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干细胞常用实验技术protocol

干细胞常用实验技术protocol
干细胞常用实验技术protocol

实验室内部的人胚胎干细胞protocol

人类胚胎干细胞H1和H9维持方案

一、试剂配制

饲养层细胞培养基

Fibroblast-DMEM Media (F-DMEM)

DMEM (GIBCO 11960-044) 450ml

FCS GIBCO 16000-044 50ml 10%

Pen/Strep 2.5ml 50IU/ml

L-glut GIBCO 25030-081 5ml 2uM/ml

人类胚胎干细胞培养基

HESC-Media

KO-DMED GIBCO 10829-018 480ml

KOSR GIBCO 10828-028 120ml 20%

10mM NEAA GIBCO 11140-050 6ml 0.1mM

L-glut(0.2M) GIBCO 25030-081 6ml 2mM

Pen/Strep 3ml

55mM BME GIBCO 21985-023 1.1ml 0.1mM

ITS GIBCO 41400-045 6ml

4-80C避光保存。用前每50毫升加200-400ng bFGF

细胞冻存培养基

FBS-DMSO

FCS GIBCO 16000-044 9ml 90%

DMSO SIGMA D2650 1ml 10%

细胞消化液Trypsin-EDTA

0.25% Trysin-1mM EDTA GIBCO 25200-056 2ml 0.05%,0.2mM

PBS(-) 14190-144 8ml

MEF细胞有丝分裂终止液Mito C

Mitomycin C 0.2mg 0.05mg/ml

dd-H2O 15230-162 4ml

避光保存。

Mito C的终浓度为10ug/ml即40吸ul 工作液加到2ml F-DMEM中。.

0.1% Gelatin(用于培养皿的包被)

1% Gelatin 40ml 0.1%

ddH2O GIBCO 15230-162 360ml

高压消毒。

二、培养方案

一) 饲养层细胞的培养

1、主要实验材料

(1)培养液为F-DMEM。

(2)小鼠周龄为7~8w的性成熟母小鼠和周龄为8w的种公鼠。

2. 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的培养

(1)小鼠胚胎的准备

1)性成熟母小鼠与种公鼠按1公(♂):2母(♀)比例合笼。

2)每天早上观察母小鼠阴道口。有乳白色或蛋黄色冻胶状物(阴道栓)即确定为怀孕。见栓当天上午定为怀孕的0.5d。

3)取怀孕12.5~14.5d母鼠,断颈处死,无菌条件下暴露子宫。

4)用镊子提起近子宫颈端,分离子宫系膜,剪断子宫角。

5)取出整个子宫,在无菌滤纸上吸干血迹,置于有PBS或无血清DMEM平皿内。用PBS洗涤三次,弃除表面残余血迹。

6)沿子宫系膜侧剪开子宫,取出带有胎膜的胚胎,置于另一盛有PBS或无血清DMEM平皿内,充分洗涤,弃除表面红细胞。

7)用小镊子撕破胎膜,取出胎鼠,弃除胎膜,用PBS洗涤三次。

8)去除胚胎头部、内脏和四肢,将躯干部置于另一盛有PBS或无血清DMEM平皿内,用PBS 至少洗涤三次,充分弃除红细胞。

(2)小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的培养

二) 培养方法有两种: 组织块培养法和单细胞悬液培养法。

组织块培养法:

1) 用无菌眼科小剪刀或刮胡刀片将鼠胚躯干剪(切)成1mm3以下的碎块,吸置于离心管内。

2) 室温下静置5~10min, 弃上层液,留下胚胎组织碎块。

3) 向装有鼠胚组织碎块的离心管内加入1ml消化液,轻轻吹吸30sec。

4) 加入等体积的培养液终止消化。室温下静止5-10min。

5) 弃上清液,留下鼠胚组织块沉淀物。

6)加入5ml培养液重新悬浮鼠胚组织块,移入培养瓶内。每5个鼠胚的组织块可使用1个100ml的培养瓶。

7) 补加适量的培养液,使组织块悬浮液能均匀分布于培养瓶表面。37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱内培养。

8) 培养开始的前两天不要晃动培养瓶。第三天见组织块附着培养瓶表面, 周围生长出细胞。补充培养液或更换培养液,继续培养。每天观察。

9) 待细胞连成一片时,即可消化。消化时弃培养液,用PBS洗涤一次;加适量消化液(以能覆盖细胞层为度),在室温下作用大约30sec;弃消化液,让残余消化液继续作用。轻敲培养瓶底, 当细胞层出现裂隙时,加入培养液终止消化。或在倒置显微镜下观察,当细胞与细胞之间分开即可终止消化。

10)补加培养液,轻轻吹打均匀,吸置离心管内,静置5~10min。

11)上层为单细胞悬液,下层为组织块沉淀。将上层单细胞悬液轻轻吸置另一离心管内,弃组织块。

12)以800~1000rpm 5min离心,弃上清。加入培养液,重新悬浮细胞沉淀。以1:3比例传代。采用3~5代细胞作为饲养细胞。

单细胞悬液培养法:

1)~5)步骤同组织块培养法1)~5) 步骤。

6)重复组织块培养法3)~4)步骤5~6次,即重复消化鼠胚组织块5~6次。每次消化后都收集上层液即单细胞悬液。最后一次消化后弃组织块。

7)将收集到的单细胞悬液离心,800~1000rpm 5min。

8)弃上清,加入培养液,轻轻吹吸,制备成均匀的单细胞悬液。

9) 移置培养瓶内。5个鼠胚制备出来的单细胞悬液可以使用3个100ml的培养瓶。

10)补加适量的培养液,吹吸均匀。37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱内培养。每天观察。

11)培养2~3d后,细胞连成片,即可消化。消化过程同组织块培养法9)步骤。

12)以1:2~1:3比例传代培养,2~3d传一代。采用3~5代细胞作为饲养细胞。

(3)培养结果

在培养MEF初始的1~2代时,杂细胞(非成纤维细胞的其他组织细胞)较多,细胞形态多样;在第三代开始时,杂细胞逐渐减少。小鼠胚胎成纤维细胞为梭状;但连成片时,由于受杂细胞的影响,形态不够典型。

三)细胞冷冻

1. 当细胞90%-100% 融合时,尤其细胞少量堆聚可冷冻。

2. 处理方法同传代培养1-8,每25 cm2 的细胞加1ml FBS-DMSO重悬细胞。

3. 每个冷冻管编号加1ml细胞悬液。

4. 置入40C1小时,放入1cm厚的泡沫盒中置入-800C过夜,置入液氮长期保存。四)灭活饲养层细胞并备饲养层皿

试剂和材料

HESC Medium、PBS(+)、PBS(-)、Mito C、Trypsin-EDTA

离心管、移液管

Mito C处理(以25 cm2培养瓶为例)

1. 需要铺皿前一天,全换液。.

