文档库 最新最全的文档下载
当前位置:文档库 › C反应蛋白(超敏CRP)检测--散射比浊法

C反应蛋白(超敏CRP)检测--散射比浊法

C反应蛋白(超敏CRP)检测--散射比浊法
C反应蛋白(超敏CRP)检测--散射比浊法

1.预期用途

适用于人体血液、体液中特定蛋白含量测定。

2.检测原理

用散射比浊法,可溶性抗原与特异性的抗体反应形成不溶性复合物,当光线通过反应悬液时发生散射并由特定蛋白分析仪检测到。散射光值的多少与测试样品中的特定蛋白浓度成一定比例,仪器会自动计算出样品中特定蛋白浓度。

3.储存条件及有效期

储存在(2-8)℃,无腐蚀性气体的冷库中,试剂盒保质期为一年;开启后的缓冲液和样品处理液可保持稳定3个月,质控和抗血清可稳定1个月。

4.样本要求

采用新鲜手指血,或者EDTA或肝素抗凝血进行测定,抗凝血在(2-8)℃储存最长不超过72h,测定当天稀释样本。

5.适用仪器

适用于特定蛋白分析仪Nephstar Plus。

6.检验方法:

(1)、特定蛋白分析仪Nephstar Plus开机,刷全程全血C反应蛋白磁卡更新,核对试剂批号等信息。

(2)、将试剂平衡至室温后,取2ul全血标本加入预分装处理缓冲液的测量杯中,轻轻摇匀,并将测量杯放进仪器的测量孔。

(3)、屏幕显示“请加入试剂”。

(4)、取60ul抗血清加入测量杯中并同时按下反应启动键。

(5)、仪器自动进行检测。

7.参考范围:

(1)、根据CRM470标准,健康成人血清CRP参考范围为:<5mg/L,而根据文献资料,超敏CRP(hsCRP)<3mg/L,建议各实验室根据所检测的患者群体建立自己的参考范围。

(2)、诊断和治疗不能只依赖CRP检测结果。必须同时考虑临床病史和其他实验室检测结果。

8.检验结果的解释:

1、C反应蛋白是一种经典炎症反应急性期蛋白,在急性炎症时其浓度升高和降低都比红细胞沉降率快。CRP升高表现为非特异性,在多种组织受到侵犯时,其浓度都可升高,例如在感染性疾病,风湿性关节炎,心肌梗塞等,测定CRP 对于追踪随访和监测这些疾病,以及在某些情况下鉴别诊断都非常有用。

超敏CRP是根据测定方法更敏感而命名,称为高敏感或超敏感CRP,国内一般简称为超敏或高超敏CRP。

在新生儿实践中发现,一般新生儿血清CRP水平小于2mg/L,大于此值即与细菌感染的严重程度有关。超敏CRP还在冠心病、中风、周围血管栓塞等疾病预测中发挥重要作用,对于心血管疾病危险性评估具有重要意义。

2、全血测定的结果在全血压积为40时测定的。如果知道压积值可根据下列公式校正结果:

60

——————————————×CRP值

100-血球压积

注意:虽然本试剂盒是测定全血样品,但仪器显示的结果已经由Nephstar的内置程序换算为该样品的血清CRP浓度,这样便于通常的CRP浓度的提法相适应。

检验方法的局限性

1、高度乳糜、浑浊的样品都不适合用散射比浊检测,测定时仪器可能会显示空白过高,对此类标本建议离心后改用血清样品并使用血清CRP试剂盒进行检测,如果背景仍太浑浊冰不能消除,则建议用其它方法。

2、如果样品中含有类风湿因子、副蛋白或免疫循环复合物,则可能会影响检测结果,因为上述物质可能会产生一定程度的非特异性散射光。

3、样品浓度高于6000mg/L会出现抗原过剩的情况,此时测量值可能会意想不到的低,从而会给出误导的结果。但是这种情况几乎不会发生。

注意事项

1、本试剂仅用于体外诊断。

2、该产品只有经过专门培训的人员方可使用,操作人应严格按实验室操作规程操作。

3、标本测试在全血模式下进行,质控测试在血清模式下进行。

4、确保仪器屏幕显示批号与试剂批号一致,批号不同时请及时刷卡更新。

5、每天开机后先稳定运行半小时,试剂从冰箱取出,需平衡至室温才能进行测量。

6、加入抗血清后务必尽快按下“反应启动”键。

7、溶血时请充分摇匀至透明清亮方可进行测试。

8、所有血清经检测HBsAg阴性,HIV(1&2)抗体阴性,HCV Ab阴性。但迄今尚无一种方法能确保其中绝对不含任何感染源,因此需按照潜在感染源处理。

9、试剂盒多种成分中含有防腐剂叠氮化钠,使用时小心,严禁入口。如不慎接触皮肤或粘膜,应用大量清水冲洗并咨询医生。此外,叠氮化物易于铅或铜管反应形成易爆炸的金属复合物,因此,处理试剂时应用大量清水冲洗,避免叠氮化物累计。

