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生物技术制药考试题复习修订稿

生物技术制药考试题复

习

内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）

一：选择题

1、酶的主要来源是（C）

A、生物体中分离纯化

B、化学合成

C、微生物生产

D、动/植物细胞与组织培养

2、所谓“第三代生物技术”是指 (A)

A、海洋生物技术

B、细胞融合技术

C、单克隆技术

D、干细胞技术

3、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体往往会产生代谢副产物乙酸：(A)

A、大于

B、等于

C、小于

D、无关

4、促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：（E）

A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用?

B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定?

C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活

D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感

E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化

5、目前基因治疗最常用的载体是：(B)

A、腺病毒?

B、反转录病毒

C、腺相关病毒

D、痘苗病毒

E、疱疹病毒

6、cDNA第一链合成所需的引物是：（D）

A、Poly?A

B、PolyC

C、PolyG

D、PolyT

E、发夹结构

7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：(A)

A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段

B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达?

C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达?

D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制

8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A)

A、表达产物的功能

B、表达产物的产量C.表达产物的稳定性

D.表达产物分离纯化的难易?

9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和（安全性鉴定）。

10、基因工程药物的化学本质属于：(C)

A.糖类

B.脂类

C.蛋白质和多肽类

D.氨基酸类

11、用聚二乙醇（PEG）诱导细胞融合时，下列错误的是：(C)

A、PEG的相对分子量大，促进融合率高

B、PEG的浓度高，促进融合率高

C、PEG的相对分子量小，促进融合率高

D、PEG的最佳相对分子量为4000

12、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C)

A、表达产物为糖基化蛋白质

B、表达产物存在的部位是在菌体内

C、容易培养，产物提纯简单

D、表达产物为天然产物?

13、人类第一个基因工程药物是：(A)

A、人胰岛素

B、重组链激酶

C、促红细胞生成素

D、乙型肝炎疫苗

14、下列不属于加工改造后的抗体是：

(C)

A、人-鼠嵌合抗体?

B、单链抗体

C、鼠源性单克隆抗体

D、单域抗体

15、动物细胞培养的条件中，不正确的是：(D)

A.最适pH为

B.最适温度为37±

C.最理想的渗透压为290-300mOsm/kg?

D.氧浓度为100%

16、第三代抗体是指：(D)

A、B淋巴细胞合成和分泌的球蛋白

B、多发性骨髓瘤细胞产生的免疫球蛋白

C、融合细胞产生的单克隆抗体

D、利用基因工程技术制备的基因工程抗体

17、现代生物技术的标志是：(C)

A、DNA互补双螺旋结构模型的提出?

B、DNA测序技术的诞生

C、第一只克隆羊“多莉”的诞生

D、人类基因组草图的完成

18、获得目的基因最常用的方法是：(B)

A、化学合成法?

B、PCR技术

C、逆转录法

D、DNA探针技术

19、疫苗组成是由抗原和（佐剂）组成

20、鸟枪法克隆目的基因的战略适用于（A）

A、原核细菌

B、酵母菌

C、丝状真菌

D、植物

E、人类

21、cDNA法获得目的基因的优点是：（B）

A.成功率高?

B.不含内含子

C.操作简便

D.表达产物可以分泌?

E.能纠正密码子的偏爱性

22、有机相酶反应的优点：

1．有利于疏水性底物的反应；2．可提高酶的热稳定性；3．从低沸点的溶剂中易分离纯化产物；4．热力学平衡向产物方向移动如脂合成和肽合成；5．减少由水引起的副反应，如水解反应；6．酶易于实现固定化；7．酶和产物易于回收；8．可避免微生物污染。

23、抗体发展阶段：抗血清、单克隆抗体、基因工程抗体。

24、

25、凝胶过滤层析进行分离的依据是：分子大小

26、质粒载体必备三要素：复制子、选择标记、多克隆位点。

27、体外培养动物细胞三类型：贴壁依赖性细胞、非贴壁依赖性细胞、兼性贴壁细胞。

28、下列关于细胞冻存及复苏过程的描述不正确的是（B）。

A.冻存的细胞提前一天更换全部培养液

B.细胞冻存的原则为快速冻存

C.每只冻存管中以冻存（1～）×106个细胞为宜

D.冻存液中含有8％二甲基亚砜

E.复苏时将冻存细胞从液氮中取出迅速投入42℃温水中速溶

29、能将IgG水解成两个抗原片段和一个可结晶片段的是：（木瓜蛋白酶）。

30、单克隆技术抗体是B细胞和（杂交瘤细胞）的结合。

31、所谓“第二代基因工程”是指(A)

A、蛋白质工程

B、细胞工程

C、酶工程

D、抗体工程

32、酶和细胞固定化最常用、最有效的方法是：(A)

A、载体结合法

B、交联法

C、包埋法

D、选择性热变性法

33、真核基因在大肠杆菌中以融合蛋白形式表达，下列错误的是：(D)

A、基因操作简便

B、只能作抗原用

C、容易实现高效表达?

D、易被细菌酶类水解

34、目前应用最广泛的产酶菌是：(A)

A.大肠杆菌

B.枯草杆菌

C.青霉菌

D.链霉菌

35、大肠杆菌的基因表达系统为?(A)

A、pBV220/pET

B、YEp/YRp

C、pUC/λgt11

D、pBR322/λgt10

36、用于生产α-干扰素的动物细胞是(A)

A、NamalumNamalwa

B、Vero

C、WI-38

D、MIRC-5

37、外源基因在动物细胞与大肠杆菌中表达产物的主要区别是(A)

A.糖基化

B.产量高

C.性质稳定

D.疗效可靠

38、基因表达最常用的宿主菌是(A)

A.大肠杆菌

B.枯草芽孢杆菌

C.链霉菌

D.酵母

39、筛选杂交瘤细胞（脾-瘤融合细胞）选用的培养基是(B)

A、HT?

B、HAT

C、RMP1640

D、BME

40、采用凝胶过滤法分离单克隆抗体，最高峰属于(A)

A、IgG

B、IgM

C、IgA

D、IgE

41、改造鼠源性单克隆抗体的首要目的是(C)

A、降低相对分子量

B、增加组织通透性

C、降低免疫源性

D、延长半衰期

42、鼠源性单克隆抗体改造后得到小分子抗体，常用的是(B)

A、单域抗体?

