眼针对IBS模型大鼠结肠组织5_HT含量及转化率的影响_宋士一

·针灸与经络·

眼针对IBS 模型大鼠结肠组织5－HT 含量及转化率的影响

宋士一，王德山，王艳杰，李

丹，李任峰

（辽宁中医药大学基础医学院，辽宁沈阳110032）

摘要：目的：研究肠易激综合征（Irritable bowel syndrome ，

IBS ）模型大鼠结肠组织5－羟色胺（5－hydroxytryptamine ，5－HT ）含量、5－HT 转化率以及眼针治疗的影响。方法：实验动物分成对照组、IBS 模型组、眼针组，采用束缚刺激与应激刺激相结合的方法建立IBS 动物模型并进行眼针治疗。各组采用ELISA 法检测结肠组织5－HT 和5－羟吲哚乙酸（5－hydroxyindoleacetic acid ，5－HIAA ）的表达，采用RT －PCR 法检测结肠组织5－HT 重摄取转运体（serotonin reuptake transporter ，SERT ）、色氨酸羟化酶1（Tryptophan hydroxylase1，TPH1）的mRNA 表达。结果：与对照组比较，IBS 模型组5－HT 、5－HIAA 水平显著升高，5－HT 转化率也显著升高，SERT mRNA 表达下调而TPH1mRNA 表达上调；与IBS 模型组

比较，眼针组5－HT 和5－HIAA 水平明显下降，

5－HT 转化率显著降低，SERT mRNA 表达上调而TPH1mRNA 表达下调。结论：5－HT 降解与合成分泌的不相匹配可能是IBS 模型大鼠5－HT 水平升高的重要原因，眼针治疗可有效改善IBS 大鼠5－HT 代谢，使5－HT 恢复至正常水平。

关键词：肠易激综合征；5－羟色胺；5－羟吲哚乙酸；眼针

中图分类号：R245文献标识码：A 文章编号：1000－1719（2010）11－2222－03

Effects of Ocular Acupuncture Therapy on Colonic 5－HT Content

and Percent Conversion in the Rat with Irritable Bowel Syndrome

SONG Shi-yi ，WANG De-shan ，WANG Yan-jie ，LI Dan ，LI Ren-feng

（College of Basic Medicine ，Liaoning University of Traditional Chinese Medicine ，Shenyang 110032，Liaoning ，China ）Abstract ：Objective ：To investigate colonic 5－HT content and percent conversion in the rat with IBS and effects of ocular ac-upuncture therapy （OAT ）．Methods ：Animals were classified into control 、IBS model and OAT groups．Rat model of IBS was estab-lished by method of stress and combining bound ，and OAT was given．Colonic 5－HT and 5－HIAA of each group were examined by ELISA．SERTmRNA and TPH1mRNA were examined by RT －PCR．Results ：Compared with those in control ，the levels of 5－HT and 5－HIAA increased ，percent conversion of 5－HT increased too ，expression of SERTmRNA decreased and TPH1mRNA expression increased in IBS model．Compared with those in IBS model ，the levels of 5－HT and 5－HIAA and percent conversion

of 5－HT decreased ，

expression of SERTmRNA increased and TPH1mRNA expression decreased in OAT．Conclusion ：The differ-ence of 5－HT between anabolic metabolism and catabolism in IBS model suggestes that the disharmony is involved in the patho-genesis of IBS．OAT can correct 5－HT metabolism effectively．

Key words ：irritable bowel syndrome ；5－hydroxytryptamine ；tryptophan hydroxylase1；serotonin reuptake transporter ；ocular acupuncture therapy

收稿日期：2010－04－22

基金项目：国家重点基础研究发展计划（973计划）资助项目

（2007CB512702）

作者简介：宋士一（1965－），男，辽宁沈阳人，副教授，博士研究生，研究

方向：中医药对消化系统神经内分泌功能影响的机制研究。

通讯作者：王德山（1951－），男，教授，博士研究生导师，

E －mail ：wwddss5768@sina．com

肠易激综合征是以腹痛、腹部不适、大便性状和排

便习惯改变为其特征的，

流行病学调查显示健康人群中的10% 20%患有此病［1］

，而IBS 的病理生理过程中都发现有5－HT 的参与。本研究旨在通过观察IBS

模型大鼠结肠组织5－HT 含量、

5－HT 转化率以及眼针治疗的影响，来进一步研究眼针治疗IBS 的机制。1材料与方法1.1

实验动物

选用健康SPF 级Wistar 雄性大鼠，

11周龄，体重（240?20）g ，北京中医药大学动物实验中心提供。大鼠饲养适应3日后进行实验，自由摄食及饮水。饲养期间每日8：00—16：00时给予恒定灯光照明。1.2

分组与造模

采用随机数字法分成：对照组、

IBS 模型组、眼针组，每组10只。按文献方法［2］

进行改良，

IBS 模型组、眼针组每日放入自制束缚性鼠笼（直径

5cm 长度20cm ，钢丝网制）1h 进行束缚刺激，并每日依次交替进行一项下列应激刺激：①禁水24h ，②置于

温箱40?，5min ，③电击刺激30V ，电击5s 间歇5s 共120s ，④冷水游泳14?，5min ，⑤禁食24h ，⑥夹尾180s ；共循环3次计18日造模结束。对照组无处理。

1.3眼针处理眼针组在IBS 大鼠造模成功后第2天开始，取下焦区、大肠区、肝区、脾区针刺，定位参照人体取穴方法；用31号13mm 毫针，于大鼠眶周2mm

处平刺，进针3mm，留针20min，留针期间捻转行针3次，每次1min，每12h针刺1次，针刺7天。

1.4标本采集标本采集前24h禁食，各组大鼠水合氯醛麻醉，开腹在距肛门上10cm处取远端结肠，肠段长约2cm，液氮冻存后－80?保存。

1.5主要试剂和仪器组织5－HT、5－HIAA的ELISA试剂盒（美国ADL），2010型anthos酶标仪、an-thos全自动酶标洗板机，Rabbit-anti-rat SERT抗体、Rabbit-anti-rat TPH1抗体（美国Santa Cruz）；mouse-an-ti-ratβ－actin抗体（美国Abcam）；小鼠及兔的二抗（美国KPL）；Trizol试剂（美国Invitrogen）；SDS－PAGE仪（美国BIO－RAD）；DYCZ－40B型电泳转移槽（北京市六一厂）；图像分析系统（美国UVP）。引物由大连宝生物工程合成，引物设计参照文献及核苷酸序列数据库：

SERT F1GAGTTCTACTTGCGCCATGTC R1 GCTAGCAAAAGCCAGGAGAA360bp

TPH1F1GAAAATCTTCCAGGAGAACCAC R1 TCTTTGAAGCCAGGATGGTC309bp

BETA ACTIN F1CCTAGGCACCAGGGTGTG R1 GATGGCATGAGGGAGCG414bp

1.6ELISA法测定5－HT、5－HIAA水平各组结肠组织块用冷盐水洗净，滤纸吸干，按1?9加入生理盐水制备组织匀浆，离心取上清。分别按照ELISA试剂盒操作步骤进行，应用全自动酶标仪在450nm处测定OD值，采用CurveExpert1.3进行标准曲线的绘制，并计算对应的浓度值。

