天然药物实验指导
实验指导
《中药化学》实验室注意事项
中药化学实验课具有实验周期长、使用有机溶剂品种多，用量较大等特点，所用的药品多数是挥发性、易燃、有腐蚀性、刺激性、实验操作经常在加温，减压下进行，需要使用各种热源和电器，再加上实验室较为拥挤，若操作不慎，易引起着火、触电、中毒、爆炸等事故，为确保实验安全顺利进行，特作如下要求。
一、实验前必须预习实验内容，了解实验原理和操作程序，检查仪器是否完整，装置是否正确，检查合格后方可开始实验。
二、实验室内要保持严肃、安静，不得大声说话打闹，室内严禁吸烟，实验进行时不行擅自离开，必要时委托专人看管。
三、未经教师允许不得擅自使用明火，需使用明火时，实验台周围不得放置易燃有机溶剂，如发生火情应保持镇静，立即报告指导教师同时切断火源，移走易燃品，用湿布闷盖或用灭火器进行灭火，切勿轻易用水，以免扩大火势。
四、实验时要做到整齐、清洁、用过的仪器要及时清洗并收入仪器柜内，保持水、仪器、桌面、地面四洁。
五、回流、蒸馏有机溶剂时，注意检查冷凝水是否通畅，装置不得密闭，接收有机溶剂时不得使用广口仪器，溶剂瓶不得敝口存放。在进行减压操作时，必须使用安全瓶，弄清操作程序，以免造成回水等事故。
六、使用挥发性试剂或喷显色剂时，应在窗口或通风橱内操作，不慎溅在桌面上的化学药品必须立即清除。身体直接接触化学物品后应及时用肥皂及大量水冲洗，如碱性试剂可用1%HAc溶液冲洗，酸性试剂可用3%NaHCO
溶液冲洗。不要用酒精、丙酮等洗涤皮肤上的
3
有机物，以免增加皮肤对有毒物质的吸收，眼睛内溅入化学试剂后，应立即用大量水冲洗，及时到校医室就诊。
七、使用电器设备（如水浴锅、紫外灯、旋转蒸发仪、循环水泵等）一定要按操作规程进行，不得在烘箱内干燥带有易燃性有机溶剂的仪器或物品，仪器发生故障时及时报告指导教师，不得擅自拆卸。
八、每次实验结果后的产品，应妥善包装好，贴好标签，写明级别、产率等，放入干燥器内保存，不得随意丢失。
九、实验结束后，值日生应做好实验室清洁卫生工作，整理好公共仪器、药品，检查水、电、门窗，经教师检查后方可离去。
实验一粉防己中粉防己生物碱的提取、分离和鉴定粉防己为防己科千金藤属植物粉防己的干燥块根。又名汉防己、倒地拱、百木香。具有利水消肿，祛风止痛的功效，用于治疗神经痛、关节炎等症。
粉防己的有效成分是双苄基异喹啉型生物碱，总碱含量约1~2%，其中主要是粉防己碱、去甲粉防己碱及轮环藤酚碱。
一、实验目的要求
1、掌握总生物碱的提取及脂溶性生物碱和水溶性生物碱的分离、纯化方法
2、掌握脂溶性和水溶性生物碱的薄层色谱鉴定方法
3、熟悉生物碱衍生物的制备方法
二、实验原理
利用乙醇提取总生物碱，回收乙醇得总生物碱的浸膏，利用脂溶性生物碱在酸性条件下成盐后，溶于水不溶于极性小的有机溶剂；在碱性条件下成游离生物碱，溶于极性小的有机溶剂不溶于水的特点，反复处理，藉此使脂溶性的粉防己甲及粉防己乙素与水溶性的轮环藤酚碱分开，并去除部分杂质。
去甲粉防己碱粉防己碱N 3HC O
O
OC H 3O R
OC H 3N O
3HC O C H 3R=C H 3R=H
三、实验方法
1、粉防己总碱的提取 称取粉防己粗粉100g ，置于500ml 圆底烧瓶中，加80%~95%乙醇浸没药材（约需300ml ），水浴加热回流1~2小时，过滤，滤液置1000ml 三角烧瓶中。药渣再加乙醇浸没，如上法再提取2次。合并3次乙醇提取液，如有絮状物析出，再过滤1次，澄清溶液浓缩至糖浆状。
2、亲脂性生物碱和亲水性生物碱的分离 将糖浆状总提取物置三角烧瓶中，逐渐加放100ml 左右1%盐酸液，同时充分搅拌，促使生物碱溶解，不溶物则呈树脂状析出。静置，滤出上清液，用1%盐酸少量多次洗涤不溶物，直至洗液对生物碱沉淀试剂反应微弱为止。
合并洗液和酸性溶液，移置于分液漏斗中用氯仿洗3次，每次取用酸水液的1/3量。氯仿洗液合并，用1%盐酸洗1~2次。将洗涤氯仿液的酸液和总酸水液合并，留取8ml 作沉淀反应，其余酸液移入500ml 的三角烧瓶中，滴加浓氨水中和至pH9~10，此时亲脂性的叔胺碱游离出来。如有发热现象，应设法冷却，加氯仿50ml ，再移置500ml 分液漏斗中，振摇萃取，分取氯仿层，上层碱水液再以新鲜氯仿萃取数次，每次用氯仿50ml ，直至氯仿抽提液生物碱反应微弱时为止（试验时取氯仿溶液置表面皿上待溶剂挥发，残留物中加稀盐酸2滴使溶解，再加生物碱沉淀试纸试之，或做薄层板点滴反应）合并氯仿溶液并置分液漏斗中，先以1%NaOH 液洗2次后，再用水洗耳恭听2~3次，碱水洗液和氨性碱水液合并，留待分离水溶性生物碱。氯仿液用无水硫酸钠脱水，回收氯仿至干，抽松，加丙酮约30ml 热溶，必要时抽滤，丙酮液冷后，析晶，抽滤，得脂溶性生物碱（粉防己甲素和乙素的混合物）。
3、粉防己甲素和粉防己乙素的分离称取粗总碱，置于25ml三角烧瓶中，加5~6倍苯冷浸，室温放置30min后，抽滤，苯不溶物主要含乙素，可用95%乙醇溶解，加少量活性炭回流脱色，乙醇液浓缩，析晶，抽滤，得粉防己乙素。苯液回收至干，加20倍量95%乙醇，适量活性炭回流加热30min，抽滤，乙醇液放置，析晶，抽滤，得粉防己甲素，干燥，称重，用丙酮（1：40，W/V）重结晶，（热溶，抽滤）得粉防己甲素精制品，作TLC检查。
Cl固体中和至pH7，置分液漏4、季胺生物碱——轮环藤酚碱的分离纯化将碱水液用NH
4
斗中，用正丁醇提取数次，直至碱水液生物碱反应微弱为止（取数滴碱水液于试管中，用稀HCl酸化后，再加生物碱沉淀试剂试之，或作薄层板点滴反应）。正丁醇液减压浓缩至干，用95%乙醇溶解，滤除不溶物，乙醇液浓缩至小体积，放置，析晶。反复数次，可得轮环藤酚碱精制品，作TLC检查。
5、粉防己生物碱的鉴定
（1）生物碱沉淀反应：取粉防己酸水液分别置小试管中，每份1ml，分别滴加下列各试剂2~3滴，观察有无沉淀及颜色变化。
A、碘化铋钾试剂；
B、硅钨酸；
C、苦味酸试剂（先将酸水液调至中性，再滴加试剂）
（2）薄层色谱：
A、粉防己生物碱：
吸附剂：硅胶-CMC-Na板
展开剂：氯仿-乙醇（10：1）氨饱和；
甲苯-丙酮-甲醇（4：5：1）氨饱和
对照品：粉防己甲素乙醇液
粉防己乙素乙醇液
显色剂：改良碘化铋钾试剂
B、轮环藤酚碱：
吸附剂：硅胶-CMC-Na板
展开剂：甲醇-氨水（7：3）
对照品：轮环藤酚碱水液
显色剂：改良碘化铋钾试剂
6、衍生物的制备
（1）苦味酸盐：取粉防己碱200mg溶于2ml丙酮中，滴加苦味酸的饱和水溶液，即析出黄色沉淀，滴加试剂至沉淀完全，抽滤，收集沉淀，依次以少量水、乙醇、乙醚洗涤，再经乙醇重结晶，可得苦味酸盐，mp241~246℃。
（2）粉防己甲素二碘甲烷盐（汉肌松）的制备：取粉防己甲素200mg，加甲醇10ml溶解，加碘甲烷1ml，回流加热15min，蒸去甲醇，残留物以水或乙醇重结晶，得白色鳞片状结晶，即粉防己甲素二碘甲烷盐（汉肌松），mp216.5℃。
四、操作要点
1、提取总碱时，回收乙醇至稀浸膏即可。过干时，当加入1%盐酸水后，会结成胶状团块，
影响提取效果。
2、滴加浓氨水中和至pH9~10时，若有发热现象，应设法冷却，以免加入的氯仿挥发。
3、去甲粉防己碱虽然也有酚羟基，但不溶于一般浓度的NaOH液，故称之为隐性酚羟基，
液中。
用2%NaOH萃提时，仍留在CHCl
3
4、纯化时，若溶剂量太大，不易析晶，可再蒸去一些溶剂后，放置，以利结晶析出。
五、思考题
1、提取总生物碱的常用方法有哪几种？各有何缺点？
2、粉防己碱和去甲粉防己碱在结构上有哪些异同点？实验中如何利用它们的共性和个
性？
3、什么叫生物碱的假阳性反应？能消除吗？
4、萃取操作的好坏对实验结果有什么影响？怎样防止产生乳化？怎样消除乳化？
为什么有机溶剂必须洗至中性方能浓缩或放置？
实验二大黄中大黄素的提取、分离和鉴定大黄为蓼科多年生草本植物掌叶大黄，药用大黄和唐古物大黄的根茎。具有泻下、健胃、抗菌、清热、解毒、收敛和利胆等作用。此外，还有止血、降低血清胆甾醇的作用。
大黄中含有多种羟基蒽醌类化合物，其中有较少量的游离羟基蒽醌（约为大黄的0.5%左右），它们在植物中主要以苷的形式存在。
