紫外可见分光光度计SP-752操作规程

SP-752型紫外可见分光光度计操作规程

1 操作方法

1.1准备工作

1.1.1 打开光度计电源开关，即进入光度计自检过程，自检过程中，

切勿打开样品室盖，自检通过后即可。

1.1.2 预热20min。

1.1.3 检查透过率模式下，挡光位置，透过率是否显示00.0%T。否

则要调整暗电流，按“0%T ”键，使透过率显示为00.0%T。

1.1.4 返回对光位置，仍能显示100.0%T，否则重新调100%T。

1.1.5 通过“”和“”键，设定测试波长；按“100%T ”键，

使透过率显示为100.0%。

1.2光度测试

1.2.1 透过率（T）测试

1.2.1.1 仪器默认显示状态为“T”（其它状态下可按“MODE ”键，

选择T方式）。

1.2.1.2 把参比物质放入光路，按“100%T ”键，使透过强度显示为

100.0%。

1.2.1.3 把待测样品放入光路，显示值即为样品的实际透过率。

1.2.2 吸光度（A）测试

1.2.2.1 按“MODE ”键，选择A方式，此时显示0.000A。

1.2.2.2 把参比物质放入光路，按“100%T ”键，扣除空白吸光度（显

示0.000A）。

1.2.2.3 然后把待测样品放入光路，显示值即为样品的实际吸光度。

1.2.3 浓度（C）测试

1.2.3.1 已知浓度因子，求待测样品浓度

1.2.3.1.1 按“MODE ”键，选择浓度方式，此时显示浓度为0.0000。

1.2.3.1.2 把参比溶液放入光路，按“100%T ”键，扣除空白值（显示

0.0000）。

1.2.3.1.3 把待测样品放入光路，输入浓度因子：按“FUNC ”键直到

显示“STD/FACT=1234”（或“请输入标样因子：_ _ _ _ ”）,

然后通过“”和“”键及“ENT ”键，对标样因子

进行设定。

[具体数值的输入（怎样引入小数点并确定其位置）：先输

入一定数值，按“ENT ”键，引入小数点，再由“”和

“”键来移动小数点位置（按动“”键，小数点往

左移）。例如，输入浓度因子1.235.首先通过“”和“”

键输入数值1235，然后按“ENT ”键，引入小数点（显示

123.5），接着按动“”键，使小数点往左移动直到显示

1.235，最后，按“ENT ”键完成设定。]

1.2.3.1.4 进行浓度直读，直接显示待测样品的浓度。

1.2.3.2 已知一个标准样品的浓度，求待测样品浓度

1.2.3.2.1 按“MODE ”键，选择浓度方式，此时显示浓度为0.0000。

1.2.3.2.2 把参比溶液放入光路，按“100%T ”键，扣除空白值（显示

0.0000）。

1.2.3.2.3 把标准样品放入光路，输入标样浓度：按“FUNC ”键直到

显示“STD/FACT=1000”（或“请输入标样因子：_ _ _ _ ”），

然后通过“”和“”键及“ENT ”键，对标样浓度

进行设定。

[数值的输入操作，同浓度因子。]

1.2.3.2.4 把标准样品换成待测样品，显示读数即为待测样品浓度。

1.3标准曲线

1.3.1 标准曲线测试

1.3.1.1 按“MODE ”键，选择A方式。

1.3.1.2 把参比物质放入光路，按“100%T ”键，扣除空白值。

1.3.1.3 按动“FUNC ”键直到显示“CREATE Std. CURVE”，按“ENT ”

键，进一步出现提示：TOTALSAMPLE：002。

1.3.1.4 通过“”和“”键设定标准样品个数，按“ENT ”键

设定标准样品个数，按“ENT ”键确认后，提示：CONC：_

_ _ _ 001（样品编号）。

1.3.1.5 按标准浓度由小到大的顺序，把标准样品放入光路，输入相

应的浓度并确认。

1.3.1.6 标准曲线的测试完成，仪器自动显示K、B值和R值（这里，

R为相关系数），并提示“PRINT”。

1.3.1.7 按“P/C ”键，提示“TEST ？”。

1.3.1.8 按“ENT ”键，提示：“SA VE ？”。

1.3.1.9 按“ENT ”键，提示：“SUCCESS ！”（储存编号自动按序列

增加）。

1.3.1.10 按“ENT ”键，回到吸光度显示界面。

1.3.1.11 把样品空白参比溶液放回光路，按“100%T ”键，扣除空白

值。

1.3.1.12 换上样品溶液，按“MODE ”键，切换至C方式，显示读数

即为样品对照标准曲线测试的结果。

1.3.2 标准曲线调用及样品测试

1.3.

2.1 设定相同的波长，按“100%T ”键，使透过率显示为100.0%。

1.3.

2.2 按动“FUNC ”键直到显示“LOAD Std. CURVE ？”。

1.3.

2.3 按“ENT ”键，显示“001（曲线编号）K：_._ _ _ _ B：_._ _ _ _”。

1.3.

2.4 通过“”和“”键，选择对应编号的标准曲线。

1.3.

2.5 按“100%T ”键，回到吸光度显示界面。

1.3.

2.6 把样品空白参比溶液放回光路，按“100%T ”键，扣除空白

值。

1.3.

2.7 换上样品溶液，按“MODE ”键，切换至C方式，显示读数

即为样品对照标准曲线测试的结果。

1.3.3 标准曲线的删除

1.3.3.1 按动“FUNC ”键直到显示“DEL Std. CURVE ？”。

1.3.3.2 按“ENT ”键，显示“001（曲线编号）K：_._ _ _ _ B：_._ _

_ _”。

1.3.3.3 通过“”和“”键，选择对应编号的标准曲线。

1.3.3.4 按“ENT ”键，显示“DEL！！！SURE ？”

1.3.3.5 按“ENT ”键，便删除了该曲线。

1.3.3.6 按“P/C ”键，退出该界面。

1.4测试结束

1.4.1 及时将样品室中的样品取出。

1.4.2 关闭仪器电源。

2 注意事项

2.1 仪器开机前，请确保光路畅通（样品室中无挡光物质）。

2.2 测定时注意样品室应关严，样品室如未关好易引入杂散光，使

吸收度读数下降。

2.3 仪器在调100%T（0A）或0%T的过程中，显示屏显示“BLANK...”