10、试剂盒中样品处理液在不同批号试剂中可以通用,其他如缓冲液,抗血清和磁卡在不同批号之间不可混用,否则可能会出现误导结果。

免疫比浊法检测免疫球蛋白

免疫比浊法检测免疫球蛋白 一、实验目的 利用免疫比浊法绘制标准曲线,并检测样品中免疫球蛋白的浓度。(本小组检测的为IgG样品) 二、实验原理 1.抗原抗体反应(Antigen-antibody reaction):抗原与其刺激机体产生的相应抗体在体内或体外发生特异性结合的反应。反应特点有:特异性、比例性、可逆性、敏感性。影响因素有:电解质、温度、酸碱度。 2.免疫比浊法:合适比例的抗原抗体形成的免疫复合物,在PEG作用下形成微粒,使样品浊度发生变化。当一束光线通过溶液受到光散射和光吸收两个因素的影响而使光的强度减弱,根据光的强度改变可测得微粒浓度。 分类:①透射比浊法(Transmission tubidimetry)当一定波长光线通过浊度发生变化的反应混合物时,由于被不溶性免疫复合物吸收而减弱,故在一定范围内吸光度与免疫复合物量呈正相关。当抗体浓度固定(过量),样品的浊度与其中所含抗原量成正比。(特点)透射比浊操作简便,适用于普通的自动生化分析仪和普通的分光光度计,几乎所有的实验室均能开展。不足的是灵敏度和精密度均不够理想,所需的抗血清量大,检测的时间较长。②散射比浊法(Nephelometry)光线通过检测溶液时,被其中所含的抗原抗体复合物折射而部分偏转,产生散射光,其强度与复合物的数量和散射夹角成正比,与光的波长成反比。(特点)优点是灵敏度、精密度均较高,检测快速。其缺点是需特定的分析仪器,试剂价格高。 本实验采用透射法。 3.聚乙二醇PEG的作用:在免疫反应中,为增强抗原抗体反应常使用增聚剂,3~4%的聚乙二醇,可破坏抗原抗体的水化层,促进抗原抗体靠近反应,但如浓度不适合,会影响其它溶质或产生非特异性聚集影响结果。 三、实验材料 免疫球蛋白A,G(IgA,IgG)测定试剂(试剂1[PEG],试剂2[羊抗人IgA, IgG])(1管/每组) 免疫球蛋白A, G(IgA,IgG)校准品,蒸馏水,血清样本(1管) 微量加样枪、ep管(1.5mL离心管) 酶标仪、水浴箱 四、实验步骤 1.在7个EP管中各加250μL IgG试剂1(PEG)。 2.7管分别加入蒸馏水、校准品原液、1:2校准品、1:4校准品、1:8校准品、1:16校准品、样本各2μL。 3.混匀后37℃水浴5min。 4.7管各加入85μL IgG试剂2(羊抗人IgG)。 5.混匀后37℃水浴10min。 6.分别吸取200μL至96孔酶标板中,用酶标仪在700nm处读取OD值。 五、实验结果与数据处理 2.标准曲线

免疫透射比浊法

免疫透射比浊法 一、原理 当光线通过一个浑浊介质溶液时,由于溶液中存在混浊颗粒,光线被吸收一部分,吸收的多少与混浊颗粒的量成正比,这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。这一方法早于1959年Schultre和Schuick 等报道应用于血浆蛋白与其抗体结合后形成复合物,导致浊度的改变,再进行透射比浊测定,一般采用抗体对抗原定量的透射比浊法,称为免疫透射比浊法。其原理是,利用抗原和抗体的特异性结合形成复合物,通过测定复合物形成量的多少对抗原或抗体进行定量的方法。在介质溶液中,抗原与特异性抗体在一定条件下才能形成复合物,一定的条件包括:①对抗体的要求,作为体液或组织中蛋白质种类很多,若要快速特异检测,要求有单价特异抗体才能与抗原形成复合物。某一种蛋白质,有其特异抗体才能与该抗原结合,形成免疫复合物进行定量,若抗体不纯混杂有另一种或两种少量的抗体,这种免疫复合物就不是单一复合物而是大杂烩,结果偏高;②抗原抗体比例适当,因免疫复合物形成有三个阶段,第一阶段是复合物形成抗原抗体复合物;第二阶段是初步形成抗原抗体复合物,此阶段是复合物交联成大的网格状结构;第三阶段是复合物聚合产生絮状沉淀。只有在抗原与抗体等价时即无过剩抗体,此时,复合物的结合与解离处于平衡状态,其混浊程度达高峰。在抗体过量时,随抗原量的增加而复合物形成也增加,其测定只能在反应曲线的左侧进行(见图18-4);③一般要求溶液中有非离子性亲水多聚体促进免疫复合物的形成,如聚二乙醇6000等。溶液pH为6.5~8.0之间为宜。载脂蛋白有形成两性螺旋片(amphipathic helix)的特性,对脂质(特别是磷脂)有高度亲和力,与脂质结合后有时会掩盖抗原位点或构象改变,可以部分或完全丧失对抗血清的特异反应。为此,载脂蛋白检测过程中有必要先暴露抗原位点,所用试剂有表面活性剂,尿素,盐酸胍和吐温等解离蛋白剂,或用四甲基脲脱脂或有机溶剂脱脂等暴露抗原决定簇等方法,血清脂蛋白颗粒中的载脂蛋白,能在短时间内形成抗原抗体复合物进行定量;④抗原不能过量,因为抗原过量,抗原抗体复合物形成不但不增加,反而会减少,光散射或光吸收减少,检测结果反而偏低。

超敏C反应蛋白检测的临床意义

超敏C反应蛋白检测的临 床意义 This manuscript was revised on November 28, 2020

超敏C反应蛋白检测的临床意义 核心提示:C反应蛋白(C-reactivenbsp;protein,nbsp;CRP)因其能和肺炎双球菌的细胞壁的C多糖起沉淀反应而得名nbsp;[1]nbsp;,是相对分子质量为115-140KD的血清β球蛋白。CRP持续增高提示机体存在慢性炎症或自身免疫疾病,CRP在病毒感染时不会升高,其变化不受患者的个体 C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)因其能和肺炎双球菌的细胞壁的C多糖起沉淀反应而得名 [1] ,是相对分子质量为115-140KD的血清β球蛋白。CRP持续增高提示机体存在慢性炎症或自身免疫疾病,CRP在病毒感染时不会升高,其变化不受患者的个体差异、机体状态和治疗药物的影响[2]。近年来,随着检测技术的进步,采用超敏感方法检测到的CRP被称为超敏CRP。大量的文章研究显示,它在冠心病、中风、周围血管栓塞等疾病诊断和预测中发挥越来越重要的作用,甚至被认为是心血管病危险评估的“金标准”[3]。 1 C反应蛋白的生物学特性 CRP是一种主要由肝脏合成的蛋白质,正常人血清中含量极微(平均值约为3.5 mg/L),当有急性炎症、创伤和冠心病时CRP会升高 [4] 。CRP含5个多肽链亚单位,非共价结合为盘形多聚体。白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素1(IL-1)对CRP的生成有调节作用。CRP的生物特性主要表现为能结合细菌、真菌等体内的多糖物质,在钙离子存在下,形成的复合物,激活补体系统,释放炎症介质,促进细胞间粘附和吞噬细胞反应,溶解靶细胞。在血管粥样硬化损害的早期还发现CRP与细胞膜形成的复合体附着在血管内皮细胞,导致血管内皮细胞损伤,促进动脉粥样硬化的形成。由于各种原因的组织损伤血清中CRP浓度的升高,同时还会出现一系列的全身反应,包括发热、免疫反应增强等急性时相反应,CRP的水平与炎症的出现及其严重程度具有相关性[5]。 2 超敏C反应蛋白与颅脑损伤 张吉平等[6]对129例颅脑损伤患者不同时期超敏C反应蛋白的变化的研究显示,颅脑损伤后血清超敏C反应蛋白均有不同程度升高,且伤情越重,升高越明显。这说明超敏C反应蛋白不仅是一种疾病标记物,同时也参与创伤性疾病的致病过程,且创伤越严重,肝细胞在IL-6等细胞因子诱导下合成超敏C反应蛋白的速度越快,并释放入血液中。伤情越重,超敏C反应蛋白的下降速度越慢。这是因为决定循环中超敏C反应蛋白浓度的唯一因素是合成速率。当可刺激超敏C反应蛋白增加的因素没有得到完全控

