基因表达调控习题
第11单元基因表达的调控和基因工程
（一）名词解释
1．操纵子；2．启动子；3．增强子；4．衰减子；5．反式作用因子；6．降解物基因活化蛋白；7．克隆技术；8．限制性核酸内切酶；9．基因组DNA文库；10．cDNA 文库。
（二）填充题
1．正调控和负调控是基因表达的两种最基本的调节形式，其中原核细胞常用模式，而真核细胞常用模式。
2．在原核细胞中，由同一调控区控制的一群功能相关的结构基因组成一个基因表达调控单位，称为，其调控区包括基因和基因。
3．有些基因的表达较少受环境的影响，在一个生物体的几乎所有细胞中持续表达，因此被称为；另有一些基因表达极易受环境的影响，在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，这种基因是可的基因，相反，如果基因对环境信号应答时被抑制，这种基因是可的基因。
4．在基因重组技术中，切割DNA用，连接DNA用。
5．除噬菌体外，和也是分子克隆的常用载体。
6．用动物病毒DNA改造的基因载体有和。用于植物基因工程的常用载体是。
7．将重组质粒导入细菌称，将噬菌体DNA转入细菌称。
8．Southern印迹法、Northern印迹法和Western印迹法是分别用于研究、和转移和鉴定的几种常规技术。
（三）选择题（在备选答案中选出1个或多个正确答案）
1．一个操纵子通常含有
A．一个启动序列和一个编码基因B．一个启动序列和数个编码基因
C．数个启动序列和一个编码基因D．数个启动序列和数个编码基因
E两个启动序列和数个编码基因
2．有关操纵子学说的论述，正确的是
A．操纵子调控系统是真核生物基因调控的主要方式
B．操纵子调控系统是原核生物基因调控的主要方式
C．操纵子调控系统由调节基因、操纵基因、启动子和结构基因组成
D．诱导物与阻遏蛋白结合启动转录
E．诱导物与启动子结合而启动转录
3．转录因子是
A．调节DNA结合活性的小分子代谢效应物B．调节转录延伸速度的蛋白质C．调节转录起始速度的蛋白质D．调节转录产物分解速度的蛋白质
E．促进转录产物加工的蛋白质
4．阻遏蛋白（阻抑蛋白）识别操纵子中的
A．启动基因B．结构基因C．操纵基因D．内含子E．调节基因
5．在下列哪种情况下，乳糖操纵子的转录活性最高
A．高乳糖，低葡萄糖B．高乳糖，高葡萄糖C．低乳糖，低葡萄糖
D．低乳糖，高葡萄糖E．不一定
6．顺式作用元件是指
A．基因的5ˊ侧翼序列B．基因的3ˊ侧翼序列C．基因的5ˊ和3ˊ侧翼序列
D．基因的5ˊ和3ˊ侧翼序列以外的序列E．具有转录调节功能的特异DNA序列
7．反式作用因子是指
A．具有激活功能的调节蛋白B．具有抑制功能的调节蛋白
C．对自身基因具有激活功能的调节蛋白D．对另一基因具有激活功能的调节蛋白E．对另一基因有调节功能的蛋白质因子
8．下列关于限制性内切酶的叙述哪一项是错误的
A．它能识别DNA特定的碱基顺序，并在特定的位点切断DNA
B．切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构
C．它能专一性降解经甲基化修饰的DNA
D．是重组DNA的重要工具酶
E．主要从细菌中获得
9．基因工程中，不常用到的酶是
A．限制性核酸内切酶B．DNA聚合酶C．DNA解链酶D．DNA连接酶E．反转录酶
10下列哪项不能作为表达载体导入真核细胞的方法?
A．磷酸钙转染B．电穿孔C．脂质体转染D．氯化钙转染E．显微注射
11．重组体的筛选方法有
A．抗药标志筛选B．标记补救C．分子杂交D．免疫化学E．酶联免疫检测
12．cDNA是指
A．在体内合成的与病毒DNA或RNA互补的DNA
B．在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA
C．在体外经转录合成的与DNA互补的RNA
D．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA
E．在体内经转录合成的与DNA互补的RNA
13．建cDNA文库时，首先需分离细胞的
A．染色体DNA B．线粒体DNA C．总mRNA D．tRNA E．rRNA （四）判断题
1．高等真核生物的大部分DNA是不为蛋白质编码的。
2．大多数管家基因编码低丰度的mRNA．
3．乳糖可以诱导乳糖操纵子的表达，所以乳糖对乳糖操纵子的调控属于正调控系统。
4．某些蛋白质既可以作为阻遏蛋白又可以作为激活蛋白参与基因表达的调控。
5．准备用原核生物表达真核基因时，最好通过cDNA获取目的基因。
6．用原核生物表达真核生物的糖蛋白，其表达产物不会有正常的生物学功能。
7．Ti质粒可以随土壤农杆菌进入植物细胞。
8．用λ噬菌体作克隆载体时，外源DNA片断越小，克隆的成功率越高。
9．基因克隆选择的宿主细胞必须无限制性核酸内切酶。
10．采用蓝白斑选择法时，蓝色菌落或噬菌斑是含有重组载体的克隆。
（五）分析与计算题
1．简述操纵子的基本结构。
2．举例说明基因表达的诱导与阻遏，正调控与负调控。
3．概述原核生物基因表达调控的特点。
4．概述真核生物基因组的特点。
5．概述真核生物基因表达调控的特点。
6．简答真核生物基因表达的调控方式。
7．常用的限制性核酸内切酶有哪些特点?
8．在基因克隆中，目的基因有哪些主要来源?
9．什么是cDNA文库?cDNA文库与基因组文库有何差别?
10．用于DNA重组的载体应具备什么条件?常用的载体有哪一些?各有何特点?
11．简述连接目的基因与载体的主要方法?
12．概述筛选和鉴定DNA重组体的常用方法。
参考答案
（一）名词解释
1．原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。
顺式调控元件：指可影响自身基因表达活性的真核DNA序列。根据顺式作用元件在基因中的位置、转录激活作用的性质及发挥作用的方式，分为启动子、增强子及沉默子等。
2．是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。
3．是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约200bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100～200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。
4．在原核生物的Trp操纵子结构中，第一个结构基因与启动子P之间有一个区域含Trp密码子，称衰减子。当环境中Trp浓度很高时，它可通过编码并翻译，使正在转录的
mRNA形成终止信号，从而终止Trp操纵子的表达。这种转录衰减实质上是转录与一个前导肽翻译过程的偶联，它是原核生物特有的一种基因调控机制。
5．大多数真核转录调节因子由某一基因表达后，通过与特异的顺式作用元件相互作用（DNA－蛋白质相互作用），或通过与基它调节因子的相互作用（蛋白质－蛋白质相互作用），反式激活另一基因的转录，故称反式作用蛋白或反式作用因子。
6．也就是cAMP受体蛋白（cAMP receptor protein，CRP），它与cAMP的复合物可以促进某些原核操纵子（如乳糖操纵子）的转录。
7．“克隆”作为名词指相同的分子或细胞构成的群体，或一个共同的祖先通过无性繁殖所得到的群体，作为动词指获取“克隆”的过程。克隆技术特指获取“克隆”的过程，包括分子克隆，细胞克隆等技术。
8．就是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。限制性核酸内切酶存在于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制、修饰体系，限制外源DNA，保护自身DNA，对保持细菌遗传物质的稳定具有重要意义。限制性核酸内切酶分为三类，其中的Ⅱ类酶能特异性在一定的核苷酸序列处切割双链DNA，因而在基因工程中得到广泛的应用。
9．利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成一定大小的片段，将这些片段分子与适当的克隆载体拼接成重组DNA分子，继而转入受体菌，使每个细菌内都携带一种重组DNA分子。不同细菌中的重组DNA分子可能包含不同的染色体DNA片段，这样，只要得到的转化细菌所携带的重组DNA分子种类足够多，则全部转化细菌所携带的各种染色体片段就代表了染色体的整个基因组。存在于转化细菌内，由克隆载体所携带的所有基因组DNA 片段的集合称基因组DNA文库。基因组DNA文库涵盖了基因组的全部基因信息。
10．以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达，而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同，所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。另外，对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同，基因组DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过剪接，去除了内含子的cDNA。一般来说，从cDNA文库获得的基因，因不含内含子而片段较小，更适合于用作基因工程的目的基因。由于原核生物不存在将hnRNA加工成mRNA的酶系统，若用原核生物表达真核基因，则目的基因一定要通过cDNA获取。
