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使用ELISAcalc软件绘制标准曲线以及批量计算样品浓度的教程

如何使用ELISAcalc软件绘制标准曲线以及批量得出样品浓度此处选用的是“Logistic曲线拟合2（四参数）”模型。

1）输入数据。这里中间的数据框中要输入标准品STA A至STA F的浓度（后面测出的结果的单位和此标准品单位一致）与吸光值。在左侧“扣除本底”处可以输入空白孔（只加显色液及终止液，）的吸光值，如果没有做，则就不用填了。

2）“回/拟合模型”选择“Logistic曲线拟合2（四参数）”方式。

3）点击“回归/拟合”显示标准曲线。

4）点“回归方程”显示参数（内容可以直接复制）

5）点“由Y计算X”计算样品浓度。在空格中输入样品的吸光值，回车或点击“计算”。

即能计算对应的浓度。（技巧：可以在表格中复制所有样品的Y值，在软件中点击“粘

贴”按钮，就可以得出所有的X值哦！全部计算完可以点击“复制”按钮将结果复制下来，粘贴到EXCEL表格里面），另：若数值超出曲线范围，则有可能得不到结果，如下图0.468的Y值所示。

标准物质与标准样品

1 概述在国际上标准物质和标准样品英文名称均为“Reference Materials”，由 ISO/REMCO组织负责这一工作。在我国计量系统将“Reference Materials”叫为“标准物质”，而标准化系统叫为“标准样品”。实际上二者有很多相同之处，同时也有一些微小差异（见表1）。 2 标准物质的分类与分级 2.1 标准物质的分类根据中华人民共和国计量法的子法—标准物质管理办法（1987年7月10日国家计量局发布）中第二条之规定：用于统一量值的标准物质，包括化学成分标准物质、物理特性与物理化学特性测量标准物质和工程技术特性测量标准物质。按其标准物质的属性和应用领域可分成十三大类，即：

l 钢铁成分分析标准物质； l 有色金属及金属中气体成分分析标准物质； l 建材成分分析标准物质； l 核材料成分分析与放射性测量标准物质； l 高分子材料特性测量标准物质； l 化工产品成分分析标准物质； l 地质矿产成分分析标准物质； l 环境化学分析标准物质； l 临床化学分析与药品成分分析标准物质； l 食品成分分析标准物质； l 煤炭石油成分分析和物理特性测量标准物质； l 工程技术特性测量标准物质； l 物理特性与物理化学特性测量标准物质。 2.2 标准物质的分级我国将标准物质分为一级与二级，它们都符合“有证标准物质”的定义。 2.2.1 一级标准物质一级标准物质是用绝对测量法或两种以上不同原理的准确可靠的方法定值，若只有一种定值方法可采取多个实验室合作定值。它的不确定度具有国内最高水平，均匀性良好，在不确定度范围之内，并且稳定性在一年以上，具有符合标准物质技术规范要求的包装形式。一级标准物质由国务院计量行政部门批准、颁布并授权生产，它的代号是以国家级标准物质的汉语拼音中“Guo”“Biao”“Wu”三个字的字头“GBW”表示。 2.2.2 二级标准物质二级标准物质是用与一级标准物质进行比较测量的方法或一级标准物质的定值方

环境标准样品DOC

环境标准样品标准样品是指具有足够均匀的一种或多种特性量值经过充分确定了的材料或物质，主要用于评价测量方法、校准测量仪器、或确定其他材料与物质的特性量值。国家标准样品是经国家权威部门认证的标准样品，其一种或多种特性量值是通过建立了溯源性的程序确定，并可溯源到准确复现表示该特性量值的计量单位，且每个标准值都附有不确定度。环境标准样品是为了满足环境监测分析工作需要的一类标准样品。国家环境标准样品与国家环境监测分析方法标准一样，是国家环境标准体系的重要组成部分，作为全国环境监测分析的测量标准、量值传递的载体，是有效开展环境监测量值溯源的重要工具。国家环境标准样品一般由国家环境保护总局和全国标准样品技术委员会组织专家进行技术评审，由国家质量监督检验检疫总局批准、颁布并授权生产，以“GSB”进行编号，目前已有230余种，主要包括气体、水、土壤、生物和工业固体废弃物等环境标准样品以及各种环境监测分析用标准溶液。为了保证全国环境监测分析数据的可溯源性和准确可比性，国家环境保护总局一直非常重视国家环境标准样品的研究、制备、生产和应用工作，如专门发文“指定国家环境保护总局标准样品研究所负责环境标准样品的研

究、制备和生产工作”、并要求“在对各级环境监测分析实验室及分析人员进行质量控制考核；校准、检验分析仪器；制备标准溶液；进行分析方法验证以及其他环境监测工作活动中，都应使用国家环境标准样品”。我国国家环境标准样品现已广泛应用于全国环境保护系统及其他各行业的计量认证、实验室认可、质控考核、方法验证、技术仲裁等工作中。环境标准样品目录一、气体标准样品（1） 1.1、选用指南 1.2、气体标样 1.3、气瓶 1.4、气瓶更换相关服务二、液体标准样品（2） 2.1、选用指南 2.2、水质标样 2.3、有机标样 2.4、大气标样三、固体标准样品（7） 3.1、选用指南 3.2、固体标样四、能力验证样品（8） 4.1、选用指南 4.2、能力验证样品

