用能产生最大特异结合和适宜的孵育条件。需要经过大量的实验才可摸索出最佳的测定条件。 6、放射配体-受体复合体与游离放射配体的分离
放射性核素的应用
放射性核素的应用 radionuclide applications 放射性核素（见放射性、核素）的辐射、能量和作为示踪物的应用，为原子能利用的一个重要方面，它具有效果好、收益大、投资少等优点。 简史M.居里和P.居里从沥青铀矿中发现镭之后，瑞典科学家于1907年研究证明，镭辐射对于发育迅速的细胞有特别强的抑制作用，于是镭辐射在医学上的应用，引起人们极大的兴趣。后来镭发光粉的制成和它在夜明仪表中的应用，则是利用放射性核素的辐射能的先例。1912年，G.C.de赫维西在化学反应中首次成功地用镭D（即210Pb）作为示踪原子，从此人们认识到放射性核素示踪应用的广泛可能性。但是，从矿石中提炼这些天然放射性核素很困难，价格又非常贵，使进一步推广应用受到了限制。30年代人工放射性核素的获得和40年代以后人工放射性核素生产的不断发展，才为其广泛应用提供了良好的条件。 方法通常分为示踪应用、辐射应用和衰变能的应用三大类。辐射应用，按其应用的方式和目的，还可分为放射性核素仪表（又称同位素仪表）、辐射加工、辐射育种、辐射刺激生长、辐射防治虫害、食品辐照保藏、辐射治疗（又称放射治疗）和医疗用品的辐射消毒等。（见彩图钴60辐照装置。正在进行蔬菜的辐照保鲜试验，蓝光为切伦科夫辐射、钴圃──利用钴60的γ射线对农作物进行辐射育种的装置、月季花的辐射育种──使发生白色突变。、月季花的辐射育种──使发生白色突变对照物、冬小麦的辐射育种──赋予早熟、抗条锈等性能、用于食品保藏的钴60辐照装置、马铃薯的辐照保鲜──抑制发芽。左为对照物） 示踪应用是在被研究的体系中引入适当形式的某种放射性核素，利用其特有的信号──放射性，追踪探测其运动和变化，揭示该体系物质运动变化规律的一类方法。这类方法既包括非同位素示踪应用，也包括严格意义上的同位素示踪原子的应用。后一种应用由于放射性核素能和其稳定同位素一样参与物理、化学和生物学的反应、变化或代谢，故易于获得其他方法难于或不可能获得的有关生产过程、反应机理、物质结构以至生物医学、生命科学等方面的信息。 辐射应用是放射性核素发射的□、β、γ、中子等粒子或射线与物质作用产生的电离、激发、活化等效应和物质对射线所起的散射、减弱、吸收、慢化等效应的应用。例如广泛应用的放射性核素仪表就是根据辐射与物质相互作用所产生的种种效应制成的。具有广阔发展前景的辐射加工、辐射育种、辐射消毒等新型工艺也是利用辐射（尤其是γ射线）能穿透物质和所引起的电离效应能使物质发生物理的、化学的以至生理学的变化而发展起来的。放射性核素（又称放射性同位素）X射线荧光分析则是利用放射性核素的辐射（γ射线）激发被测样品的组成元素、发出特征X射线而发展起来的。该方法适应性很广，而且灵敏度较高。能量应用主要指放射性核素衰变能（或射线的能量）的应用。核电池（又称同位素电池）就是以放射性核素为主要原料制成的特殊能源（见放射性废物利用）。 概况放射性核素的应用具有很多优点，在工业、农业、医学、基础科学、环境保护及人民生活等领域的应用已相当广泛。 放射性核素仪表料位计、厚度计、密度计已广泛用于工业生产过程管理和产品质量控制。由于这类仪表在应用中不需直接接触被测对象，除可在一般条件下使用外，还可用于其他仪表难于或不能使用的高温、高压、易爆、有毒和腐蚀性的对象的测量控制。中子水分计已成为测定和控制土壤水分、混凝土提坝以及公路路基施工中含水量的重要手段。 泥沙量计已用于江河湖泊、海湾、港口泥沙含量变化的直接而准确的测量。硫黄或铅含量计已有效地用于石油含硫、含铅量的测定。可携式X射线荧光光谱分析仪已用于选矿中测定矿石品位的现场快速分析。煤炭含炭量计已用于若干洗煤厂中间产品质量的检控。γ照相和中子照相装置也已广泛用于金属材料和某些复合材料，以及由这些材料做成的容器、部件、
龙泉青瓷瓷土天然放射性核素分析