1.7RT－PCR法测定SERTmRNA、TPH1mRNA表达

参照说明书用Trizol试剂从大鼠结肠组织抽提总RNA，空气干燥后，溶解于无RNase水中，－80?保存备用。转成cDNA时取上述RNA溶液稀释，测定吸光度计算RNA浓度。在25μL逆转录体系中，加入总RNA1μg，以逆转录反应液1.0μL作为模板，加入上下游引物各25pmol，在Gene Cycler中进行PCR扩增，β－actin为内参照。首先94?预变性3min，以后94?变性45s→（SERTmRNA）58?或（TPH1mRNA）56.8?退火45s→72?延伸45s，共35个循环，72?再延伸7min终止反应，4?保存。取6μL PCR产物和标准分子Marker ladder加入20g/L琼脂糖凝胶内，80V电泳40min，凝胶置凝胶成像及分析系统拍照，密度扫描，然后用其表达量与对应的β－actin表达量的比值进行比较分析。

1.8统计处理实验数据采用均数?标准差（珋

x?s）表示，采用SPSS12.0软件，多组间比较采用单因素方差分析，P＜0.05为差异显著。

2结果

实验过程中动物无死亡。实验动物的一般状态观察结果：与对照组比较，IBS模型大鼠出现易怒好斗、毛色晦暗、食欲下降等表现，稀便状态持续存在，慢性腹泻形成，依据成模标准表明造模成功［2］。经过眼针治疗后大鼠一般状态明显改善，大便性状和排便次数逐渐恢复正常。

2.1眼针对结肠5－HT含量及5－HT转化率（5－HIAA/5－HT百分率）的影响

表1眼针对结肠5－HT含量及5－HT转化率的影响（n=10，珋x?s）

组别5－HT（ug/mg）5－HIAA（ug/mg）5－HT转化率（%）对照组9．65?2．361．09?0．3111．30?2．16

IBS模型组18．24?2．40*3．97?0．85*20．63?3．58*

眼针组13．04?1．13＊＊1．66?0．47＊＊12．73?2．85＊＊

注：与对照组比较：*P＜0.05，与模型组比较：＊＊P＜0.05

由表1可见与对照组比较，IBS模型组5－HT、5－HIAA水平显著升高（P＜0.05），5－HT转化率显著升高（P＜0.05）；与IBS模型组比较，眼针组5－HT、5－HIAA水平及5－HT转化率显著降低（P＜0.05）。

2.2眼针对结肠SERTmRNA、TPH1mRNA表达水平的影响由图1、图2、表2可见，在β－actin扩增效率大致相同的情况下，与对照组比较，IBS模型组SERT-mRNA表达下调（P＜0.05），TPH1mRNA表达上调（P ＜0.05）；而与IBS模型组比较，眼针组SERTmRNA表达上调（P＜0.05），TPH1mRNA表达下调（P＜0.05）

。

图1眼针对结肠SERTmRNA

表达的影响

图2眼针对结肠TPH1mRNA表达的影响

表2眼针对结肠SERTmRNA TPH1mRNA

相对表达量的影响（珋x?s，n=10）

组别SERTmRNA/β－actin TPH1mRNA/β－actin

对照组1．013?0．2250．052?0．015

IBS模型组0．663?0．144*0．133?0．034*

眼针组0．952?0．178＊＊0．068?0．017＊＊

注：*与正常组比较，P＜0.05；＊＊与IBS模型组比较P＜0.05。3讨论

体内大约有90%的5－HT是在胃肠道EC细胞内合成的。TPH1是5－HT合成的限速酶，在其作用下色氨酸首先生成5－羟色氨酸，再进一步生成5－HT，TPH1主要在胃肠道EC细胞内表达。EC细胞是体内最主要的5－HT合成细胞，其合成和储存5－HT，并且在生理或病理刺激下释放5－HT［3－4］。当前研究大多表明，IBS患者胃肠道黏膜EC细胞数目增多，其释放的大量5－HT使肠黏膜及血液循环中5－HT含量升高。释放的5－HT作用于胃肠道黏膜特异的5－HT受体而发挥生理作用，然后立即被SERT从细胞外重新摄取入胞内进行降解，因为胞外没有分解5－HT的酶，所以对5－HT信号的终止反应必须通过重摄取来进行，摄入的5－HT一部分进入囊泡储存和

再利用，另一部分通过单胺氧化酶等将其分解成5－HIAA［5－6］随尿排出，5－HT分解的代谢完全在细胞内进行。

本实验结果表明，与对照组比较，IBS模型大鼠结肠5－HT水平显著升高，TPH1mRNA表达上调，结合本室前期工作发现IBS大鼠结肠EC细胞数量增加，免疫组化染色加深，提示分泌5－HT的EC细胞功能活跃，EC细胞5－HT高水平合成分泌可能是IBS大鼠5－HT水平升高的重要原因之一。

实验结果还表明，IBS模型组SERTmRNA表达水平比对照组显著降低，提示IBS模型大鼠结肠重摄取5－HT的水平下降，这使得大量的5－HT停留在结肠细胞外，直接导致了结肠局部5－HT水平升高；还因为重摄取进入胞内的5－HT量下降，间接地使胞内的5－HT分解代谢酶系不能得以有效地发挥作用；进一步提示尽管IBS模型组5－HT转化率也显著升高，但5－HT分解代谢水平仍然不足与高水平的5－HT合成代谢和分泌相匹配，这可能是IBS模型大鼠5－HT

收稿日期：2010－03－08

作者简介：梁佳（1983－），女，山西人，博士研究生，研究方向：影响针灸疗效的相关因素。

通讯作者：邬继红（1964－），女，副教授，硕士生导师，E－mail：wujihong @sohu．com。水平升高的重要原因。

眼针治疗后结肠5－HT含量和5－HT转化率显著降低、SERTmRNA表达上调，TPH1mRNA表达下调，提示眼针治疗降低5－HT合成速度，加快重摄取速度，进而降低了5－HT水平；另一方面通过增加进入胞内5－HT量，利于5－HT的降解代谢，两者都有助于5－HT水平恢复到正常水平，眼针治疗通过调节结肠平滑肌的兴奋性而收到了治疗效果。

参考文献

［1］Heateon KW，O'Donnell LD，Braddon FE，et al．Symptoms of irritable bowel syndrome in a British urban community：consulters and noncon-

sulters［J］．Gastroenterology，1992，102：196221967．

［2］Katz R，Roth K，Carroll B．Acute and chronic stress effects on open field activity in the rat：Implications for a model of depression［J］．

Neurosci Biobehav Rev，1981，5：247．

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［4］Grider JR，Kuemmerle JF，Jin JG．5－HT released by mucosal stimuli initiates peristalsis by activating S－HT4/5－HTlp receptors on senso-

ry CGRP neurons［J］．Am J Physiol，1996，270：6778－82．

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science，1996，16（7）：2352－2364．

［6］Mandela P，Ordway GA．The norepinephrine transporter and its regula-tion［J］．Journal of neurochemistry，2006，97：310－333．

