网上找的生化分生实验练习题

一、

1．某蛋白样品的浓度大约在1-5μg左右，应使用下列哪种方法进行定量() A．凯氏定氮法

B．双缩脲法

C．Folin-酚试剂法

D．考马斯亮蓝法

E．紫外吸收法

2．使用紫外吸收法测定蛋白质含量时应使用（）()

A．玻璃比色皿

B．塑料比色皿

C．萤石比色皿

D．陶瓷比色皿

E．石英比色皿

3．凝胶层析是根据待分离样品的（）进行分离的方法。()

A．电荷性质

B．电荷多少

C．分子大小

D．吸附力

E．分配系数

4．相对离心力是（）()

A．在离心场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数

B．在离心场中，作用于颗粒的地球重力相当于离心力的倍数

C．在离心场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的乘积

D．在离心场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的和

E．在离心场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的差

5．下列关于电泳时pH值、颗粒所带电荷和电泳速度的关系描述正确的是：() A．pH值里等电点越远，颗粒所带电荷越多，电泳速度越慢

B．pH值里等电点越近，颗粒所带电荷越多，电泳速度越快

C．pH值里等电点越远，颗粒所带电荷越少，电泳速度越快

D．pH值里等电点越远，颗粒所带电荷越多，电泳速度越快

6．聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质，除一般电泳电荷效应外，欲使分辨力提高还应有的作用是（）()

A．浓缩作用

B．扩散作用

C．分子筛作用

D．电渗作用

7．常用的小量制备质粒DNA的方法不包括：()

A．煮沸法

B．碱裂解法

C．去污剂法

D．层析法

8．下列关于限制性内切酶的描述，错误的是：()

A．一种限制性内切酶只能识别并切割一种特定的核苷酸序列

B．限制性内切酶的活性受温度影响

C．限制性内切酶需保存于-20℃

D．限制性内切酶可以切割RNA分子

9．现需要吸取液体100μl，请选择合适量程的移液器:()

A．0.1-2.5μl

B．1-10μl

C．2.5-20μl

D．10-200μl

E．100-1000μl

10．目前实验室常用的制备感受态的方法是：()

A．CaSO4法+热激法

B．MgCl2法+热激法

C．CaCl2法+热激法

D．CaSO4法+低温变性

答案：DECAD CDDDC

二、

1．紫外吸收法是利用蛋白质中含有哪些氨基酸残基，使蛋白质具有吸收紫外光的性质的？()

A．Tyr及Trp

B．Tyr及Gly

C．Trp及Ala

D．Phe及Cys

E．Phe及Ser

2．利用分光光度法测定蛋白质含量时吸光度的范围应为（）()

A．0.01-1.0

B．0.05-1.0

C．0.01-0.5

D．0.05-0.5

E．0.5-1.0

3．凝胶层析过程中最先从凝胶柱中流出的是（）()

A．最小的分子

B．最大的分子

C．较大的分子

D．较小的分子

E．中等大小的分子

4．下列选项是使用离心机时的注意事项，除了（）()

A．必须事先在天平上精密地平衡离心管和其内容物

B．转头中绝对不能装载单数的管子

C．当转头只是部分装载时，管子必须互相对称地放在转头中

D．每个转头必须在其最高允许转速和使用累计期限内使用

E．必须使用塑料离心管

5．某蛋白样品的PI= 7.3，那么在PH8.6的电泳缓冲液中进行电泳，其涌动方向是（）() A．向负极移动

B．向正极移动

C．不运动

D．同时向正极和负极移动

6．聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶，其优点是()

A．机械强度好、弹性小、无电渗作用、分辨率高

B．机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率高

C．机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率低

D．机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率高

7．碱裂解法提取质粒DNA时，氯仿/酚的作用是：()

A．去除染色体DNA

B．去除脂类物质

C．去除杂蛋白

D．去除RNA

8．在分子克隆技术中，限制性内切酶主要用于：()

A．目的基因的提取和导入

B．目的基因的导入和检测

C．目的基因与载体的结合

D．目的基因的切割和提取

9．现需要吸取液体2.5μl，请选择合适量程的移液器:()

A．0.1-2μl

B．1-10μl

C．2.5-20μl

D．10-200μl

E．100-1000μl

10．基因工程中使用最为广泛的基因载体是：()

A．质粒

B．粘粒

C．噬菌体

D．病毒

答案：ABBEB BCDBA

三、

1．利用双缩脲法测定蛋白质含量时，标准品的浓度为10mg/ml，标准的OD520=0.5，样品的OD520=0.8，那么样品的浓度为（）()

A．16mg/ml

B．6.25 mg/ml

C．8 mg/ml

D．12.5 mg/ml

E．24 mg/ml

2．在凝胶层析过程中样品分子的运动方式是（）()

A．只做垂直向下运动

B．只做不定向扩散运动

C．自由运动

D．横向运动

E．既做垂直向下运动又做不定向扩散运动

3．RCF是指：（）()

A．每分钟转数

B．重力加速度

C．转头的角速度

D．相对离心力

E．向心力

4．下列选项是影响电泳迁移率的因素，除了（）()

A．电场强度

B．溶液的PH值

C．溶液的离子强度

D．凝胶长度

5．SDS-PAGE电泳系统中的物理效应不包括（）()

A．扩散效应

B．浓缩效应

C．电荷效应

D．分子筛效应

6．微量移液器使用时，应注意很多事项，不包括在内的是：()

A．选择合适量程，不能超过规定量程

B．取液时，按到第一档，放出液体是按到第二档打出

C．取液时，按到第二档，放出液体是按到第一档打出

D．移液器不能直接接触溶液

7．制备的质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳时，通常以三条带形式出现，不包括下列哪种：() A．线性

B．开环

C．闭环超螺旋

D．单链DNA

8．DNA琼脂糖凝胶电泳中，上样缓冲液的成分是：()

A．氨基黑，甘油

B．考马斯亮蓝，蔗糖

C．苏丹红，蔗糖

D．溴酚蓝，蔗糖

9．下列影响琼脂糖凝胶DNA迁移率的因素，不包括：()

A．DNA分子的分子量

B．DNA分子的带电荷性质

C．DNA的带电荷量

D．DNA分子的空间构象

E．DNA分子的浓度

答案：AEDDA CDDE

四、

1．利用标准曲线法测定蛋白质含量时，标准曲线的范围是（）()

A．被测物质浓度的1/4到4倍之间

B．被测物质浓度的1/3到3倍之间

C．被测物质浓度的1/4到2倍之间

D．被测物质浓度的1/2到2倍之间

E．被测物质浓度的1/2到3倍之间

2．可见分光光度计是依据物质对可见区辐射光产生的特性吸收光谱及（）定律，测量物质

对不同波长单色光的吸收程度进行定量分析的仪器。()

A．爱迪生

B．朗伯-比尔

C．牛顿

D．阿基米德

E．特斯拉

3．在凝胶层析过程中行程最长的分子是（）()

A．最小的分子

B．最大的分子

C．较大的分子

D．较小的分子

E．中等大小的分子

4．为了保证离心机正常使用，必须做到下述选项，除了（）()

A．使用带有棉垫的套管

B．平衡离心管及其内容物后将其插入套管中

C．将平衡好后的离心管对称放置于离心机中

D．离心过程中应随时观察离心机的运转情况

E．低温离心需先预冷转头

5．聚丙烯酰胺凝胶聚合时使用的催化剂是()

A．丙烯酰胺

B．甲叉双丙烯酰胺

C．TEMED

D．过硫酸铵

6．本学期的Western Blot实验在转膜过程中，凝胶与膜的位置关系是（）() A．膜在负极，胶在正极

B．膜在正极，胶在负极

C．胶在上，膜在下

D．膜在上，胶在下

7．DNA 分子在电泳缓冲液中，带何种电荷：()

A．正电荷

B．负电荷

C．不带电荷

8．在分子克隆技术中，连接酶主要用于：()

A．目的基因的提取和导入

B．目的基因的导入和检测

C．目的基因与载体的链接

D．目的基因的提取

9．碱裂解法分离提取质粒DNA的基本原理是：()

A．碱性条件下染色体DNA变性，去除变性条件后，可以复性；而质粒DNA则相反。

B．碱性条件下质粒DNA变性，去除变性条件后，可以复性；而染色体DNA则相反。10．在质粒提取实验中，solution III处理后，离心进行分离，此时，质粒DNA存在于：() A．上清液

