猴头菌提取物抗氧化活性研究
猴头菌提取物抗氧化活性研究
分别采用还原力测定法、Fenton法、2,2-二苯基-1-苦肼基（DPPH）分析法和改良邻苯三酚自氧化法，对猴头菌子实体水提物和醇提物的总还原力，清
除?OH、DPPH?和O - 2?自由基的能力进行测定。结果表明：醇提物还原力
较强，且还原力大小与浓度成正比；猴头菌水提物和醇提物均有清除?OH、DPPH?
和O - 2?自由基的能力，且水提物的效果比醇提物好；水提物和醇提物对?OH、DPPH?和O - 2?的清除能力依次为DPPH?、?OH和O - 2?，并且在一定浓
度范围内，清除率与浓度成正比。
猴头菌；清除自由基；抗氧化活性
人体持续暴露在活性氧与促氧化剂中时，很容易引起机体组织产生氧化应激，导致代谢性功能紊乱以及一系列的慢性疾病［1］。食用一些富含具有抗氧化活性物质的功能性食品可以减轻机体组织氧化应激或预防损伤。一些合成抗氧化剂与天然抗氧化剂相比，尽管具有很强的清除自由基活性，但同时也具有强的毒副作用，因此人们倾向于从自然界中寻求更安全的抗氧化剂。LEE等［2］从桦褐孔菌（Inonotus obliquus）中分离到一些具有较强活性的抗氧化成分（多酚类化合物）。MAU等［3］研究表明灵芝(Ganoderma lucidum)是很好的天然抗氧化剂。同为食用菌的猴头菌(Hericium erinaceus)是著名的药膳两用真菌，具有抗溃疡、抗炎症、抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳、提高机体耐缺氧能力、增加心肌血液输出量、加速机体血液循环、降血糖、保肝护肝和降血脂、降血压等作用［4］。笔者通过对猴头菌子实体的水提物和醇提物总还原力、清除?OH、2,2-二苯基-1-苦
肼基自由基（DPPH?）及O - 2?自由基的研究，旨在为其在医药保健方面的
利用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1材料
猴头菌（H. erinaceus)子实体由上海市农业科学院食用菌研究所提供。
1.2主要试剂与仪器
柠檬酸、Na 2HPO 4、NaH 2PO 4、六氰合铁酸钾（铁氰化钾）、醋酸、三氯化铁、维生素C、FeSO 4?7H 2O、30％H 2O 2溶液、水杨酸、无水乙醇、95％乙醇等（国药集团化学试剂有限公司），DPPH（美国Sigma公司），实验用水（娃哈哈纯净水）；infinite M200 PRO酶标仪（瑞士TECAN公司）；UVmini-1240分光光度计（日本SHIMADZU 公司)。
1.3提取物的制备
1.3.1水提物
干燥猴头菌子实体，用粉碎机粉碎，称取50 g粉末，加1 L蒸馏水超声20 min，过滤，滤液减压浓缩，反复3次，合并浓缩液，转至蒸发皿中，60 ℃水浴蒸干，备用。
1.3.2醇提物
同样称取50 g猴头菌子实体粉末，加1 L 95％乙醇超声20 min，过滤，其
ABTS_法测定葡萄酒抗氧化活性的研究
第37卷 第11期2009年11月 西北农林科技大学学报(自然科学版) Journal of Northwest A&F University(Nat.Sci.Ed.) Vol.37No.11 Nov.2009 ABTS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的研究3 李 华,李 勇,吴 莹,王 华 (西北农林科技大学葡萄酒学院,陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心,陕西杨凌712100) [摘 要] 【目的】确定AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数。【方法】应用福林肖卡比色法(FC)测定36种葡萄酒样品的总酚含量(Total phenol index,TPI),从中选出9种总酚含量具代表性的葡萄酒样品,并采用AB TS?+法测定反应不同时间和稀释不同倍数葡萄酒样品的抗氧化活性。【结果】AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间为2～5min;红葡萄酒的最佳稀释倍数为0.2∶10～0.4∶10,桃红葡萄酒的最佳稀释倍数为1∶10～4∶10,白葡萄酒的最佳稀释倍数为3∶10～7∶10。【结论】得到了AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数,且无需事先测定总酚含量,简化了试验步骤。 [关键词] 葡萄酒;抗氧化活性;AB TS?+法;反应时间;稀释倍数 [中图分类号] TS262.6[文献标识码] A[文章编号] 167129387(2009)1120090208 Research of antioxidant activity of wine s determined by the ABTS?+method L I Hua,L I Y ong,WU Y ing,WAN G Hua (College of Enolog y,Engineering Research Center f or V iti2V i nicult ure,N ort hwest A&F universit y,Yangli ng,S haanx i712100,China) Abstract:【Objective】The p resent st udy aimed to confirm t he best reaction time and wine dilution of t he AB TS?+met hod.【Met hod】The Folin2Ciocalteu colorimetry was used to measure t he total p henol in2 dex of36kinds of wines and t hen9kinds of rep resentative samples were selected f rom t hem,AB TS?