（二）填充题
1．负调控，正调控；2．启动子，启动，操纵；3．管家基因，诱导，阻遏；4．限制性核酸内切，DNA连接；5．质粒，病毒；6．腺病毒载体，反转录病载体，Ti质粒。7．转化，转导；8．DNA，RNA，蛋白质；
（三）选择题（在备选答案中选出1个或多个正确答案）
1．（B）操纵子均含有数个编码基因，但启动序列只有1个。
2．（B，C，D）操纵子调控系统由调节基因，操纵基因，启动子和多个结构基因组成，是原核生物基因表达调控的主要方式，诱导物与组遏蛋白结合启动转录。诱导物不能直接与启动子结合。真核生物不存在操纵子调控系统。
3．（C）转录因子是调节转录起始的蛋白质，对转录延伸的速度，转录产物分解的速度和转录产物的加工均无影响。
4．（C）操纵基因位于启动基因与结构基因之间，阻遏蛋白与操纵基因结合后，与启动基因结合的RNA聚合酶不能转录结构基因。
5．（A）参与乳糖代谢的三种酶的表达同时受控于正负调控两种机制，只有在正调控发挥作用，负调控不起作用的时候，这三种酶才能有效的表达。当培养基中加入乳糖的时候，参与负调控的阻遏蛋白将失去活性，但如果培养基中含有葡萄糖，则细菌优先利用葡萄糖，这时参与乳糖代谢的酶仍然不能有效的表达，这是因为葡萄糖降低了细胞内的cAMP水平，而cAMP浓度的降低，导致降解物激活蛋白丧失活性，正调控的机制失去作用，这时三种酶不可能正常的表达。
6．（E）顺式作用元件是对某基因自身有调节功能的DNA序列，其中的启动子多在基因的5ˊ侧翼，但增强子既可以在5ˊ侧翼，又可以在3ˊ侧翼，一般距基因较远。有些顺式作用元件甚至可以在基因内部。
7．（E）反式作用因子是指对另一基因的表达有激活或抑制作用的蛋白质因子。
8．（C）限制性核酸内切酶主要存在于细菌，它可以水解外源DNA，而自身DNA因在特定位点被甲基化而可以免遭水解。限制性核酸内切酶由于可识别特定的碱基序列并在特定的位点切割双链DNA，因而在基因工程中得到广泛的使用。
9．（C）DNA聚合酶可用来获取目的基因，测序和PCR等项工作，限制性核酸内切酶用于DNA酶切片段长度的多态性分析，载体和目的基因的特异性切割等工作，DNA连接酶可用于基因重组的连接反应。DNA解链酶在基因工程中几乎用不到。
10．（D）CaCl2处理受体细胞是提高细菌转化率的常用方法，不适用于真核生物，题中列出的其余4种方法均可用于将表达载体导入真核细胞。
11．（A，B，C，D，E）题中列出的5种方法均可用于重组体的筛选。
12．（D）cDNA指在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA。
13．（C）cDNA文库应包含某一细胞在某一状态下所表达的基因，因此，构建cDNA 文库首先要分离细胞的总mRNA。
（四）判断题
1．对。高等真核生物的DNA中含有不少高度重复序列的非编码序列，基因内部又有内含子，不少基因内含子的总长度远远大于外显子。因此，真核生物的编码区只占DNA总长度的一小部分，一般认为，编码区不超过总长度的5%。
2．对。管家基因是持续表达的，mRNA丰度不高，但寿命较长，翻译效率较高。
3．错。乳糖被转化为别乳糖后，与乳糖操纵子调节基因产生的阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失去活性。由于这一调控方式起作用的是阻遏蛋白，故属于负调控。
4．对。某些蛋白质能够与DNA分子的不同区域结合，分别发挥激活蛋白或阻遏蛋白的作用。
5．对。真核生物的基因多数含有内含子，原核生物缺乏从转录初级产物切除内含子的加工系统，另外，如果将基因组DNA作为目的基因，基因片段因含有内含子而过大，也会降低基因转移的成功率。cDNA是以成熟mRNA为模板经过反转录制成的，不含内含子，适合于作为目的基因用于基因的克隆或表达。
6．对。原核生物缺乏真核生物的翻译后加工系统。不能对蛋白质进行糖基化。因此，表达糖蛋白要用真核表达系统。
7．错。土壤农杆菌可以促进Ti质粒进入植物细胞，但农杆菌本身并不进入植物细胞。
8．错。λ噬菌体的外壳蛋白只能包装长度为噬菌体DNA78%～105%的DNA，若外源DNA片段太小，重组体DNA的长度小于噬菌体DNA的78%，就不能在体外包装成噬菌体，因而，克隆很难成功。
9．对。如果宿主细胞有限制性核酸内切酶，将会水解进入宿主细胞的重组体DNA，导致克隆失败。
10．错。采用蓝的斑选择法时，克隆位点被选在表达－肽的基因内，含有空载体的受体菌可以在IPTG（异丙基硫代－－D－半乳糖苷）的诱导下，表达－肽，通过与受体菌的－互补，能够水解X－gal（5－溴－4氯－3－吲哚－－D－半乳糖苷）生成蓝色的水解产物，因而菌落或噬菌斑为蓝色。含有重组DNA的受体菌，由于外源基因插入表达－肽的基因内，不能表达－肽，因而，菌落或噬菌斑为白色。
（五）分析与计算题
1．操纵子的调控区有一个操纵序列，一个启动序列及一个CAP位点，调控区下游有几个结构基因，还有一个调节基因编码阻遏蛋白，阻遏蛋白与操纵序列结合，使操纵子受阻遏而处于关闭状态。若cAMP 与CAP结合，形成的复合物与CAP位点结合，可增大操纵子的转录活性。阻遏蛋白的负性调节和CAP的正性调节共同调节结构基因的表达，操纵子机制在原核基因表达调控中具有较善遍的意义，因其多是几个功能相关基因串联于同一操纵子上，故在同一启动序列控制下，可转录出能为多种蛋白质编码的mRNA，即多顺反子mRNA。
2．在特定的环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，则这种基因是可诱导的。可诱导基因在特定的环境中表达增强的过程称为诱导。例如有DNA损伤时，修复酶基因就会在细菌内被诱导激活，使修复酶的活性增加。相反，如果基因对环境信号应答时被抑制则这种基因是可阻遏的，可阻遏基因表达产物水平降低的过程称为阻遏，例如，当培养液中色氨酸供应充分时，在细菌内编码色氨酸合成相关酶的基因表达会被抑制。如果某种基因在没有调节蛋白存在时是表达的，加入某种调节蛋白后基因表达活性便被关闭，这样的控制为负调控。例如，乳糖操纵子。相反，若某种基因在没有调节蛋白存在时是关闭的，加入某种调节蛋白后基因活性就被开启，这种控制称为正调控。例如代谢物阻遏。
3．原核基因表达调控与真核存在很多共同之处，但因原核生物没有细胞核和亚细胞结构，其基因组结构要比真核生物简单，基因表达的调控因此而比较简单。虽然原核基因的表达也受转录起始、转录终止、翻译调控及RNA、蛋白质的稳定性等多级调控，但其表达开、关的关键机制主要发生在转录起始。其特点包括以下3方面：（1）σ因子决定RNA聚合酶的识别特异性：原核生物只有一种RNA聚合酶，核心酶催化转录的延长，亚基识别特
异启动序列，即不同的因子协助启动不同基因的转录。（2）操纵子模型的普遍性：除个别基因外，原核生物绝大数基因按功能相关性成簇地连续排列在染色体上，共同组成一个转录单位即操纵子，如乳糖操纵子等。一个操纵子含一个启动序列及数个编码基因。在同一个启动序列控制下，转录出多顺反子mRNA。（3）阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性：在很多原核操纵子系统，特异的阻遏蛋白是控制启动序列活性的重要因素。当阻遏蛋白与操纵基因结合或解离时，结构基因的转录被阻遏或去阻遏。
4（1）基因组结构庞大：哺乳动物基因组DNA由约bp的核苷酸组成。大约有3万个左右的基因，90%以上的DNA不为蛋白质编码。真核细胞DNA与组蛋白结合形成复杂的染色质结构，基因表达调控机制更加复杂。（2）单顺反子：真核基因转录产物为单顺反子，即一个编码基因转录生成一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。许多蛋白质由几条不同的多肽链组成，因此存在多个基因的协调表达。（3）重复序列：重复序列在真核DNA中普遍存在，重复序列长短不一，短的在10个核苷酸以下，长的达数百，乃至上千个核苷酸。据重复频率不同分为高度重复序列、中度重复序列及单拷贝序列。（4）基因的不连续性：结构基因的两侧有不被转录的非编码序列，往往是基因表达的调控区。在编码基因内部有一些不为蛋白质编码的间隔序列，称内含子，而编码序列称外显子，因此真核基因是不连续的。
5．同原核生物一样，真核基因表达调控的最基本环节也是转录起始，而且某些机制是相同的，但也存在明显差别：（1）RNA聚合酶：真核有3种RNA聚合酶，分别负责3种RNA转录。（2）活性染色质结构变化：当基因被激活时，可观察到染色体相应区域发生结构和性质变化。包括对核酸酶敏感，DNA拓扑结构变化，DNA碱基修饰变化和组蛋白变化。（3）正调节占主导地位：真核RNA聚合酶对启动子的亲和力极小或根本没有实质性的亲和力，二者的结合必须依赖一种或多种激活蛋白。尽管发现少量基因存在负性顺式作用元件，但普遍存在的是正性调节机制。（4）转录与翻译分隔进行：真核细胞有胞核及胞质等区间分布，转录与翻译在不同亚细胞结构中进行。（5）转录后加工：真核基因的内含子和外显子均被转录，内含子在转录后要被剪接去除，使外显子连接在一起，形成成熟的mRNA。不同剪接方式可形成不同的mRNA，翻译出不同的多肽链。因此，转录后加工是真核基因表达调控的另一重要环节。