一、实验目的和要求
1、掌握PH梯度萃取法的原理和操作技术
2、学习用硅胶柱色谱法分离精制大黄素
3、学习羟基蒽醌类化合物的鉴定方法
二、实验原理
根据大黄中蒽醌类成分酸性强弱不同的特性，以乙醚提取脂溶性成分后，利用碱度递增的碱水液，自乙醚提取液中萃取酸度递减的游离蒽醌类成分，本实验主要分离其大黄素。
1，8-二羟基蒽醌衍生物
大黄酸
芦荟大黄素
大黄素甲醚
大黄素
大黄酚
R1 R2
H C H3
O H C H3
O C H3 C H3
H C H2O H
H C O O H
O O O H
O H
R2R1A B C D E
酸性： E > B > D > C、A
极性： E > D > B > C > A
三、实验方法
1、酸水解取大黄粉10g，加20%硫酸水溶液100ml，在水浴上加热3~4小时，抽滤，滤饼水洗后于70℃左右干燥。
2、总羟基蒽醌苷元的提取滤饼经干燥后，置索氏提取器中，加入乙醚150ml，回流提取3~4小时，得乙醚提取液。
乙醚提取液经薄层色谱检查有大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚和大黄酚。薄层板为硅胶-CMC-Na，展开剂为石油醚（沸程60~90℃）-乙酸乙酯（7：3），近水平或直立展开，在可见光下可看到4个斑点，Rf为0.9的黄色斑点为大黄酚和大黄素甲醚混合物，在此条件下分不开，其余3个斑点，依Rf值由大到小分别为大黄素（橙色斑点）、芦荟大黄素（黄色斑点）、大黄酸（黄色斑点）。
3、pH梯度萃取分离
（1）置乙醚提取液于250ml分液漏斗中，以2.5%碳酸氢钠水溶液120ml分3次萃取，乙醚层经薄层色谱检查（薄层条件同上），知大黄酸己除去。合并3次碳酸氢钠萃取液，酸化，可得大黄酸沉淀。
（2）经2.5%碳酸氢钠水溶液萃取后的乙醚层，以2.5%碳酸钠水溶液120ml分3次萃取，乙醚层经薄层色谱检查，知大黄素己除去。合并3次碳酸钠萃取液，酸化，主要得大黄素沉淀，另含有少量大黄酚、大黄素甲醚和芦荟大黄素等。水洗沉淀物至洗出液呈中性，
低温干燥后作为柱色谱样品。
经2.5%碳酸钠水溶液萃取后的乙醚层，继续用2.5%碳酸钠水溶液120ml分4次萃取，乙醚层经薄层色谱检查，知芦荟大黄素己除去。合并4次碳酸钠萃取液，酸化，得芦荟大黄素沉淀。
（3）经2.5%碳酸钠水溶液萃取后的乙醚层，再以0.5%氢氧化钠水溶液100ml分4次萃取至碱水层无色为止，合并氢氧化钠萃取液，酸化得沉淀，为大黄酚和大黄素甲醚混合物。
4、硅胶柱色谱分离精制大黄素
（1）装柱：取100~200目的硅胶约10g，按干法装柱
（2）加样：将样品溶解于5ml石油醚（沸程60~90℃）-乙酸乙酯（7：3）中，用吸管吸取样品溶液于色谱柱柱床顶端。
（3）洗脱：用石油醚（沸程60~90℃）-乙酸乙酯（7：3）为洗脱剂洗脱，分段收集，每份10ml，用硅胶薄层板跟踪检查（被洗脱的成分先后顺序为：大黄酚和大黄素甲醚、大黄素、芦荟大黄素等）。合并大黄素部分，适当浓缩，放置析晶，过滤，即得纯品大黄素。
5、大黄素的鉴定
（1）在薄层板上用点滴反应检查大黄素对NaOH、MgAc
试液的反应
2
（2）测定大黄素的熔点。
四、操作要点
1、本实验多次使用乙醚，因此需注意安全防火，绝对禁止有明火的情况下使用乙醚。
2、采用梯度pH萃取法分离萃取各游离蒽醌成分时，操作不宜过分剧烈振摇，以免乳化，难以分层。
3、硅胶柱色谱整个操作过程硅胶柱表面应保持一定高度的洗脱剂，不使柱面溶液流干。
4、柱色谱洗脱时流速不应太快，以免柱交换来不及达到平衡，影响分离效果。
5、柱色谱时所用的仪器要干燥。
五、思考题
1、大黄中五种羟基蒽醌化合物的酸性和极性大小应如何排列？为什么？
2、梯度pH萃取法的原理是什么？适用于哪些中药化学成分的分离？
3、试分析薄层色谱图谱中各羟基蒽醌类成分的结构与Rf值的关系。
实验三 槐花米中芦丁的提取、分离和鉴定
槐花米系豆科槐属植物sophora japonica L 的花蕾，自古作为止血药。其中所含主要化学成分为芦丁，亦称芸香苷，药理实验证明芦丁具有减少毛细血管的通透性作用，临床上主要用为防治高血压病的辅助治疗药物。此外，芦丁对于放射线伤害所引起的出血症亦有一定作用。
芦丁广泛存在于植物界，已发现的含芦丁植物至少在70种以上，其中以槐花米和荞麦叶含量较高，可作为提取芦丁的原料。
一、 实验目的和要求
1、以芦丁为实例学习黄酮类化合物的提取分离方法
2、掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷、苷元和糖部分的鉴定方法
3、通过槲皮素的乙酰化反应，要求得到纯品槲皮素五乙酰化物
4、掌握纸色谱和薄层色谱的方法及黄酮类化合物的色谱特点
二、实验原理
1、芦丁可溶于热水，难溶于冷水。其分子结构中具有较多的酚羟基，显弱酸性，在碱中易溶解，而在酸性条件下易析出沉淀。故可采用碱提酸沉法提取芦丁。
2、利用芦丁可被稀酸水解，生成苷元和糖。通过纸色谱和薄层色谱及苷元的乙酰化衍生物进行鉴定和确认。 O O H OH HO OH OH O O
O
OH HO OH
OH O
芦丁芸香糖槲皮素
三、实验方法
1、芦丁的提取 于1000ml 烧杯中加入500ml 蒸馏水，煮沸2~3min 后，称取40g 槐花米（粗粉），投入沸水中，直火加热煮沸约5min ，在搅拌下小心加入石灰乳调至pH8~9，加热微沸30min 后，注意添加水，保持原体积并维持pH8~9，趁热过滤，滤渣再加入200ml 水，加石灰乳调pH8~9，煮10min ，趁热过滤，合并滤液，稍冷（60~70℃），用浓HCl 调至4~5，放置后析出沉淀，抽滤，用水洗3~4次，置空气自然干燥得淡黄色粗制芦丁。
2、芦丁的精制 将芦丁粗品置500ml 烧杯中，加适量（约100ml ）蒸馏水，再用石灰水调至pH8。加热煮沸数分钟，使充分溶解。趁热抽滤，滤液滴加3mol/L HCl 调至pH7，放置
18小时以上，即析出沉淀。减压过滤，用少量蒸馏水洗涤沉淀2~3次。然后用少量乙醇洗1次。抽干，于70~80℃干燥1小时，即得精制芦丁。称重，计算产率，测mp。
3、芦丁的水解取精制芦丁2g，研细，置于500ml圆底烧瓶中，加2%H
2SO
4
溶液150ml，
于直火上加热微沸30min（要补充蒸发掉的水分），析出的黄色沉淀为槲皮素，趁热抽滤，
滤液保留作糖部分的鉴定。沉淀经水洗后再用95%乙醇重结晶1次，得黄色针状结晶，于70~80℃以下干燥，即得精制槲皮素。测mp。
4、糖的纸色谱鉴定取水解母液20ml，用Ba(OH)
2
的细粉（约2.6g）中和至pH7，滤去
生成的BaSO
4
沉淀（可用滑石粉助滤），滤液浓缩至约1ml，供纸色谱点样用。
样品：水解浓缩液
色谱滤纸：新华一号滤纸
对照品：葡萄糖、鼠李糖水溶液
展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5上层）
显色：苯胺-邻苯二甲酸盐试剂喷后105℃烘10min，显棕色和棕红色斑点。
苯胺-邻苯二甲酸的配制：将1.66g苯二甲酸和0.93g的苯胺溶于100ml水饱和的正丁醇中。
5、芦丁、槲皮素的纸色谱和聚酰胺薄层鉴定
样品：自制芦丁、槲皮素的乙醇溶液
色谱滤纸：新华一号滤纸
对照品：芦丁、槲皮素的乙醇溶液
展开剂：（1）正丁醇-乙酸-水（4：1：5上层）
（2）15%乙酸水溶液
显色：（1）可见光下观察及紫外灯下观察
（2）经氨气薰后再观察
（3）喷三氯化铝试剂后再观察
聚酰胺薄层的鉴定，用90%乙醇或乙醇-水（7：3）展开，在紫外灯下观察斑点颜色，或采用纸色谱的显色方法。
6、槲皮素五乙酰化物的制备取槲皮素结晶200mg，置于圆底烧瓶中，加4ml无水吡啶溶解，再加5ml乙酸酐摇匀，接上空气冷凝管，水浴上加热回流30min，放冷。将反应液在搅拌下倾入100ml冰水中，一直搅拌至油滴消失，白色固体沉淀析出为止，抽滤，滤饼用水洗涤，干燥后用95%乙醇重结晶，得针状结晶，测其熔点（文献值为193~195℃）。