B．沉淀

答案：DBABD ABCAA

五、

1．考马斯亮蓝法测定蛋白质含量时使用的检测试剂是？()

A．考马斯亮蓝R250

B．考马斯亮蓝G250

C．溴酚蓝

D．铁氰化钾

E．磷酸苯二钠

2．有甲、乙两份不同浓度的有色物质溶液，甲溶液用1.0cm吸收池，乙溶液用2.0cm吸收池,在同一波长下测得的吸光度的值相等，则他们的浓度关系为（）()

A．甲是乙的1/2

B．甲等于乙

C．乙是甲的二倍

D．乙是甲的1/2

E．不确定

3．聚丙烯酰胺凝胶聚合时使用的催化剂是()

A．丙烯酰胺

B．甲叉双丙烯酰胺

C．TEMED

D．过硫酸铵

4．Western Blot是通过（）进行检测的。()

A．DNA与DNA相互作用

B．DNA与RNA相互作用

C．蛋白质与蛋白质相互作用

D．蛋白质与DNA相互作用

E．蛋白质与RNA相互作用

5．作为基因工程中常用的载体，质粒必需具备一些条件，下列哪个不属于载体的必备要素：A．环状DNA分子，能够自我复制

B．有多个限制性酶切位点

C．有筛选标记基因

D．跟随染色体DAN复制而复制

E．方便从宿主细胞中提取分离

6．制备的质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳时，通常以三条带形式出现，不包括下列哪种：() A．线性

B．开环

C．闭环超螺旋

D．单链DNA

7．基因工程技术中，切割载体和目的基因的限制性内切酶和切口必备的条件是：() A．可用不同的限制性内切酶，产生的粘性末端必需相同

B．必需用相同的限制性内切酶，产生的粘性末端不需要相同

C．必需用相同的限制性内切酶，产生的粘性末端必需相同

D．可用不同的限制性内切酶，产生的粘性末端不必相同

8．琼脂糖凝胶电泳分离DNA时，加样孔端应该临近电泳仪的：()

A．阳极

B．阴极

9．微量移液器使用时，应注意很多事项，不包括在内的是：()

A．选择合适量程，不能超过规定量程

B．取液时，按到第一档，放出液体是按到第二档打出

C．取液时，按到第二档，放出液体是按到第一档打出

D．移液器不能直接接触溶液

10．质粒DNA提取分离中，solution II的作用是：()

A．裂解菌体，使DNA分子变性

B．悬浮菌体，稳定菌体性质

C．中和碱性，使DNA分子复性

D．去除杂蛋白

答案：BDDCD DABCA

六、

1．利用双缩脲法测定蛋白含量时，样品的吸光度为1.6，下一步应如何操作？() A．利用标准曲线法计算样品含量

B．利用标准管法计算样品含量

C．将样品进行稀释从新检测

D．将样品进行浓缩从新检测

E．另取一定量样品从新检测

2．利用分光光度技术检测蛋白质含量时，下列哪种做法是错误的？()

A．机器预热20-30分钟

B．选择合适波长

C．用空白管调零时，不应把装有待测样品的比色皿放在分光光度计表面

D．将样品倒入比色皿后应用吸水纸将比色皿毛面擦净

E．不能用手接触比色皿的光面

3．带电粒子在电场中的移动与下列哪个选项无关:()

A．粒子的大小

B．粒子所带电荷

C．粒子的形状

D．电泳方式

4．下列选项中可以加速聚丙烯酰胺凝胶聚合的是（）()

A．升高温度并充氧

B．升高温度并隔绝氧

C．降低温度并充氧

D．降低温度并隔绝氧

5．提取分离质粒DNA时，加入的2倍体积的冰预冷的无水乙醇的目的是：() A．去除杂蛋白

B．去除脂类物质

C．沉淀质粒DNA

D．沉淀RNA

6．在质粒提取实验中solution III处理后，离心进行分离，此时细菌染色体DNA存在于：() A．上清液

B．沉淀

7．质粒DNA提取分离中，solution II 的作用是：()

A．裂解菌体，使DNA分子变性

B．悬浮菌体，稳定菌体性质

C．中和碱性，使DNA分子复性

D．去除杂蛋白

8．DNA琼脂糖凝胶电泳中，上样缓冲液的功能是：()

A．沉淀杂蛋白

B．加快电泳速度

C．提高分辨率

D．沉降样品至加样孔和前沿指示

9．质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳时,电泳迁移率按照从大到小的顺序排列，正确的是：() A．线性DNA>闭环DNA>超螺旋DNA

B．闭环DNA>线性DNA>超螺旋DNA

C．超螺旋DNA>闭环DNA>线性DNA

D．超螺旋DNA>线性DNA>闭环DNA

10．琼脂糖凝胶电泳分离DNA时，加样孔端应该临近电泳仪的：()

A．正极

B．负极

答案：CDDBC BADCB

七、

1．参比溶液（空白管）的作用是（）()

A．消除背景效应

B．获取标准品吸光度

C．获取样品吸光度

D．消除待测物对光的吸收

2．利用分光光度法测定蛋白含量时，比色皿中加入溶液的量应为比色皿容积的（）() A．1/3

B．1/2

C．2/3

D．3/5

E．4/5

3．血清γ球蛋白的分离纯化中，蛋白质粗提使用的方法是？()

A．有机溶剂沉淀

B．免疫沉淀

C．盐析

D．渗析

4．凝胶层析分离混合物的基本原理是：()

A．吸附力差异

B．分子筛作用

C．离子交换

D．配体亲和差异

5．离心机按转速分类，分为高速离心机、低速离心机和（）()

A．分析离心机

B．制备离心机

C．冷冻离心机

D．超速离心机

E．台式离心机

6．对酶的分离纯化进行评估的指标是()

A．酶的纯度

B．酶的收率

C．酶的纯度及收率

D．酶的活性

E．酶的重量

7．颗粒带净电荷量、直径和泳动速度的关系是（）()

A．颗粒带净电荷量越大或其直径越小，在电场中的泳动速度就越快

B．颗粒带净电荷量越小或其直径越小，在电场中的泳动速度就越快

C．颗粒带净电荷量越大或其直径越大，在电场中的泳动速度就越快

D．颗粒带净电荷量越大或其直径越小，在电场中的泳动速度就越慢8．质粒DNA提取分离中，solution I的作用是：()

A．裂解菌体，使DNA分子变性

B．悬浮菌体，稳定菌体性质

C．中和碱性，使DNA分子复性

D．去除杂蛋白

9．常用的小量制备质粒DNA的方法不包括：()