+ met hod was used to measure t he antioxidant activities of wines wit h different reaction time and different di2 lutio ns,and was analyzed t he experiment result.【Result】The result s showed t hat t he best reaction time of t he AB TS?+met hod is2to5minutes,t he best dilution range,0.2∶10to0.4∶10for red wines,1∶10to 4∶10for ro se wines,and3∶10to7∶10for white wines.【Conclusion】The st udy has obtained t he best re2 action time and wine dilution to measure antioxident activity of wines by AB TS?+met hod,and t here is no need to measure total p henol content beforehand,so t he test p rocedure is simplified. K ey w ords:wine;antioxidant activity;AB TS?+met hod;reaction time;dilution 经过研究和分析发现,葡萄酒中含有大量的多酚类物质,如白藜芦醇、儿茶酚、表儿茶精、槲皮酮和芸香苷等,这些多酚类物质具有抗氧化活性,除了抑制低密度脂蛋白的氧化、预防心血管疾病以外,还有抗癌、抗炎症和抗血小板凝聚等功能[1],但不同的品种、气候、地理条件和工艺措施,导致葡萄酒中酚类物质在数量和种类上都有明显不同[223]。因此,如何评价葡萄酒中酚类物质的抗氧化活性很有现实意义。 AB TS?+在414,645,734和815nm处均有特征吸收[4]。Miller等[5]在1993年首次介绍了用AB TS?+法来评价一些化合物的抗氧化活性,即根据待测化合物清除AB TS?+引起的吸光度变化来评价其抗氧化活性。此后,AB TS?+法成为一种被广泛采用的抗氧化活性测定方法,用于饮料和食 3[收稿日期] 2009203206 [基金项目] 陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项“陕西省葡萄与葡萄酒产业关键研究”(2007ZD KG209) [作者简介] 李 华(1959―),男,重庆市梁平人,教授,博士生导师,主要从事葡萄与葡萄酒研究。 E2mail:lihuawine@https://www.wendangku.net/doc/129855542.html,
抗氧化酶活性等测定方法
叶绿体得提取 一、试剂配置 １、PＢS提取液:每L水依次加入MES(１9５.2×0。05=９、7６g)、山梨糖醇(0。33×182。2＝60。1２6g)、ＮaCｌ(０、０10×58.5=0、５85g)、MgCｌ(０.002×95=0、19g)、EDＴA(292、２5×０.0０２=０、５84５g)、KH2PO４(２00×0.0005=０、１g);使用时加入ASＡ—Nａ(１98。1×0、00２=0、３962g); 2、悬浮液:将ＰBS提取液中得MES换为238。３×0.05＝１１、９15g得HEＰＥS(238、3×０。05=11。915ｇ); ３、8０%Pｅrｃoｌ:8０ml原液+２0ml水;40％Perｃol:４0ｍl原液＋60ml水; 实际配制: PBS提取液2000ｍl(3个处理*2个品种＊３个重复＊20ml＊３次=1０80mｌ), 悬浮液100ml(３个处理＊2个品种＊3个重复*1mｌ＊3次＝5４ml); 8０％Percol ２０0ml;40%Percｏl 200ml。(3个处理*2个品种*3个重复*3mｌ＊3次=162ｍl) 二、提取步骤 1、10g鲜样加20ｍl提取ＰＢS(50mM MES PH６、1,含0、３3M山梨糖醇,10mM NaＣl,2mMＭgCｌ２,２ｍM EＤTA,０.5 mMKH2PＯ４,2mM ASA—Ｎa,ASＡ—Na使用前现配现加) 2、快速研磨,使叶片碎成绿豆粒大小,４层纱布过滤,去除残渣(注意过滤时不可用力挤压,以免叶绿体膜破碎) 3、滤液20００g ３ｍin,小心倒出上清液,将离心管放入离心机后,使离心机得加速很快上升到预定值(水平转头,加速度调到9),约经30s后很快使其下降停止,整个离心持续大约2—3ｍｉｎ左右完成; 4、沉淀用１ml提取液漂洗表面悬浮物; 5、用1ml悬浮液(５０mM HＥPＥS pＨ7。6,含０、３３mM山梨糖醇,１０mM NaＣl,2mM MgＣl2,2mM EDTA,0。5mMKH2PＯ４,2mM ASA－Ｎａ,ASＡ-Na使用前现配现加)将沉淀悬浮,在分散叶绿体时宜用毛笔轻轻刷,或者用手握住离心管在冰块之间搅动,使叶绿体由于震动分散开来,不要用棉球吸滤,以防被膜压破。叶绿体悬浮时要浓点,含叶绿素２ｍg、ml-1以上,这样有利于保持活性。 6、２000g 1min; 7、沉淀再用悬浮液悬浮;(悬浮液同5,可以不做) 8、用Ｐｅrcol试剂进行梯度离心(将3ml含有80％Peｒcｏl(原液按100％算)铺在１0mｌ离心管下层,再把３ｍl 40％Perｃol铺在离心管中层,然后将1mｌ叶绿体悬浮液轻轻铺在离心管上层)１500ｇ2-3mｉn(用
猴头菌提取物颗粒治疗小儿感染后脾虚综合征58例
龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/129855542.html, 猴头菌提取物颗粒治疗小儿感染后脾虚综合征58例 作者：赵敏耿文婧刘静李雪苏华明 来源：《健康必读（上旬刊）》2019年第05期 【摘 ;要】目的：探讨猴头菌提取物颗粒治疗小儿感染后脾虚综合征的临床疗效。方法：选取我院58例小儿感染后脾虚综合征患者，给予双歧杆菌乳杆菌三联活菌片和猴头菌提取物颗粒治疗，观察治疗后的总体疗效。结果：58 例患者，显效50例，有效6例，无效2例，总有效率为96.6%。结论：猴头菌提取物颗粒能够明显提高小儿感染后脾虚综合征治疗的临床疗效，显著改善患儿临床症状，值得临床推广。 【关键词】猴头菌提取物颗粒;小儿感染后脾虚综合征; 【中图分类号】R272 ;;;;;【文献标识码】A; ;;;;【文章编号】1672-3783（2019）05-0057-02 小儿感染后脾虚综合征，最早是由中医儿科专家孟仲法提出的，是指患儿在感染后形成长期、持续的脾虚证，主要表现为食纳不佳、面色恍白、泄泻、腹胀、舌苔白腻等症状及体征，本病的发病机理为脾虚不运、湿困积滞 [1] 。目前临床上对于本病的治疗，仅仅是对症改善相关症状，疗效欠佳。笔者在常规服用双歧杆菌三联活菌片的基础上加用猴头菌提取物颗粒治疗小儿感染后脾虚综合征 58 例，取得较好效果，报道如下。 1 资料与方法 1.1一般资料 58例小儿感染后脾虚综合征患者均来自我院中医门诊和儿科门诊，其中男35例，女23例，年龄3～12岁，平均年龄（5.9±1.5）岁，所有患儿均符合《中药新药临床研究指导原则》中脾气虚证的相关诊断标準[2]及孟仲法的相关诊断标准[3]。 1.2治疗方法
猴头菌提取物抗氧化活性研究
猴头菌提取物抗氧化活性研究 分别采用还原力测定法、Fenton法、2,2-二苯基-1-苦肼基（DPPH）分析法和改良邻苯三酚自氧化法，对猴头菌子实体水提物和醇提物的总还原力，清 除?OH、DPPH?和O - 2?自由基的能力进行测定。结果表明：醇提物还原力 较强，且还原力大小与浓度成正比；猴头菌水提物和醇提物均有清除?OH、DPPH? 和O - 2?自由基的能力，且水提物的效果比醇提物好；水提物和醇提物对?OH、DPPH?和O - 2?的清除能力依次为DPPH?、?OH和O - 2?，并且在一定浓 度范围内，清除率与浓度成正比。 猴头菌；清除自由基；抗氧化活性 人体持续暴露在活性氧与促氧化剂中时，很容易引起机体组织产生氧化应激，导致代谢性功能紊乱以及一系列的慢性疾病［1］。食用一些富含具有抗氧化活性物质的功能性食品可以减轻机体组织氧化应激或预防损伤。一些合成抗氧化剂与天然抗氧化剂相比，尽管具有很强的清除自由基活性，但同时也具有强的毒副作用，因此人们倾向于从自然界中寻求更安全的抗氧化剂。LEE等［2］从桦褐孔菌（Inonotus obliquus）中分离到一些具有较强活性的抗氧化成分（多酚类化合物）。MAU等［3］研究表明灵芝(Ganoderma lucidum)是很好的天然抗氧化剂。同为食用菌的猴头菌(Hericium erinaceus)是著名的药膳两用真菌，具有抗溃疡、抗炎症、抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳、提高机体耐缺氧能力、增加心肌血液输出量、加速机体血液循环、降血糖、保肝护肝和降血脂、降血压等作用［4］。笔者通过对猴头菌子实体的水提物和醇提物总还原力、清除?OH、2,2-二苯基-1-苦 肼基自由基（DPPH?）及O - 2?自由基的研究，旨在为其在医药保健方面的 利用提供理论依据。 1 材料与方法 1.1材料 猴头菌（H. erinaceus)子实体由上海市农业科学院食用菌研究所提供。 1.2主要试剂与仪器 柠檬酸、Na 2HPO 4、NaH 2PO 4、六氰合铁酸钾（铁氰化钾）、醋酸、三氯化铁、维生素C、FeSO 4?7H 2O、30％H 2O 2溶液、水杨酸、无水乙醇、95％乙醇等（国药集团化学试剂有限公司），DPPH（美国Sigma公司），实验用水（娃哈哈纯净水）；infinite M200 PRO酶标仪（瑞士TECAN公司）；UVmini-1240分光光度计（日本SHIMADZU 公司)。 1.3提取物的制备 1.3.1水提物 干燥猴头菌子实体，用粉碎机粉碎，称取50 g粉末，加1 L蒸馏水超声20 min，过滤，滤液减压浓缩，反复3次，合并浓缩液，转至蒸发皿中，60 ℃水浴蒸干，备用。 1.3.2醇提物 同样称取50 g猴头菌子实体粉末，加1 L 95％乙醇超声20 min，过滤，其
生物活性肽的研究及其进展汇总
生物活性肽的研究及其进展 摘要：生物活性肽作为一种来源广泛、种类繁多、功能性良好的生命因子，目前已成为全球范围内的研究热点。研究表明这些肽除具有常规的生物活性,如增加矿物质吸收、调节血压、抗菌、抗氧化、降胆固醇、免疫调节之外还对人类营养有调节作用,因而受到广泛关注。本文综述了生物活性肽的种类、生理功能、吸收、制备研究进展,以期为生物活性肽的进一步研究和应用提供参考。 关键词：生物活性肽，生理活性，吸收 Research and progress of biological active peptide Abstract:Bioactive peptides as one rich sources, wide variety, good functional life factors have been a global research hot spot. Studies have shown that these peptides have some conventional biological activities, such as increase mineral absorption, adjust blood pressure, antibacterial, antioxidant, decrease cholesterol, regulate immune. What’s more, they also have a regulating effect on human nutrition, so they have attracted widely attention. The kinds of bioactive peptides was reviewed in this paper, preparation research progress of physiological function, absorption and biological active peptide in order to provide reference for further research and application. Key words:Biological active peptide, Physiological activity, Absorb 1.