2. 留2ml培养基。

3. 加40ul Mito C(10ug/ml)。

4. 培养皿底以0.1%Gelatin溶液覆盖预处理。

5. 3小时后,去培养基,处理方法同传代方法。

6. 重悬细胞,细胞计数,以、

7.0×104/ cm2(MEF)铺皿。

7. 置于培养箱常规培养。

8. 15分钟后,取出皿,吹打皿中央,重新置于培养箱中培养。

五、复苏及冻存hES细胞

细胞被冻存在10%二甲基亚砜(DMSO)中防止结晶的形成,结晶的形成会损害细胞。然而,二甲基亚砜对细胞有毒性,快速的进行细胞复苏是很重要的。

步骤:

1.从液氮中取出一管细胞;

2.将冻存管置于37℃水浴中2分钟(或放到管内溶液恰好完全溶解);

3.将细胞转移到一15ml Falcon管中;

4.加入5ml ES培养基(用培养基冲洗冻存管);

5.离心200g×5min;

6.弃上清,用2ml ES培养基重悬细胞,吹打10次;

7.接种在明胶包被(见下文)的6孔或6cm组织培养皿;

8.孵育。

冻存细胞

冻存液:90%HS和10%二甲基亚砜

步骤:

1.1×PBS洗细胞并留少许PBS在培养皿内;

2.用细胞刮刀收集细胞;

3.将细胞转入15ml Falcon管内并离心200g×5min;

4.弃去上清并将细胞重悬于冷的冻存液中。

5.分装于冻存管内,每管1ml;将冻存管装入Nalgen冻存盒内。

6.置-80℃过夜,第二天移入液氮。

转载自丁香园

1、Stem Cell Analysis干细胞分析(功能、表型、核酸含量、边群)[London Research Institute]

brief introduction:Stem Cell Analysis ,FACS Laboratory, London Research Institute

干细胞分析,包括以下四方面内容:

Functional Analysis

Phenotyping

Nucleic Acid content

Side Population analysis

2、Production of ES Cell Chimeras by Aggregation wtih Eight-Cell Stage Embryos [Nagy Lab,Mount Sinai Hospital]

brief introduction:Production of ES Cell Chimeras by Aggregation wtih Eight-Cell

Stage Embryos

[Nagy Lab,Mount Sinai Hospital]

3、Production of Completely ES Cell-Derived Fetuses by Aggragation with Tetraploid Embryos[Nagy Lab,Mount Sinai Hospital]

brief introduction:Production of Completely ES Cell-Derived Fetuses by Aggragation with Tetraploid Embryos

Nagy Lab,Mount Sinai Hospital

4、Picking ES Cell Colonies and Transferring Them to 24-Well Culture Dishes

brief introduction:Picking ES Cell Colonies and Transferring Them to 24-Well Culture Dishes

From the Laboratory of Dr. Allan Bradley Baylor College of Medicine, Houston, Texas

5、Preparation of Feeder Layers And SNL Stocks [Baylor College of Medicine]

brief introduction:Preparation of Feeder Layers And SNL Stocks ,

Allan Bradley's Lab, Baylor College of Medicine, Houston, Texas

6、Preparing 48-Well Plate Feeders[Baylor College of Medicine]

brief introduction:Preparing 48-Well Plate Feeders

From the Laboratory of Dr. Allan Bradley ,Baylor College of Medicine, Houston, Texas

7、Freezing Embryonic Stem (ES) Cell Clones in 96-Well Plates冻存96空板中的胚胎干细胞克隆[Baylor College of Medicine]

brief introduction:Freezing Embryonic Stem (ES) Cell Clones in 96-Well Plates the Laboratory of Dr. Allan Bradley ,Baylor College of Medicine, Houston, Texas

8、In Vitro Differentiate ES cells into glial cells and neurons 胚胎干细胞体外分化为神经元和神经胶质细胞(Nagy Lab,Mount Sinai Hospital)

brief introduction:Differentiate ES cells into glial cells and neurons ,Nagy Lab,Mount Sinai Hospital

胚胎干细胞体外分化为神经元和神经胶质细胞

9、In Vitro Differentiation of ES Cells into Cystic Embryoid Bodies 胚胎干细胞体外分化为囊胚体(Nagy Lab,Mount Sinai Hospital)

brief introduction:In Vitro Differentiation of ES Cells into Cystic Embryoid Bodies ,Nagy Lab,Mount Sinai Hospital

胚胎干细胞体外分化为囊胚体

10、In Vitro Differentiation of ES Cells into Cardiac Muscle胚胎干细胞体外分化成心肌细胞(Nagy Lab,Mount Sinai Hospital )

brief introduction:In Vitro Differentiation of ES Cells into Cardiac Muscle Nagy Lab,Mount Sinai Hospital

11、Isolation of Primary Fibroblasts from Mouse Embryos 从小鼠胚胎分离纤维原细胞Baylor College of Medicine

brief introduction:Isolation of Primary Fibroblasts from Mouse Embryos , Allan Bradley's Lab, Baylor College of Medicine, Houston, Texas

12、ES Cell Subcloning Protocol 胚胎干细胞亚克隆(NIH Stem Cell Unit)

brief introduction:ES Cell Subcloning Protocol, NIH ,Stem Cell Unit

13、ES and TS cell freezing/thawing胚胎干细胞冻存复苏

brief introduction:ES and TS cell freezing/thawing, Nagy Lab,Samuel Lunenfeld Research Institute, Room 881 ,Mount Sinai Hospital

该实验室专著于小鼠遗传学以及其跟人类疾病关系

14、ES Cell Culture and Manipulation (The Cancer Center at Washington University)

brief introduction:ES Cell Culture and Manipulation (The Cancer Center at Washington University)

15、ES / MEF cell culture and electroporation of targeting construct 胚胎干细胞培养及电穿孔

brief introduction:This website is an online resource for those interested in murine transgenesis. Within this site you will find information pertaining toresearch and techniques employed in the field of transgenics, including both DNA microinjection and embryonic stem cell injection.

16、Electroporation of ES Cell 胚胎干细胞电穿孔[Mount Sinai Hospital]

brief introduction:Electroporation of ES Cell ,Nagy Lab,Samuel Lunenfeld Research Institute, Room 881 ,Mount Sinai Hospital

胚胎干细胞电穿孔,该实验室专著于小鼠遗传学以及其跟人类疾病关系

17、Culture of Human Embryonic Stem Cells (hESC)人胚胎干细胞培养[NIH Stem Cell Unit]

brief introduction:Culture of Human Embryonic Stem Cells (hESC),NIH Stem Cell Unit

人胚胎干细胞培养,来自NIH Stem Cell Unit的材料,该网址下还有许多NIH关于干细胞的资料。

18、Analysis of ES Cell Clones by Mini-Southern 分析胚胎干细胞克隆(Baylor College of Medicine)

brief introduction:Analysis of ES Cell Clones by Mini-Southern ,Allan Bradley's Lab, Baylor College of Medicine, Houston, Texas,Mini-southern法

分析胚胎干细胞克隆

19、General ES Cell Protocols胚胎干细胞基本操作(Baylor College of Medicine)

brief introduction:EMBRYONIC STEM CELLS PROTOCOL,Allan Bradley's Lab, Baylor College of Medicine, Houston, Texas

20、Stem Cell Protocols 很全的干细胞操作[University of Wisconsin]

brief introduction:Stem Cell Protocols Thomson Lab, University of Wisconsin 内容很全的干细胞基本操作;主要包括以下内容:

Media and reagents

Thawing ES Cells

Splitting ES Cells on MEF's (stem cell photos)

Freezing ES Cells

Matrigel Aliquoting and Plating

Splitting ES Cells on Matrigel

Embryonic Bodies

edited by sdimmuno

Feeder-Free Culture of hESCs

MEF Conditioned medium

Plate MEFs (p4 or p5) onto gelatin-coated plates at a density of 1x106 cells/10cm culture dish.

The next day, wash cells with PBS and add 10ml normal hESC medium containing 4ng/ml bFGF. This is collected the next day and each subsequent day for 7 days.

CM may be stored frozen for several months.

Before use, add 4ng/ml bFGF to the medium and filter.

Culture of hESCs

Coat 6-well tissue culture plates (Falcon) with 5% Matrigel in DMEM/F12 overnight at 4°C using 1.5ml Matrigel suspension per well.

Allow the Matrigel plate to warm to room temperature in the hood for approx 30min prior to use. DO NOT WARM IN INCUBATOR.