· 17 ·第 26 卷第 2 期 第 26 卷第 2 期2019 年 4 月Vol.26, No.2 Apr. 2019 中 国 陶 瓷 工 业 CHINA CERAMIC INDUSTRY DOI:10.13958/https://www.wendangku.net/doc/ea18966958.html,ki.ztcg.2019.02.004 Received date:2018-12-25. Revised date: 2018-12-28.Correspondent author:YE Yinpeng, male, Master, Engineer.E-mail:yeyp0309@https://www.wendangku.net/doc/ea18966958.html, 收稿日期：2018-12-25。 修订日期：2018-12-28。基金项目：龙泉市科技计划项目资助(KJ五水三边安全-020)。通信联系人：叶银鹏，男，硕士，工程师。 龙泉青瓷瓷土天然放射性核素分析 叶银鹏，叶伟平，周 虎 (浙江省青瓷及日用陶瓷产品质量检验中心，龙泉市产品质量监督检验所，浙江 龙泉 323700) 摘 要：龙泉青瓷闻名于世，对其原料天然放射性核素进行分析有助于系统评估龙泉青瓷瓷土原料放射性核素的水平。根据 龙泉市瓷土矿的分类与分布，采集7个不同矿点的瓷土样品作为研究对象。利用多道γ能谱仪对龙泉市不同区域7份瓷土样品中天然放射性核素的检测与数据分析，发现其226Ra的比活度较低，而232Th的比活度较高。40K的比活度与浙江省平均监测值处于同一水平，高于全国平均监测值。其内外照射指数在相关标准范围之内。 关键词：瓷土；放射性核素；龙泉青瓷 中图分类号：TQ174.4 文献标志码：A 文章编号：1006-2874(2019)02-0017-04 Analysis of Radionuclides Content in Longquan Celadon Clay YE Yinpeng, YE Weiping, Zhou Hu (Longquan Products Quality Supervision Testing Institute, Zhejiang Province Celadon and Ceramic Products Quality Inspection Center, Longquan 323700，Zhejing, China) Abstract: Longquan celadon ware is famous in the world. The research on its clay is helpful to evaluate the radionuclide levels of the clay for Longquan celadon ware. According to the classification and distribution of celadon clays in Longquan City, samples from 7 different mineral spots were collected as the research objects. Then, the radionuclide content and ratioactivity of these samples were obtained by means of γ EDS. The results showed that their specific activity of 226Ra was low and their specific activity of 232Th was high. Their specific activity of 40K was at the same level as the average tested in Zhejiang Province but was higher than the national average. Moreover, their internal & external exposure indexes were within the scope of relevant standards. Key words: clay; radionuclide; Longquan celadon ware 0 引 言 随着社会生活的不断发展，环境中的各种辐射源引起人们的广泛关注[1] 。