功能肽的简介 肽(peptides)是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物,是蛋白质的结构与功能片段,并使蛋白质具有数以千万计的生理功能。肽本身也具有很强的生物活性。是由蛋白质中20种天然氨基酸以不同的组合和排列的方式构成的，从二肽到复杂的线性或者环状的多肽的总成。一般说来,肽链上氨基酸数目在10个以内的叫寡肽,10～50个的叫多肽,50个以上的叫蛋白质。人们习惯上也把寡肽中的二、三肽称为小肽。由于构成肽的氨基酸种类、数目与排列顺序的不同,决定了肽纷繁复杂的结构与功能。 生物活性肽( biologically active peptide/ bioactive peptide/ biopeptide) 是指对生物机体的生命活动有益或具有生理作用的肽类化合物,又称功能肽(functional peptide)[1]。肽由氨基酸组成,人体存在20 种氨基酸,由不同的氨基酸的种类排列,加上数量排列形成,再加上还可能有的二级、三级结构,其种类是十分庞大的[2,3]。每一种活性肽都具有独特的组成结构,不同活性肽的组成结构决定了其功能。此外活性肽在生物体内的含量是很微量的,但却具有显著的生理活性。据研究,有些多肽在10 - 7mol/ L 的浓度时仍具有生理活性,就是说1 mL 的多肽用60 倍水稀释后,仍然具有生理功能。功能肽是源于蛋白质的多功能化合物，是多样化且来源充足的食品原料，具有多种人体代谢和生理调节功能，如易消化吸收、促进免疫、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等[4] 现代营养学研究发现，人体摄入蛋白质经消化道中的酶作用后，大部分是以寡肽的形式
抗氧化活性测定方法的比较
抗氧化活性测定方法的比较 人体衰老和多种疾病均与自由基有关，寻找天然抗氧化剂具有重要意义。黄酮、多糖、多肽、酚类等生物活性成分均具有抗氧化活性，抗氧化活性的筛选方法可分为体外和体内2种测试体系。 体外：抗氧化活性可以用在特定条件下，样品对检测体系中自由基的清除能力、抗油脂过氧化能力及样品的还原能力、总抗氧化能力等来衡量和表征。常用的方法有羟基自由基（·OH）清除能力法、1,1-二苯基苦基苯肼（DPPH法）、2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐（ABTS 法）、超氧阴离子自由基法（O2-·）、邻苯三酚自氧化法、β-胡萝卜素漂白法、硫代巴比妥酸法、铁离子还原能力测定（FRAP法）、总酚测定法、ORAC法等方法。体内：主要有DNA氧化损伤法、蛋白质氧化损伤法、线粒体氧化损伤法。 其中DPPH法和ABTS法操作较简单便捷，不需要特殊的检测设备，只在需固定时间下记下其紫外分光光度测量值后计算其自由基清除率，缺点是不同物质具有组成和结构的差异，与DPPH·、ABTS+·的反应速率不同，反应到达平衡的时间不同，将反应时间固定在某一值时，可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断，且DPPH自由基会和其他自由基发生反应。邻苯三酚自氧化法缺点是检测波长、缓冲液的组成及ｐＨ值、邻苯三酚浓度等关键测定条件存在
着较大差异。β-胡萝卜素漂白法的缺点是β-胡萝卜素本身有抗氧化活性，对样品活性的测定结果有影响。FRAP法主要用于食品业，优点是简单易操作、可以重复，缺点是无法测定硫醇化合物的还原能力。ORAC法是国际上通用的评价食品氧化的标准方法，缺点是仪器成分较复杂，检测成本较高。 目前普遍使用的体外抗氧化活性指标一般都采用分光光度法，使用分光光度计测量各种颜色成分含量的变化。分光光度法操作较简单、便捷，不需要特殊的检测设备，只在需固定时间下记下其紫外-可见分光光度测量值后计算其活性大小，具有成本低、效率高、样品量少等优点。分光光度法缺点是会受到样本自身颜色和浑浊度的影响和限制，颜色深的样品测得的数据误差大，甚至得到错误的结果；不同物质组成和结构存在差异，与各种自由基的反应速率不同，反应到达平衡的时间不同，将反应时间固定在某一值时，可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断。外界环境因素对实验结果也存在一定程度的影响，有些抗氧化活性实验在冬天低温时不易成功，测得的数据往往没有规律。 我觉得在测定样品的抗氧化活性时，各种方法都有自己的优缺点，要根据需测物质来决定用什么方法，比如DPPH 法的自由基选择性强，不和只有一个羟基的芳香酸、无羟基的类黄酮反应，这类物质需用其他方法测定。若对检测结果
菊花提取物的抗氧化活性研究
！：：：：：：＝＝：＝：２：：！垒曼型兰！蚤茎熊匹塞 菊花提取物的抗氧化活性研究 张尔贤方黎张捷俞丽君肖湘汕头大学理学院生物学系汕头５１５０６３摘要通过菊花提取物对Ｆｅ２＋诱发卵黄脂蛋白ＰｕＦＡ过氧化体系、ＴＢＡｓ生成体系和邻苯三酚一Ｌ吼ｉｎ。ｌ发光体 系的抑制作用，研究了菊花的不同提取物的抗氧化活性。结果表明．菊花黄酮类化合物有清除?ｏＨ、０?：的能力， 且有着较强的抗氧化活性，并且发现菊花抗氧化活性与黄酮类化合物含量相关。 关键词菊花黄酮类化合物抗氧化活性脂质过氧化硫代巴比妥酸反应物 ＡｂｓｔｒａｃｔＡｓｔＩｌｄ”ｖａｓｃａｒｒｉｅｄｏｎａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｖｏａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＦｌｏｓｃｈｒｙｓａｎｔｌｌｅｍｕｍｅｘｔｒａｃｔＣｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍｅｘｔｒａｃｔｗａｓ允】Ｉ ｏｔ、ｎａＶｏｎｅｓＳ０ｍｅｐｒｅｃｃｓｓｃｓｔｏｅｘｔｒａｃＩａａｖＯｎｅｓ打Ｏｍｃｈｌ）％ａｎｔｈｅｍｕｍｆｏｒｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｃｔｉｖｃｏｘｙｇｅｎｒａｄｉｃａｌｗｅｒｅｒｅｐｏｒｃｅｄ１兀 【ｈｌｓｐ印ｃｒＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍｎａｖｏｎｅｓｃｏｕｌｄｓｃａｖｅｎｇｅ?