或“ZERO...”，请勿急着打开样品室盖，等调整完成显示100%T （0A）或0%T后再进行有关操作。

2.4 在某特定波长下测试，每次改变波长后，要重新调100%T！2.5 不同的吸光度线性范围会引起不同的测量误差。测试的吸光度

最佳线性范围0.3 ~ 0.8。

2.6 比色皿的透光面不能有指印、纸絮、溶液残留痕迹等，比色皿

应垂直放入样品架，比色皿倾斜放置或透光面沾污都会影响测试结果。

2.7 使用一个比色皿可以实现测试操作。若使用一对或多个比色皿

操作，必须确保比色皿之间是配对的，建议配对误差（ΔA）

≤0.003；测试前将相应溶液放入样品室，拉动比色皿架拉杆使

光路通过对应的溶液，扣除空白或测定。

紫外可见分光光度计计量标准技术报告.docx

）））））））） 计量标准技术报告 计量标准名称紫外可见分光光度计检定装置 计量标准负责人 建标单位名称（公章）新月市质量技术监督检验测试中心填写日期

目录 一、建立量准的目的?????????????????????( 01 ) 二、量准的工作原理及其成??????????????( 01) 三、量准器及主要配套????????????????( 02 ) 四、量准的主要技指??????????????????( 03 ) 五、境条件?????????????????????????( 03 ) 六、量准的量溯源和框???????????????( 04 ) 七、量准的重复性???????????????????( 05 ) 八、量准的定性考核????????????????????( 06 ) 九、定或校准果的量不确定度定?????????????( 07 ) 十、定或校准果的???????????????????( 11 )十一、??????????????????????????( 12 )十二、附加明?????????????????????????( 12 )

一、建立计量标准的目的 紫外可见分光光度计属强制检定的计量器具，为了统一这些计量器具的量值，向企业提供全面可靠的计量 服务，确保该计量器具不影响我市的工业安全生产，卫生环境检测，建立了这一社会公用计量标准。 二、计量标准的工作原理及其组成 紫外可见分光光度计检定装置根据 JJG178-2007 《紫外、可见、近红外分光光度计检定规程》提供的方 法 , 紫外、可见分光光度计的主要检定项目是波长准确度和透射比准确度两项。 1、波长准确度检定： 在规定的条件下，用被测紫外可见分光光度计直接测标准滤光片（或溶液），测得的透射比波谷（波峰）所对应波长值，重复测量 3 次，其算术平均值与标准波长之差，即为波长示值误差。 2、透射比准确度检定： 用被测可见分光光度计在规定的波长处，以空气为参比，分别测（透射比标称值为10%、 20%、 30%）标准中性滤光片的透射比（示值），用被测紫外分光光度计在规定的波长处，以空白为参比，测重铬酸钾-高氯酸标准溶液的透射比（示值），重复测量 3 次，其算术平均值与相应下的透射比的标准值之差，即为透 射比的示值误差。 紫外可见分光光 氧化钬滤光片 镨铒滤光片 度计 镨钕滤光片 杂散光滤光片 干涉滤光片 低压汞灯 重铬酸钾 - 高氯酸标准溶液 标准中性滤光片

紫外可见分光光度计常见故障的排除

紫外可见分光光度计常见故障的排除 光源部分： （1）故障：钨灯不亮； 原因：钨灯灯丝烧断（此种原因几率最高）； 检查：钨灯两端有工作电压，但灯不亮；取下钨灯用万用表电阻档检测。 处置：更换新钨灯； （2）故障：钨灯不亮； 原因：没有点灯电压； 检查：保险丝被熔断； 处置：更换保险丝，（如更换后再次烧断则要检查供电电路）； （3）故障：氘灯不亮； 原因：氘灯寿命到期（此种原因几率最高）； 检查：灯丝电压、阳极电压均有，灯丝也可能未断（可看到灯丝发红）； 处置：更换氘灯； （4）故障：氘灯不亮； 原因：氘灯起辉电路故障； 检查：氘灯在起辉的过程中，一般是灯丝先要预热数秒钟，然后灯的阳极与阴极间才可起辉放电，如果灯在起辉的开始瞬间灯内闪动一下或连续闪动，并且更换新的氘灯后依然如此，有可能是起辉电路有故障，灯电流调整用的大功率晶体管损坏的几率最大。 处置：需要专业人士修理； 二．信号部分： （1）故障：没有任何检测信号输出； 原因：没有任何光束照射到样品室内；

检查：将波长设定为530nm，狭缝尽量开到最宽档位，在黑暗的环境下用一张白纸放在样品室光窗出口处，观察白纸上有无绿光斑影像； 处置：检查光源镜是否转到位？双光束仪器的切光电机是否转动了（耳朵可以听见电机转动的声音）？ （2）故障：样品室内无任何物品的情况下，全波长范围内基线噪声大； 原因：光源镜位置不正确、石英窗表面被溅射上样品； 检查：观察光源是否照射到入射狭缝的中央？石英窗上有无污染物？ 处置：重新调整光源镜的位置，用乙醇清洗石英窗； （3）故障：样品室内无任何物品的情况下，仅仅是紫外区的基线噪声大； 原因：氘灯老化、光学系统的反光镜表面劣化、滤光片出现结晶物； 检查：可见区的基线较为平坦，断电后打开仪器的单色器及上盖，肉眼可以观察到光栅、反光镜表面有一层白色雾状物覆盖在上面；如果光学系统正常，最大的可能是氘灯老化，可以通过能量检查或更换新灯方法加以判断； 处置：更换氘灯、用火棉胶粘取镜面上的污物或用研磨膏研磨滤光片（注意：此种技巧需要有一定维修经验者来实施）； （4）故障：样品室放入空白后做基线记忆，噪声较大，紫外区尤甚； 原因：比色皿表面或内壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白样品对紫外光谱的吸收太强烈，使放大器超出了校正范围； 检查：将波长设定为250nm，先在不放任何物品的状态下调零，然后将空比色皿插入样品道一侧，此时吸光值应小于0.07Abs；如果大于此值，有可能是比色皿不干净或使用了玻璃比色皿；同样方法也可判断空白溶液的吸光值大小； 处置：清洗比色皿，更换空白溶液； （5）故障：吸光值结果出现负值（最常见）； 原因：没做空白记忆、样品的吸光值小于空白参比液； 检查：将参比液与样品液调换位置便知； 处置：做空白记忆、调换参比液或用参比液配置样品溶液； （6）故障：样品信号重现性不良；