超敏C反应蛋白测定对胸腔积液性质的鉴别作用

论著 临床辅助检查 C H IN ESE COMMUN I TY DOCTORS 166 中国社区医师 医学专业2011年第08期(第13卷总第超敏C 反应蛋白测定对胸腔积液性质的鉴别作用 麻桂琴 730900甘肃白银市第二人民医院呼吸科 摘 要 目的:探讨胸腔积液中超敏C 反应蛋白(CR P)测定在结核性胸膜炎和 癌性胸腔积液中的鉴别诊断价值。方法:对54例结核性和恶性胸腔积液患者胸腔积液中超敏C 反应蛋白活性浓度进行测定。结果:结核性胸液组胸腔积液超敏CRP 浓度高于恶性胸液组(P <0 001)。结论:胸腔积液超敏C 反应蛋白(CRP )活性测定可用于结核性和癌性胸腔积液的鉴别。 关键词 超敏C 反应蛋白 结核性胸腔积液 恶性胸腔积液 鉴别诊断do :i 10.3969/.j issn .1007-614x.2011.08.168 C 反应蛋白是一种由肝脏产生的急性时相蛋白[1],与组织感染、急性损伤、免疫性疾病等关系密切,而且与感染的严重程度有一定的相关性,在临床上被作为细菌感染的指标之一。大量的研究显示,C 反应蛋白在冠心病、中风、周围血管栓塞等疾病诊断和预测中发挥越来越重要的作用,甚至被认为是心血管病危险评估的 金标准![3]。2009年1月~2010年6月收治胸腔积液患者54例,测定在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液中的超敏CRP 水平,并探讨超敏CRP 测定对疾病性质鉴别的临床意义。资料与方法 一般资料:2009年1月~2010年6月收治胸腔积液患者,明确诊断且资料齐全的54例患者中,男36例,女18例;年龄32~90岁,平均63 8岁。每例至少抽取胸液?2次送检超敏C 反应蛋白,检测分为结核性胸液和恶性胸液两组。恶性胸液组28例,其中肺癌合并胸液25例,恶性胸膜间皮瘤3例,均在胸液中找到肿瘤细胞;结核性胸液组26例,胸液中未找到肿瘤细胞,根据临床表现、X 线胸片、PPD 试验和抗痨治疗1个月后,临床症状 消失,胸腔B 超证实胸腔积液吸收,随访 3个月无复发诊断为结核性胸膜炎。 超敏C 反应蛋白测定方法:每次抽液后取胸液5m l 送检,应用德国D i asy s D i agnostic Syste m s Gmb H 试剂盒,颗粒增强免疫透射比浊法,仪器为日本全自动生化分析仪。参考值为2 8~5m g /L 。统计学方法:结果用方差分析和配对t 检验,浓度以X #S 表示,两组比较统计学方法采用X 2检验分析。 结 果 两组超敏C 反应蛋白检测值比较:恶性胸液28例,送检胸液标本80份;结核性胸液26份,送检胸液标本58份。所有标本均进行超敏C 反应蛋白浓度检测,结核性胸腔积液组胸液中超敏CRP 水平与癌性胸液中比较明显增高,差异有显著性意义(P <0 01),若以9 9m g /L 为标准,在结核性胸腔积液组中有73份(91 3%)标本>9 9mg /L,恶性胸腔积液组中有4份标本(6 9%),共4例>9 9mg /L 。结果见表1。 表1 恶性与结核性胸液超敏C 反应蛋白升高率比较组别例数标本数CRP 升高>9 9m g /L 标本数 百分率(%) 结核组28807391 3 恶性组 26 58 4 6 9 超敏C 反应蛋白检测升高率与送检 次数的关系:结核组胸液组标本超敏C 反应蛋白测定大于正常值(>5 0mg /L ),1、2、3次送检的升高率分别为89 3%(25/28)、94 6%(53/56)、97 5%(78/80);超敏C 反应蛋白3次送检阳性率比较接近,表明检测方法比较稳定。结果见表2。讨 论 C 反应蛋白(简称CR P),于1930年发现,是一种能与肺炎球菌C 多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白。 CRP 的检测在80年代以前作为炎症和组织损伤的非特异性标志物大量应用 于临床。但由于过去CRP 的检测方法较为落后,假阳性和假阴性很高,影响了它在临床上的价值,而逐渐被临床所忽视。 近年来,由于检测技术的更新,测定CR P 的快速、简便和可靠的方法已迅速建立,使CRP 的临床应用大大增加。结核性胸膜炎是胸膜对结核杆菌抗原的强烈细胞免疫的结果,当结核杆菌感染后,会引起机体的一系列免疫反应,因而结核性胸腔积液的CRP 活性会明显升高。结核和癌症是引起胸腔积液的最主要最常见的两种原因,常规检查方法诊断有一定危险性,细菌培养又费时且结核杆菌的培养有一定的难度,加之一般的综合性医院里无此类设备,故临床诊断缺乏特异客观手段。本测定实验结果显示,在结核组胸液中超敏CR P 的活性明显升高,比例达97 5%,浓度>9 9mg /L 者占91 3%,张秋娣等报道,以恶性胸液组胸腔积液超敏CR Px+1 96s 即9 9m g /L 为判断界值,提示超敏CRP >9 9m g /L 则考虑结核性胸膜炎的可能性大,胸腔积液超敏CR P 测定对结核性胸腔积液判断的灵敏度高,特异性好。有文献报道[2],鉴别结核性与非结核性胸腔积液,CRP 以12 8m g /L 为限,>12 8m g /L 基本考虑结核,但该界值与文献报道相比偏低,可能与检查方法不同有关。 本研究中恶性胸腔积液的超敏CRP 活性与结核性胸腔积液超敏CRP 活性之间有明显的差异,恶性胸液组胸液的C 反应蛋白水平明显低于结核性胸腔积液(P <0 001)。笔者认为,胸腔积液超敏CR P 测定可作为常规检查项目,其灵敏度高,是较为理想的鉴别结核性胸腔积液与癌性胸腔积液的生化指标,但CRP 检测特异性较低,并非结核所特有,故判断CR P 结果应结合临床的相关检查。 表2 54例患者胸腔积液超敏C 反应蛋白检测结果(m g /L) 组别例数胸液CRP 浓度范围 X #S 结核组281.42~72.828.5#14.32恶性组 26 0.5~10.8 12.47#7.34