B、单链抗体

C、Fab片段抗体

D、最小识别单位

43、最具有抗原活性的蛋白是：（丙种球蛋白）。

44、基因工程的单元操作顺序是（A）

A．酶切，连接，转化，筛选，验证 B.酶切，转化，连接，筛选，验证C．连接，转化，筛选，验证，酶切 D.验证，酶切，连接，筛选，转化

E. 酶切，连接，筛选，转化，验证

45、CHO-K1细胞来源于：答案：中国仓鼠卵巢。

46、下列五个DNA片段含有回文结构的是（D）

A．GAAACTGCTTTGAC

47、

48、T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是（D）

A．2’-OH和5’-P B. 2’-OH和3’-P C. 3’-OH和2’-P

D. 3’-OH和5’-P

E. 5’-OH和3’-P

49、目前工业上生产酶的方法大多数是（微生物发酵）。

50、若某质粒带有lacZ标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入（D）

A、半乳糖

B、葡萄糖

C、蔗糖

D、5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷（X-gal）

E、异丙基巯基-b-半乳糖苷（IPTG）

51、对酶活性有影响的物理化学方法是（温度，pH值，酶的浓度，底物浓度，激活剂，抑制剂）

52、分子杂交的化学原理是形成（E）

A.共价键

B.离子键

C.疏水键

D.配位键

E.氢键

二、填空题

1、人工化学合成DNA新形成的核苷酸的合成方向是(3’→5'),合成的DNA5’末端是（-P），3’末端是（-OH）。

2、理想载体应具备的条件：（至少有一个复制起点，有多克隆位点，具备转化的功能，遗传标记基因，具有较高的载装能力）。

3、进行PCR扩增DNA时，反映体系应加入（DNA模板，DNA聚合酶，引物，dNTP的缓冲液）。

4、细胞培养基三大类：（天然培养基，合成培养基，无血清培养基）。

5、质粒DNA三种构型：（共价闭合环状DNA（cccDNA),开环DNA(ocDNA),线状DNA(1DNA)）。

6、微生物转化中常用的微生物有：（细菌，真菌，放线菌）。

7、生物技术的核心与关键是（基因工程），生物技术的基础是(生化工程)，生物技术的条件是(细胞工程)，生物技术获得最终产物的手段是(发酵工程)。

8、PCR全称是（聚合酶链反应），以（mRNA)为引物，基本反应步骤是（变性，退火，延伸）。

9、在翻译过程中mRNA与核糖体的结合位点：（SD序列，SD序列与起始密码子AUG之间的距离）。

10、克隆真核基因常用的方法：（逆转录法，化学合成法）。

11、将抗体转变为酶的四种途径：（诱导，拷贝，引入，化学修饰）。

12、酶固定法中包埋法有（网格型和微囊型）两种。

13、噬菌体表达载体有（穿梭，插入，置换）三种。

14、鼠源性单克隆抗体改造后的小分子抗体类型（人-鼠联合抗体，改形抗体，Fab抗体，单链抗体，单域抗体，分子识别单位）。

15、抗体药物的特点：（多样性，定向性，特异性）。

16、质粒载体结构包括：（复制子，选择标记，多克隆位点）。

17、蛋白质药物按分子大小提取方法：（透析，层析，离心，超滤）。

18、核酸类药物分为：（反义核酸，核酶，脱氢核酶，抗基因寡核苷酸，裸DNA疫苗，基因药物）。

19、动物细胞的培养条件：（培养温度，pH值，通氧量，防止污染，基本营养物质，渗透压）。

20、根据动物细胞对生长基质的依赖性可分为：（贴壁依赖性细胞，非贴壁依赖性细胞，兼性贴壁细胞）。

21、答案：感受态细胞。

22、

三、简答题

五、问答题

1、简述生物药物与生物技术药物的内涵。

答：生物药物是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法，利用生物体、生物组织、细胞、体液等制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。生物药物，包括生物技术药物和原生物制药。

生物技术药物：是指采用DNA重组技术或其他创新生物技术生产的治疗药物。细胞因子类药物、激素类药物、酶与辅酶类药物、疫苗、单克隆抗体药物、反义核酸药物、RNA干扰(RNAi)药物、基因治疗药物。

2、简述生物技术药物和生物技术制药的概念。

答：生物技术药物是指采用DNA重组技术或其他生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物；生物技术制药是指利用基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程等生物技术，来研究、开发和生产用于预防、治疗和诊断疾病的药物。

3、比较基因工程疫苗与传统疫苗？

答：传统疫苗是用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂或用理化方法将病原微生物杀死制备的生物制剂。传统疫苗受制作工艺的限制，其保存、使用和接种副反应等方面都容易出现一些问题。

基因工程疫苗指使用重组DNA技术克隆并表达保护性抗原基因，利用表达的抗原产物，或重组体本身制成的疫苗。

基因工程亚单位疫苗优点：①纯度高；产量高。②易制备。③安全性好。④这种疫苗稳定性好，免疫期长，便于保存和运输。

4、如何控制基因工程药物的质量？

答：①原材料：主要检查目的基因、表达载体及宿主细胞（如细菌、酵母、人和动物的细胞），防止其产生我们不想要的遗传变异。

②培养过程：无论是发酵还是细胞生产，关键是保证基因的稳定性和不被污染。主要控制生产用的细胞库、有限代次的生产、连续培养过程。

③纯化工艺过程：要求能保证去除微量DNA、糖类、残余宿主蛋白质、纯化过程带入的有害化学物质、致热原，或者将这类杂质减少至允许量。

④最终产品：主要表现在生物学效价测定、蛋白质纯度检查、蛋白质的比活性、蛋白质的性质鉴定几个方面。

⑤杂质检测：蛋白类，由于降解、聚合或者错误折叠而造成的目的蛋白变构体在体内往往会导致抗体的产生；非蛋白类，主要有细菌、病毒、热原质和DNA 几种类型，往往在极低的水平就可产生严重的危害作用。

⑥安全性试验：其中的无菌试验、热原试验、安全性和毒性试验按我国新颁布的《中国生物制品规程》进行。

5、简述单克隆抗体的制备。

答：（1）．对动物注射特定的抗原蛋白，使其产生免疫反应；提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。

（2）．应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞。这种细胞既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性。

（3）．对杂交瘤细胞进行细胞培养，用特定的选择培养基选出所需要的细胞群，体外或体内培养，从培养液或动物腹水中提取单克隆抗体。

6、简述基因工程操作流程。

答：1目的基因的获取

2构建表达载体

3将重组DNA导入受体细胞

4重组DNA筛选与鉴定

4目的基因的检测与表达。

7、动物大规模培养有哪些方式？

答：（1）悬浮培养法、（2）微载体培养法、（3）多孔载体培养法、（4）微囊化培养法、（5）中空纤维培养法。

8、生产用动物细胞的种类有哪些各有什么特点

答：（1）原代细胞,特点：不能直接获得，需临时制备，生长不旺盛；

（2）传代细胞系，特点：接触抑制和贴壁依赖性，增值能力有限，无致瘤性；

（3）转化细胞系，特点：无限增殖，倍增时间短，较低的营养条件要求，适用于大规模生产；

（4）工程细胞系（包括融合细胞系和基因工程细胞系），特点：稳定遗传

9、获得部分或全部人员化的质量抗体采用何种方法？

10、何为治疗性疫苗？比较治疗性疫苗和预防性疫苗的主要区别。（p129）.