天然本底辐射是环境辐 射水平的主要贡献者，也是人类所受年有效剂量的主要来源[2]。瓷土作为各种建筑材料以及陶瓷制品的主要原料，其放射性元素的分布及含量直接影响陶瓷制品的放射性水平。 瓷土又名高岭土，是以高岭石或多水高岭石为主要矿物成分的土状或泥状的岩石，其化学成分以富钾、高硅、贫铝、低铁为特征。瓷土中的天然放射性物质主要包括232Th、226Ra、和40K三个天然衰变系及其他放射性核素，这些核素在不同地域、不同岩石类型、不同土壤类型和不同水域中的含量差别 很大。龙泉有中国青瓷之都的美誉，是全国的主要 青瓷生产基地。然而，目前对于龙泉青瓷瓷土的放射性核素水平分析的研究非常少。为此，本文通过对龙泉市瓷土矿中放射性核素含量的研究反映该区域的瓷土矿辐射水平，进而评估青瓷制品的放射性含量水平。 1 概 况 龙泉市位于浙江省西南部的浙闽赣边境，地理坐标北纬27° 42'-28° 20'，东经118° 42'-119° 25'。由于受到地质构造和新构造运动的抬升影响，龙泉是浙江省内海拔最高的山地地貌区域之一，东南和西北部山脉绵亘，龙泉溪从西南向东北贯穿中部，群山平行于河谷对称分布，西北部为仙霞岭山脉，东南部为洞宫山脉，中部为龙泉溪大小不一的
抗原,抗体,受体,配体,补体,细胞因子的概念
抗原，抗体，受体，配体，补体，细胞因子的概念 1。抗原与抗体： 抗原是一种能诱发机体产生特异性免疫反应的大分子物质，如蛋白质、多糖、核酸等，在自然界中抗原分布很广，如细菌、病毒、组织细胞、血细胞、血清蛋白、毒素、花粉等都含有抗原。通过人工方法也可以改造抗原或合成抗原。外来抗原进入机体以后能诱导机体产生特异的免疫反应（抗原的这种能力叫做抗原性），这种免疫反应是通过淋巴细胞来完成的。淋巴细胞分为T淋巴细胞和B淋巴细胞两种。T淋巴细胞受到抗原刺激就会产生排除抗原的反应。B淋巴细胞受到抗原刺激后就会分经为浆细胞，浆细胞则能产生抗体，抗体也就是免疫球蛋白（Ig）,它能够识别相对应的抗原，并且与抗原特异性结合，这样就在体内中和或者排除抗原，保护了机体不受异物的侵犯。抗原有一个最重要的特性就是它具有特异性（即专一性）和选择性。例如抗原甲诱导的免疫反应只针对抗原甲而不针对无关的抗原乙或丙。同样，抗原乙诱导的免疫反应也只针对抗原乙，而不针对无关的抗原甲或丙。因此，抗体也是特异地与某种抗原结合的，如针对感染因素的不同，就有抗细菌抗体、抗病毒抗体、抗真菌抗体、抗寄生虫抗体、抗毒素抗体等等。借助抗原体和抗体之间免疫反应的这种专一的特异性，就可以通过检验方法来鉴定抗原或抗体，用于疾病诊断。 由此看来，人体有一种自我保护的免疫功能，就是认识自身和识别异体，凡是异体的物质即可通过人体的免疫系统排出去。人的血清中也有多种针对自身抗原的抗体，属于生理性抗体，可以清
除衰老、退变的自身组织（这叫作自身免疫反应），这种自身抗体含量极低，不会破坏自身成分，但如果在病理情况下，机体针对自身的组织、血液成分产生大量自身抗体就要严重破坏自身的组织，由此产生的疾病称“自身免疫性疾病”。 2。配体： 同锚定蛋白结合的任何分子都称为配体。在受体介导的内吞中, 与细胞质膜受体蛋白结合,最后被吞入细胞的即是配体。根据配体的性质以及被细胞内吞后的作用, 将配体分为四大类:Ⅰ.营养物, 如转铁蛋白、低密度脂蛋白(LDL)等; Ⅱ.有害物质, 如某些细菌; Ⅲ.免疫物质, 如免疫球蛋白、抗原等; Ⅳ.信号物质, 如胰岛素等多种肽类激素等。 3。受体： 细胞表面或亚细胞组分中的一种分子，可以识别并特异地与有生物活性的化学信号物质（配体）结合，从而激活或启动一系列生物化学反应，最后导致该信号物质特定的生物效应。 通常受体具有两个功能： （1）识别特异的信号物质--配体，识别的表现在于两者结合。配体，是指这样一些信号物质，除了与受体结合外本身并无其他功能，它不能参加代谢产生有用产物，也不直接诱导任何细胞活性，更无酶的特点，它唯一的功能就是通知细胞在环境中存在一种特殊信号或刺激因素。配体与受体的结合是一种分子识别过程，它靠氢键、离子键与范德华力的作用，随着两种分子空间结构互不程度增加，相