紫外-可见分光光度计计量标准技术报告

计量标准技术报告 计量标准名称紫外可见分光光度计检定装置 计量标准负责人 建标单位名称（公章）新月市质量技术监督检验测试中心填写日期

目录 一、建立计量标准的目的………………………………………………………( 01 ) 二、计量标准的工作原理及其组成……………………………………( 01) 三、计量标准器及主要配套设备…………………………………………( 02 ) 四、计量标准的主要技术指标………………………………………………( 03 ) 五、环境条件…………………………………………………………………( 03 ) 六、计量标准的量值溯源和传递框图………………………………………( 04 ) 七、计量标准的重复性试验…………………………………………………( 05 ) 八、计量标准的稳定性考核……………………………………………………( 06 ) 九、检定或校准结果的测量不确定度评定…………………………………( 07 ) 十、检定或校准结果的验证…………………………………………………( 11 ) 十一、结论……………………………………………………………………( 12 ) 十二、附加说明…………………………………………………………………( 12 )

一、建立计量标准的目的 紫外可见分光光度计属强制检定的计量器具，为了统一这些计量器具的量值，向企业提供全面可靠的计量服务，确保该计量器具不影响我市的工业安全生产，卫生环境检测，建立了这一社会公用计量标准。 二、计量标准的工作原理及其组成 紫外可见分光光度计检定装置根据JJG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计检定规程》提供的方法, 紫外、可见分光光度计的主要检定项目是波长准确度和透射比准确度两项。 1、波长准确度检定： 在规定的条件下，用被测紫外可见分光光度计直接测标准滤光片（或溶液），测得的透射比波谷（波峰）所对应波长值，重复测量3次，其算术平均值与标准波长之差，即为波长示值误差。 2、透射比准确度检定： 用被测可见分光光度计在规定的波长处，以空气为参比，分别测（透射比标称值为10%、20%、30%）标准中性滤光片的透射比（示值），用被测紫外分光光度计在规定的波长处，以空白为参比，测重铬酸钾-高氯酸标准溶液的透射比（示值），重复测量3次，其算术平均值与相应下的透射比的标准值之差，即为透射比的示值误差。 氧化钬滤光片镨铒滤光片镨钕滤光片干涉滤光片低压汞灯 紫外可见分光光 度计 杂散光滤光片 重铬酸钾-高氯酸标准溶液 标准中性滤光片

752紫外可见分光光度计使用方法解析

752紫外可见分光光度计 一、仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理—一比耳定律。 τ=I/Io log I/Io=KCL A= KCL 从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时．透过的光是根据溶液的浓度而变化的，752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。 二、仪器的安装、使用、安装 1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查，电源电压是否正常，接地线是否牢固可靠，在得到确认后方和接通电源使用。 2 仪器经过运输和搬运等原因，会影响波长准确度，应进行仪器调校后使用。 使用：仪器使用前需开机预热30min。 本仪器键盘共有4个键，分别为； 1 A /τ/C/F 1SD 2 ▽／0％ 3?／100％ 4 A /τ/C/F键：每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。 A——吸光度（Absorbance） T——透射比（Trans） C——浓度（conc） F——斜率（Factor） (2)F值通过按键输入（后面介绍如何设置） 5SD键：该键具有2个功能 a)用于RS232串行口和计算机传输数据（单向传输数据，仪器发向计算机）。 b)当处于F状态时，具有确认的功能，即确认当前的F值，并自动转到C，计算当前的C 值（C=F*A）。 6 ▽／0％键：该键具有2个功能 a）调零；只有在τ状态时有效，打开样品室盖，按键后应显示0.000。 b）下降键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动减1，如果按住本键不放，目动减1会加快速度；如果F值为0后，再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。 7 ?／100％键；该键具有2个功能 a）只有在A、τ状态时有效，关闭样品室盖，按键后应显示0.000、100.0。 b）上升键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动加1，如果按住本键不放，自动加1会加快速度，如果F值为1999后，再按键它会自动变为0，再往键开始自动加l。 例如：设置斜率为1500。 方法一 T）按A／τ／C／F键切换到F状态。 b）如果当前F值为1000，则按?／100%键，直到F值为1500。 C）再按SD键，表示当前的F值为1500，然后自动回到C状态，假如所测的A值为0．234，则此时显示C值为0351。