Excell软件绘制ELISA标准曲线

怎么用Excell软件绘制ELISA标准曲线许多试剂检测都涉及到标准曲线的问题,究竟如何绘制或制作标准曲线呢? 用Excell和SPSS的软件能做出来吗?,怎么操作?能一起求出计算公式吗? 有没有专门的软件来处理呢?介绍几种? 希望有这方面经验的介绍自己的经历,与大家分享,“与众同乐才是真的快了” 的确,标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。首先,做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意: 1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。 2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度最陡段,即曲线几乎成直线的范围内。 3、最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。 4、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。 5、标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。 6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999.

怎样绘制标准曲线? 标准曲线浓度得到后,可通过计算器、Excell或SPSS统计软件进行绘制,并得到相关的回归方程(即计算公式和相关系数(回归系数,个人认为,Excell 软件比较好用一些;SPSS也行,不过是英文的,初学者不是很容易掌握;计算器嘛太麻烦了,所以现在一般不用。双抗夹心法ELISA拟和曲线: 拟和曲线: 打开EXCEL软件;在工作表中输入第一行:浓度值,如0 10 50 100 400 输入第二行:该浓度下的调整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42 选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型”中选择“xy散点图”;在“子图表类型”中选择“折线散点图”,按“下一步”;选择“系列产生在行”,按“下一步”;数据标志,可以填写:如数据y 轴,OD值;数据x轴,浓度;按下一步,点击完成。可得曲线图。单击曲线,按右键,选择“添加趋势线”,在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值。得到公式和R平方值。也可以用上面说的方法,在公司已经提供的图表上,双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和新的曲线。计算浓度: 举例:第一次实验: 标准曲线为:

标准曲线的制作方法

标准样品的准备由于你做的是基因表达分析，样品的准备就比较简单了，因为你要知道都是相对的数值（你的对照样品和实验样品中基因表达的比值），这样就不需要知道精确的拷贝数，所以标准品也就无须知道精确的拷贝数，只需知道稀释的倍数就可以了。你实验中的标准品可以是来源比较丰富的细胞或组织的RNA转录得到的cDNA。将这种cDNA进行梯度的稀释，可以是稀释10倍，100，1000，10000等倍（具体到你的实验要根据具体的情况来调整稀释倍数。最好能作一个预实验来看看什么样的稀释倍数比较适合你的这种基因的扩增）。而对于各个稀释倍数我们要对它的拷贝数进行赋值，这个值当然不是标准品中真实含有的基因数量（在基因表达分析中也不需要），而是我们根据稀释倍数给每一个稀释度人为赋予的拷贝数，这只是为了方便实验最终结果的计算而已。比如我们把前面稀释十倍的样品赋值为10000个拷贝，100倍的赋值为1000个拷贝依次类推把10000倍的赋为10等。要注意，赋值的数目的倍数差异和你稀释的倍数是一样的，比如前面是10稀释，后面赋值也是10倍变化。如何做标准曲线在定量实验中标准品是要和你的未知样品一起进行定量实验的，这样在实验结束，无论是标准品还是未知样品都将跑出曲线，获得Ct值。那么我们先可以把未知样品放到一边，对于标准品来说，我们既获得了Ct值，还知道他们的拷贝数（虽然这个拷贝数是我们自己赋予的）。这样我们可以通过标准品的Ct值和拷贝数做一条标准曲线（以拷贝数为横坐标，而Ct值为纵坐标）。一旦作出了标准曲线，而未知样品的Ct值我们知道（通过实验求得的），这时候就在标准曲线上进行定位，就可以得到未知样品的拷贝数了。事实上，操作起来没有那么复杂，你只需要告诉软件你的哪个孔是标准品，哪个是未知样品，以及标准品的拷贝数等必要信息，软件会自动帮你把标准曲线和未知样品的拷贝数计算出来。举例来说如何进行设置先进入软件，在板设置中选择所放样品的位置，并标上unknow或standard等信息。选择要使用的荧光染料。

标准曲线法与标准加入法的区别

1 标准曲线法 1.1标准曲线法的计算公式在一定条件下，标准曲线是一条直线，直线的斜率和截距可以用最小二乘法求得。现在好多仪器软件都能自动生成标准曲线，所以一小部分版友不清楚标准曲线的具体计算方法。本人查找了一些资料，找到标准曲线的斜率和截距的计算方法，和大家分享。工作曲线可以用一元线性方程表示： y=a+bx （1）式中，x为标准溶液的浓度，y为相应的吸光度。使用最小二乘法确定的直线称为回归线，a,b称为回归系数。 b 为直线的斜率，可由下式求得：