电针及电针配合耳穴贴压治疗

单纯性肥胖症的临床疗效对比观察

梁佳1，邬继红1，吕海波2，韩丽1

（1．北京中医药大学，北京100029；2．北京市海淀医院，北京100080）

摘要：目的：探讨比较电针及电针配合耳穴贴压两种疗法对单纯性肥胖症的临床疗效。方法：选取60例女性单纯性肥胖患者，随机分为电针组和电针配合耳穴贴压组两组，每组30例，分别用电针疗法和电针配合耳穴贴压疗法进行治疗。观察治疗前后体重指数、体脂百分比、腰围、臀围的变化，并评价减肥疗效。结果：60例患者治疗前后的体重指数、体脂百分比、腰围、臀围分值均显著下降，有极显著性差异（P＜0.01）；且电针组和电针配合耳穴贴压组之间患者体重指数、体脂百分比、腰围、臀围的下降值有显著性差异（P＜0.05），电针配合耳穴贴压组下降幅度更显著。结论：单纯电针与电针配合耳穴贴压两种疗法对肥胖患者的体重指数、体脂百分比、腰围、臀围均有明显降低作用。并且电针配合耳穴贴压组患者在体重指数、体脂百分比、腰围、臀围分值的下降上更明显，说明综合疗法减肥疗效优于单一疗法。

关键词：电针；耳穴贴压；单纯性肥胖症；临床疗效

中图分类号：R245.97文献标识码：B文章编号：1000－1719（2010）11－2224－03

Controlled Observation of the Clinical Curative

Effects of the Electro－acupuncture Therapy and the Electro－acupuncture

Combined with Auricular Plaster Therapy on the Simple Obesity

LIANG Jia1，WU Ji-hong1，LV Hai-bo2，HAN Li1

（1．Beijing University of Chinese Medicine，Beijing100029，China；2．Beijing Haidian Hospital，Beijing100080，China）

Abstract：Objective：To discuss and compare the clinical curative effects of the electro－acupuncture therapy and the electro －acupuncture combined with auricular plaster therapy on the simple obesity．Methods：Female Patients of simple obesity were di-vided into two groups stochastically：the electro－acupuncture Group and the combined Group．Each group has30patients．The

通络救脑注射液对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆及氧化应激反应的影响

2012年12月1日第12期No．12 1 Dec． 2012 中医学报 CHINA JOURNAL OF CHINESE MEDICINE 第27卷总第175期Vol．27 Serial No．175 *基金项目：北京中医药大学自主课题(编号:2011－JYBZZ － XS077) 通络救脑注射液对阿尔茨海默病模型大鼠学习 记忆及氧化应激反应的影响 * Effects of Tongluo Jiunao Injection on learning and memory and oxidative stress response for Alzheimer's Disease Rat Models 刘洋Liu Yang 1，李澎涛Li Pengtao 2，刘希伟Liu Xiwei 1，南一楠Nan Yinan 1，都文渊Du Wenyuan 1 1．北京中医药大学基础医学院中西医结合基础(病理)，北京110029 Integration of Traditional Chinese Medicine and Western Medicine Subject (Pathology )in Basic Medical College of Beijing University of Traditional Chinese Medicine ， Beijing ，China 1100292．北京中医药大学东直门医院，北京100700 Dongzhimen Hospital of Beijing University of Traditional Chinese Medicine ，Beijing ，China 100700 摘要：目的:探讨通络救脑注射液(Tong Luo Jiu Nao injection ， TLJN )对阿尔茨海默病(Alzheimer ’s Disease ，AD )模型大鼠的防治作用及其抗氧化机制。方法:采用脑内定位注射β淀粉样蛋白(βamyloid1-42)建立AD 大鼠模型，在模型建立成功的同时给予TLJN 治疗。采用Morris 水迷宫进行AD 大鼠的行为学检测，用化学比色法检测大脑皮质丙二醛(MDA )的含量。结果:与正常组比较，AD 模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长(P ＜0．01)，目标象限停留时间明显缩短(P ＜0．01);TLJN 治疗组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P ＜0．05)，目标象限停留时间明显增加(P ＜0．05)。AD 模型组大鼠脑皮质中MDA 含量增加(P ＜0.01);TLJN 治疗组，脑皮质MDA 含量显著减少(P ＜0．01)。结论:TLJN 具有改善学习记忆能力，对抗大鼠神经系统的退行性病变有一定的作用，可能通过抑制AD 模型大鼠脑皮质MDA 产生发挥其保护作用。 Abstract :Objective :To explore the preventive and therapeutic effect and anti-oxidation mechanism of Tong Luo Jiu Nao injection (TLJN )in Alzheimer's Disease (AD )rat models．Methods :The AD rat model was established by injecting β-amyloid1-42into the rat brain ，and successful model rats were given TLJN injection treatment at the same time．The behavioral changes of the AD rats were test-ed with Morris water maze．Chemical colorimetry was used to measure malondialdehyde (MDA )content in the cerebral cortex．Results :Compared with the control group ，the escape latent period of AD rats was significantly longer (P ＜0．01)，retention time of the target quadrant significantly obviously reduced (P ＜0．01);After TLJN treatment ，the escape latent period of AD rats was significantly shorter (P ＜0．05)，and retention time of the target quadrant was significantly increased (P ＜0．05)．In AD model group ，the MDA content in cerebral cortex was increased significantly (P ＜0．01);while after TLJN treatment ，the MDA content in cerebral cortex was decreased obviously (P ＜0．01)．Conclusions :TLJN treatment has certain effects on improving learning and memory ability of AD rats and resisting retrogression of rats nervous system ，and plays protective role in AD rats possibly via inhibiting the production of MDA．关键词：阿尔茨海默病;通络救脑注射液;Morris 水迷宫;学习记忆;氧化应激反应;大鼠 Key words :Alzheimer's Disease (AD );Tongluo Jiunao injection ;Morris water maze ;learning-memory ;oxidative stress response ;rat 中图分类号CLC number ：R285．5 文献标识码Document code ：A 文章编号Article ID ：1674－8999（2012）12－1614－03阿尔茨海默病（Alzheimer ’ s Disease ，AD ）是一种继心血管病、癌症、脑卒中后严重威胁人类健康的高发性神经退变性疾病。但目前临床上对于AD 的病因和发病机制尚不完全清楚， 对于其治疗仍旧是一个世界性的难题。近些年来，对于AD 的发病机制研究方面取得了很多进展，主要集中在遗传因素、环境因素、免疫-炎性机制、氧化应激和细胞凋亡等方面，而氧化应激在AD 中的作用越来越受到研究者的重视。结合本研究团队多年体内外实验研究， 发现AD 的中医病机关键为“毒损脑络”［1-2］ 。因此，本实验采用大鼠双侧海 马注射A β1-42这一致毒片段以模拟“毒损脑络”病证，观察“毒损脑络”病证下AD 大鼠学习记忆变化情况及氧化应激反应的改变，采用针对该中医病机关键具有解毒通络作用的中药复方通络救脑注射液进行干预， 通过Morris 水迷宫行为学检测方法观察药物干预后大鼠学习记忆的改善情况及通络救脑注射液的作用机制，为通络救脑注射液的临床应用提供体外实验依据。 1 材料与方法 1．1 动物分组 清洁级雄性SD 大鼠32只，体质量（250?20）g ，购自北 京维通利华实验动物中心。随机分成正常对照组（正常组）、 A β海马注射组（模型组）、A β海马注射+通络救脑注· 4161·

