2.2 细菌
复习
1.细菌的基本结构(4个)；
2.G+菌与G-菌的细胞壁组成和特点；
3.细菌的特殊结构及意义(4个)；
4.细菌生长繁殖的条件(温度、酸碱度、气体)
5.细菌的繁殖方式与速度；
6.液体培养基中的生长现象。
课时目标
1. 掌握细菌的分布，重点在正常人体分布。
2. 消毒灭菌以及相关方法，难点是逐渐形成无菌观。
(一)细菌在自然界的分布
1.土壤：
破伤风梭菌；
(一)细菌在自然界的分布
2.水；
3.空气。
(一)细菌在正常人体的分布
1.正常菌群
在正常人的体表和与外界相
通的腔道中，存在着不同种
类和数量的微生物，这些微
生物通常对人体无害，为人
体正常微生物群，通称正常
菌群。
人体常见的正常菌群
部位主要菌群
皮肤葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、铜绿假单胞菌、丙酸杆菌、白假丝酵母菌、非致病性分枝杆菌。
口腔葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、乳杆菌、类白喉棒状杆菌、放线菌、螺旋体、白假丝酵母菌、梭菌。
鼻咽腔葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、类杆菌。
外耳道葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、铜绿假单胞菌、非致病性分枝杆菌。眼结膜葡萄球菌、干燥棒状杆菌、奈瑟菌。
胃一般无菌
肠道大肠埃希菌、产气肠杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、葡萄球菌、肠球菌、类杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、双歧杆菌、乳杆
菌、白假丝酵母菌
尿道葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、非致病性分枝杆菌。
阴道乳杆菌、大肠埃希菌、类白喉棒状杆菌、白假丝酵母菌。
2.正常菌群的生理意义
①生物拮抗作用
②营养作用
③免疫作用
3.条件致病菌
正常菌群与人体间的平衡状态在某些特定条件下可被打破，使原来不致病的正常菌群也能引起疾病，这些细菌统称为条件致病菌。寄居部位改变
机体免疫功能低下菌群失调
③菌群失调 正常菌群中各种细菌
的
种类和数量发生较大
的变化。
常与抗菌药物的使用
有关。
痢疾
杆菌 大肠肝菌 葡萄球菌
假膜性肠炎
二、消毒与灭菌
(一)基本概念
1.消毒：杀死物体上或环境中的病原生物
的方法。
2.灭菌：杀死物体上所有微生物（包括病
原微生物、非病原微生物及细菌芽孢）的方法。
1.湿热消毒灭菌法
(1)煮沸法：100℃，5min。
(2)高压蒸汽灭菌法：最常用，最有效。
如手术衣、手术器械等灭菌。
(3)巴氏消毒法：常用于牛奶、酒类。
2.干热消毒灭菌法
焚烧烧灼干烤
3.辐射杀菌法
紫外线波长在265-266nm杀菌能力最强，但穿透力弱,故只能用于房间空气和物品表面的消毒。
(三)化学消毒灭菌法
70-75%乙醇
1．正常人体无菌的部位是( ) A.外耳道 B.小肠 C.血液
D.眼结膜
E.尿道门
2.杀灭空针、手术器械中所有微生物的方法
（
） A.消毒 B.灭菌 C.防腐 D.无菌 E.无菌技术
C
B
3．在医疗实践中判断手术器械、敷料等灭菌是否有效，下列哪项为标准（ ）
A.杀灭病毒
B.杀灭真菌
C.杀灭细菌
D.杀灭细菌芽孢
E.杀灭细菌繁殖体
4.紫外线杀菌最有效的波长是（ ）
A.200～300nm
B.265～266nm
C.270～280nm
D.250～260nm
D B
5.不属于湿热灭菌的方法是（
） A.巴氏消毒法 B.流通蒸汽消毒法
C.焚烧
D.高压蒸汽灭菌法
6.因长期大量使用广谱抗生素引起的细菌性腹泻属于（ ） A.食物中毒 B.细菌性痢疾 C.菌群失调症 D.过敏性反应
C C
7.牛奶和酒类的消毒常用（ ）
A.高压蒸汽灭菌法
B.流动蒸汽灭菌法
C.间歇灭菌法
D.巴氏消毒法
E.煮沸法
8.紫外线( )弱，故只适用于( )和( )消毒。
D 穿透力 物体表面 室内空气
冷冻食品
冻结食品 冷冻食品分为冷却食品和冻结食品，冷冻食品易保藏，广泛用于肉、禽、水产、乳、蛋、蔬菜和水果等易腐食品的生产、运输和贮藏；营养、方便、卫生、经济；市场需求量大，在发达国家占有重要的地位，在发展中国家发展迅速。 中文名冷冻食品包括冷却食品和冻结食品特点易保藏适用易腐食品的生产、运输和贮藏； 目录 1 概括 ?概念分类 ?发明 2 新冷冻技术在食品中的应用 ?被膜包裹冻结法 ?超声冷冻技术 ?高压冷冻技术 ?冰核活性细菌冻结技术 ?生物冷冻蛋白技术 ?即时冻结系统 ?食品减压冷冻 3 影响因素 ?运输业
?行业标准规范 ?设备质量 4 产业转型 概括编辑 概念分类 冷却食品：不需要冻结，是将食品的温度降到接近冻结点，并在此温度下保藏的食品。 冻结食品：是冻结后在低于冻结点的温度保藏的食品。 冷却食品和冻结食品合称冷冻食品，可按原料及消费形式分为果蔬类、水产类、肉禽蛋类、米面制品、调理方便食品类这五大类。 发明 英国17世纪的作家和哲学家弗兰西斯·培根试图将雪塞进一只鸡里冷冻它，不料受了寒，不久就病倒了。甚至在培根不幸的实验之前，人们就知道极端的寒冷能阻止食用肉类“变坏”。这使得富有的地主们纷纷在自己的庄园里设置了可以保存食品的冰窖。 这些早期冷冻食品的尝试都没有抓住问题的关键。与其说是冷冻的程度，不如说是冷冻的速度，才是使肉冷冻的关键。大概最先认识到这一点的人是美国发明家克拉伦斯·伯兹埃伊。 直到20世纪50年代和60年代，当家用冰箱日益普及时，冷冻食品才开始大量销售。随后不久，伯兹埃伊著名的红、白、蓝包装存在于全世界许多地方的商店，就成了人们熟悉的景观。 伯兹埃伊在第一次世界大战后几年，在加拿大拉布拉多半岛旅行
细菌素抗菌活性的检测