A．煮沸法

B．碱裂解法

C．去污剂法

D．层析法

10．提取分离质粒DNA时，加入的70%的冰预冷无水乙醇的目的是：() A．去除杂蛋白

B．洗涤质粒DNA

C．沉淀质粒DNA

D．沉淀RNA

答案：ACCBD CABDB

临床生化检验部分复习试题a

临床生化检验部分复习试题 一、选择题(最佳答案) 1、下列说法正确的是 ⑴、高密度脂蛋白胆固醇是好胆固醇，⑵、氧化酶法测定血清胆固醇所用比色波长为340纳米，⑶、低密度脂蛋白胆固醇是好胆固醇，⑷、反映心肌损伤时肌红蛋白比肌钙蛋白特异性强，⑸、心肌肌酶谱中的CK增高就一定是心肌炎。（1） 2、下列说法错误的是(2) ⑴各种炎症时都伴有CRP增高，⑵、超敏CRP增高是动脉硬化的直接原因，⑶、超敏CRP增高是动脉硬化的病人出现心梗的标志，⑷、超敏CRP增高是冠心病人出现心梗的危险标志，⑸、CRP和超敏CRP本质是一样的。（2） 3、高密度脂蛋中含量最高的载脂蛋白是（1） ⑴、载脂蛋白A，⑵、载脂蛋白B，⑶、载脂蛋白C，⑷、载脂蛋白D，⑸、载脂蛋白E。 4、低密度脂蛋白中含量最高的载脂蛋白是（2） ⑴、载脂蛋白A，⑵、载脂蛋白B，⑶、载脂蛋白C，⑷、载脂蛋白D，⑸载脂蛋白E。 5、急性胰腺炎时血清淀粉酶增高峰值多在（5） ⑴、发病后2小时，⑵、发病后6~8小时，⑶、发病后9~10小时，⑷、发病后5~7小时，⑸、发病后12~24小时。 6、下列说法错误的是（1） ⑴、胰腺癌患者血清淀粉酶一定升高，⑵、暴饮是急性胰腺炎诱发因素之一，⑶、胰腺癌的病人CA199有可能增高，⑷、腮腺炎的病人血清淀粉酶升高，⑸、CEA升高可能为胃癌。 7、反映红细胞膜异常的试验是（1） ⑴、红细胞渗透脆性试验，⑵、酸洗脱试验，⑶、高铁血红蛋白还原试验，⑷、血红蛋白电泳，⑸、网织红细胞计数。 8、反映红细胞膜内酶缺泛的试验是（3） ⑴、红细胞渗透脆性试验，⑵、酸洗脱试验，⑶、高铁血红蛋白还原试验，⑷、血红蛋白电泳，⑸、网织红细胞计数。 9、反映红细胞血红蛋白结构异常试验是（4） ⑴、红细胞渗透脆性试验，⑵、酸洗脱试验，⑶、高铁血红蛋白还原试验，⑷、血红蛋白电泳，⑸、网织红细胞计数。 10、反映红细胞破坏加速首选的试验是（5） ⑴、红细胞渗透脆性试验，⑵、酸洗脱试验⑶、高铁血红蛋白还原试验，⑷、血红蛋白电泳， ⑸、网织红细胞计数。 11、VMA是（2） ⑴、肾上腺素的代谢产物，⑵、去甲肾上腺素的代谢产物，⑶、多巴胺的代谢产物，⑷、盐皮质激素的代谢产物，⑸、糖皮质激素的代谢产物。 12、醛固酮是（2） ⑴、肾上腺髓质产生，⑵、肾上腺皮质产生，⑶、甲状腺产生，⑷、甲状旁腺产生，⑸、肾上腺产生。 12、下列说法错误的是（5） ⑴、尿HCG增高；早期妊娠，⑵、尿HCG增高；异位妊娠，⑶、血HCG增高可能为肺癌， ⑷、血HCG异常高可能为葡萄胎，⑸、尿HCG增高可能为子宫癌。 13、低钾的病人常伴有（2）

生化实验考题1

1、简述分光光度法的原理和分光光度计的操作步骤。 原理：物质对不同波长的光波有选择吸收的特性，利用单色光可测定物质对光的吸收能力。根据Lambert-Beer定律:A=lgl／T=lgI。／I=εbC，在分光光度计的测定范围内，可测定某一浓度物质的A值。 注:单色光、稀溶液、0.2-0.8、最大波长处、加合性 步骤：（1）预热：通电，开盖，选择“T”，预热20min（2）取比色杯。 光面为光通路，手拿毛面，样品入比色杯后，滤纸擦拭杯外液体 （3）装样：空白管放在靠近自己的第一个孔，比色杯中液体占总体积2／3~4／5（4）调零：选“T”，关盖，按100:；开盖，按0.选择“A”，关盖，按0（5）测量 2、等电点的定义，为什么等电点时蛋白质溶解度最低？ 定义：蛋白质分子酸性离解与碱性离解相等，静电荷和净迁移率均为0时溶液的pH为该蛋白质的等电点 等电点时蛋白质处于等电状态，蛋白质颗粒上的静电荷为零，无电荷间的排斥作用，容易凝集成大颗粒而沉淀，因而最不稳定，溶解度最小。 3、以实验folin酚法测定人体血清蛋白含量为例，说明样品待测液显 色浓度、样品待测液浓度与样品实际浓度三个基本概念。 样品待测液显色浓度：样品与显色试剂甲、乙显色后，和标准液进行颜色强度对比得出的样品浓度； 样品待测液浓度:稀释并显色后的样品由分光光度计测定A值，通过标准曲线法查得或标准管法求得的待测管的蛋白质浓度 样品实际浓度:稀释500倍的待测血清的实际浓度 4、以蔗糖为例，分三个方面简述蔗糖酶专一性测定原理。 蔗糖分子组成为α-吡喃葡萄糖-1,2-β-呋喃果糖，蔗糖酶专一水解α-吡喃葡萄糖-1,2-β-呋喃果糖苷键，故能催化蔗糖水解，水解产物与班氏试剂共热可产生红棕色沉淀。实验在同一条件下设置对照组和实验组，变量分别为pH值、温度、蔗糖酶的浓度。 5、简述醋酸纤维薄膜电泳法的原理及操作步骤。 原理： 用醋酸纤维素薄膜作为支持物，用合适pH值的缓冲液使Pr带电，在电场力作用下，带电颗粒向着与其电性相反的电极移动。由于各种蛋白质都有特定的等电点，如将蛋白质置于pH值低于其等电点的溶液中，则蛋白质将带正电荷而向负极移动。反之，则向正极移动。依据V=Eq／6πrη得蛋白质分子在电场中移动的速度与其带电量、分子的形状及大小有关，所以，可用电泳法将不同的蛋白质分离开来。（血清中含有多种蛋白质，它们的等电点都在pH 7.5以下。将血清放于pH 8.6的缓冲液电泳时，所有的血清蛋白都带有负电荷，在电场中将向正极移动。由于各种血清蛋白在相同pH时所带电荷数量不等，分子颗粒大小不一，因而泳动速度不同，经电泳被分离开来）。分离后的Pr经显色或紫外光等可进行测定。 步骤：1.泡膜（薄膜毛面一端1.5cm处铅笔划线） 2.准备仪器3.点样 4.电泳 5.检测鉴定（5.染色 6.浸洗 7.定量） 6、简述凝胶过滤层析法的原理和操作步骤。 原理：凝胶颗粒内部有大小不一的孔隙，且孔隙大小有一定范围，相对分子质量大的物质能够更容易从颗粒间缝隙通过而最先被洗脱出来，相对分

生物化学实验复习题 2

生物化学实验复习题： 1.试述旋光法测定淀粉含量的实验原理。 在加热及稀盐酸的作用下，淀粉水解并转入盐酸溶液中。在一定的水解条件下，不同谷物淀粉的比旋光度是不同的。其在171～195之间，因此可用旋光法测定粗淀粉的含量。 2.淀粉含量测定的方法有几种？比较各方法特点。 淀粉是由多个葡萄糖缩合而成的多糖，测定淀粉的方法主要有酸水解法、酶水解法和旋光法等。 1、酸水解法：面粉经乙醚除去脂肪，乙醇除去可溶性糖类后，用酸水解淀粉为葡萄糖， 按还原糖测定方法测定还原糖含量，再折算为淀粉含量。 2、酶水解法：面粉经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用 盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。 3、旋光法：在加热及稀盐酸的作用下，淀粉水解并转入盐酸溶液中。在一定的水解条 件下，不同面粉淀粉的比旋光度是不同的。其淀粉的比旋光度在171~195之间，因此可用旋光法测定淀粉的含量。 3.简述旋光法测定淀粉的关键步骤。 1.样品的处理 在电子天平上称取小麦粉2.5000g置于三角瓶中→加入50ml 1%HCl混成浆状（不能有结块）→沸水浴中准确加热15min→先加1ml 30% ZnSO4混匀→再加1ml 15%亚铁氰化钾混匀→移至100ml容量瓶中加水定容混匀后过滤→弃去最初15ml收集其余滤液。 2.旋光度测定 取滤液20ml置于旋光管中，先用1%HCl 调节旋光仪“0”点，然后将样品溶液放入旋光仪中测α 4.写出计算粗淀粉含量的公式并说明各符号的含义。

5.试述凯氏定氮法测定蛋白质含量的实验原理。 含氮的有机物与浓硫酸共热时，其中的碳、氢二元素被氧化成二氧化碳和水，而氮则转变成氨，并进一步与硫酸作用生成硫酸铵。 浓碱可使消化液中的硫酸铵分解，游离出氨，借水蒸汽将产生的氨蒸馏到一定浓度的过量硼酸溶液中，硼酸吸收氨后使溶液中氢离子浓度降低，然后用标准无机酸滴定，直到恢复溶液中原来氢离子浓度为止，最后根据所用标准酸的摩尔数（相当于待测物中氨的摩尔数）计算出待测物中的总氮量。 6.蛋白质含量测定的方法有几种？比较各方法特点。 定氮法,双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法.考马斯亮蓝法（Bradford法）. 凯氏定氮灵敏度低,适用于0.1.0mg氮,误差为±2％费时 10小时将蛋白氮转化为氨,用酸吸收后滴定非蛋白氮（可用三氯乙酸沉淀蛋白质而分离）用于标准蛋白质含量的准确测定；干扰少；费时太长 双缩脲法（Biuret法）灵敏度低 20mg 中速 20~30分钟多肽键＋碱性Cu2＋?紫色络合物硫酸铵；Tris缓冲液；某些氨基酸用于快速测定,但不太灵敏；不同蛋白质显色相似 紫外吸收法较为灵敏 50～100mg 快速 10分钟蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基

基础生物化学实验.