紫外可见分光光度计的校正

实训二紫外可见分光光度计的校正 一、实训目的 1、了解紫外-可见分光光度的基本构造。 2、熟悉紫外可见分光光度计的操作技术。 3、熟悉校正波长和测量吸收值精度的原理和方法。 二、仪器与试剂 1、仪器：紫外-可见分光光度计，石英吸收池（1cm），容量瓶（1000m1），烧杯。 2、试剂：0.0600g→1000ml的K2Cr2O7的硫酸标准溶液（0.005mol/L），NaI溶液（10g/L），NaNO2溶液（50g/L）。 三、实训原理 紫外-可见分光光度计是单光束手工操作仪器，备有钨灯及氢灯两种光源，可用于可见及紫外光区。它是具有色散能力较高的单色器，狭缝可调，可得到较纯的单色光，适用于定性鉴别和定量分析。 新仪器启用前或仪器修理后或长期使用后均需对仪器的性能进行检定。仪器的性能主要是波长准确度与重现性、单色器的分辨能力、吸光度的准确性和重现性及杂散光等。 四、实训操作 1、吸收池配对性试验 每次测定前，应先用蒸馏水做吸收池配对性试验。两个吸收池透光率T相差应＜0.5％。 2、波长准确性与重现性 校验波长是否准确，可用谱线校正法。在吸收池中置一白纸挡住光路，转动波长至486nm附近，遮光观察白纸上蓝色斑。轻微移动波长，至使此蓝色光斑最亮时止。根据调整的波长范围观察所得到的相应颜色，并进行对比核对，判断波长的准确性。 3、吸收度的准确性与透光率重现性 在紫外-分光光度计中用作读取透光率的电位器的精度可达到0.2％，但是，由于其他原因，例如电压变化等，实际测得的透光率误差大于0.2％。一般要求透光率的精度、稳定性和重现性不超过0.5％。透光率的准确性可用已知吸光系数的物质核对，常用的是重铬酸钾。取在120℃干燥至恒重的基准K2Cr2O7约60mg，精密称定，用H2S04溶液(0.005mol／L)溶解并稀释至1000ml，摇匀。按下表规定的吸收峰与谷波长处测定。 将测得的吸光度，计算出其吸光系数，取平均值与表中规定值核对，如相对偏差在土1％以内，则透光率准确性好。K Cr O的H S0溶液（0.005mol／L)的E cm1% 透光率重现性可结合透光率准确性实验同时进行，即在固定波长、溶液浓度以及狭

紫外-可见分光光度计计量实用标准技术报告材料.docx

标准实用 计量标准技术报告 计量标准名称紫外可见分光光度计检定装置 计量标准负责人 建标单位名称（公章）新月市质量技术监督检验测试中心填写日期

目录 一、建立量准的目的?????????????????????( 01 ) 二、量准的工作原理及其成??????????????(01) 三、量准器及主要配套????????????????(0 2 ) 四、量准的主要技指??????????????????( 03 ) 五、境条件?????????????????????????( 0 3) 六、量准的量溯源和框???????????????(04) 七、量准的重复性???????????????????(0 5) 八、量准的定性考核????????????????????(06) 九、定或校准果的量不确定度定?????????????(07)

十、定或校准果的???????????????????(1 1 )十一、??????????????????????????( 1 2 ) 十二、附加明?????????????????????????(1 2 )

一、建立计量标准的目的 紫外可见分光光度计属强制检定的计量器具，为了统一这些计量器具的量值，向企业提供全面可靠的 计量服务，确保该计量器具不影响我市的工业安全生产，卫生环境检测，建立了这一社会公用计量标准。 二、计量标准的工作原理及其组成 紫外可见分光光度计检定装置根据JJG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计检定规程》提供 的方法 , 紫外、可见分光光度计的主要检定项目是波长准确度和透射比准确度两项。 1 、波长准确度检定： 在规定的条件下，用被测紫外可见分光光度计直接测标准滤光片（或溶液），测得的透射比波谷（波峰）所对应波长值，重复测量 3 次，其算术平均值与标准波长之差，即为波长示值误差。 2 、透射比准确度检定： 用被测可见分光光度计在规定的波长处，以空气为参比，分别测（透射比标称值为 10% 、20% 、30% ）标准中性滤光片的透射比（示值），用被测紫外分光光度计在规定的波长处，以空白为参比，测重铬酸钾-高氯酸标准溶液的透射比（示值），重复测量 3 次，其算术平均值与相应下的透射比的标准值之差，即为 透射比的示值误差。 紫外可见分光光 氧化钬滤光片 度计 镨铒滤光片 镨钕滤光片

紫外可见分光光度计 文档

紫外可见分光光度计 一．基本简介 紫外可见分光光度计简介1852年，比尔(Beer)参考了布给尔(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所发表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液层厚度相等时，颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例，从而奠定了分光光度法的理论基础，这就是著名的比尔朗伯定律。1854年，杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人将此理论应用于定量分析化学领域，并且设计了第一台比色计。到1918年，美国国家标准局制成了第一台紫外可见分光光度计。此后，紫外可见分光光度计经不断改进，又出现自动记录、自动打印、数字显示、微机控制等各种类型的仪器，使光度法的灵敏度和准确度也不断提高，其应用范围也不断扩大。 [1]从仪器理论上讲，各种紫外可见分光光度计，都是根据比耳定律设计的；而比耳定律研究的是在平行光、单色光的条件下，物质对光的吸收。但是，紫外可见分光光度计的单色器不可能得到真正的单色光。并且，单色器系统不同，它产生的单色光的纯度（光谱带宽）也不同，并且光通过物质时，也不可能是真正的平行光。因此，严格地说，实际工作中，任何紫外可见分光光度计，都不可能真正满足比耳定律。所以，紫外可见分光光度计都是针对近似平行光、近似单色光的条件设计的。所以，就看谁设计、制造仪器最能满足或接近比耳定律（或产生的比耳定律的偏离最小），谁的仪器到了使用者手里，由于非平行光或非单色光产生的分析误差最小，谁的仪器就最好（当然还有杂散光、噪声、稳定性等要求）。这就是从仪器学理论，去看紫外可见分光光度计的设计、制造误差的最根本、最本质的问题；也是使用者从仪器学理论去看紫外可见分光光度计的分析误差的最根本、最本质的问题。 二．工作原理 吸收光谱 物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。

