现代生化仪器分析试题及答案
一、选择题
1. 在气-液色谱分析中，当两组分的保留值很接近，且峰很窄，但只能部分分离，其原因是（ D ）
A. 柱效能太低
B. 容量因子太大
C. 柱子太长
D. 固定相选择性不好
2. 在GC和LC中，影响柱的选择性不同的因素是（A）
A. 固定相的种类
B. 柱温
C. 流动相的种类
D. 分配比
3. 适合于植物中挥发油成分分析的方法是（D ）
A. 原子吸收光谱
B. 原子发射光谱
C. 离子交换色谱
D. 气相色谱
4. 原子发射光谱的产生是由（B）
A. 原子次外层电子在不同能态间的跃迁
B. 原子外层电子在不同能态间的跃
C. 原子外层电子的振动和转动
D. 原子核的振动
5. 在AES分析中，把一些激发电位低、跃迁几率大的谱线称为（B）
A. 共振线
B. 灵敏线
C. 最后线
D. 次灵敏线
6. 为了同时测定废水中ppm级的Fe、Mn、Al、Ni、Co、Cr，最好应采用的分析方法为（A）
A. ICP-AES
B. AAS
C. 原子荧光光谱（AFS）
D. 紫外可见吸收光谱（UV-VIS）
7. 某物质能吸收红外光波，产生红外吸收光谱图，那么其分子结构中必定（C）
A. 含有不饱和键
B. 含有共轭体系
C. 发生偶极矩的净变化
D. 具有对称性
8. C）光谱仪
A. AES
B. AAS
C. UV-VIS
D. IR
9. 一般气相色谱法适用于（C）
A. 任何气体的测定
B. 任何有机和无机化合物的分离测定
C. 无腐蚀性气体与在气化温度下可以气化的液体的分离与测定
D. 无腐蚀性气体与易挥发的液体和固体的分离与测定
10. 吸光度读数在（B）范围内，测量较准确
A. 0～1
B. 0.15～0.7
C. 0～0.8
D. 0.15～1.5
11. 分光光度计产生单色光的元件是（A ）
A. 光栅＋狭缝
B. 光栅
C. 狭缝
D. 棱镜
12. 分光光度计测量吸光度的元件是（B ）
A. 棱镜
B. 光电管
C. 钨灯
D. 比色皿
13. 用分光光度法测铁所用的比色皿的材料为（D）
A. 石英
B. 塑料
C. 硬质塑料
D. 玻璃
14. 用邻二氮杂菲测铁时所用的波长属于（B）
A. 紫外光
B. 可见光
C. 紫外－可见光
D. 红外光
15. 摩尔吸光系数与吸光系数的转换关系（B）
A. a＝M·ε
B. ε＝M·a
C. a＝M／ε
D. A＝M·ε
16. 一般分析仪器应预热（B）
A. 5分钟
B. 10～20分钟
C. 1小时
D. 不需预热
17. 若配制浓度为20μg/mL的铁工作液，应（A）
A. 准确移取200μg/mL的Fe3＋贮备液10mL于100mL容量瓶中，用纯水稀至刻度
B. 准确移取100μg/mL的Fe3＋贮备液10mL于100mL容量瓶中，用纯水稀至刻度
C. 准确移取200μg/mL的Fe3＋贮备液20mL于100mL容量瓶中，用纯水稀至刻度
D. 准确移取200μg/mL的Fe3＋贮备液5mL于100mL容量瓶中，用纯水稀至刻度
18. 测铁工作曲线时，要使工作曲线通过原点，参比溶液应选（A）
A. 试剂空白
B. 纯水
C. 溶剂
D. 水样
19. 测量一组工作溶液并绘制标准曲线，要使标准曲线通过坐标原点，应该（D）
A. 以纯水作参比，吸光度扣除试剂空白
B. 以纯水作参比，吸光度扣除缸差
C. 以试剂空白作参比
D. 以试剂空白作参比，吸光度扣除缸差
20. 下述情况所引起的误差中，属于系统误差的是（C）
A. 没有用参比液进行调零调满
B. 比色皿外壁透光面上有指印
C. 缸差
D. 比色皿中的溶液太少
21. 邻二氮杂菲分光光度法测铁实验的显色过程中，按先后次序依次加入（B）
A. 邻二氮杂菲、NaAc、盐酸羟胺
B. 盐酸羟胺、NaAc、邻二氮杂菲
C. 盐酸羟胺、邻二氮杂菲、NaAc
D. NaAc、盐酸羟胺、邻二氮杂菲
22. 下列方法中，那个不是气相色谱定量分析方法（D）