答：治疗性疫苗：指在已感染病原生物或患某些疾病的机体中，通过诱生机体的特异性或非特异性免疫应答，以达到治疗或防止疾病恶化的天然、人工修饰合成或用基因重组技术表达的产品或生物制品。

区别：a.使用对象不同：治疗性疫苗的使用对象为已病者，而预防性疫苗的使用对象为未病者。

b. 使用目的不同：治疗性疫苗的目的是治疗疾病，预防性疫苗的目的是预防疾病。

c. 监测手段不同：预防性疫苗接种后产生保护性抗体，可通过实验室进行监测，结果准确，可靠。而治疗性疫苗接种后疾病是否改善，则需要结合临床症状、体征、疾病相关的实验指标进行综合测试，较为复杂，且其准确性尚有争议。

d. 期望激发的免疫应答类型不同：预防性疫苗接种后，期望产生的是保护性抗体，即激发体液免疫反应；而治疗性疫苗主要用于病毒感染和肿瘤疾病，病毒一旦进入宿主细胞内，抗体即失去作用，肿瘤细胞的杀灭也主要依赖细胞免疫效应，因此，治疗性疫苗应以激发细胞免疫反应为主要目的，这是与预防性疫苗最大的区别。

生物技术制药考试题库

选择 ABC分子印迹可以应用于下列哪些方面：模拟抗体，生物传感器的构建，手性药物的分离，新药的构建 ABD酶促反应的特点包括：催化效率高，酶的催化活性不受调节和控制，专一性强，反应条件温和 ABCD体细胞基因治疗常用的靶细胞主要有：造血干细胞成纤维细胞肌细胞、肾细胞肝细胞、淋巴组织 B世界上第一个基因工程药物是：人白细胞干扰素INFa 重组人胰岛素人鼠源性单克隆抗体尿激酶 C下列不属于脂类药物的是：胆酸固醇灵芝大豆异黄酮 C下列能够产生抗体的细胞是：肝细胞，巨噬细胞，浆细胞，血红细胞 ABCD下列属于细胞代谢过程中的生理活性物质的是：维生素，植物激素，抗生素，生物碱 C下列属于细胞工程内容的是：染色体改造的理论和技术，酶改造的理论和技术，细胞融合的理论和技术，有关产物提取纯化的理论和技术 ABD工业上下列哪些是使用大肠杆菌生产的：谷氨酸脱羧酶，天门冬氨酸酶，丙酮酸脱羧酶，青霉素酰化酶 D被称为药剂学鼻祖的是：张仲景，希波克拉底，华佗，格林 AB造血生长因子的作用是：促进骨髓造血细胞分化，促进骨髓造血细胞增殖和定向成熟，动员祖细胞从骨髓移动到外周血，促进血液生产和血液循环 D下列不属于按分子大小分离的方法是：有超滤法，凝胶过滤法，超速离心法，沉淀法 ABCD下列可以作为生物药物的是：氨基酸及其衍生物，酶与辅酶，糖类，细胞生长因子 D基因工程中，载体的本质是：DNA，RNA ，蛋白质，DNA或RNA ABCD能够用作蛋白质药品冷冻干燥保护剂的是：糖类/多元醇，表面活性剂，氨基酸、盐和胺，聚合物 ABC才才下列属于酶反应器的是：鼓泡塔反应器，填充床反应器，流化床反应器，淤浆反应器

生物技术制药试卷A-答案

生物技术制药试卷A 一、名词解释：（本题共10小题，每小题5分，共计50分） 1、生物药物：是指利用各种生物材料，综合采用各种生物技术的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。 2、抗生素：由微生物产生，在低浓度下能杀灭和抑制病原体，但对宿主不会产生严重的副作用的物质，或使用化学方法半合成的衍生物和全合成的仿制品。广义的抗生素还包括一些抗肿瘤药、杀虫剂和除草剂。 3、补料分批发酵：是指将种子接入发酵反应器进行培养，经过一段时间之后，间歇式地、或者连续地补加新鲜培养基，使菌体进一步生长的方法。 4、限制性内切酶：生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNA 分子内部进行的，故名限制性内切酶。 5、载体：将外源目的DNA导入受体细胞，并能自我复制和增殖的工具。 6、转化细胞系：正常细胞经过某个转化过程，失去正常细胞的特点而获得无限增殖能力的细胞系。 7、微载体培养：将细胞吸附于微载体表面，再在培养液中进行悬浮培养，使细胞在微载体表面生长成单层的方法称为微载体培养法。 8、毛状根：受到发根农杆菌感染后形成的根组织，易于培养，改变了植物的次生代谢。毛状根生长快速和次级代谢产物含量高，特别适用于从木本植物和难于培养的植物中得到较高含量的次级代谢产物。

9、气升式反应器：没有搅拌，气体通过喷管进入剪切力更小，主要用于悬浮细胞的分批式培养，近年开发用于贴壁细胞的微载体培养，并进行半连续、连续和灌流式培养。 10. 酶固定化：指经物理或化学方法处理，使酶（细胞）限制或固定于特定空间位置，使之不但能连续发挥催化作用，而且反应后酶又可以反复利用的技术。二、简答题（本题共5小题，每小题8分，共40分） 1. 简述生物药物新药的研发流程。答：新药研究和开发的主要过程： (1)确定研究计划； (2) 准备候选菌株； (3) 选择合适药理模型初筛（摇瓶）、复筛（小型发酵）体外试验、细胞试验； (4) 提纯有效成分进行化学分析； (5) 精制样品（中型发酵）； (6) 临床前Ⅱ期(Preclinical Ⅱ) ； (7) Ⅰ期临床(Preclinical I)； (8) Ⅱ期临床(Preclinical Ⅱ)； (9) Ⅲ期临床(Preclinical Ⅲ)； (10) 注册申请上市、试生产； (11) 售后监测(Post－marketing surveillance)。 2.简述生物药物的优点和缺点。答：生物药物是指利用各种生物材料，综合采用各种生物技术的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。优点：

