四川大学生物化学考试试题答案

一、名词解释：（10×2＝20分，答案写在专用答题纸上）

1、核酸分子杂交－不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性，形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程

2、蛋白质的超二级结构－指蛋白质分子中相邻的二级结构单位组合在一起所形成的有规则的、在空间上能辨认的二级结构组合体。

3、增色效应－当双螺旋DNA融解（解链）时，260nm处紫外吸收增加的现象。

4、伴娘蛋白－就是与部分折叠或不正确的折叠的多肽链相互作用的蛋白质，能够加速正确折叠的进行或提供折叠发生所需要的微环境。

5、顺反子－指DNA上的一个片段，有上千个脱氧核苷酸构成，相对独立的单位。DNA分子由许多相对独立的单位（基因）构成。

6、生物大分子的变性－生物大分子的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象。蛋白质在受到光照、热、有机溶剂以及一些变性剂的作用时，次级键受到破坏，导致天然构象的破坏，使蛋白质的生物活性丧失。DNA变性(DNA denaturation)指DNA双链解链分离成两条单链的现象。

7、回纹结构－即反向重复序列(inverted repeat sequence)：在同一多核苷酸链内的相反方向上存在的重复的核苷酸序列。在双链DNA中反向重复可能引起十字形结构的形成。

8、PCR －扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定DNA序列的一种技术。在该反应中，使用与目的DNA序列互补的寡核苷酸作为引物，进行多轮的DNA合成。其中包括DNA变性、引物退火和在Taq DNA聚合酶催化下的DNA合成。

9、激素－一类由内分泌组织合成的微量的化学物质，它由血液运输到靶组织，起着一个信使的作用调节靶组织（器官）的功能。

10、同工酶－是指有机体内能够催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。

二、写出下列生化名词缩写符号的的中文名称（10×0.5＝5分，答案直接写在小题后）

1、cAMP 3,5－环腺嘌呤核苷酸

2、NADP＋氧化型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸

3、cccDNA 共价闭合环DNA

4、GSH 还原型谷胱甘肽

5、ddNTP 双脱氧核苷三磷酸

6、RNase 核糖核酸酶

7、Subunit 亚基

8、hnRNA 核内不均一RNA 9、Ψ（指一种稀有碱基）假尿嘧啶10、holoenzyme 全酶

三、填空题：（20×1＝20分，答案直接写在题中括号内）

1.真核生物细胞中的80 S核糖体是由60 S 和（40 ) S 组成。

2.构成α螺旋中肽键的原子（H和O）和DNA双螺旋中（B－DNA）中嘌呤核苷的碱基的排列均采用（反式或Trans ）

式排列。

3.（His或组氨酸）的功能基是催化中最有效、最活泼的，它是构成胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等的电荷中继网氨