（1）排除有机酸的影响 将发酵液在4000r/min下离心20min，除菌体。取上清液，调pH至5.0，排除有机酸干扰。旋转蒸发浓缩10倍后，采用琼 脂扩散法，测定对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性 （2）排除过氧化氢的影响 将过氧化氢酶溶解在50mmol/L pH 7.0的磷酸缓冲液中配成母液，加入到排除菌体和有机酸后的发酵液中，使过氧化氢酶的 终浓度为5mg/mL，置于37℃的水浴中温浴2h后取出，以不用过氧化氢酶处理的发酵液为空白对照，采用琼脂扩散法，测定对 金黄色葡萄球菌的抑菌活性。 （3）抑菌物质的蛋白质本质的确定 把胰蛋白酶、胃蛋白酶和蛋白酶K分别溶解在3mmol/L pH 7.5的磷酸缓冲液中配成母液，分别加入到排除菌体、有机酸和 过氧化氢作用后的发酵液中，使它们的终浓度为0.5 mg/mL，在37℃水浴中温浴2h后取出，以不用蛋白酶处理的发酵液为空白 对照，采用琼脂扩散法，测定对金黄色葡萄球菌的抑菌活性[9]。 细菌素抗菌活性的检测 细菌素抗菌活性的检测采用牛津杯法。双碟的制备：取直径90 mm 的培养皿，注入灭菌的营养琼脂（1.5%）15 mL，水平放置使 之凝固，作为底层，取指示菌培养基（浓度为0.8%，冷却至50 ℃）与指示菌菌液适量混匀，取6 mL 铺在底层培养基上，水平 放置使之凝固，作为菌层。用无菌镊子夹取已灭菌的牛津杯，打开皿盖，放在培养基上。在牛津杯中加满相同量的抗菌液（300 μL），每个样品3 个重复。将加完样的培养皿小心放入37 ℃恒温箱内，培养18 h 后（其中以真菌做指示菌的培养时间为30 ℃、 3 d）取出测量抑菌圈直径。 琼脂扩散法：先将指示菌固体培养基融化，冷却后倒平板。待平板凝固后，均匀放入牛津杯。再将指示菌半固体培养基融化， 冷却至45～50℃，把指示菌液先稀释至10-2后，吸取50μL接入指示菌半固体培养基中，倒平板。待平板凝固后将牛津杯拔出， 在孔中加入50μL发酵液。30℃培养24h，观察有无抑菌圈产生[56]。 酸清除实验 乳酸菌发酵液的抑菌效果可能是由于在代谢过程中产生的乳酸、乙酸等有机酸造成的,为了排除有机酸的干扰,将培养好的发酵 液离心后获得无细胞发酵上清液,将此上清液的pH值调为5.0,与发酵液同pH值的乳酸、乙酸为对照,采用牛津杯琼脂扩散法测定 抑菌活性, 过氧化氢排除实验 取1mL菌悬液，加入10mg/mL的过氧化氢酶液1mL，在30℃水浴反应60min，进行抑菌试验。以大肠杆菌（E.coli）为指示菌，以未经过氧化氢酶作用的菌悬液液为对照，牛津杯法测定抑菌活性。 蛋白类抑菌物质的确定 将产细菌素菌株的无细胞发酵液pH值调至中性后,按1mg/mL加入蛋白酶K,混匀, 38℃反应3h。与未经处理的发酵液(对照)一起做 抑菌实验。结果表明,经蛋白酶K处理后,各菌株发酵液的抑菌活性有了明显的下降,证明其抑菌效果是由蛋白质类的物质产生的, 是细菌素类的成分。 （3）菌种生理生化鉴定 pH 4.5生长试验：将菌种涂布于pH 4.5的菌种平板固体培养基中培养，观察是否有菌落长出。 生长温度试验：将接种后的斜面菌种放入15℃的培养箱中培养，观察是否有菌落长出。 运动性试验：采用穿刺接种法，将菌种接入菌种固体斜面培养基中培养，观察是否在穿刺的周围生长。 精氨酸产氨试验：将菌种接入含精氨酸的培养基中，并接种不含精氨酸的培养基为对照，30℃，培养2d，取培养液于比色 盘中，加奈氏试剂，如有氨气产生，会出现橙黄或黄褐沉淀，样品的显示强于对照液才为阳性反应。 产酸试验：将菌种接入阿拉伯糖、纤维二糖、七叶灵、半乳糖、葡萄糖、葡糖酸盐、乳糖、麦芽糖、甘露糖、蜜二糖、核 糖、水杨甘、蔗糖、海藻糖、甘露醇、松三糖、棉籽糖、鼠李糖、山梨醇、木糖生理生化管中培养，观察是否变色，变色则为 阳性反应，不变色则为阴性反应。
临床标本的细菌学检验
临床标本的细菌学检验 临床标本的细菌学检验，从各种标本中查找病原菌及其对抗生素的敏感性，在明确诊断、指 导用药、预防和流行病学调查等方面具有重要意义。对各种标本，应根据实际要求和标本特 点选择适当的检验步骤及方法，准确、快速地检测病原菌，分析检验结果并报告，同时应注 意低耗和安全防护。分离细菌的目的是查找与疾病相关的病原体及其对抗生素的敏感性，对 临床诊断、治疗、预后和流行病学调查很有价值。 1临床标本的采集与送检 临床标本的质量对于细菌学检验的结果至关重要，严格按操作规程的要求进行标本采集、运送、保存和处理，才能保证检验结果准确、可靠。 1.1临床标本的采集 1.1.1细菌学检验申请单的检查与登记：应仔细检查检验申请单上的内容，如标本类型、来源、送检目的、患者姓名、性别、年龄、临床诊断(如未明确，应注明主要症状)及是否已用 抗生素等，并及时登记。 1.1.2标本盛放容器：采集的标本，尤其是采自无正常菌群寄居部位的标本如血液、脑脊液、穿刺液等，必须盛放于无菌容器内[1]。容器灭菌应采用干热、湿热等物理方法灭菌。容器上 应贴上标签，注明待检患者姓名、床号等信息。 1.1.3无菌操作：在采集血液、脑脊液、穿刺液、骨髓时，应严格进行无菌操作，避免杂菌 污染标本。采集粪便、痰液、咽拭子、肛拭子等标本，虽无需严格无菌操作，但也应尽量避 免杂菌污染。 1.1.4采集时间和部位：选择合适的采集时间是很重要的，一般情况下，标本应尽量在疾病 早期或在症状、体征明显时，在抗生素治疗之前采集，一些特殊检验的标本应按规定的时间 采集。根据感染的具体情况，选择适当的部位采集标本。 1.1.5安全防护：采集的标本可能含有病原菌，因而采集、运送、保存和处理过程中必须注 意安全，防止标本中的病原菌溢出导致污染甚至传播；同时还需防止自身感染。 1.2标本的送检与保存 采集标本后，在盛装标本的容器上应贴好标签，并在标签上写明相关信息，立即将标本送至 检验室。标本收集时间应加以准确记录，使检验人员接种时能判断标本是否延误。如不能及 时送检，应根据病原菌的生物学特性，采用冷藏或保温等措施，以及将标本放入相应的保存 液或培养基中保存运送。常规细菌学检验的标本在采集后，应于1 h内送交实验室，否则可 能影响病原菌检出。若需保存于4℃，也不能超过24 h，否则会影响病原菌的检出率。