6．（1）DNA水平的调控：a．基因丢失，即DNA片段或部分染色体的丢失，如蛔虫胚胎发育过程有27%的DNA丢失。b．基因扩增，即特定基因在特定阶段的选择性扩增，如非洲爪蟾卵母细胞中的rDNA是体细胞的4000倍。c．DNA序列的重排，如哺乳动物免疫球蛋白各编码区的连接。d．染色质结构的变化，通过异染色质关闭某些基因的表达。e．DNA的修饰，如DNA的甲基化关闭某些基因的活性。（2）转录水平的调控。a．染色质的活化，如核小体结构的解开、非组蛋白的作用等。b．转录因子的作用，转录因子与RNA聚合酶及特定的DNA序列（启动子、增强子）相互作用实现对转录的调控。（3）转录后水平的调控。a．mRNA前体的加工，如5′端加帽、3′端加尾、拼接、修饰、编辑等。B．mRNA的选择性拼接，如抗体基因的选择性拼接。（4）翻译水平的调控。a．控制mRNA 的稳定性，如5′端的帽子结构、3′端polyA尾巴和mRNA与蛋白质的结合有利于mRNA 的稳定。b．反义RNA的作用，反义RNA可以选择性抑制某些基因的表达。c．选择性翻
译，如血红素缺乏时，通过级联反应使eIF2磷酸化。d．抑制翻译的起始。（5）翻译后水平的调控。a．多肽链的加工和折叠，如糖基化、乙酰化、磷酸化、二硫键形成、蛋白质的降解。b．氨基酸的重排，如合成伴刀豆蛋白A时，氨基酸序列大幅度地被剪接重排。c．通过肽链的断裂等的加工方式产生不同的活性多肽。
7．Ⅱ型限制性核酸内切酶（限制酶）是基因工程中常用的重要工具酶，是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的核酸内切酶，常用的限制酶主要有以下特点：（1）均来自于微生物，并以其来源的微生物学名进行命名；（2）相对分子质量小，仅需Mg2＋作为辅助因子，无需ATP；（3）识别特异性DNA双链顺序，在序列内特异切割产生特异性DNA片段；（4）识别序列长度为连续的4/6/8bp；（5）识别序列呈二重旋转对称，称回文结构，富含GC；（6）有3种切口：5′端突出的黏性末端（如HindⅢ），3′端突出的黏性末端（如Pst Ⅰ）和平末端（如H加工）。
8．（1）从染色体DNA中直接分离：主要针对原核生物。（2）化学合成法：由已知多肽的氨基酸序列，推得编码这些氨基酸的核苷酸序列，利用DNA合成仪人工合成其基因。（3）从基因组DNA文库中筛选分离组织/细胞染色体DNA：利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成片段，与适当的克隆载体连接后转入受体菌扩增，即获得基因组DNA文库，用核酸探针将所需目的基因从基因文库中“钓”取出来。（4）从文库中筛选cDNA：提取mRNA，利用反转录酶合成与其互补的DNA（cDNA）分子，再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌，即获得cDNA文库，然后采用适当方法从cDNA文库中筛选出目的cDNA。（5）用PCR从基因组DNA或cDNA中扩增目的基因。
9．同mRNA互补的DNA称为cDNA。cDNA文库是以某一细胞的总mRNA为模板，在无细胞系统中，在反转录酶的作用下，首先合成互补DNA的第一链，破坏RNA模板后，再以第一链为模板合成第二链，得到双链cDNA。选用适合的载体，与合成的cDNA重组，导入寄主细胞，经筛选得到的cDNA克隆群称为cDNA文库。由于cDNA技术合成的是不含内含子的功能基因，因此是克隆真核生物基因的一种通用方法。由于细胞内的基因在表达的时间上并非是统一的，具有发育的阶段性和时间性，有些则需要特殊的环境条件。所以，cDNA文库不可能构建得十分完全，也就是说任何一个cDNA文库都不可能包含某一生物的全部编码基因。cDNA文库与基因组文库的主要差别是：（1）基因组文库克隆的是任何基因，包括未知功能的DNA序列，cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因，包括调节基因。（2）基因组文库克隆的是全部遗传信息，不受时空影响，cDNA文库克隆的是被转录DNA序列（因它受发育和调控因子的影响）。（3）基因组文库中的编码基因是含有内含子和外显子，而cDNA克隆的基因不含内含子。
10．DNA重组载体应具备的条件：（1）能自主复制；（2）具有一种或多种限制性内切酶的单一切割位点，并在位点中插入外源基因后，不影响其复制功能；（3）具有1～2个筛选标记；（4）克隆载体必须是安全的，不应含有对受体细胞有害的基因，并且不会任意转入其他生物细胞；（5）易于操作，转化效率高。常用的基因载体有以下几种：（1）质粒：是细菌染色体以外的小型环状双链DNA分子，本身有复制功能，且带有某些选择信息，但可插入的目的基因片段较小。（2）噬菌体DNA：是一种病毒DNA，能插入比较大的外源DNA片段，在DNA分子上有多种限制性核酸内切酶识别位点，便于多种外源DNA
酶切片段的克隆。（4）柯斯质粒载体和酵母人工染色体：前者结合了质粒和噬菌体载体的优点，也是一种环形双链DNA分子，具有质粒的性质，可以转化大肠杆菌，并自行复制和增殖，但它不会产生子代噬菌体，构建成的此种载体较小，因此能插入比较大的外源DNA 片段，所以被广泛地用于构建基因组文库。后者既含有大肠杆菌来源的质粒复制起始位点，又含有酵母菌染色体DNA着丝点，端粒和复制起始位点的序列，以及合适的选择标记基因，可在转化的酵母菌细胞内，按染色体DNA复制的形式复制重组DNA，容纳外源DNA片段的能力比前3种载体大得多。
11．（1）黏性末端连接：用同一限制酶切割载体及目的基因后，产生完全相同的黏性末端，可以用DNA连接酶直接进行共价连接。或两种不同的限制性核酸内切酶切割产生的配伍末端（相同类型的黏性末端）之间也可以进行黏性末端连接。（2）平端连接：某些限制酶切割DNA后产生平头末端，由于平头末端5′端带有磷酸，3′带有游离羟基，可在DNA 连接酶作用下直接连接，并且不管末端序列如何均可连接，但连接效率要比黏性末端之间的连接低。（3）同聚物加尾连接：利用同聚物序列，如多聚A与多聚T之间的退火作用完成连接。如果载体和目的基因上找不到共同的酶切点时，可经不同的限制酶切割后，用单链核酸酶将其各自的黏性末端切平，在末端核苷酸转移酶作用下，在DNA片段末端加上同聚物序列，制造出黏性末端，而后连接。（4）人工接头连接：将磷酸化接头连到平末端，使产生新的限有制性酶切核酸酶位点，再用限制酶切割，产生黏性末端后连接。
12．在转基因操作以后，载体只能进入部分宿主细胞，即使含有载体的细胞，也并非都含有目的基因，有些宿主细胞可能含有自身连接成环的载体分子或非目的基因与载体形成的重组体。因此，须在不同层次不同水平上进行筛选和鉴定，以确定哪一菌落所含的重组DNA分子确实带有目的基因，这一过程为筛选。根据载体体系、宿主细胞特性及外源基因在受体细胞表达情况的不同，可采用：（1）直接选择法：针对载体携带某种或某些标志基因和目的基因，直接测定该基因或基因表型的方法。a．抗药标志的筛选：载体具有某种抗生素的抗性基因，在转化后只有含载体的细菌才能在含该抗生素的培养平板上生长并形成单菌落，而未转化细胞则不能生长，这样即可将转化菌与非转化菌区别开来。b．插入失活法：将目的基因插入载体某一耐药基因内使该基因失活，可区分单纯载体或重组载体（含目的基因）的转化菌落。如pBR322含ampr、Tetr双抗药基因，若将目的基因插入载体的Tetr 基因中，则含目的基因的转化细胞只能在含Amp的培养液中生长，而不能在含Tet的培养液中生长。c．标志补救：若克隆的基因能在宿主菌表达，且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补，那么就可以利用营养突变菌株进行筛选，这称为标志补救。如重组体为亮氨酸自养型（Leu＋），将重组子导入亮氨酸异养型（Leu－）的宿主细胞后，在不含Leu的培养液中可生长，而不含重组体的细胞则不能生长。－互补法筛选（见43题）也是一种标志补救选择方法。d．酶切图谱筛选：分别挑取独立的菌落，培养后快速提取重组体DNA，用重组时所采用的限制酶切割后，进行琼脂糖凝胶电泳，可以从DNA片段的大小和有无判断所选的菌落是否为阳性克隆。e．核酸杂交筛选：将转化子DNA或克隆的DNA分子片段转移至合适的膜上，利用标记探针进行杂交，直接选择并鉴定目的基因。f．原位杂交筛选：是将待选菌在平板上培养成菌落，按相应位置（原位）转移至合适的膜上，经变性使膜上的DNA成单链，再与标记的探针（与目的基因互补）杂交，找出平板上的菌落位置，即为重
组的阳性菌落。（2）免疫学方法筛选：利用特异抗体与目的基因表达产物的特异相互作用进行筛选。这种方法不直接鉴定基因，属非直接筛选法。分为免疫化学方法及酶联免疫检测分析等。基本的工作原理是将琼脂培养板上的转化子菌落经氯仿蒸汽裂解、释放抗原，再将固定有抗血清的膜覆盖在裂解菌落上，在膜上得到抗原抗体复合物，最后用合适的方法检出阳性反应菌落。
基因表达调控课堂练习 参考答案(简