Remove hESC cells from MEFs using collagenase treatment and sediment as usual. Aspirate the Matrigel and plate triturated colonies in conditioned medium supplemented with an additional 4ng/ml bFGF or in normal hESC medium containing 100ng/ml bFGF.

Feed cells every day up to 7 days. Note: Colonies can grow bigger and more densely on Matrigel without losing morphology than on MEFs.

Passaging

Wash cells once with PBS and incubate at 37°C with 1ml/well of 2mg/ml dispase in DMEM/F12.

Colonies should detach intact within 10–15 minutes upon tapping smartly on the side of the plate. DO NOT SCRAPE.

Remove the colonies in dispase to a 15ml tube and rinse wells with an additional 1ml/well growth medium.

Sediment and wash twice more as usual.

Triturate VERY gently as colonies grow flat and dissociate readily in dispase. Note:Small colonies and single cells do not survive well on Matrigel especially in

100ng/ml bFGF only.

Plate as usual on fresh Matrigel

微生物实验室现场检查

微生物实验室要求 微生物检验实验室操作技术要求 第一节实验室管理制度 一、实验室管理制度 1 .实验室应制定仪器配备管理、使用制度,药品管理、使用制度,玻璃器皿管理,使用制度,并根据安全制度和环境条件的要求,本室工作人员应严格掌握,认真执行。 2 .进入实验室必须穿工作服,进入无菌室换无菌衣、帽、鞋,戴好口罩,非实验 室人员不得进入实验室,严格执行安全操作规程。 3 .实验室内物品摆放整齐,试剂定期检查并有明晰标签,仪器定期检查、保养、 检修 , 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。 4 .各种器材应建立请领消耗记录,贵重仪器有使用记录,破损遗失应填写报告; 药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让,更不得私自拿出,应严格执行《菌种保管制度》。 5 .禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗,实验室内不得带入私人物品,离开 实验室前认真检查水、电、暖气、门窗,对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。 6 .科、室负责人督促本制度严格执行,根据情况给于奖惩,出现问题立即报告, 造成病原扩散等责任事故者,应视情节直至追究法律责任。 二、仪器配备、管理使用制度 1 .食品微生物实验室应具备下列仪器:培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱,电位 pH 计、高速离心机。 2 .实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求,保证准确可靠,凡计量器具须经 计量部门检定合格方能使用。 3 .实验室仪器安放合理,贵重仪器有专人保管,建立仪器档案,并备有操作方法,保养、维修、说明书及使用登记本,做到经常维护、保养和检查,精密仪器不得随意移动,若有损坏需要修理时,不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员,经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。

建立一个分子生物学实验室所需的仪器

分子生物学技术信息 关于筹建一个分子生物学实验室所需的仪器 一、上游分子克隆 分子克隆技术是分子生物学的核心技术,这项技术的主要目的是获得某一基因或DNA片段的大量拷贝,从而可以深入分析基因结构与功能,并可达到人为改造细胞及物种个体的遗传性状的目的。 1. 分子克隆的基本技术路线: 1) 分离制备目的基因或DNA片段; 2) 目的DNA与载体在体外进行连接; 3) 重组DNA分子转入宿主细胞; 4) 筛选及鉴定阳性重组体; 5) 重组体的扩增。 2. 分子克隆常用仪器:

二、核酸分子杂交 核酸分子杂交技术是分子生物学领域中最常用的技术之一。其基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下可按碱基互补原则形成双链。由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的高度灵敏性,使其在分子生物学领域中被广泛应用于分子克隆的筛选,基因组中特定基因序列的定量定性检测,基因表达和基因突变分析及疾病的基因诊断等。根据核酸种类分为Southern印迹法和Northern印迹法。 核酸分子杂交中常用的仪器: 三、下游蛋白的表达及分离纯化 目的基因能否发挥其效应,只能通过其表达有功能的蛋白质来实现,因此蛋白质的表达及分析方法成为分子生物学中必不可少的组成部分。 1. 蛋白的表达 大肠杆菌是自然界中最为人知的生物体之一。由于其具有操作简易,产量高和成本低廉等优点,使其成为蛋白质表达的首选宿主。缺点是:表达缺乏翻译后加工,得到的蛋白可能缺乏某些天然蛋白所具有的活性。 酵母作为单细胞低等真核生物,具有易培养,繁殖快,便于基因操作等优点,渐渐被开发作为目的基因的表达系统。其中甲基酵母作为外源基因的表达

干细胞实验室管理使用规程

干细胞实验室管理使用规程 1 目的建立实验室管理使用规程,保证操作者正确使用。 2 范围适用于实验室操作。 3 责任者操作人员、实验室管理人员。 4 内容 4.1实验室应严禁放置杂物,无关人员严禁入内。 4.2 实验室应严格保持整洁,防止污染,定期消毒。实验室应每次使用前后用0.1%新洁尔灭溶液擦拭工作台面及可能污染 的死角,湿拖地面,每周湿擦墙面及天花板。定期清洁空气 净化器,做好消毒记录。无菌衣每周送供应室消毒。 4.3实验人员用肥皂洗手后进入缓冲间换拖鞋,用75%乙醇棉球擦手,穿戴工作衣帽、口罩。进行无菌操作时,衣帽穿戴要整 洁。帽子要将全部头发遮盖,口罩须遮住口鼻,并修剪指甲,洗手。 4.4将所需物品剥去牛皮纸及外包装,从传递窗移入操作间。所有进出实验室的物品需通过专用传递窗通道,并且需经过紫外 线消毒或75%酒精消毒。 4.5超净工作台使用前开启紫外灯照射30分钟,使用时打开吹风净化工作台,操作完毕及时清理消毒。 4.6取无菌物品时,必须用无菌钳(镊),镊子剪刀等在每次使用前后,必须通过火焰灭菌冷却后方可使用。未经消毒的物品不

可触及无菌物或跨越无菌区。注射器如需回抽时,应对着火焰吸入无菌空气。 4.7实验过程严格按照无菌操作规程操作,进行无菌操作时如器械、用物疑有污染或已被污染,即不可使用,应更换或重新灭菌。 所有消毒灭菌物品必须及时标明打开时间,并在规定时限内使用。实验完毕,整理检品及各种用具并清洁工作台面。 4.8细胞培养箱、离心机等实验仪器根据各自要求定期消毒。新配培养液等试剂送检无菌后使用。 4.9各种消毒灭菌剂根据其性能及产品说明与要求配置,并按要求定时测试浓度,保证消毒灭菌效果。实验室定期进行洁净度测试检查沉降菌(在室内打开血琼脂平板30分钟,经37℃培养48h),100级平均菌落数不得过1个/皿,如超过应进行清洁消毒。 4.10 实验室进出程序如下:

实验室日常管理规定

实验室日常管理规定 为了配合与支持公司加强规范化管理的优良管理精神,为了进一步提高实验室人员的工作效率,根据目前实验室目前的实际情况,现拟订《实验室日常管理规定(试行)》。具体内容如下: 一、考勤。必须严格按照公司的管理规定认真执行。 二、安全。 1、着装要求。在实验区域必须穿工作服,而且要扣好所有的扣子。裤子必须长到脚踝部分以下。在实验室的办公区域,可暂时不穿工作服,但工作服必须放在指定地点。 2、饮水进食。禁止在实验区域进食、喝水等。 3、门窗。上班开门、窗,下班锁门关窗。如有参观人员,提前通知实验室负责人;如果需要加班在实验室做实验,提前告知实验室管理人员并填写实验室延时使用单,找实验室主任签字,使用完成后关好窗户,锁好门。 4、技术资料。必须具备良好的保密意识。对于不清楚保密级别的东西,及时询问直接上级。 5、在实验区域要集中注意力,做到三不伤害:不伤害自己、不伤害他人、不被他人伤害。对进行有危险及较大危害的实验,实验者有责任提醒实验室其他人员注意,以便提高防范意识。 三、仪器管理。 1、检测人员使用仪器时必须严格按照使用方法操作,不得私自操作,使用完成后将仪器整理干净,放回原位,保持仪器关闭状态。对于实验室租用的仪器,须填写租用仪器详单,得到领导签字,并妥善保管,保证完好归还。 2、仪器定期进行外校,由实验室管理员送校,并要保证在外校期间,实验室仪器使用正常,无缺少,保证实验正常的进行。 3、实验室仪器保证贴有统一标志,对合格,准用,停用仪器严格区分,绝不违规使用,仪器损坏时需及时联系专人修理,修理产生费用填写报销单进行统一报销。对于新购进的仪器需进行校准,并贴标、填写仪器档案。 4、仪器设备需要借用时,需要借用人员填写《仪器借用登记单》,仪器管理人员在仪器外借前需要认真检查仪器的状态,符合使用要求才能外借。借用人员需保持仪器设备的完整性及完好性,确保仪器设备在借用期间无损坏。如有损坏,按损坏程度进行相应的处罚。

干细胞实验室净化工程设计

干细胞实验室净化工程设计(SICOLAB) 1工程概况 该干细胞实验楼位于吉林省,主要从事干细胞基础研究、临床应用研究及干细胞技术服务,包括各种组织细胞的来源干细胞体外鉴别、分离、纯化、扩增和培养等实验研究。楼内共有洁净实验室约3 818m2,其中万级2416m2,10万级598m2,30万级804m2。该实验楼共4层,其详细布局如下:1层为干细胞库、备品库、更衣室、制水间、配电等后勤保障设施房间。其中只有干细胞库为净化区域,该干细胞库面积约140m2,洁净度等级为10万级。2层为实验用干细胞生产车间。其中包括7个细胞培养间,1个套间培养间,3个质控室,以及灭菌室、洗刷间、液氮储存库、更衣室、清洁间、洗衣间、配液室、耗材库、内走廊等净化区域,共约1 191m2,洁净度等级为万级;质控室内走廊及其更衣室,合计约63m2,洁净度等级为10万级;脱包室、细胞发送室、备品洗刷间、原料检测室、CO2气瓶室、外实验区、外环走廊等净化区域,共约515m2,洁净度等级为30万级。3层为生物制药中试生产车间。其中包括3间博士外实验区、实验区内走廊、预留区内走廊、一更室等净化区域,共约289m2,洁净度等级为30万级;中试车间内走廊、二更室等净化区域,约204m2,洁净度等级为10万级;细胞培养间、纯化室、发酵室、灌装室、无菌备品室、备用实验室等净化区域,面积共约1 225m2,洁净度等级为万级。4层为办公室、公共实验室等功能房间,屋顶为净化设备机房,均为非净化区域,本设计不予考虑。 2设计参数 室外设计参数 夏季室外空调计算干球温度℃,湿球温度℃;冬季室外空调计算干球温度-25℃,相对湿度68%。 室内设计参数 该干细胞实验楼各功能房间对温度和湿度均无特殊要求,因此设计参数如下:万级净化区,室内设计温度为20~24℃,相对湿度为45%~60%;10万级及30万级净化区,室内设计温度为18~26℃,相对湿度为45%~65%。 3净化空调系统设计 空调系统划分干细胞实验室洁净空调系统的主要作用是保证各功能房间内部实验环境的空气品质,对防止交叉感染、防火防爆等没有特殊要求,因此系统划分时并不需要严格区分不同洁净度等级和不同功能的房间。另外该项目的特点是内部房间功能复杂、种类繁多,不同洁净度等级的房间分布也相对比较散乱,但各房间的运行、使用时间相差不大,且温湿度控制要求差别也不大。结合该特点,该项目在系统划分时主要考虑了房间的相对位置及方便送风管路布置安装等因素,将系统划分为6个分区。其中1层的干细胞库为1#区;2层从中间划分为2个分区(2#和3#区);3层除从中间划分为2个分区(4#和5#区)之外,又将不在此次项目之内的预留区单独划分为一个分区(6#区),以便实现预留区在未启用前的全部关闭及将来启用后的独立控制。 洁净室压差控制 洁净室与周围的空间必须维持一定的压差,但不同的国家标准中对压差的规定有一定的出入。其中《药品生产质量管理规范(2010年修订)》(2011新版GMP)第48条规定:洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差应当不低于10Pa[2]。而GB 50457—:不同空气洁净度等级的医药洁净区之间及医药洁净区与非洁净区之间的空气静压差不应小于5Pa,医药洁净区与室外大气的静压差不应小于10Pa。虽然目前存在的干细胞实验室大都是按照GMP要求设计建设的,但根据实际计算及相关经验,GMP标准中对于压差的要求并不一定完全适合于干细胞实验室。因此本项目按照不同级别洁净区之间压差不小于5Pa、洁净区与室外的压差不小于10Pa的原则,确定各级别洁净室与室外大气的相对压力(压差)分别为:30万级,10Pa;10万级,15Pa;万级,20Pa。实际运行调试效果良好。洁净室维持压差值所需的压差风量,根据洁净室特点,采用换气次数法确定。压差为10Pa(30万级)的区域取换气次数为2h-1,15Pa(10万级)的区域取换气次数为3h-1,20Pa(万级)的区域取换气次数为4h-1。并在压差要求相对严格的培养间与外走廊之间、2层内走廊与外实验区、3层罐装室及纯化室分别与内走廊之间设置差压计,以便调节与控制压差。 新风量的计算 国家标准规定,医药类洁净室内的新风量应取下列最大值: 1)补偿室内排风量和保持室内正压所需新风量之和; 2)室内每人新风量不应小于40m3/h。由于该项目各洁净室内人员数量较少,经计算按照第2)条确定的新风量均小于第1)条,因此新风量均取保持正压所需新风量与补偿室内排风量之和。经验证,该风量大于总送风量的10%,符合相关要求。

实验室日常管理制度

1实验室是进行检测和科研的重要场所,严禁存放私人或与实验无关的一切物品;不准做一切与检测和科研实验无关的事情。 2实验室所有人员必须严格遵守各项规章制度和管理规定,加强技术安全和技术保密工作,严格实行标准化管理和计量管理。 3实验室的工作人员必须认真学习实验室有关的安全守则,熟悉有关仪器的操作规程和相关实验技术操作规程;遵守有关实验室的规章制度,服从实验室管理人员的管理,在实验室内的一切活动须经本实验室管理人员的许可方可实施。 4进入实验室的人员必须按规定穿着整洁的工作服。除实验室工作人员和与实验室工作有关的人员外,其他任何人员严禁入内。 5严禁实验室人员私自接受或安排他人在实验室内开展实验工作、进行仪器检测和私自收费,或减免应收费用,违者将按有关规定严肃处理和处罚。 6在实验室工作的人员,应严格遵守本行业的有关法律、法规和规章,每次实验必须有详尽的记录,包括实验目的、实验方法、实验操作步骤和实验数据等;使用仪器必须按规定进行登记。原始实验记录、数据按规范和要求必须严格管理。 7由于责任事故造成仪器设备的损坏,要追究使用人的责任直到赔偿。 8实验室工作人员必须热爱本职工作,不断提高业务水平,做到文明、有序管理。必须认真执行有关实验室安全卫生的管理规定,做到文明整洁,仪器设备摆放整齐,杜绝事故的发生。 9实验室钥匙管理应严格遵守实验室有关钥匙管理的规定,严禁任何人以任何借口私自配制或转借他人。 10非本公司外的个人或团体参观实验室需经主管级别以上批准。任何人未经批准不得私自安排他人参观。