免疫比浊法和免疫投射比浊法(修改版)

免疫比浊法和免疫投射比浊法 1.定义: (1)免疫比浊法:在一定量的抗体中分别加入递增量的抗原,经一定时间后形成抗原抗体复合物,用浊度计测量反应液体的浊度,并由此推算样品中的抗原含量。 (2)免疫投射比浊法:当光线通过一个浑浊介质溶液时,由于溶液中存在混浊颗粒,光线被吸收一部分,吸收的多少与混浊颗粒 的量成正比,这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。一般 采用抗体对抗原定量的透射比浊法,称为免疫透射比浊法。2.原理 (1)免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规 定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促 聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使 反应液出现浊度。当抗体浓度固定时,形成的免疫复合物的 量随着检样中抗原量的增加而增加,反应液的浊度也随之增 加。通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照,即可计算 出检样中抗原的含量。 (2)免疫透射比浊法是抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时,可被免 疫复合物吸收。免疫复合物量越多,光线吸收越多。光线被 吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。利用比浊

计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密度值也与抗原含量成正比。本法较单向琼脂扩散试验和火箭电泳等一般免疫化学定量方法敏感、快速简便,但要求免疫复合物的数量和分子量达到一定高度,否则就难以测出。 3.关系 4.免疫比浊法适用的仪器 紫外可见分光光度计 全自动生化仪 全自动生化仪常见的检测方法 终点法 连续检测法 比浊法 均相酶免疫分析

超敏c反应蛋白高的原因

超敏c反应蛋白高的原因 在生活中人体是很容易产生一些炎症出现的,如果不注意卫生情况还容易受到细菌的感染,这些现象不仅会影响到大家的身体健康,还容易导致超敏c反应蛋白_超敏c反应蛋白高的情况发生,所以大家一定要养成一个好的生活习惯,从而来避免这些情况的出现,那么超敏c反应蛋白_超敏c反应蛋白高的原因有哪些? 第一,超敏c反应蛋白_超敏c反应蛋白高的原因。超敏c 反应蛋白偏高并没有什么特异性的,在炎症、组织损伤等情况下就会增高的。超敏C反应蛋白,正常人血清含量低于10ug/ml。在心肌梗塞、风湿活动、组织损伤、恶性肿瘤、手术创伤及各种急性或慢性感染等情况下,CRP在4~6h后可迅速增高;随着病情的好转,又会迅速下降至正常。 第二,C 反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)是急性时相反应蛋白之一,1930 年美国洛克菲勒研究院 AVERY 实验室的Tillett 和 Fransic 发现急性感染患者的血清能和肺炎双球菌

细胞壁上的 C 多糖发生沉淀反应,后证实参与反应的是一种蛋白质,故称之为 C 反应蛋白。CRP 基因位于 1 号染色体 q23,序列上高度保守,CRP 属于穿透素家族成员之一,相对分子质量为 115×10^3,由 5 个相同的亚单位以非共价键形式结合,形成对称的环状五球体,中间环绕一孔型结构,其凹面含有配体结合位点,每个亚单位有 206 个氨基酸残基,相对分子质量为23×10^3。 超敏c反应蛋白_超敏c反应蛋白高的原因。敏C蛋白是身体内一种关于细菌被感染后的反应。它的意思是身体内的血沉变高,造成血沉变高的原因有急性细菌性炎症,和慢性细菌的严重,以及结核病等这些细菌造成的感染的疾病。还有就是出现心肌炎和脑膜炎等炎症的时候,也是会造成超敏C反应蛋白出现偏高的情况。

C反应蛋白和超敏C反应蛋白

C反应蛋白和超敏C反应蛋白 一、C反应蛋白 1、C反应蛋白的发现、结构 C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是急性时相反应蛋白之一,1930年美国洛克菲勒研究院A VERY实验室的Tillett和Fransic发现急性感染患者的血清能和肺炎双球菌细胞壁上的C多糖发生沉淀反应,后证实参与反应的是一种蛋白质,故称之为C反应蛋白。CRP 基因位于1号染色体上,序列上高度保守,CRP属于穿透素家族成员之一,相对分子质量为115×103,由5个相同的亚单位以非共价键形式结合,形成对称的环状五球体,中间环绕一孔型结构,其凹面含有配体结合位点,每个亚单位有206个氨基酸残基,相对分子质量为23×103。正常状态下,CRP分子以五聚体形式存在,在酸性或碱性环境中也可分解为单体,从而引起某些免疫反应,但由于CRP单体存在于细胞膜而非血清中,故很难检测。炎症、感染、组织损伤时,在细胞因子(如白细胞介素-6、肿瘤坏死因子)等的刺激下,CRP主要由肝脏生成,并可在其他组织局部,如神经细胞、单核细胞、淋巴细胞及动脉粥样硬化斑块内合成。CRP在血中半衰期稳定,约19 h,其浓度主要依赖于肝脏的生成量。 2、CRP的生物学作用 CRP具有多种生物学功能,参与多种自身生理及病理生理过程。CRP与磷脂胆碱残基具有高度亲和力,并且可以和多种自身配体(如浆细胞脂蛋白、损伤细胞的细胞膜、小核糖体蛋白颗粒、调理素细胞等)或外来配体(如多聚糖、磷脂以及细菌、真菌、寄生虫等微生物的组分)相结合。CRP与这些配体结合后,被C1q识别,可以激活补体活化的经典途径。但经典途径的激活仅限于其初级阶段,即产生调理素C1~C4,几乎不能激活晚期补体蛋白C5~C9,因此不激活C5~C9膜攻击复合体的强烈促炎作用,限制补体激活晚期炎症反应