可见分光光度计校准规程

MV_RR_CNG_0036可见分光光度计检定方法 1．可见分光光度计检定规程说明 编号 JJG 178—1996 名称（中文）可见分光光度计检定规程 （英文）Verification Regulation of Visible Range Spectrophotometer 归口单位浙江技术监督局 起草单位浙江省技术监督检测研究院 主要起草人王洁（浙江省技术监督检测研究院） 批准日期 1996年12月31日 实施日期 1997年6月1日 替代规程号 JJG 178—89 适用范围本规程适用于新制造、使用中和修理后、波长范围为360nm~800nm 或以此为主要谱区的可见分光光度计的检定。 主要技术要求1.稳定性 2.波长准确度 3.波长重复性 4.透射比准确性 5.透射比重复性 6.杂散辐射率 7.光谱带宽 8.τ- A换档偏差 是否分级分为 3 级； 检定周期（年） 1 附录数目 5 出版单位中国计量出版社 检定用标准物质 相关技术文件 备注 附录（本附录仅为技术文件的摘要，如需全文，请与出版发行单位联系）146

2．可见分光光度计检定规程摘要 一技术要求 1 外观与初步检查 1.1 样品室应密封良好，无漏光现象。样品架应推拉自如、正确定位。 1.2 仪器处于工作状态时，光源发光应稳定无闪烁现象。当波长置于580 nm处时，在样品室内应能看到正常的黄色光斑。 1.3 仪器光谱范围的两端(有灵敏度换档开关的仪器，可选在合适的灵敏度档次)，光量调节系统应能使透射比超过100％。 1.4 吸收池的透光面应光洁，无划痕和斑点，任一面不得有裂纹。 2 稳定度 2.1 仪器零点在3 min内漂移引起的透射比示值变化应符合相应的要求。 2.2 光电流在3 min内漂移引起的透射比示值变化应符合有关要求。 2.3 电源电压220 V变动其±10％时，仪器透射比示值变化应符合有关的要求。 3 波长准确度与波长重复性 4 透射比准确度与透射比重复性 5 杂散辐射率(杂散光) 光栅型仪器在波长360 nm处，棱镜型仪器在波长420 nm处，杂散辐射率应不大于规定的技术指标。 6 光谱带宽 光栅型仪器光谱带宽应不大于规定的技术指标。 7 τ-A换档偏差 带有τ-A换档的仪器，选择开关(或按键)换档引起的吸光度示值偏差应符合要求。 8 吸收池的配套性 配套使用的同一光径吸收池间的透射比之差(在440 nm与700nm处)不得超过0.5％。 9 绝缘电阻 仪器的绝缘电阻应不小于5 MΩ。 二检定条件 10 检定环境条件 10.1 温度（10～30）℃；相对湿度小于85％RH。 10.2 电源电压 (220±22) V，频率(50±1) Hz。 10.3 仪器检定处不得有强光直射；放置仪器的工作台应平稳。周围无强磁场、电场干扰，无强气流及腐蚀性气体。 11 检定设备 11.1 调压变压器，规格为500 VA，输出0～250 V可变。 11.2 频率计，45～55 Hz，准确度0.5％。 11.3 交流电压表，准确度2.5 级。 11.4 兆欧表，试验电压500 V，准确度1.0 级。 * *12 标准器与标准物质 147

原子吸收分光光度计检定规程

国家标准-原子吸收检定规程详文 目录 一 ?概述 二 ?技术条件 三 ?检定条件 四检定项目和检定方法 五检定结果处理和检定周期 附录检定用空心阴极灯稳定性（暂行）检测方法 原子吸收分光光度计检定规程 本规程适用于新制造、使用中和修理后的单、双光束原子吸收分光光度计（以下简称仪器）的检定。 一 ??概述 原子吸收分光光度计是根据被测元素的基态原子对特征辐射的吸收程度进行定量分析的仪器。其测量原理是基于光吸收定律： A=–lg I/I =–lg T =KCL 0? 式中A吸光度（其单位为A ）； ??? ??????I入射光强度 ??? ??????I0透射光强度 T透射比 ???? K吸光系数 ???? C样品中被测元素的浓度 ??? ?L光通过原子化器的光程 仪器的主要结构如下：特征辐射光源---原子化器---单色仪---检测系统 按光束形式可将仪器分为单光束型和双光束型，原子化器可分为火焰原子化器及无火焰（石墨炉）原子化器等。

二 ?技术要求 1 ?外观与初步检查 ?仪器应有下列标志：仪器名称、型号、制造厂名、出厂编号与出厂日期等。 ?仪器及附件的所有紧固件应紧固良好；连接件应连接良好；运动部件应运动灵活、平稳；气路系统应可靠密封，不得泄露。 ?仪器的各旋钮及功能键应能正常工作；由计算机控制或带微机的仪器，当由键盘输入指令时，各相应的功能应正常。 2 波长示值误差与重复性 波长示差误差不大于±，波长重复性优于 3 分辨率 仪器光谱带宽为时，应可分辨和双线 4 基线稳定性 30min内静态基线和点火基线的稳定性应不大于表1所列指标。 表1????????????????? ??????????????????基线稳定性?????? ??????????????????????????（A） 5 边缘能量 在仪器波长处，应能对,铯谱线进行测定，其瞬时躁声应小于。 ）和精密度（RSD） 6 火焰法测定铜的检出限（C L(K =3) 新制造仪器应分别不大于μg/ml和1%；使用中和修理后的仪器应分别不大于μg/ml和%。 ），特征量（C。M。）和精密度（RSD） 7 石墨炉法测定隔的检出限（C L(K =3)

721 722 752分光光度计说明书

5.3故障分析 故障现象故障原因排除方法 1.开启电源开关后，仪器无反应。1.电源未接通。 1.检查供电电源。 2.电源保险丝断。 2.更换保险丝。 3仪器电源开关接触不良。 3.更换仪器电源开关。 2.显示不稳定1.仪器预热时间不够。 1.保证开机时间 20min。 2.环境振动过大，光源附近气 流过大或外界强光照。 2.改善工作环境。 3.电源电压不良。 3.检查电源电压。 4.仪器接地不良。 4.改善接地状态。 3.调不到0% 1.没放黑体或者黑体位置不 对。 1.正确放入黑体。 2.放大器坏。 2.修理放大器。 4.调不到100% 1.钨卤素灯不亮。 1.检查灯电源电路。 2.光路不准。 2.调整光路。 3.放大器坏。3修理放大器。 5.浓度计算失准1.显示板坏。 1.修理或更换显示板。 目录 1概况 1.1仪器的特点和用途 1.2主要规格和技术参数 1.2.1仪器技术指标 1.2.2仪器使用条件 1.2.3仪器规格 1.3仪器的工作原理 1.4仪器的光学原理 2.仪器的安装 2.1附件备件的检查 2.2仪器的工作环境 2.3安装连接 3.仪器的使用及操作方法 3.1键盘的使用说明 3.2仪器的使用 4.仪器的维护 5.仪器的调校和故障分析 5.1灯的更换 5.2波长准确度校验 5.3故障分析