《基因表达调控》部分课堂练习题参考答案 学号：姓名： 一、填空题。 1.营养状况，环境因素，激素水平，发育阶段 2.Jacob，Monod https://www.wendangku.net/doc/f54227725.html,cZ，lacY，lacA，启动子，阻遏子 4.葡萄糖抑制效应，降解物抑制作用，代谢物阻遏效应 5.异构乳糖 6.义务安慰性，辅阻遏物 7.弱化系统 8.茎-环，弱化子，色氨酸，色氨酸-tRNA Trp，核糖体 9.色氨酸，辅阻遏物，色氨酸 10.鸟苷四磷酸，鸟苷五磷酸，空载tRNA 11.单顺反子，基因家族 12.顺式作用原件，反式作用因子 13.C2H2，Cys，His，C2C2，Cys 二、判断题。 1.√ 2.√ 3.× 4.√ 5.√ 6.√ 7.√ 8.× 9.√ 10.√ 11.× 12.× 13.× 14.√ 15.√ 16.√ 17.√ 18.√ 19.√ 20.√ 21.√ 22.√
1.A、半乳糖苷 2.A、反映了真核生物的mRNA是多顺反子 3.D、RNA聚合酶II识别的大部分启动子中，RNA聚合酶III识别的小部分启动子中 4.B、大部分剪接位点都遵从GT-AG规律 5.C、都形成相似的二级结构 6.B、需要保守的AAUAAA序列 7.C、提供一个核糖体结合位点 8.C、不存在转录后调控 9.C、组织特异性启动子 10. D 有基因专一性，只增强特定基因的表达 11.C、阻遏蛋白，激活蛋白 12. C 抗终止蛋白以它的作用位点与核心酶结合，因而改变其构象，使终止信号不能被核心酶识别 13.A、免疫球蛋白结构基因 14.B、色氨酸-tRNA Trp 四、名词解释。 1.顺式作用元件：启动子、增强子中或结构基因共线性的DNA序列，基因转录调控，影响基因的 表达。 2.反式作用因子：能够直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因 转录效率的蛋白质。 3.持家基因housekeeping：维持细胞正常结构、基本代谢活动所需要的蛋白质或RNA的编码基因。 4.假基因：与原基因核甘酸序列相同但没有功能的基因。 5.基因重排gene recomposition： 6.基因扩增gene amplication： 7.操作基因operator：操纵子上结合阻遏蛋白特异结合的DNA序列。 8.操纵子operon：由操作子以及相邻的若干结构基因所组成的功能单位，其中结构基因转录受操纵 基因控制。 9.弱化子：原核生物中位于转录单位开始区的一种内部终止子。 10.增强子(enhancer)： 11.弱化作用attenuation： 12.激活蛋白activator： 13.阻遏蛋白repressor： 14.副阻遏蛋白aporepressor： 15.
第六章 基因表达调控自测习题
第六章基因表达调控 自测题 （一）选择题 A型题 1. 关于基因表达调控的说法错误 ．．的是 A. 转录起始是调控基因表达的关键 B. 环境因素影响管家基因的表达 C. 在发育分化和适应环境上有重要意义 D. 表现为基因表达的时间特异性和空间特异性 E. 真核生物的基因表达调控较原核生物复杂的多 2. 下列哪项属于可调节基因 A. 组蛋白编码基因 B. 5S rRNA编码基因 C. 异柠檬酸脱氢酶编码基因 D. 肌动蛋白编码基因 E. 血红蛋白编码基因 3. 与α-酮戊二酸脱氢酶系协调表达的是 A. 肉毒碱脂酰转移酶I B. 柠檬酸合成酶
C. 丙酮酸羧化酶 D. 葡萄糖-6-磷酸酶 E. HMG-CoA合成酶 4. 乳糖操纵子中，能结合别位乳糖（诱导剂）的物质是 A. AraC B. cAMP C. 阻遏蛋白 D. 转录因子 E. CAP 5. 乳糖操纵子模型是在哪个环节上调节基因表达 A. 复制水平 B. 转录水平 C. 转录后水平 D. 翻译水平 E. 翻译后水平 6. 乳糖操纵子的调控方式是 A. CAP的正调控 B. 阻遏蛋白的负调控 C. 正、负调控机制不可能同时发挥作用
D. CAP拮抗阻遏蛋白的转录封闭作用 E. 阻遏作用解除时，仍需CAP加强转录活性 7. 与分解代谢相关的操纵子模型中，存在分解代谢物阻遏现象，参与这一调控的主要作用因子是 A. 阻遏蛋白 B. AraC C. 衰减子 D. cAMP-CAP复合物 E. 诱导剂 8. 原核细胞中，识别基因转录起始点的是 A. 阻遏蛋白 B. 转录激活蛋白 C. 基础转录因子 D. 特异转录因子 E. σ因子 9. 使乳糖操纵子实现高表达的条件是 A. 乳糖存在，葡萄糖缺乏 B. 乳糖缺乏，葡萄糖存在 C. 乳糖和葡萄糖均存在
真核生物基因表达调控
第十章作业 1. 简述真核生物基因表达调控的7个层次。 ①染色体和染色质水平上的结构变化与基因活化 ②转录水平上的调控，包括基因的开与关，转录效率的高与低 ③RNA加工水平的调控，包括对出事转录产物的特异性剪接、修饰、编辑等。 ④转录后加工产物在从细胞核向细胞质转运过程中所受到的调控 ⑤在翻译水平上的控制，即对哪一种mRNA结合核糖体进行翻译的选择以及蛋白质成量的控制 ⑥对蛋白质合成后选择性地被激活的控制，蛋白质和酶分子水平上的剪接等的控制 ⑦对mRNA选择性降解的调控 2. 真核基因表达调控与原核生物相比有何异同？ 相同点：①与原核基因的调控一样，真核基因表达调控也有转录水平调控和转录后水平的调控，并且也以转录水平调控为最重要； ②在真核结构基因的上游和下游(甚至内部)也存在着许多特异的调控成分，并依靠特异蛋白因子与这些调控成分的结合与否调控基因的转录。 不同点：①原核细胞的染色质是裸露的DNA，而真核细胞染色质则是由DNA与组蛋白紧密结合形成的核小体。 ②在原核基因转录的调控中，既有激活物参与的正调控，也有阻遏物参与的负调控，二者同等重要。 ③原核基因的转录和翻译通常是相互偶联的，即在转录尚未完成之前翻译便已开始。 ④真核生物大都为多细胞生物，在个体发育过程中发生细胞分化后，不同细胞的功能不同，基因表达的情况也就不一样，某些基因仅特异地在某种细胞中表达，称为细胞特异性或组织特异性表达，因而具有调控这种特异性表达的机制。 3. DNA 甲基化对基因表达的调控机制。 甲基化抑制基因转录的机制：DNA甲基化会导致某些区域DNA构象改变，包括甲基化后染色质对于核酸酶或限制性内切酶的敏感度下降，更容易与组蛋白H1相结合，DNaseⅠ超敏感位点丢失，使染色质高度螺旋化, 凝缩成团, 直接影响了转录因子与启动区DNA的结合效率的结合活性，不能启始基因转录。DNA的甲基化不利于模板与RNA聚合酶的结合，降低了转录活性。 4. 转录因子结合DNA的结构基序（结构域）有哪几类？ ①螺旋-转折-螺旋 ②锌指结构 ③碱性-亮氨酸拉链 ④碱性-螺旋-环-螺旋 5. 真核基因转调控中有几种方式能够置换核小体？ ①占先模式：可以解释转录时染色质结构的变化。该模型认为基因能否转录取决于特定位置上组蛋白和转录因子之间的不可逆竞争性结合。 ②动态模式该模型认为转录因子与组蛋白处于动态竞争之中，基因转录前染色质必须经历结构上的改变，即转换核小体中的全部或部分成分并重新组装，这个耗能的基因活化过程称为染色质重构 6. 简述真核生物转录水平调控过程。 真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的，主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程：①转录起始复合物的形成：真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的
第六章 基因表达的调控教学内容
第六章基因表达 的调控
第六章基因表达的调控 基因表达调控（gene expression regulation）是指生物体通过特定蛋白质与DNA、蛋白质与蛋白质之间的相互作用来控制基因是否表达，或调节表达产物的多少以满足生物体自身需求以及适应环境变化的过程。 第一节基因表达调控的基本规律 （一）基因表达具有时空特异性 时间特异性(temporal specificity)：某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生，又称阶段特异性（stage specificity）， 空间特异性(special specificity）：在个体生长全过程，各基因在不同的组织器官中的表达种类和表达水平都不同，又称组织特异性（tissue specificity）（二）诱导表达和阻遏表达是基因表达调控的主要方式 管家基因（housekeeping gene）：有些基因参与生命的全过程，因此必须在一个生物体的所有细胞中持续的表达这，这些基因称为管家基因。 管家基因主要维持细胞基本生存需要：如细胞基本构成蛋白，细胞基本代谢中的酶，DNA复制过程中必需的蛋白等。 常见的管家基因：微管蛋白基因、糖酵解酶系基因，核糖体蛋白基因，甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）和β-肌动蛋白（β-actin）。 组成性基因表达（constitutive expression）：管家基因的表达只与启动子和RNA 聚合酶有关，基本上不受环境因素和其它因素的影响，这样的表达方式称为组成性基因表达。 ?可调控型表达：仅在特定细胞或特定条件下才表达，编码具有特殊功能的蛋白 产物的这类基因称为奢侈基因或可调控基因（regulated genes），如表皮的角蛋白基因、肌肉细胞的肌动蛋白基因、红细胞的血红蛋白基因等。这类基因的表达称为可调控型表达（regulated expression）。 ?可调控型表达分为诱导和阻遏。 ?在特定环境因素刺激下，相应的基因被激活，从而使基因的表达产物增加的过 程，称为诱导(induction) ，这类基因称为可诱导基因(inducible gene) 。?能够诱导基因表达的分子称为诱导剂。 ?在特定环境因素刺激下，基因被抑制，从而使基因的表达产物减少的过程称为 阻遏(repression)，这类基因称为可阻遏基因(repressible gene) 。 ?能够阻遏基因表达的分子成为阻遏剂。 ?乳糖操纵子的调控机制即是典型的外环境因素诱导/阻遏基因表达的典型例子， 也是原核生物转录水平基因表达调控的代表例子。 ?乳糖操纵子的组成： ?结构基因lac Z、lac Y、lac A，分别编码β-半乳糖苷酶、通透酶、半乳糖 苷转乙酰基酶；共用1个启动子Plac ?操纵基因lac O，阻遏蛋白结合位点 ?阻遏蛋白基因lac I，具独立的启动子等调控序列，介导负性调节 ?分解代谢基因激活蛋白CAP结合位点，位于Plac的上游；CAP蛋白由位于远离操