第五章 放射性核素成像
第五章放射性核素成像 第6题第10题 5-1 RNI的技术特点是什么？ 答：RNI基本上是功能性显像，可以进行功能性的量化测量，安全性好。 5-2 放射性制剂中放射性核素起什么作用？为什么？ 答：可显示被研究物质在机体内的输送、集聚和代谢，获得定位、定性、定量及动态变化结果。所以有这样的结果是因为同位素之间的化学性质相同。当被研究物质被同类同位素标记时，被研究物质的分子结构不会发生改变，它会与未被标记的物质一样参加所有的生理、生化过程。 5-3 原子核的稳定性可以从哪几个方面进行考查？ 答：比结合能的大小，原子核最后一个核子的结合能大小，原子核中的中子数与质子数之比与稳定原子核中的电子数与质子数之比的偏差大小。 5-4 表示放射性核素衰变快慢的三个物理常数间的关系是什么？ 答： 5-5 为什么临床上愿意用短寿命的核素？ 答：从A=λN＝1／τ可得出：当N一定时，τ越小，A越大；当A一定时，τ小者所需核素的数量N越小。 5－6求MO－TC发生器提取子核的最佳时间。
5-7 核衰变的随机性具有体表现在哪些方面？ 答：随机性表现在核衰变的方式、衰变的时刻、辐射粒子出现在空间某位置上。上述随机性又造成测量对象、环境固定情况下，探测器一次性计数的随机性。 5-8 两计数的相对偏差为50%，平均计数为1600，求该计数测量的信噪比及m大小。 答： 5-9 什么是准直器的焦点长度？其临床意义是什么？ 答：焦点近限与焦点无限的距离之差称为焦点长度。其临床意义是在焦点长度的厚度层内的组织与器官可成较清晰的像，其分辨距离可控制2倍的最小分辨距离之内。 5-10什么是核素的辐射能谱？它与哪些因素有关？ 答：辐射能谱就是光子能量与对应计数大小的关系曲线。辐射能谱与闪烁晶体的发射光谱及光电倍增管的光谱响应有关。 5-11 γ照相机探头给出的位置信号和Z信号在γ照相中的作用是什么？ 答：位置信号确定了光电管与像点在二维空间上的位置对应，Z信号控制像点的灰阶。 5-12 如何提高γ照相机中的测量灵敏度？ 答：γ照相机中的计数是对γ光子中最高能量的计数，所以幅度分析器的窗位要准确与辐射能谱中的全能峰对应。为此常采用多道幅度分析器作出辐射能谱，找
放射性配体受体结合试验
放射性配体受体结合试验 1、定义: 放射性配基与受体结合分析简称为受体放射分析（radioassay of receptors），它是应用放射性核素标记配基与特异受体相结合，研究受体的亲和力和受体的数量，以及研究受体亚型的常用方法。 2、原理: 1）、放射性标记配基（激动剂或拮抗剂）和组织、细胞，或含有受体的制剂一起温育，使受体和配基充分结合，形成受体-配基复合物，终止反应后，用过滤或离心的方法除去未被结合的标记物，测定滤膜或沉淀物中的放射性，即可计算出和配基结合的受体的量。 2）、放射配基与受体制备物（含受体的组织或细胞制备物）作用时，其结合形式有两种，一种是配基与受体的特异性结合，其特点是亲和力高；且由于受体有限，故具有饱和性。另一种是配基与受体制备物的非受体分子的结合，称为非特异性结合。其特点是亲和力低但结合点多，不易饱和。用放射性配基研究特异性受体时，必须设法减除非特异性结合。一般采用的方法是制备总结合管和非特异结合管，两者计数之差即为特异性结合量。 总结合管：将放射性配基与受体制备物反应，除去游离的放射性配基，测定结合的放射性配基的计数，（其中包含特异性结合与非特异性结合，称为总结合）。 非特异性结合管：将大量（一般为500－1000倍）非标记特异性配基与标记的放射性配基相混，然后共同与受体制备物反应。由于非标记配基与标记配基两者比例悬殊，所以受体几乎全部被非标记配基饱和，标记配基只能与组织制备物中的非特异结合位点结合。这时测出的标记配基的结合量，反映的是非特异结合量。用总结合管的计数减去非特异结合管的计数，即可得到特异结合计数。