A. 峰面积测量
B. 峰高测量
C. 标准曲线法
D. 相对保留值测量
23. 气相色谱仪分离效率的好坏主要取决于何种部件（B）
A. 进样系统
B. 分离柱
C. 热导池
D. 检测系统
24. 原子吸收光谱分析仪的光源是（D）
A. 氢灯
B. 氘灯
C. 钨灯
D. 空心阴极灯
25. 下列哪种方法不是原子吸收光谱分析法的定量方法（B）
A. 浓度直读
B. 保留时间
C. 工作曲线法
D. 标准加入法
26. 准确度和精密度的正确关系是（B）
A. 准确度不高，精密度一定不会高
B. 准确度高，要求精密度也高
C. 精密度高，准确度一定高
D. 两者没有关系
27. 下列情况所引起的误差中，不属于系统误差的是（A）
A. 移液管转移溶液后残留量稍有不同
B. 称量时使用的砝码锈蚀
C. 天平的两臂不等长
D. 试剂里含有微量的被测组分
28. 若试剂中含有微量被测组分，对测定结果将产生（A）
A. 过失误差
B. 系统误差
C. 仪器误差
D. 偶然误差
29. 滴定终点与化学计量点不一致，会产生（A）
A. 系统误差
B. 试剂误差
C. 仪器误差
D. 偶然误差
30. 比色皿中溶液的高度应为缸的（B）
A. 1/3
B. 2/3
C. 无要求
D. 装满
31. 重量法中，用三角漏斗过滤晶形沉淀时，溶液应控制在（D）
A. 漏斗的1/3高度
B. 漏斗的2/3高度
C. 滤纸的1/3高度
D. 滤纸的2/3高度
32. 用分光光度法测水中铁的含量时，所用的显色剂是（B）
A. 醋酸钠
B. 氮杂菲
C. 盐酸羟胺
D. 刚果红试纸
33. 用分光光度法测水中铁含量时，绘制工作曲线的步骤是（D）
A. 用200ppb溶液在510nm处，每5min测一次吸光度
B. 用200ppb溶液在510nm处，加入不等量显色剂分别测吸光度
C. 用200ppb溶液在光路中，分别测不同波长下吸光度
D. 用100～500ppb系列溶液在510nm处，分别测吸光度
34. 原子吸收光谱分析中，乙炔是（C）
A. 燃气－助燃气
B. 载气
C. 燃气
D. 助燃气
35. 原子吸收光谱测铜的步骤是（A）
A. 开机预热－设置分析程序－开助燃气、燃气－点火－进样－读数
B. 开机预热－开助燃气、燃气－设置分析程序－点火－进样－读数
C. 开机预热－进样－设置分析程序－开助燃气、燃气－点火－读数
D. 开机预热－进样－开助燃气、燃气－设置分析程序－点火－读数
36. 原子吸收光谱光源发出的是（A）
A. 单色光
B. 复合光
C. 白光
D. 可见光
37. 分光光度法测铁实验中，绘制工作曲线标准系列至少要几个点（D）
A. 2个
B. 3个
C. 4个
D. 5个
38. 分光光度法测铁中，标准曲线的纵坐标是（A）
A. 吸光度A
B. 透光度T%
C. 浓度C
D. 浓度mg/L
39. 在液相色谱法中，按分离原理分类，液固色谱法属于（D ）
A. 分配色谱法
B. 排阻色谱法
C. 离子交换色谱法
D. 吸附色谱法
40. 在高效液相色谱流程中，试样混合物在（C ）中被分离
A. 检测器
B. 记录器
C. 色谱柱
D. 进样器
41. 在液相色谱中，为了改变色谱柱的选择性，可以进行如下哪些操作（C）
A. 改变流动相的种类或柱子
B. 改变固定相的种类或柱长
C. 改变固定相的种类和流动相的种类
D. 改变填料的粒度和柱长
42. 在液相色谱中，某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力（C）
A. 组分与流动相
B. 组分与固定相
C. 组分与流动相和固定相
D. 组分与组分
43. 在液相色谱中，不会显著影响分离效果的是（B ）
A. 改变固定相种类
B. 改变流动相流速
C. 改变流动相配比
D. 改变流动相种类
44. 不是高液相色谱仪中的检测器是（B）
A. 紫外吸收检测器
B. 红外检测器