包括 厌氧菌培养的临床细菌检验标本，运送时间与原始标本的量有关，标本的量少应加快运送， 可在15～30 min内送达，否则必须于厌氧环境中25℃存放，不超过20～24 h。不得冷藏及 冷冻。如怀疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌感染标本应立即处理。脑脊液、生 殖道、眼睛、内耳标本绝对不可以冷藏[2]。任何临床标本，包括拭子、体屑、体液或组织块，已知或可能含有被分离的致病菌，都应视为生物危险材料。运送时，无论距离远近都必须严 格执行有关病原微生物标本的运送管理规定，注意安全防护，且标识清楚、包装完整且符合 要求，然后安排专人运送。 2 临床标本的细菌学鉴定与报告 对标本进行直接涂片镜检、快速检测病原体成分或特异性抗原、直接药敏试验，同时进行病 原菌的分离培养、菌种鉴定和纯菌药物敏感试验，最后报告检验结果。
污水处理活性菌作用
污水处理活性菌作用 活性污泥法是利用活性污泥在废水中的凝聚、吸附、氧化、分解和沉淀等作用，去除废水中有机污染物的一种废水处理方法，其基本工艺流程是曝气池和二次淀池依次串联，并有回流污泥管将二次沉淀池沉淀下来的污泥又送回到曝气池中活性污泥处理技术中，原生动物充当着重要的角色，发挥着重要的作用。原生动物是动物界中最原始的单细胞动物，分布广，生活于淡水、海水及潮湿的土壤中，也有不少种类营寄生生活，主要分为：鞭毛纲、肉足纲、孢子纲、和纤毛纲。其在活性污泥法中的作用主要有以下几点： 1.净化作用： （1）捕食游离细菌 原生动物是活性污泥的重要组成部分。废水生物处理系统中污染物质降解者主要是细菌，原生动物主要掠食细菌。原生动物对细菌的掠食速度是惊人的，某一池塘的研究结果证实，细菌总数的75%被原生动物所食。在污水处理厂中，形成菌胶团的细菌对原生动物有抗性作用，原生动物主要捕食游离细菌，可以大大降低出水中细菌的密度，从而降低出水浊度。 （2）分解污染物 很多证据表明，原生动物还能够净化污水中的无机物和有机物。有人在无菌条件下，运用累枝虫处理污水，发现可
降低70%的氨态氮。还有人通过加热处理原污水来杀灭原生动物，然后接种细菌并进行曝气实验，结果大量游离细菌导致出水浑浊，同时COD、BOD、总有机碳和悬浮固体等各项指标明显偏高；在试验的平行系列中接种纤毛虫后，随着原生动物种群的建立，游离细菌总数下降，出水变得澄清，BOD 和COD均下降。因此可证明，原生动物有分解污染物的作用。2．絮凝作用： （1）分泌絮凝物质 活性污泥是一种生物絮体，絮凝对活性污泥的沉淀至关重要，它直接影响到出水中固体悬浮的含量。原生动物可以促进絮凝作用，草履虫等纤毛虫和一些鞭毛虫向胞外分泌可溶性多糖类物质，这些多糖物质对悬浮颗粒和细菌均有吸附能力，有利于形成菌胶团。 （2）促进细菌絮凝 在原生动物捕食作用的压力下，细菌往往改变形态，抵抗原生动物捕食。原生动物存在时，一些原来悬浮生长的个体细菌采用絮状菌胶团或菌链的方式生长，去除原生动物并连续培养几代后，这些菌胶团或菌链又以悬浮个体的方式生长。细菌的这种有效捕食防御机制，十分利于絮体的形成与污泥沉淀。 3.指示作用： （1）指示污泥性质
(完整版)临床细菌学检验的质量控制流程.doc
临床细菌学检验的质量控制流程 1、质量的概念和质量保证 影响检验结果质量的因素很多 , 实验过程中 , 仪器、试剂和操作 等均会引起试验结果的误差 , 衡量检验结果的质量常用准确度和精确 度 , 或特异性和灵敏度。具体采用哪一种指标应根据实验的性 质决定 , 目前临床细菌学检验的工作内容大致有 3 类 , 衡量起质量的技 术指标不完全相同。 第一类是检出细菌的实验, 包括标本直接涂片检查和细菌分 离培养。现代的细菌感染, 混合菌较常见 , 一份标本中 , 会有 2 种以上细菌存在。无论标本直接涂片还是分离培养, 检验结果必须如实 反映感染病灶中细菌的真实情况。这类实验的质量 , 应该用细菌检出率或细菌分离率来衡量。 第二类是鉴定细菌的实验。通过一系列生理生化及形态学、 血清学的手段来鉴定病原菌。对分离到的病原菌都做出准确的鉴定, 是反映细菌事工作质量的一个重要方面。 第三类是药敏实验。有稀释法和纸片法 , 前者是半定量的实验 , 可以用准确度和精密度来衡量 , 后者以敏感或耐药的形式报告 , 属于定性的实验 , 但实验过程中测量抑菌环是定量的指标。也应以准确度和精确度衡量。 所以实验室人员必须清楚认识到以上这一点, 在实验室的设 计和管理方面就应该主动设置误差检测系统 , 实验中一旦出现误差及 时发出警报 , 查明原因及时纠正。 2、室内质量控制 2.1 在职人员 2.1.1 须受过细菌学检验的专门基础教育以及相关的生物交全防护 知识 , 并以细菌检验为专业 , 及时终结并积累工作经验。 2.1.2 作人员必须具有严谨的工作态度 , 技术操作须完全遵守操作规 程 , 并直接参与质量控制工作。 2.1.3 工作人员应不断加强自身的业务学习 , 及时了解本领域的新进展 , 将所掌握的新知识应用到实际工作中。
细菌脱氢酶活性的测定
细菌休止细胞的制备及其脱氢酶活性的测定 摘要休止细胞又叫静息细胞，在研究微生物生理生化及新陈代谢中应用广泛，这种细胞虽然处于休眠状态，不进行生长繁殖，但仍含有各种酶系，具有氧化和发酵能力，是测定细菌脱氢酶活性的良好材料。本实验用E.coli cVcc249菌株作为实验材料，制备其休止细胞，再加入四种同样浓度的TCA循环中的底物：乙酸钠、琥珀酸钠、α-酮戊二酸及柠檬酸钠，比较和分析在相同浓度、不同底物的情况下，细菌脱氢酶活性的大小；并对其中的α-酮戊二酸和柠檬酸钠两种底物配以浓度梯度，研究其分别与细菌脱氢酶活性之间的相互影响。在本次实验中，所采用的测定细菌脱氢酶活性的方法是噻唑盐还原法，噻唑盐宜与反应生成的还原氢反应生成水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒，可溶解于二甲亚砜中，再根据其颜色变化的深浅，用分光光度计测其OD510nm值，即可表示细菌脱氢酶的活性。 