第六章 基因表达的调控
第六章基因表达的调控 基因表达调控（gene expression regulation）是指生物体通过特定蛋白质与DNA、蛋白质与蛋白质之间的相互作用来控制基因是否表达，或调节表达产物的多少以满足生物体自身需求以及适应环境变化的过程。 第一节基因表达调控的基本规律 （一）基因表达具有时空特异性 时间特异性(temporal specificity)：某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生，又称阶段特异性（stage specificity）， 空间特异性(special specificity）：在个体生长全过程，各基因在不同的组织器官中的表达种类和表达水平都不同，又称组织特异性（tissue specificity）（二）诱导表达和阻遏表达是基因表达调控的主要方式 管家基因（housekeeping gene）：有些基因参与生命的全过程，因此必须在一个生物体的所有细胞中持续的表达这，这些基因称为管家基因。 管家基因主要维持细胞基本生存需要：如细胞基本构成蛋白，细胞基本代谢中的酶，DNA复制过程中必需的蛋白等。 常见的管家基因：微管蛋白基因、糖酵解酶系基因，核糖体蛋白基因，甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）和β-肌动蛋白（β-actin）。 组成性基因表达（constitutive expression）：管家基因的表达只与启动子和RNA 聚合酶有关，基本上不受环境因素和其它因素的影响，这样的表达方式称为组成性基因表达。 ?可调控型表达：仅在特定细胞或特定条件下才表达，编码具有特殊功能的蛋白产 物的这类基因称为奢侈基因或可调控基因（regulated genes），如表皮的角蛋白基因、肌肉细胞的肌动蛋白基因、红细胞的血红蛋白基因等。这类基因的表达称为可调控型表达（regulated expression）。 ?可调控型表达分为诱导和阻遏。 ?在特定环境因素刺激下，相应的基因被激活，从而使基因的表达产物增加的过程， 称为诱导(induction) ，这类基因称为可诱导基因(inducible gene) 。 ?能够诱导基因表达的分子称为诱导剂。 ?在特定环境因素刺激下，基因被抑制，从而使基因的表达产物减少的过程称为阻 遏(repression)，这类基因称为可阻遏基因(repressible gene) 。 ?能够阻遏基因表达的分子成为阻遏剂。 ?乳糖操纵子的调控机制即是典型的外环境因素诱导/阻遏基因表达的典型例子， 也是原核生物转录水平基因表达调控的代表例子。 ?乳糖操纵子的组成： ?结构基因lac Z、lac Y、lac A，分别编码β-半乳糖苷酶、通透酶、半乳糖苷 转乙酰基酶；共用1个启动子Plac ?操纵基因lac O，阻遏蛋白结合位点 ?阻遏蛋白基因lac I，具独立的启动子等调控序列，介导负性调节 ?分解代谢基因激活蛋白CAP结合位点，位于Plac的上游；CAP蛋白由位于远离操纵
第十三章-基因表达的调控
第十三章基因表达的调控 一、基因表达调控基本概念与原理： 1．基因表达的概念：基因表达（gene expression）就是指在一定调节因素的作用下，DNA分子上特定的基因被激活并转录生成特定的RNA，或由此引起特异性蛋白质合成的过程。 2．基因表达的时间性及空间性： ⑴时间特异性：基因表达的时间特异性(temporal specificity)是指特定基因的表达严格按照特定的时间顺序发生，以适应细胞或个体特定分化、发育阶段的需要。故又称为阶段特异性。 ⑵空间特异性：基因表达的空间特异性（spatial specificity）是指多细胞生物个体在某一特定生长发育阶段，同一基因的表达在不同的细胞或组织器官不同，从而导致特异性的蛋白质分布于不同的细胞或组织器官。故又称为细胞特异性或组织特异性。 3．基因表达的方式： ⑴组成性表达：组成性基因表达（constitutive gene expression）是指在个体发育的任一阶段都能在大多数细胞中持续进行的基因表达。其基因表达产物通常是对生命过程必需的或必不可少的，且较少受环境因素的影响。这类基因通常被称为管家基因（housekeeping gene）。 ⑵诱导和阻遏表达：诱导表达（induction）是指在特定环境因素刺激下，基因被激活，从而使基因的表达产物增加。这类基因称为可诱导基因。阻遏表达（repression）是指在特定环境因素刺激下，基因被抑制，从而使基因的表达产物减少。这类基因称为可阻遏基因。 4．基因表达的生物学意义：①适应环境、维持生长和增殖。②维持个体发育与分化。 5．基因表达调控的基本原理： ⑴基因表达的多级调控：基因表达调控可见于从基因激活到蛋白质生物合成的各个阶段，因此基因表达的调控可分为转录水平（基因激活及转录起始），转录后水平（加工及转运），翻译水平及翻译后水平，但以转录水平的基因表达调控最重要。 ⑵基因转录激活调节基本要素：①顺式作用元件：顺式作用元件（cis-acting element）又称分子内作用元件，指存在于DNA分子上的一些与基因转录调控有关的特殊顺序。②反式作用因子：反式作用因子（trans-acting factor）又称为分子间作用因子，指一些与基因表达调控有关的蛋白质因子。反式作用因子与顺式作用元件之间的共同作用，才能够达到对特定基因进行调控的目的。③顺式作用元件与反式作用因子之间的相互作用：大多数调节蛋白在与DNA结合之前，需先通过蛋白质-蛋白质相互作用，形成二聚体或多聚体，然后再通过识别特定的顺式作用元件，而与DNA分子结合。这种结合通常是非共价键结合。 二、操纵子的结构与功能：
分子生物学真核生物基因表达调控考试卷模拟考试题.docx
《真核生物基因表达调控》 考试时间：120分钟 考试总分：100分 遵守考场纪律，维护知识尊严，杜绝违纪行为，确保考试结果公正。 1、转录因子通常以（）结合于DNA 上，并且大多数家庭的转录因子以（）形式起作用。（ ） 2、锌指蛋白以一个含有（）残基的氨基酸保守序列与锌结合。该转录因子家庭的成员大部分具有（）锌指结构，它们通过锌指的（）端形成α螺旋而与DNA 相结合。（ ） 3、类固醇受体通过（）个保守的赖氨酸残基（Lys ）与锌结合。（ ） 4、锌指结构的C 端部分与DNA 结合而N 端部分主要参与（）的形成。这种因子通常具有三个结构域：（）活化区、（）结合区和（）结合区。（ ） 姓名：________________ 班级：________________ 学号：________________ --------------------密----------------------------------封 ----------------------------------------------线---------------------- ---
5、同源异型蛋白有相同的形成三个α螺旋的60个氨基酸：其中（）螺旋在（）处与DNA相结合。这一家族的转录因子在很多生物体的（）进程中起重要的 调节作用。（） 6、亮氨酸拉链家族与HLH家族有几点相同之处。（）残基形成一个与（）形 成有关的双亲α螺旋。（） 7、基因表达还受到（）修饰的影响。（）的（）通常被甲基化。（） 8、控制基因产物数量的最关键的步骤是（）。（） A.复制的终止 B.mRNA向细胞质的转运 C.转录的起始 D.可变剪接 E.翻译的调 控 9、锌指蛋白结构模体与哪种蛋白质功能有关？（）（） A.激酶活性 B.DNA结合 C.mRNA剪接 D.DNA复制 E.甲基化 10、（）是通常与其调控的基因具有一段距离的DNA顺式作用元件。（） A.启动子 B.终止子 C.增强子 D.调节子 E.阻抑物
13 生物化学习题与解析--基因表达调控