超敏C反应蛋白的研究现状及临床应用

超敏C-反应蛋白的研究现状及临床应用 一、C反应蛋白定义 由肝细胞合成(1 - 19 mg/天)存在于人的血清、脑脊液、胸腹水等多种体液中是炎性淋巴因子(白介素-6、白介素-1、肿瘤坏死因子)刺激肝脏和上皮细胞产生的急性相蛋白,是非特异性免疫机制的一部分。相对分子质量为115,000~140,000。 C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)被公认为是最有价值的急性时相反应蛋白,它的升高可以提示许多炎症事件的发生,因此,很久以来被广泛应用于临床感染性疾病的检测。近年来有研究者发现,炎症在动脉粥样硬化的起始、形成、发展过程中扮演了重要的角色,所以C反应蛋白这个极其灵敏的炎症指标在各种类型心血管疾病中得到了广泛的研究。现对C反应蛋白在感染性疾病、心血管疾病诊断、监测方面的研究进展作一综述。 CRP的结构和生理功能 最早发现其和肺炎球菌的C多糖相结合而得名,由5个相同的亚单位以非共价键结合而成的环状五球体,206氨基酸在体外可激活补体,诱导内皮细胞产生单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),上调ICAM-1、VCAM-1和E选择素,介导巨噬细胞摄入天然低密度脂蛋白,使单核细胞产生组织因子增加 CRP是环状五球体蛋白,属于Oligomeric钙结合蛋白,相对分子质量约120000,由5个相同的单体以非共价键构成,是炎性淋巴因子白介素-6、白介素-1,肿瘤坏死因子刺激肝脏上皮细胞合成的。CRP是由Tillet和Francis于1930年在一些急性病患者的血清中发现,因为它能和肺炎链球菌的荚膜C多糖起沉淀反应而得名。它是非特异性免疫机制的一部分,在钙离子存在下可以结合膜上的磷脂酸胆碱,也可结合染色质激活补体的经典途径,增强白细胞的吞噬作用,刺激淋巴细胞或单核/巨噬细胞活化,起调理作用。CRP在动脉粥样硬化斑块中也可以检测到,主要是结合于部分降解的低密度脂蛋白;此外,CRP也可以促进巨噬细胞组织因子的生成。由于各种原因的组织损伤会导致血清中CRP浓度的升高,同时还会出现一系列的全身反应,包括发热、免疫反应增强等急性时相反应,CRP的水平与炎症的出现及其严重程度具有相关性。 二、C反应蛋白特性 一)CRP半寿期约15h正常人CRP的浓度很低~82mg/L);组织损伤、急性感染发生后迅速显著上升(6 - 10 h ,1000mg/天)持续增高提示机体存在慢性炎症或自身免疫疾病病毒感染时不会升高,其变化不受病人的个体差异、机体状态和治疗药物的影响。 临床应用 * 炎症的诊断 * 炎症与非炎症的鉴别

关于超敏C反应蛋白,你应该知道这些

关于超敏C反应蛋白,你应该知道这些 1、炎症是动脉粥样硬化和急性冠脉综合征发生过程中不可或缺的组成部分,血清标志物超敏C反应蛋白(hs-CRP)可以反映这一过程。在美国无感染、关节炎、慢性炎性疾病和新近创伤的群体中,hs-CRP中位水平为2 mg/L。 2、代谢综合征患者的hs-CRP水平升高,可能是内脏脂肪炎症细胞因子介导的,可预测血管事件风险,并可能在糖尿病的发生发展中发挥作用。最近的研究证实了hs-CRP的心血管事件预测价值,但不支持其在疾病表达中的因果作用。 3、根据JUPITER在内的多项他汀试验证据,LDL-C将至<70 mg/dl和hs-CRP<2 mg/dl的患者临床预后最好。JUPITER 试验显示,在健康男性和女性(hs-CRP >2 mg,LDL-C <130> 4、冠心病和心血管死亡相对风险降低幅度与总胆固醇、HDL-C和血压降低幅度相似。与冠脉钙化积分不同,hs-CRP 和冠心病的相关性与事件发生率关系更密切(与动脉粥样硬化相比)。 5、中危人群是否使用他汀类药物治疗可使用hs-CRP这一指标辅助决策(Class IIb适应症)。考虑到JUPITER试验中包括LDL-C非常低的参与者,hs-CRP这一指标在该亚组中成本效益较好。

6、以心血管事件和糖尿病为终点的安慰剂对照试验正在评估抗炎药物的效果。这些抗炎药物包括低剂量甲氨蝶呤、canakinumab、秋水仙碱和双水杨酯。 医脉通编译自:Melvyn Rubenfire. A Test in Context: High-Sensitivity C-Reactive Protein. ACC. Feb 18, 2016 参考文献(点击阅读原文查看)C-反应蛋白浅谈CRP是一种急性炎症标志物,感染或外伤后可升高100-1000倍,因此,其主要作为心血管疾病的风险标记物,需要测量2次至少间隔2周,患者感染后或疾病期需处于新陈代谢稳定状态,因为它的半衰期是19天。CRP参考范围如下:CRP:0-10mg/dL;高灵敏度CRP(hs-CRP):< 3="">hs-CRP出现于急性心肌梗死后的1-2天内,第3天达到高峰,七天后变为阴性。CRP无法恢复正常意味着在心脏或其他组织出现损伤。不稳定型心绞痛患者体内的CRP通常不会升高。Hs-CRP与急性心肌梗死后的CKMB峰值相关。急性心肌梗死后至少三个月内,CRP可能仍然很高。 CRP升高的情况 急性或慢性炎症性疾病;组织坏死或组织损伤;组织缺血或梗死;感染,炎症;代谢综合征;恶性肿瘤尤其是乳腺、肺、胃肠道肿瘤;急性胰腺炎;手术后;烧伤;白血病;烟草烟雾;激素替代疗法;肥胖 CRP降低的情况

胶乳透射免疫比浊法

附件5 胱抑素C测定试剂(胶乳透射免疫比浊法) 注册技术审查指导原则 本指导原则旨在指导技术审评部门对胱抑素C测定试剂(胶乳透射免疫比浊法)的技术审评工作,同时也为注册申请人注册申报资料的准备及撰写提供参考。 本指导原则是对胱抑素C测定试剂(胶乳透射免疫比浊法)的一般要求,申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用,若不适用,需具体阐述理由及相应的科学依据,并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件,不涉及注册审批等行政事项,亦不作为法规强制执行,如有能够满足法规要求的其他方法,也可以采用,但应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的,随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展,本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、适用范围 胱抑素C测定试剂(胶乳透射免疫比浊法)是指基于透射免疫比浊法原理,利用半自动生化分析仪、全自动生化分析仪对人血清、血浆中的胱抑素C进行体外定量分析的试剂。 目前胱抑素C含量的测定方法主要是基于抗原抗体反应的 —1 —