2型糖尿病大鼠模型研究概况

2型糖尿病大鼠模型研究概况 【摘要】目的：综述近年来2型糖尿病(T2DM)大鼠模型的研究进展及对其优缺点进行评价和未来同类模型的展望。方法：主要对T2DM大鼠模型的建立技术和方法进行综合性评价。结果：T2DM大鼠模型目前可以分为自发性T2DM 和实验性T2DM模型,且仍有较大发展空间。结论：经过综合评价研究，认为各种建模方法均有优缺点，目前较认可的是实验性T2DM大鼠模型，因价格低廉，造模方便而广受欢迎，但仍缺乏一定的造模标准。 【关键词】2型糖尿病；动物模型；研究概况 随着经济社会的发展，人们的饮食结构、生活方式等发生了很大改变，糖尿病发病率显著上升，尤其T2DM占了较高比例，大概占了糖尿病发病率的90%。T2DM是因人体胰岛素分泌相对不足或靶细胞对胰岛素敏感性降低继而引发糖、蛋白质、脂肪和水电解质等代谢紊乱所导致的疾病。患者典型表现为三多一少，即多饮、多食、多尿表现，同时还伴有身体消瘦、疲乏、烦躁、口渴等临床症状。 选择一些合适的动物模型进行动物试验成了我们研究糖尿病的良好途径，我们可以从中比较一些糖尿病药物的作用效果以及其药动学的特点，在临床用药上对评价某套治疗方案的可行性及预后等具有十分重要的参考意义。 目前研究的临床T2DM动物模型主要集中在大鼠上，这可能是由于大鼠作为T2DM动物模型相对较稳定且与人T2DM表现相似的优点。因此我们在下面综述近几年来国内外有关临床T2DM大鼠模型研究的情况。 总体上来说，目前临床T2DM研究的大鼠模型主要分为两类，一类是自发性T2DM大鼠模型，另一类则是实验性T2DM大鼠模型，考虑到成本及方便程度，目前以后者居多。 1 实验性T2DM大鼠模型 1.1 单纯高脂高糖引发的T2DM 在试验中，通过较长时间给予大鼠过量的高糖高脂饮食，发现能够诱导出较满意的T2DM大鼠模型，从而能为进一步研究奠定良好的基础。目前认为其机理可能是高糖高脂饲料会导致胰岛B细胞超负荷，进而使胰岛细胞发生损伤、萎缩甚至死亡，胰岛的功能因此下降，继而建立起伴胰岛素抵抗的T2DM模型。鲁瑾[1]等采用61%的高脂饮食，饲养大鼠7周后，大鼠就出现了高胰岛素血症，且形成了明显的胰岛素抵抗，是一个十分可靠的胰岛素抵抗模型。张丽锋[2]等给予W istar大鼠脂肪热比为59%的饲料, 喂养4周，均出现胰岛素抵抗，多项研究试验表明高脂饮食可以诱发产生可靠的糖尿病大鼠模型。 1.2 应用STZ药物诱导产生的大鼠模型由于高糖高脂饲料相对用时较长，且饲料成本相应较高，因此合理使用链脲菌素(STZ)是目前许多研究者所推崇的

实验十三 失血性休克模型的复制及治疗

实验十三失血性休克模型的复制及治疗【实验目的】 1.复制失血性休克的动物模型。 2.观察失血性休克发生前后动物症状体征变化。 3.探讨失血性休克的发病机制熟悉休克的治疗措施。 【实验原理】 休克是多种原因引起的急性微循环障碍，使全身组织血液灌流量严重不足，导致细胞损伤，各重要生命器官发生严重障碍的全身病理过程。 休克的病因有许多种，本实验采用股动脉放血的方法，直接减少有效循环血量，复制低血容量性休克模型。由于放血一定程度后可使循环血量不足，静脉回心血量减少，血压下降，通过压力感受器反射，引起交感神经兴奋，外周血管收缩，组织灌流量急剧减少，导致失血性休克。通过输液，补充血容量，同时使用不同血管活性药物，抢救休克。 【实验材料】 1.实验对象家兔。 2.实验器材BL-420生物机能实验系统，手术器械一套，气管插管，动脉插管，股动脉插管，呼吸流量换能器。 3.实验药品20%乌拉坦，1%肝素，生理盐水。 【实验步骤】 1.取家兔1只，称重，从耳缘静脉注射20%乌拉坦5ml/kg进行麻醉，将家兔仰卧位固定于兔台上，用剪刀剪去颈部及下腹部的被毛，注意勿伤及皮肤。 2.做颈部手术，分离气管并插管，连接呼吸流量换能器，记录呼吸

曲线。右侧颈外静脉分离并插管用于输液。再做颈总动脉插管，用于描记动脉血压。 3.分离股动脉进行插管，放血的途径。 4.肝素化从耳缘静脉注射1%肝素2ml/kg。 5.松开动脉夹，从股动脉处缓慢放血，速度小于2ml/min，放血量约为全血的1/10，家兔的全血量按70～80ml/kg来计算，边放血，边观察血压的变化。继续放血，当放血量约为全血量1/5～1/4，血压稳定在30～40mmHg之间，维持10～15min，观察动物各项生理指标的改变。 6.根据失血性休克的病理生理变化，按休克发病学的防治原则进行纠酸、扩容、应用血管活性药物及防治细胞损伤等治疗，自行设计抢救方案，观察并比较各项救治措施后血压和微循环的变化。 ①建立耳缘静脉通路，5%葡萄糖生理盐水输液（输液量应根据失血量自行确定）。 ②血液回输注射器内的血液快速从颈外静脉输回。 ③去甲肾上腺素0.5mg去甲肾上腺素溶于25ml生理盐水中，静脉滴注（30min输完），与放血前所测得的收缩压高度作比较。 ④654-2 2mg654-2溶于25ml生理盐水中，静脉滴注（30min输完），观察血压和微循环的变化。 ⑤待抢救恢复后，结扎右侧迷走神经，在结扎处远心端剪断迷走神经，观察血压有何变化？刺激右侧迷走神经外周瑞，观察血压有何变化？ ⑥处死动物耳缘静脉注射空气。 【注意事项】 1.保护耳缘静脉，注射时应从耳尖部进针，如不成功．再向耳根部移位。

红景天对阿尔茨海默病大鼠行为学和脑组织抗氧化能力的影响

红景天对阿尔茨海默病大鼠行为学和脑组织 抗氧化能力的影响 作者：冀俊虎,董联玲,曹娟,杨发明,王健 【摘要】目的探讨红景天对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的干预效果和作用机理。方法采用腹腔注射D-半乳糖(用生理盐水配成浓度为10 mg/mL)和灌胃AlCl3(用蒸馏水配成浓度为20 mg/mL),并一次性注射东莨菪碱建立AD动物模型。通过Morris水迷宫测试系统检测大鼠学习记忆能力变化,抗超氧阴离子和总抗氧化能力测定检测各组大鼠脑组织抗氧化水平,常规HE染色和免疫组化测Aβ1-40的表达,观察大鼠海马及皮质的形态学改变。用红景天以灌胃方式对实验大鼠进行干预,并以喜得镇做对照观察其干预效果。结果模型组大鼠记忆功能明显减退,神经细胞破坏明显,海马和皮质出现β-淀粉样蛋白沉积及老年斑。中药组、西药组及空白组大鼠在水迷宫测试中,逃避潜伏期明显缩短,原平台象限比、跨平台次数明显增加,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；模型组抗超氧阴离子和总抗氧化能力活性较其他组明显降低(P＜0.05)。结论红景天可以有效改善AD大鼠空间学习记忆能力损害,同时在清除自由基和抗氧化损伤方面有显著功效,具有神经保护作用。 【关键词】红景天；阿尔茨海默病；行为学；抗氧化能力；大鼠