3、分类： RBA用放射性核素来标记配基，与相应的受体进行特异性结合反应，可对受体的性质进行定性和定量的分析。 1、定性RBA：是通过反应的量效关系的变化来判断受体的类型，单位点或多位点结合式，及受体与配体结合的特点，反应的可逆性、协作性等。 2、定量RBA：是在已知配体与受体反应性质的基础上，通过结合反应，给出一定量的组织或细胞中能与该放射性配体结合的受体数及结合的平衡解离常数或结合位点数（最大结合容量）。 4、实验材料: 动物组织 仪器（组织匀浆机、旋涡混合器、低温高速离心机、电热恒温水温箱、-80℃冰箱、制冰机、抽虑瓶、液闪仪等） 材料（ 2ml/6ml分离管、10ul/200ul/1ml枪头、微纤维滤纸等） 药品（放射性配基、各种非标计化合物等） 5、实验具体步骤：
受体
受体 受体是一类存在于细胞膜、胞浆或细胞核内的，能与细胞外专一信号分子结合进而激活细胞内一系列生物化学反应，使细胞对外界刺激产生相应的效应的特殊蛋白质(糖蛋白或脂蛋白构成的生物大分子)。与受体结合的生物活性物质统称为配体（ligand)。受体与配体结合即发生分子构象变化，从而引起细胞反应，如介导细胞间信号转导、细胞间黏合、胞吞等过程。 1简介 受体在药理学上是指糖蛋白或脂蛋白构成的生物大分子，存在于细胞膜、胞浆或细胞核内。不同的受体有特异的结构和构型。 受体在细胞生物学中是一个很泛的概念，意指任何能够同激素、神经递质、药物或细胞内的信号分子结合并能引起细胞功能变化的生物大分子。 受体是细胞膜上或细胞内能识别生物活性分子并与之结合的成分，它能把识别和接受的信号正确无误地放大并传递到细胞内部，进而引起生物学效应。 在细胞通讯中，由信号传导细胞送出的信号分子必须被靶细胞接收才能触发靶细胞的应答，接收信息的分子称为受体，此时的信号分子被称为配体(ligand)。在细胞通讯中受体通常是指位于细胞膜表面或细胞内与信号分子结合的蛋白质。 2功能 受体是细胞表面或亚细胞组分中的一种分子，可以识别并特异地与有生物活性的化学信号物质（配体）结合，从而激活或启动一系列生物化学反应，最后导致该信号物质特定的生物效应。通常受体具有两个功能： (1)．识别特异的信号物质--配体，识别的表现在于两者结合。配体，是指这样一些信号物质，除了与受体结合外本身并无其他功能，它不能参加代谢产生有用产物，也不直接诱导任何细胞活性，更无酶的特点，它唯一的功能就是通知细胞在环境中存在一种特殊信号或刺激因素。配体与受体的结合是一种分子识别过程，它靠氢键、离子键与范德华力的作用，随着两种分子空间结构互补程度增加，相互作用基团之间距离就会缩短，作用力就会大大增加，因此分子空间结构的互补性是特异结合的主要因素。同一配体可能有两种或两种以上的不同受体，例如乙酰胆碱有烟碱型和毒蕈型两种受体，同一配体与不同类型受体结合会产生不同的细胞反应。如Ach可以使骨骼肌兴奋，但对心肌则是抑制的。 (2)．把识别和接受的信号准确无误的放大并传递到细胞内部，启动一系列胞内生化反应，最后导致特定的细胞反应。使得胞间信号转换为胞内信号。 3.受体的主要特征 (1)．特异性受体与配体结合的特异性是受体的最基本特点，保证了信号传导的正确性。配体和受体的结合是一种分子识别过程，它依靠氢键、离子键与范德华力的作用使两者结合，配体和受体分子空间结构的互补性是特异性结合的主要因素。受体只存在于某些特殊的细胞中。如激素作用的靶细胞，神经末梢递质作用的效应器细胞。黄体生成素可作用于睾丸的间质细胞，就是因为间质细胞有其受体；而卵泡刺激素只能作用于曲细精管的支持细胞。受体还能识别配体，并能与其活性部位发生特异性结合。如子宫细胞中的雌激素受体只能与17－β羟二醇结合，而不能与17-α羟雌二醇结合，更不能与睾酮和孕酮结合, 特异性除了可以理解为一种受体仅能与一种配体结合之外，还可以表现为在同一细胞或不同类型的细胞中，同一配体可能有两种或两种以上的不同受体；同一配体与不同类型受体结合会产生不同的细胞反应，例如肾上腺素作用于皮肤粘膜血管上的α受体使血管平滑肌收缩，作用于支气管平滑肌上的β受体则使其舒张。 (2)．