免疫方法,如胶乳免疫比浊法、胶体金免疫比色法、单向免疫扩散法、酶联免疫吸附法、放射免疫测定法、荧光免疫测定法等,免疫比浊法可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。其中透射免疫比浊法可适用于半自动生化分析仪、全自动生化分析仪,散射免疫比浊法需特定蛋白分析仪。 从方法学上讲,本指导原则仅适用于胶乳透射免疫比浊法,不适用于散射免疫比浊法。 依据《体外诊断试剂注册管理办法》(国家食品药品监督管理总局令第5号)和《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》(食药监械管〔2013〕242号),胱抑素C测定试剂(免疫比浊法)管理类别为二类,分类代号为6840。 二、注册申报资料要求 (一)综述资料 综述资料主要包括产品预期用途、产品描述、方法学特征、生物安全性评价、研究结果总结以及同类产品上市情况介绍等内容,应符合《体外诊断试剂注册管理办法》(国家食品药品监督管理总局令第5号)和《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》(国家食品药品监督管理总局公告2014年第44号)的相关要求。相关描述应至少包含如下内容: 1.产品预期用途及辅助诊断的临床适应证背景情况 (1)胱抑素C的生物学特征、结构与功能、在体内正常和病理状态下的代谢途径和存在形式。 胱抑素C(Cystatin C, CysC)是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂,也被称为γ—微量蛋白及γ—后球蛋白,广泛存在于各种组织的—2 —

免疫比浊法测C反应蛋白

免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊度。当抗体浓度固定时,形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加,反应液的浊度也随之增加。通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照,即可计算出检样中抗原的含量。 抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。 免疫比浊测定注意事项: 1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。 2、应维持反应管中抗体蛋白始终过剩。 3、易受到脂血的影响。 分类 1.免疫透射比浊法抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时,可被免疫复合物吸收。免疫复合物量越多,光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。利用比浊计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密度值也与抗原含量成正比。本法较单向琼脂扩散试验和火箭电泳等一般免疫化学定量方法敏感、快速简便,但要求免疫复合物的数量和分子量达到一定高度,否则就难以测出。 2.免疫散射比浊法一定波长的光沿水平轴照射,通过溶液使遇到抗原抗体复合物粒子,光线被粒子颗粒折射,发生偏转,光线偏转的角度与发射光的波长和抗原抗体复合物颗粒大小和多少密切相关。散射光的强度与复合物的含量成正比,即待测抗原越多,形成的复合物也越多,散射光也越强。散射光的强度还与各种物理因素,如加入抗原或抗体的时间、光源的强弱和波长、测量角度等密切相关。散射比浊法又分为速率散射比浊法和终点散射比浊法。 3.免疫胶乳比浊法胶乳比浊法即是将待测物质相对应的抗体包被在直径为15-60nm的胶乳颗粒上,使抗原抗体结合物的体积增大,光通过之后,透射光和散射光的强度变化更为显著,从而提高试验的敏感性。 实验八免疫比浊法测定C-反应蛋白 【原理】 血清C反应蛋白(CRP)与试剂中抗人CRP抗体结合,形成免疫复合物,一起吸光度增加,在波长340nm和700nm处测定免疫复合物浊度。根据吸光度增加

关于超敏C反应蛋白,你应该知道这些

关于超敏C反应蛋白,您应该知道这些 1、炎症就是动脉粥样硬化与急性冠脉综合征发生过程中不可或缺得组成部分,血清标志物超敏C反应蛋白 (hs-CRP)可以反映这一过程。在美国无感染、关节炎、慢性炎性疾病与新近创伤得群体中,hs-CRP中位水平为2 mg/L。 2、代谢综合征患者得hs-CRP水平升高,可能就是内脏脂肪炎症细胞因子介导得,可预测血管事件风险,并可能在糖尿病得发生发展中发挥作用。最近得研究证实了hs-CRP得心血管事件预测价值,但不支持其在疾病表达中得因果作用。 3、根据JUPITER在内得多项她汀试验证据,LDL-C将至<70 mg/dl与hs-CRP<2 mg/dl得患者临床预后最好。JUPITER 试验显示,在健康男性与女性(hs-CRP >2 mg,LDL-C <130> 4、冠心病与心血管死亡相对风险降低幅度与总胆固醇、HDL-C与血压降低幅度相似。与冠脉钙化积分不同,hs-CRP 与冠心病得相关性与事件发生率关系更密切(与动脉粥样硬化相比)。 5、中危人群就是否使用她汀类药物治疗可使用hs-CRP这一指标辅助决策(Class IIb适应症)。考虑到JUPITER试验中包括LDL-C非常低得参与者,hs-CRP这一指标在该亚组中成本效益较好。

6、以心血管事件与糖尿病为终点得安慰剂对照试验正在评估抗炎药物得效果。这些抗炎药物包括低剂量甲氨蝶呤、canakinumab、秋水仙碱与双水杨酯。 医脉通编译自:Melvyn Rubenfire、A Test in Context: High-Sensitivity C-Reactive Protein、ACC、Feb 18, 2016 参考文献(点击阅读原文查瞧)C-反应蛋白浅谈CRP就是一种急性炎症标志物,感染或外伤后可升高100-1000倍,因此,其主要作为心血管疾病得风险标记物,需要测量2次至少间隔2周,患者感染后或疾病期需处于新陈代谢稳定状态,因为它得半衰期就是19天。CRP参考范围如下:CRP: 0-10mg/dL;高灵敏度CRP(hs-CRP):< 3="">hs-CRP 出现于急性心肌梗死后得1-2天内,第3天达到高峰,七天后变为阴性。CRP无法恢复正常意味着在心脏或其她组织出现损伤。不稳定型心绞痛患者体内得CRP通常不会升高。Hs-CRP与急性心肌梗死后得CKMB峰值相关。急性心肌梗死后至少三个月内,CRP可能仍然很高。 CRP升高得情况 急性或慢性炎症性疾病;组织坏死或组织损伤;组织缺血或梗死;感染,炎症;代谢综合征;恶性肿瘤尤其就是乳腺、肺、胃肠道肿瘤;急性胰腺炎;手术后;烧伤;白血病;烟草烟雾;激素替代疗法;肥胖 CRP降低得情况