1实验室内应保证有各种必备的安全设施(通风橱、防尘罩、消防灭火器材等),并应定期进行检查,保证可随时提供使用。 2实验室工作人员必须严格遵守操作规程及各项安全管理规章制度,在使用电、气、水、火时,必须按有关规定进行操作。实验室内各种仪器、器皿应按规定的位置放置,不得任意堆放,以免错拿错用,保证安全无误并认真填写使用登记(记录)表。 3实验室工作人员工作前应做好个人防护,穿工作服,戴口罩帽子鞋套,搞好实验室内外的环境卫生。 4禁止将与实验无关的物品带入实验室,实验室与办公室须严格分开。 5凡进入实验室的各级工作人员,都要熟悉准备进行实验的具体步骤和条件,选用适当的仪器和试剂药品,对可能发生的危险,应作好防护准备。 6实验室工作人员必须掌握消防常识和常用消防器材的使用,能区别不同火源选择适当的灭火器材。灭火器材要放置在明显及使用方便处,要经常检查,保证其处于完好有效状态。 7操作和处理易挥发、易燃试剂时,严禁用明火直接加热。 8按照仪器说明的要求,使用安全电压以上电压的电器设备均应有良好接地,电热设备所用电源导线应能满足功率(电流)要求,应经常检查是否完好无损。关闭闸刀开关时绝对不得用湿手进行操作。 9凡使用有毒气体、液体或在反应过程中产生有毒、刺激性气体和液体时,必须在通风柜内进行操作。 10使用酸、碱等强腐蚀性试剂时,必须佩带橡胶手套,必要时佩带橡胶围裙,勿使易挥发试剂瓶口对着自己或他人。 11清洗实验室仪器时应注意不使含有多量剧毒试剂的废液直接倒入下水道,必须先经适当转化处理再进行清洗排放。 12发生意外事故时,应迅速切断电源、火源,立即采取有效措施及时处理,并及时报告有关领导和保卫消防部门。 13实验室内不准吸烟、就餐、会客、住宿,严禁携带无关物品或带领无关人员进入实验室。 14实验工作结束后,值班人员要对仪器设备、水、电、门、窗等进行安全检查。 各室都要选定安全负责人,专门负责此项工作。

临床级干细胞实验室建设标准中英文对照

临床级干细胞实验室建设标准Rating Scale Definitions

Assessment Objectives评估目标

1.Standard Operating Procedures and Methods 标准化操作规程(SOP)和方法 a.SOP in writing and available to approved personnel. SOP正确编写,并且对工作人员来说是切实可用的。 b.Personnel properly performing SOP as stated. 工作人员能够按照SOP正确操作。 c.Are current SOPs being implemented? 当前使用的SOP是有效的? https://www.wendangku.net/doc/f54688369.html,b Facilities and Environmental Control 实验室设施及环境控制 a.Facility of suitable size and properly maintained. 实验室设备的匹配性及恰当的维护。 b.Facility divided into separate or defined areas for each operation. 仪器设备分区放置及每项操作有专门的区域。 c.Does the facility maintain a proper access/egress? 实验室的出入口安排恰当。 d.Proper environmental control for equipment and facilities. 实验室环境控制安排合理性。 e.Facility restricted to authorized personnel. 出入实验室人员的权限。 3.Equipment Maintenance and Calibration 设备维护和校正 a.Equipment properly maintained. 仪器设备的正确维护。 b.Equipment of suitable design and use. 仪器设备合理匹配和使用。 c.Proper SOP established for the cleaning, maintenance, testing, calibration, use, and standardization of the equipment established. 建立正确的清洁、维护、测试、校准、使用设备的SOP。 4.Supplies and Reagents Management Control 耗材和试剂管理控制

微生物实验室设备清单

微生物实验室设备清单 Company Document number:WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998

微生物实验室设备清单 微生物实验室设备清单(比较基础,只是针对一般食品厂的要求) 食品微生物实验室必备设备 一,无菌室和超净工作台 是实验室的核心部分,主要为样品提供保护,保证实验结果的准确和人员的安全。 (一)无菌室 无菌室通过空气的净化和空间的消毒为微生物实验提供一个相对无菌的工作环境。无室的主要组成设备的 空气自净器,传递窗,紫外线灯等。严格的无菌室可能还装备风彬室等。 (二)超净工作台 超净工作台作为代替无菌室的一种设备,使用简单方便,为实验的开展提供一个相对无菌的操作台。超净工作台湾队根据风向分为水平式和垂直式。 二,培养箱 主要用于实验室微生物的培养,为微生物的生长提供一个适宜的环境。 (一)普通培养箱:一般控制的温度范围为:室温+5~65度,又分为电热恒温培养箱和隔水式恒温培养箱。 (二)生化培养箱:一般控制的温度范围为:5~50度。

(三)恒温恒湿箱:一般控制的温度范围为:5~50度,控制的湿度范围为:50~90%。可作为霉菌培养箱。 (四)厌氧培养箱:适用于厌氧微生物的培养。 三,干燥箱 四,灭菌器 五,天平 一般要求具备精度达到万分之一的分析天平。 六,显微镜 主要用于微生物和微小物品结构,形态等的观察。 七,分光光度计 在QS中用于生产方便面,茶饮料,肉制品,乳制品,棉白糖的企业。 八,酸度计 在QS中用于生产果蔬罐头,白沙糖,饮用水类的企业。 九,电导率仪和浊度仪 在QS中用于生产饮用水的企业。 十,折光仪 在QS中用于生产果蔬罐头,饮料类的企业。 十一,恒温水温浴锅 在QS中用于生产方便面,速冻面米食品企业。 十二,定氮装置 在QS中用于生产乳制品,含蛋白质饮料的企业。

干细胞联合实验室建立运作合同范本

编号: 干细胞联合实验室建立运作合同 甲方:_______________________________ 乙方:_______________________________ 签订日期:_______ 年______ 月______ 日 甲方: 地址: 乙方: 地址:

公司(以下简称“”或者乙方) 和公司(以下简称“”或者甲 方)为了促进干细胞技术相关领域的科学研究,推动生物技术经济产业的发展,本着优势互补、平等互利和长期合作的原则,双方商议决定联合建立和运作 -- 联合实验室(以下简称“联合实验室”),内容如下: 一、合作目标 1.1以共赢机制创建干细胞联合实验室,促进双方在干细胞技术前沿领域的研究工作。 1.2通过联合研究和合作项目进行共同创新。 1.3。 1.4。 二、合作范围和研究领域 联合实验室以干细胞技术领域的相关研究作为工作重点,双方初期将在以下领域开展研究工作 2.1 2.2 2.3 。 三、组织管理 3.1.联合实验室由和公司在协议指导下共 同管理和运作,联合实验室不是独立的法人实体。 32联合实验室的日常管理和运作由和公司共同承担。