生物技术制药问答题.doc

三、问答题（共计50分） 1．基因工程菌的遗传不稳定性的两种主要表现形式是什么？基因工程菌的遗传不稳定性的主要机制是什么？（10分）基因工程菌的遗传不稳定性主要表现在重组质粒的不稳定性，这种不稳定性具有下列两种表现形式： 1．结构不稳定性：重组DNA 分子上某一区域发生缺失、重排、修饰，导致其表观生物学功能的丧失2．分配不稳定性：整个重组DNA 分子从受体细胞中逃逸。基因工程菌的遗传不稳定性的的产生机制 1．受体细胞中的限制修饰系统对外源重组DNA 分子的降解2．外源基因的高效表达严重干扰受体细胞正常的生长代谢3．重组质粒在受体细胞分裂时的不均匀分配，这是重组质粒逃逸的基本原因4．受体细胞中内源性的转座元件促进重组分子的缺失重排 2．在人胰岛素AB链分别表达法中，为何将AB链编码序列与b-半乳糖苷酶基因融合？小分子蛋白在大肠杆菌中表达后不稳定，容易被细胞内蛋白酶降解失活。表达融合蛋白的优点是基因操作简便；在菌体内比较稳定，不易被细菌酶类所降解，容易实现高效表达。人胰岛素AB链分别表达法中，将A、B链编码序列与b-半乳糖苷酶基因融合，分别表达出融合蛋白，使表达的蛋白分子量足够大，避免被蛋白水解酶分解，提高其稳定性及表达率。 3．动物细胞大规模培养的方法有哪些？各自的特点是什么？（10分） 1．悬浮培养悬浮培养即让细胞自由地悬浮于培养基内生长增殖。它适用于一切种类的非贴壁依赖性细胞（悬浮细胞），也适用于兼性贴壁细胞。该培养方法的优点是操作简便，培养条件比较均一，传质和传氧较好，容易扩大培养规模，在培养设备的设计和实际操作中可借鉴许多有关细菌发酵的经验。不足之处是由于细胞体积较小，较难采用灌流培养（perfusion culture )，因此细胞密度一般较低。2．贴壁培养贴壁培养是必须让细胞贴附在某种基质上生长繁殖的培养方法。它适用于一切贴附依赖性细胞（贴壁细胞），也适用于兼性贴壁细胞。该方法的优缺点与悬浮培养正好相反，优点是适用的细胞种类广（因为生产中所使用的细胞绝大多数是贴壁细胞），较容易采用灌流培养的方式使细胞达到高密度；不足之处是操作比较麻烦，需要合适的贴附材料和足够的面积，培养条件不易均一，传质和传氧较差。3．贴壁—悬浮培养微载体培养既可创造相当大的贴附面积供细胞贴附生长增殖，满足了绝大多数细胞的基本要求，又由于载体的体积很小，比重较轻，在轻度搅拌下即可携带细胞自由地悬浮在培养基内，充分发挥了悬浮培养的一切优点。 4. 阐述基因工程药物研制有那些主要过程（10分）基因工程药物的生产必须首先获得目的基因，然后用限制性内切酶和连接酶将所需目的基因插入适当的载体质粒或噬菌体中并转入大肠杆菌或其他宿主菌（细胞），以便大量复制目的基因。对目的基因要进行限制性内切酶和核苷酸序列分析。目的基因获得后，最重要的就是使目的基因表达。基因的表达系统有原核生物系统和真核生物化的难易。将目的基因与表达载体重组，转入合适表达系统，获得稳定高效表达的基因工程菌（细胞）。建立适于目的基因高效表达的发酵工艺，以便获得较高产量的目的基因表达产物。建立起一系列相应的分离纯化、质量控制、产品保存等技术。5．阐述鼠源性单克隆抗体改造后的小分子抗体类型（10分）（1）人－鼠嵌合抗体将鼠MAb的可变区和人抗体的恒定区组成嵌合抗体由于这两部分在空间结构上相对独立，其独特的抗体亲和力保持得很好，但因鼠单抗可变区的存在，应用时仍有较强的排斥反应。（2）改形抗体在嵌合抗体的基础上进一步将鼠MAb可变区中相对保守的FR替换成人的FR，保留与抗原结合的CDR部位（3）Fab抗体Fab段由重链V区及CH1功能区与整个轻链以二硫键形式连接而成，主要发挥抗体的抗原结合功能。Fab抗体只有完整IgG 的1/3。（4）单链抗体单链抗体(Single chain Fv，scFv)是由一段弹性连接肽(Linker)把抗体可变区重链(VH)与轻链(VL)相连而成，是具有亲代抗体全部抗原结合特异性的最小功能结构单位。（5）单域抗体只含V区基因片段的小分子抗体，即只有VH或VL一个功能结构域，也能保持原单克隆抗体的特异性。这种小分子的抗体片段就称为单域或单区抗体，其分子量仅为整个Ig分子的1／12。（6）分子识别单位只含有一个CDR多肽的抗体。 6动物细胞的生理特点？答：1 细胞分裂周期长（动物细胞分裂所需时间一般为12~48h。）。2 细胞生长需贴附于基质，有接触抑制现象。3 二倍体细胞寿命有限（异倍体细胞系寿命长）。4 对生长环境要求敏感。5 培养基要求高。6 合成的蛋白质有修饰。 7动物细胞培养时加入血清的作用机制？答：提供基本营养物质；提供激素和各种生长因子；提供贴附因子和伸展因子；对培养中的细胞起到某些保护作用；

(完整版)生物技术制药考试题复习

一：选择题 1、酶的主要来源是( C) A、生物体中分离纯化 B、化学合成 C、微生物生产 D、动/ 植物细胞与组织培养 2、所谓“第三代生物技术”是指(A) A、海洋生物技术 B、细胞融合技术 C、单克隆技术 D、干细胞技术 3、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体往往会产生代谢副产物乙酸：(A) A、大于 B、等于 C、小于 D、无关 4、促红细胞生长素( EPO)基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：( E) A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用 B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定 C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活 D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感 E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化 5、目前基因治疗最常用的载体是：(B) A、腺病毒 B、反转录病毒 C、腺相关病毒 D、痘苗病毒 E、疱疹病毒 6、cDNA第一链合成所需的引物是：( D) A、Poly A B、Poly C C、Poly G D、Poly T E、发夹结构 7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：(A) A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段 B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达 C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达 D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制 8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A) A、表达产物的功能B、表达产物的产量 C.表达产物的稳定性 D.表达产物分离纯化的难易 9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和(安全性鉴定)。 10、基因工程药物的化学本质属于：(C) A. 糖类 B.脂类 C.蛋白质和多肽类 D.氨基酸类 11、用聚二乙醇( PEG)诱导细胞融合时，下列错误的是：(C) A、PEG的相对分子量大，促进融合率高B、PEG的浓度高，促进融合率高C、PEG 的相对分子量小，促进融合率高D、PEG的最佳相对分子量为 4000 12、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C) A、表达产物为糖基化蛋白质B、表达产物存在的部位是在菌体内 C、容易培养，产物提纯简单 D 、表达产物为天然产物 13、人类第一个基因工程药物是：(A) A、人胰岛素 B、重组链激酶 C、促红细胞生成素 D、乙型肝炎疫苗 14、下列不属于加工改造后的抗体是：(C) A、人-鼠嵌合抗体 B、单链抗体C 、鼠源性单克隆抗体D、单域抗体 15、动物细胞培养的条件中，不正确的是：(D)