超敏c反应蛋白检测临床意义

超敏C反应蛋白测定的临床意义 产品信息: 临床意义: C反应蛋白(CRP)是人体血浆中的一种正常蛋白组分,含量甚微。当组织损伤或炎症发生时,CRP 在肝脏的合成和分解率增加,血清中的CRP浓度会显著上升,是一种急性相的反应物。在临床上,CRP 浓度的测定非常有助于炎症和感染的检测,是最敏感的炎症指标之一。表现健康人:90%<3mg/L,99%<10mg/L,由细菌感染或创伤引起的急性炎症>10mg/L。 近期研究表明,长期反复的慢性炎症是动脉粥样硬化形成与扩展的一个重要组成部分,是引发心血管疾病的独立危险因素。该状态下CRP呈低浓度升高(10mg/L以下),只能用超敏CRP(简称hsCRP或hCRP)来检测(普通CRP检测低限为8-10mg/L,不能检测低浓度)。对无症状的人,基础CRP值可预示将来6-10年或更长时间发生心脑血管意外的危险程度。随着对低浓度的CRP准确测定要求的增加,定量测定低浓度的CRP作为防治早期冠状动脉心脏疾病(CHD)的主要工具之一,并且制定了相关的测定方法和说明。 LEADMAN公司生产的hCRP测定试剂盒是以胶乳免疫比浊测试为基础的高灵敏度的检测试剂。 在使用LEADMAN生产的hCRP试剂盒时,样本与缓冲液以及胶乳试剂混合。样本中的CRP与胶乳试剂中的抗人CRP抗体标记的胶乳颗粒特异性的结合,产生一种不溶的聚合物,导致溶液的浊度增加。溶液混浊的程度可以通过光学仪器进行检测,并与标本中CRP的浓度成正比。 LEADMAN生产的hCRP试剂盒具有优良的性能。精密度测试显示当样本的平均浓度为2.13和8.0mg/L 时,CV值分别为0.76%和0.56%。本试剂盒的线性范围是0-160.0mg/L,可以检测的最低浓度为0.05mg/L。 按照以上所述的步骤,对一组CRP浓度范围在0.10-48.30mg/L的388个血清样本进行了测试,另外还采用了一种市面上可以买到的浊度计检测的方法进行参考。这两组数据比较的相关系数为0.996,相关方程为y=0.96x+0.0125。 我们的试剂盒适用于日立系列、奥林巴斯系列、Cobas、东芝、贝克曼系列以及雅培系列等各种自动生化仪器。 做为判断感染和观察疗效的指标

超敏C反应蛋白检测的临床意义

超敏C反应蛋白检测的临床意义 核心提示:C反应蛋白(C-reactivenbsp;protein,nbsp;CRP)因其能和肺炎双球菌的细胞壁的C多糖起沉淀反应而得名nbsp;[1]nbsp;,是相对分子质量为 115-140KD的血清β球蛋白。CRP持续增高提示机体存在慢性炎症或自身免疫疾病,CRP在病毒感染时不会升高,其变化不受患者的个体 C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)因其能和肺炎双球菌的细胞壁的C多糖起沉淀反应而得名 [1] ,是相对分子质量为115-140KD的血清β球蛋白。CRP 持续增高提示机体存在慢性炎症或自身免疫疾病,CRP在病毒感染时不会升高,其变化不受患者的个体差异、机体状态和治疗药物的影响[2]。近年来,随着检测技术的进步,采用超敏感方法检测到的CRP被称为超敏CRP。大量的文章研究显示,它在冠心病、中风、周围血管栓塞等疾病诊断和预测中发挥越来越重要的作用,甚至被认为是心血管病危险评估的“金标准”[3]。 1 C反应蛋白的生物学特性 CRP是一种主要由肝脏合成的蛋白质,正常人血清中含量极微(平均值约为3.5 mg/L),当有急性炎症、创伤和冠心病时CRP会升高 [4] 。CRP含5个多肽链亚单位,非共价结合为盘形多聚体。白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)和白细胞介素1(IL-1)对CRP的生成有调节作用。CRP的生物特性主要表现为能结合细菌、真菌等体内的多糖物质,在钙离子存在下,形成的复合物,激活补体系统,释放炎症介质,促进细胞间粘附和吞噬细胞反应,溶解靶细胞。在血管粥样硬化损害的早期还发现CRP与细胞膜形成的复合体附着在血管内皮细胞,导致血管内皮细胞损伤,促进动脉粥样硬化的形成。由于各种原因的组织损伤血清中CRP浓度的升高,同时还会出现一系列的全身反应,包括发热、免疫反应增强等急性时相反应,CRP的水平与炎症的出现及其严重程度具有相关性[5]。 2 超敏C反应蛋白与颅脑损伤 张吉平等[6]对129例颅脑损伤患者不同时期超敏C反应蛋白的变化的研究显示,颅脑损伤后血清超敏C反应蛋白均有不同程度升高,且伤情越重,升高越明显。这说明超敏C反应蛋白不仅是一种疾病标记物,同时也参与创伤性疾病的致病过程,且创伤越严重,肝细胞在IL-6等细胞因子诱导下合成超敏C反应蛋白的速度越快,并释放入血液中。伤情越重,超敏C反应蛋白的下降速度越慢。这是因为决定循环中超敏C反应蛋白浓度的唯一因素是合成速率。当可刺激超敏C反应蛋白增加的因素没有得到完全控制,循环中超敏C反应蛋白也不会很快消失,会随伤情的好转而逐渐下降。可见,颅脑损伤后超敏C反应蛋白升高幅度和持续时间是反映颅脑损伤严重程度和观察疗效的理想指标,对判断伤情轻重、预

c反应蛋白偏高是怎么回事

如对您有帮助,可购买打赏,谢谢 c反应蛋白偏高是怎么回事 导语:在生活中我们有时候会听说过c反应蛋白这一物质的,但是很多人都不太了解这一物质是什么。在一些检查中我们会听见c反应蛋白偏高这一检查结果 在生活中我们有时候会听说过c反应蛋白这一物质的,但是很多人都不太了解这一物质是什么。在一些检查中我们会听见c反应蛋白偏高这一检查结果。我们并不知道这一情况出现是怎么回事。为了更好的保护人们的身体健康,我们需要了解这方面的知识。那么到底c反应蛋白偏高是怎么回事?下面我们就来看看权威的专家是怎么样说的吧。 1、人类C反应蛋白(C-reactive protein ,CRP)是指在机体受到感染或组织损伤时血浆中一些急剧上升的蛋白质(急性蛋白)。CRP可以激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用,从而清除入侵机体的病原微生物和损伤,坏死,凋亡的组织细胞,在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用。关于CRP的研究已经有70多年的历史,传统观点认为CRP是一种非特异的炎症标志物,但近十年的研究揭示了CRP直接参与了炎症与动脉粥样硬化等心血管疾病,并且是心血管疾病最强有力的预示因子与危险因子。 2、超敏C反应蛋白(hs-CRP)与普通C反应蛋白(CRP)属同一种蛋白,只是由于其测定方法更敏感而得名。C反应蛋白值常在感染、心脑血管性疾病、糖尿病、代谢综合征、外周血管病、慢性阻塞性肺病、哮喘、肿瘤等疾病中指导临床诊疗。而超敏C反应蛋白的升高与心血管疾病、代谢综合征、2型糖尿病的发病率增加密切相关。有研究表明,hs-CRP≥2.0毫克/升是中国人发生心血管疾病的有效预测因子。 3、超敏C反应蛋白并不是诊断类风湿关节炎的特异指标。根据您预防疾病常识分享,对您有帮助可购买打赏