基酸残基之一,在生理pH条件下，既可以作为H＋的受体，也可以作为H+的供体

4.已知一个酶对a、b、c三个底物作用的K m之间的关系是K ma＞K mb＞K mc, 则该酶的最适底物是( c ) 。

5.蛋白质分子α－螺旋构象中，螺旋一圈中含有（3.6 ）个氨基酸残基。

6. 蛋白质a 、b 和c （M.W 分别为20,000、50,000和100,000）组成的混合液体，欲用Sephadex G 200分子筛柱层析分

离，流动相为磷酸缓冲液。这三种蛋白质从层析柱中先后流出的顺序为（ c b a ）。

7. 酶的竞争性抑制作用的动力学特征是Km （ ↑或增加 ）,而Vmax 不变，因此增加底物浓度可减弱或消除抑制作用。

8. ( Vk )维生素与血液的凝固有关。

9. DNA 双螺旋中常见的碱基配对是T 与（ A ）配对，C 与G 配对。

10. Oligo(dT)－纤维素可以用来分离纯化（ mRNA ）。

11. 双链DNA 中若（ G ，C 或G+C ）含量多，则Tm 值就高。

12. 由分子量相同的2条肽链，且肽链之间由二硫键相连的蛋白质，在还原或非还原条件下（加巯基乙醇或不加巯基

乙醇处理样品）进行SDS-PAGE ，均为（ 1 ）条蛋白着色带。

13. 酶只能改变化学反应的活化能而加速反应速度，但不能改变化学反应的（平衡 ）点。

14. 环状结构的葡萄糖分子其立体异构体的总数目为（ 32 ）个。

15. 磷脂分子中甘油的C 1和C 2上的两个脂肪酸之一被酶水解掉的磷脂称为（ 溶血磷脂）。

16. 疫球蛋白G 分子呈Y 形，含有以二硫键连在一起的4条多肽链（即2条轻链和2条重链），含有（ 2 ）个抗原结

合部位。

17. （ TPCK ）是胰凝乳蛋白酶的专一性亲和标记试剂。

18． 在E + S ES E + P 中，当（K 2＜＜K －1）时，Km=Ks ，Km 单位与[S]相同。 18. 在特定条件下，1 min 内转化（1 ）μmol 底物所需要的酶量，定义为一个国际单位”（IU ）。

19. 当[S]＝10K m 时，酶促反应速度相当于（ 90.9 ）％V max 。

四、是非题（正确的划“√”，错误的划“×”（10×1＝10分，答案直接写在题中括号内）

1. DNA 的二级结构包括双螺旋结构、三链螺旋、四链结构，其中B-DNA 是重要的基本结构形式。维系DNA 二级结

构的主要作用力是盐键。( × )

2. 酶活性的调节方式主要有共价修饰、亚基的聚合与解聚以及变构调节等。( √ )

3. 高压液相层析（HPLC ）指使用颗粒极细的介质，在高压下分离蛋白质或其他分子混合物的层析技术。( √ )

4. 胶原（蛋白）（collagen ）是动物结缔组织最丰富的一种蛋白质，它是由原胶原蛋白分子组成。原胶原蛋白是一种

具有左手超螺旋结构的蛋白。每个原胶原分子都是由3条特殊的右手螺旋的多肽链左手旋转形成的。( × ) 5. 肌红蛋白（myoglobin ）是由一条肽链和一个血红素辅基组成的结合蛋白，是肌肉内储存氧的蛋白质，它的氧饱和

曲线为S 曲线型。而血红蛋白（hemoglobin ）是由含有血红素辅基的4个亚基组成的结合蛋白，血红蛋白负责将氧由肺运输到外周组织，它的氧饱和曲线为双曲线型。( × )

6. 活化能（activation energy ）指将1mol 反应底物中所有分子由其态转化为过度态所需要的能量。( √ )

7. 初速度(initial velocity)指酶促反应最初阶段底物转化为产物的速度，这一阶段产物的浓度非常低，其逆反应可以忽

略不计。( √ )

K 1

K 2

K －1

8.糖原（glycogen）是含有分支的α-（1→4）糖苷键的葡萄糖残基的同聚物，支链在分支点处通过α-（2→6）糖苷

键与主链相连。( ×)

9.肽聚糖（peptidoglycan）是葡萄糖和唾液酸交替连接的杂多糖与不同的肽交叉连接形成的大分子。肽聚糖是许多细

菌细胞壁的主要成分。( ×)

10.影响酶促反应的因素有降低反应的活化能、邻近效应和定向效应、酶使底物分子中的敏感键发生变形、多功能催

化作用（酸碱催化和共价催化）、金属离子的催化作用和微环境的影响。( ×)