基因表达调控 一、选择题 （一） A 型选择题 1 ．基因表达调控的最基本环节是 A ．染色质活化 B ．基因转录起始 C ．转录后的加工 D ．翻译 E ．翻译后的加工 2 ．将大肠杆菌的碳源由葡萄糖转变为乳糖时，细菌细胞内不发生 A ．乳糖→ 半乳糖 B ． cAMP 浓度升高 C ．半乳糖与阻遏蛋白结合 D ． RNA 聚合酶与启动序列结合 E ．阻遏蛋白与操纵序列结合 3 ．增强子的特点是 A ．增强子单独存在可以启动转录 B ．增强子的方向对其发挥功能有较大的影响 C ．增强子不能远离转录起始点 D ．增强子增加启动子的转录活性 E ．增强子不能位于启动子内 4 ．下列那个不属于顺式作用元件 A ． UAS B ． TATA 盒 C ． CAAT 盒 D ． Pribnow 盒 E ． GC 盒 5 ．关于铁反应元件（ IRE ）错误的是 A ．位于运铁蛋白受体 (TfR) 的 mRNA 上 B ． IRE 构成重复序列 C ．铁浓度高时 IRE 促进 TfR mRNA 降解 D ．每个 IR E 可形成柄环节构 E ． IRE 结合蛋白与 IRE 结合促进 TfR mRNA 降解 6 ．启动子是指 A ． DNA 分子中能转录的序列 B ．转录启动时 RNA 聚合酶识别与结合的 DNA 序列 C ．与阻遏蛋白结合的 DNA 序列 D ．含有转录终止信号的 DNA 序列 E ．与反式作用因子结合的 RNA 序列 7 ．关于管家基因叙述错误的是 A ．在同种生物所有个体的全生命过程中几乎所有组织细胞都表达 B ．在同种生物所有个体的几乎所有细胞中持续表达 C ．在同种生物几乎所有个体中持续表达 D ．在同种生物所有个体中持续表达、表达量一成不变 E ．在同种生物所有个体的各个生长阶段持续表达 8 ．转录调节因子是 A ．大肠杆菌的操纵子 B ． mRNA 的特殊序列 C ．一类特殊的蛋白质 D ．成群的操纵子组成的凋控网络 E ．产生阻遏蛋白的调节基因 9 ．对大多数基因来说， CpG 序列高度甲基化 A ．抑制基因转录 B ．促进基因转录 C ．与基因转录无关 D ．对基因转录影响不大 E ．既可抑制也可促进基因转录 10 ． HIV 的 Tat 蛋白的功能是 A ．促进 RNA po l Ⅱ 与 DNA 结合 B ．提高转录的频率
第六章 基因表达调控
第六章基因表达调控 Regulation of Gene Expression 生物体的代谢调节尽管有不同的途径和水平，但最根本的还是基因的表达调控。基因表达即遗传信息的转录和翻译过程。 生物体在生命周期中，基因组的各个基因表达随生长发育有先后，并受内外环境的影响和诱导。 第一节基因表达调控基本概念与原理 一、基因表达的概念 ●基因表达（gene expression）就是指在一定调节因素的作用下，DNA分子上特定的基因 被激活并转录生成特定的RNA，或由此引起特异性蛋白质合成的过程。 ●人类基因组DNA中约含3.5万个基因，但在某一特定时期，只有少数的基因处于转录 激活状态，其余大多数基因则处于静息状态。一般来说，在大部分情况下，处于转录激活状态的基因仅占5%。 ●通过基因表达以合成特异性蛋白质，从而赋予细胞以特定的生理功能或形态，以适应内 外环境的改变。 二、基因表达的时间性及空间性 （一）时间特异性： ●基因表达的时间特异性(temporal specificity)是指特定基因的表达严格按照特定的时间顺 序发生，以适应细胞或个体特定分化、发育阶段的需要。故又称为阶段特异性。 二）空间特异性： ●基因表达的空间特异性（spatial specificity）是指多细胞生物个体在某一特定生长发育阶 段，同一基因的表达在不同的细胞或组织器官不同，从而导致特异性的蛋白质分布于不同的细胞或组织器官。故又称为细胞特异性或组织特异性。 三、基因表达的方式 （一）组成性表达： ●组成性基因表达（constitutive gene expression）是指在个体发育的任一阶段都能在大多 数细胞中持续进行的基因表达。其基因表达产物通常是对生命过程必需的或必不可少的，且较少受环境因素的影响。这类基因通常被称为管家基因（housekeeping gene）。（二）诱导和阻遏表达： ●诱导表达（induction）是指在特定环境因素刺激下，基因被激活，从而使基因的表达产 物增加。这类基因称为可诱导基因。 ●阻遏表达（repression）是指在特定环境因素刺激下，基因被抑制，从而使基因的表达产 物减少。这类基因称为可阻遏基因。 四、基因表达的生物学意义 一）适应环境、维持生长和增殖。 （二）维持个体发育与分化。 五、基因表达调控的基本原理
第十三章 基因表达调控
第十三章基因表达调控 基因表达（gene expression）：是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经转录、翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质，进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。并非所有基因表达过程都产生蛋白质，rRNA、tRNA的编码基因转录生成RNA的过程也属于基因表达。基因表达的调控是在多极水平上进行的，转录水平是基因表达的基本控制点。 基因表达的时间特异性（temporal specificity）：按功能需要，某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生，这就是基因表达的时间特异性。 基因表达的空间特异性（spatial specificity）：在个体生长全过程，某种基因产物在个体按不同组织空间顺序出现，这就是基因表达的空间特异性。基因表达伴随时间或阶段顺序所表现出的这种空间分布差异，实际上是由细胞在器官的分布决定的，因此基因表达的空间特异性又称细胞特异性（cell specificity）或组织特异性（tissue specificity）。基因表达的方式有（1）组成性表达。 管家基因（ho usekeeping gene）：有些基因产物对生命过程是必需的且在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达或变化很小的基因。 = 1 \* GB2 ⑴组成性基因表达（constitutive gene expression）：指管家基因的表达，又称基本的基因表达，只受启动序列或启动子与RNApol抑制作用的影响。 = 2 \* GB2 ⑵诱导表达（induction expression）和阻遏表达（repression expression）：有一些基因表达极易受环境变化的影响，在特定的环境信号刺激下，相应基因的表达表现为开放或增强，这种表达方式称诱导表达；相反有些基因的表达表现为关闭或下降，这种表达方式称阻遏表达。 原核生物基因表达的调控 原核生物基因表达的调控主要是在转录水平其次是翻译水平进行。基因表达调控的基本原理是1.基因表达子多极调控2.基因转录激活调节基本要素（1）特异DNA序列，主要指具有调节功能的DNA序列，把可影响自身基因表达活性的DNA序列称为顺式作用元件。根据作用性质和后式分为启动子，增强子和沉默子。（2）调节蛋白：分三大类 = 1 \* GB3 ①决定RNApol对启动序列的特异性识别和结合能力的顺式作用元件的特异因子。原核基因转录调节具有如下特点，1.σ因子决定RNApol识别的特异性，不同的σ因子决定特异基因的转录激活，决定mRNA、rRNA和tRNA基因的转录。2.操种子模型的普遍性，一个操重子只含有一个启动序列及数个可转录的编码基因。3.阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性。 转录水平的调控 原核生物基因多以操纵子（operon）的形式存在。操纵子由调控区与信息区组成，上游是调控区，包括启动子与操纵基因两部分。启动子是同RNA聚合酶结合并启动转录的特异性DNA序列，操纵基因是特异的阻遏物结合区。 乳糖操纵子调控的机制 E.coli的乳糖操纵子（lac operon）有三个结构基因Z、Y、A，分别编码β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）、透酶（permease）和半乳糖苷乙酰化酶（galactoside acetylase）,其上游还有一个启动序列(P)和一个操纵基因(O)。在启动序列上游还有一个CAP蛋白的结合位点。由启动子、操纵基因和CAP结合位点共同构成乳糖操纵
基因表达调控习题