四、操作要点
1、提取中加入硼砂，即能调节水溶液的pH，又有与芦丁分子中的邻二酚羟基结合，达到保护芦丁减少氧化的目的。但硼砂价格较贵，工业上用较大量的石灰加少量的硼砂，同样达到提高质量的要求。
2、搅拌下用石灰乳调节pH8~9，既可达到碱溶解芦丁的目的，又可除去槐花米中含有的大量果胶、粘液质、多糖等，使这些成分生成钙盐沉淀不致溶出。但pH不可过高，否则钙离子能与芦丁形成螯合物析出而降低收率。
3、用浓盐酸酸化调pH4~5，pH不宜过低，以免芦丁形成钅羊盐，重新溶解，降低收率。
4、槲皮素五乙酰化衍生物制备中，所有仪器均要干燥。
五、思考题
1、提取芦丁工艺中影响产量与质量的因素是什么？为什么要加硼砂水沸溶液？
2、使用去离子水或蒸馏水的目的？为什么？
3、芦丁水解不完全时将产生什么结果？
4、黄酮类化合物有哪些提取方法？芦丁的提取还可以用什么方法？
5、芦丁和槲皮素用不同展开剂系统展开，将出现什么结果？为什么？
6、芦丁和槲皮素聚酰胺薄层将出现什么结果？为什么？
7、槲皮素乙酰化衍生物的制备应注意什么？
如何证明芦丁分子中只含有葡萄糖和鼠李糖？如何证明苷元、葡萄糖、鼠李糖的连接位置？
实验四薯蓣皂苷元的提取、分离和鉴定
我国薯蓣皂苷元资源极为丰富，薯蓣略的八十多种植物中大多含有薯蓣皂苷，其中可用于生产薯蓣皂苷元的植物原料有穿山龙，盾叶薯蓣，山萆解等，用其根茎提取薯蓣皂苷元。
薯蓣皂苷属于甾体皂苷，经水解后可以得到属于甾体结构的薯蓣皂苷元，是合成甾体激素的重要原料。
一、实验目的和要求
1、掌握苷类的酸催化水解方法
2、掌握甾体皂苷元的提取方法
3、掌握甾体皂元的检识方法
4、掌握索氏提取器的应用
二、已知主要成分的理化性质
穿山龙根中含有多种甾体皂苷，其中薯蓣皂苷含量最高。这些皂苷水解后大多能生成薯蓣皂苷元。
1、薯蓣皂苷
无定形粉末或针状结晶，mp288℃，[α]D-95°。可溶于乙醇、甲醇、醋酸、难溶于乙醚等弱极性有机溶剂，不溶于水。
2、薯蓣皂苷元
白色针状结晶（乙醇），mp204~207℃（丙酮）或202~204，[α]D25-129.3°（氯仿）。
可溶于一般有机溶剂及醋酸中，不溶于水。
三、实验原理
薯蓣皂苷元在植物体内与葡萄糖、鼠李糖结合成薯蓣皂苷，经酸水解生成薯蓣皂苷元和单糖。由于薯蓣皂苷元不溶于水，留存于植物残渣中，所以可用有机溶剂直接从植物原料残渣中连续回流将其提取出来。
四、实验方法
（一）薯蓣皂苷元的提取分离方法
1、苷的酸水解
取穿山龙25g，切成碎片，置500ml圆底烧瓶中，加8%酸水（水-浓硫酸230：20V/V），然后直火加热（石棉网上），回流6小时（开始用小火，以防泡沫冲出）。倒去酸水，加入常水洗涤两次，然后将药渣倒在乳钵内，加固体碳酸钠粉研磨，调pH至中性，常水洗，过滤（用尼龙布），滤渣研碎，低温干燥（不超过80℃），得干燥药渣。
2、薯蓣皂苷元的提取
将上述干燥药渣装入滤纸筒置索氏提取器内，用石油醚（沸程60~90℃）300ml，在水浴上连续回流提取4~6小时，提取液常压回收石油醚至约10~15ml，迅速用吸管转入小锥形瓶中，冷却，析出结晶，抽滤，固体用少量新鲜石油醚洗涤两次，抽干，即得薯蓣皂苷元粗品。干燥，称重，计算得率。
3、精制
将上述粗品用20~30ml 95%乙醇加热溶解（色深时可加1~2%的活性炭脱色），趁热抽滤，滤液放置，析出结晶。滤集结晶，干燥，即得薯蓣皂苷元精品。称重，计算得率，测定熔点
mp204~207℃。
（二）薯蓣中皂苷与皂苷元的鉴定
1、皂苷的鉴别
（1）泡沫试验
取穿山龙的水浸出液2ml，置小试管中，用力振摇1min，如产生多量泡沫，放置10min，泡沫没有显著消失，即表明含有皂苷。
另取试管二支，各加入穿山龙热水浸出液1ml，一管内加入2ml 0.1mol/L氢氧化钠溶液，另一管加入2ml 0.1mol/L盐酸溶液，将两管塞紧用水振摇1min，观察两管出现泡沫的情况。如两管的泡沫高度相近，表明为三萜皂苷，如含碱液管比含酸管的泡沫高过数倍，表明有甾体皂苷。
（2）溶血试验
2、皂苷元的显色反应
（1）硫酸-醋酐试剂
薯蓣皂苷元结晶少许，置白磁板上，加硫酸-醋酐试剂2~3滴，观察颜色由红~紫~兰，放置后变污绿色。
（2）浓硫酸试剂
薯蓣皂苷元结晶少许，置白磁板上，加浓硫酸2滴，观察颜色由红色久置后变污绿色。（3）三氯醋酸试剂
薯蓣皂苷元结晶少许，置干燥试管中，加同量固体三氯醋酸放在60~70℃恒温水浴中加热，数分钟后由红→紫色，示为甾体皂苷。若加热至100℃变色，应为三萜皂苷。
（4）氯仿-浓硫酸试剂
薯蓣皂苷元结晶少许，加适量氯仿溶解，沿管壁加入浓硫酸1ml，观察颜色变化，在氯仿层呈红或蓝色，硫酸层出现绿色荧光。
（5）磷钼酸试剂
薯蓣皂苷元重结晶的乙醇母液点于滤纸片或硅胶薄层板上，点加磷钼酸试剂，略加热，观察颜色变化，并与空白对照。
（6）冰醋酸-乙酰氯试剂
薯蓣苷元结晶少许，置干燥试管中，用冰醋酸溶解，加入乙酰氯数滴及氯化锌数粒，稍加热，观察颜色呈淡红色或紫红色。
3、薄层色谱
吸附剂：硅胶-CMC-Na板
样品：薯蓣皂苷元粗品乙醇重结晶母液
薯蓣皂苷元精品乙醇液
对照品：薯蓣皂苷元标准品乙醇液
展开剂：氯仿-醋酸乙酯（8：2）
显色剂：5%磷钼酸乙醇液，喷雾后加热，显蓝色斑点
五、操作要点
1、原料经酸水解后，应充分洗涤呈中性，以免烘干时炭化。
2、由于使用的石油醚极易挥发和燃烧，故应以水浴加热，水浴温度不宜过高，回流速度不
宜过快，应注意防火。
3、回流前，回收溶剂剂，烧瓶内均要加止爆剂。
4、索氏提取器为实验室中常用的提取仪器，通过溶剂蒸发、冷凝及仪器中的虹吸，便药渣
中的物质每次都是用新鲜溶剂提取，效递率极高，同时可节省溶剂。一般受热易分解或变色的物质或高沸点溶剂提取，本仪器不适用。
5、滤纸筒
滤纸筒高度以超过索氏提取器的虹吸管1~2cm为准。
滤纸筒内径小于索氏提取器的内径。
提取药材滤渣（含皂苷元）的装置是将滤渣倒入滤纸筒，不要散在筒外，其量装入筒后应低于虹吸管。轻轻压实，然后上盖一薄层脱脂棉。
六、思考题
1、本实验应用了哪些主要玻璃仪器？怎样使用这些仪器？
2、使用索氏提取器有什么特点？应注意哪些问题？
3、大规模生产时，可以用什么溶剂代替石油醚？
4、请设计一方法，证明水解液中含有葡萄糖和鼠李糖？
5、薯蓣皂苷元和薯蓣皂苷在理化性质上有哪些不同之处？如何鉴别？
试设计一种穿山龙提取皂苷的方法，并说明提取依据。
(医疗药品)天然药物化学实验指导
天然药物化学实验指导 （供药学药剂专业用） 河北医科大学药学院天然药物化学教研室 2006年3月 前言 天然药物化学是运用现代科学理论与技术研究天然药物中化学成分的一门学科，是药学、药剂、药分、中药学等专业及相关专业本科学生必修的专业课，是国家职业药师(中药学)资格考试必考课程。本课程在有机化学、分析化学、有机化合物波谱学、中药学、生药学等课程的基础上，重点讲授天然药物中化学成分的化学结构、理化性质、提取分离方法、结构鉴定、生理活性、天然药物新药开发等方面的基本原理和实验技能，培养学生具有从事天然药物方面的研究、开发和生产的能力，为我国药学事业的发展输送人才。 天然药物化学实验是天然药物化学课的重要的、必不可少的组成部分。学习的主要目的是通过实验检验在课堂上所学的理论知识，使学生对理论知识的理解更加深入，掌握得更加牢固；通过实验训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练；使学生养成严谨的科学态度和良好的科学作风。
实验教学的重点是加强学生基本操作技能的训练，要求学生掌握以下技能：（一）提取分离方面 1.要求掌握常用的经典方法的原理及操作。其中包括液-固提取法（浸渍、渗漉、回流提取等）、液-液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法、逆流分布法）、重结晶法等。 2.掌握纸色谱、薄层色谱、柱色谱的原理和基本操作。 （二）结构鉴定方面 1.化学方法 ①掌握各类化学成分的一般定性反应在鉴定中的应用； ②掌握重要衍生物的制备方法及其在结构鉴定中的应用； ③了解重要降解反应的原理及应用。 2.光谱方法 了解UV、IR、NMR、MS在天然药物化学成分结构测定中的应用。 目录 实验须知1 实验技能操作规范2 实验一大黄中蒽醌苷元的提取、分离和检识8 实验二芦丁的提取、水解；黄酮类化合物与糖类的鉴别10 实验三苦参生物碱的提取、分离、鉴别和生物碱的检识15 实验四利用纸色谱先导设计法从洋金花中提取分离生物碱19 实验五一叶萩碱的分离和鉴定23