五、单项/多项选择题（10×1＝10分，答案直接写在题中括号内）

1.同源蛋白质（homologous protein）指____a_________。

a. 来自不同种类生物的序列和功能类似的蛋白质

b. 来自同种类生物的序列和功能类似的蛋白质

c. 来自不同种类生物的序列和功能不同的蛋白质

d. 来自同种类生物的序列和功能不同的蛋白质

2．在蛋白质一级结构分析中，测定肽片断氨基酸序列的最佳方法是____b_______。

a. Sanger试剂法

b.Edman降解法

c. ddNTP法

d.蛋白酶法

3．在合成时以无活性的前体形式存在的是____a___d_______。

a. 胰岛素

b. Mb

c. A TCase

d. 胰蛋白酶

4．物质逆浓度梯度的穿膜运输，需消耗代谢能，并需专一性的载体蛋白，此种转运方式称为_____a______。

a. 协同运输

b. 主动运输

c. 被动运输

d. 胞吞

5．测得某一蛋白质样品的氮含量为0.40g，此样品约含蛋白质____b________。

A．2.00g B．2.50g C．6.40g D．3.00g E．6.25g

6．关于β-片层结构的正确描述为___a__b__c____。

A．是一种伸展的肽链结构B．可由两条以上多肽链顺向或反向平行排列而成

C．肽键平面折叠成锯齿状D．两链间形成离子键以使结构稳定

7．变构剂调节酶活性的机理是____b______。

A．与必需基团结合B．与调节亚基或调节部位结合

C．与活性中心结合D．与辅助因子结合

E．与活性中心内的催化部位结合

8．在pH5的溶液中，带正电荷的是____b__c__d____。

A．pI为4.5的蛋白质B．pI为7.4的蛋白质

C．pI为7.0的蛋白质D．pI为6.5的蛋白质

9.胆固醇含量最高的脂蛋白是_______a________。

A．乳糜微粒B．极低密度脂蛋白C．中间密度脂蛋白D．低密度脂蛋白

10.溴化氰(Cyanogen bromide)选择性地切割多肽链中由_______a_______。

A．甲硫氨酸的羧基形成的肽键B．甲硫氨酸的氨基形成的肽键

C．碱性氨基酸的羧基形成的肽键D．中性氨基酸的羧基形成的肽键

六、问答题（3×10＝30分，任选其中3个，答案写在专用答题纸上）

1、双螺旋DNA一条链的碱基序列为（5ˊ）GCGCAATA TTTCTCAAAA TATTGCGC-3ˊ，写出它的互补链。该DNA 片段中含有什么特殊类型的序列？该双链DNA有能力形成另外一种结构吗？

答：（5ˊ）GCGCAATA TTTTGAGAAATA TTGCGC-3ˊ，含有回文序列；单链内可形成发卡结构；双链可形成十字结构。

2、由下列信息求八肽的序列。

（a）酸水解得Ala，Arg，Leu，Met，Phe，Thr，2V al

（b）Sanger试剂处理得DNP-Ala。

（c）胰蛋白酶处理得Ala，Arg，Thr 和Leu，Met，Phe，2V al。当以Sanger试剂处理时分别得到DNP-Ala和DNP-V al。

（d）溴化氰处理得Ala，Arg，高丝氨酸内酯，Thr，2V al，和Leu，Phe，当用Sanger试剂处理时，分别得DNP-Ala 和DNP-Leu。

答：Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe

3．蛋白质或多肽有那些重要的的生物学功能？并举例说明之。

1.酶

2.转运蛋白e.g. 脂蛋白,Hb

3.作为营养和储存蛋白e.g. 清蛋白，铁蛋白

4.收缩和运动蛋白 e.g.激动蛋白

5.结构蛋白e.g. 弹性蛋白, 角蛋白

6.防御蛋白 e.g.Ig.