3.3.和公司将联合建立一个实验室管理委 员会以管理联合实验室的日常运作。联合管理委员会的成员将包括: 方: 方: 实验室管理委员会将负责管理和审核联合实验室的日常运作,包括人员安排、流程制定及效果评定。实验室管理委员会每年定期举行会议,审议实验室年度工作状况和规划下一年度工作计划。 3.4.实验室管理委员会下设学术(专业)委员会。学术(专业)委员会的成员将包括 和在、以及相关领域的学术领头人。由学术(专业)委员会负责上列___ 2.1、2.2、2.3节中所述研究 方向的项目招标、项目评审、学术交流的管理与执行。学术委员会将定期召开会议以推动工作进行,并定期向联合管理委员会汇报工作进展和成果。 四、合作形式及内容 4.1研究课题 4.1.1课题种类 第一类是联合实验室基金课题,主要资助应用创新性、技术前沿性、经费相对较少 的研究型课题(I类课题); 第二类是直接向联合实验室工作委员会申请并获得立项、完全由 公司提供经费支持的重大课题(II类课题); 第三类是双方联合申请到的国家或者政府资助的研究课题(III类课题),如需配 套经费可由公司提供。 4.1.2立项原则 经过广泛而深入的双方交流,在双方感兴趣的研究领域中确立课题,由

分子生物学实验室常用仪器设备简介(精)

实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介 实验室主要仪器,设备的简介及使用方法 微量移液器 微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器,其装有直接读数容量计。 微量移液器有多种规格,在移液器量程范围内能连续调节读数。移液器常见的四种规格分别是: 0.5~10μl(读数窗显示0.5~10.0,每转1档为0.1μl); 10~100μl(读数窗显示10.0~100, 每转1档为1μl); 20~200μl(读数窗显示20~200, 每转1档1μl); 100~1000μl(读数窗显示100~1000, 每转1档为5μl). 量液的操作步骤: 1.将微量移液器装上吸头(不同规格的移液器用不同的吸头) 2.将微量移液器按钮轻轻压至第一停点; 3.垂直握持微量移液器,使吸嘴浸入液样面下几毫米,千万不要将吸嘴直接插到液体底部;4.缓慢、平稳地松开控制按钮,吸上样液。否则液体进入吸嘴太快,导致液体倒吸入移液器内部,或吸入体积减少; 5.等一秒钟后将吸嘴提离液面 6.平稳地把按钮压到第一停点,再把按钮压至第二停点以排出剩余液体; 7.提起微量移液器,然后按吸嘴弹射器除去吸嘴。 量液操作注意问题: 1.未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。 2.一定要在允许量程范围内设定容量,千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围,否则会造成损坏。 3.不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。 4.不要用大量程的移液器移取小体积样品。 5. 移液器使用完后,将刻度调到最大刻度,收藏。 低温台式高速离心机 离心机的分类 低速:每分钟几千转 高速:每分钟1 ~ 3万转 超速:每分钟3万转以上 离心机的功能:分离,纯化 低速:细胞等大分子 高速:DNA,蛋白等 超速: 病毒,蛋白等,根据用途又可分为分析超速离心机和制备超速离心机。 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段 基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术 本实验室所用离心机为台式高速离心机(IBM),配有角式转头:24×1.5ml;极限转速20000rpm 台式高速离心机使用步骤 1、把离心机放置于平面桌或平面台上,目测使之平衡,用手轻摇一下离心机,检查离心机是否放置平衡。

实验室管理规范

实验室管理规范 Document number:NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT

实验室管理规范 一.目的: 为了营造一个安全有效,秩序良好的实验室环境,达到“科学、规范、安全、高效”的目的,特制订本实验室管理规定。 二.范围: 本规定适用于进入实验室内所有人员。 三.实验室管理人员职责 实验室属于家电公司厨电技术部,负责厨电烟机,消毒柜及灶具新产品研发实验、调试、验证和测试评价等工作,担负着产品研发测试、产品常规检验、市场退换货产品确认、OEM供应商送检产品评价、零部件形式实验及周期审查。 1.1负责实验室日常管理,使测试任务顺利进行; 1.2仪器仪表,测试工具,测试辅料定期点检,维护,报废及申购; 1.3负责实验室标准建立、修订,实验记录、报告等归档; 1.4负责实验室日常5S; 1.5负责实验室物品的点检,每月至少点检一次。 四.实验室管理办法: 1.1所有进入实验室的人员都必须严格遵守实验室规章制度。 1.2所有进入实验室的人员应服从实验室管理人员安排,采取必要的安全 措施,保证人身及仪器设备的安全。

1.3实验室的仪器设备,未经管理人许可,任何人不得擅自开关、使用和 移动实验室中的任何设备。实验室设备借用按程序向实验室管理人员 申请。 1.4不得将实验无关人员带入实验室,由于产品技术又有保密性,进出实 验室要随手关门。 1.5由于责任事故造成仪器设备的损坏,要追究使用人的责任。 五.实验室安全管理制度 1.1实验室应制定相应实验室规则及实验室安全制度。根据本实验室情况 制定严格的操作规程及防火、防电、防气体泄漏及防盗管理制度,实 验室内部人员要严格执行。进入实验室的外来人员都必须遵守实验室 有关的规章制度。 1.2实验室应指定专人负责实验室设备及人身的安全。负责本室的安全技 术监督、检查工作;对贵重精密仪器设备、危险物品,应由具有业务 能力的专人负责操作。 1.3来实验室工作的人员,必须有实验室工作人员在场或经过上机操作培 训与考核。实验人员进入实验室应穿着整齐、不佩戴有损仪器仪表的 挂件。与实验室工作无关的人员不得擅自进入实验室,外单位来访人 员如需要进入实验室,必须经实验室负责人批准同意后,才能进入实 验室。 1.4不得在实验室饮食、娱乐,实验室操作用仪器仪表不能用来盛载食物 和饮料。 1.5实验室及走廊禁止吸烟,严禁烟火。

干细胞实验室净化工程设计SICOL新编

干细胞实验室净化工程设 计S I C O L新编 Revised by Liu Jing on January 12, 2021

干细胞实验室净化工程设计(SICOLAB) 1工程概况 该干细胞实验楼位于吉林省,主要从事干细胞基础研究、临床应用研究及干细胞技术服务,包括各种组织细胞的来源干细胞体外鉴别、分离、纯化、扩增和培养等实验研究。楼内共有洁净实验室约3 818m2,其中万级2416m2,10万级598m2,30万级804m2。该实验楼共4层,其详细布局如下:1层为干细胞库、备品库、更衣室、制水间、配电等后勤保障设施房间。其中只有干细胞库为净化区域,该干细胞库面积约140m2,洁净度等级为10万级。2层为实验用干细胞生产车间。其中包括7个细胞培养间,1个套间培养间,3个质控室,以及灭菌室、洗刷间、液氮储存库、更衣室、清洁间、洗衣间、配液室、耗材库、内走廊等净化区域,共约1 191m2,洁净度等级为万级;质控室内走廊及其更衣室,合计约 63m2,洁净度等级为10万级;脱包室、细胞发送室、备品洗刷间、原料检测室、CO2气瓶室、外实验区、外环走廊等净化区域,共约515m2,洁净度等级为30万级。3层为生物制药中试生产车间。其中包括3间博士外实验区、实验区内走廊、预留区内走廊、一更室等净化区域,共约289m2,洁净度等级为30万级;中试车间内走廊、二更室等净化区域,约204m2,洁净度等级为10万级;细胞培养间、纯化室、发酵室、灌装室、无菌备品室、备用实验室等净化区域,面积共约1 225m2,洁净度等级为万级。4层为办公室、公共实验室等功能房间,屋顶为净化设备机房,均为非净化区域,本设计不予考虑。 2设计参数 室外设计参数