生物化学实验 实验基本原理 1 有效数字计算（结合电子天平的应用等） 加减法： 进行数字加减时，最后结果所保留的小数点后的位数应与参与运算的各数中小数点后位数最少者相同，其尾数“四舍五入”。如：0.124+1.2345+12.34=13.6979，应取13.70。 乘除法： 进行数字乘除时，最后结果的有效数字应与参与运算的各数中有效数字位数最少者为准，而与小数点的位数无关，其尾数“四舍五入”。如：1.23×0.12=0.1476,应取0.15。 2 误差分析 误差为实验分析的测定值与真实值之间的差值。误差越小，测定值越准确，即准确度越高。误差可用绝对误差和相对误差表示。 绝对误差= 测定值- 真实值 相对误差= 绝对误差÷真实值×100% 一般用相对误差表示结果的准确度，但因真实值是并不知道的，因此实际工作中无法求出分析的准确度，只得用精确度来评价分析的结果。 3 偏差分析（结合“可溶性蛋白或赖氨酸实验”要求掌握） 精确度表示在相同条件下，进行多次实验的测定值相近的程度。一般用偏差来衡量分析结果的精确度。偏差也有绝对偏差和相对偏差两种表示方法。 绝对偏差= 单次测定值- 算术平均值（不计正负号） 相对偏差= 绝对偏差÷算术平均值×100%

例如：分析某一材料糖含量，共重复测定5次，其结果分别为：16.1%，15.8%，16.3%，16.2%，15.6%，用来表示精确度的偏差可计算如下： 分析结果算术平均值个别测定的绝对偏差（不计正负） 16.1% 0.1% 15.8% 0.2% 16.3% 16.0% 0.3% 16.2% 0.2% 15.6% 0.4% 平均绝对偏差=（0.1%+0.2%+0.3%+0.2%+0.4%）÷5 = 0.2% 平均相对偏差= 0.2÷16.0×100% = 1.25% 在实验中，有时只做两次平行测定，这时就应用下式表达结果的精确度： 两次分析结果的差值÷平均值×100% 4 实验结果的表述：实验结果可用列表法（“影响酶作用的因素”常用）和作图法（综合实验用）表示。 第1章分光光度技术 分光光度技术是光学（光谱）分析技术的一种，它是利用物质的特征吸收光谱来对不同物质进行定性和定量分析的一项技术。我们将重点介绍紫外光-可见光分光光度法。 一、紫外光-可见光分光光度法的基本原理 1、讨论的波长范围：200～400nm的紫外光区和400～760nm的可见光区。 人肉眼可见的光线称可见光，波长范围在400～760nm；

临床生化检验练习题及答案

临床生化检验练习题及答案 1、在标准状况下，升氨气溶于500毫升水中，其溶液的物质的量浓度是：C A. 2mol/L B. L C. 4mol/L D. 8mol/L 2、体液是一种缓冲溶液，它的缓冲作用是： A A.维持PH值不变 B.增加阴阳离子的浓度 C.增强人体的抵抗能力 D.扩大PH的范围 3.作为缓冲对的是 A A.醋酸－醋酸钠 B.盐酸－醋酸钠 C.盐酸－氯化钠 D.氢氧化钠－氯化钠 # 4.缓冲溶液的一个例子是：C 本文来自检验地带网 A.氢氧化钠和氯化钠 B.氨水和醋酸钠 C.醋酸和醋酸钠 D.醋酸和氯化铵 5、下列哪组物质可组成缓冲对 D A.盐酸—氯化钠 B.碳酸--碳酸钠 C.醋酸---碳酸氢钠 D.碳酸---碳酸钠 6、下列离子既能水解又能电离的是： C A. NO3－ B. NH＋4 C. HCO－ D. HCOO－ 7、设弱酸HA的电离度为α，L 溶液中的氢离子的浓度是：B { A.αmol/L 8、下列关于酸碱的叙述中，正确的是： B A.盐酸和氨水等体积混和的水溶液显中性 B.某弱酸的水溶液浓度越小，该酸的电离度越大 C.磷酸比盐酸的酸性强 D.因为氨分子不含氢氧根，所以不是碱 9、已知L 某一元弱酸的PH值为3，该弱酸溶液的电离度是 C 本文来自检验地带网 A.0.01% % % 10、同离子效应使弱电解质电离度 C … A.增大 B.不变 C.减小 D.在酸性溶液中增大 11、在L的氨水中加入固体氯化铵后溶液的氢离子浓度 A A.增大 B.减小 C.不变 D.先减小后增大 12、100毫升L的盐酸加到等体积的L的氢氧化钠溶液中，所得的PH值是 C A. 0.2 B. 0.7 C. D. 13、相同浓度的下列溶液按其PH值由小到大排列的是： D A.氢氧化钠、盐酸、醋酸钠、氯化钠、氯化铵 B.氢氧化钠、醋酸钠、氯化钠、氯化铵、盐酸 C.盐酸、醋酸钠、氯化铵、氯化钠、氢氧化钠 D.盐酸、氯化铵、氯化钠、醋酸钠、氢氧化钠

2015高级生物化学及实验技术试题答案

高级动物生化试题 问答题： 1. 简述非编码RNA（non-coding RNA）的种类、结构特点及其主要功能。 非编码RNA的种类结构和功能 1tRNA转运RNA（transfer RNA，tRNA） 结构特征之一是含有较多的修饰成分，核酸中大部分修饰成分是在tRNA中发现的。修饰成分在tRNA分子中的分布是有规律的，但其功能不清楚。5’末端具有G（大部分）或C。3’末端都以ACC的顺序终结。有一个富有鸟嘌呤的环。有一个反密码子环，在这一环的顶端有三个暴露的碱基，称为反密码子（anticodon）.反密码子可以与mRNA链上互补的密码子配对。有一个胸腺嘧啶环。tRNA具有三叶草型二级结构以及“L”型三级结构，tRNA 的不同种类及数量可对蛋白质合成效率进行调节。tRNA负责特异性读取mRNA中包含的遗传信息，并将信息转化成相应氨基酸后连接到多肽链中。 tRNA为每个密码子翻译成氨基酸提供了结合体，同时还准确地将所需氨基酸运送到核糖体上。鉴于tRNA在蛋白质合成中的关键作用，又把tRNA称作第二遗传密码。tRNA还具有其他一些特异功能，例如，在没有核糖体或其他核酸分子参与下，携带氨基酸转移至专一的受体分子，以合成细胞膜或细胞壁组分；作为反转录酶引物参与DNA合成；作为某些酶的抑制剂等。有的氨酰-tRNA还能调节氨基酸的生物合成。 2rRNA核糖体RNA（ribosomal RNA, rRNA） 核糖体RNA是细胞中最为丰富的RNA，在活跃分裂的细菌细胞中占80%以上。