C. 差示折光检测
D. 电导检测器
45. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是（B）
A. 贮液器
B. 输液泵
C. 检测器
D. 温控装置
46. 高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用（A）水
A. 国标规定的一级、二级去离子水
B. 国标规定的三级水
C. 不含有机物的蒸馏水
D. 无铅（无重金属）水
47. 高效液相色谱仪与普通紫外－可见分光光度计完全不同的部件是（A）
A. 流通池
B. 光源
C. 分光系统
D. 检测系统
48. 符合吸收定律的溶液稀释时，其最大吸收峰波长位置（D）
A. 向长波移动
B. 向短波移动
C. 不移动
D. 不移动，吸收峰值降低
49. 光学分析法中，使用到电磁波谱，其中可见光的波长范围为（B）
A. 10～400nm;
B. 400～750nm;
C. 0.75～2.5mm;
D. 0.1～100cm
50. 棱镜或光栅可作为（C）
A. 滤光元件
B. 聚焦元件
C. 分光元件
D. 感光元件.
51. 红外光谱法中的红外吸收带的波长位置与吸收谱带的强度，可以用来（A）
A. 鉴定未知物的结构组成或确定其化学基团及进行定量分析与纯度鉴定;
B. 确定配位数;
C. 研究化学位移;
D. 研究溶剂效应.
52. 某种化合物，其红外光谱上3000-2800cm-1，1460 cm-1，1375 cm-1和720 cm-1等处有主要吸收带，该化合物可能是（A）
A. 烷烃
B. 烯烃
C. 炔烃
D. 芳烃
E. 羟基化合物
53. 电磁辐射的微粒性表现在哪种性质上（B）
A. 能量
B. 频率
C. 波长
D. 波数
54. 测定大气中的微量有机化合物（M大于400）首选的仪器分析方法是（A）
A. GC
B. ISE
C. AAS
D. UV
55. 测定试样中的微量金属元素首选的仪器分析方法是（C）
A. GC
B. ISE
C. AAS
D. UV
56. 直接测定鱼肝油中的维生素A首选的仪器分析方法是（D）
A. GC
B. ISE
C. AAS
D. UV
57. 近紫外区的波长是（B）
A. 5～140pm
B. 200～400nm
C. 2.5～50um
D. 0.1～100mm
58. 原子吸收分光光度计不需要的部件是（A）
A. 比色皿
B. 光栅
C. 光电倍增管
D. 光源
59. 测定张家界树木叶片中的微量金属元素，首选的仪器分析方法是（C）
A. GC
B. ISE
C. AAS
D. UV
60. 下列分析方法中，可以用来分离有机混合物的是（B）
A. 原子吸收光谱法
B. 气相色谱法
C. 紫外吸收光谱法
D. 电位分析法
61. 人眼能感觉到的光称为可见光，其波长范围是（C）
A. 200—780nm
B. 200—400nm
C. 400—780nm
D. 200—600nm
62. 在光度测定中，使用参比溶液的作用是（C）
A. 调节仪器透光度的零点
B. 调节入射光的光强度
C. 消除溶剂和试剂等非测定物质对入射光吸收的影响
D. 吸收入射光中测定所不需要的光波
63. 摩尔吸收系数k的物理意义是（C）
A. 1mol有色物质的吸光度
B. 1mol.L-1某有色物质溶液的吸光度
C. 1mol.L-1某有色物质在1cm光程时的吸光度
D. 2 mol.L-1某有色物质在1cm光程时的吸光度
64. 紫外光度计的种类和型号繁多，但其基本组成的部件中没有（C）
A. 光源
B. 吸收池
C. 乙炔钢瓶
D. 检测器
65. 原子吸收分析中光源的作用是（C）
A. 提供试样蒸发和激发所需要的能量
B. 产生紫外光
C. 发射待测元素的特征谱线
D. 产生具有足够浓度的散射光
66. 原子吸收分析中，吸光度最佳的测量范围是（A）
A. 0.1~ 0.5