Abstract：Objective To study the intervention effect and mechanism of integripetal rhodiola herb (IRH) on Alzheimer’s disease model rats. Methods Alzheimer’s disease model was made by injecting D-galactose (10 mg/mL) in abdominal cavity and taking AlCl3 (20 mg/mL) by intragastric administration, and injecting scopolamine. Morris water maze testing system was undertaken to observe the change of learning and memory ability in rats, biochemical indicator tested was to contrast the state of oxidative stress, common HE staining and immunohistchemistry staining were to observe the morphology change of the hippcampus and cortex cell. The model rats were administrated IRH by means of intragastric administration contrasting with hydergine to compare the effect. Results The memory ability of model group was obviously decreased, cellula nervosa were damaged badly. A β and senile plaques appeared on hippcampus and cortex. All of the test indexes in Morris water maze showed that the abilities of space search, learning and memory in different groups remarkably improved compared with that of the model group (P ＜0.05). The anti-02·- and T-AC activity of the model group was lower than other groups obviously (P＜0.05). Conclusion IRH has significant relieving effect on the lesion of the abilities of

大鼠二型糖尿病造模方法

大鼠二型糖尿病造模方法 Prepared on 22 November 2020

大鼠2型糖尿病模型建立方法讨论 专业：药理班级：六班姓名：刘畅学号：150517 摘要：据国际糖尿病联合会（InternationalDiabetesFederation，IDF）估计，现在全球约%的成年人患有糖尿病。到2035年，该病患者人数预计会上升至亿。在2013年，全球约有亿成年人患有糖尿病，中国的糖尿病患者人数居全球之首，调查统计人数为亿。糖尿病导致约510万人死亡，平均大约每6秒钟就有1人死于糖尿病。2012年1月9日，中国健康教育中心公布的“中国慢病监测及糖尿病专题调查”结果显示，我国18岁及以上居民糖尿病患病率为2。6%，60岁以上老年人患病率高达%。因此，为治疗糖尿病建立简单、稳定、经济的动物模型非常重要。因2型糖尿病患者人数占糖尿病患病人数的90%以上，本文主要综合讨论高糖高脂饲料联合链脲佐菌素大鼠2型糖尿病模型的建立方法和注意事项。得出结果为：使用体重在190g~240g之间的雄性SD大鼠，通过连续两次腹腔注射小剂量链脲佐菌素并辅以去抗氧化剂处理，合理饲养并通过尾静脉采血方法建立的2型糖尿病模型较理想。 关键词：2型糖尿病，SD大鼠模型，链脲佐菌素STZ， 糖尿病（diabetes）是一种以胰岛素分泌缺陷和胰岛素作用不足所致的以高血糖为特征的葡萄糖、蛋白质、脂质代谢紊乱的综合征，基本治疗方案包括饮食治疗、运动治疗、药物治疗、糖尿病监测及糖尿病教育。病因主要有遗传因素、病毒感染、肥胖等，临床表现为“三多一少”即多尿、多饮、多食和体重减轻。长期的高血糖最终会引起很多严重的并发症，包括心脑血管疾病、糖尿病神经病变、糖尿病视网膜病变，糖尿病肾病、糖尿病足、感染、糖尿病酮症酸中毒、高渗性昏迷等[1]。 糖尿病分为1型糖尿病（Type1diabetes）和2型糖尿病 （Type2diabetes）两种，1型患者因自身免疫β细胞破坏所致，每日胰岛素分泌量非常少，空腹基值及糖刺激后峰值均明显低于正常值，表现为绝对分泌不足。2型糖尿病细分为两类：体重正常患者胰岛素分泌量低于正常人，糖刺激后峰值低并且延迟出现；肥胖糖尿病人胰岛素分泌量大于正常人，空腹基值和糖刺激后高峰明显高于正常人，但延迟出现，因此，表现为相对性胰岛素分泌不足且释放反应迟钝。胰岛素分泌不足的原因可能为：遗传因素、自身免疫、胰岛素拮抗。糖尿病患者中约有90%～95%属于2型糖尿病。 2型糖尿病，即非胰岛素依赖型糖尿病（non-insulin-dependentdiabetesmellitus，NIDDM），根据体重可分为肥胖和不出现肥胖两

失血性休克模型及其抢救

失血性休克模型及其模型 河北医科大学赵拓 一.实验目的 复制家兔失血性休克模型，在此过程中观察失血性休克动物的血压、中心静脉压、呼吸、心率、尿量、血细胞比容，分析并加深对失血性休克的发病机制的认识。 二.实验动物 健康状况良好的雄性家兔一只（便于尿道插管） 三.实验步骤 参考实验指导即可 四.实验结果 呼吸加深加快并逐渐恢复治疗后几近恢复正常 血压骤降随后逐渐上升治疗后几近恢复正常 中心静脉压下降并逐渐上升治疗后几近恢复正常 血细胞比容下降未测定 心率上升治疗后心率比正常微高 尿量减少未测定 肛温降低恢复正常 粘膜颜色淡白红色-苍白-紫绀治疗后变浅粉红色 五.实验分析 1.呼吸的变化：缺氧使交感神经兴奋，外周毛细血管收缩，致使外周组织缺血状况显著，同时外周毛细血管换气量需求加强，兴奋颈动脉体，使呼吸加深加快；同时缺氧亦可导致代谢性酸中毒，刺激呼吸中枢使呼吸加深加快。 2.血压的变化：血压骤降是由于大量失血，有效循环血量骤然减少；缓慢回升则是代偿机制具体代偿机制如下： ①交感--肾上腺髓质系统兴奋，导致儿茶酚胺的大量分泌，作用于血管平滑肌的β受体，使血管收缩，增强外周阻力，升高血压。 ②醛固酮--肾素--血管紧张素系统启动，分泌大量血管紧张素入血，收缩血管，增强外周阻力，升高血压。 ③抗利尿激素的形成，同样导致肾脏微小血管收缩，提升外周阻力，升高血压。 ④“自身输液”的出现，增加了有效循环血量，升高血压。 3.血细胞比容的变化:“自身输液”的出现使血容量升高，然而血细胞的量没有变化，所以血细胞比容降低。 4.心率的变化：有效循环血量的减少导致平均动脉压降低，激动交感神经，大量产生肾上腺素激动心脏上的β1受体，使心率升高。同时抑制迷走神经，降低神经张力抑制作用，加快心率。 5.中心静脉压的变化：中心静脉压表征血容量的变化，大量失血使血容量降低，故中心静脉压也降低。 6.皮肤粘膜以及肛温的变化：在有关血压的变化中提到了外周组织血管收