Abstract The resting cells, which are widely used in the study of microbial biochemistry and metabolism, are a kind of cells that are dormant ,not growth or reproduction. Those cells still contains a variety of enzymes as well as the capacity of oxidation and fermentation, thus make them good material of determining dehydrogenases activity. The experimental strain is E.coli cVcc249.Firstly,preparing the resting cells of the stain, then adding the four substates of TCA cycle with the same concentration, the four substates are: sodium acetate, sodium succinate, α-ketoglutaric acid and sodium citrate. These allow us to compare and analysis the bacterial dehydrogenase activity in those four same concentration substates. Secondly, making concentration gradient of α-ketoglutaric acid and sodium citrate perspectively, study their functions with bacterial dehydrogenase activity. In this experiment, we us the method of MTT reduction to determine the activity of dehydrogenase. The MTT can be reduced by the bacterial dehydrogenase, and the product is Formazan, which is a water-insoluble and blue-purple crystalline. We can solute Formazan in DMSO, then the samples were checked by measuring spectrophotometrically at 510 nm, which can represent the activity of bacterial dehydrogenase. 关键词休止细胞脱氢酶活性α-酮戊二酸柠檬酸钠噻唑盐
厨房卫生细菌数量调查
厨房卫生细菌数量调查 夏天天气炎热，是细菌滋长的好季节，家居清洁卫生成夏季健康关键之一。威王清洁剂作为家里的健康卫士，提醒妈妈们要注意厨房细菌的滋生，提防病从口入。 厨房是细菌滋生好地方 随着生活水平的不断提高，人们对日常的饮食要求更高，多样的烹调手法不再只出现在酒楼饭店，家里也会经常煎炒焖炸，这无疑就增添了厨房的油烟负担。如果油烟不及时清理，油污就会凝结，难以清理，而且油垢特别容易沾上空气里面细菌，成为细菌繁殖的温床，还有未经处理的食材所带的细菌，对食物造成污染，危害家人的健康。厨房最常出现的细菌有大肠杆菌和金黄葡萄球菌，容易引起腹泻，呕吐，体质较弱的孩子和老人家们都会比较容易被感染。 威王清洁剂助你健康除油污 厨房是家居中最容易产生细菌的场所，这主要是由于常年水洗、蒸煮食物，都特别容易造成厨房湿气重、温度高，加上特别多外来未经加工的食材，特别容易带上细菌，在这样的情况下，细菌繁殖就会特别迅速。在夏天，细菌的滋生就会更加迅速，妈妈们希望孩子们能健康成长，厨房清洁就更不容忽视。而近年来，厨房清洁产品都有加入除菌配方，其实威王厨房除菌清洁剂备受妈妈们的肯定威王清洁剂含有效除菌配方，对厨房最常出现的金黄葡萄球菌和大肠杆菌的除菌率高达99.9%，为孩子们的健康添上了一道坚固的“保护罩”。同时，威王10效全能厨房清洁剂，特有溶油配方，能轻松解决油污，独特的喷头设计，不用拆卸厨具，只要一喷，停留2-3分钟，不用过水清洗，用干布一抹就能快速除油垢，让妈妈更轻松。如果之前已经忽视了清洁，厨房已经被油污重度污染的情况下，妈妈们可以用威王清洁剂专门设计的一款针对重油污的产品—威王厨房油烟机重油污净。产品的去重油污配方，特别针对油烟机、炉灶台中累积顽固污渍，只要喷洒在油污上，也是停留2-3分钟，让清
细菌
细菌 细菌是具有不成形的核膜的具有细胞壁的微生物。一般有以下三种形态：球菌、杆菌、螺旋菌。 一、性质 ①细胞壁缺陷的细菌：泛指那些由于长期受某些环境阴虚的影响或通过人工事假某种压 力导致细菌的细胞壁合成不完整甚至完全缺失的细菌。这种细胞壁受损的细菌在普通环境中由于不能耐受体内的高渗透压将会胀裂死亡。但在高渗环境下，它们仍可存活。 ②由于真核细胞和原核细胞核糖体亚基的组成差异，许多能有效作用于细菌核糖体的抗生素对人体无害。 ③遗传物质：拟核、质粒（游离或整合到宿主细胞染色体中） ④影响细菌生长繁殖的因素： 一定范围内，菌体细胞的生长繁殖速度与营养物质的浓度呈正比营养 物质 酸碱度影响细菌生长代谢中酶的活性；大多数最适pH范围为6.8~7.4 酸碱 度 温度温度影响最大，一般中温菌，哺乳动物寄生菌最适温度37℃，腐生性细菌25~32℃ 气体氧气的需求量不同； ⑤细菌的繁殖方式 细菌以无性二分裂方式进项繁殖，即细菌生长到一定即使短期，在细胞中间逐渐形成横隔，由一个母细胞分裂成两个大小基本相等的子细胞。（芽孢不是繁殖体是休眠体） ⑥细菌生长量的测定 主要根据细菌的数目、重量及生理指标三方面对生长量进行测定。由于条件限制，只能用计数法：分为直接技术发、间接技术法和比浊法。直接技术法用细菌技术板或血球计数板，缺点是不能区分死菌和活菌；接计数法又称活菌计数法，活菌培养法计算；比浊法是根据细菌悬液的光吸收值能反应出细菌细胞浓度的原理，用浊度计或分光光度计测出细菌悬液的光吸收值，由此计算出细菌数。 ⑦细菌的酶