大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定(实验报告)
大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定 一、实验目的 （1）熟悉蒽醌类成分的提取分离方法 （2）掌握pH梯度提取法的原理和操作技术 （3）学习蒽醌类化合物鉴定方法 二、实验器材 材料及试剂：大黄粗粉、浓硫酸、NaHCO3、Na2CO3、NaOH、浓盐酸、乙酸乙酯、石油醚、乙醚、普通滤纸、薄层层析硅胶板（2.5 cm×10 cm）、广泛PH试纸、剪刀、铅笔、尺子、点样毛细管、样品管等。 仪器：500mL圆底烧瓶、球形冷凝管（30cm）、橡皮管、烧杯、滴管、层析缸（广口瓶）、250mL分液漏斗、布氏漏斗、抽滤瓶、水浴锅、集热式磁力搅拌器、磁子、循环水式多用真空泵、铁架台等。 三、实验原理 大黄为蓼科植物,味苦,性寒,具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经等功效。其主要成分为为蒽醌化合物，含量约为3%~5%，大部分与葡萄糖结合苷，游离苷元有大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等。其中，大黄酸具有羧基，酸性最强；大黄素具有β-酚羟基，酸性第二；芦荟大黄素连有羟甲基，酸性第三；大黄素甲醚和和大黄酚的酸性最弱。根据以上化合物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液进行梯度萃取分离。 大黄酸R1=H R2=COOH 大黄素R1=CH3R2=OH 芦荟大黄素R1=CH2OH R2=H 大黄素甲醚R1=CH3R2=OCH3 大黄酚R1=CH3R2=H
四、实验内容 大黄素的提取、分离流程图 大黄粗粉10g 20%H2SO4 150 ml 加热1h, 抽滤、干燥 滤饼 150ml乙醚回流提取1 h 乙醚层 水层（紫红色）乙醚层 HCl 3 大黄酸沉淀（粗品） 水层（红色）乙醚层 HCl 0.25% NaOH 大黄素沉淀（粗品）水层（红色） 芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚沉淀（混合物） 具体操作步骤 1. 游离蒽醌的提取 （1）酸水解：称取大黄粗粉10g，加20%H2SO4水溶液150mL，在水浴上加热1小时，放冷，抽滤，滤饼用NaOH溶液洗至近中性（pH约为6），于70℃干燥后，研碎，置250mL 圆底烧瓶中，加入乙醚150mL回流提取1小时（调45℃，回流即可），得到乙醚提取液。 （2）蒽醌类成分的提取：乙醚提取液经薄层层析检查有大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、
天然药物化学(2016简答题)
1*天然药物化学研究的内容有哪些？ 答：天然药物中各类化学成分的结构特点、理化性质、提取分离与鉴定方法，操作技术及实际应用。 2*如何理解有效成分和无效成分？ 答：有效成分是指天然药物中经药效实验筛选具有生物活性并能代表临床疗效的单体化合物，能用结构式表示，具有一定的物理常数。天然药物中不代表其治疗作用的成分为无效成分。一般认为天然药物中的蛋白质、多糖、淀粉、树脂、叶绿素、纤维素等成分是无效成分或杂质。 3*天然药物有效成分提取方法有几种？采用这些方法提取的依据是什么？ 答：①溶剂提取法：利用溶剂把天然药物中所需要的成分溶解出来，而对其它成分不溶解或少溶解。②水蒸气蒸馏法：利用某些化学成分具有挥发性，能随水蒸气蒸馏而不被破坏的性质。③升华法：利用某些化合物具有升华的性。 4*常用溶剂的亲水性或亲脂性的强弱顺序如何排列？哪些与水混溶？哪些与水不混溶？ 答：石油醚>苯>氯仿>乙醚>乙酸乙酯>正丁醇（与水互不相容）>丙酮>乙醇>甲醇>水（与水相混溶） 5*两相溶剂萃取法是根据什么原理进行？在实际工作中如何选择溶剂？ 答：利用混合物中各成分在两相互不相溶的溶剂中分配系数不同而达到分离的目的。实际工作中，在水提取液中有效成分是亲脂的多选用亲脂性有机溶剂如苯、氯仿、乙醚等进行液‐液萃取；若有效成分是偏于亲水性的则改用弱亲脂性溶剂如乙酸乙酯、正丁醇等，也可采用氯仿或乙醚加适量乙醇或甲醇的混合剂。 6*色谱法的基本原理是什么？ 答：利用混合物中各成分在不同的两相中吸附、分配及其亲和力的差异而达到相互分离的方法。 7*聚酰胺吸附力与哪些因素有关？ 答：①与溶剂有关：一般在水中吸附能力最强，有机溶剂中较弱，碱性溶剂中最弱；②与形成氢键的基团多少有关：分子结构中含酚羟基、羧基、醌或羰基越多，吸附越牢；③与形成氢键的基团位置有关：一般间位＞对位＞邻位；④芳香核、共轭双键越多，吸附越牢；⑤对形成分子内氢键的化合物吸附力减弱。 8*简述苷的分类。 答：据苷键的构型不同分为α-苷、β-苷；依据在植物体内的存在状态不同，可分为原生苷和次生苷；依据苷的结构中单糖数目的不同，可分为单糖苷、双糖苷、三糖苷；依据苷元结构不同，可分为黄酮苷、蒽醌苷、香豆素苷；依据糖链的数目不同，分为单糖链苷、双糖链苷；依据苷的生物活性，分为强心苷、皂苷等。 9*简述苷键酸水解的影响因素。 答：①苷原子不同，水解难以顺序：N-苷>O苷>S苷>C苷②呋喃糖苷较吡喃糖易水解③酮糖苷较醛糖苷易水解④吡喃糖苷中C5取代基越大越难水解。⑤吸点子基的诱导效应，尤其是C2上取代基的吸点子基对质子的竞争吸引，使苷键原子的电子云密度降低，质子化能力下降，水解速度下降⑥芳香族苷因苷元部分有供电子基，水解比脂肪族苷容易。 10*如何用化学方法鉴别：葡萄糖、丹皮苷、丹皮酚。 答：三种样品分别做α-萘酚-浓硫酸反应，不产生紫色环的是丹皮酚。产生紫色环的，再分别做斐林反应，产生砖红色沉淀的是葡萄糖，不反应的是丹皮苷。 11*为何《中华人民共和国药典》规定新采集的大黄必须储存两年以上才可药用？
天然药物学基础习题解答
《天然药物学基础》习题解答 ( 一.名词解释 1 . 过桥——是指黄连根茎的节间表面平滑如茎杆，习称“过桥”。 2. 晶纤维——是指纤维成束，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。 3. 星点-——是指大黄的根茎的韧皮部散在及髓部环列或散在的无限外韧型异型维管束，状如“星点”。 4. 云锦花纹——是指何首乌的皮部有4——11个类圆形异型维管束环列，形成云锦花纹状。 5. 金井玉栏——是指某生药（如板蓝根、桔梗、黄芪）的断面皮部处呈黄白色，木部黄色。 6. 菊花纹——是指某生药（如白芍、甘草、党参、人参等）的断面，形成层环明显，射线放射状排列。 7. 车轮纹——是指某生药（如防己）的断面，形成层环明显，射线粗而稀放射状排列。 8. 盘纹罗——是指某生药（商陆、牛膝）的段面，形成层呈多个同心性环排列。 9. 狮子盘头——是指党参的根头部有多数疣状突起的茎痕，每个茎痕的顶端呈凹下的圆点 状，俗称“狮子盘头。” 10. 蚯蚓头——是指生药防风的根头部有明显密集的环纹，形似蚯蚓头状。 11. 芦头·芦碗·艼·珍珠疙瘩——是分别指人参的根茎部位·根茎上凹陷的茎基痕·根 茎上的不定根·支根上的须根常有不明显的细小疣状突出。 12.铜皮铁骨·剪口·筋条——是指三七的根表面具铜样的灰黄色光泽，体重、质地致密、 质硬不易破碎。芦头称“剪口”，较粗支根称“筋条”。 13. 针眼——是指半夏块茎点端有凹陷的茎痕，周围密布麻点状根痕。习称“针眼”。 14. 怀中抱月——是指川贝的外层鳞叶2枚，大小悬殊，大瓣紧抱小瓣，未抱部分呈新月形。