他们是核糖体的组分，并直接参与核糖体中蛋白质的合成。核糖体是rRNA 提供了一个核糖体内部的“脚手架”，蛋白质可附着在上面。这种解释很直接很形象，但是低估了rRNA在蛋白质合成中的主动作用。较后续的研究表明，rRNA并非仅仅起到物理支架作用，多种多样的rRNA可起到识别、选择tRNA以及催化肽键形成等多种主动作用。例如：核糖体的功能就是,按照mRNA的指令将氨基酸合成多肽链。而这主要依靠核糖体识别tRNA 并催化肽键形成而实现。可以说核糖体是一个大的核酶( ribozyme)。而核糖体的催化功能主要是由rRNA来完成的,蛋白质并没有直接参与。 3 tmRNA tmRNA主要包括12个螺旋结构和4个“假结”结构，同时还包括一 个可译框架序列的单链RNA结构。tmRNA中H1由5’端和3’端两个末端形成，与tRNA的氨基酸受体臂相似。H1和H2的5’部分之间有一个由10-13nt 形成的环，类似tRNA中的二氢尿嘧啶环，称为“D”环。H3和H4，H6和H7，H8和H9，H10和H11之间分别形成Pk1，pK2，pK3，pK4。H4和H5之间则由一段包含编码标记肽ORF的单链RNA连接。H12由5个碱基对和7nt 形成的环组成，类似tRNA中的TΨC臂和TΨC环，称为“T”环。tmRNA 结构按照功能进行划分可分为tRNA类似域（TLD）和mRNA类似域（MLD），TLD主要包括H1,H2,H12,“D”环和“T”环，MDL则包括ORF和H5，这两部分分别具有类似tRNA和mRNA的功能。tmRNA是一类普遍存在于各种细菌及细胞器（如叶绿体，线粒体）中的稳定小分子RNA。它具有mRNA分子和tRNA分子的双重功能，它在一种特殊的翻译模式——反式翻译模式中发挥重要作用。同时，它与基因的表达调控以及细胞周期的调控等生命过程密切相关，是细菌体内蛋白质合成中起“质量控制”的重要分子之一。识别翻译或读码有误的核糖体，也识别那些延迟停转的核糖体，介导这些有问

生物化学实验思考题

生物化学实验思考题 Document number：BGCG-0857-BTDO-0089-2022

生物化学实验思考题 1.可用何种颜色反应鉴别酮糖的存在？ 间苯二酚反应，在酸的作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。 2.α—萘酚的反应原理是什么？ 糖在浓的无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及其糠醛的衍生物，后者能与α—萘酚生成紫红色物质。 3.菲林试剂和本尼迪凯特氏法检验糖的原理是什么？ O沉淀。它们都是含有Cu2+的碱性溶液，能使还原糖氧化而本身还原成红色或者黄色的Cu 2 4.何谓纸层析法？ 用滤纸作为惰性支持物的的分层层析法。 5.何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么？ 纸层析法形成的纸层析图谱上，原点到层析点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值；影响Rf值的因素有：物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。 6.怎样制备扩展剂？ 扩展剂是4份水饱和的和1份醋酸的混合物。将20ml和5ml冰醋酸放入中，与15ml水混合，充分振荡，静置后分层，放出下层水层，漏斗中的则为扩展剂。 7.层析缸中的平衡剂的作用是什么？ 平衡剂起到使纸上吸附的溶剂达到饱和。使物质在展开剂和纸层析上吸附的溶剂中溶解度不同而进行分离。 8.通过蛋白质及氨基酸的呈色反应实验你掌握了几种鉴定蛋白质和氨基酸的方法？他们 的原理是什么？

四种：双缩脲反应；茚三酮反应；黄色反应；考马斯亮蓝反应。 （1）双缩脲在碱性环境中能与Cu2+ 生成紫红色化合物，蛋白质中有肽键，其结构与双缩脲相似，也能发生此反应。（2）除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外，所有α—氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应产生蓝紫色物质。（3）含有苯环结构的氨基酸，如酪氨酸、和色氨酸，遇硝酸后，可被硝化成黄色物质，该化合物在碱性溶液中进一步形成橙色的硝醌酸钠。（4）考马斯亮蓝G250有红色和蓝色两种色调。在酸性溶液中，其以游离态存在呈现棕红色；当它与蛋白质通过疏水作用结合后变为蓝色。 9.什么是酶的最适温度及其应用的意义？ 酶活性最高时的温度称为酶的最适温度。可以利用这一原理指导工农业生产，提高生产效益。 10.什么是酶反应的最适PH?对酶的活性有什么影响？ 酶催化活性最高时反应体系的 pH 称为酶促反应的最适 PH。PH过高、过低都会使酶促反应的速率下降。 11.什么是酶的活化剂？ 指能够与分子上的一些结合，使酶活力提高的物质。 12.什么是酶的抑制剂？与变性剂有何区别？本实验结果如何证明酶的专一性？ 指与分子上的一些结合，使酶活力下降，甚至消失，但不使变性的物质。区别：酶的抑制剂不会使酶发生变性，而酶的变性剂会使酶的结构和性质发生改变。酶的专一性证明：实验结果表明通过在淀粉和蔗糖中分别加入有活性的淀粉酶和蔗糖酶后，两者均产生了还原性的糖，与本尼迪凯特试剂反应产生了砖红色沉淀，而其他的条件下均没有还原性糖的的产生，进而说明了酶的专一性。（答题时可以详尽的描述） 13.何谓碘值？有何意义？

临床医学生物化学期末复习题.doc

生物化学试题答案（2） 一、名词解释（20） 1、乙醛酸循环（2分） 是某些植物，细菌和酵母屮柠檬酸循环的修改形式,通过该循环町以收乙乙酰CoA经草酰乙酸净生成葡萄糖。乙醛酸循环绕过了 柠檬酸循环中生成两个C02的步骤。 2、无效循环（futile cycle）（2 分） 也称为底物循环。一对爾催化的循环反应，该循环通过ATP的水解导致热能的释放。Eg匍萄糖+ATP=ffi萄糖6-磷酸+ADP与匍萄糖6-磷酸+H20二匍萄糖+P i反应纽成的循环反应，英挣反应实际上是A TP + H20二ADP + Pi。 3、糖异生作用（2分） 由简单的非糖前体转变为糖的过程。糖异生不是糖酵解的简单逆转。虽然由內酮酸开始的糖异生利用了糖酵解中的匕步进似平衡反应的逆反应，但还必需利用另外四步酵解屮不曾出现的酚促反应，绕过酵解过程中不可逆的三个反应 4、生糖生酮氨基酸：既町以转变成糖或酯的氨基酸。 5、启动子：DNA分子中RNA聚合酶能够结合并导致转录起始的序列。 6、错配修复（mismatch repair）（2 分） 在含有错配碱基的DNA分子屮，使正常核昔酸序列恢复的修复方式。这种修复方式的过程是：识别出下正确地链，切除掉不正确链的部分，然后通过DNA聚合酌和DNA连接阳的作用，合成正确配对的双链DNA。 7、外显子（exon）（2分） 既存在于故初的转录产物屮，也存在于成熟的RNA分子中的核昔酸序列。术语外显子也指编码相应RNA内含子的DNA中的区域。 8、（密码子）摆动（wobble）（2分） 处于密码子3 '端的碱基与之互补的反密码子5 "端的碱基（也称为摆动位置），例如I可以与密码子上3 '端的U, C和A配对。 山于存在摆动现象，所以使得一个tRNA反密码子可以和一个以上的mRAN密码子结合。 9、魔点：（2分） 任何一种氨基酸缺乏，或突变导致任何一种氨基酰-tRNA合成酚的失活都将引起严谨控制生长代谢的反应。此时细胞内出现两种不同寻常的核昔酸,电泳时出现2个特殊的斑点,称之为魔点。为ppGpp, pppGpp. 10、Q循环：（2分） 在电子传递链屮，2个氢酿（Q112）分别将一个电子传递给2个细胞色素C,经过细胞色索Bl, Bh等参与的循环反应，生成一个氢服和服的循环。