ＯＨ、Ｏ＝２ａｎｄａｆ诧ｃｔｔｈｃａｎｔｉ．ｏｘｊｄａｔｉｖｅ ａｃｔｎ７Ｉｔｙ ＫｅｙｗｏｒｄｓＦｌｏｓＣｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍＡｎ“Ｏ一０ｘｉｄａｔｉｖｅＦＪａｖｏｎｅｓＯｘｙ鼬ｎｒａｄｉｃａｌ 菊花是菊科植物菊（ｃｈｒｙ８ａｎｃｈｅｍｕｍｍｏｒｉｆ０１ｉｕｍＲａｍａｔ）的头状花序．为多年生草本，在我国大部分地区有栽培。传统医学认为菊花的功效包括清热、明目、解毒，治疗头疼、眩晕、心胸烦热、疗疮等作用，民间更以饮用菊花水来解暑热。菊花含黄酮类化合物，本研究通过对菊花的抗氧化作用的初步研究．为进一步开发菊花的保健效用提供理论依据。 １材料与方法 二．二材料、试剂与仪器 千杭自菊：购于市场．绞碎备用。 卵黄悬液：新鲜鸡蛋去卵清，卵黄用等体积的ｐＨ７．４５，ｏ二＿。一，Ｌ磷酸钠缓冲液（ＰＢｓ）配成１：ｉ的悬液，磁力搅拌１０ｍ址再用ｐＢｓ稀释成１：２５的悬液（置于冰箱中备用）。 次黄嘌呤【Ｆｌｕｋａ公司）、黄嘌呤氧化酶（酶活力５ｕ，ｍｌ，广卅１军事医学研究所）、２一脱氧一Ｄ核糖（ｆｅｉｎｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ二ｅ二。÷一。ｅｒｇ，ｎｅｗｙｏｒｋ）、硫代巴比妥酸（生化试剂，上海试剂二厂。 ７５ｉ—Ｇｗ型分光光度计（上海分析仪器厂）、ＧＨＧ—ｃ型生物化学发光测量仪（上海市检测技术所检测仪器厂）、ＤＧＪｏ．５一Ｉ｜冷冻干燥机（军事医学科学院实验仪器厂）、旋转蒸发器（Ｒｏ＝ｊｒｙＥｖａｐｏｒａｔｏｒＲＥ一４７，ＹＡＭＡＴ０ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣｃ。，二二ｄＴｏｋｙ。，Ｊａｐａｎ）、ＢｅｃｋｍａｎＪ２—２１Ｍ高速冷冻离心机３ｅ：息ａｎ，ＵＳＡ）。 ：：方法 二．：二提取工艺。１。’ 干菊花绞碎，加入１５倍体积７ｏ％乙醇热浸提１２ｈ．抽滤，滤渣用热水冲洗，滤液减压浓缩．蒸去乙醇，３ｏｏｏｒ／ｍｉｎ离心：ｏ－二ｊ上清液保存待用（样品Ｉ）。取一定量样品Ｉ，用２倍 体积１００％的正丁醇萃取２次，萃取液蒸干溶剂，再用水定容，得样品ＩＩ。取一定量样品Ｉ，用２倍体积１００％的乙酸乙酯。萃取２次．萃取液蒸干溶剂，再用水定容，得样品ＩＩＩ。取一定量样品Ｉ，用２倍体积１００≈的氯仿，萃取２次．萃取液薰干溶剂，再用水定容，得样品Ⅳ。 干菊花绞碎，１５倍体积水直接浸提１２ｈ，低温浓缩获得样品Ｖ（作为对照）。 １．２．２Ｆｅｎ诱发卵黄脂蛋白ＰＵＦＡ过氧化体系…。 选用１：２５的卵黄悬液吸取ｏ．２ｍｌ，加入一定量的样品．加入ｏ，２ｍｌＦｅｓｏ．２５衄ｏｌ／Ｌ，用ｐＨ７．４，ｏ１ｍｏｌ／Ｌ的ＰＢｓ补充至２ｍ！，３７℃振荡１５ｍｉｎ，取出后加人ｏ．５ｍｌ三氧乙酸（简写ＴｃＡ），３５００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，吸取２ｍｌ上清液加入ｌｍｌ硫代巴比妥酸（简写ＴＢＡ）．加塞，放人沸水浴中１５ｍｉｎ，冷却后，于５３２ｎｍ处比色测出吸光度（Ａ）值：以不加样品管的吸光度为（Ａ．）。样品抗氧化活性（ＡｏＡ）用对卵黄脂蛋白ＬＰｏ的抑制率表示： ＡＯＡ（％）＝（Ａ０一Ａ）／Ａ。×１００％ １．２．３Ｆｅ“次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶一ＴＢＡｓ生成体系ｎ４加样顺序为：Ｆｅｓｏ．（２ｍｍ。１，Ｌ）ｏ．０４ｍｌ、黄嘌呤氧化酶（简写：ｘｏ）（５ｕ／ｍ１）３．５ｕｌ、脱氧核糖（３０ｍｍ０１，Ｌ）ｏ２ｍｌ、ＥＤＴＡ（５吼ｏｌ，Ｌ）Ｏ．０４ｍ１、Ｈ２０２（１７．６黝ｏｌ，Ｌ）ｏ０１ｍｌ、加入ｏ．１ｍｌ样品、ｐＨ７．４ＰＢｓ（Ｏ．１５ｍｏｌ／Ｌ）１．４８ｍｌ、次黄嘌呤（简写：ｘ）（２ｍｏｌ／Ｌ）ｏ．２ｍｌ总体积为２ｍｌ（除ＰＢｓ、Ｆｅ∞．用重蒸水配制外．其它试剂均用ｐＨ７．４ＰＢｓｏ．１５ｍｏｌ／Ｌ配制）。然后，３５℃温浴１５ｍｉｍ．取ｌｍｌ反应液加１％ｗ／ｖＴＢＡ（ＮａｏＨｏ０５ｍｏｌ／Ｌ配制）及冰醋酸ｌｍｌ，混匀后放人沸水浴３０ｍｉｎ，冷却。在５３２ｎｍ处测其吸光度Ａ，以不加样品管的吸光度为ｋ：清除活性以抑制ＴＢＡｓ生成量Ａｓ３２ｎ。值的抑制百分率表示即（Ａ。一Ａ）／Ａ。×ｌｏｏ％。１．２．４超氧阴离子的邻苯三酚“ｕＩｎｉｎ。ｌ发光体系 万方数据
猴头菇提取物颗粒的功效
猴头菇提取物颗粒的功效 有很多的人们在服用药物的时候都不太清楚这种药物具体的功效，比如说猴头菇提取物颗粒，这种药物主要还是属于中成药的，在服用过后是可以起到保护胃黏膜的效果，那么对于一些平常饮食不太注重，导致胃肠道出现问题的患者来说效果就是非常好的，甚至是还可以促进人们胃溃疡的快速愈合，起到一个辅助治疗的功效。 ★功效： 建议你猴头菌提取物颗粒最好是饭后过半小时服用最好，一次一袋，温开水冲服，不要过量，以免产生耐药性。猴头菌提取物颗粒有保护胃黏膜促进黏膜的修复与再生的作用，因此对胃糜烂也有用。猴头菌提取物颗粒是一种胃粘膜保护药，够改善胃粘膜营养状态，促进溃疡愈合及炎症消退，激活机体免疫细胞，增强机体免疫功能。 有保护胃粘膜的作用，用也可以的。那你就不加其它的保护
胃粘膜的作用的药。可用奥美拉唑一段时间，一般至少二周，同时配合胃乐新就可以，或用其它的保护胃粘膜的药物，很快会有改善的。保护胃粘膜的药要饭前五分钟少量水服用就好了。宝宝需要根据体重来计算，按宝宝体重13公斤来计算，口服一次1g （1/3袋），一日3次。5-6周为一个疗程。温开水冲服就可以的。 猴头菌提取物颗粒可以治疗慢性胃病的，病因大多来自个体的饮食结构和滥用抗生素，降低了身体免疫力。需要在用药的同时在饮食生活上多注意，建议：你的情况可以用生物制剂奘灵水苏糖，奘灵水苏糖可以快速的增殖有益菌到达炎症部位消除炎症，修复胃肠粘膜，饮食要清淡，少吃生冷辛辣刺激性食物，猴头菌提取物颗粒成分有益气养血、扶正培本和增强胃黏膜屏障功能的作用，可有效地缓解腹痛、腹胀和反酸等症状，促进炎症面愈合，并可获得一定的病理改善。 猴头菌提取物颗粒的有效成分主要为多糖和多肽，是猴头菌的提取物。那么，猴头菌提取物颗粒的作用是什么?适用症有哪些?猴头菌提取物颗粒的适应症为：猴头菌提取物颗粒用于慢性