1、概况 1.1仪器的特点及用途 特点：1.大容量样品室，（可以使用5mm-100mm的比色皿） 2.对称光学性能的CT型单色器光路，更优的测光精度 3.大屏幕液晶显示器（4位LCD）显示 4.仪器自动调零、自动调满度，操作简单方便 5.设计新颖的工程塑料外壳，适应任何实验室。 用途：仪器能在紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量的分析。 该仪器可广泛地应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化 工、环境保护、质量控制等部门，是理化实验室常用的分析仪器 之一。LCD显示器和键盘，使得操作更具有人性化 1.2 仪器的主要技术参数及规格 1.2.1 仪器技术指标 721 722（N/S）752（N） 波长范围360nm~1020nm 325nm~1020nm 195nm~1020nm 波长准确度±3nm ±2nm ±2nm 波长重复性 1.5nm 1nm 1nm 光谱带宽6nm 5nm 4nm 杂散光 1.0%τ (在360nm处) 0.5%τ (在360nm处) 0.5%τ(在220、 360nm处) 透射比测量0.0%τ~199.9%τ0.0%τ~199.9%τ0.0%τ~199.9%τ吸光度测量0.000A~1.999A 0.000A~1.999A 0.000A~1.999A 透射比准确±1.0%τ±0.5%τ±0.5%τ 透射比重复±0.5%τ±0.5%τ±0.5%τ 稳定性≤0.5τ/3min≤0.5τ/3min≤0.5τ/3min 噪声0.5%τ0.5%τ0.5%τ 亮电流≤0.5τ/3min ≤0.5τ/3min ≤0.5τ/3min 接收元件光电池光电池光电池5、仪器的调校和故障分析 仪器使用较长时间后，仪器的性能指标有所变化，需要进行调校或修理，现简单介绍，以供参考。 5.1钨卤素灯的更换： 光源灯是易损件，当损坏件更换或由于仪器搬运后均可能偏离正常的位置，为了使仪器有足够的灵敏度，正确的调整光源灯的位置则显得更为重要，在更换光源灯时应戴上手套，以防止沾污灯壳而影响能量。 本仪器的光源灯采用6V/10W插入式钨卤素灯，更换时应先切断电源，待灯冷却后，取出损坏的钨卤素灯，换上新灯，将仪器的波长置于550nm处，按A/T/C/F键，切换到T状态，不要调节ABS0/100%T键，观察显示读数，调整灯位置显示读数最高即可。 5.2波长准确度校验 本仪器采用镨钕滤光片529nm特征吸收峰（需经标定）。通过逐点测试法来进行检定和校正。 本仪器分光系统采用光栅作为色散元件，其色散是线性的，因此波长分度的刻度也是线性的。当通过逐点测试法记录的刻度波长与镨钕滤光片特征吸收波长值超过误差时，则可卸下波长手轮，旋松波长刻度盘上的三个定位螺钉，将刻度指示置特征吸收波长值，旋紧螺钉即可。

694-90原子吸收分光光度计检定规程

MV_RR_CNG_0167 原子吸收分光光度计检定规程 1.原子吸收分光光度计检定规程说明 2. 原子吸收分光光度计检定规程摘要 一 概 述 原子吸收分光光度计是根据被测元素的基态原子对特征辐射的吸收程度进行定量分析的仪器。其测量原理是基于光吸收定律：

https://www.wendangku.net/doc/fa16067844.html, https://www.wendangku.net/doc/fa16067844.html, https://www.wendangku.net/doc/fa16067844.html, A ＝－1g l —l ＝－1g T ＝KCL (1) 式中 A ——吸光度 (其单位为A)； I 0——入射光强度； I ——透射光强度； T ——透射比； K ——吸光系数； C ——样品中波测元素的浓度； 按光束形式可将仪器分为单光束型及双光束型；原子化器可分为火焰原子化器及无火焰 (石墨炉) 原子化器等。 二 技术要求 1 外观与初步检查 1.1 仪器应有下列标志：仪器名称、型号、制造厂名、出厂编号与出厂日期等。 1.2 仪器及附件的所有紧固件均应紧固良好；连接件应连接良好；运动部位应运动灵活、平稳；气路系统应可靠密封，不得泄漏。 1.3 仪器的各旋钮及功能键应能正常工作；由计算机控制或带微机的仪器，当由键盘输入指令时，各相应的功能应正常。 2 波长示值误差与重复性 波长示值误差不大于±0.5 nm，波长重复性优于0.3 nm。 3 分辨率 仪器光谱带宽为0.2 nm时，应可分辨锰279.5 nm和279.8 nm双线。 4 基线稳定性 30 min内静态基线和点火基线的稳定性应不大于表1所列指标。 表 1 基线稳定性 (A) 项 目 新 制 造 使用中和修理后 最大零漂 ±0.005 ±0.006 静态基线 最大瞬时噪声 0.005 0.006 最大零漂 ±0.006 ±0.008 点火基线 最大瞬时噪声 0.006 0.008 5 边缘能量 在仪器边缘波长处，应能对砷193.7 nm，铯852.1 nm谱线进行测定，其瞬时噪声应小于0.03 A。 6 火焰法测定铜的检出限 (C L(K = 3)) 和精密度 (RSD) https://www.wendangku.net/doc/fa16067844.html, https://www.wendangku.net/doc/fa16067844.html, https://www.wendangku.net/doc/fa16067844.html, https://www.wendangku.net/doc/fa16067844.html,