细菌是能够进行独立生活的单细胞生物，因而其细胞内的酶非常丰富。按存在部位分为胞内酶和胞外酶。按产生方式分为组成酶和诱导酶；等等 二、抑菌剂的种类和抑菌机理 化学消毒剂的杀菌机制： （1）促进菌体蛋白质变性或凝固。例如分类（高浓度）、醇类、重金属盐类（高浓度）、酸碱类、醛类。 （2）干扰细菌的酶系统和代谢。某些氧化剂、重金属盐类（低浓度）与细菌的巯基结合使有关酶失去活性。 （3）损伤细菌细胞膜。例如酚类（低浓度）、表面活性剂、脂溶剂等，能降低细菌细胞的表面张力并增加通透性，胞外液体内渗，只是细菌破裂。 杀菌剂的不同类别： 杀菌剂类别杀菌、抑菌机理 酚及其衍生物主要作用于细菌的细胞壁和细胞膜，使菌体内含物逸出，同时也可使菌体蛋白变性。酚类对细菌繁殖体的作用强烈，但对芽孢的作用不明显。 一般用酚作为标准来比较其他消毒剂的杀菌力。 卤素系由于卤素都是强氧化剂，故与氧化剂的杀菌机制答题相似，主要通过作用于菌体细胞内的酶蛋白啦实现杀菌作用。 过氧化物类氧化剂可以使菌体酶中的巯基（-SH）氧化成为（-S-S），从而使酶的活性丧失。常见的氧化剂有高锰酸钾、过氧化氢、过氧乙酸等 醇类醇类可以溶解细胞膜中的脂类，并使菌体蛋白质变性。70%~75%乙醇杀菌力最强。 醛类强于醇类；醛基能与细菌蛋白质中的氨基结合，使蛋白质变性。 季铵盐类这类杀菌剂的作用机理主要是阳离子通过静电力、氢键力以及表面活性剂分子与蛋白质分子间的疏水结合等作用，吸附带负电的细菌体，聚集 在细胞壁上，产生室阻效应，导致细菌生长受抑而死亡；同时其憎水烷 基还能与细菌的亲水基作用，改变膜的通透性，继而发生溶胞作用，破 坏细胞结构，引起细胞的溶解和死亡。属于阳离子表活类别 表面活性剂通过媳妇与菌体细胞表面，改变细胞壁的通透性，导致胞内物质逸出，发挥杀菌作用。细菌表面带负电荷，故阳离子型的杀菌作用较强，杀菌 范围也较广泛。 酸碱类（腐蚀性） 燃料类 气体类 其他有机类
微生物各种细菌存活条件
大肠菌群1、大肠菌群为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。若水中或食品中发现有大肠菌群，即可证实已被粪便污染，也可能就有肠道病原菌存在。据此，可以认为含有大肠菌群的水或食品是不安全的。2、生存环境大肠菌群在自然界中分布广泛，在15—46℃均可生长，最适生长温度为37℃.在水和土壤中大量存在，对自然环境有较强的抵抗力。主要污染的食品是肉类、水产品、蔬菜等。85℃热水1~3分钟内杀灭本菌。300ppm次氯酸纳溶液1~3分钟内杀灭本菌。 金黄色葡萄球菌繁殖条件金黄色葡萄球菌能在12~45℃生长繁殖，最适生长温度为37℃，由于常引起人和动物化脓性疾病，又称化脓性球菌。杀灭条件加热80℃30分钟才能杀死，煮沸可迅速使它死亡。 沙门氏菌1、生存环境该菌在水中不易繁殖，但可生存2—3周，冰箱中可生存3—4个月，在—25℃可存活10个月，在自然环境的粪便中可存活1—2个月。2、繁殖条件沙门氏菌最适繁殖温度为37℃，在20℃以上即能大量繁殖，因此，低温储存食品是一项重要预防措施。生熟食品严格分开，防止交叉污染也是防止该菌污染的至为重要的措施。沙门氏菌3、污染渠道沙门氏菌的来源主要是患病的人和动物，及人和动物的带菌者。，其中在肉类中最为多见。淡水鱼虾有时带菌，海产鱼虾一般带菌者较小。菌不耐热。4、杀灭条件沙门氏菌对热及外界环境的抵抗力属于中等，60℃20—30分钟、75℃5分钟即被杀死，100℃条件下该菌立即被杀死。 真菌（霉菌、酵母菌）1、生存环境和繁殖条件霉菌在自然界中分布极为广泛，土壤、空气、水、和生物体内外到处都有，其最适生长温度是25℃，在20—30℃大部分霉菌都能生长，小于10℃和大于30℃时霉菌生长显著减弱，在0℃时几乎不生长2、污染渠道由于霉菌种类多且分布广，物体水分含量高时，容易滋生霉菌。霉菌中的毛霉常在果实、果酱、蔬菜、糕点、乳制品、肉类等食品上生长，引起食品的腐败变质。含水量高的粮食容易滋生霉菌。3、杀灭条件食品的中心温度达到87.8—90.6℃才能杀死霉菌，90℃10—30分钟可以杀死其中的孢子
临床细菌检验的全面质量管理
临床细菌检验的全面质量管理 临床细菌学检验在检验医学中具有特殊的位置，主要表现在它的高风险性（如脑脊液培养结果正确与否直接关系到患者的生死）、高干扰性（如标本采集、运送等过程中的诸多因素都会干扰检出率和正确率）、高技术性和高严谨性（准确表达、报告和解释结果直接影响治疗的成败）。因此，细菌培养和药敏试验等属于高度复杂的试验范畴。 由于致病菌的多样性和变异性，临床细菌学始终是一门知识更新和发展较快的学科。为此，从事临床细菌检验的医师和技师必须具有较好的业务素质和敬业精神，要勤于学习和探索，要有严谨求实的作风和对新事物的敏感性，这是高质量完成细菌检验任务的首要条件。 细菌检验的全面质量管理是一个连续的质量管理过程，包括从患者准备，申请单书写，标本采集、标识、保存、运送、处理和检验，结果分析和报告，直至医师的理解和应用（诊治）。为了有效地对这一过程进行全面质量管理，本文从检验前、检验中和检验后三个方面提出相关要求。 一、检验前的质量管理 （一）检验项目的申请 细菌检验项目的申请要有针对性和合理性。临床医师应在熟悉人体各部位正常菌群以及常见致病菌的基础上，结合感染患者的症状、体征，科学地提出检验申请。对于有感染迹象者（WBC增高，中性粒细胞升高，CRP>20mg/L等），应尽快申请做细菌培养与药敏试验，并力争在使用抗菌药物之前送检标本，以便及时获得致病菌的有关资料和药敏结果，正确选用抗菌药。对于低临床价值的细菌标本，如口腔和肠内容物、直肠周围脓肿、褥疮、多毛的脓肿、恶露、呕吐物、Foley导管尖等，由于易受正常菌群的污染，细菌培养价值较低，一般不做细菌培养；必须申请细菌培养时，其结果应结合临床分析。