活性肽的神奇功效
小分子活性肽的神奇功效 经研究表明，小分子活性肽辅以多种维生素和复合微量元素可诱导和促进T淋巴细胞分化、成熟；调节T淋巴细胞群比例，使CD4/CD8趋于正常。同时，增强巨噬细胞的吞噬能力和红细胞免疫功能。可显着增加淋巴细胞功能，并能有效地防止辐射和放化疗及其他污染中毒后白细胞数量的减少，有效地抑制肿瘤细胞生长，起到改善免疫功能的作用。从间接作用而言，小分子活性肽可促使粪便排泄，降低血清胆固醇浓度，使甾醇排泄增加和肝脏高胆固醇浓度下降，对治疗原发性高血压有一定的功效。能抑制脂肪的积蓄，抑制有害菌，排除毒素，促进其对食物营养的消化吸收，以提高人体对药物有效成分的吸收，具有很高的生理活性，人们经常食用小分子活性肽，在强身保健方面有如下功效： 1、主动吸收，迅速恢复体能 肽是蛋白质与氨基酸的中间物质，由数个氨基酸结合而成。分子大小介于蛋白质与氨基酸之间。但是，比氨基酸分子大的肽在人体内被吸收的速度反而比氨基酸更快，原因就在于：小分子活性肽是数个氨基酸分子集中起来被整体吸收，而氨基酸需要一个一个地
被吸收，小分子活性肽能比氨基酸更迅速地被人体吸收。 在恢复体力方面，小分子活性肽也发挥着优异的功效。人体在进行激烈运动时，为了补给能量就需要消耗肌肉中的氨基酸。就是说，身体需要能量的时候就会从肌肉中获取。肌肉中的氨基酸被消耗掉后，肌肉组织就会受到损伤、肌肉产生疲劳感、难以发挥原有的力量。服用小分子活性肽3分钟进入血液，5分 钟转换为体能，在运动前、运动中补给活性肽可以给身体提供充足的能量，能够抑制肌肉力量的下降、长时间维持充沛的体力。 2、消除疲劳 疲劳是由大脑感知的。当人体感到疲劳的时候，疲劳的机体部位向大脑发出疲劳信息，于是人就感到疲劳。从这个意义上说，感知疲劳的中心就在大脑里。如果没有疲劳这种生理反应，我们就会无休止的劳动下去，直至死亡。 大脑疲劳是由氧化血红蛋白浓度的上升引起的，服用小分子活性肽可以抑制氧化血红蛋白浓度的上升，因而能够缓和大脑的精神压力，使人在学习时保持沉着冷静、清醒的记忆，能够减轻工作造成的大脑疲劳。
抗氧化剂抗氧化活性的测定方法
1.抗氧化剂是指在低浓度下能有效延缓或阻止底物氧化的物质。被氧化的底物包括蛋白质、脂质、糖和DNA。 2.初始型抗氧化剂(AH)可通过与脂质自由基L.、过氧自由基LOO.或烷氧自由基LO.反应抑制脂质氧化链反应。 L.+ AH--- LH + A. LOO.+ AH--- LOOH + A. LO.+ AH--- LOH + A. 抗氧化剂自由基A.也能与过氧自由基、烷氧自由基反应从而终止脂质氧化反应。 LOO.+ A.---LOOA LO.+ A.---LOA 次级型抗氧化剂可通过各种机理延缓脂质氧化,如螯合过渡金属、给初始型抗氧化剂补充氢、清除氧以及使活性物质失活等。 抗氧化剂的活性分为在生物体外(如食品中)的活性和在生物体内的活性。本文综述了体外测定抗氧化剂抗氧化活性的方法,不包括在生物体中测定生物活性的方法。 3.评价或表征抗氧化活性的方法为了说明在特定条件下被测物抑制底物氧化的效力或清除自由基的能力 实际测定时至少要说明在测试条件下被测物是抗氧化剂还是促氧化剂;在指定浓度下比较不同测试材料(如被测物与标准抗氧化剂或添加有被测物的测试体系与空白体系)对底物的作用。 评价或表征抗氧化活性的方法有: (1)在指定的时间测量氧化产物或官能团的浓度或吸光度值;( 2)测量反应的速率;
( 3)测量诱导期(延滞期)或氧化达到一定程度所需的时间;( 4)测量速度的积分(即动力学曲线下的面积) ; ( 5)测量被测物产生与标准抗氧化剂相当作用的浓度。4.参数 4.1诱导期( induction period) 诱导期tIND(也叫延滞期, lag period)常定义为化学反应的速度。诱导期是一个相当不确定的值,受检测方法、使用仪器的灵敏性以及一些其他因素的影响。对于脂质氧化,诱导期通常是指链增长阶段动力学曲线的切线和时间轴的交点。 4.2抑制率( percentag e of inhibition)和IC50 抑制率和IC50 (抗氧化剂提供50%抑制作用时的浓度,也可用EC50表示的)常用来表征抗氧化能力。它们不仅与被测抗氧化剂的反应性能和氧化的底物有关,而且受其他因素的影响,如脂质氧化链反应的长度和抑制速率等。此外,用IC50表征抗氧化剂 的活性与比较活性的时间点有关。只有在其他参数相同的情况下,在某一研究中测得的抑制率和IC50才可以与另一研究中测得的值进行直接比较。TEC50是指抗氧化剂提供50%抑制作用所需的时间,也常用来表征抗氧化活性 5.对测定方法的要求 测定抗氧化剂抗氧化活性的方法应满足如下要 求: ( 1)能说明测试体系中发生的反应,并能用明确的动力学图解描述;( 2)测试要有再现性; ( 3)测试效率要足够高; ( 4)方法要相对简单; ( 5)能连续检测; ( 6)应使用与体内或食品有关的活性自由基;
植物源活性肽研究进展
植物源生物活性肽的研究进展 多肽是由天然氨基酸以不同组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称，其中可调节生物体生理功能的多肽称为生物活性肽。与蛋白质相比，活性肽不仅有比蛋白质更好的消化吸收性能，还具有促进免疫、调节激素、抗菌、抗病毒、降血压和降血脂等生理机能。此外活性肽还有较好的酸、热稳定性，水溶性及粘度随浓度变化迟钝等优点，易于作为功能因子添加到各种食品中。我国农作物种类品种繁多，利用这些廉价的植物蛋白开发具有高附加值的生物活性肽产品，越来越受到重视。本文重点综述了降血压肽、抗氧化钛、降胆固醇肽这3类生物活性肽的研究进展，将其结构特征与生理功能的关系进行了归纳，同时归纳了活性肽的生理功能，并指出其发展应用前景。 1. 生物活性肽的生理功能 1.1 抗菌活性 抗菌活性肽通常由细菌、真菌产生，或从动植物体中分离。它们尽管在结构上千差万别，但几乎所有的抗菌肽都是阳离子型的，两亲结构是它们的共同特征[1]。国内外研究成果表明，抗菌肽对部分细菌、真菌、原虫、病毒及癌细胞等均具有强大的杀伤作用。临床试验也表明，抗菌肽能够增强机体抵抗病原微生物的能力，而且在体内还不容易产生耐药性。 1.2 免疫活性[2] 免疫活性肽能够刺激机体淋巴细胞的增殖，增强巨噬细胞的吞噬功能，提高机体抵御外界病原体感染的能力，降低机体发病率。从人乳和牛乳的酪蛋白中已检测到具有免疫刺激活性的肽片段，这些肽具有刺激巨噬细胞吞噬能力的作用。另外，乳蛋白、大豆蛋白和大米蛋白等通过适当酶解处理也可产生具有免疫 活性的肽类物质。 1.3 抗高血压活性 血压是在血管紧张素转换酶（angiotensin-convertion enzyme，ACE）的作用下进行调节的，血管紧张素Ⅰ在A C E的作用下可转化为有活性的血管紧张素Ⅱ，使血管平滑肌收缩，引起血压升高。降血压肽是具有抑制ACE活性的肽类， 来源广泛，ACE 抑制肽的主要来源是乳制品和鱼蛋白（沙丁鱼、金枪鱼、