1.2 灵敏度灵敏度是指该方法对单位浓度或单位量的待测物质的变化所引起的响应量变化的过程。一般用标准曲线的斜率b为方法的灵敏度，b越大，灵敏度越高。不要小看灵敏度，用处可大了。灵敏度由于仪器的不同，实验条件等的不同，在不断的变化。但在一定的实验条件下，灵敏度相对还是比较稳定的。所以，建议对灵敏度也做个质量控制图，具体做法见我另一个帖子。每次标准曲线做好以后，观察灵敏度是否在一定的范围内维持稳定。如果发现灵敏度突然降低，就需要考虑，是否是仪器出问题了。火焰首先考虑雾化器是否堵塞，石墨炉首先考虑石墨管是否是烧坏。解决方法是用通丝清理雾化器，更换石墨管后继续测定标准曲线，带灵敏度稳定后进行样品测定。还有，在打开一瓶新的标准溶液的时候，在仪器进行维修以后，一定要注意灵敏度的变化。 1.3线性范围线性范围这个大家都比较清楚，主要从相关系数r看，一般要求r大于等于三个九。我在这里和大家分享的是，我想了好久才想开的一个问题。之前看好多书上

后来专门做了好多次实验，还是一直是直线在，只是有时候浓度高时，线性不好，高浓度点不在标准曲线上，而是在标准曲线的下面，而且离拟合的标准曲线比较远。遇到这种情况，标准曲线的线性相关系数就很差，有时候才一个九，如图2所示。最后我终于想明白了，如果自己用手动拟合的话，用平滑的曲线去连接所有点的话，你就会发现，如果在线性范围内，连接起来就是直线，如果超出了线性范围，连接起来就是一条弯曲的曲线。从弯曲的拐点开始，就已经超出了线性范围，如图3所示。所以，判断是否超出线性范围，个人觉得不是看是否弯曲，软件用最小二乘法拟合的一次曲线，永远是直线。要看你的高浓度点是否在拟合的标准曲线上或离得比较近，相关系数是否在三个九以内。如果不在，从拐点开始的那个点，就超出了线性范围，应该删除，从新拟合。 1.4检出限检出限是指对某一特定的分析方法在给定的置信水平内可以从样品中检测待测物质的最小浓度或最小量。

环境空气采样规范

环境空气采样作业指导书 1.采样工作流程 1.1监测项目调查现场监测人员认真了解监测对象的生产设备、工艺流程，清楚主要污染源、主要污染物及其排放规律，查看环保措施落实和环保设施运行情况。监控生产负荷，调查现场环境（气象、水温、污染源）有关参数和周边环境敏感点，检查监测点位符合性及安全性，搜集与编制监测报告有关的各种技术资料并做好相关记录。 1.2实验室采样前准备现场监测人员领取采样容器、滤膜，准备现场监测和采样所用的仪器设备、器具、样品标签、现场固定剂等，并完成设备的运行检查。包括：采样器、风速风向仪、气温气压计、GPS；吸收瓶（内装配制好的吸收液，装箱，含空白、平行）、滤膜（含空白和备用膜）、镊子、凡士林、剪刀、手套、封口膜、电池、原始记录单、交接单、样品标签和笔等相关仪器物品。在领用时，要检查并填写仪器的使用记录，尤其检查采样流量是否需要校准，并对采样器进行气密性检查。 1.3现场采样前准备，是否适宜进行采样。，局地流场、大气稳定度等气候条件，确定监测点位。 1.4.气态污染物，核对样品编号，并将采样流量调至所需的采样流量，开始采样。记录采样流量、开始采样时间、气样温度、压力等参数。气样温度和压力可分别用温度计和气压表进行同步现场测量。 1.5颗粒物采样，取出滤膜夹，用清洁干布擦掉采样头内滤膜夹及滤膜支持网表面上的灰尘，将采样滤膜毛面向上，平放在滤膜支持网上。同时核查滤膜编号，放上滤膜夹，安好采样头顶盖。启动采样器进行采样。记录采样流量、开始采样时间、温度和压力等参数。，取下滤膜夹，用镊子轻轻夹住滤膜边缘，取下样品滤膜，并检查在采样过程中滤膜是否由破损现象，或滤膜上尘的边缘轮廓不清晰的现象。若有，则该样品膜作废，需重新采样。确认无破裂后，将滤膜的采样面向里对折两次放入与样品膜编号相同的滤膜袋（盒）中。记录采样结束时间、采样流量、温度和压力参数。 1.6采样记录相关事项环境空气采样记录包括：监测项目、样品批号、采样点位、采样日期、采样时间（开始、结束）、样品编号、气温、大气压、采样流量、采样体积、天气状况、风速、风向、采样人、审核人。填写采样记录注意事项：样品批号和样品种类一定要填写；标况体积一定要计算正确；发生异常情况，备注栏和副架说明处一定要填写清楚；记录单上不能有涂改的痕迹，修改要规范； 1.7样品转移、交接。工作结束，现场监测人员应妥善保管原始记录，安全、规范运输样品，及时与样品管理员进行交接并填写交接记录。