生物技术制药试题及重点

第一章绪论填空题 1. 生物技术制药的特征 _高技术、高投入、高风险、高收益、长周期。 2. 生物药物广泛应用于医学各领域，按功能用途可分为三类，分别是_治疗药物、预防药物、诊断药物。 3. 现代生物药物已形成四大类型：一是应用DNA重组技术制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂；二是基因药物_______________ ；三是来自动物植物和微生物的天然生物药物；四是合成与部分合成的生物药物； 4. 生物技术的发展按其技术特征来看，可分为三个不同的发展阶段，传统生物技术阶段；近代生物技术阶段；现代生物技术阶段。 5. 生物技术所含的主要技术范畴有基因工程; 细胞工程；酶工程；发酵工程；蛋白质核酸工程和生化工程；选择题 1?生物技术的核心和关键是（A ） A细胞工程B蛋白质工程C酶工程D 基因工程 2. 第三代生物技术（A ）的出现，大大扩大了现在生物技术的研究范围 A基因工程技术B蛋白质工程技术C海洋生物技术D细胞工程技术 3. 下列哪个产品不是用生物技术生产的（D）A青霉素B淀粉酶C乙醇D氯化钠 4. 下列哪组描述（A ）符合是生物技术制药的特征 A高技术、高投入、高风险、高收益、长周期B 高技术、高投入、低风险、高收益、长周期 C高技术、低投入、高风险、高收益、长周期 D高技术、高投入、高风险、低收益、短周期 5. 我国科学家承担了人类基因组计划（C ）的测序工作 A10% B5% C 1% D 7% 名词解释（2）近代生物技术阶段的技术特征是微生物发酵技术，所得产品的类型多，不但有菌体的初级代谢产物、次级代谢产物，还有生物转化和酶反应等的产品，生产技术要求高、规模巨大，技术发展速度快。代表产品有青霉素，链霉素，红霉素等抗生素，氨基酸，工业酶制剂等。（3）现代生物技术阶段的技术特征是DNA 重组技术。所得的产品结构复杂，治疗针对性强，疗效高，不足之处是稳定性差，分离纯化工艺更复杂。代表产品有胰岛素，干扰素和疫苗等。 3. 生物技术在制药中有那些应用？生物技术应用于制药工业可大量生产廉价的防治人类重大疾病及疑难症的新型药物，具体体现在以下几个方面：（1）基因工程制药，利用基因工程技术可生产岀具有生理活性的肽类和蛋白质类药物，基因工程疫苗和抗体，还可建立更有效的药物筛选模型，改良现有发酵菌种，改进生产工艺，提供更准确的诊断技术和更有效的治疗技术等。随着基因技术的发展，应用前景会更广阔。（2）细胞工程和酶工程制药该技术的发展为现代制药技术提供了更强大的技术手段，使人类可控制或干预生物体初次生代谢产物和生物转化等过程，使动植物能更有效的满足人类健康方面的需求。（3）发酵工程制药发酵工程制药的发展主要体现在对传统工艺的改进，新药的研制和高效菌株的筛选和改造等。第二章基因工程制药填空题 1. 基因工程药物制造的主要步骤是：目的基因的获得；构建DNA重组体;构建工程菌；目的基因的表达；产物的分离纯化; 产品的检验。 1. 生物技术制药采用现代生物技术可以人为的创造一些条件，借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医学药品，称为生物技术制药。 2. 生物技术药物一般说来，采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸来药物称为生物技术药物。 3. 生物药物生物技术药物是重组产品概念在医药领域的扩大应用，并与天然药物、微生物药物、海洋药物和生物制品一起归类为生物生物药物。简答题 1.生物技术药物的特性是什么？生物技术药物的特征是：（1）分子结构复杂（2）具有种属差异特异性（3）治疗针对性强、疗效高（4）稳定性差（5）免疫原性（6）基因稳定性（7）体内半衰期短（8）受体效应（9）多效应和网络效应（10）检验特殊性 2.简述生物技术发展的不同阶段的技术特征和代表产品？（1）传统生物技术的技术特征是酿造技术，所得产品的结构较为简单，属于微生物的初级代谢产物。代表产品如酒、醋、乙醇，乳酸，柠檬酸等。

生物技术制药试题及答案(二)

生物技术制药试题及答案 1.论述生物技术在食品工业中的作用？答：（1）开辟新的食品资源：利用微生物菌体发酵生产单细胞蛋白；应用微生物酶工程生产高果糖浆、饴糖、麦芽糖、高麦芽糖浆、麦芽糊精、偶联糖等淀粉糖产品。（2）提高食品品质：利用发酵工程、酶工程技术生产酸味剂、甜味剂和鲜味剂等食品添加剂。在肉类和鱼类加工中应用酶来改善组织，嫩化肉类和转化废弃蛋白质。在乳品加工中应用酶进行干酪生产、分解乳糖和黄油增香。在果蔬加工中应用酶进行柑橘脱苦、果汁澄清和果蔬保藏等。在饮料、酿酒工业中应用酶发酵生产各种饮料。在焙烤食品生产中应用淀粉酶和蛋白酶来提高焙烤品质和增加香味。（3）食品卫生检测：酶免疫分析法、放射免疫分析法、单克隆抗体法和DNA 探针法用于检测食品中的沙门氏杆菌等。（4）食品脱毒：利用发酵法、酶解法等对食品中的有毒糖苷类物质（硫代葡萄糖苷）、寡糖（β-半乳糖苷）和棉酚等进行处理，以脱除有毒物质。 2.试论述生物技术与医药卫生的关系？答：（1）疫苗生产：病原体减毒或弱化疫苗、基因工程疫苗和核酸疫苗。病原体减毒和弱化疫苗是利用微生物的纯种培养技术以及减毒疫苗的制备技术来生产的，是以减毒或弱化的病原体作为疫苗。基因工程疫苗是将病原体的抗原基因克隆在细菌或真核细胞内，利用细菌或细胞生产病原体的抗原，利用抗原作为疫苗。而核酸疫苗则是将含有编码蛋白质基因序列的质粒载体，经肌肉注射或微弹轰击等方法导入体内，通过宿主细胞表达系统表达抗原蛋白质，诱导宿主产生对抗该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。（2）疾病诊断：单克隆抗体与ELISA技术用于诊断传染性疾病、检测肿瘤相关基因、确定激素水平、检验血液中的药物含量及鉴定微生物病原体。DNA诊断技术可用于诊断遗传性疾病、肿瘤和传染性疾病。（3）生物制药与基因工程药物：利用微生物发酵可生产各种抗生素。利用植物细胞大规模培养技术可生产天然药物，如紫草宁、紫杉醇、人参皂苷、强心苷、胡萝卜素等。利用单克隆抗体制备技术可制备用于肿瘤治疗的“生物导弹”。利

2018年生物技术制药习题及答案

2018年生物技术制药习题及答案一、选择填空题 1. 酶的主要来源是什么? 微生物生产。 2. 第三代生物技术是什么? 基因组时代。 3. 基因治疗最常用的载体是什么? 质粒载体和λ噬菌体载体。 4. 促红细胞生长素基因可在大肠杆菌中表达。但不能用大肠杆菌工程菌生产人的促红细胞生产素为什么? 因为大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化, 人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用。 5. 菌体生存所需能量已菌有氧代谢所需能量在什么情况下产生代谢产物乙酸?