阿尔茨海默病大鼠自噬相关蛋白Beclin—1和凋亡相关蛋白p53表达变化及电针的调控作用

阿尔茨海默病大鼠自噬相关蛋白Beclin—1和凋亡相关蛋白p53表达 变化及电针的调控作用 目的观察电针对大鼠海马自噬相关蛋白Beclin-1和凋亡相关蛋白p53表达的影响，探讨电针治疗阿尔茨海默病（AD）的作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组。电针组取“百会”和“涌泉”进行电针治疗，每日1次，7 d为1个疗程，共治疗4个疗程。疗程结束后尼氏染色观察各组海马CA1区组织形态的变化并计数尼氏体阳性细胞，Western blot检测Beclin-1和p53蛋白的表达。结果模型组CA1区尼氏体阳性的细胞数目较正常组显著减少（P＜0.01），电针组锥体细胞和尼氏体表达较模型组明显增多（P＜0.05）。与正常组比较，模型组海马组织中Beclin-1蛋白表达降低、p53蛋白表达升高（P＜0.05）；与模型组比较，电针组Beclin-1蛋白表达明显升高（P＜0.01），p53蛋白表达降低（P＜0.05）。结论电针治疗可对抗β-淀粉样蛋白诱导的神经元凋亡，改善AD海马组织形态变化。 标签：电针；阿尔茨海默病；凋亡；自噬；Beclin-1蛋白；p53蛋白；大鼠 上海中医药大学名师传承研究工程项目（2009120） 阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是一种慢性进行性的中枢神经系统退行性变性病，β-淀粉样蛋白（amyloid-β，Aβ）沉积形成的老年斑、神经原纤维缠结和神经元及其突触的缺失是其典型特征。目前AD的临床药物只能对症治疗，无法逆转其病理进程。自噬是细胞长寿命蛋白、变性或衰老细胞器的主要降解途径[1]。研究表明，自噬功能障碍与多种错折叠蛋白聚集体导致的神经变性疾病有关[2-3]。自噬障碍可能影响Aβ的清除和增加神经细胞死亡[4]，表明自噬可以保护神经元免受Aβ诱导的凋亡[5]，与AD的病理生理学密切相关。针灸治疗AD具有诸多的优势，且疗效明确[6-7]。本研究在构建AD大鼠模型的基础上，通过检测自噬相关蛋白Beclin-1和凋亡相关蛋白p53的表达变化，探讨电针治疗AD的作用机制。 1 实验材料 1.1 动物 SPF级雄性SD大鼠60只，体质量（200±50）g，上海中医药大学实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK（沪）2008-0016，实验室符合国家动物实验设施屏障系统标准。 1.2 主要试剂与仪器 Aβ1-40，美国Sigma公司；Beclin-1兔抗大鼠多克隆抗体和HRP标记山羊抗兔二抗，美国cell signaling technology公司；p53山羊抗大鼠多克隆抗体，美

机能学实验-失血性休克实验报告

一、实验目的 1、复制失血性休克模型（主要）。 2、观察休克早期大鼠机体的机能变化，探讨休克的发病机制。 3、了解休克早期的治疗原则。 二、实验动物：300g左右SD大鼠，雌雄不限 三、实验器械：略 四、实验步骤： 1.称重麻醉固定：大鼠称重后腹腔注射40mg/kg 2%戊巴比妥钠溶液进行全麻，数分钟后观察，疼痛， 翻正反射均消失后，用8%硫化钠脱去一侧耳廓被毛，将大鼠仰卧位固定于鼠恒温实验台上，减去股部手术野被毛。 2.动静脉插管：碘伏消毒手术野，切开股动脉搏动处皮肤组织，止血钳分离股血管神经鞘，暴露神经 血管后，利多卡因擦拭。用玻璃分针分离股动静脉与股神经，股静脉插管，结扎远心端，近心端插入静脉留置针，打结固定，2.5ml/kg经股静脉推注50U/ml肝素。股动脉插管连接压力换能器。腹部手术完成后，以湿生理盐水纱布覆盖。 3.尿道插管：选取硬膜外导管前端约七厘米与尿液计滴器相连，碘伏会阴处消毒，将导管沿尿道插入 约4cm。 4.肛温测量：用液体石蜡涂抹动物肛温仪前端，插入大鼠肛门约二厘米，但数值稳定后读取肛温。 5.观察记录正常指标。 6.抢救：经股静脉回输自身血液加出血量二倍的生理盐水。观察记录指标变化。 五、实验结果： 平均压/脉压呼吸中心静 脉压 心率血细胞比容皮肤黏膜颜色肛温耳廓微循环正常113.45/38.03 正常正常212 正常红润37.6 正常 放血后代偿后下降/增加 54.74/48.22 变浅变慢 加深加快 下降 增加 减慢 294 不变 降低 苍白 苍白 下降 35.2 微循环收缩 微血管收缩 治疗后99.25/45.84 加深加快进一步 回升 272 增加红润36.3 恢复正常 六、讨论 1、各观察指标的变化及其变化机制？ 血压：放血后，血容量降低，回心血量急剧下降，导致心脏搏出量迅速降低，血压也就急剧下降； 代偿后，通过心率加快，外周阻力增加，自身输液等机制，血压有所回升。治疗后，血容量得到扩

1型糖尿病大鼠模型的建立及观察_张巨彪

7 摘要：目的探讨链脲佐菌素（STZ ）建成可靠、稳定的1型大鼠糖尿病模型情况。方法选取 SDF 级雄性Wistar 大鼠70只，分成3个实验组，各20只和对照组10只，实验组大鼠一次性腹腔注射STZ 30、65、100mg /kg ，对照组10只大鼠腹腔注射枸橼酸缓冲液，用拜安易血糖仪检测血糖，7d 后血糖＞16．65mmol /L 判定为1型糖尿病动物模型。观察大鼠的血糖、体质量、饮水量、胰岛素和C 肽等指标。结果大鼠注射STZ 65mg /kg 7d 后，大部分血糖值达到成模标准，并出现糖尿病表现，持续观察7周，有18只大鼠成模，未见糖尿病转复，糖尿病症状明显。结论腹腔一次性注射STZ 65mg /kg 剂量可成功制备1型糖尿病大鼠模型。 关键词：链尿佐菌素；1型糖尿病模型；大鼠 Establishment and Observation of Type I Diabetic Rat Models ZHANG Ju-biao 1， SU Xiu-lan 2，OUY-ANG Xiao-hui 1 ．（1．Department of Tumor Surger ， Inner Mongolia Autonomous Region People's Hospital ，Hohhot 010010，China ；2．Central Lab of Inner Mongolia Medical University ，Hohhot 010010，China ） Abstract ：Objective To establish type I diabetic rat models by intraperitoneal injection of streptozoto-cin and observe the stability of diabetic changes in rats．Methods 70male Wistar rats were divided into 3experiment groups of 20rats each and 1control group of 10rats．The experiment groups were intraperitoneally injected by 30mg /kg ，65mg /kg ，and 100mg /kg STZ respectively ，while the control group was injected cit-rate buffer．Bayer blood glucose meter was adopted to test the blood glucose ，setting ＞16．65mmol /L after 7d as the type 1diabetic animal model．The fasting blood glucose level ，body weight ，water intake ，insulin and C-peptide of the rats at different time points were observed /measured．Results In the group of injection by 65mg /kg STZ ，after 7days most rats reached the model blood glucose standard and had diabetic manifes-tation ，after continuous observation of 7weeks ，18rats were qualified as the model with obvious symptoms and without conversion．Conclusion With the dose of 65mg /kg of STZ through one intraperitoneal injection ，type 1diabetic rat models can successfully established． Key words ：Streptozotocin ；Type 1diabetic models ；Rat 糖尿病已成为严重威胁人类身体健康和生命的 疾病。它是一种以持续性高血糖为特征的内分泌障碍疾病，可导致全身性代谢紊乱并继发眼、肾、神经和心血管等器官的慢性进行性病变，最终引起功能损伤及衰竭。1型糖尿病及其并发症的病因、发病机制尚未完全阐明，预防和治疗仍不完善，干细胞（stem cells ）是体内存在的一类特殊细胞，有自我更新和不断增生的能力，又具有多向分化的潜能，只要掌握了胰腺干细胞的特异标志、转化调控机制、培养及分离技术，就可以体外操纵干细胞，进行大量扩增和定向诱导分化，最后将得到能分泌胰岛素的胰岛 样细胞［1-2］，用于治疗1型糖尿病。因此，建立较理 想的动物模型研究该病的发病机制和治疗具有重要意义。目前，国内外普遍使用STZ 制备糖尿病大鼠 动物模型。该项实验根据吴清洪报道的方法［3］ ，采用简单的腹腔一次注射的方法制备稳定并且可靠的动物模型。1材料与方法 1．1实验动物的选择和喂养SDF 级成熟Wistar 雄性大鼠70只（体质量220 280g ），购自内蒙古大学实验动物中心，饲养室内氨浓 度＜20g /L ， 相对湿度40% 70%，室温18 25℃，保证良好的通风，避免增加造模后大鼠的感染概率，普通饲料喂养，饮水自由。 1．2主要仪器和试剂拜安易血糖检测仪及试纸（美国Bayer 公司）；STZ （美国Sigma 公司）；胰岛素、C 肽放射免疫分析药盒（均购自内蒙古泽生耗材）。 1．3主要实验试剂的配制STZ 液称取STZ 粉剂0．2g ，溶于pH 4．5，浓度为0．1mmol/L 的枸橼酸三钠-枸橼酸缓冲液20mL 中，制成1%溶 液，经0．22μm 滤器过滤除菌，要求5min 内配制完成，配好后，10min 内用完，STZ 和枸橼酸缓冲溶液低温保存，新鲜配制。 1．4实验分组和大鼠糖尿病模型的制备采取国内外普遍使用的STZ 制备糖尿病大鼠模型，根据徐 华等［4］ 报道， 雄性大鼠易于成模，且成模后血糖稳定性好，故选取成熟雄性大鼠用于实验。将所有大鼠（70只）使用代谢笼单只喂养，适应性喂养1周， 1周内注意观察大鼠的饮食情况、体质量等健康状况， 1周后，选取空腹血糖介于2．92 6．92mmol /L 的大鼠为实验对象。将空腹血糖介于2．92 6．92mmol /L 的大鼠随机分为4组，实验组（60只）分别接受STZ 液一次性腹腔注射，剂量为30、65、100mg /kg ，对照组（10只）注射枸橼酸三钠-枸橼酸缓冲液。实验前 大鼠禁食、水12h 。分别于注射后3、 7、14、28d 采用剪尾法采集血样，用拜安易血糖仪检测空腹血糖，7d 后空腹血糖＞16．65mmol /L ，出现多饮、多食、多尿 · 533·医学综述2013年1月第19卷第2期Medical Recapitulate ， Jan．2013，Vol．19，No．2