运用Ecel做标准曲线

E x c e l绘制标准曲线全图片教程随着计算机的日益普及，越来越多的检验工作者希望能从一些烦琐的工作中解脱出来，如：绘制标准曲线、绘制质控图、计算检测值等等。当然借助检验科办公系统理论上是最方便的，但很多单位是没有检验科办公系统的。其实借助Microsoft的Excel电子表格工具对检验工作也会带来很大的便利。 Excel是Microsoft offices系统的重要组成，它是界于WORD字处理软件与ACCESS数据库软件之间的电子表格工具，功能十分强大，特别适合于日常工作使用。使用得好，完全比目前所有的检验科办公系统优秀。现就先介绍一下如何使用Excel绘制标准曲线。首先，将数据整理好输入Excel，并选取完成的数据区，并点击图表向导，如下图所示。点击图表向导后会运行图表向导如下图，先在图表类型中选“XY散点图”，并选了图表类型的“散点图”（第一个没有连线的）。点击“下一步”，出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改，如果是纵向列表就改选“列”。如果发现图不理想，就要仔细察看是否数据区选择有问题，如果有误，可以点击“系列”来更改，如下图。如果是X值错了就点击它文本框右边的小图标，结果如下图：

出现上图后，如图在表上选取正确的数据区域。然后点击“下一步”出现图表选项界面，如下图，上应调整选项，以满足自己想要的效果。点击“下一步”，现在一张带标准值的完整散点图就已经完成，如下图。完成了散点图，现在需要根据数据进行回归分析，计算回归方程，绘制出标准曲线。其实这很简单，先点击图上的标准值点，然后按右键，点击“添加趋势线”。如下图。由于本例是线性关系，在类型中选“线性”如下图点击“确定”，标准曲线就回归并画好了。标准曲线是画好了，可是我们怎么知道回归后的方程是什么样呢这了简单，点击趋势线（也就是我们说的标准曲线）然后按右键，选趋势线格式，如下图：在显示公式和显示R平方值（直线相关系数）前点一下，勾上。再点确定。好了，现在公式和相关系数都出来了。如图：呵R的平方达，线性相当好。可是有时候有的项目是成指数增加的，散点图如下图，将左下方的对数刻度选中，确定。完整的一个半对数标准曲线就做好了。利用Excel制作标准曲线简单吧如果认真调整参数可以得到不同的效果，大家多研究一下吧。有人说标准曲线是拿来用的，要是能输入信号值就可以得出浓度那就好了，其实使用Excel也能很自如的处理。具体请听下回分解。

标准曲线的绘制吸光度标准曲线绘制

标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制采集样本：广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间：2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人：何洁梅一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录 ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组 00000000

二、各采集样本汇总图样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L 样本2测定得待测血清ALT活力单位为 97U/L 样本3测定得待测血清ALT活力单位为 135U/L 样本4测定得待测血清ALT活力单位为 70U/L 样本5测定得待测血清ALT活力单位为 148U/L 样本6测定得待测血清ALT活力单位为

45U/L 样本7测定得待测血清ALT活力单位为 98U/L 四、采集数据处理结果分析 1．数据总结样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常 150是非正常 297是非正常 3135是非正常 470是非正常 5148是非正常 645是非正常 798是非正常平均值92均为“是”均为“非正常” 2.针对数据处理结果的分析采集的7组数据经标准曲线测量后，得到的ALT活力单位值均大于40，即均为非正常值，综上，认为待测血清中ALT 含量超于正常值。 3.针对源数据的分析

采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系，符合理论规律，但其他的数据误差较大。另外，比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。 4.经分析，总结可能的误差来源如下配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时，丙酮酸标准溶液的剂量都很小，容易造成误差。加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差，保温的时间，以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差，容易造成较大。如何用EXCEL绘制标准曲线 Excel是Microsoft offices系统的重要组成，它是界于WORD字处理软件与ACCESS数据库软件之间的电子表格工具，功能十分强大，特别适合于日常工作使用。使用得好，完全比目前所有的检验科办公系统优秀。现就先介绍一下如何使用Excel绘