习称“怀中抱月”。 15. 鹦哥嘴·红小辫·肚脐眼·点状环纹——是指天麻的顶端有红棕色至深棕色鹦哥嘴状的芽（冬麻），习称“鹦哥嘴”。或为残留茎基（春麻），习称“红小辫。”另端有自母麻脱落后的圆脐形疤痕，习称“肚脐眼”。天麻表面有细小凹陷的根痕或潜伏芽痕，排列成数轮横环纹。俗称“点状环纹”。 16. 乌金衣·挂甲——是指牛黄的表面黄红色至棕黄色，有的表面挂有一层黑色光亮的薄膜，习称“乌金衣”。取本品少量，加清水调和，涂在指甲上，可使指甲染黄且经久不退，习称“挂甲”。 17. 水波纹（合把）·骨塞·通天眼——是指羚羊角表面有10——16隆起环脊，间距约2cm,用手握之，四指正好嵌入凹处，习称“水波纹”或“合把”。角的基部横截面圆形，直径3——4cm, 内有坚硬质重的角柱，习称“骨塞”。除去骨塞后，角的下半段成空洞，全角成空洞，全角呈半透明，对光透视，上半段中央有一条隐约可辫的细孔道直通角尖，习称“通天眼”。 18. 当门子——是指麝香仁质软、油润、疏松，其中不规则圆球形或颗粒状者，习称“当门子”。 19. 子实体——是指高等真菌在生殖时期形成的具有一定形态和结构，能产生孢子的菌丝体。 20. 子座——是指容纳子实体的菌丝肉座。 二、显微鉴别特征
天然药物化学试验指导试验室注意事项￣
天然药物化学实验指导 目录 实验室注意事项 (1) 实验一芦丁的提取分离与鉴定 (2) 实验二艾叶及丁香中挥发油的提取鉴定 (5) 实验三从红辣椒中分离红色素 (7) 实验四咖啡因的提取与分离 (8) 自选实验薯蓣皂苷元的提取与分离 (10) 自选实验甘草皂苷元的提取与分离 (10) 自主设计实验 (15)
实验室注意事项 天然药物化学实验课具有实验周期长、使用有机溶剂品种多，用量较大等特点，所用的药品多数是挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、刺激性、实验操作经常在加温，减压下进行，需要使用各种热源和电器，再加上实验室较为拥挤，若操作不慎，易引起着火、触电、中毒、爆炸等事故，为确保实验安全顺利进行，特作如下要求。 一、实验前必须预习实验内容，了解实验原理和操作程序，检查仪器是否完整，装置是否正确，检查合格后方可开始实验。 二、实验室内要保持严肃、安静，不得大声说话打闹；室内严禁吸烟，实验进行时不得擅自离开，必要时委托专人看管。 三、未经教师允许不得擅自使用明火，需使用明火时，实验台周围不得放置易燃有机溶剂，如发生火情,应保持镇静，立即报告指导教师，同时切断火源，移走易燃品！用湿布闷盖或用灭火器进行灭火，切勿轻易用水，以免扩大火势。 四、实验时要做到整齐、清洁、用过的仪器要及时清洗并收人仪器柜内，保持水槽、仪器、桌面、地面四洁。 五、回流、蒸馏有机溶剂时，注意检查冷凝水是否通畅，装置不得密闭，接收有机溶剂时不得使用广口仪器，溶剂瓶不得敞口存放。在进行减压操作时，必须使用安全瓶，弄清操作程序，以免造成回水等事故。 六、使用挥发性试剂或喷显色剂时，应在窗口或通风橱内操作，不慎溅在桌面上的化学药品必须立即清除。身体直接接触化学物品后应及时用肥皂及大量水冲洗，如碱性试剂可用l％HAc溶液冲洗，酸性试剂可用3％NaHCO3溶液冲洗。不要用酒精、丙酮等洗涤皮肤上的有机物，以免增加皮肤对有毒物质的吸收，眼睛里溅入化学试剂后，应立即用大量水冲洗，及时到校医室就诊。 七、使用电器设备（如水浴锅、紫外灯、旋转蒸发仪、循环水泵等）一定要按操作规程进行，不得在烘箱内干燥带有易燃性有机溶剂的仪器或物品，仪器发生故障时及时报告指导教师，不得擅自拆卸。 八、每次实验结果后的产品，应妥善包装好，贴好标签，写明级别、产率等，放入干燥器内保存，不得随意丢失。 九、实验结束后，值日生应做好实验室清洁卫生工作，整理好公共仪器、药品，检查水、电、门窗，经教师检查后方可离去。
天然药物学基础期末考试题(含答案)
药学专业天然药物学基础期末考试题 一.名词解释：10分 水飞法挂甲珍珠疙瘩怀中抱月朱砂点 二.填空：20分 1.生药鉴定的依据是-------------和------------------。 2.生药青蒿的抗疟成分为--------------。 3.生药甘草的来源为------------------.--------------------.和--------------干燥根及根茎。 4.生药黄芩的功效为------------------.----------------.和------------------。 5.生药赭石的化学成分主要含有----------------。 6.生药木瓜的道地之乡是-------------------。 7.板蓝根的功效为----------------.--------------------。 8.生药雄黄的化学成分主要含有------------------。 9.枳壳的功效为----------------和--------------------。 10.冬虫夏草的来源为----------------------------------------------------------。 三.选择题：20分 1.生药五味子溶液，滴加甲红指示剂，溶液变为（） A.红色 B.蓝色 C.紫色 D.黄色 2.有“狮子盘头”特征的生药材是（） A.玄参 B.党参 C.丹参 D.高丽参 3.为伞形科生药材的是（） A.附子 B.知母 C.当归 D.麻黄 4.河南沁阳市哪一味药材的的道地之乡（） A.茯苓 B.甘草 C.白芍 D.山药 5.以根部入药的药材是（） A.沉香 B.红花 C.连翘 D.黄连 6.五味子的药效成分为（） A.挥发油 B.香豆素 C.木质素 D.枸橼酸 7.具有理气健脾，燥湿化痰之功效的药材是（） A.牡丹皮 B.陈皮 C.枳壳 D.秦皮 8.具有“马头蛇尾瓦楞身”之称的生药材是（） A.海马 B.贝母 C.防风 D.苍术 9.生药学中对生药雄黄的炮制方法是（） A.水飞法 B.燀法 C.煨法 D.煅法 10.适用于土炒的药材是（） A.苏子 B.白术 C.丹参 D.黄柏 四.简答题：30分 1.生药炮制的目的？ 2.黄连的种类及性状区别？
天然药物化学实验模块化教学设计
天然药物化学实验模块化教学设计摘要：模块化教学是依据教学目的将教学内容划分成不同层次模块，每个教学模块中都包含了特定的教学内容和教学目标，各模块之间相互关联、层层递进，构成一个完整的教学系统。该文探索了天然药物化学实验课程模块化教学设计思路，力求提高教学效果，达到提升学生创新研究能力的目的。 关键词：生药学/教育；教学；天然药物化学；实验教学；模块化设计 “天然药物化学”是药学专业主干课程，具有很强的实践性，因此天然药物化学实验课是教学的重要环节。因此，我校于2017年将天然药物化学实验课设置为一门独立的课程，教学时数与理论课学时数相同，均为72学时，旨在通过实验教学使学生掌握天然药物中所含有效成分的结构类型、理化性质、提取分离、检识和结构鉴定的基本理论、基本知识和基本技能，训练和培养学生操作能力，提高学生动手能力和分析问题解决问题的能力；更重要的是培养学生具备天然药物新药研发的素质，使学生具备科学研究的思维、素质及严谨的科学作风。 1天然药物化学实验课程存在的问题 根据课程特点，我校天然药物化学实验安排了9次实验，每次实验8学时，学生每两周进行一次实验，由于间隔时间太长导致实验缺乏连贯性，学生对实验缺乏整体认识；其次，为强化规范化操作练习，教师提供给学生“菜谱式”操作流程，学生只需照单操作，这种教学模