B. 0.01 ~ 0.05
C. 0.6 ~ 0.8
D. 大于0.9
67. 在原子吸收分光光度计中所用的检测器是（C）
A. 吸光电池
B. 光敏电池
C. 光电管倍增管
D. 光电管
68. 气液色谱系统中，被分离组分的k值越大，则其保留值（A）
A. 越大
B. 越小
C. 不受影响
D. 与载气流量成反比
69. 气液色谱系统中，被分离组分与固定液分子的类型越相似，它们之间（C）
A. 作用力越小，保留值越小
B. 作用力越小，保留值越大
C. 作用力越大，保留值越大
D. 作用力越大，保留值越小
70. 固定相老化的目的是（C）
A. 除去表面吸附的水分
B. 除去固定相中的粉状态物质
C. 除去固定相中残余的溶剂和其它挥发性物质
D. 提高分离效能
二、填空题
1. 琼脂糖电泳用的缓冲液有TAE、TBE、TPE。
2. 折射率是指光线在电子相对于原子核的运动速度与在原子在平衡位置的振动速度的比值。
3. 核酸电泳的染色剂是EB。
4. PCR中应注意的事项有防止污染和设立对照。
5. 在有机化合物中，常常因取代基的变更或溶剂的改变，使其吸收带的最大吸收波长发生移动，向长波方向移动称为红移，向短波方向移动称为蓝移。
6. 在朗伯—比尔定律I/I o= 10-abc中，I o是入射光的强度，I是透射光的强度，a 是吸光系数，b是光通过透明物的距离，即吸收池的厚度，c是被测物的浓度，则透射比T = I/I o，百分透过率T% = I/I o ×100%_，吸光度A与透射比T的关系为-logT_。
7. PCR的基本原理是DNA体外的快速扩增。
8. 对于紫外及可见分光光度计，在可见光区可以用玻璃吸收池，而紫外光区则用石英吸收池进行测量。
9. 红外光谱是由于分子振动能级的跃迁而产生，当用红外光照射分子时，要使分子产生红外吸收，则要满足两个条件：（1）辐射光子具有的能量与发生振动跃迁所需的跃迁能量相等，（2）辐射与物质之间有耦合作用。
10. 把无色的待测物质转变成为有色物质所发生的化学反应称为显色反应
所用试剂为显色剂。
11. 保留值表示试样中各组分在色谱柱中的滞留时间。
12. 火焰原子吸收常用乙炔作燃气，用空气或笑气作助燃气。
13. 气相色谱仪一般由五部分组成，它们是气路系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统.。
14. 在AAS法中，使试样原子化的方法有火焰原子化、石墨炉原子化法，这两种方法的主要区别在于：火焰原子化靠火焰加热、石墨炉原子化靠电加热。15. ICP的中文名称为电感耦合等离子体。
16. 气相色谱法的英文缩写为_ GC。
17. 原子吸收法的英文缩写为_ AAS。
18. 原子吸收光谱法中采用的光源是锐线光源，它的作用是发射待测元素的特征谱线.。
19. 你认为在气相色谱分析中，两混合组分R=1.5才算达到完全分离。
20. 实验室常用的生物样品的破碎方法有机械法、物理法和化学及生物化学法
21. 生物样品有植物样品、动物样品和各种微生物样品三种类型。
22. 旋转浓缩仪的组成有收集瓶、电机、浓缩瓶
23. 分光光度计有单光束、双光束和双波长三种类型。
24. 蛋白质和核酸都具有很强的紫外吸收，通常情况下一般蛋白质在紫外区的最大峰在280nm左右，核酸在260nm左右。
25. 滴定分析可分为四类：酸碱滴定、配位滴定、氧化还原滴定、沉淀滴定
三、名词解释
1. 基线：没有组分流出，仅有流动相通过检测器时，检测器产生的响应值；稳定的基线是一条直线，若基线下斜或上斜，称为漂移，基线的上下波动，称为噪音。
2. 分析线：元素发射的特征谱线中用来进行定性或定量分析的特征谱线。
3. 共振线：在原子谱线中，凡是由基态与激发态之间的跃迁所产生的原子光谱线。
4. 最后线：如果把含有某种元素的溶液稀释，原子光谱线的数目就不断减少，当元素含量少到最低限度时，仍能坚持到最后出现的谱线，称为最后线或是灵敏线.