生物化学实验理论考试题答案

生物化学实验理论考试题答案 1.醋酸纤维薄膜电泳时点样端应靠近电极的哪一端，为什么？ 答；电泳时点样端应靠近负极，因为血清中各种蛋白质在PH为8.6的环境中均带负电，根据同性相吸，异性相斥原理，点样端在负极时蛋白质向正极泳动从而实现蛋白质分离。 2.用分光光度计测定物质含量时，设置空白对照管的作用,为什么？ 答；空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度，但是作为溶剂也能吸收，反射和透射一部分的光，因此必须以相同的溶剂设置对照，排除溶剂对吸光度的影响。 3.简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜的电泳原理？ 答；血清蛋白中各种蛋白质离子在电场力的作用下向着与自身电荷相反的方向涌动，而各种蛋白质等电点不同，且在PH为8.6时所带电荷不同，分子大小不等，形状各有差异，所以在同一电泳下永动速度不同从而实现分离。 4.何谓Rf值？影响Rf值的因素？ 答;Rf是原点到层析中心的距离与原点到溶剂前沿的距离之比。Rf的大小与物质的结构，性质，溶剂系统，层析滤纸的质量和层析温度有关，对同一种物质来讲Rf是一个常量。 5.什么是盐析？盐析会引起蛋白质的变性吗？一般用什么试剂? 答;盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时，蛋白质的溶解度下降，当中性盐的浓度达到一定程度的时候，蛋白质从溶液中析出的现象。盐析不会引起蛋白质的变性，因为蛋白质的结构并未发生改变，去掉引起盐析的因素蛋白质仍能溶解；一般用饱和硫酸铵溶液进行盐析 6.简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理？ 答;还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸，而DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5硝基水杨酸颜色的深浅成正比，用分光光度计测出溶液的吸光度，通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5硝基水杨酸的浓度，从而得出还原糖的浓度。 7.影响蛋白质沉淀的因素是什么？沉淀和变性有什么联系？ 答;水溶液中的蛋白质分子由于表面形成水化层和双电层从而形成稳定的亲水胶

大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案

大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案 一、选择题 1、下列实验仪器中，常用来取用块状固体药品的仪器是（）。 A. 药匙 B. 试管夹 C. 镊子 D. 坩埚钳 2、托盘天平调零后，在左盘衬纸上置氧化铜粉末，右盘衬纸上置1个5g砝码，游码标尺示数如下，此时天平平衡。则被称量的氧化铜质量为（）。 A. 8.3 g B. 7.7 g C. 3.3 g D. 2.7 g 3、用减量法从称量瓶中准确称取0.4000 g分析纯的NaOH固体，溶解后稀释到100.0 mL，所得NaOH溶液的浓度为（）。 A. 小于0.1000 mol/L B. 等于0.1000 mol/L C. 大于0.1000 mol/L D. 三种情况都有可能 4、已知邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）的摩尔质量为204.2 g/mol，用作为基准物质标定0.1 mol/L NaOH溶液时，如果要消耗NaOH溶液为25 mL左右，每份应称取邻苯二甲酸氢钾（）g左右。 A. 0.1 B. 0.2 C. 0.25 D. 0.5 5、NaHCO3纯度的技术指标为≥99.0%，下列测定结果哪个不符合标准要求？（）。 A. 99.05% B. 99.01% C. 98.94% D. 98.95% 6、精密称取马来酸氯苯那敏对照品12 mg，应选取（）的天平。 A. 千分之一 B. 万分之一 C. 十万分之一 D. 百万分之一 7、实验室标定KMnO4溶液，常用的基准物质是（）。 A. Na2CO3 B. Na2S2O3 C. Na2C2O4 D. K2Cr2O7 8、标定氢氧化钠常用的基准物质是（）。 A. EDTA B. K2Cr2O7 C. 草酸 D. 邻苯二甲酸氢钾 9、下列物质可以作为基准物质的是（）。 A. KMnO4 B. Na2B4O7·7H2O C. NaOH D. Na2S2O3 10、下列物质中，可以用直接法配制标准溶液的是（）。 A. 固体NaOH B. 浓HCl C. 固体K2Cr2O7 D. 固体Na2S2O3

生物化学实验复习题库

生物化学实验复习题库 生物化学实验复习题库 1、卵磷脂提取原理: 卵磷脂在大脑、神经组织、肝脏、肾上腺和红细胞中含量丰富，尤其是在蛋黄中。卵磷脂易溶于脂肪溶剂，如乙醇和乙醚，可以用这些脂肪溶剂提取。本实验用95%乙醇提取卵磷脂，用蒸汽浴分离乙醇和卵磷脂。 2.卵磷脂的提取原理:新提取的卵磷脂被鉴定为白蜡，与空气接触后，由于不饱和脂肪酸的氧化而变成棕色。卵磷脂中的胆碱基团在碱性条件下分解成三甲胺。三甲胺有一种特殊的鱼腥味，可以被识别。 3、糖莫尔斯试验的颜色反应: 糖用无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水，生成糠醛或糠醛衍生物，在浓无机酸的作用下，与а-萘酚形成紫色缩合物。因为糠醛或糠醛衍生物对此都是肯定的，所以它不是糖的特定反应，而是可以用来鉴别糖的存在。 4、糖色反应塞的测试: 酮糖在浓酸的作用下脱水生成5-羟甲基糠醛，后者与红色的间苯二酚反应。有时，它也产生棕红色沉淀，溶解在乙醇中形成亮红色溶液。这个反应是酮糖的特定反应，在同样条件下醛糖显色反应缓慢，只有当糖浓度高或沸腾时间长时，才是弱阳性反应。在实验条的条件下，蔗糖可能水解并呈现阳性反应。赛波特试验可以识别酮糖的存在。5.什么是纸色谱？

纸色谱是最简单的液-液相分配色谱。滤纸是纸色谱的支撑。当载体被水饱和时，大多数水分子被滤纸的纤维素牢固地吸附，因此，纸及其饱和水是色谱的固定相，与固定相不混溶的有机溶剂是色谱的流动相。 因为不同的氨基酸在相同的溶剂中有不同的溶解度，所以氨基酸在滤纸上的迁移率不同。 6.什么是Rf值？影响Rf值的主要因素是什么 Rf是氨基酸的特定位移值。Rf=从原点到色谱点中心的距离/从原点到溶液前端的距离 影响纸色谱迁移率Rf值的主要因素有:1 .样本本身的性质和结构；2、溶剂的性质；3.酸碱度；4.温度；5.滤纸的性质。 7.如何准备延长剂？ 8.平衡溶剂在色谱柱中的作用是什么？9.牛奶制备酪蛋白的原理和方法。 牛奶含有半乳糖、蛋白质和脂肪。蛋白质中的酪蛋白通过等电点沉淀，然后通过离心获得。小的碳水化合物分子被分离，因为它们在清澈的液体中。通过有机溶剂萃取除去沉淀物中的脂肪，最终得到纯净的白色结晶酪蛋白。 方法:在鲜奶中加入PH4.7的醋酸缓冲液，在40℃下沉淀酪蛋白，洗涤，将醇醚吸附于水中，干燥成粉末，计算提取率。步骤:保温、调节酸碱度、沉淀、离心、洗涤、干燥和称重 10.蛋白质的等电点是多少？实际意义是什么？

食品生物化学实验

食品生物化学实验要求 1.学生做实验前必须写好实验预习报告，做好实验预习，无实验预习报告者不 许进入实验室。每大组实验人数28人，4人一小组。 2.实验试剂的配制，现场由教师指导，学生操作完成。学生在试剂配制过程中， 掌握试剂配置的基本步骤，基本方法和注意事项。 3.实验室所有设备都必须按说明书使用，器皿要小心使用，按规范要求操作， 如有损坏，照价赔偿。 4.卫生要求：每次试验完毕小组成员务必将本试验台及地面收拾整洁，器皿摆 放整齐有序，如哪组成员发现没有搞好自己组的环境卫生，这次试验的所有组员的实验报告都会扣分。 一、10食品科学食品生物化学实验项目表 1. 淀粉的显色、水解和老化（4学时） 2. 蛋白质的功能性质（4学时） 3. 牛奶中酪蛋白等电点测定和氨基酸的分离鉴定（4学时） 4. 或果胶的提取（4学时） 5. 酶的性质实验（4学时） 实验总课时：16学时