式导致学生思维僵化，不会解决实际问题，更难以适应企业生产、科学研究等工作的实际需要［1］。教学组对学生发放实验课满意度调查问卷，并通过分析发现：大部分学生对天然药物化学实验课很感兴趣，但认为创新型和设计型实验项目不够，有的学生提出增加一些与毕业设计或就业相关的实验，如天然化妆品、保健品的制备等，可见学生并不满足于被动操作和机械重复，对实验教学提出更高的要求［2］。 2天然药物化学实验模块化教学设计思路 “教学有法，教无定法”。为了使学生成为学习的主体，锻炼和培养学生的综合素质和创新能力，发挥学生的主观能动性，教学组依据天然药物化学实验教学大纲，将教学内容或组合或分解成相应的模块（表1），根据培养目标确定技能目标，明确学生在各个模块中需要掌握的教学内容，并最终实现培养目标。模块一的设计思路：本模块的实验项目多为经典验证性内容，旨在强化学生基本操作技能，如药材的前处理、回流、煎煮、过滤、结晶与重结晶、萃取、薄层色谱与柱色谱等，其目标是培养学生掌握天然药物提取分离有效成分的基本操作技能，并加以熟练运用，提高学生操作技能。模块二的设计思路：由于传统菜单式、验证性实验内容不能很好调动学生的积极性和求知欲，以应用和成果导向为目的的实验项目尤其能够激发学生的主观能动性［3］。例如我校天然药物化学学科多年来围绕新疆特色植物资源，结合课程的研究性和实践性特点，利用充足的研究经费和科研创新，开展了一系列研究，经过多年的积淀和发展，获得了丰硕的科研成果，并挑选成熟的科研成果引入实验教学，如我们对肉苁蓉的研究取得系
天然药物化学实验
天然药物化学实验 Document number【AA80KGB-AA98YT-AAT8CB-2A6UT-A18GG】
实验一天然产物化学成分系统预试验 天然产物中所含的化学成分种类很多，在深入研究之前应首先了解其中含有哪些类型的化学成分，如生物碱、皂苷、黄酮类等等。这就需要进行各类化学成分的系统定性预试验。或根据研究的需要进行单项预试法来初步判断。 一、实验目的与要求 掌握未知成分的天然产物是怎样初步提取分离的，熟悉各主要成分的试管试验、沉淀反应和纸层析、薄层层析的方法并根据试验结果判断含有什么类型的化学成分。 二、基本原理 利用各类成分的颜色反应和沉淀反应，对天然产物的提取液进行检查可以初步判断其中的化学成分。由于提取液大多数颜色较深，影响对颜色变化的观察，可以使用薄层层析（TLC）或纸层析（PC）等方法对天然产物的提取液进行初步分离，再进一步检查。 三、实验内容： 利用不同成分在各种溶剂中的溶解度的不同，一般可采用以下3种溶剂分别提取，试验。 1．水浸液：取中草药粗粉5 g加水60 ml，在50~60℃的水浴上加热1小时，过滤，滤液进行下列试验。
*在试管进行，△在滤纸或硅胶CMC-Na薄层板上进行，下同。 糖鉴定 （1）α-萘酚一硫酸试剂检查还原糖。 ①溶液I：10％α-萘酚乙醇溶液。溶液II：硫酸。取1ml样品的稀乙醇溶液或水溶液，加入溶液I 2滴～3滴，混匀，沿试管壁缓缓加入少量溶液II，二液面交界处产生紫红色环为阳性反应。 （2）斐林试剂检查还原糖。 溶液I：6．93g结晶硫酸铜溶于100ml水中。溶液II：34．6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于100ml水中。取1ml样品热水提取液，加入4滴～5滴用时配制的溶液I、II 等量混合液，在沸水浴中加热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性反应。如检查多糖和苷，取1ml样品水提液，加入1m110% 盐酸溶液，在沸水浴上加热10min，过滤，（成盐去除杂质）再用10％氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查还原糖。 或者直接用高效液相色谱看色谱图。 酚类鉴定试剂 （1）三氯化铁试剂检查酚类化合物、鞣质1％～5％三氯化铁水溶液或乙醇溶液，加盐酸酸化。取1ml样品的乙醇溶液，加入试剂1滴～2滴，显绿、蓝绿或暗紫色为阳性反应。作色谱显色剂用，喷洒后，显绿或兰色斑点为阳性。 2．乙醇提取液 取中草药粗粉5 g，加5~12倍量95%乙醇，在水浴上加热回流提取1小时，过滤，滤液留2 ml作（1）项试验，其余回收乙醇至无醇味，并浓缩成浸膏状，浸膏分为二部分，一部分加少量2% HCL振摇溶过滤。分出酸液，作（2）项式验，附于滤纸上的一部分再以少量乙醇溶解，溶液作（3）项试验；
天然药物化学 学习指南
中国药科大学 天然药物化学学习指南 一、说明--天然药物化学简介及知识模块构成 《天然药物化学》涉及中药及天然产物化学成分的提取、分离、结构鉴定、结构修饰、活性研究。本课程以有机化学、分析化学、波谱解析等学科为基础，是中药学、药学、中药资源与开发专业本科生的核心专业基础课程（4学分，理论68学时、实验68学时）。根据学校的培养目标结合上述专业培养要求，本课程定位于在学生完成基础课学习的前提下，遵循传统中药理论和现代有机化学、分析化学的技术和方法紧密结合的教学理念，从分子水平向学生传授中药及天然药物生物活性的物质基础，用现代科学的观点和方法揭示传统中药的作用机制。 《天然药物化学》课程由四大知识模块构成： 第一部分，天然药物化学成分提取、分离和纯化的方法和技术（4学时）； 第二部分，天然药物化学成分的结构鉴定方法和技术概述（2学时）。该部分的主要内容由本教研室承担的大二下学期《波谱解析》课程（共34学时）进行传授； 第三部分，是本课程的重点内容，即各类成分的提取、分离和结构鉴定（60学时）； 第四部分，天然药物化学研究的新技术、新方法和新进展（2学时）。 课程计划136学时，其中理论教学和实验教学各半，均为68学时。 二、课程的基本要求 依据药学类本、专科的培训目标，本课程要求学生掌握天然药物化学的相关理论、天然有机化合物的物理化学性质，以及生物活性成分的提取、分离、纯化和结构鉴定的基本方法和实验技能，初步具有从事与天然药物的生产和研究相关工作的能力。在工作实践中，能够运用现代科学理论与研究的方法，为继承和发扬祖国的传统药学事业，使我国独特的中药实现现代化打下坚实的理论和实践基础。 根据本课程的四大知识模块，重点讲授主要天然化学成分的结构类型、理化性质、提取、分离、纯化以及检识方法，介绍各主要类型天然化合物的生物活性，主要类型天然化学成分结构测定的物理方法，重点讲授波谱方法在黄酮类化合物结构测定中的应用。同时适当介绍天然药物的构效关系、天然药物化学在中药制剂和分析中应用实例以及主要类型天然化合物研究的最新发展。
天然药物化学实验报告(槲皮素的提取与鉴别)
天然药物化学实验报告 一、实验题目：槐米中槲皮素的提取分离及结构鉴定 二、实验目的: 通过对该选题进行资料查阅、方案设计、试验、结果分析等，让我自己学到一套系统、完整的槐米药效成分芦丁和槲皮素进行基源鉴定、提取、分离和结构鉴定的方法，并通过此项训练，提高自己的动手操作能力及综合运用自己所学知识的能力，培养自己独立思考、分析问题、解决问题的能力。 掌握槐米中槲皮素的提取及提取方法 了解槲皮素的药理作用及应用价值 掌握槲皮素的纯度检测 掌握槲皮素的结构鉴定的方法 三、实验基本原理： 本实验主要利用黄酮类化合物虽然有一定的极性，可溶于水，但却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再将碱水提取液调成酸性，黄酮苷类即可沉淀析出。以槐米为原料，采用煎煮法提取槐米有效成分芦丁，然后酸溶液水解获得槲皮素粗品，乙醇重结晶获得槲皮素精品。 四、实验所用试剂、仪器的型号及生产厂家： （一）实验试剂，见下表： 序号名称数量规格生产厂家 1 95%乙醇溶液25ml 500ml／瓶 AR 天津天力 2 浓H2SO4 12ml 500ml／瓶 AR 天津天力 3 甲醇10ml 500ml／瓶 AR 天津天力 4 无水乙醇43ml 500ml／瓶 AR 天津天力 5 纯净水1500ml 18L/桶万家纯水 6 硅胶GF254 30g 500g／瓶 青岛海浪 薄层层析