7.调节蛋白 e.g. Insulin

4．如何证明DNA是主要的遗传物质，而不是蛋白质？

答：通过噬菌体感染细菌实验和肺炎球菌的转化实验来证明。

噬菌体感染实验：用放射性硫标记噬菌体的外壳蛋白，蛋白质不能进入细菌体内；而用放射性磷标记核酸则核酸进入细菌体内。

肺炎球菌的转化实验：

活的有夹膜的毒性菌株→rat→死亡；

活的无夹膜的非毒性菌株→rat→活着；

活的无夹膜的非毒性菌株＋加热致死的毒性菌株→rat→活着；

热灭活的毒性菌株+活的非毒性菌株→rat→死亡；

从热灭活的毒性菌株中分离的DNA→rat→死亡。

5．比较DNA和蛋白质（包括酶）变性后其结构、性质和生物学功能等方面的异同点。

蛋白质变性后：生物活性丧失；溶解度降低，对于球状蛋白粘度增加；生化反应易进行；光吸收系数增大；组分和分子量不变。

DNA变性后：氢键断裂，双螺旋结构解开，从而引起紫外｛ε(p) ｝增加（hyperchromie effect ，增色效应）、失去生物活性、粘度下降（双股－无规线团）（与pr反）、比旋下降等性质改变的过程叫变性。(与降解不同，无共价键的断裂)

七、计算题(5分，任选其一，答案写在专用答题纸上)

1．从肝细胞中提取的一种蛋白水解酶的粗提液300ml含有150mg蛋白质，总活力为360单位。经过一系列纯化步骤以后得到的4ml酶制品（含有0.08mg蛋白），总活力为288单位。整个纯化过程的收率是多少？纯化了多少倍？答: 80％；1500倍。

2．氨基酸的定量分析表明牛血清白蛋白含有0.58％的色氨酸（色氨酸的分子量为204）。

（a）试计算牛血清白蛋白的最小分子量（假设每个蛋白分子只含有一个色氨酸残基）。

（b）凝胶过滤测得的牛血清白蛋白的分子量为70，000，试问血清白蛋白分子含有几个色氨酸残基？

答：（a）32,100g/mol（b）2

华中农业大学《生物化学实验》试卷

华中农业大学本科生课程考试试卷 考试课程与试卷类型：植物生理学实验原理与技术（A）姓名： 学年学期：2008－2009－1 学号： 考试时间：2009－－班级： 一、名词解释 ( 每题 4 分 , 共 12分 ) 1. 聚丙烯酰胺凝胶 2. 离心技术 3．可见光分光光度法/反相纸层析 二、填空题 ( 每空 2 分 , 共 42分 ) 1. 反相纸层析法分离油菜不饱和脂肪酸的实验中 ,分离后的不饱和脂肪酸经红氨酸溶液显色后 , 其最终产物颜色是（1）,从点样端起层析谱带所对应的脂肪酸依次是 (2) 、（3）、（4）、（5）、（6）。 2. 圆盘聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物酶同工酶的实验中 , 电泳时上槽接电源（7）极 ,下槽接电源 (8) 极 , 电泳开始电流应调节至每管（9）mA, 十分钟后电流调节至每管 (10) mA; 在上槽或样品中加入溴酚蓝是起（11）的作用。 3. 核酸提取过程中 , 将含有 DNA 的溶液置72℃处理 3 分钟，其目的是（12）；在淀粉酶活性测定过程中将淀粉酶液置于 70℃下处理 15 分钟的目的是（13）。 4．在微量凯氏定氮法测定植物组织中的总氮和蛋白氮，有三个主要的实验阶段，它们分别是（14）、（15）和（16）。在第二阶段，若收集三角瓶中的溶液颜色由_（17）变为（18），表明反应完全。第三阶段所用的标准浓度的滴定溶液名称是（19）。 5. DNA 提取研磨时加入的研磨缓冲液的NaCl浓度是（20），研磨时加入SDS的作用是（21）

三、是非判断题 (判断对错，对的标T，错的标F，每题 2 分，共 10 分 ) 1．萌发的小麦种子中含有很高活性的淀粉酶，其中α－淀粉酶不耐热，在70℃迅速钝化。（） 2．本学期测定还原性糖和可溶性蛋白含量时都用到了斐林试剂，这两个实验中所用的斐林试剂的配方是相同的。（） 3．DNA提取中，加入冷乙醇是为了使DNA分子复性变粗。（） 4．离心机使用中，要求同一台离心机所用的离心管都有相同的重量。（）5．油菜种子硫甙葡萄糖苷的快速分析法中，反应的实质是测定水解硫苷产生的葡萄糖的数量。（） 四、问答题（共36分） 1．试述维生素C测定的基本原理及其实验过程中的注意事项（12分） 2．简述凯氏定氮法测定蛋白质含量的基本原理。为什么一些不法商人要在蛋白质制品中加入三聚氰胺？（12分） 3．凝胶电泳法测定同工酶的原理是什么？为什么本学期所作的胶条染色后显示的谱带就是过氧化物同工酶带？（12分）