标准曲线的作法

标准曲线的作法 (1)标准液浓度的选择：在制备标准曲线时，标准液浓度选择一般应能包括待测样品的可能变异最低与最高值，一般可选择5种浓度。浓度差距最好是成倍增加或等级增加，并应与被测液同样条件下显色测定。 (2)标准液的测定：在比色时，读取光密度至少读2-3次，求其平均值，以减少仪器不稳定而产生的误差。 (3)标准曲线图的绘制：一般常用的是光密度一浓度标准曲线。 ①用普通方格纸作图。图纸最好是正方形(长：宽=l：1)或长方形(长：宽=3 ： 2)，以横轴为浓度，纵轴为光密度，一般浓度的全距占用了多少格，光密度的全距也应占用相同的格数。在适当范围内配制各种不同浓度的标准液，求其光密度，绘制标准曲线，以浓度位置向上延长，光密度位置向右延长、交点即为此座标标点。然后，将各座标点和原点联成一条线，若符合Lambert-Beer氏定律，则系通过原点的直线。 ②若各点不在一直线，则可通过原点，尽可能使直线通过更多点，使不在直线上的点尽量均匀地分布在直线的两边。 ③标准曲线绘制完毕以后，应在座标纸上注明实验项目的名称，所使用比色计的型号和仪器编号、滤光片号码或单色光波长以及绘制的日期、室温。 ④绘制标准曲线：一般应作二次或三次以上的平行测定，重复性良好曲线方可应用。 ⑤绘制好的标准曲线只能供以后在相同条件下操作测定相同物质时使用。当更换仪器、移动仪器位置、调换试剂及室温有明显改变时，标准曲线需重新绘制。 ⑥标准曲线横坐标的标度：从标准液的含量换算成待测液的浓度。 1.5 原子吸收光谱分析的定量方法原子吸收光谱分析是一种动态分析方法，用校准曲线进行定量。常用的定量方法有标准曲线法、标准加入法和浓度直读法。如为多通道仪器，可用内标法定量。在这些方法中，标准曲线法是最基本的定量方法。 1.5.1 标准曲线法前面已经指出，原子吸收光谱和原子荧光光谱分析是一种相对测定方法，不能由分析信号的大小直接获得被测元素的含量，需通过一个关系式将分析信号与被测元素的含量关联起来。校正曲线就是用来分析信号（即吸光度）转换为被测元素的含量（或浓度）的“转换器”，此转换过程成为校正。之所以要进行校正，是因为同一元素含量在不同的试验条件下所得到的分析信号是不同的。校准曲线的制作方法是，用标准物质配制标准系列溶液，在标准条件下，测定各标准样品的吸光度值Ai，以吸光度值Ai（i＝1，2，3，4，5）对被测元素含量ci（i＝1，2，3，4，5）绘制校准曲线A＝f（c）。在同样条件下，测定样品的吸光度值Ax，根据被测元素的吸光度值Ax从校准曲线求得其含量Ci。校准曲线如图1－4所示。校准曲线的质量直接影响校准效果和样品测定结果的准确度。正确地制作一条高质量校准曲线是非常重要的，为此需要：（1）合理的设计校准曲线；（2）分析信号的准确测定；（3）正确绘制校准曲线。首先，从数理统计的观点出发合理设计校准曲线。根据一组实验点绘制校准曲线所遵循的原则是最小二乘原理，即要让实验点随机地分布在校正曲线的周围，并有尽可能多的实验点落在标准曲线上，使得由这些实验点绘制的标准曲线的标准偏差最小。从校准曲线的置信范围考虑，当实验点数目，<4时，置信系数较大且变化速率较快，置信范围较宽，由校正

环境标准汇总

环境标准汇总环境标准通过本节的学习，学生学习环境标准的定义，掌握我国环境保护标准的分类方法，掌握制订环境标准的原则，了解各环境要素的标准。环境标准就是为了保护人群健康、防止环境污染、促使生态良性循环，同时又合理利用资源，促进经济发展，依据环境保护法和有关政策，对环境中有害成分含量及其排放源规定的限量阈值和技术规范。一、分类“三级六类”标准体系 1.三级：国家级、地方级、行业级 2.六类环保标准：包括环境质量标准、污染物排放标准、环境基础标准、环境方法标准、环境标准物质标准、环保仪器设备标准。环境质量标准和污染物排放标准分国家标准和地方标准两级；基础标准、方法标准和标准物质标准只有国家标准。 ①环境质量标准：是为了保护人群健康、维持生态平衡和保障社会物质财富，并考虑技术经济条件，对环境中有害物质和因素所做的规定，是环境政策目标，是制订污染物排放标准的依据。 ②污染物排放标准（污染物控制标准）：是为了实现环境质量标准目标，结合技术经济条件和环境特点，对排入环境的污染物或有害因素所做的控制规定。问题：既然有了国家排放标准，为什么还允许制定和执行地方排放标准？国家标准是适用于全国范围的标准。我国幅员辽阔，人口众多，各地区对环境质量要求也不相同，各地工业发展水平、技术水平和构成污染的状况、类别、数量等都不相同；环境中稀释扩散和自净能力也不相同，完全执行国家质量标准和排放标准是不适宜的。为了更好地控制和治理环境污染，结合当地的地理特点，水文气象条件、经济技术水平、工业布局、人口密度等因素，进行全面规划，综合平衡，划分区域和质量等级，提出实现环境质量要求，同时增加或补充国家标准中未规定的当地主要污染物的项目及容许浓度，有助于治理污染，保护和改善环境。地方标准应该符合以下两点：国家标准中所没有规定的项目；地方标准应严于国家标准，以起到补充、完善的作用。 ③环境基础标准：是在环境标准化工作范围内，对有指导意义的符号、代号、指南、程序、规范等所做的规定，是制订其他环境标准的基础。 ④环境方法标准：是在环境保护工作范围内，以试验、检查、分析、抽样、统计计算为对象制订的标准。