2型糖尿病大鼠模型的建立及其验证

2型糖尿病大鼠模型的建立及其验证论著 燕娟1　郭巍伟1　梁执群1　李志国1　郭永昌2 (山西医科大学1人文社会科学学院;2实验动物中心　山西　太原　030001) 【摘要】　目的　制备一种发病过程类似人类2型糖尿病的动物模型。方法　雄性S D成年大鼠高糖高脂饲料喂养 1个月,诱发出胰岛素抵抗,给予小剂量链脲佐菌素(STZ)25mg/kg,腹腔注射,建立2型糖尿病大鼠模型。结果　试验 组大鼠血糖升高,对胰岛素敏感性下降,从生化指标和形态学方面证实造模成功。结论　本实验2型糖尿病大鼠模型 造模成功,它具有中度高血糖、胰岛素抵抗、成功率高等特点,是人类2型糖尿病及其药物研究的理想动物模型。 【关键词】　糖尿病　动物模型　大鼠 Type2d i a betes ra t m odel and its ver i f i ca ti on.YAN Juan,G UO W ei-w ei,L I ANG Zhi-qun,et al.ShanxiM edical U niversity,College O f Hu2 m anities A nd Social Science,Taiyuan Shanxi030001,China. 【Abstract】　O bjecti ve　Preparati on of a disease si m ilar t o human type2diabetes ani m al model.M ethods　Male S D adult rats fed high- fat high-sugar a month,induced insulin resistance,given l ow-dose strep t ozot ocin(STZ,25mg/kg,intraperit oneal injecti on),set up in type2 diabetic rat model.Results　Test gr oup of rats increased bl ood glucose,insulin sensitivity decreased,fr om the bi oche m ical indices and mor phol ogy confir med the successful model.Conclusi on　The experi m ental rat model of type2diabetes model successfully,it has moderately high bl ood sug2 ar,insulin resistance,the success rate is high,are of human type2diabetes and its drug research ideal ani m al model. 【Key words】　D iabetes;Ani m al model;Rat 糖尿病与心脑血管疾病、肿瘤是当前威胁人类健康的三大非传染性疾病,已成为全球性的卫生问题。随着我国人民生活水平的提高、人口老化、生活方式的改变以及诊断技术的进步,糖尿病的发病率呈现迅速上升趋势,2型糖尿病是糖尿病人群的主体,占糖尿病发病率的90%以上。因此,研制2型糖尿病动物模型具有重要的医学研究意义。在国外2型糖尿病的研究中,采用的动物模型多为遗传相关模型,如ob/ob小鼠、db/db小鼠及肥胖型Zucker大鼠等,其特点是遗传因素在发病过程中占主导作用,不完全与临床相符,且十分昂贵,不利于国内研究的开展[1]。本研究结合前人经验,应用高糖高脂饲料结合小剂量链脲佐菌素(STZ)建立了2型糖尿病大鼠模型,较符合人类普通型2型糖尿病发病机制,有利于进行2型糖尿病及其并发症的相关研究[2,3]。1　材料和方法 1.1　动物和材料　清洁级雄性S D大鼠40只,体质量(180±20)g,由山西医科大学实验动物中心提供,每笼4～5只,饲以普通饲料,自由摄食摄水,除实验应激外无其他不良刺激。STZ由美国Sig m a公司生产。胰岛素、胰高血糖素放射免疫分析药盒为解放军总医院科技开发中心放免所产品,购自北京普尔伟业生物科技有限公司。 1.2　2型糖尿病大鼠模型的建立　在大鼠适应期后,随机取10只作为正常对照组,其余30只给予高糖高脂饲料(在标准全价混合饲料的基础上添加蔗糖、炼猪油和蛋黄,热能含量21.6kJ/kg)。高糖高脂饲料组喂养4周后,腹腔注射STZ(临用前溶解在pH=4.0的0.1mmol/L柠檬酸缓冲液内,25mg/kg,1次/d,连续2d),正常对照组普通饲料喂养4周,再注射等量柠檬酸缓冲液,1次/d,连续2d。注射药物两天后间隔1d血糖测试仪测查大鼠空腹血糖(测试前禁食12h)即注射后血糖,以血糖含量16.7mmol/L为2型糖尿病大鼠模型判定标准,随机选取10只糖尿病大鼠为模型组。继续普通饲料喂养4周。 1.3　指标测定 1.3.1　一般状况观察　包括大鼠的精神状态、体质量、饮水量、食量、大小便。 1.3.2　血糖测定　腹腔注射STZ或柠檬酸缓冲液2 d后及实验结束时分别进行空腹状态下剪尾取血,测其血糖值,为注射后血糖。4周后处死大鼠测其血糖为终血糖。 1.3.3　血清胰岛素、胰高血糖素水平测定　实验结束时禁食12h,20%的乌拉坦腹腔麻醉大鼠,腹主动脉取血,分离血清后放射免疫分析法测定。 1.3.4　胰岛素敏感指数(I SI)的计算　参照李光伟等[4,5]的方法,I SI=ln[1/F BG×F I N S],F BG为空腹血糖,F I N S为空腹胰岛素。 1.4　统计学处理　采用SPSS11.5统计软件对实验数据进行处理,数据以均数±标准差( x±s)的形式表示,用t检验分析。 2　结果 2.1　两组大鼠一般状况　对照组大鼠生长良好,体质量持续增加,无其他症状。模型组大鼠在注射STZ后体质量呈缓慢增长、逐步较前下降、消瘦走势,观察发现有 ? 5 ? 临床和实验医学杂志　2009年4月　第8卷　第4期