（二）实验仪器，见下表： 序号名称数量型号生产厂家 1 电子天平1台IM-B200 2 余姚市纪铭称量校验设备有 限公司 2 圆底烧瓶1个GG-17 1000ml 蜀牛 3 烧杯1个GG-17 1000ml 蜀牛 4 烧杯1个 GG-17 500ml 环球 5 烧杯1个GG-17 250ml Jing Xing 6 量筒1个100ml BOMEX 7 量筒1个10ml 旌湖 8 直型冷凝 管 1个BOMEX 9 75?弯管1个 10 橡胶管2条 11 移液管1个10ml 12 玻璃棒1个直径7mm 长40cm 高邮亚泰 13 尾接管1个BZ24129 HENG TAJ 14 布氏漏斗1个 15 抽滤瓶1个GG-17 500ml 蜀牛 16 滤纸1张 17 玻璃漏斗1个 18 研钵1套 19 胶头滴管1个 20 薄层板10个 21 展开缸1个P-1 100×100 上海信谊仪器 厂 22 紫外光谱 仪 1台 UV-8三用紫外分 析仪 无锡科达仪器 厂 23 熔点测定 仪 1台 X-6显微熔点测定 仪 北京泰克仪器 有限公司 24 真空泵1台SHD-III型循环水 式多用真空泵 保定高新区阳 光科教仪器厂 25 电热套1台98-1-C型数字控 温电热套 天津市泰斯特 仪器有限公司
天然药物化学实验讲义
天然药物化学实验讲义目录 一、芦荟粗多糖的提取及鉴定 二、大黄中蒽醌苷元的提取、分离与鉴别 三、槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离与鉴别 四、八角茴香挥发油的提取及鉴别 五、黄柏中生物碱的提取、分离和鉴别 六、茶叶中咖啡因的提取 前言 《天然药物化学实验》是一门实践性很强的课程，理论教学与实验教学是一个不可分割的完整体系。通过实验课的学习使学生能印证并加深理解课堂讲授的理论知识，掌握由天然药物中提取、分离、精制有效成分，并对其进行鉴别的基本方法和技能，提高学生独立动手、观察分析、解决问题的能力，培养学生严谨的科学态度和良好的科研作风。
实验一芦荟粗多糖的提取及鉴定 一、实验目的 1、水提醇沉法提取多糖的原理和方法 2、掌握高速冷冻离心机、旋转蒸发器等仪器的用法 3、了解芦荟多糖在医药中的应用 二、实验原理 芦荟的多糖类可增强人体对疾病的抵抗力，治愈皮肤炎、慢性肾炎、膀胱炎、支气管炎等慢性病症，抑制、破坏异常细胞的生长的作用，从而达到抗癌目的。植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖，所以本实验采用水提醇沉法提取芦荟中的粗多糖。 三、试剂、材料及仪器 1、试剂：盐酸、无水乙醇、丙酮、乙醚、葡萄糖对照品、苯酚、浓硫酸 2、材料和仪器：芦荟叶、烧杯、移液管、量筒、容量瓶、玻璃棒、旋转蒸发仪、电子天平、真空泵、电热恒温水浴锅、紫外-可见分光光度计、高速离心机、真空冷冻干燥机。 四、实验方法与步骤 1、取芦荟鲜叶50g，洗净，去掉叶尖和叶底，在蒸馏水水中浸泡0.5h,已除去由表面滲出的黄色液体。然后切去表皮，将内层凝胶（匀浆后）置于烧杯中，加入三倍蒸馏水，置于55℃恒温水浴锅中加热浸提4h。 2、浸提液离心分离（2500r/min，5min）并过滤（直接6层纱布过滤），将所得液汁减压浓缩（至30ml），用6mol/L的盐酸调pH值3.2左右，向经过调酸处理的芦荟凝胶浓缩汁中缓慢加入6倍量的95％乙醇，边加边搅拌大约需要15～30min，室温下静置2h，离心分离(2500r/min，7min)得多糖沉淀。依次用乙醇、丙酮和乙醚洗涤，然后真空干燥（通风橱干燥），最终得到的沉淀即为芦荟多糖粗品。 3、芦荟多糖的鉴定 对芦荟多糖的鉴定利用改进的苯酚一硫酸法。苯嘞一硫酸试剂能与芦荟多糖中的己糖起显色反应，在一定波长下其吸光度的变化与多糖含量呈线性关系。采用苯酚一硫酸显色法鉴定芦荟多糖，芦荟中的多糖在硫酸的作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，然后和苯酚缩合成有色化合物共轭酚在490nm处有最大波长，由此可以鉴定出芦荟中的多糖(图1)。
中药化学实验教学大纲
中药化学实验教学大纲 一、实验课程名称 中药化学 二、课程编码 1002371 三、课程性质 必修课 四、学时学分 课程总学时：104 总学分：6.5 实验学时：44 五、适用专业 中药学专业 六、本实验课的配套教材、讲义与指导书 天然药化教研室编. 天然药物化学实验讲义. 七、实验课的任务、性质与目的 中药化学是一门实践性很强的学科，中药化学实验是中药化学课程的重要组成部分，学生必须在学好理论知识的同时高度重视实验课，通过实验课的学习使学生能印证并加深理解课堂讲授的理论知识，掌握由中药中提取、分离、精制有效成分，并对其进行鉴别的基本方法和技能，提高学生独立动手、观察分析、解决问题的能力，培养学生严谨的科学态度和良好的科研作风。 八、实验课的基本理论 1. 掌握各类主要中药化学成分(如生物碱、糖苷类、黄酮、蒽醌、苯丙素、萜类、强心苷、皂苷等)的基本结构类型、结构特征；了解各类主要化学成分中的重要中药； 熟悉各类主要化学成分中的重要生物活性成分。 2. 掌握各类主要化学成分的物理化学性质，理化性质与化学成分分子结构之间的相 互关系；熟悉不同的理化性质在提取方法的设计和化学结构鉴定中的重要作用。
3. 掌握各类生物活性成分常用的提取分离方法的原理和技术；了解提取分离方法和 处理条件对化学成分结构的影响及后生产物形成的可能性。 4. 了解各类主要化学成分的波谱特征；了解化学成分结构研究中典型的降解反应及衍生物的制备；掌握各主要类型化学成分的特征定性反应、化学结构鉴定研究的步骤和采取的主要方法。 九、实验方式与基本要求 每次实验课以小组进行教学：每组24人，由1位教师指导进行实验操作或课堂讨论。对中药化学实验中重要的操作技能和方法采取首先观看教学录像或操作动画，同时指导教师详细讲解每一步的操作方法和原理，然后再由学生自己动手操作，老师点评。 十、考核方式与评分方式 根据平时实验成绩和实验考试综合评定。平时实验70%，实验考试30%。
叶绿素的提取实验报告
一．实验目地 、学习从植物中提取色素地方法. 、学习柱色谱(层析)地原理及其操作方法. 、掌握天然药物化学实验报告地一般写法. 二．实验原理 、绿色植物叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素.各种色素能溶解在有机溶剂（无水乙醇等）中形成溶液，使色素从生物组织中脱离出来.文档来自于网络搜索 、柱色谱是通过色谱柱来实现分离地.在色谱柱内装有固体吸附剂(固定相)如氧化铝或硅胶.液体样品从柱顶加入，当液体流经吸附剂时，由于吸附剂表面对液体中各组分吸附能力不同而按一定地顺序吸附.然后从柱顶加入洗脱剂(流动相)，样品中地各组分随洗脱剂按一定地顺序从色谱柱下端流出，根据不同颜色分段收集.吸附剂，常用吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁等.吸附剂对化合物地吸附能力与分子地极性有关，极性越强，吸附能力越大，分子中含有极性较大地基团，其吸附能力也越强.溶剂，溶剂分为溶解样品地溶剂和洗脱剂.选择溶剂时还要考虑到被分离物各组分地极性和溶解度.通常是先将要分离地样品溶于非极性溶剂中，从柱顶加入柱中.然后用稍大极性地溶剂使各组分在柱中形成若干谱带.再用极性更大地溶剂洗脱被吸附地物质.为了提高洗脱效果，有时也使用混合溶剂.在本实验中色素成分在不同比例混合洗脱剂地作用下可以分离出来.文档来自于网络搜索 三．实验仪器及试剂 仪器：烧杯、量筒、色谱柱、分液漏斗、玻璃棒、干燥地锥形瓶、滤纸、旋转蒸发仪、酸式滴定管、布氏漏斗、研钵、胶头滴管、剪刀、天平文档来自于网络搜索 试剂：新鲜植物叶、中性氧化铝、甲醇( ％，分析纯) 、乙醇、石油醚( ～％) 、丙酮、无水硫酸钠、正丁醇、新鲜植物叶、文档来自于网络搜索 四．实验内容 . 绿叶色素地提取 把新鲜绿叶洗净晾干或用滤纸吸干，称取绿叶，剪碎后放入研钵，再加入乙醇.研磨后用布氏漏斗抽滤，弃去滤渣.文档来自于网络搜索 将滤液放回研钵，每次用（体积比）地石油醚甲醇混合液萃取两次，每次需加以研磨并且抽滤.把两次滤液合并，转入分液漏斗中.用水洗涤两次，弃去水甲醇层, 洗涤时要轻轻旋荡，以防止产生乳化.石油醚层转入干燥地锥形瓶中用无水硫酸钠干燥.干燥后地液体在旋转蒸发仪上蒸除石油醚至体积约左右.文档来自于网络搜索 .柱色谱分离色素 取一支干净地酸式滴定管，向柱内加入石油醚至柱高约处.再缓慢加入氧化铝，并打开活塞，控制流出速度约为滴，并保持液面不低于固定相.打开下端活塞，放出溶剂，直到氧化铝表面溶剂剩下－高时关上活塞.注意，在任何情况下，氧化铝表面不得露出液面.文档来自于网络搜索 色素浓溶液用滴管小心加到色谱柱顶部，并要旋转加入.加完后打开下部活塞，让液面下降到柱面以下左右关闭活塞.旋转加入数滴石油醚，重新打开活塞使液面下降，重复几次使有色物质全部进入柱体内，待色素全部进入柱体后，观察并记录下此时实验地现象.在柱顶小心加洗脱剂—石油醚丙酮溶液（体积比）.打开活塞，让洗脱剂逐滴放出，层析即开始进行，用试管收集.当第一个有色成分即将滴出时，取另一试管收集，得橙黄色溶液，它就是胡萝卜素.用石油醚丙酮（体积比）作洗脱剂，分出第二个黄色带，它是叶黄素（）.再用丁醇乙醇水（体积比）洗脱叶绿素（蓝绿色）和叶绿素（黄绿色）.文档来自于网络搜索