5. 液-固吸附色谱：流动相为液体，固定相为固体吸附剂，根据物质吸附作用的不同来分离物质的色谱
6. 正相HPLC（normal phase HPLC）：是由极性固定相和非极性（或弱极性）流动相所组成的HPLC体系
7. 基态：通常情况下，物质的原子处于能量最低的基态（ground state）。
8. 激发：原子由基态跃迁到激发态的过程叫做激发。
9. 激发态：原子的基态是可以被破坏的，当获取足够的能量后，原子的一个或者几个电子就可能跃迁到较高的能级上去，原子便成为激发态。
10. 光学分析法：根据物质发射的电磁辐射或电磁辐射与物质相互作用建立起来的一类分析方法，称为光学分析法
11. 峰高（peak height；h）：组分在柱后出现浓度极大时的检测信号，即色谱峰顶至基线的距离。
12. 峰面积（peak area；A）：色谱曲线与基线间包围的面积
13. 滴定：就是指将标准溶液通过滴定管滴加到待测溶液中的操作过程
14. 终点误差：滴定分析法允许的由滴定终点和化学计量点不一致所引起的误差称为终点误差
四、问答题（每题4分，共20分，答在空白处）
1. 举例说明生色团和助色团，并解释红移和紫移。
答：广义地说，生色团是指分子中可以吸收光子而产生电子跃迁的原子基团；严格地说，那些不饱和吸收中心才是真正的生色团，如苯环等。
助色团：带有非键电子对的基团（如-OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等），它们本身不能吸收大于200 nm的光，但是当它们与生色团相连时，会使其吸收带的最大吸收波长λmax发生移动，并增加其吸收强度。
在有机化合物中，常常因取代基的变更或溶剂的改变，使其吸收带的最大吸收波长λmax发生移动
向长波方向移动称为红移
向短波方向移动称为紫移（蓝移）
2. 原子吸收光谱法的特点有哪些？
1）灵敏度高（火焰法：1 ng/ml，石墨炉100-0.01 pg）
2）准确度好（火焰法：RSD <1%，石墨炉3-5%）
3）选择性高（可测元素达70个，相互干扰很小；一般不需要分离共存元素）4）分析速度快
5）应用范围广
缺点：不能多元素同时分析，分析不同元素必须使用不同元素灯
3. 为什么作为高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤、脱气？
答：高效液相色谱仪所用溶剂在放入贮液罐之前必须经过0.45μm滤膜过滤，除去溶剂中的机械杂质，以防输液管道或进样阀产生阻塞现象。所有溶剂在上机使用前必须脱气；因为色谱住是带压力操作的，检测器是在常压下工作。
若流动相中所含有的空气不除去，则流动相通过柱子时其中的气泡受到压力而压缩，流出柱子进入检测器时因常压而将气泡释放出来，造成检测器噪声增大，使基线不稳，仪器不能正常工作，这在梯度洗脱时尤其突出。
4. 什么是复合光和单色光？光谱分析中如何获得单色光？
答：物质发出的包含多种频率成分的光，称取复合光。只包含一种频率成分的光叫单色光，光谱分析中利用色散原理来获得单色光。
5. 简述气相色谱仪的分离原理，气相色谱仪一般由哪几部分组成及其作用？
答：气相色谱仪的分离原理：当混合物随流动相流经色谱柱时，与柱中的固定相发生作用（溶解、吸附等），由于混合物中各组分理化性质和结构上的差异，与固定相发生作用的大小、强弱不同，在同一推动力作用下，各组分在固定相中的滞留时间不同，从而使混合物中各组分按一定顺序从柱中流出。
气相色谱仪一般由气路系统、进样系统、分离系统、检测系统和记录与数据处理系统组成。
1）路系统的作用：为色谱分析提供纯净、连续的气流。
2）进样系统的作用：进样并将分析样品瞬间汽化为蒸气而被载气带入色谱柱. 3）分离系统的作用：使样品分离开。