降钙素原与超敏C反应蛋白鉴别及优缺点

讲义(打印或手写) 降钙素原(PCT)就是一种蛋白质,当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症与多脏器功能衰竭时它在血浆中得水平升高。自身免疫、过敏与病毒感染时PCT不会升高、局部有限得细菌感染、轻微得感染与慢性炎症不会导致其升高、PCT反映了全身炎症反应得活跃程度。影响PCT水平得因素包括被感染器官得大小与类型、细菌得种类、炎症得程度与免疫反应得状况,就是一种用于细菌感染早期诊断、鉴别诊断、治疗监控及预后判断得具有创新意义得诊断指标。当发生严重细菌感染与脓毒症时,血浆PCT异常升高,3~6h 即可测得,6~12h达高峰,2~3天恢复正常 1。降钙素原适应症:①细菌感染与病毒感染得鉴别诊断②帮助SIRS/脓毒症得早期诊断,评估疾病得严重程度及预后③抗生素治疗效果得评估,指导临床抗生素使用④手术与严重创伤患者细菌感染并发症监测⑤胰腺炎鉴别诊断 2、降钙素原临床意义 (1)细菌感染与病毒感染得鉴别诊断 病毒性疾病时PCT不增高或仅轻度增高,一般不会超过1~2 ng,PCT鉴别病毒性疾病得敏感度与特异性均高于传统标记物(如c反应蛋白、白细胞,红细胞沉降率等)。 (2)用于脓毒症得诊断与鉴别诊断 2012年9月发表得《降钙素原PCT急诊临床应用得专家共识》(以下简称为“共识”)指出:脓毒症患者得PCT水平明显高于非脓毒症患者。且PCT升高对细菌感染导致得脓毒症特异性很高,可作为诊断脓毒症与鉴别严重细菌感染得生物标志物。同时,与单纯得临床检测标准相比,PCT检测可显着提高SIRS/脓毒症诊断得敏感性(97%)与特异性(78%)。把PCT加入诊断标准后,诊断准确率从0.77提高到0、94。 《共识》指出:PCT在SIRS/脓毒症、严重脓毒症与脓毒症休克患者得质量浓度依次增高,与病情得严重度呈正相关(见上图),目前PCT诊断脓毒症得界值水平为>0。5 ng/ml、PC T〈0.05ng/ml得患者患高风险细菌性感染得可能性非常小,PCT浓度从0。5ng/ml上升超过2 ng/ml时,严重细菌感染或脓毒症得发生率增高,如果PCT值大于 2 ng/ml甚至大于10 ng/ml时,脓毒症、严重脓毒症或者脓毒症休克得可能性非常大(超过90%),高水平PCT表明全身炎症反应非常严重,死亡风险很高,应立即开始抗生素及针对性治疗。 (3)抗生素治疗效果得评估 监测PCT得变化趋势可以作为抗生素治疗效果得评估手段,PCT持续升高或者不降就是治疗无效得表现。例如在严重社区获得性肺炎(SCAP)、院内获得性肺炎(HAP)以及呼吸机相关性肺炎(VAP)中,PCT水平与痰细菌培养阳性率、病情得严重程度呈正相关、初始PCT水平高并且在治疗过程中持续升高或不降就是预后不良得标志。

免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较-精选文档

免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较 在临床上,对于人血清内特定蛋白的检测,一般是采取免疫散射比浊法、免疫透射比浊法进行检测;然而,在检测的过程中,如游离血红蛋白、脂蛋白等会对检测的结果带来一定的干扰,继而影响检测结果的准确性[1]。对此,为保证血清检测的准确性,笔者对免疫透射比浊法、免疫散射比浊法在特定蛋白抗干扰能力的效果进行探讨,具体报道如下。 1.资料与方法 1.1对象 本次研究的样本源自于某医院门诊与住院患者当天的新鲜 血清,其中排除存在脂血、溶血、浑浊等血清。同时,事前准备好IgM、CRP等浓度不等的混合血清,具体为IgM低浓度1.0~1.5g/L,高浓度大于2.0g/L;CRP低浓度4~10mg/L,高浓度大于100mg/L。 1.2仪器设备 选用Dade Behring BNProSpec特定蛋白测定仪、Roche Modular P全自动生化分析仪,试验所用试剂皆为仪器配套试剂。同时选取三个干扰物,即FBil(游离胆红素)、CH(乳糜)、Hb(血红蛋白),每种干扰物各准备两瓶试剂盒,一瓶作为空白对照使用,另外,干扰物的浓度具体为FBil3280μmol/L、

CH15000FTU、Hb49.6μmol/L[2]。 1.3研究方法 首先,对混合血清进行制备,之后依据干扰试剂盒上的制备顺序,配制干扰物;将2ml的蒸馏水加入到每一个干扰物与空白对照内,复溶。然后,按照1:9的比例,把已经准备好的干扰物和混合血清混合在一起,制作成干扰物样本,其中含有干扰物的为样本甲,未加干扰物为样本乙[3]。把两个样本分别制定浓度不等的若干个样本,具体浓度见下表1所示。最后采取特定蛋白测定仪与全自动生化分析仪展开特定蛋白的抗干扰试验检测,同时对其干扰率进行计算。 1.4统计学分析 本次研究所得全部数据,均采取软件Excel加以分析与处理。其中,干扰率计算公式为:含有干扰物组的均值减去空白对照组的均值,之后再除以空白对照组的均值。注意,特定蛋白(已加入干扰物)所测得的均值,高于浓度相同的空白对照组的正负5%,那么则判定为检测受到了干扰[4]。 2. 结果 经检测发现,CH在9000与15000时,免疫散射比浊法对IgM 进行检测时,受到干扰影响;Hb在9.9与29.8浓度时,免疫散射比浊法对高浓度IgM、低浓度CRP检测时,受到干扰影响。采取免疫透射比浊法对三种含有干扰物的特定蛋白进行检测时,未受到任何干扰影响。具体情况见下表1所示。

相关文档
相关文档 最新文档