抗氧化活性测定方法
抗氧化方法 一、Determination of Superoxide Anion Scavenging Ability（超氧阴离子清除能 力） 1、determined by a CL method in the pyrogallol-luminol system on a BPCL Ultra-weak luminescence analyzer。（焦性没食子酸-发光胺，荧光检 测） 2、步骤：10μL sample (不同浓度) + 50 μL焦棓酸(6.25*10-4 mol/L) + 0.94 mL of a mixture containing luminol (0.05 mol/L) and carbonate buffer (pH 10.2) （发光胺用pH 10.2碳酸盐缓冲液配成0.05 mol/L） 3、Hi-V, 800; Kv, -1; the spectral range of CL（波长范围）180-800 nm; 温 度：30 ° C.总时间：300S，每2S读数一次。 4、对照：不加样品（样品用水代替）。空白不加焦棓酸（用来调零）。 二、Determination of Scavenging Ability on Hydroxide Radicals（羟基自由基清除能力） 1、CuSO4-Phen-Vc-H2O2 CL system（1 mL体系） 2、50 μL of sample solution （样品液）+ 50 μL of a 1.0 mmol/L CuSO4 solution （CuSO4 溶液）+ 50 μL of a 1 mmol/L 1,10-phenanthroline solution（邻二氮菲溶液）+ 700 μL of a 0.05mol/L borate buffer (pH 9.0) （硼酸缓冲液）+ 100 μL of a 1 mmol/L ascorbate solution + 50 μL of a 0.15% H2O2 solution 3、总时间400S，间隔3S。Hi-V, 800; Kv, -1; the spectral range of CL（波长范围）180-800 nm; 温度：30 ° C. 4、阳性对照：不加样品（样品用水代替）。空白不加H2O2（用来调零）。 三、Determination of Scavenging Effect on Hydrogen Peroxide（过氧化氢清除 能力） 1、luminol-H2O2 system
猴头菌提取物颗粒
猴头菌提取物颗粒 Houtoujun Tiquwu Keli Hedgehog Fungus Extract Granules 本品为猴头菌提取物制成的颗粒。每袋含多糖以无水葡萄糖（C6H12O6）计算，不得少于37.5mg，含肽以牛血清白蛋白计算不得少于37.5mg。 【性状】本品为棕黄色或微黄色混悬颗粒，味甜、微苦或味微苦（无糖型），有引湿性。 【鉴别】取本品1.5g（含糖型）或1g（无糖型），加水10ml充分振摇，溶解，滤过，取续滤液1ml，加5% a-萘酚乙醇溶液2~3滴，摇匀，沿管壁缓缓加入硫酸0.5 ml，在两液面交界处出现紫色环。 【检查】干燥失重取本品，依法检查（中国药典2010年版二部附录ⅧL），减失重量不得过5.0%。 其他应符合颗粒剂项下有关的各项规定（中国药典2010年版二部附录I N）。 【含量测定】多糖对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖适量，加水制成每1ml中含无水葡萄糖100μg的溶液，即得。 标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml，各加水至2.0ml，分别加入预先用冰水冷却的蒽酮溶液4ml，混匀，置沸水浴中加热6分钟，迅速冷却，约20分钟时，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录ⅣA），在625nm的波长处分别测定吸光度，以测得吸光度与其对应的浓度，计算回归方程。 供试品溶液的制备精密称取供试品2.5g（含糖型）或1.5g（无糖型），溶于10ml水中，时时振摇浸渍30分钟，滤过，作为贮备液。 精密量取贮备液1ml，置10ml离心管中，分4次加入无水乙醇，每次1ml并摇匀，静置5分钟，离心（每分钟4000转）10分钟，倾去上清液；沉淀加水0.2ml振摇使溶解，再分2次加入无水乙醇，每次1ml，同法重复操作，离心，倾去上清液，沉淀加95%乙醇5ml，振摇使成混悬液，离心，倾去上清液；沉淀再加无水乙醇5ml，同法洗涤一次。取沉淀，用水溶解并稀释至100ml，作为供试品溶液。 测定法精密量取供试品溶液2.0ml，照标准曲线制备项下自“加入预先用冰水冷却的蒽酮溶液4ml起”依法操作，由回归方程计算多糖含量。 肽对照品溶液的制备精密称取牛血清白蛋白对照品适量，加水制成每1ml中含0.3mg的溶液。 供试品溶液的制备取供试品适量，研细，精密称定，制成每1ml含5mg（无糖型）或7.5mg（含糖型）的溶液，不时振摇30分钟，滤过，取续滤液为供试品溶液。 标准曲线的制备精密量取对照品溶液0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分别置具塞试管中，各加水至1.0ml，再加福林酚试液甲液1.0ml，摇匀，室温放置10分钟后，加入福林酚试液乙液4.0ml，摇匀，于55℃水浴中保温5分钟，取出，放冷。照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录ⅣA），在650nm的波长处测定吸光度，以牛血清白蛋白的量与对应的吸光度计算回归方程。