《临床骨科杂志》投稿攻略发表论文

临床骨科杂志 一、发表说明 本团队专注于论文写作与发表服务，擅长案例分析、编程仿真、图表绘制、理论分析等，论文写作、发表300起，具体价格信息联系： 本团队并非任何杂志编辑中心，本中心是专业代发论文的机构，与各个杂志社具有长期良好的合作关系，也就是我们通过我们的特殊渠道将论文送给杂志社我们特定的内部人处理论文，保证较高的上稿率，以解决投稿人投稿后焦急的等待与石沉大海的结局。通过我们可以较为容易达到发表的目地，当然，论文的质量也是重要的基础。 二、期刊简介如下 本杂志是国内外公开发行的骨科专业学术性期刊，国家科技部中国科技论文统计源期刊。面向临床骨科医生、相关学科医生和研究人员，以临床研究为基石，以新技术、新方法、新思想为引导，普及与提高相结合。本刊注重科学性、创新性、实用性，文章内容翔实、图文并茂、格式规范，可读性强。 临床论著 一期病灶清除植骨融合内固定治疗跳跃性胸腰椎结核实验与临床 兔脂肪干细胞直接修复陈旧性全层兔膝关节软骨缺损综述 肩袖损伤修复技术的研究现状方法与应用 锁定钢板固定治疗老年股骨转子间骨折

临床论著 后路寰枢椎椎弓根钉固定融合治疗寰枢椎不稳或脱位方法与应用 重建钢板结合自体植骨治疗粉碎性锁骨骨折临床论著 保留颈后方韧带复合体对颈椎后路单开门椎板成形术椎板开门角度的影响方法与应用 股骨干骨折内固定术后并发急性感染的外科治疗临床论著 不同方法治疗桡骨远端C型骨折的疗效比较方法与应用 腓骨远端爪型钢板治疗外踝骨折的疗效观察临床论著 锁定加压钢板结合植骨术治疗胫骨平台骨折方法与应用 关节镜下带线锚钉紧缩内侧支持带治疗急性髌骨脱位临床论著 股骨近端外侧锁定钢板治疗Russell-TaylorⅡB型股骨转子下骨折方法与应用 腰椎滑脱症的手术治疗体会临床论著 超关节外固定架结合内固定治疗PilonⅢ型骨折方法与应用 带线锚钉修复跟腱断裂实验与临床 组织工程化凝胶诱导股骨头坏死血管化的实验研究方法与应用 空心加压螺钉内固定治疗锁骨骨折综述 脊柱内固定术后切口深部感染诊断与治疗进展方法与应用 微创内固定系统治疗股骨髁间髁上粉碎性骨折投稿须知 投稿须知 临床论著 一期后路病灶清除植骨融合钉棒固定治疗L5～S1结核方法与应用 DVR解剖型接骨板结合注射型人工骨治疗桡骨远端不稳定性骨折临床论著微创经肌间隙入路结合伤椎固定治疗胸腰椎爆裂骨折方法与应用 带线铆钉结合克氏针多轴固定治疗肩锁关节脱位临床论著

沙漠干热环境下创伤失血性休克大鼠模型的建立

2015年2月第25卷　第2期 中国比较医学杂志 CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE February,2015Vol.25　No.2 [基金项目]军队临床高新技术重大项目(编号:2010gxjs016);全军后勤科研计划项目(编号:2013CLZ13J004)。 [通讯作者]刘江伟(1970-),男,博士后,教授,主任医师,重点实验室主任,硕士研究生导师,研究方向:特殊环境战创伤研究。E?mail:ljw273@https://www.wendangku.net/doc/fb13620656.html,. 研究报告 沙漠干热环境下创伤失血性休克大鼠模型的建立 刘江伟,钱建辉,李　瑞,许文娟,许永华,杨向新,杨　帆 (兰州军区乌鲁木齐总医院新疆特殊环境医学重点实验室,乌鲁木齐市,新疆　830000) 【摘要】　目的　建立一种沙漠干热环境下创伤失血性休克大鼠模型。方法 90只雄性SD 大鼠随机分为 常温环境组、干热环境I 组、干热环境II 组3个实验组。麻醉后大鼠经打击及颈动脉放血,造成创伤失血性休克, 使大鼠MAP(平均动脉压)达到(35±5)mmHg 水平,比较各组大鼠休克后3h 存活率,并对死亡大鼠及休克后3h 仍存活大鼠重要脏器取材进行病理学检查。结果 休克后3h 常温环境组、干热环境I 组(在休克模型建立成功后10min 内从沙漠干热环境转运到常温环境)、干热环境Ⅱ组(休克模型建立成功后仍放置在沙漠干热环境中)的存活率分别为90%、83.3%、0;干热环境I 组与常温环境组存活率差异无显著性(P >0.05),常温环境组和干热环境I 组存活率明显高于干热环境II 组(P <0.01);病理学检查可见常温环境组、干热环境组I 死亡大鼠和干热环境组II 大鼠心、肺、肝组织水肿、变性、白细胞浸润、出血较广泛,细胞坏死较严重。结论　本实验成功建立了沙漠干热环境下创伤失血性休克大鼠模型,同时提示沙漠干热环境能明显降低创伤失血性大鼠的存活率,伤后应立即转运后送。 【关键词】 干热环境;沙漠;创伤失血性休克;动物模型;大鼠【中图分类号】R33 【文献标识码】A 【文章编号】1671?7856(2015)02?0030?04 doi:10.3969.j.issn.1671.7856.2015.002.008 Establishment of a rat model of traumatic hemorrhagic shock in dry hot desert environment LIU Jiang?wei,QIAN Jian?hui,LI Rui,XU Wen?juan,XU Yong?hua,YANG Xiang?xin,YANG Fan (Key Laboratory of Special Environmental Medicine of Xinjiang,Urumqi General Hospital of Lanzhou Military Region,Urumqi 830000,China) 【Abstract 】　Objective To establish a rat model of traumatic hemorrhagic shock in dry?hot desert environment. Methods Ninety male SD rats were randomly equally divided into three groups (n =30):the normal temperature environment traumatic hemorrhagic shock group (normal temperature group)(temperature 25℃,humidity 35%),dry?hot traumatic hemorrhagic shock group I (dry heat group I)and dry?hot traumatic hemorrhagic shock group Ⅱ(dry heat group II)(temperature 40℃,humidity 10%).The rats were anesthetized,fixed,and intravenous indwelling needles were inserted into the right carotid artery,vein and the right femoral artery so as to make bleeding,and at the same time,fracture of the left hindlimb femur was made from the dropped steel wheel.The wounds were quickly bounded after injury.The mean arterial pressure was kept at 35±5mmHg.The rats of group I was transferred into normal environment.The rats of group II were kept in the dry?hot environment continuously.The 3h?survival rates were calculated,and all the rats were sacrificed at 3hours after the traumatic injury.Heart,lung and liver tissue samples were taken for histopathological