二、食品生物化学实验指导书 实验一淀粉的显色、水解和老化 一、实验目的和要求 1、了解淀粉的性质及淀粉水解的原理和方法。 2、掌握淀粉水解的条件和产物的实验方法。 3、淀粉的老化原理和方法 二、实验原理 1、淀粉与碘的反应直链淀粉遇碘呈蓝色，支链淀粉遇碘呈紫红色，糊精遇碘呈蓝紫、紫、橙等颜色。这些显色反应的灵敏度很高，可以用作鉴别淀粉的定量和定性的方法，也可以用它来分析碘的含量。纺织工业上用它来衡量布匹退浆的完全度，它还可以用来测定水果果实（如苹果等）的淀粉含量。 近年来用先进的分析技术（如X射线、红外光谱等）研究碘跟淀粉生成的蓝色物，证明碘和淀粉的显色除吸附原因外，主要是由于生成包合物的缘故。直链淀粉是由α-葡萄糖分子缩合而成螺旋状的长长的螺旋体，每个葡萄糖单元都仍有羟基暴露在螺旋外。碘分子跟这些羟基作用，使碘分子嵌入淀粉螺旋体的轴心部位。碘跟淀粉的这种作用叫做包合作用，生成物叫做包合物。 在淀粉跟碘生成的包合物中，每个碘分子跟6个葡萄糖单元配合，淀粉链以直径0.13 pm绕成螺旋状，碘分子处在螺旋的轴心部位。 淀粉跟碘生成的包合物的颜色，跟淀粉的聚合度或相对分子质量有关。在一定的聚合度或相对分子质量范围内，随聚合度或相对分子质量的增加，包合物的颜色的变化由无色、橙色、淡红、紫色到蓝色。例如，直链淀粉的聚合度是200～980或相对分子质量范围是32 000～160 000时，包合物的颜色是蓝色。分支很多的支链淀粉，在支链上的直链平均聚合度20～28，这样形成的包合物是紫色的。糊精的聚合度更低，显棕红色、红色、淡红色等。下表就是淀粉的聚合度和生成碘包合物的颜色。 表 2-1 淀粉的聚合度和生成碘包合物的颜色 淀粉跟碘生成的包合物在pH=4时最稳定，所以它的显色反应在微酸性溶液里最明显。 2、淀粉的水解淀粉是一种重要的多糖，是一种相对分子量很大的天然高分子化合物。虽属糖类，但本身没有甜味，是一种白色粉末，不溶于冷水。在热水里淀粉颗粒会膨胀，有一部分淀粉溶解在水里，另一部分悬浮在水里，形成胶状淀粉糊。淀粉进入人体后，一部分淀粉收唾液所和淀粉酶的催化作用，发生水解反应，生成麦芽糖；余下的淀粉在小肠里胰脏分泌出的淀粉酶的作用下，继续进行水解，生成麦芽糖。麦芽糖在肠液中麦芽糖酶的催化下，水解为人体可吸收的葡萄糖，供人体组织的营养需要。反应过程为：（C6H12O5）m→(C6H10O5)n→C12H22O11→C6H12O6 淀粉糊精麦芽糖葡萄糖

生物化学实验题目

实验一胆固醇的提取2012-11-15 16:20:00 生物师范班题目 1.比色法测定样品的理论基础是什么？ 被测样品必须要有颜色。 2. 胆固醇含量在多少范围时，与值呈良好的线性关系？ 在400mg/ml范围内。 3.在提取胆固醇的过程中，为什么要加无水乙醇？ 促使蛋白质沉淀。 4.在试管中加入1ml磷硫铁试剂，会产生什么现象？（至少写2点） 产生紫红色化合物。产生热量。 5.在无水乙醇中加磷硫铁试剂时，正确的加法是什么？将产生什么现象？请准确描述 该现象。 沿管壁慢慢加入。溶液分层。上层是无水乙醇，下层是磷硫铁试剂。 1. 胆固醇提取过程中，无水乙醇为什么要分两次加入？ 目的是使蛋白质以分散很细的沉淀颗粒析出。 2.我们用比色法测定胆固醇含量的仪器名称是什么？ 分光光度计 3. P-S-Fe试剂配置时，能用稀硫酸吗？为什么？ 不能。因为FeCl3本身是亲水性物质，稀硫酸中含有水，会降低P-S-Fe试剂的浓度，从而导致反应不能发生。 4.请简述移液枪的使用步骤。 根据所要吸取的溶液的体积选定合适量程的移液枪。 调好量程。 插枪头。 吸取液体。 将移液枪的量程调至最大。 5. 请简述0.08mg/ml胆固醇标准溶液的配置方法。 准确称取胆固醇80mg，溶于无水乙醇，定容至100ml 将贮液用无水乙醇准确稀释10倍既得。

实验二总糖和还原糖测定2012-11-15 16:20:00 生物师范班 1. 请写出还愿糖与非还原糖结构的不同之处 拥有自由的醛基和酮基 2. 对没有还原性的糖，用什么方法进行糖含量的测定？ 酸水解的方法将非还原性的糖降解呈还原糖。 3. DNS之所以能和还原糖反应，是因为其结构中含有__________? 硝基 4. 如果将DNS和其与还原糖反应的产物同时进行比色，谁的A值更大？为什么？ 产物的更大，因为产物生成棕红色，颜色越深，吸光度越高。 5. 还原糖提取过程中，为什么要离心两次？ 因为这样可以更好地将还原糖全部提取出来。第二次洗涤沉淀。 海洋技术班 1.单糖都是还原糖吗？为什么？ 是的，因为有自由醛基和酮基 2.为什么能用比色法测定还原糖的量？ 因为还原糖的量与光吸收值呈线性关系。 3.DNS的全称是？ 3,5-二硝基水杨酸 4.总糖提取过程中，碘液的作用是什么？ 确认淀粉水解完全。 5.请简述标准曲线的作用。 通过标准曲线来算出未知样品的浓度。

生物化学实验

本科生实验报告 实验课程 学院名称 专业名称 学生姓名 学生学号 指导教师 实验地点 实验成绩 二〇一五年月二〇一五年月

实验一氨基酸的分离鉴定----纸层析法一、实验目的 通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及实验方法。 二、实验原理 纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。滤纸纤维上的羟基具有亲水性，因此吸附一层水作为固定相，而通常把有机溶剂作为流动相。纸层析法是根据不同氨基酸在两相间的分配比不同而进行分离的：在固定相分配的比例大的氨基酸，随流动相移动的速度慢，而在流动相分配的比例大的则随流动相流动的速度快。层析溶剂由有机溶剂和谁组成。 物质被分离后用比移值（Rf值）来衡量各组分的分离情况，如图所示。 根据图得到： Rf=a\b 其中：a为原点到层析点中心的距离（cm），b为原点到溶剂前沿的距离（cm）。 在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值最大等于1，即该组分随溶剂一起上升，Rf值最小等于0，即该组分基本上留在原点不动。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。 三、实验药品、实验器材 1.扩展剂：将20mL正丁醇和5mL冰醋酸放入分液漏斗中，与15mL水混合，

充分震荡，静置数分层后，放出下层水相。取分液漏斗内的扩展剂约5mL 置于小烧杯中作为平衡溶剂，其余的倒入杯中备用。 2.氨基酸溶液：赖氨酸、脯氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸溶液及它们 的混合液（各组分浓度均为0.5%），各5mL。 3.显色剂：0.1%水合茚三酮正丁醇溶液。 4.层析缸：毛细管，喷雾剂，培养皿，层析滤纸，分液漏斗，针，线。 四、实验方法 1.将盛有平衡溶剂的小烧杯置于密闭的层析缸中，使展开剂达到饱和。 2.取层析滤纸（长22cm，宽14cm）一张。在纸的一端距边缘2cm处用铅 笔画一条直线，在此直线上每间隔2cm作一记号。 3.点样：用毛细管将氨基酸样品分别点在这6个位置上，吹干后再点一次。 注意没点再纸上扩散的直径最大不超过3mm。 4.扩展：用线将滤纸沿长边缝成筒状，纸的两边不能接触。将盛有约20mL 扩展剂的培养皿迅速置于密闭的层析缸中，并将滤纸直立于培养皿中。 点样的一端在下，滤纸下端侵入扩展剂0.5cm为宜，并且注意扩展剂的 页面需低于点样线1cm。待溶剂上升15~20cm时即取出滤纸，用铅笔描 出溶剂前沿界限，自然干燥或用热风吹干。 5.显色：层析滤纸用喷雾器均匀喷上0.1%茚三酮正丁醇溶液；然后置烘箱 中烘烤5min（100）或用热风吹干即可先出各层析斑点。 6.计算各种氨基酸的Rf值。 7.注意事项：实验过程应带带胶手套，不可用手直接接触滤纸，以防止皮 肤分泌物的污染。 五、实验记录与数据处理

生物化学测试题及答案.(DOC)