菌体生长所需能量 (大于) 菌体有氧代谢所能提供的能量时, 菌体往往会产生代谢副产物乙酸。 6.cDNA 第一链所合成所需的引物是什么? cDNA 第一条链合成所需引物为 PolyT 。 7. 基因工程制药在选择基因表达系统时首先考虑什么? 表达产物的功能。 8. 为了减轻工程菌代谢负荷,提高外源基因表达水平可采取什么措施? 将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。 9. 根据中国生物制品规定要求,疫苗出厂需要经过哪些检验? 理化检定、安全检定、效力检定。 10. 基因工程药物化学本质是什么? 蛋白质。

11.PEG 诱导细胞融合? PEG 可能与可能与临近膜的水分相结合, 使细胞之间只有微笑空间的水分被 PEG 取代, 从而降低了细胞表面的极性,导致双脂层的不稳定,使细胞膜发生融合。 12. 以大肠杆菌为目的基因表达系统的表达产物,产物位置是什么? 胞内、周质、胞外。 13. 人类第一个基因工程药物是什么? 重组胰岛素。 14. 动物细胞培养的条件是什么? 温度 :哺乳类 37昆虫 25~28, ph7.2~7.4,通氧量:使 co2培养箱,不同动物比例不同。防止污染, 基本营养物质:三大营养物质维生素, 激素, 促细胞生长因子, 渗透压:大多数 260~320。 15. 不属于加工改造抗体的是什么? 单域抗体。 16. 第三代抗体是什么?

生物技术制药习题修订稿

生物技术制药习题 WEIHUA system office room 【WEIHUA 16H-WEIHUA WEIHUA8Q8-

第三章基因工程—工程技术一．填空 1、基因工程操作流程主要包括（）（）（）（）（）。 2、分离目的基因常采用（）从基因组DNA中扩增含目的具有的DNA片断，或者用分子杂交等方法从构建的（）或（）中获得含目的基因的克隆子。 3、克隆载体有（）和（）等，供不同实验要求选择使用。 4、在（）的作用下，含（）的DNA片断与（）连接成为重组 DNA 分子。二．判断 1、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体。（） 2、cDNA是以DNA为起始材料，经过复制得到的互补DNA。（） 3、只有粘性末端才可以被连接起来。（） 4、任何细胞都可用作受体细胞。（） 5、原核生物细胞是最理想的受体细胞。（） 6、Western杂交是DNA-RNA之间的杂交。（） 7、 DNA连接酶只能催化双链DNA片断互补黏性末端之间的连接。（）第四章细胞工程技术概论一．选择 1、植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是（） A. 植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁 B. 细胞壁使原生质体失去活力 C. 细胞壁阻碍了原生质体的融合? D. 细胞壁不是原生质的组成部分 2、动物细胞融合的说法不正确的是（） A. 细胞融合首先用酶解法（胰蛋白酶）分散成单个细胞 B. 细胞融合是个细胞识别过程

C. 融合细胞能表现出两个亲本的特点 D. 原生质体自然条件下常自发融合 3、单克隆抗体的生产方法中错误的是（） A. 发酵罐中培养 B. 小鼠的腹腔繁殖 C. 培养成组织移植到动物体内 D. 牛的体腔培养 4、不能人工诱导原生质体融合的方法是（） A. 高pH B. 电刺激 C. PEG（聚乙二醇）试剂 D. 重压 5、植物细胞融合常用的诱导剂是（） A. PEP B. PEG C. ATP D. 大肠杆菌质粒 6、目前有一种蔬菜新品种“白菜—甘蓝”,只是将两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并将其培养成新的植物体。这是利用了现代生物技术中的什么？ A.细胞工程 B.基因工程 C.蛋白质工程 D.酶工程二. 填空下图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答： (1)步骤?是_______________________，最常用的方法是_______________________。 (2)步骤?一般常用的化学试剂是_______________,目的是______________________。第六章发酵工程技术概论一．选择 1、发酵工程以培养微生物为主，所以又称为（）。 A．细胞工程B．微生物工程 C．细菌工程 2、发酵工程的主要内容包括（）。 A．生产菌种的选育B．发酵条件的优化与控制反应器的设计及产物的分离 C．提取与精制 D．以上都是 3、下列哪些是目前具有生产价值的发酵类型（）。 A．微生物菌体发酵 B．微生物菌体代谢产物发酵 C．微生物的转化发酵D．以上都是 4、下列哪些是发酵技术独有的特点（）。 A．多个反应不能在发酵设备中一次完成 B．条件温和、能耗少、设备简单 C．不容易产生高分子化合物D．发酵过程中不需要防止杂菌污染 5、发酵过程中，PH值取决于（）。 A．菌种B．培养基 C．培养条件D．以上都是 6、下列生产工艺属于固体发酵的是（）。 A．酿酒B．制酱C．天培（大豆发酵食品） D．以上都是 7、下列哪些是发酵的主要操作方式（）。 A．分批发酵B．连续发酵C．补料分批发酵D．全部都是 8、气升式发酵罐与搅拌式发酵罐相比，下列不属于前者特点的是（）。 A．发酵罐内没有搅拌装置，结构简单 B．发酵罐内有搅拌装置，混合速度快 C．耗能少，利于生产二、填空 1、根据搅拌的方式不同，好氧发酵设备又可分为（）、（）。 2、根据操作方式的不同，液体深层发酵主要有（）、（）、（）。 3、当前发酵工业所用的菌种总趋势是从野生菌转向（），从自然选育转向（），从诱发基因突变转向（）。