（一）名词解释 1．操纵子； 2．启动子； 3．增强子； 4．衰减子； 5．反式作用因子； 6．降解物基因活化蛋白；7．克隆技术； 8．限制性核酸内切酶； 9．基因组DNA文库； 10． cDNA 文库。 （二）填充题 1．正调控和负调控是基因表达的两种最基本的调节形式，其中原核细胞常用模式，而真核细胞常用模式。 2．在原核细胞中，由同一调控区控制的一群功能相关的结构基因组成一个基因表达调控单位，称为，其调控区包括基因和基因。 3．有些基因的表达较少受环境的影响，在一个生物体的几乎所有细胞中持续表达，因此被称为；另有一些基因表达极易受环境的影响，在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，这种基因是可的基因，相反，如果基因对环境信号应答时被抑制，这种基因是可的基因。 4．在基因重组技术中，切割DNA用，连接DNA用。 5．除噬菌体外，和也是分子克隆的常用载体。 6．用动物病毒DNA改造的基因载体有和。用于植物基因工程的常用载体是。 7．将重组质粒导入细菌称，将噬菌体DNA转入细菌称。 8．Southern印迹法、Northern印迹法和Western印迹法是分别用于研究、和转移和鉴定的几种常规技术。 （三）选择题（在备选答案中选出1个或多个正确答案） 1．一个操纵子通常含有 A．一个启动序列和一个编码基因 B．一个启动序列和数个编码基因 C．数个启动序列和一个编码基因 D．数个启动序列和数个编码基因 E两个启动序列和数个编码基因 2．有关操纵子学说的论述，正确的是 A．操纵子调控系统是真核生物基因调控的主要方式 B．操纵子调控系统是原核生物基因调控的主要方式 C．操纵子调控系统由调节基因、操纵基因、启动子和结构基因组成 D．诱导物与阻遏蛋白结合启动转录 E．诱导物与启动子结合而启动转录 3．转录因子是 A．调节DNA结合活性的小分子代谢效应物 B．调节转录延伸速度的蛋白质 C．调节转录起始速度的蛋白质 D．调节转录产物分解速度的蛋白质 E．促进转录产物加工的蛋白质 4．阻遏蛋白（阻抑蛋白）识别操纵子中的 A．启动基因B．结构基因C．操纵基因D．内含子E．调节基因 5．在下列哪种情况下，乳糖操纵子的转录活性最高
第十三章 基因表达的调控
第十三章基因表达的调控 Regulation of gene expression 一、授课章节及主要内容：第十三章基因表达的调控 二、授课对象：临床医学、预防、法医（五年制）、临床医学（七年制） 三、授课学时 本章共３学时，第一学时讲述基因表达调控的基本概念、原理，第二学时讲述原核生物转录调节，第三学时讲述真核生物转录调节、小结。 四、教学目的与要求 通过本章学习应该掌握基因表达调控的基本原理、原核生物转录调控模式、真核生物基因表达特点，了解基因表达的时空性及表达方式，原核生物与真核生物基因表达调控异同点。 五、重点与难点 重点：掌握基因表达、顺式作用元件、反式作用因子的概念。掌握原核生物操纵子模型调节机制，重点掌握乳糖操纵子。掌握真核生物转录水平的调节、顺式作用元件的分类、反式作用因子的分类、掌握RNA pol II转录起始、终止的调节。 难点：真核RNA pol II转录起始、终止的调节。 六、教学方法及授课大致安排 启发式教学，复习、提问、讲解、小结相结合。首先复习中心法则，然后提问：遗传信息的传递如何控制，有什么规律？重点讲述基因表达调控的原理、原核生物的转录调控模式，最后进行小结，并出几个思考题。 七、主要外文专业词汇 基因组（genome）时间特异性（temporal specificity） 基因表达（gene expression）阶段特异性（stage specificity） 管家基因（housekeeping gene）组成性基因表达（constitutive gene expression） 诱导（induction）阻遏（repression） 协调调节（coordinate regulation）操纵子（operon）
生物化学复习-基因表达调控
第十三章基因表达调控 单选题 1 原核生物基因表达调控的乳糖操纵子系统属于 A 复制水平调节 B 转录水平调节 C 逆转录水平调节 D 翻译水平调节 E 翻译后水平调节 2 分解代谢物基因激活蛋白(CAP)对乳糖操纵子表达的影响是 A 正性调控 B 负性调控 C 正性调控、负性调控都可能 D 无调控作用 E 可有可无 3 阻遏蛋白识别操纵子中的 A 启动基因 B 结构基因 C 操纵基因 D 内含子 E 外显子 4 真核生物用多种调节蛋白发挥生物学效应的作用方式是 A 提高RNA聚合酶的转录效率 B 降低RNA聚合酶的转录效率 C 提高DNA-蛋白质相互作用的特异性 D 降低DNA-蛋白质相互作用的特异性 E 以上都不是 5 下列属于顺式作用元件的是： A 启动子 B 结构基因 C RNA聚合酶 D 转录因子I E 转录因子Ⅱ 6 基因表达产物是： A RNA B DNA C 蛋白质 D 酶和DNA E 大多数是蛋白质，有些是RNA 7 顺式作用元件是指： A 非编码序列 B TATA盒 C CCAAT盒 D 具有调节功能的DNA序列 E 具有调节作用的蛋白质 8 反式作用因子是指 A 具有激活功能的调节蛋白 B 具有抑制功能的调节蛋白 C 对另一基因具有激活功能的调节蛋白 D 对另一基因表达具有调节功能的蛋白 E 是特异DNA序列 9 基因表达调控是多级的，其主要环节是 A 基因活化 B 转录起始 C 转录后加工 D 翻译 E 翻译后加工 10 关于启动子的叙述，下列哪一项是正确的? A 开始被翻译的DNA序列 B 开始转录生成mRNA的DNA序列 C RNA聚合酶结合的DNA序列 D 产生阻遏物的基因 E 阻遏蛋白结合的DNA序列 名词解释 1 基因组 2 操纵基因 3 操纵子 4 增强子
第十五章-基因表达调控
第十五章基因表达调控 一、单项选择题 1.基因表达产物是 A.RNA B.DNA C.蛋白质 D.DNA和蛋白质 E.RNA和蛋白质 2. 基因表达调控可在多级水平上进行，但其基本控制点是： A．基因活化， B．转录起始 C．转录后加工 D．翻译 E．翻译后加工 3. 关于管家基因叙述错误的是 A. 在生物个体的几乎各生长阶段持续表达 B. 在生物个体的几乎所有细胞中持续表达 C. 在生物个体全生命过程的几乎所有细胞中表达 D. 在生物个体的某一生长阶段持续表达 E. 在一个物种的几乎所有个体中持续表达 4. 下列情况不属于基因表达阶段特异性的是，一个基因在 A. 胚胎发育过程不表达，出生后表达 B. 胚胎发育过程表达，在出生后不表达 C.分化的骨骼肌细胞表达，在未分化的心肌细胞不表达 D. 分化的心肌细胞表达，在未分化的心肌细胞不表达 E. 分化的心肌细胞不表达，在未分化的心肌细胞表达 5. 一个操纵子通常含有 A. 数个启动序列和一个编码基因 B. 一个启动序列和数个编码基因 C. 一个启动序列和一个编码基因 D. 两个启动序列和数个编码基因 E. 数个启动序列和数个编码基因 6. 操纵子的基因表达调节系统属于： A. 复制水平调节 B. 转录水平调节 C. 逆转录水平调节 D. 翻译水平调节 E. 翻译后水平调节
7.在乳糖操纵子的基因表达中，乳糖的作用是： A.作为阻遏物结合于操纵基因 B.作为辅阻遏物结合于阻遏物 C.使阻遏物变构而失去结合DNA的能力 D.抑制阻遏基因的转录 E.使RNA聚合酶变构而活性增加 8. Lac操纵子的阻遏蛋白由 A. Z基因编码 B. Y基因编码 C. A基因编码 D. I基因编码 E. 以上都不是 9. 阻遏蛋白识别操纵子的 A 启动基因 B 结构基因 C 操纵基因 D 内含子 E 外显子 10. 分解代谢物基因激活蛋白（CAP）对乳糖操纵子表达的影响是： A 正性调控 B 负性调控 C 正/负调控 D 无控制作用 E 可有可无 11.cAMP与CAP结合、CAP介导正性调节发生在 A 葡萄糖及cAMP浓度极高时 B 没有葡萄糖及cAMP较低时 C 没有葡萄糖及cAMP较高时 D 有葡萄糖及cAMP较低时 E 有葡萄糖及CAMP较高时 12.与DNA结合并阻止转录进行的蛋白质是 A.正调控蛋白 B.反式作用因子 C.诱导物 D.分解代谢基因活化蛋白 E.阻遏物 13. 色氨酸操纵子调节过程涉及 A. 转录水平调节 B. 转录延长调节 C. 转录激活调节 D. 翻译水平调节 E. 阻遏蛋白和“衰减子”调节 14.当培养基中色氨酸浓度较大时，色氨酸操纵子处于： A.诱导表达 B.阻遏表达 C.基本表达 D.组成表达 E.协调表达 15.顺式作用元件是指
基因表达调控课堂练习 参考答案