微生物实验室常用仪器配置

微生物实验室常用仪器配置 1 超净工作台(已有)微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养,那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境 2、培养箱(已有)培养箱有多种类型,它的作用在于为微生物的生长提供一个适宜的环境。生化培养箱只能控制温度,可作为一般细菌的平板培养;霉菌培养箱可以控制温度和湿度,可作为霉菌的培养;CO2培养箱适用于厌氧微生物的培养。 3、天平(已有待完善)天平用于精确称量各类试剂。实验室常用的是电子天平,电子天平按照精度不同有不同的级别。 4、微生物均质器(无)用于从固体样品中提取细菌。用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无污染、无损伤、不升温、不需要灭菌处理,不需洗刷器皿等特点,是微生物实验中使用较为方便的仪器 5、菌落计数器(无)菌落计数仪可协助操作者计数菌落数量。通过放大,拍照,计数等方式准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可连接电脑完成自动计数的操作。 微波炉/ 电炉用于溶液的快速加热,微生物固体培养基的加热溶化。 7、高压灭菌锅(已有坏)微生物学所用到的大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号,有些是手动的,有些是全自动的。用户需要根据自己的需要选购。 8、移液器(无)液体量器用于精密量取各类液体。常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯。 9、低温冰箱(已有)冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是 4 度保存,有些要求是负20 度保存,实验人员一定要看清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存。 11、摇床(已有)摇床是实验室常用的一种仪器,在微生物实验操作过程中,液体培养基培养细菌时需要在特定温度下振荡使用。 12、纯水装置 13、生物显微镜(无)由于微生物体积较小,所以在观察时需要借助生物显微镜。生物显微镜用于微生物和微小物品结构,形态等的观察。 16、恒温干燥箱 17、恒温水浴锅(已有------ 其他实验室) 水浴锅是一种控温装置,水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分。有些微生物反应需要在37度,42度,56度下水浴进行,所以恒温水浴锅可以提供需要的温度。 (18)酸度计(无) 用于配置试剂时精确测量PH 值,从而保证配置的溶液的精确性。有时也需要利用pH 计测定样品溶液的酸碱度。 (19)离心机(无)用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。离心机有冷冻和常温之分。 有些样品由于在常温下不太稳定,需要低温环境,要视样品的种类而定。 20 接种仪器:试管(有)、接种针、牛角勺(无)、药勺、接种环、接种钩,解剖刀、培养皿(无)、镊子、酒精灯、接种锄、玻璃刮刀(无)

实验室日常管理规章制度

实验室日常管理规 章制度

实验室日常管理规章制度 制定人:高欢相美容王旭李阳王朋展闫辉 老师审批意见: .10.20

一、总则 (1) 二、实验室日常管理责任分工安排 (2) 三、实验室维护与科研管理制度 (3) 四、实验室资产设备使用管理制度 (4) 五、实验室资产设备保管管理制度 (5) 六、实验室安全卫生管理制度 (6) 七、实验室教学管理制度 (8) 八、实验室财务管理制度 (9) 附件1.实验室卫生值日表 (10) 附件2.实验室经费报销值日表 (11)

为加强实验室规范化管理,提高管理效率,确保实验室安全,保障科研工作,根据老师要求和实验室实际情况,特制订本实验室日常管理规章制度。 第一条实验室全体成员必须严格按照老师的要求,遵守实验室各项规章制度和决定。 第二条实验室一切事务必须严格按照老师的统一要求和安排进行。 第三条实验室日常管理按照“集体协商,分工负责”的原则进行。 第四条实验室日常管理实行分工负责制。各负责人必须按照老师和规章制度要求做好自己分管的工作,配合好其它负责人的工作。各负责人向老师和全体成员负责。 第五条坚持汇报制度。实验室成员要定期或不定期的向老师汇报自己的工作进展。重要事项必须及时向老师汇报。 第六条对任何违反实验室各项规章制度的行为,予以做出适当处理。未造成严重后果的,由相关负责人进行业务培训并合格后方能继续工作。造成严重后果的,必须及时向老师汇报,接受老师处理。 第七条禁止个人做有损实验室利益、形象、声誉或破坏实验室发展的事情。 第八条规章制度要与时俱进。各负责人对不适应新情况、新

问题的规定要及时修改,上报老师审批。 实验室日常管理责任分工安排第一条实验室日常管理责任人 总负责人:孙启慧 负责人:高欢相美容 分管负责人:王旭李阳高欢王朋展闫辉相美容第二条实验室日常管理职责分工 (一)总负责人 指导实验室日常管理工作。 (二)负责人 负责统筹实验室日常管理全面工作。 (三)分管负责人 1、王旭:资产设备维护与科研管理 2、李阳:资产设备使用管理 3、高欢:资产设备保管管理 4、王朋展:安全卫生管理 5、闫辉:教学管理 6、相美容:财务管理 7、研三:监督指导 8、研一:协助执行

干细胞发展

干细胞技术是当今医学研究最前沿也是最热门的方向之一,近年来发展迅猛,也取得了令人兴奋的成果。今天就让我们来看一看干细胞从发现到现在都有哪些里程碑式的意义。 如果说,作为细胞治疗的免疫治疗,让人们看到了攻克癌症和肿瘤的可能,那么作为细胞治疗的另一个方向,干细胞则在血液系统疾病、神经系统疾病、心血管疾病、自身免疫系统疾病以及内分泌疾病等各种疾病的治疗上让人们看到了希望。 起——干细胞概念的提出 干细胞的概念,是在1908年柏林的一次血液病大会上的一位俄国组织学家Alexander A. Maximow提出的。就是他(见下图): 干细胞的“干”译自英文“stem”,意为“树干”和“起源”,干细胞就是起源细胞。大多数动物出生以后,器官和组织在生长发育过程中不再产生其他类型细胞的发育和分化。而在生命过程中,有些细胞需要不断地更新,如皮肤、小肠和血液细胞。干细胞群的功能即是控制和维持细胞的再生。 因此干细胞在医学界也被称为"万用细胞",而与干细胞相关的医学研究有时也被称为"再生医学",皆是因为干细胞本身具有独特的修复和重建功能,以及再生成为各种组织器官和人体的潜在能力,简单的来说就像这货。 但在1908年提出的干细胞假说当时并没被重视,直到1945年,人们在对暴露在致命辐射剂量下的病人进行研究时,重新定义并找到了造血干细胞的证据。干细胞的定义包括两部分:自我更新和分化,每一次分裂后产生一个新的干细胞和一个分化后的细胞。干细胞库得到维持,同时分化的细胞也在机体内发挥功能。 承——“多莉”的诞生 上述这些成果都是在小编出生前的事,因此并没有什么感觉,但接下来到了1997年。那年除了香港回归外,还发生了一件大事,震惊了世界,那就是利用干细胞培养出了克隆羊多莉。这是世界上第一只用成体细胞发育成的哺乳动物,也是人类向造物主的能力更进了一大步。 在之后的一年,这项技术有了真正的突破,1998年美国两个实验小组分别独立地从人体胚胎组织中培养出人的多能干细胞。其后,人类胚胎干细胞研究成果在《Science》1999年评选的当年世界十大科技进展中位列榜首;2000年,《Time》周刊又将其评选为20世纪末世界十大科技成就之首。干细胞的出现使人类一直幻想的长生不老成为了可能。