由于细菌检验的特殊性，细菌检验申请单必须提供临床信息，特别应说明患者是否使用过抗菌药以及使用过何种抗菌药，以便于实验室有的放矢地抵消抗菌药的作用，提高细菌培养阳性率。 （二）检验标本的采集、保存、运送和验收 1．患者的准备主要包括两个方面：一是做好采集部位的清洁和消毒工作，防止正常菌群的污染；二是耐心细致地交待患者，使其主动配合以便采集到有价值的标本。 2．标本采集标本正确采集十分重要，其目的是千方百计捕捉病原菌并保持其活性，以提高检出率，同时又要尽可能避免非病原菌的污染和干扰。为此，要根据各种感染性疾病和目标病原菌的不同特点，正确合理地确定采样部位、时机和次数。要选用恰当的采样器材并严格按规范操作。一般来讲，采样量多一些有利于病原菌的检出，但应以不影响患者健康和便于操作为前提，因此采样量要恰当。 3．标本保存与送检盛标本的容器应无菌、不漏和便于密封。要根据目标病原菌的特点决定是否使用保菌液、运送液或增菌液，以及选择何种保菌液、运送液或增菌液。标本采集后应尽可能立即送检。如不能及时送检，要根据目标病原菌的特点确定保存条件（如温度等），在规定的时间内送到实验室。 4．验收和登记标本的验收和登记要有专人负责。验收的内容主要包括：采样时间与送检时间（注意时间间距）以及送检条件是否符合保存致病菌活力的要求；盛标本容器是否有溢漏和污染；申请单是否填写完整；标本标识是否与申请单一致和唯一等。对不合格的标
海洋细菌活性物质
海洋细菌活性物质的研究概况 刘拥微生物与生化药学2111007135 海洋是生命之源，人类物质资源的天然宝库。海洋生物量约占地球生物总量的80％，生物种类20万种以上，蕴藏着丰富的药用资源。但是，目前人们对海洋生物的认识仍相当有限，利用率仅l％左右。海洋生态环境十分独特，海洋的特殊环境如高压、低营养、低温(特别是深海)、无光照以及局部的高温和高盐等，造成了海洋微生物的多样性和特殊性。使海洋微生物产生了与陆地微生物不同的代谢系统和防御体系，特别是从海洋微生物中提取的生物活性物质，常常具有新颖的化学结构和特异的生理功能，在抗菌、抗病毒、抗肿瘤、保健等方面具有独特效应，已成为开发新药、特药的主要研究方向之一。海洋细菌是海洋微生物中的优势类群，同时具有产生生物活性物质的巨大潜力，由于海洋细菌具有独特的代谢途径和遗传背景，故可产生出不同结构和功能的天然活性物质，所以为寻找能解决目前疑难杂症的药物提供了丰富的资源，也为微生物工业化生产新药开辟了一条崭新道路。海洋细菌活性物质的研究，是目前国际研究的热点。 1 海洋细菌资源 海洋中常见的细菌主要属于以下几个系统类群：变形细菌(Proteobacteria)类群、革兰氏阳性细菌类群(包括高G+c和低G+c)、噬纤维菌属一黄杆菌(Cytophaga-Flavobacterium)类群、浮霉状菌(Planctomycetales)／衣原体类群、疣微菌(Verrucomicrobiales)类群及一些人工尚未培养成功的系统类群等。其他一些细菌类群也存在于海洋生态环境中，但研究报道较少?。早期人们从海水中分离得到的海洋细菌有9o％以上是革兰氏阴性细菌，对这些细菌的研究较多也较集中。随着研究的深入，发现海洋中同样存在许多革兰氏阳性细菌，但大多分布于海洋沉积物和海洋生物共生系统中，并常在系统学上形成独特的分支。海洋中的革兰氏阳性细菌包括产芽孢和不产芽孢的属群，主要有：芽孢杆菌属(Bacillus)、类芽孢杆菌(Paenibavillus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、链球菌属(Streptococcus)、消化球菌属(Peptococcus)、微球菌(Micrococcus)、梭菌属(Clostridium)、八叠球菌属(Sarcina)、动性球菌属(Planococcus)、盐芽孢杆菌属(Halobacillus)、放线菌属(Actinomycetes) 。 2 海洋细菌药物研究 2．1 抗菌活性物质 抗菌活性物质主要包括抗细菌、抗真菌、抗病毒物质三类，其中主要以抗细菌活性物质为主。许多海洋细菌可产生抗生素，包括链霉菌属(Streptomyces)、交替单胞菌属(Alteromonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)、黄杆菌属(Flavobavterium)、微球菌属、着色菌属(Chromatium)、钦氏菌属(Chainia)、Madurmacetes等菌及许多未定菌。已报道海洋细菌产生的抗生素有溴化吡咯、a—n— pentylquinolind、magnesidins，istamycins，aplasmomycins，ahermicidin，macmlactins，diketoplperazines、3-氨基一3一脱氧一D一葡萄糖、oncorhynco|ide、maduralide、salinamides、靛红、对羟苯基乙醇、醌、thiomarinds BC、trisindoline、pyrolnitrim等，其中有些种类在陆生菌中从未见过。Jaruchoktaweechai等从海泥里分离出一株芽孢杆菌(Bacillus sp．)Sc026，并从其培养液中分离出3个大环内酯化合物对枯草杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制活性。Fudou等从海藻中分离出一种新属黏细菌Halisngium luteum，其培养液的丙酮浸膏中分离出一个新的抗真菌抗生素—Haliangicin。
临床细菌检验标本的采集、运送、保存和处理