运用EXCEL做标准曲线

运用E X C E L做标准曲线 TPMK standardization office【 TPMK5AB- TPMK08- TPMK2C- TPMK18】

E x c e l绘制标准曲线全图片教程随着计算机的日益普及，越来越多的检验工作者希望能从一些烦琐的工作中解脱出来，如：绘制标准曲线、绘制质控图、计算检测值等等。当然借助检验科办公系统理论上是最方便的，但很多单位是没有检验科办公系统的。其实借助Microsoft的Excel电子表格工具对检验工作也会带来很大的便利。 Excel是Microsoft offices系统的重要组成，它是界于WORD 字处理软件与ACCESS数据库软件之间的电子表格工具，功能十分强大，特别适合于日常工作使用。使用得好，完全比目前所有的检验科办公系统优秀。现就先介绍一下如何使用Excel绘制标准曲线。首先，将数据整理好输入Excel，并选取完成的数据区，并点击图表向导，如下图所示。点击图表向导后会运行图表向导如下图，先在图表类型中选“XY散点图”，并选了图表类型的“散点图”（第一个没有连线的）。点击“下一步”，出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改，如果是纵向列表就改选“列”。

如果发现图不理想，就要仔细察看是否数据区选择有问题，如果有误，可以点击“系列”来更改，如下图。如果是X值错了就点击它文本框右边的小图标，结果如下图：出现上图后，如图在表上选取正确的数据区域。然后点击“下一步”出现图表选项界面，如下图，上应调整选项，以满足自己想要的效果。点击“下一步”，现在一张带标准值的完整散点图就已经完成，如下图。完成了散点图，现在需要根据数据进行回归分析，计算回归方程，绘制出标准曲线。其实这很简单，先点击图上的标准值点，然后按右键，点击“添加趋势线”。如下图。由于本例是线性关系，在类型中选“线性”如下图点击“确定”，标准曲线就回归并画好了。标准曲线是画好了，可是我们怎么知道回归后的方程是什么样呢？这了简单，点击趋势线（也就是我们说的标准曲线）然后按右键，选趋势线格式，如下图：

环境标准样品的主要用途与正确使用

环境标准样品的主要用途与正确使用一、主要用途 1、在评价和验证环境监测新方法方面的应用目前国际上普遍采用标准样品对新技术、新方法的准确度和精密度进行评价，因为这种评价方法比较方便和可靠。要研制或修订一个分析方法需要一个或多个良好特性的试样来评价该方法的性能特点，此时选择合适的标准样品显然是最恰当的。例如：美国环保局（EPA）在1971年曾推荐了一种测量环境空气中NO2的监测方法（即Jacobs-Hochheisev法），这是一种基于重氮化反应的比色方法，该方法有一个重要的假设条件是在所有浓度范围内，NO2的转化率是个常数（约35%）。EPA之所以推荐该方法主要是考虑到其曾作为健康方面的研究并具有良好的精密度，遗憾的是由于当时没有合适的NO2标准样品，未能对方法的准确性进行验证。等到1973年美国NBS（现在的NIST）研制出四种NO2渗透管标准样品之后，EPA重新评价该方法的准确性时却发现，NO2转化率并不是个常数，而是随着NO2浓度的增加而下降。在通过标准样品确认该方法存在较大的系统误差之后，EPA撤消了原来的推荐，并重新研究和推荐了三种新的NO2监测方法。 2、在检测分析实验室质量管理方面的应用标准样品是环境检测分析实验室开展质量管理工作的有力工具。选择标准样品作控制图，可以对实验室测量系统作周期性的检查，以确定测量的准确度和精密度的情况。控制图的控制限可根据标准样品提供的不确定度以及实验室的实际检测能力综合加以确定。在日常监测活动中，将标准样品与未知样品在相同的条件下进行测量，如果标准样品的测定结果落在控制限之外，说明测量系统脱离控制了，此时未知样品的测量结果应是无效的，实验室应该立即查找原因，采取措施加以纠正，重新进行标准样品的测定，直至标准样品的测定值落在控制限内，才能重新进行未知样品的测定。总之，在检测分析过程中进行适量标准样品的测定是保证实验室检测数据质量的一种切实可行的方法。 3、在实验室能力验证方面的应用通过对标准样品的检测，既可以对从事监测分析人员的个人能力进行验证，也可以对实验室的检测能力状况进行验证。前者如持证上岗考核，后者如实验室质控考核。应用标准样品进行能力验证已广泛用于实验室认可、计量认证以及有关监督评审等工作中。

环境标准物质

环境标准物质一、环境标准物质及其分类（一）环境计量环境计量是定量地描述环境中有害物质或物理量在不同介质中的分布及浓度（或强度）的一种计量系统。环境计量包括环境化学计量和环境物理计量两大类。环境化学计量是以测定大气、水体、土壤以及人和生物中有害物质为中心的化学物质测量系统；环境物理计量是以测定噪声、振动、电磁波、放射性、热污染等为中心的物理计量系统，有关计量项目在前述各章已有叙述。（二）基体和基体效应在环境样品中，各种污染物的含量一般在ppm或ppb甚至ppt级水平，而大量存在的其他物质则称为基体。目前环境监测中所用的测定方法绝大多数是相对分析法，即将基准试剂或标准溶液与待测样品在相同条件下进行比较测定的一种方法。这种用“纯物质”配成的标准溶液与实际环境样品间的基体差异很大。由于基体组成不同，因物理、化学性质差异而给实际测定中带来的误差，叫做基体效应。（三）环境标准物质环境标准物质是标准物质中的一类。不同国家、不同机构对标准物质有不同的名称，而且至今仍没有被普遍接受的定义。