紫外可见分光光度计SP-752操作规程

SP-752型紫外可见分光光度计操作规程 1操作方法 1.1.1准备工作 1.1.2打开光度计电源开关，即进入光度计自检过程，自检过程中，切勿打开 样品室盖，自检通过后即可。 1.1.3预热20min。 1.1.4检查透过率模式下，挡光位置，透过率是否显示00.0%T。否则要调整暗 电流，按“ 0%T ”键，使透过率显示为00.0%T。 1.1.5返回对光位置，仍能显示100.0%T，否则重新调100%T。 1.1.6通过“”和“”键，设定测试波长；按“ 100%T ”键，使透过率显 示为100.0%。 1.2光度测试 1.2.1 透过率（T）测试 1.2.1.1 仪器默认显示状态为“T”（其它状态下可按“ MODE ”键，选择T方式）。 1.2.1.2 把参比物质放入光路，按“ 100%T ”键，使透过强度显示为100.0%。1.2.1.3 把待测样品放入光路，显示值即为样品的实际透过率。 1.2.2 吸光度（A）测试 1.2.2.1 按“ MODE ”键，选择A方式，此时显示0.000A。 1.2.2.2 把参比物质放入光路，按“ 100%T ”键，扣除空白吸光度（显示0.000A）。 1.2.2.3 然后把待测样品放入光路，显示值即为样品的实际吸光度。 1.2.3 浓度（C）测试 1.2.3.1 已知浓度因子，求待测样品浓度 1.2.3.1.1 按“ MODE ”键，选择浓度方式，此时显示浓度为0.0000。 1.2.3.1.2 把参比溶液放入光路，按“ 100%T ”键，扣除空白值（显示0.0000）。 1.2.3.1.3 把待测样品放入光路，输入浓度因子：按“FUNC”键直到显示 “STD/FACT=1234”（或“请输入标样因子：_ _ _ _ ”）,然后通过“” 和“”键及“ ENT ”键，对标样因子进行设定。[具体数值的输入（怎 样引入小数点并确定其位置）：先输入一定数值，按“ ENT ”键，引入 小数点，再由“”和“”键来移动小数点位置（按动“”键， 小数点往左移）。例如，输入浓度因子1.235.首先通过“”和“”

UV752系列紫外可见分光光度计操作规程

紫外可见分光光度计操作规程 适用范围：适用于752型紫外可见分光光度计。 操作规程： 1. 打开仪器开关，仪器使用前应预热30分钟。 2. 转动波长旋钮，观察波长显示窗，调整至需要的测量波长。 3. 根据测量波长，拨动光源切换杆，手动切换光源。200-339nm使用氘灯，切换杆拨至紫外区；340nm-1000nm使用卤钨灯，切换杆拨至可见区。 4. 调T零 在透视比（T）模式，将遮光体放入样品架，合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路。按下“调0%”键，屏幕上显示“000.0”或“-000.0”时，调T零完成。 5.调100%T/ OA 先用参比（空白）溶液荡洗比色皿2-3次，将参比（空白）溶液倒入比色皿，溶液量约为比色皿高度的3/4，用擦镜纸将透光面擦拭干净，按一定的方向，将比色皿放入样品架。合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路。按下“调100%”键，屏幕上显示“BL”延时数秒便出现“100.0”（T模式）或“000.0”、“-000.0”（A模式）。调100%T/ OA完成。 6.测量吸光度 6.1参照操作步骤3、步骤4。 6.2在吸光度（A）模式，参照步骤5调100%T/ OA。 6.3用待测溶液荡洗比色皿2-3次，将待测溶液倒入比色皿，溶液量约为比色皿 高度的3/4，用擦镜纸将透光面擦拭干净，按一定的方向，将比色皿放入样品架。合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路，读取测量数据。 7.测量透视比 7.1参照操作步骤3、步骤4。 7.2在透视比（T）模式，参照步骤5调100%T/ OA。 7.3用待测溶液荡洗比色皿2-3次，将待测溶液倒入比色皿，溶液量约为比色皿 高度的3/4，用擦镜纸将透光面擦拭干净，按一定的方向，将比色皿放入样

紫外可见分光光度计及其应用

紫外可见分光光度计及其应用 科技论文写作期末作业 西北民族大学生命科学与工程学院 11级生物技术(1)班 符朝方 学号:P112114841 紫外可见分光光度计及其应用 李诗哲 西北民族大学生命科学与工程学院兰州 730100 摘要:紫外可见分光光度计对于分析人员来说是最有用的分析工具之一，几乎每一个分析实验室都离不开紫外可见分光光度计。下面介绍了紫外分光光度计的原理、结构及其特点，并介绍了它在生物领域的应用及其他方面的应用1引言:紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器，无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域，还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理行业，紫外可见分光光度计都获得了日益广泛的应用。 2原理:紫外可见分光光度法 【1】紫外可见分光光度法是根据物质分子对波长为200~760nm的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长的光线能量小，波长短的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了人射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有不同的分子、原子和不同的分

子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的 某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。 【2】2.1有机化合物的紫外可见吸收光谱 有机化合物的电子跃迁 与紫外可见吸收光谱有关的电子有三种[[4]，即形成单键的σ电子、形成双键的π电子以及未参与成键的n电子。 跃迁类型有:σ?σ*、n?σ*，π?π*、n?π四种。 饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ?σ*，n?σ*跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区，吸收峰低于200nm，实际应用价值不大。不饱合机化合物的电子跃迁类型为n?π*，π?π*跃迁，吸收峰一般大于200nm. 2.2有机化合物的吸收带 吸收带(absorption band):在紫外光谱中，吸收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分子轨道的种类，可将吸收带分为四种类型。 (1)R吸收带 (2)K吸收带 (3)B吸收带 (4)E吸收带 2.3无机化合物的紫外可见吸收光谱 无机化合物的UV-Vis光谱吸收光谱主要有:电荷 迁移跃迁及配位场跃迁。 (1)电荷迁移光谱