《天然药物学基础》习题解答39页word
《天然药物学基础》习题解答 (2010.5.5——） 一.名词解释 1 . 过桥——是指黄连根茎的节间表面平滑如茎杆，习称“过桥”。 2. 晶纤维——是指纤维成束，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。 3. 星点-——是指大黄的根茎的韧皮部散在及髓部环列或散在的无限外韧型异型维管束，状如“星点”。 4. 云锦花纹——是指何首乌的皮部有4——11个类圆形异型维管束环列，形成云锦花纹状。 5. 金井玉栏——是指某生药（如板蓝根、桔梗、黄芪）的断面皮部处呈黄白色，木部黄色。 6. 菊花纹——是指某生药（如白芍、甘草、党参、人参等）的断面，形成层环明显，射线放射状排列。 7. 车轮纹——是指某生药（如防己）的断面，形成层环明显，射线粗而稀放射状排列。 8. 盘纹罗——是指某生药（商陆、牛膝）的段面，形成层呈多个同心性环排列。 9. 狮子盘头——是指党参的根头部有多数疣状突起的茎痕，每个茎痕的顶端呈凹下的圆点 状，俗称“狮子盘头。” 10. 蚯蚓头——是指生药防风的根头部有明显密集的环纹，形似蚯蚓头状。
11. 芦头·芦碗·艼·珍珠疙瘩——是分别指人参的根茎部位·根茎上凹陷的茎基痕·根 茎上的不定根·支根上的须根常有不明显的细小疣状突出。 12.铜皮铁骨·剪口·筋条——是指三七的根表面具铜样的灰黄色光泽，体重、质地致密、 质硬不易破碎。芦头称“剪口”，较粗支根称“筋条”。 13. 针眼——是指半夏块茎点端有凹陷的茎痕，周围密布麻点状根痕。习称“针眼”。 14. 怀中抱月——是指川贝的外层鳞叶2枚，大小悬殊，大瓣紧抱小瓣，未抱部分呈新月形。习称“怀中抱月”。 15. 鹦哥嘴·红小辫·肚脐眼·点状环纹——是指天麻的顶端有红棕色至深棕色鹦哥嘴状的芽（冬麻），习称“鹦哥嘴”。或为残留茎基（春麻），习称“红小辫。”另端有自母麻脱落后的圆脐形疤痕，习称“肚脐眼”。天麻表面有细小凹陷的根痕或潜伏芽痕，排列成数轮横环纹。俗称“点状环纹”。 16. 乌金衣·挂甲——是指牛黄的表面黄红色至棕黄色，有的表面挂有一层黑色光亮的薄膜，习称“乌金衣”。取本品少量，加清水调和，涂在指甲上，可使指甲染黄且经久不退，习称“挂甲”。 17. 水波纹（合把）·骨塞·通天眼——是指羚羊角表面有10——16隆起环脊，间距约2cm,用手握之，四指正好嵌入凹处，习称“水波纹”或“合把”。角的基部横截面圆形，直径3——4cm, 内有坚硬质重的角柱，习称“骨塞”。除去骨塞后，角的下半段成空洞，全角成空洞，全角呈半透明，
天然药物化学实验指导(临床药学)
天然药物化学实验指导 药化教研室 天然药物化学实验指导 一．说明 天然药物化学是一门实验学科，实验教学占重要地位，通过实验要达到以下目的。 1．能检验学生在课堂上所学的理论知识。使学生对理论知识的理解更加深入，掌握的更加牢固。 2．训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作和实际工作的基本训练。 3．使学生养成严谨的科学态度和良好的科学作风。 实验中，重点是加强对学生基本技能的训练。 二．实验须知 1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。若发生事故应立即采取措施并报告指导老师。 2．实验前做好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法。安排的实验计划，争取准时结束，实验过程中应养成及时记录的习惯，凡是观察到的现象和结果及有关数据，应随时如实地记录。实验完毕，要认真总结，写好实验报告，实验所得的提纯物要包好，贴上标签，交给老师。 3．实验室内应保持安静，不得大声喧嚷，不许抽烟。进入实验室必须穿工作服，实验过程中，不许随便离开。 4．实验台前应保持整洁，与实验无关的物品不得放在台前。实验中废弃的固体物，要丢入废物桶内。 5．爱护仪器，节约药品，仪器损坏后应填写报损单，注明原因，由指导教师按规定处理。 6．实验过程中要节约用水、用电。 7．每次实验结束后，值日生应将实验室打扫干净，倾倒废物桶，关好水、电、门窗，方可离去。 实验一虎杖蒽醌类成分及白黎芦醇苷的提制和鉴定 虎杖系蓼科蓼属植物polyganum cuspidetum siebet zucc.（即Reynoutrin japonica Houobluyn）的根茎。又名阴阳莲。民间用于消炎、杀菌、利尿、通经和镇痛。近年来用于烫伤、止血、消结石和降血脂均有疗效。虎杖根茎中含有大量的蒽醌类成分和二苯乙烯类成分。后者具有降血脂的作用。 一、部分已知成分的物理性质 1．大黄酚（chrysophanol） O HO OH CH3 O
天然药物学基础期末试卷文本
一. 单选（1分/题） 1.冬虫夏草的入药部位是 A.子实体 B.虫体 C.菌核 D.子座 E.虫体与子座的复合体 2.来源为毛茛科植物三角叶黄连的干燥根茎习称 A.味连 B.鸡爪连 C.雅连 D.野连 E.云连 3.石膏的主要化学成分是 A.碳酸钙 B.二水硫酸钙 C.硫酸钠 D.碳酸锌 E.四氧化三铁 4.附子所含主要成分为 A.生物碱类 B.挥发油类 C.蒽醌类 D.黄酮类 E.香豆精类 5.川芎的命名是根据 A.原植物形态 B.产地 C.药用部位 D.性状 E.功能 6.益母草的命名是根据 A.生长特性 B. 性状 C.药用部位 D.功能 E.原植物形态 7.具有“挂甲”现象的生药是 A.鹿茸 B.牛黄 C.羚羊角 D.阿胶 E.麝香 8.树皮类生药的一般采收期是 A.春季 B.夏季 C.秋季 D.秋后春前 E.春夏之交 9.茎木类生药一般的采收期是 A.立秋后 B.春夏之交 C.秋后春前 D.秋冬两季 E.春夏两季 10.显微鉴定生药时，为了使细胞.组织能观察清楚，常用的透化剂是 A.甘油醋酸试液 B.乙醇 C.稀甘油 D.水合氯醛 E.蒸馏水 11.下列哪项不属于天然药物范围 A.草药 B.生物制品 C.生药 D.中药 E.民族药 12.茯苓的入药部位是 A.菌核 B.子座 C.子实体 D.菌丝 E.菌落 13.麻黄的入药部位是 A.全草 B.草质茎 C.地上部分 D.地上茎 E.带根全草 14.新鲜断面或粉末或稀乙醇浸出液点于滤纸上，在紫外光下观察可见棕色荧光的是 A.黄连 B.大黄 C.茯苓 D.冬虫夏草 E.人参 15.完全按自然属性分类的是 A.本草纲目 B.新修本草 C.证类本草 D.本草经集注 E.开宝本草 16.现知最早的本草著作为 A.神农本草经 B.新修本草 C.本草经集注 D.证类本草 E.本草纲目 17.根和根茎类生药的一般采收期是 A.春夏之交 B.秋后春前 C.夏季 D.春季 E.秋季 18.具有“水波纹”的生药是 A.阿胶 B.麝香 C.鹿角 D.犀牛角 E.羚羊角
天然药物化学合集2018
天然药物化学 实验指导 循环使用 请勿带走 目录 实验一槐花M中芦丁的提取
实验二芦丁水解液的纸色谱鉴定 实验三大黄中大黄素的提取 实验四大黄中大黄素的柱色谱提纯 实验五苦参生物碱的薄层鉴定 实验六茶叶中咖啡因的提取 实验一槐花M中芦丁的提取 芦丁 芦丁是由槲皮素