生物化学第一章蛋白质化学测试题 一、单项选择题 1．测得某一蛋白质样品的氮含量为0．40g，此样品约含蛋白质多少？B(每克样品*6.25) A．2．00g B．2．50g C．6．40g D．3．00g E．6．25g 2．下列含有两个羧基的氨基酸是：E A．精氨酸B．赖氨酸C．甘氨酸D．色氨酸E．谷氨酸 3．维持蛋白质二级结构的主要化学键是：D A．盐键B．疏水键C．肽键D．氢键E．二硫键(三级结构) 4．关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是：B A．天然蛋白质分子均有的这种结构 B．具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C．三级结构的稳定性主要是次级键维系 D．亲水基团聚集在三级结构的表面 E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 5．具有四级结构的蛋白质特征是：E A．分子中必定含有辅基 B．在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上，肽链进一步折叠，盘曲形成 C．每条多肽链都具有独立的生物学活性 D．依赖肽键维系四级结构的稳定性 E．由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成 6．蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定：C A．溶液pH值大于pI B．溶液pH值小于pI C．溶液pH值等于pI D．溶液pH值等于7．4 E．在水溶液中 7．蛋白质变性是由于：D A．氨基酸排列顺序的改变B．氨基酸组成的改变C．肽键的断裂D．蛋白质空间构象的破坏E．蛋白质的水解 8．变性蛋白质的主要特点是：D A．粘度下降B．溶解度增加C．不易被蛋白酶水解

D．生物学活性丧失E．容易被盐析出现沉淀 9．若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时，该溶液的pH值应为：B A．8 B．＞8 C．＜8 D．≤8 E．≥8 10．蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸？E A．半胱氨酸B．蛋氨酸C．胱氨酸D．丝氨酸E．瓜氨酸二、多项选择题 1．含硫氨基酸包括：AD A．蛋氨酸B．氨酸C．组氨酸D．半胖氨酸2．下列哪些是碱性氨基酸：ACD A．组氨酸B．蛋氨酸C．精氨酸D．赖氨酸 3．芳香族氨基酸是：ABD A．苯丙氨酸B．酪氨酸C．色氨酸D．脯氨酸 4．关于α-螺旋正确的是：ABD A．螺旋中每3．6个氨基酸残基为一周 B．为右手螺旋结构 C．两螺旋之间借二硫键维持其稳定（氢键） D．氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧 5．蛋白质的二级结构包括：ABCD A．α-螺旋B．β-片层C．β-转角D．无规卷曲 6．下列关于β-片层结构的论述哪些是正确的：ABC A．是一种伸展的肽链结构 B．肽键平面折叠成锯齿状 C．也可由两条以上多肽链顺向或逆向平行排列而成 D．两链间形成离子键以使结构稳定(氢键) 7．维持蛋白质三级结构的主要键是：BCD A．肽键B．疏水键C．离子键D．德华引力 8．下列哪种蛋白质在pH5的溶液中带正电荷？BCD(>5) A．pI为4．5的蛋白质B．pI为7．4的蛋白质 C．pI为7的蛋白质D．pI为6．5的蛋白质 9．使蛋白质沉淀但不变性的方法有：AC A．中性盐沉淀蛋白B．鞣酸沉淀蛋白 C．低温乙醇沉淀蛋白D．重金属盐沉淀蛋白

生物化学实验习题及参考答案完整版

生物化学实验习题及参 考答案 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】

生物化学实验习题及解答 一、名词解释 1、pI； 2、层析； 3、透析； 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳； 5、蛋白质变性； 6、复性； 7、Tm 值； 8、同工酶； 9、Km值； 10、DNA变性；11、退火；12、增色效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键（ ） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的（） A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是（） A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、-巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收（） A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收（） A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查（） A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 8、蛋白质变性是由于（） A、一级结构改变 B、亚基解聚 C、空间构象破坏 D、辅基脱落 9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（） A、胶体性 B、粘性 C、变性作用 D、沉淀作用 10、有关变性的错误描述为（）

临床检验仪器复习题及参考答案汇总.doc

《临床检验仪器学》 一、选择题 I.流式细胞仪检测细胞的大小的信号是.：前向角散射2、VCS白细胞分类技术不包括： 细胞化学染色技术3.毛细管粘度计不适合检测：.全血4、尿液分析仪的测试项目中, 与酸碱指示剂无关的项目是:尿葡萄糖5.血细胞分析仪中对网织红细胞的检测原理：光散射和细胞化学染色6、关于光学显微镜的分辨率，下列有误的是：与照明光的波长成反比7、流式细胞仪中的光电倍增管接收：荧光8、前向角散射可以检测：被测细胞的大小 9、流式细胞仪测定的标本，不论是外周血细胞，还是培养细胞，首先要保证是：单细胞悬液 10、电阻抗型血细胞分析仪的缺点是只能将白细胞按体积大小分为：三个亚群或二个亚群 II、有关血细胞分析仪的叙述不正确的是：高档次血细胞分析仪白细胞的分类计数很准确 12、双磁路磁珠法中，随着纤维蛋白的产生增多，磁珠的振幅逐渐：减弱13、毛细管黏度计工作原理的依据是：泊肃叶定律14、尿蛋白定性干化学检测法只适用于检测：清 蛋白15、流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理是：应用流式细胞术和电阻抗16、BacT/Alert 血培养瓶的底部含一个传感器，用于检测：二氧化碳17、密度梯度离心法又称为：区带离心法18、根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是：等密度 区带离心法19、等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是：液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度，液柱底部的密度明显大于样品组份的密度20、表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是：Rmin 21、pH玻璃电极对样本溶液pH的敏感 程度取决于：电极的玻璃膜22、PCO2电极属于：气敏电极23、临床上大量使用的电解质分析仪，测量?样本溶液中离子浓度的电极是：离子选择电极24、通常血气分析仪中毛细管pH玻璃电极的pH测定范围是：0?10 25、为将血气分析仪气路系统所提供的气体饱和湿化，需经过的装置是：湿化器26、世界上最早的自动生化分析仪是：管道式自动生化分析仪27、具有空气分段系统的自动生化分析仪是：连续流动式自动生化分 析仪28、离心式自动生化分析仪特有的关键部件是：转头29、自动分析仪中采用“顺序分析”原理的是：连续流动式自动生化分析仪30、微孔板固相酶免疫测定仪器（酶标仪）的固相支持是：PVC微孔板31、以空气为加热介质的PCR仪是：离心式实时定量PCR 仪32、能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为：原位PCR仪33、PCR反应正确过程应为：变性一退火一延伸34、一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为：梯度PCR仪35、PCR基因扩增仪最关键的部分是：温度控制系统36、试剂空白变化速率：是在反应温度下试剂自身吸光度随时间的变化37、以下哪项不是微生物自动鉴定与药敏分析系统的性能特点：数据管理系统功能强大，但系统软件大多不可以不断升级。 38、全自动血凝仪中的免疫学方法，通常选用：免疫比浊法39、自动生化分析仪工作较长时间后个别项目出现系统误差，则首先考虑日因素是：.标准品是否变质40、比色杯清洗步骤中可以忽略的是：经吹干后可以继续循环使用41、使用（区带）转头离心时 不需要离心管，样品直接加至其中即可42、使用电阻加热和半导体冷却的PCR仪的恒 温方法属：变温金属块恒温法43、含2个加样针、灌注式加试剂装置、双圈反应盘的自 动生化分析仪的取样周期为6s,则测定单试剂法的工作效率为（1200 ）测试/h 44、测最电流变化的电极是：P02电极45、血培养仪的检测信号不包括：温度46、按血凝仪检测原理，下述中不属于凝固法的是：免疫比浊法47、流式细胞术尿沉渣分析仪应用的原理是：流式细胞术和电阻抗原理48、含1个加样针、1个加试剂针、 单圈反应盘的自动生化分析仪的取样周期为 4.5s,贝删定单试剂法的工作效率为（800 ） 测试/h 49、关于底物消耗限额参数，不正确的是：目的是提高监测精密度50、全自动尿沉渣分析仪中F1几乎极低而Fsc大小不等可以为：红细胞51、以下哪项不是微生物自动鉴定与药敏分析系统的性能特点：数据管理系统功能强大，但系统软件大多不可以不断升