可见分光光度计使用方法

721可见分光光度计使用方法 一、开机预热 仪器在使用前应预热30分钟。 二、波长调整 转动波长旋钮，并观察波长显示窗，调整至需要的测试波长。 注意事项：转动测试波长调100%T/0A后，以稳定5分钟后进行测试为好(符合行业标准及质监局检定规程要求)。 三、设置测试模式 按动“功能键”，便可切换测试模式。相应的测试模式循环如下：*开机默认的测试方式为吸光度方式 四、结果打印(721型无此功能) 在得到测试结果后按动“打印”键便可打印结果(需外接标准串行打印机)。 五、光源切换(适用于752、754、755B型) 因为仪器在紫外区和可见区使用不同的光源，所以需要波动光源切换杆来手动的切换光源。建议的光源切换波长为340nm，即200nm-339nm适应氘灯，340nm-1000nm使用卤素灯。 注意事项：如果光源选择不正确，或光源切换杆不到位，将直接影响仪器的稳定性。特殊测试要求除外。 六、比色皿配对性 仪器所附的比色皿是经过配对测试的，未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。适应比色皿一套两只，供紫外光谱区使用，置入样品架时，两只石英比色皿上标记Q或箭头方向要一致。玻璃比色皿一套四只，供可见光谱区使用。 石英比色皿和玻璃比色皿不能混用，更不能和其他不经配对的比色皿混用。用手拿比色皿应握比色皿的磨砂表面，不应该接触比色皿的头光面，即透光面上不能有手印或溶液痕迹，待测溶液中不能有气泡、悬浮物，否则也将影响样品的测试精度。比色皿在使用完毕后应立即清洗干净。 七、调T零(0%T) 1.在T模式时，将遮光体置入样品架(如图七所示)，合上样品室盖，并拉动样品架拉杆使其进入光路。然后按动“调0%T”键，显示器上显示“00.0”或“-00.0”，便完成调T 零，完成调T零后，取出遮光体。 注意事项：1.测试模式应在透射比(T)模式； 2.如果未置入遮光体合上样品室盖，并使其进入光路便无法完成调T零；

2021新版使用分光光度计安全操作规程

( 操作规程 ) 单位：_________________________ 姓名：_________________________ 日期：_________________________ 精品文档 / Word文档 / 文字可改 2021新版使用分光光度计安全 操作规程 Safety operating procedures refer to documents describing all aspects of work steps and operating procedures that comply with production safety laws and regulations.

2021新版使用分光光度计安全操作规程 使用前应先检查电路接线是否正确，接地是否良好。 2.打开电源开关，打开样品池盖，预热二十分钟和方可使用。 3.不要长时间开机，让光电池疲劳，使测量结果有误差，一般开机2小时。 4.手指不能接触比色皿的透光面，以免影响测定结果，比色皿透光面要轻轻用擦镜纸擦拭。 5.测定高浓度溶液时，要将溶液稀释。 6.测量易挥发和有腐蚀性的样品溶液时，应在比色皿上加盖，认防样品液挥发或溢出。 7.测定完毕，关闭仪器电源开关，取出比色皿，清洗干净放入比色皿盆内，再切断电源。 8.为了避免仪器积灰和沾污，在停止工作的时间里，用防尘罩

罩住仪器，同时在罩子内放置干燥剂，以免灯室受潮、反射镜镜面发霉或沾污，影响仪器日后的工作，如果干燥剂变色要及时更换。 9.仪器工作数月或搬动后，要检查波长准确度，以确保仪器的使用和测定精度。 10.使用过程中出现异常，要停止使用，并通知维修人员进行修理。 云博创意设计 MzYunBo Creative Design Co., Ltd.

72型分光光度计工作原理

72型分光光度计工作原理 72型分光光度计是可见光分光光度计，波长范围为420nm～700nm，它由三大部分组成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。 72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律，它是根据相对测量原理工作的，即先选定某一溶剂作为标准溶液，设定其透光率为100%，被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的，即让单色光分别通过被测试样和标准溶液，二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率。如图所示，白色光源经入射狭缝、反射镜和透光镜后，变成平行光进入棱镜，色散后的单色光经镀铝的反射镜反射后，再经过透镜并聚光于出射狭缝上，狭缝宽度为0.32nm。反射镜和棱镜组装在一可旋转的转盘上并由波长调节器的凸轮所带动，转动波长调节器便可以在出光狭缝后面选择到任一波长的单色光。单色光透过样品吸收池后由一光量调节器调节为适度的光通量，最后被光电电池吸收，转换成电流后由微电计指示，从刻度标尺上直接读出透光率的值。 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。 分光光度计的简单原理 分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被

吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，尔后测试空白液和样品液。然而，实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器，表现出的吸光值漂移越大。 事实上，分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定的准确度和精确度。如EppendorfBiophotometer的准确度≤1.0%（1A）。这样多次测试的结果在均值 1.0%左右之间变动，都是正常的。另外，还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值，离子浓度等：在测试时，离子浓度太高，也会导致读数漂移，因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液，如TE，可大大稳定读数。样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素：由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒，尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了最大程度减少颗

(完整版)紫外可见分光光度计--原理及使用

应用 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。 基本原理 分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息，可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。 朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即 A= kcl 式中比例常数k与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。 组成 各种型号的紫外－可见分光光度计，就其基本结构来说，都是由五个基本部分组成，即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。 1.光源 在紫外可见分光光度计中，常用的光源有两类：热辐射光源和气体放电光源。热辐射光源用于可见光区，如钨灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。 2．单色器 单色器的主要组成：入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。 单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。 3.吸收池 吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。吸收池的种类很多，其光径可在0.1~10cm之间，其中以1cm光径吸收池最为常用。 4、检测器 检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。 5、信号显示系统 常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。