《基因表达调控》部分课堂练习题 学号： 姓名： 一、填空题。 1. 不同的生物使用不同的信号来指挥基因调控。在原核生物中，__营养状况__和__环境因素__对基因表达起着举足轻重的影响；在高等真核生物中，__激素水平__和__发育阶段__是基因表达调控的最主要手段。 2.操纵子学说是关于原核生物基因结构和表达调控的学说，由法国巴斯德研究所科学家__Jacob__和__Monod__在1961年首先提出，后经许多学者补充修正得以逐步完善。 3.大肠杆菌乳糖操纵子包括三个结构基因：__lacZ__、__lacY__和__lacA__，以及__启动子__、操 纵基因和__阻遏子__。 4. 在葡萄糖存在时，即使在细菌培养基中加入乳糖、半乳糖、阿拉伯糖等诱导物，与其对应的操纵子也不会启动而产生出代谢这些糖的酶，这种现象称为__葡萄糖抑制效应__。由于葡萄糖对乳糖操纵子表达的抑制是间接的，是葡萄糖的降解产物抑制了lac mRNA 的合成，所以又称为__降解物抑制作用__或__代谢物阻遏效应__。 5.对于大肠杆菌乳糖操纵子而言，乳糖并不与阻遏物相结合，真正的诱导物是乳糖的异构体__异构乳糖__，它是在β-半乳糖苷酶的催化下由乳糖形成的。 6. 能够诱导操纵子但不是代谢底物的化合物，如异丙基巯基半乳糖苷（IPTG ）和巯甲基半乳糖苷（TMG ），称为___义务（安慰性）___诱导物。色氨酸是一种调节分子，被称为__辅阻遏物___。 7.大肠杆菌中，色氨酸操纵子的转录调控除了阻遏系统外，还有__弱化系统__。 8. 色氨酸操纵子的弱化机制主要涉及__茎-环__的结构，它是一段可以通过自我配对形成__弱化子__的mRNA 区域，具有典型的终止子特点。前导区的碱基序列以不同的方式进行碱基配对，在前导肽基因中有2个相邻的__色氨酸__密码子，所以前导肽的翻译对__色氨酸-tRNA Trp _的浓度敏感，弱化子对RNA 聚合酶的影响依赖于前导肽中__核糖体__所处的位置，实现对转录过程的调节。 9. 在大肠杆菌色氨酸操纵子系统中，效应物分子为__色氨酸__。trp R 基因突变常引起trp mRNA 的组成型合成，该基因产物因此被称为__辅阻遏物__。它与__色氨酸__相结合形成有活性的阻遏物，与操纵区结合并关闭trp mRNA 转录。 10.细菌实施应急反应的信号是__鸟苷四磷酸__和__鸟苷五磷酸__，产生它们的诱导物是__空载 tRNA__。11.原核细胞中具有操纵子结构，并以多顺反子mRNA 方式转录，整个体系被置于一个启动子的控 制之下。真核细胞的DNA 是__单顺反子__结构，许多相关的基因常按功能成套组合，被称为__基因家族__。12.真核基因调控主要也是在转录水平上进行的，受大量特定的__顺式作用原件__和__反式作用因 子的调控，真核生物的转录调控大多数是通过两者复杂的相互作用来实现的。13.典型的锌指蛋白为__C2H2__型，即Zn 离子与两个__Cys____残基和两个__His ___残基形成配位 键。另一类锌指蛋白为__C2C2__型，即Zn 离子与四个_____Cys __残基形成配位键。 气设备料试卷
第13章 基因表达调控
第13 章基因表达调控 学习要求 1．掌握基因表达的相关概念及原理；原核生物转录起始的调节与操纵子模式；顺式作用元件的分类及转录因子的分类。 2．熟悉真核生物表达调控的特点；基因表达的时间、空间特异性。 3．了解基因表达调控的生理意义；其他转录调节机制及翻译水平调节机制；真核生物基因组结构特点；RNA polⅠ和RNA pol Ⅲ转录体系的调节；转录因子的结构。 基本知识点 基因表达调控是在细胞生物学、分子生物学以及分子遗传学研究基础上发展起来的新领域，涉及很多基本概念和原理。这些基本概念是认识原核、真核基因表达调控的基础。基因表达就是基因转录及翻译的过程。基因表达表现为严格的规律性，即时间、空间特异性。基因表达的方式有组成性表达及诱导或阻遏表达。原核生物、单细胞生物调节基因的表达是为适应环境、维持生长和细胞分裂。多细胞生物调节基因的表达除为适应环境，还有维持组织器官分化、个体发育的功能。 基因表达调控是在多级水平上进行的复杂事件。其中，转录起始是基因表达的基本控制点。基因转录激活调节基本要素涉及特异DNA序列, 调节蛋白以及这些因素通过何种方式对RNA聚合酶活性产生影响。除了转录起始水平的调节，其他水平，如基因激活、转录后加工、翻译及翻译后加工对原核及真核生物的基因表达均有调节作用。 大多数原核基因调控是通过操纵子机制实现的。E.coli的lac操纵子含Z、Y 及A三个结构基因，还包括一个操纵序列O，一个启动序列P在内的调控区，以及一个调节基因I。I基因与lac操纵区相邻，编码一种Lac阻遏蛋白。阻遏蛋白、分解代谢物基因激活蛋白（CAP）与调控区结合位点的结合调节着操纵子基因的转录。 真核基因表达调控的某些机制与原核存在明显差别。包括：真核细胞内含有多种RNA聚合酶；处于转录激活状态的染色质结构会发生明显变化，如对核酸酶敏感，DNA碱基的甲基化修饰，组蛋白的乙酰化，甲基化或磷酸化修饰等。此外，微小RNA对真核基因表达调控的影响也日益受到重视。 真核基因转录激活受顺式作用元件与反式作用因子相互作用调节。真核基因
基因表达调控考试题目及答案
1．决定基因表达空间特异性的是： A．器官分布 B．个体差异 C．细胞分布 D．发育时间 E．生命周期 2．关于操纵基因的叙述，下列那项是正确的： A．与阻遏蛋白结合的部位 B．与RNA聚合酶结合的部位 C．属于结构基因的一部分 D．具有转录活性 E．促进结构基因转录 3．关于管家基因叙述错误的是： A．在生物个体的几乎所有细胞中持续表达 B．在生物个体的几乎所各个生长阶段持续表达 C．在一个物种的几乎所有个体中持续表达 D．在生物个体的某一生长阶段持续表达 E．在生物个体的全生命过程中几乎所有细胞中表达 4．CAMP对转录进行调控必须先与： A．CAP结合形成CAMP-CAP复合物 B．RNA聚合酶结合从而促进酶与启动子结合 C．G蛋白结合 D．受体结合 E．操纵基因结合 5．目前认为基因表达调控的主要环节是： A．基因活化 B．转录起始 C．转录后加工 D．翻译起始 E．翻译后加工 6．调节子是指： A．操纵子 B．一种特殊的蛋白质
C．成群的操纵子组成的调控网络 D．mRNA的特殊序列 E．调节基因 7．当培养液中色氨酸浓度较大时，色氨酸操纵子处于： A．诱导表达 B．阻遏表达 C．基本表达 D．组成表达 E．协调表达 8．关于调节蛋白对基因表达调控，下列叙述那项正确： A．抑制结构基因表达 B．促进结构基因表达 C．一种调节蛋白作用于多个操纵子 D．必须先变构，才能发挥调节作用 E．一定要与其他小分子物质结合，才能有作用 9．根据操纵子学说，对基因活性起调节作用的是： A．RNA聚合酶 B．阻遏蛋白 C．诱导酶 D．连接酶 E．DNA聚合酶 10．操纵子的基因表达调节系统属于： A．复制水平的调节 B．转录水平的调节 C．翻译水平的调节 D．逆转录水平的调节 E．翻译后水平的调节 11．关于基因组的叙述错误的是： A．基因组是指一个细胞或病毒所携带的全部遗传信息 B．基因组是指一个细胞或病毒的整套基因 C．不同生物的基因组所含的基因多少不同 D．基因组中基因表达不受环境影响 E．有些生物的基因组是由RNA组成 12．下列那项决定基因表达的时间性和空间性：
第十三章 基因表达调控(试题与答案)
第十三章基因表达调控 [測试题] 一、名词解释 1．基因表达(gene expression) 2．管家基因(housekeeping gene) 3．反式作用因子(trans-acting element) 4．操纵子(operon) 5．启动子(promoter) 6．增强子(enhancer) 7．沉默子(silencer) 8．锌指结构(zinc finger) 9．RNA干涉（RNA interference，RNAi） 10．CpG岛 11．反转重复序列(inverted repeat) 12．基本转录因子(general transcription factors) 13．特异转录因子(special transcription factors) 14．基因表达诱导(gene expression induction) 15．基因表达阻遏(gene expression repression) 16．共有序列(consensus sequence ) 17．衰减子（attenuator） 18．基因组（genome） 19．DNA结合域（DNA binding domain） 20．顺式作用元件(cis-acting element) 21．基因表达的时间特异性(temporal specificity) 22．基因表达的空间特异性(spatial specificity) 23．自我控制（autogenous control） 24．反义控制（antisense control） 二、填空题 25．基因表达的时间特异性和空间特异性是由____ 、____和____相互作用决定的。 26．基因表达的方式有____和____。 27．可诱导和可阻遏基因受启动子与＿相互作用的影响。 28．基因表达调控的生物学意义包括____ 、____。 29．操纵子通常由2个以上的＿序列与____序列,____序列以及其他调节序列在基因组中成簇串联组成。30．真核生物基因的顺式作用元件常见的有____ 、____ 、____。 31．原核生物基因调节蛋白分为____ 、____ 、____三类。____决定____对启动序列的特异识别和结合能力；____与____序列结合，阻遏基因转录。 32．就基因转录激活而言，与其有关的要素有____ 、____ 、____ 、____。 33．乳糖操纵子的调节区是由____ 、____ 、____构成的。 34．反义RNA对翻译的调节作用是通过与 ____ 杂交阻断30S小亚基对____的识别及与____序列的结合。35．转录调节因子按功能特性分为____ 、____两类。 36．所有转录调节因子至少包括____ 、____两个不同的结构域。 37．转录因子DNA结构域常见的结构形式有____ 、____ 、____。 38．真核生物DNA依据重复频率，可将重复序列分为____ 、____ 、____。 39．当真核生物基因激活时，可观察到的染色体结构和性质的变化有____ 、____ 、____ 、____。40．基本转录因子是RNA聚合酶结合____所必须的一组蛋白质因子，决定____ 、____ 、____的转录。41．反转重复序列是指两个____序列在同一DNA链上____排列而成。