国际标准化组织（ISO）将标准物质（Reference Material简称作RM）定义为这种物质具有一种或数种已被充分确定的性质，这些性质可以用作校准仪器或验证测量方法。RM可以传递不同地点之间的测量数据（包括物理的、化学的、生物的或技术的）。RM可以是纯的，也可以是混合的气体、液体或固体，甚至是简单的人造物体。在一批RM发放前，应确定其给定的一种或数种性质，以及足够的稳定性。通常在规定的不确定度范围内，适当小量的RM样品应该具备完整的RM的性质。ISO 还定义了具有证书的标准物质（Certified Reference Material简称 CRM）这类标准物质应带有证书，在证书中应具备有关的特性值，使用和保存方法及有效期。证书由国家权威计量单位发给。美国国家标准局（NBS）定义的标准物质称为标准参考物质（简称SRM），是由NBS鉴定发行的，其中具有鉴定证书的也称CRM。标准物质的定值由下述3种方法之一获得：①一种已知准确度的标准方法； ②两种以上独立可靠的方法；③一种专门设立的实验室协作网。SRM 主要用于：①帮助发展标准方法；②校正测量系统；③保证质量控制程序的长期完善。我国的标准物质以BW为代号，分为国家一级标准物质，和二级标准物质（部颁标准物质），国家一级标准物质应具备以下条件：（1）用绝对测量法或两种以上不同原理的准确、可靠的测量方法进行定值。此外，亦可在多个实验室中分别使用准确可靠的方法进行协作定值；（2）定值的准确度应具有国内最高水平；

标准曲线的制作

标准曲线的制作(附甲醛标液工作曲线图)：精确吸取上述甲醛标液（S2）：0.00，0.20，0.50，1.00，1.50，2.00 ml，分别置于50ml容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀，再分别吸取上述浓度溶液5.0ml于25ml比色管中，然后加入5.0ml乙酰丙酮溶液，摇匀，置40℃水浴中显色30min，以零管液为参比，于412nm处测吸光度，以吸取甲醛标液（S2）的体积为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制工作曲线。[2] 本法的优点： ①仅用1.00，5.00的环标刻度移液管吸取甲醛标液（S2）、50ml容量瓶定容，相当于国标中吸取甲醛标液（S2）的体积、定容的体积同时缩小10倍，但浓度相当；减少了由于不同刻度单标移液管之间的系统误差。 ②用吸取甲醛标液（S2）的体积ml数为横坐标，便于作图计算（计算方法见四、结果计算），提高了准确度和精确度。甲醛标液工作曲线图仪器名称：722N 可见分光光度计比色皿厚度：1.0cm 吸收波长：λ＝412nm HCHO标液浓度：C＝82.5600μg/mL 序号 1 2 3 4 5 6 吸取标液V，ml 0.00 0.20 0.50 1.00 1.50 2.00 吸光度，A 0.000 0.014 0.031 0.056 0.091 0.123 三、样品的测定：各吸取处理好的三个平行样品液5.0ml，加5.0ml乙酰丙酮溶液，摇匀，按标准曲线同样操作进行比色测定，测得吸光度A。[2] 如果样品褪色，则用水作参比液，吸取样品液5.0ml，加5.0ml水，摇匀，进行比色测定，测得吸光度Ad，则样品的吸光度为A－Ad。四、结果计算：由样品的吸光值A从甲醛标准曲线上查得相当于样品的体积V（ml），再换算成样品的浓度C（μg/mL）＝V×C（S2）/50 ，则甲醛的含量F计算公式如下： F＝C(S2) ×V ×100 50 m F–从织物样品中萃取的甲醛含量，mg/kg； C(S2)–甲醛标准溶液S2的浓度，μg/mL，即：mg/kg； V–读自工作曲线上相当于样品萃取的液中甲醛的体积，ml（因为吸取标液的体积与浓度反映在工作曲线上，是一一对应的，样品也同理）； 100–萃取样品用水的体积，ml； 50–制作标准曲线时，吸取甲醛标准溶液S2定容的体积，ml； m–试样的质量，g 。五、其它注意事项： ①定期校正标准工作曲线，因为过一段时间，吸光度会偏低，从而影响结果的准确性。 ②每次检测时，应保持条件的一致性，连贯性。