生物活性肽的应用综述
生物活性肽的功能和应用研究 摘要：生物活性肽(bioactive peptides)是指具有生物活性的多肽, 是指对生物体的生命活动有益或具有生理作用的肽类化合物。本文主要介绍目前主要的一些生物活性肽的生理功能及应用研究，介绍生物活性肽在食品中一些简单的应用。简单展望一下生物活性肽以后的研究进展。 关键词：生物活性肽；功能；应用； 生物活性肽(bioactive peptides)是指具有生物活性的多肽, 是指对生物体的生命活动有益或具有生理作用的肽类化合物。它是一类由20种天然氨基酸以不同的组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同的肽类的总称。生物肽与蛋白质没有本质的区别，但又不同于蛋白质，比蛋白质校、生理活性强。根据肽链上氨基酸的数目，通常把具有2~10个氨基酸、分子量<2000Dalton的肽成为寡肽(oligpeptide)，讲氨基酸数目10~50个、分子量2000~10000Dalton的称为多肽（polypeptide）。 这些活性肽小到只有2个氨基酸的双肽,也可以大到复杂的长链或环状多肽,而且常经过糖苷化、磷酸化或酰化衍生,在细胞生理及代谢功能的调节上具有重要的作用,这些调节作用几乎涉及到人体所有的生理活动,如神经系统、消化系统、循环系统、内分泌系统等。不仅如此,其中许多活性肽还具有原蛋白质或其组成氨基酸所没有的新功能。特别是以数个氨基酸结合生成的低聚肽不仅有比蛋白质更好的消化吸收性能,还具有促进免疫、调节激素、抗菌、抗病毒、降血压和降血脂等生理机能,食用安全性极高。目前人们认同的活性肽的定义是对肌体构成一套高度自动化的物质,是沟通细胞间、血管间联系的信使,为外分泌、内分泌、神经系统行使传递功能,从而使肌体组成了高度严密的系统,促使生物体生长、发育、繁殖正常进行。 生物活性肽的生理功能 1.1抗高血压活性 血管紧张素转化酶(ACE)在血压调节过程中起着非常重要的作用。人体的肾脏可以分泌肾素,作用于血管紧张素释放出无活性的血管紧张素Ⅰ。ACE可以从无活性的血管紧张素Ⅰ的C-末端水解掉2个氨基酸,形成有活性的血管紧张素Ⅱ。血管紧张素Ⅱ是已知最强的缩血管物之一,可以导致血管收缩,引发高血压。同时ACE可水解血管舒缓激肽使其失活,而血管舒缓激肽可以舒张血管、使血压降低。因此ACE在肾素-血管紧张素目前主要的活性肽及其应用体系、血管舒缓素-激肽体系中起着重要的作用。已知抗高血压肽大致上有4种来源:来自乳蛋白的肽类;来自酸奶的肽类;来自鱼贝类(沙丁鱼、金枪鱼)的肽类;来自植物的肽类(玉米醇溶蛋白、无花果)等。 1.2抗菌活性 1972年,瑞典科学家在果蝇中首次发现抗菌肽,随后得到第1个真正意义上的抗菌肽天蚕素(cecropins)。后来科学家们在昆虫、被囊动物、两栖动物、鸟类、鱼类、哺乳动物、植物乃至人等多种生物体内发现了至少800多种抗菌肽,并且某些抗菌肽在临床应用中已取得良好的疗效,如Oren等从豹鳎中分离得到一种33肽的抗菌肽,具有比蜂毒素更强的抗菌活性,其抑菌机理是溶解细菌的细
抗氧化物活性测定方法总结
抗氧化物活性测定方法（倾向于考虑DPPH法和ORAC法） 1.FRAP法:铁离子还原抗氧化能力测定法[1] FRAP(ferric ion reducing antioxidant power)方法，在低pH值的溶液中， Fe3+-TPTz(Fe3+-三吡啶三嗪)被抗氧化剂还原成有色的Fe2+-TPTZ。反应的结果常以Fe2+当量或标准物质的抗氧化能力表示。 该法快速简便、易于操作、重复性好，但FRAP反应属于电子转移(SET)反应，因此FRAP方法不能够测定氢转移反应(HAT)起作用的物质。而且该法实际测定的是待测生物活性物质将Fe3+还原为Fe2+的能力，因此没有抗氧化能力的生物学相关性。 2.TEAC法(trolox equivalent antioxidant capacity) ABTS(2,2'-amino-di(2-ethyl-benzothiazoline sulphonic acid-6)ammonium salt,2,2'氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)铵盐)与过氧化物酶和氢过氧化物在一起形成ABTS+阳离子自由基。在抗氧化剂存在时，这种自由基混合物的光吸收值下降，下降程度取决于抗氧化剂的抗氧化能力，测得的结果以TEAC表示，即被测抗氧化剂清除ABTS·+的能力(吸光度大小的变化)与标准抗氧化剂trolox(VE的水溶性类似物)清除ABTS·+的能力的比值。 TEAC法十分简单，适用于大量样品的分析检测。但是，ABTS·+并非生理自由基，缺乏生理相关性，而且与FRAP方法相似，ABTS·+与不同抗氧化剂问的氧化反应时间不同，因此，只能定性不能定量评价样品的抗氧化能力。 3.DPPH法[2，3](2，2-diphenyt-l-picrylhydrazyl radical scavenging capacity) DPPH·(二苯代苦味肼基自由基)法是较常用的方法之一。DPPH·是一种稳定的以氮为中心的自由基，其醇溶液呈深紫色,在517nm 处有一吸收峰。当反应系统中存在自由基清除剂时，它可以和DPPH·的单电子配对而使517nm 处的吸收峰渐渐消退。而且，这种颜色变浅的程度与配对电子数成化学计量关系。因此，根据吸光度的变化可测得抗氧化剂的活性。通过计算DPPH自由基剩余一半时所需抗氧化剂的浓度(EC50)以及时间(TEC50)反应抗氧化物的活性。 DPPH法快速、简单，仅需要一台紫外分光光度计就可以测定，但DPPH方法存在的不足是，当被测物与DPPH紫外吸收有重叠时，将会影响测定结果，比如类胡萝卜素。此外，由于空间位阻决定反应的倾向，小分子化合物由于更易接近自由基而拥有相对较高的抗氧化能力。此外该方法线性范围也相对较窄，而且所有还原剂都能够对DPPH起作用，因此结果并不能完全代表抗氧化能力。