生物技术制药考试题复习

生物技术制药考试题复习 Document number【980KGB-6898YT-769T8CB-246UT-18GG08】

一：选择题 1、酶的主要来源是（C） A、生物体中分离纯化 B、化学合成 C、微生物生产 D、动/植物细胞与组织培养 2、所谓“第三代生物技术”是指 (A) A、海洋生物技术 B、细胞融合技术 C、单克隆技术 D、干细胞技术 3、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体往往会产生代谢副产物乙酸：(A) A、大于 B、等于 C、小于 D、无关 4、促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：（E） A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用? B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定? C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活 D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感 E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化 5、目前基因治疗最常用的载体是：(B) A、腺病毒? B、反转录病毒 C、腺相关病毒 D、痘苗病毒 E、疱疹病毒 6、cDNA第一链合成所需的引物是：（D） A、Poly?A B、PolyC C、PolyG D、PolyT E、发夹结构 7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：(A) A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段 B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达? C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达? D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制 8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A) A、表达产物的功能 B、表达产物的产量C.表达产物的稳定性 D.表达产物分离纯化的难易? 9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和（安全性鉴定）。 10、基因工程药物的化学本质属于：(C) A.糖类 B.脂类 C.蛋白质和多肽类 D.氨基酸类 11、用聚二乙醇（PEG）诱导细胞融合时，下列错误的是：(C) A、PEG的相对分子量大，促进融合率高 B、PEG的浓度高，促进融合率高 C、PEG的相对分子量小，促进融合率高 D、PEG的最佳相对分子量为4000 12、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C) A、表达产物为糖基化蛋白质 B、表达产物存在的部位是在菌体内

生物技术制药课后思考题

第一章：绪论思考题 1.什么是生物技术？生物技术所包含的内容及定义。答：1）生物技术又称生物工程，指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的技术。2）包括基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程、抗体工程、糖链工程、海洋生物技术及生物转化等。（具体定义见P1）。 2.生物技术药物的概念及分类。答：1）指采用DNA重组技术或其他生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物，主要是重组蛋白或核酸类药物。2）a.按照用途：预防、诊断、治疗；b.按作用类型：细胞因子类、激素类、酶类、疫苗、单克隆抗体类、反义核酸、RNA干扰类、基因治疗药物；c.按照生化特性：多肽类、蛋白质类、核酸类、聚乙二醇化多肽或蛋白质。 3.生物技术药物在理化性质、药理学与作用、生产制备和质量控制方面的特性。答：1）理化性质（从药物多是蛋白质或核酸出发）：a.相对分子质量大；b.结构复杂； c.稳定性差；2）药理学作用：a.活性与作用机制明确；b.作用针对性强；c.毒性低； d.体内半衰期短； e.有种属特异性； f.可产生免疫原性；3）生产制备特性：a.药物分子在原料中含量低；b.原料中常存在降解目标产物的杂质；c.制备工艺条件温和；d.分离纯化困难；e.产品易受有害物质污染；4）质量控制特性：a.质量标准内容的特殊性；b.制造项下的特殊规定；c.检定项下的特殊规定。 4.生物技术制药的概念和主要研究内容与任务。答：1）指利用基因工程、细胞工程等生物技术的原理和方法，来研究、开发和生产预防、治疗和诊断疾病的药物的一门科学。2）主要研究内容与任务：a.生物制药技术的研究、开发与应用；b.利用生物技术研究、开发和生产药物。第二章：基因工程制药思考题 1.简述基因工程制药的基本原理和基本流程。答：1）利用重组DNA技术将外源基因导入到宿主菌或宿主细胞进行大规模培养和诱导表达以获取蛋白质药物的过程称为基因工程制药。2）目的基因的获得、表达载体的

生物技术制药考试题复习修订稿

生物技术制药考试题复习内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）

7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：(A) A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段 B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达? C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达? D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制 8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A) A、表达产物的功能 B、表达产物的产量C.表达产物的稳定性 D.表达产物分离纯化的难易? 9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和（安全性鉴定）。 10、基因工程药物的化学本质属于：(C) A.糖类 B.脂类 C.蛋白质和多肽类 D.氨基酸类 11、用聚二乙醇（PEG）诱导细胞融合时，下列错误的是：(C) A、PEG的相对分子量大，促进融合率高 B、PEG的浓度高，促进融合率高 C、PEG的相对分子量小，促进融合率高 D、PEG的最佳相对分子量为4000 12、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C) A、表达产物为糖基化蛋白质 B、表达产物存在的部位是在菌体内 C、容易培养，产物提纯简单 D、表达产物为天然产物? 13、人类第一个基因工程药物是：(A)

生物技术制药第二版课后思考题及答案(全)

1. 生物技术制药分为哪些类型？生物技术制药分为四大类：（1）应用重组DNA技术(包括基因工程技术、蛋白质工程技术)制造的基因重组多肽，蛋白质类治疗剂。（2）基因药物，如基因治疗剂，基因疫苗，反义药物和核酶等（3）来自动物、植物和微生物的天然生物药物（4）合成与部分合成的生物药物 2．生物技术制药具有什么特征？（1）分子结构复杂（2）具有种属特异性（3）治疗针对性强，疗效高（4）稳定性差（5）基因稳定性（6）免疫原性（7）体内的半衰期短（8）受体效应（9）多效性（10）检验的特殊性 3.生物技术制药中有哪些应用？应用主要有：（1）基因工程制药：包括基因工程药物品种的开发，基因工程疫苗，基因工程抗体，基因诊断与基因治疗，应用基因工程技术建立新药的筛选模型，应用基因工程技术改良菌种，产生新的微生物药物，基因工程技术在改进药物生产工艺中的应用，利用转基因动植物生产蛋白质类药物（2）细胞工程制药：包括单克隆抗体，动物细胞培养，植物细胞培养生产次生代谢产物（3）酶工程制药（4）发酵工程制药 4.基因工程药物制造的主要程序有哪些？基因工程药物制造的主要步骤有：目的基因的克隆，构造DNA重组体，构造工程菌，目的基因的表达，外源基因表达产物的分离纯化产品的检验 5.影响目的的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些？（1）外源基因的计量（2）外源基因的表达效率：a、启动子的强弱 b、核糖体的结合位点 c、SD序列和起始密码的间距 d、密码子组成（3）表达产物的稳定性（4）细胞的代谢付荷（5）工程菌的培养条件 6.质粒不稳定分为哪两类，如何解决质粒不稳定性？质粒不稳定分为分裂分为分裂不稳定和结构不稳定。质粒的分裂不稳定是指工程菌分裂时出现一定比例不含质粒的子代菌的现象；质粒的结构不稳定是DNA从质粒上丢失或碱基重排，缺失所致工程菌性能的改变。提高质粒稳定性的方法如下：（1）选择合适的宿主细菌2）选择合适的载体（3）选择压力（4）分阶段控制培养（5）控制培养条件（6）固定化 7.影响基因工程菌发酵的因素有哪些？如何控制发酵的各种参数？影响因素：（1）培养基（2）接种量（3）温度（4）溶解氧（5）诱导时机的影响（6）诱导表达程序（7） PH值 8.什么是高密度发酵？影响高密度发酵的因素有哪些？可采取哪些方法来实现高密度发酵？高密度发酵：是指培养液中工程菌的菌体浓度在50gDCW/L以上，理论上的最高值可达200gDCW/L 影响因素：（1）培养基（2）溶氧浓度（3）PH (4)温度（5）代谢副产物实现高密度发酵的方法：（1）改进发酵条件：a、培养基 b、建立流加式培养基 c、提高供养能力（2）构建出产乙酸能力低的工程菌宿主菌：a、阻断乙酸产生的主要途径 b、对碳代谢流进行分流 c、限制进入糖酵解途径的碳代谢流 d、引入血红蛋白基因（3）构建蛋白水解酶活力低的工程化宿主菌