环保部标准样品研究所 - 环境保护部标准样品研究所

附件一：环境保护部标准样品研究所2015年非在编工作人员招聘计划表用人部门岗位名称岗位代码岗位职责招聘人数岗位条件报名电子邮箱所需专业学历学位其他条件环保部标准样品研究所辅助专业技术岗位（2级）（环境基体样品分析） 1、参与环境基体类有机标准样品及相关科研项目的申报及研究工作。 2、参与环境基质中有机污染物分析方法的开发及相关研究工作。 3、负责环境样品的分析检测工作。 4、负责指定仪器设备的日常维护和保养。 1 分析化学、环境化学、环境科学、仪器分析等相关专业硕士及以上遵纪守法，品行良好，身体健康；吃苦耐劳，工作踏实，条理清楚，责任感强；具备有机化学分析基础，熟悉GC、GC/MS、HPLC等分析仪器的使用和基本维护，具有一定环境基体样品前处理和分析经验、熟悉分析仪器设备者优先。 bys@https://www.wendangku.net/doc/f11884571.html,.c n 辅助专业技术岗位（2级）（有机分析实验员） 1、协助指定科研课题的研究。 2、负责标准样品分析测定。 3、协助指定项目的能力验证计划。 4、统筹管理实验室试剂、耗材等。 1 分析化学、环境化学、环境科学、仪器分析等相关专业本科及以上遵纪守法，品行良好，身体健康；吃苦耐劳，工作踏实，条理清楚，责任感强；具备有机化学分析基础，了解GC、GC/MS、HPLC等分析仪器的使用。 bys@https://www.wendangku.net/doc/f11884571.html,.c n

辅助专业技术岗位（2级）气体样品研制人员1、负责跟踪国内外气体标准样品的最新研究动态，开展气体标准样品的研制工作。 2、负责有机气体样品的分析方法开发及检测工作。 3、负责指定仪器设备日常维护和期间核查。 4、参与样品的制备和无机气体样品的分析检测。 5、参与实验室间比对、能力验证和质量考核活动。 1 环境化学、分析化学、环境科学、等相关专业博士遵纪守法，品行良好，身体健康；吃苦耐劳，工作踏实，条理清楚，责任感强；具有挥发性有机物分析或标样研制经验者优先。 bys@https://www.wendangku.net/doc/f11884571.html,.c n 辅助专业技术岗位（2级）气体分析检测人员1、负责气体样品的制备工作。 2、负责有机气体样品的分析方法开发及检测工作。 3、负责指定仪器设备日常维护和期间核查。 4、参与无机气体样品的分析检测。 5、参与实验室间比对、能力验证和质量考核活动。 1 环境化学、分析化学、环境科学、等相关专业硕士及以上遵纪守法，品行良好，身体健康；吃苦耐劳，工作踏实，条理清楚，责任感强；具有大气污染物分析或标样研制经验者优先。 bys@https://www.wendangku.net/doc/f11884571.html,.c n

水质监测标准样品

标准曲线的最小二乘法拟合和相关系数

标准曲线的最小二乘法拟合和相关系数（合肥工业大学控释药物研究室尹情胜） 1 目的用最小二乘法拟合一组变量（，，i＝1-n）之间的线性方程（y＝ax+b），表示两变量间的函数关系；（开创者：德国数学家高斯）一组数据（，，i＝1-n）中，两变量之间的相关性用相关系数（R）来表示。（开创者：英国统计学家卡尔·皮尔逊） 2 最小二乘法原理用最小二乘法拟合线性方程时，其目标是使拟合值（）与实测值（）差值的平方和（Q）最小。式（1）3 拟合方程的计算公式与推导当Q最小时，；得到式（2）、式（3）：式（2）式（3）由式（3）和式（4），得出式（4）和式（5）：式（4）式（5）

式（4）乘以n，式（5）乘以，两式相减并整理得斜率a：斜率（k＝xy／xx，n*积和-和积）式（6）截距b的计算公式为公式（5），也即：截距b＝（y-x）／n，差平均差）式（7）

4 相关系数的意义与计算公式相关系数（相关系数的平方称为判定系数）是用以反映变量之间相关关系密切程度的统计指标。相关系数（也称积差相关系数）是按积差方法计算，同样以两变量与各自平均值的离差为基础，通过两个离差相乘来反映两变量之间相关程度；着重研究线性的单相关系数。相关系数r xy取值在-1到1之间。r xy = 0时，称x,y不相关；| r xy | = 1时，称x,y完全相关，此时，x,y之间具有线性函数关系；| r xy | < 1时，X的变动引起Y的部分变动，r xy的绝对值越大，x的变动引起y的变动就越大，|r xy | > 0.8时称为高度相关，当0.5< | r xy|<0.8时称为显著相关，当0.3<| r xy |<0.5时，成为低度相关，当| r xy | < 0.3时，称为无相关。 (式（7） 5 临界相关系数的意义 5.1 临界相关系数中显著性水平（α）与置信度（P）的关系显著性水平取0.05，表示置信度为95%；取0.01，置信度就是99%。在正常的分布条件下，一般要求实际值位于置信区间的概率应该在95%以上，这个置信区间为Y±2S，从而置信区间的上下限分别为：Y1=a+bX+2S，Y2=a+bX-2S。 5.2 临界值表中自由度（f）自由度(degree of freedom, f)在数学中能够自由取值的变量个数，如有3个变量x、y、z，但x+y+z=18，因此其自由度等于2。在统计学中，自由度指的是计算某一统计量时，取值不受限制的变量个数。通常f=n-k。其中n为样本含量，k为被限制的条件数或变量个数，或计算某一统计量时用到其它独立统计量的个数。自由度通常用于抽样分布中。 f=n—p—1 其中：n为样本数(点的个数)，p为因子数（p元回归，一元线性回归，p＝1）。

使用ELISAcalc软件 绘制标准曲线以及批量计算样品浓度的教程