临床细菌检验标本的采集、运送、保存和处理 正确的标本采集、运送、保存和处理对于保证临床细菌室的工作质量非常重要，应予高度重视。实验室有责任将标本选择（包括时间和解剖部位）、收集、保管、运送、接受和安全等 关键性信息，用户里手册的形式提供给各临床部门参考。 一、标本管理的安全警示 1．所有标本的采集、运送和处理应在无菌操作，防止污染的原则下认真进行。 2．已采集原始标本都应置于防漏、密封的无菌容器中运送。 3．带针头的注射器运送标本时用无菌试管或防护装置套住注射针，再置于防漏塑料袋中运送至检验科。 4．采集足够量标本，材料不足可能导致假阴性。 5．每份标本都应标记患者姓名、送检号码、标本来源、具体部位、日期、时间及相关临床信息。 6．常规性细菌学检验的标本，采集后不能超过１小时送至检验科，4℃保存也不能超过24小时，怀疑厌氧菌感染的标本应在半小时内送至检验科（不能及时运送组织标本必须在 厌氧环境中25℃不超过24小时）。 7．脑脊髓液、生殖道、眼睛、内耳标本应立即送检，绝不可冷藏。 二、标本的处理和要求 1．血液和骨髓： 1）急性脑膜炎、骨髓炎、关节炎、细菌性肺炎、肾盂肾炎发热患者，应在抗生素治疗或更换前，从不同部位采集血液标本，做2次血液培养，分别接种于各种培养瓶中 立即送检置于孵箱内培养 2）疑似心内膜炎患者：急性病例在抗生素治疗或更换前1—2小时，从不同部位采集血液标本，做3次血液培养 3）亚急性病例：第一天24小时内，相隔1小时连续采集3次血液做培养，若24—48小时全部阴性，再采集2—3次血液做培养 4）若已经抗生素治疗患者，连续3天，每天取2次血液做培养 5）严格无菌技术采集血液血培养瓶后立即送检，切不可放冰箱暂存。 2．脑脊液： 脑脊液采集后，置于无菌试管中，15分钟内送检，绝不可冷藏。每种检验最小需 要量：细菌培养≥1ml,真菌≥2ml,抗酸杆菌≥2ml. 3．尿液： 1）中段尿采集：清洁外阴及尿道口周围，自然排尿，让尿流不间断，截留中段尿，，置于无菌尿杯中立即送检。尿量不少于1ml. 2）直接插导管采尿：一般插入导管后先让尿流弃15ml再留取培养标本。尽量不采用此法，极易将尿道细菌丛进入膀胱增加医源性感染危险。 3）滞留导管采集尿：用75%酒精消毒导管口，用针筒抽取5—10ml尿置于无菌容器中立即送检，滞留导管会使膀胱带有细菌，尽可能不采用。 4）尿液采集后2小时内必须送检，立即处理。规定每日一次。 5）若同一份标本检到3种以上不同细菌则认为标本污染。一般认为革兰氏阴性杆菌菌落计数大于105cfu/ml,革兰氏阳性球菌菌落计数大于104cfu/ml,方有诊断意义。 4．痰液： 1）先用冷开水漱口清洗咽喉，用力咳出痰液置于无菌容器中立即送检，2小时内接种。 2）符合要求的痰液应在低倍镜视野中鳞状上皮≤10个，白细胞≥25个。
细菌活性检测方法CCK-8
CCK-8细菌活性检测试剂盒 产品组成： 产品编号BB-4221-1 BB-4221-2 BB-4221-3 规格250T 500T 1000T CCK-8细菌检测试剂 2.5ml 5ml 10ml 产品简介： 贝博细菌活性检测试剂盒(CCK-8法) 是应用新型的水溶性四唑盐2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐快速高灵敏度检测细菌活性的比色检测产品。 本四唑盐在电子载体存在的情况下能够被细菌的脱氢酶还原成橙黄色的水溶性的Formazan，生成的Formazan量与细菌的活性成正比。细菌活性越强，则颜色越深；细菌活性越弱，则颜色越浅。对于同样的细菌，颜色的深浅和细菌活性呈线性关系。 CCK-8溶液可以直接加入到细菌样品中，不需要预配各种成分，CCK-8溶液很稳定，对细菌没有毒性，可以长时间培养细菌。 图一：CCK-8细菌活性检测原理 使用方法： 1. 制备适当浓度微生物细胞的悬液，在96孔板内每孔接种190μl悬液。 2. 每孔加入10μl的染色溶液。 3. 将培养板在培养箱中培养（37℃或合适的温度）。 4. 用酶标仪测定在450nm处的吸光度。 细胞活力计算： 各重复孔的OD值取平均数。 细胞活力% =（测试孔OD-空白OD/对照孔OD-空白OD）×100
相关产品： 产品 产品号 产品 产品号 Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒 BB-4101 细胞周期检测试剂盒 BB-4104 Annexin V-EGFP/PI凋亡试剂盒 BB-4102 JC-1线粒体膜电位试剂盒 BB-4105 MTT细胞增殖及毒性检测试剂盒 BB-4201 Caspase 3 活性检测试剂盒 BB-4106 CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒 BB-4202 Caspase 8 活性检测试剂盒 BB-4107 WST-1细胞增殖毒性检测试剂盒 BB-4203 Caspase 9 活性检测试剂盒 BB-4108 MTS细胞增殖与毒性检测试剂盒 BB-4204 Caspase 10 活性检测试剂盒 BB-4112 Hoechst33342/PI双染试剂盒 BB-4131 细胞凋亡形态学检测试剂盒 BB-4123 DAPI染色试剂盒 BB-4133 Rhodamine 123染色试剂盒 BB-4137 细胞存活率检测试剂盒 BB-4122 AO/EB双染试剂盒 BB-4132
细菌的控制和利用
教学设计者授课人授课时间教学课题第五单元第1章细菌的控制和利用 教学目标1.描述细菌的形态结构。 2.举例说明细菌的生活特点，如营养方式和呼吸类型等。 3.举例说明细菌对人类的益处，说出细菌的危害及其预防措施。 教学重点与难点重点：细菌结构特点及细菌对自然界的意义。2.细菌与人类的关系。难点：如何理解细菌的系统和结构特点。 教学方法 与手段 实验观察法、归纳法、讨论法 教学过程 教师行为 一、前提测评 1.你们见过细菌吗？听说过细菌吗？ 2.能否描述出细菌的样子？ 3.细菌对人类有益还是有害？ 二、认定目标 1.能描述细菌的形态结构。 2.能举例说明细菌的生活特点，如营养方式和呼吸类型等。 3.能举例说明细菌对人类的益处，说出细菌的危害及其预防措施。 三、导学达标 （一）细菌的形态 引导学生先从低倍显微镜观察，再用高倍显微镜观察细菌。学生行为 思考 静听记忆 观察 改进与反思