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第一章绪论填空题 1. 生物技术制药的特征高技术、高投入、高风险、高收益、长周期。 2. 生物药物广泛应用于医学各领域，按功能用途可分为三类，分别是治疗药物、预防药物、诊断药物。 3.现代生物药物已形成四大类型：一是应用DNA重组技术制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂；二是基因药物；三是来自动物植物和微生物的天然生物药物；四是合成与部分合成的生物药物； 4.生物技术的发展按其技术特征来看，可分为三个不同的发展阶段，传统生物技术阶段；近代生物技术阶段；现代生物技术阶段。 5.生物技术所含的主要技术范畴有基因工程；细胞工程；酶工程；发酵工程；蛋白质核酸工程和生化工程；选择题 1.生物技术的核心和关键是（A ） A 细胞工程 B 蛋白质工程 C 酶工程 D 基因工程 2. 第三代生物技术（ A ）的出现，大大扩大了现在生物技术的研究范围 A 基因工程技术 B 蛋白质工程技术 C 海洋生物技术D细胞工程技术 3.下列哪个产品不是用生物技术生产的（D ） A 青霉素 B 淀粉酶 C 乙醇 D 氯化钠 4. 下列哪组描述（A ）符合是生物技术制药的特征 A高技术、高投入、高风险、高收益、长周期 B高技术、高投入、低风险、高收益、长周期 C高技术、低投入、高风险、高收益、长周期 D高技术、高投入、高风险、低收益、短周期 5. 我国科学家承担了人类基因组计划（C ）的测序工作 A10% B5% C 1% D 7% 名词解释 1.生物技术制药采用现代生物技术可以人为的创造一些条件，借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医学药品，称为生物技术制药。 2.生物技术药物一般说来，采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸来药物称为生物技术药物。

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一：选择题）、酶的主要来源是（1C植物细胞与、动/A、生物体中分离纯化 B、化学合成 C、微生物生产 D 组织培养 (A) 2、所谓“第三代生物技术”是指、干细胞技术、单克隆技术A、海洋生物技术 B、细胞融合技术 C D、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体3(A) 往往会产生代谢副产物乙酸：、无关 A、大于 B、等于C、小于 D）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌EPO4、促红细胞生长素（）的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：（E 、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用A B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定 C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感D E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化(B) 、目前基因治疗最常用的载体是：5 、痘苗病毒A、腺病毒 B、反转录病毒 C、腺相关病毒 D E、疱疹病毒）6、cDNA第一链合成所需的引物是：（D C C、Poly G D、Poly T 、发夹结构EA A、Poly B、Poly 、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措7(A) 施有： A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段 B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达 C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达 D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制 8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A) 、表达产物的功能 B、表达产物的产量 C.表达产物的稳定性 A D.表达产物分离纯化的难易 9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和（安全性鉴定）。(C) 10、基因工程药物的化学本质属于：氨基酸类脂类 C.蛋白质和多肽类 D.A. 糖类 B. (C) PEG11、用聚二乙醇（）诱导细胞融合时，下列错误的是：促进融合率高 B、PEG的浓度高，的相对分子量大，A、PEG促进融合率高4000 的最佳相对分子量为的相对分子量小，促进融合率高 D、PEGC、PEG 、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C) 12 、表达产物为糖基化蛋白质 B、表达产物存在的部位是在菌体内A 、表达产物为天然产物 C、容易培养，产物提纯简单 D (A) 、人类第一个基因工程药物是：13 D、乙型肝炎疫苗 B、重组链激酶C、促红细胞生成素、人胰岛素A 、下列不属于加工改造后的抗体是： (C) 14A、人-鼠嵌合抗体 B、单链抗体 C、鼠源性单克隆抗体 D、单域抗体 15、动物细胞培养的条件中，不正确的是：(D) 37±0.5C最适温度为 B.7.2-7.4 为pH最适A. 100% 最理想的渗透压为290-300mOsm/kg D.氧浓度为C.(D) 、第三代抗体是指：16、多发性骨髓瘤细胞产生的免疫球蛋B淋巴细胞合成和分泌的球蛋白 BA、白、利用基因工程技术制备的基因工程抗C、融合细胞产生的单克隆抗体 D 体(C) 、现代生物技术的标志是：17 测序技术的诞生 B、DNAA、DNA互补双螺旋结构模型的提出 D、人类基因组草图的完成C、第一只克隆羊“多莉”的诞生(B) 18、获得目的基因最常用的方法是：、DNA探针技术技术 C、逆转录法DBA、

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一：选择题 1、酶的主要来源是（C） A、生物体中分离纯化 B、化学合成 C、微生物生产 D、动/植物细胞与组织培养 2、所谓“第三代生物技术”是指 (A) A、海洋生物技术 B、细胞融合技术 C、单克隆技术 D、干细胞技术 3、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体往往会产生代谢副产物乙酸：(A) A、大于 B、等于 C、小于 D、无关 4、促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：（E） A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用 B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定 C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活 D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感 E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化 5、目前基因治疗最常用的载体是：(B) A、腺病毒 B、反转录病毒 C、腺相关病毒 D、痘苗病毒 E、疱疹病毒 6、cDNA第一链合成所需的引物是：（D） A、Poly A B、Poly C C、Poly G D、Poly T E、发夹结构 7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：(A) A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段 B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达 C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达 D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制 8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A) A、表达产物的功能 B、表达产物的产量 C.表达产物的稳定性 D.表达产物分离纯化的难易 9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和（安全性鉴定）。 10、基因工程药物的化学本质属于：(C) A.糖类 B.脂类 C.蛋白质和多肽类 D.氨基酸类 11、用聚二乙醇（PEG）诱导细胞融合时，下列错误的是：(C) A、PEG的相对分子量大，促进融合率高 B、PEG的浓度高，促进融合率高 C、PEG的相对分子量小，促进融合率高 D、PEG的最佳相对分子量为4000 12、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C) A、表达产物为糖基化蛋白质 B、表达产物存在的部位是在菌体内 C、容易培养，产物提纯简单 D、表达产物为天然产物 13、人类第一个基因工程药物是：(A) A、人胰岛素 B、重组链激酶 C、促红细胞生成素 D、乙型肝炎疫苗 14、下列不属于加工改造后的抗体是：(C) A、人-鼠嵌合抗体 B、单链抗体 C、鼠源性单克隆抗体 D、单域抗体

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