实验室日常管理规范

实验室日常管理规范 1、安全管理规定 1.1实验室应设安全员,负责检查安全工作,切实做好安全要求:四防(防火、防盗、防破坏、 防灾害事故)、四关(关门、窗、水、电),以确保实验室安全。 1.2有毒、易燃、易爆物品和放射性物品的使用,要严格审批,严格保管,同时做好使用记录。 1.3绝对禁止带打火机,或其它火种等进入实验室;禁止在实验室内抽烟,扔烟头等。 1.4使用或操作化学品前,应阅读化学品的 MSDS 表,以明白其主要的危险性。 1.5使用或操作化学品后,必须及时洗手,以免化学品中毒。 1.6定期检查电线电路,消防器材等,不要用湿手,去接触电器插座,也不要使用湿手插拨 电器插头。 1.7双休日、节假日和夜间进行实验室,必须经管理人员同意,并至少有二人以上同时工作。 2、人员管理规定 2.1实验人员进入实验室开展工作前,须先办理有关手续,登记个人信息及家庭联系方式,以及 与依托单位之间的管理关系,经实验室审核批准和安全操作培训合格后,方可进入实验室进行研究工作。 2.2实验室人员进入实验室工作必须认真学习实验室有关的生物安全、防火安全和清洁卫生的有 关规定,遵守有关实验室的规章制度,服从实验室管理人员的管理,必须树立严肃认真、严谨求实、严格要求、严守纪律的工作作风。 2.3严格控制非实验人员进入实验室,参观人员、设备维修人员等非实验人员进入实验室前应对 个人相关信息进行登记,得到管理人员许可后方可进入,以切实加强技术、科研保密工作。 2.4进入实验室的一切人员,必需遵守实验室的各项规章制度,爱护公物,保持室内安静,严禁 吸烟,乱抛纸屑杂物,严禁大声喧哗,打闹。 2.5非实验室内部人员,未经允许,不允许进出实验室。 2.6参观或实验室介绍,必须有实验室负责人批准或陪同才行。 3、实验仪器管理规定 3.1仪器设备应有专人负责,定期检查仪器设备和线路,及时保养,排出仪器故障,消除隐患, 严禁带故障工作,严防损坏仪器设备,确保仪器设备处于良好工作状态,如有不安全因素应及时向管理人员汇报,采取措施及时消除,保证仪器处于正常状态。 3.2严禁利用仪器专用计算机进行娱乐活动或其它与本仪器功能无关的工作。 3.3实验前必须充分熟悉实验内容、方法,并详细阅读仪器说明书,严格按操作规程操作。 3.4实验时所用仪器、试剂要放置有序,实验台面要及时整理。 3.5在每次实验结束后,清扫卫生,清理桌面,整理仪器。要做到所负责的实验室桌面、所使用 的设备无污迹、积灰和杂物,始终保持良好的卫生环境,并做好使用登记。 3.6实验过程中不得离岗,必须离开时须委托他人看管。 3.7实验中要注意人身安全,牢固树立“安全第一”的观念。要严守操作规程,爱护仪器设备。仪

广州再生医学与健康广东实验室干细胞与衰老中心2020年诚聘科研人员

广州再生医学与健康广东实验室干细胞与衰老中 心2020年诚聘科研人员 干细胞与衰老(StemCellandAgeing)研究组开展的研究包括:1)运用前沿的生物技术手段研究衰老过程,全面揭示生理衰老的特征,进而对衰老进程进行客观监测。2)影响衰老的外部和内在因素以及 相对应的细胞内信号通路或生物学过程,以此为基础致力于寻找延 缓的机体或器官衰老的手段。3)衰老相关疾病研究,重点阐明衰老 因素在相关疾病中的作用,例如癌症、神经退性型疾病以及骨骼肌 肉系统的衰退等。4)干细胞再生技术在衰老以及衰老相关疾病中的 应用。 王涛研究员先后在UNC-CH和YaleUniversity接受博士后训练,目前致力于衰老研究,正积极探索年龄/衰老因素在各种重大慢性疾 病发生例如癌症、亨廷顿疾病以及骨质疏松症过程中的作用,为这 类疾病发生的预防以及治疗等方面奠定基础和提供指导知识。根据 项目进展,正在面向国内外招聘科研人员和管理人员,具体岗位设 置如下: 一、岗位及任职条件 助理研究员/博士后/副研究员/研究员: 职责以及要求(满足其中一个方向) 1.具有小鼠实验/细胞培养等等技术,在成体干细胞或肿瘤生物 学或生物化学等方面有较多研究经历; 2.能够熟练进行核酸质谱相关操作实验,准确可靠检测核酸相关的修饰。 3.生物信息分析,负责课题组的各种组学测序生物信息分析,包括全转录组RNA测序,ChIP-Seq,ATAC-Seq,scRNASeq等测序数据。能够根据项目进展的需要建立新的分析平台。

科研助理(支撑方向) 招聘人数:2人 应聘条件: 1.大学本科以上学历; 2.精通英语听说读写;熟练运用office等办公软件; 3.工作积极主动,具有良好的沟通协调能力以及执行力。 岗位职责: 1.负责来往文件的起草收发及归档、相关资质证件的办理、外专接待等日常行政事务协助工作; 2.协助完成实验室的日常运转和经费管理等工作; 3.完成领导交办的其他相关工作。 二、薪酬待遇 1.提供具有全球领先的丰厚薪资待遇(年薪制,顶尖人才一人一议,研究员70万+,副研究员35万+,博士后30万+,助理研究员 18万+,科研助理12万+),具体面议; 2.提供充足科研经费和齐全的科研设备,为高端人才组建科研支撑团队(副研究员、博士后、助理研究员、科研助理、协调员等),根据工作能力和贡献发放相应补贴与绩效奖励; 3.鼓励申报国家人才项目、广东省广州市开发区等各级人才项目,获取优厚人才补贴和福利,如广州市高层次人才可获100-500万人 才补贴及其他丰厚福利待遇,可与薪酬叠加; 4.高标准缴纳五险一金,带薪年假等全方位福利,多途径协助解决子女入学,住房等生活问题; 5.其他福利待遇参照再生医学省实验室相关规定执行。 三、招聘办法

各行业实验室应配仪器清单

技术服务-1 食品微生物实验室必备设备 一,无菌室和超净工作台 是实验室的核心部分,主要为样品提供保护,保证实验结果的准确和人员的安全。 (一)无菌室 无菌室通过空气的净化和空间的消毒为微生物实验提供一个相对无菌的工作环境。无室的主要组成设备的 空气自净器,传递窗,紫外线灯等。严格的无菌室可能还装备风彬室等。 (二)超净工作台 超净工作台作为代替无菌室的一种设备,使用简单方便,为实验的开展提供一个相对无菌的操作台。超净工作台湾队根据风向分为水平式和垂直式。 二,培养箱 主要用于实验室微生物的培养,为微生物的生长提供一个适宜的环境。 (一)普通培养箱:一般控制的温度范围为:室温+5~65℃,又分为电热恒温培养箱和隔水式恒温培养箱。 (二)生化培养箱:一般控制的温度范围为:5~50℃。 (三)恒温恒湿箱:一般控制的温度范围为:5~50℃,控制的湿度范围为:50~90%。可作为霉菌培养箱。 (四)厌氧培养箱:适用于厌氧微生物的培养。 三,干燥箱 四,灭菌器 五,天平 一般要求具备精度达到万分之一的分析天平。 六,显微镜 主要用于微生物和微小物品结构,形态等的观察。 七,分光光度计 在QS中用于生产方便面,茶饮料,肉制品,乳制品,棉白糖的企业。 八,酸度计 在QS中用于生产果蔬罐头,白沙糖,饮用水类的企业。 九,电导率仪和浊度仪 在QS中用于生产饮用水的企业。 十,折光仪 在QS中用于生产果蔬罐头,饮料类的企业。 十一,恒温水温浴锅 在QS中用于生产方便面,速冻面米食品企业。 十二,定氮装置 在QS中用于生产乳制品,含蛋白质饮料的企业。 十三,杂质度过滤机 在QS中用于生产乳品企业。 实验室配套常用设备 一,通风柜 二,离心机 三,纯水器 四,烘箱 五,低温冰箱 实验室常用消耗品

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