说说细菌从形态上有哪些分类。并举例说明。（二）细菌的结构特点 1.结合图5-1-2细菌的结构模式图，请学生说出细菌的各部分结构。 2.说说细菌的附属结构：荚膜、鞭毛、芽孢有怎样的作用？ （三）细菌的繁殖 做细菌繁殖的实验，说说到10代时，一共有多少细菌个数。 （四）细菌生活的特点 细菌是怎样生活的吗？吸收哪些营养物质呢？ 思考：1.牛奶为什么会变坏？ 2.如何做才能使牛奶保鲜？ （五）实际用：细菌对人类的影响 1.细菌的功劳 2.细菌的危害和防治 （六）课堂总结 你学到了什么？ 四、布置作业 知识点1、3、4、5. 回答 看图回答阅读回答 得出结论 阅读讨论回答 阅读回答尝试回答
教学过程
活性污泥法培养细菌步骤
活性污泥的培养步骤 1. 向好氧池注入清水（同时引入生活污水）至一定水位，并注意水温。 2. 按风机操作规程启动风机，鼓风。 3. 向好氧池投加经过滤的浓粪便水（当粪便水不充足时，可用化粪池和排水沟内的污泥补充。），使得污泥浓度不小于1000mg/L，BOD达到一定数值。 4. 有条件时可投加活性污泥的菌种，加快培养速度。 5. 按照活性污泥培养运行工艺对反应池进行曝气、搅拌、沉降、排水。 6. 通过镜检及测定沉降比、污泥浓度，注意观察活性污泥的增长情况。并注意观察在线PH值、DO的数值变化，及时对工艺进行调整。 7. 测定初期水质及排水阶段上清液的水质，根据进出水NH3-N、BOD、COD、NO3-、NO2-等浓度数值的变化，判断出活性污泥的活性及优势菌种的情况，并由此调节进水量、置换量、粪水、NH4Cl、H3PO4、CH3OH的投加量及周期内时间分布情况。 8. 注意观察活性污泥增长情况，当通过镜检观察到菌胶团大量密实出现，并能观察到原生动物（如钟虫），且数量由少迅速增多时，说明污泥培养成熟，可以进生产废水，进行驯化。 二、活性污泥的驯化步骤 1. 通过分析确认来水各项指标在允许范围内，准备进水。 2. 开始进入少量生产废水，进入量不超过驯化前处理能力的20％。同时补充新鲜水、粪便水及NH4Cl。 3. 达到较好处理后，可增加生产废水投加量，每次增加不超过10～20％，同时减少NH4Cl投加量。且待微生物适应巩固后再继续增生产废水，直至完全停加NH4Cl。同步监测出水CODcr浓度等指标,并观察混合液污泥性状。在污泥驯化期还要适时排放代谢产物,即泥水分离后上清液。 4. 继续增加生产废水投加量，直至满负荷。满负荷运行阶段,由于池中已培养和保持了高浓度、高活性的足够数量的活性污泥,池中曝气后混合液的MLSS达到5000mg/1,此过程同步监测溶解氧,控制曝气机的运行,并进行污泥的生物相镜检。 三、调试期间的监测和控制 在调试及运行过程有许多影响处理效果的因素,主要有进水CODcr浓度、pH值、温度、溶解氧等,所以对整个系统通过感官判断和化学分析方法进行监测是必不可少的。根据监测分析的结果对影响因素进行调整，使处理达到最佳效果。 1、温度 温度是影响整个工艺处理的主要环境因素,各种微生物都在特定范围的温度内生长。生化处理的温度范围在10～40℃,最佳温度在20～30℃。任何微生物只能在一定温度范围内生存，在适宜的温度范围内可大量生长繁殖。在污泥培养时，要将它们置于最适宜温度条件下，使微生物以最快的生长速率生长，过低或过高的温度会使代谢速率缓慢、生长速率也缓慢，过高的温度对微生物有致死作用。 2、pH值 微生物的生命活动、物质代谢与pH值密切相关。大多数细菌、原生动物的最适pH值为6.5～7.5，在此环境中生长繁殖最好，它们对pH值的适应范围在
细菌活性检测方法Alamar Blue
Alamar Blue细菌活性检测试剂盒 产品组成： 产品编号BB-4222-1 BB-4222-2 BB-4222-3 规格250 assays 500 assays 1000 assays Alamar Blue试剂 2.5ml 5ml 10ml 产品简介： 贝博细菌活性检测试剂盒是应用新型的氧化还原指示剂阿尔玛蓝快速高灵敏度检测细菌活性的比色检测产品。 AlamarBlue是一种氧化还原指示剂，能根据代谢活性产生吸光度变化和荧光信号。其在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性，而在还原状态下，转变为呈粉红或红色荧光的还原产物，其吸收峰为530-560nm，而散射峰为590nm。在细菌增殖过程中，体内NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高，处于还原环境。摄入菌体内的染料被这些代谢中间体还原后释放到体外并溶于培养基中，使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。最后用普通分光光度计或荧光光度计进行检测，吸光度和荧光强度与活性细菌数成正比。这种染料经过验证安全无毒，用于细菌活性和细菌增殖的定量分析。AlamarBlue 的无毒特性使细菌可长期暴露于这种染料，因此可随时间进行测量或进行终点测量。由于AlamarBlue对细菌无毒、无害，不影响细菌的合成与分泌等活性，因此可以对同一批细菌的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察，因此有操作简便和几乎不干扰细菌正常代谢的特点。 使用方法： 细菌的活性实验，一般可在96孔细胞培养板中进行，下面以96孔板检测为例， 如果使用其他培养方法，AlamarBlue试剂加入培养液用量的10%即可。 1、每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。具体每孔 所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定。 2、接种的细胞按照实验需要，送入培养箱进行培养。 3、培养结束后，取出AlamarBlue试剂，置室温融化混匀，于洁净工作台内按10微 升/孔加入微孔板中，在培养箱内继续孵育12－24小时，培养液颜色由蓝变为粉 红（如采用荧光分光光度法，只需孵育2－8小时）； 4、在570nm测定吸光度，参考波长600nm。如无此滤光片，可用565 nm 和 610 nm 的滤光片替代。 5、也可用荧光分光光度法检测，激发光波长在530-560 nm之间，发射光波长为 590 nm。检测时间可在结果以荧光强度表示。