4）检测系统的作用：把从色谱柱流出的各个组分的浓度（或质量）信号转换为电信号。
5）记录与数据处理系统的作用：把由检测器检测的信号经放大器放大后由记录仪记录和进行数据处理。
6. 原子吸收光谱仪主要由哪几部分组成？各有何作用？
答：原子吸收光谱仪主要由光源、原子化器、分光系统、检测系统四大部分组成。
1）源的作用：发射待测元素的特征谱线。
2）原子化器的作用：将试样中的待测元素转化为气态的能吸收特征光的基态原子。
3）分光系统的作用：把待测元素的分析线与干扰线分开，使检测系统只能接收分析线。
4）检测系统的作用：把单色器分出的光信号转换为电信号，经放大器放大后以透射比或吸光度的形式显示出来。
7. PCR技术有哪些特点？
1）高度的特异性：引物的限定，高温扩增。
2）高度的敏感性：微量样品（单拷贝基因、单个细胞、一根头发等），高效性（×106）。
3）操作简便快速，易于自动化、程序化，方法稳定。
4）对标本的纯度要求底：纯化或粗制的，新鲜或陈旧的，各种细胞，体液，完整的或降解的DNA。
8.火焰原子吸收分光光度计的原理是什么？
利用从光源辐射出的特征谱线被火焰原子化器产生的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收；通过测定特征辐射光被吸收的大小，来计算出待测元素的含量。
9. 什么是仪器分析？它与化学分析方法比较有什么特点？
仪器分析是指采用比较复杂或特殊的仪器设备，通过测量物质的某些物理或物理化学性质的参数及其变化来获取物质的化学组成、成分含量及化学结构等信息的一类方法。这些方法一般都有独立的方法原理及理论基础。
仪器分析的特点（与化学分析比较）：
1）灵敏度高，检出限量可降低。如样品用量由化学分析的mL、mg级降低到仪器分析的g、L级，甚至更低。适合于微量、痕量和超痕量成分的测定。
2）选择性好。很多的仪器分析方法可以通过选择或调整测定的条件，使共存的组分测定时，相互间不产生干扰。
3）操作简便，分析速度快，容易实现自动化。
4）相对误差较大。化学分析一般可用于常量和高含量成分分析，准确度较高，误差小于千分之几。多数仪器分析相对误差较大，一般为5%，不适用于常量和高含量成分分析。
5）需要价格比较昂贵的专用仪器。
10. 琼脂糖凝胶电泳的原理是什么？
1）带电颗粒在电场中将受到电场力的作用而发生泳动。
2）电泳缓冲液中充满了离子，因而导电，DNA分子在PH 7~8时带负电，因此在电场作用下向正极泳动。
3）琼脂糖凝胶中含有密集细小的孔洞，线状的DNA分子可以通过。
4）DNA分子越大，阻力越大，泳动越慢，经过一定时间泳动后将按大小排列成一组“条带”。
五、论述题：
简述一个PCR反应需要哪些试剂与试样及常规PCR的反应条件？
答：1、反应需要的试剂：
模板核酸（template如：人基因组DNA 0.1 μg）
扩增引物（primer一对，各0.2～1 μmol/L）
TaqDNA聚合酶（2.5 U）
dNTP（四种：各20～200 μmol/L）
标准的缓冲液：10X buffer（KCl、Tris-HCl、MgCl2、BSA或DDT）
无菌双蒸水或三蒸水
石蜡油或矿物油：30~50 μl（封闭、防止高温时液体的挥发）
2、反应条件
预变性：94 ℃300 s（高温起动:充分变性，防止非特异性扩增）
变性：90 ℃-95 ℃，30 s -60 s
退火：55-65 ℃30 s-45 s
延伸：70-72℃30-60 s （<2kb）
25-35次cycle后，延长延伸（72 ℃，10 min；充分延伸），冷却至4℃或加入EDTA至10 mmol/L以终止反应。