高度的亲和力受体与其相应的配体有高度的亲和性。一般血液中激素的浓度很低，每升只有10～10摩尔。但仍足以同其受体结合，发挥正常的生理作用。这说明受体对激素的亲和力很强。(3)．饱和性配体与受体结合的饱和性受体可以被配体饱和。特别是胞浆受体，数量较少,少量激素就可以达到饱和结合。如在对甾体激素敏感的细胞中胞浆受体的数目最高每个细胞含量为10万个，雌激素受体，每个细胞中含量只有1000～50000个。故在一定浓度的激素作用下可以被饱和，而非特异性结合则不能被饱和 (4)有效性：受体与配体结合后一定要引起某种效应。激素、神经递质与受体结合都可以引起生理效应。如肝细胞上的结合蛋白能与肾上腺素或胰高血糖素结合，从而激活磷酸化酶，引起糖原分解。这种能引起血糖升高的特异性结合蛋白，可以叫做受体；而与催乳激素结合的蛋白，结合后在肝内引起什么功能
空气中放射性核素的γ能谱分析方法
空气中放射性核素的γ能谱分析方法 1 范围 本标准规定了高纯锗（HPGe）γ能谱仪测定空气中γ放射性核素组成及其活度浓度的方法，Ge（Li）探测器和碘化钠探测器可参照本标准执行。 本标准适用于空气中放射性核素的γ能谱分析。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 11713—2015 高纯锗γ能谱分析通用方法 GB/T 11743—2013 土壤中放射性核素的γ能谱分析方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 气溶胶 aerosol 固体或液体微粒物质在空气或其他气体介质中形成的气体分散体系。含有放射性核素的气溶胶称为放射性气溶胶。 3.2 空气取样器 air sampler 利用抽吸的方法把气溶胶微粒或气态碘等收集或阻留在过滤介质上的装置。 3.3 呼吸带 breathing zone 操作人员的口腔和鼻孔附近的区域。操作人员在完成规定任务的过程中，该处的空气经口和鼻吸入人体。 3.4 个人空气取样器 personal air sampler 工作人员个人佩带的空气取样器，用以得到有代表性的呼吸带的空气样品。
4 材料与设备 4.1 空气采样系统 空气采样系统主要包括空气取样器、流量测量与控制装置和抽气动力。 4.2 过滤介质 应根据取样目的和采集对象，选用合适的过滤介质。过滤介质的有效采样面积应与空气取样器采样窗面积相符。本文件推荐常用的三种用途的过滤介质： a）超细玻璃纤维滤纸：用于采集气溶胶微粒； b）活性炭滤纸：用于采集气态元素态碘和气溶胶微粒； c）活性炭滤筒：用于采集气态有机碘化物。 4.3 流量测量与控制装置 流量测量与控制装置宜具有即时流量显示、流量调节和采集体积累积等功能，流量测量装置应经法定计量单位标定，精度应好于5%。 4.4 抽气动力 抽气动力应与流量控制装置联动实现流量调节和维持流量恒定功能。 4.5 样品盒 它用于装过滤介质样品供γ能谱仪直接测量，样品盒材质宜选用聚乙烯。 4.6 γ能谱仪 HPGeγ能谱仪是测定放射性物质γ射线能量的仪器，它由屏蔽室、探测器、电子学系统、计算机和输出打印等设备组成，其相关性能指标要求参见GB/T 11713-2015的第3章。γ能谱仪应按规定周期由法定计量部门检定。 5 采样 5.1 采样原则 根据监测类型分为环境空气采样、工作场所空气采样和个人空气采样。空气样品的采样位置、时间和采样数量要有代表性。 5.2 环境空气采样 环境空气采样指在核设施、辐射源或非密封源放射工作场所等边界外的环境中进行的空气采样，主要用于环境空气辐射水平的监测和控制。环境空气采样应按具体的辐射环境空气监测方案进行。空气的采样点应选择在周围没有树木、没有建筑物影响的开阔地，或在没有高大建筑物影响的建筑物的无遮盖平台上。在事故空气污染监测时，要特别注意采样的时效性和地理分布情况。 5.3 工作场所空气采样 工作场所空气采样指在核设施、辐射源或非密封源放射工作场所等边界内进行的空气采样，主要用于工作场所空气辐射水平的监测。在没有个人空气取样器的情况下，可用于吸入空气的内照射个人剂量