四川大学生物化学试题

四川大学97 98 99 2000生物化学试题 考试科目：生物化学 说明：一至四题所有专业考生必作，五、六题非生物化专业考生作，七、八题生化专业考生作。 一、填空题（每空1分，共20分） 1、动物和人体对糖类的降解有两种方式，一种需水为，另一种不需水为。 2、肽分子中α-羟基的PK2a比相应游离的氨其酸α-羟基的PK-a值，肽中α-氨基的PK-a比相应的游离氨基酸基的PK-a值。 3、在一般蛋白质中很存在，主要存在于胶原中的氨基酸是。 4、在葡萄糖的分解代谢中，β-磷酸甘油醛氧化产生的NADH，在酒精发酵中以为受氢体，在酵解中以为受氢体，在有氧存在时以为受氢体。 5、在对小牛胸腺DNA进行的酸碱滴定时，在PH6~?之间PH变化很快，表明无可滴定的基因，在这个范围内应该是解离范围，说明在DNA分子中它参与了的形成。 6、在双股DNA中，被转录的链叫不被转录的链叫。遗传信息贮存在链中。 7、焦磷硫胺素（TPP）是酶和酶的辅酶。 8、在中性PH下，影响DNATM的值的因素是。 9、肉质网脂肪酸延长过程与胞浆脂肪酸合成的差别之一是以代替为脂酰载体。 10、乙醛循环步酶促反应构成，其中3种酶与TCA循环中的酶相同，其它两种专一性反应是由和催化的。 二、单项选择题（从4个备选答案中选出1个正确答案，并将其编号填入括号内，每小题1分，共10分） 1、维系蛋白质二级结构的化学键是（） 1）肽键； 2）二硫键； 3）氢键； 4）疏水作用。 2、下列脂质中，在生物膜中含量最多的是（） 1）磷脂； 2）胆固醇； 3）糖脂； 4）三酰甘油。 3、碘乙酸可抑制糖酵解中哪种酶的活性？（） 1）已糖微酶； 2）3-磷酸甘油醛脱氢酶； 3）烯醇化酶； 4）丙酮酸激酶。 4、细胞内含量最多的RNA是（） 1）mRNA； 2）tRNA; 3)rRNA; 4)HnRNA. 5、由两分子丙酮酸转变成1分子葡萄糖所消耗的高能键数是（） 1）3； 2）4； 3）6 4）8。 6、下列维生素中哪一种参与核苷酸的合成代谢？（） 1）B1； 2）B2 3）泛酸； 4）叶酸 7、下述基因除何者外，都属于多栲贝基因？ 1）tRNA基因； 2）rRNA; 3）胰岛基因； 4）组蛋白基因。 8、下列催化多底物反应酶中，哪一种酶催化的反应属于有序机制？（） 1）苹果玻脱氢酶； 2）谷丙转氨酶； 3）肌酸激酶； 4）醛缩酶 9、在抗生物素蛋白存在下，下述哪种酶活性将受影响？（） 1）苹果玻脱氢酶； 2）谷丙转氨酶； 3）肌酸激酶； 4）丙酮酸羟化酶 10、下列各三肽混合物，用阳离子交换树脂，PH梯度洗脱，哪一个最先被洗下来？（） 1）Met-Asp-Gln； 2）Glu-Asp-Val； 3）Glu- Val - Asp； 4）Met-Glu-Asp 三、多项选择题（从备选答案中选出2至3个正确答案，将其编号填入括号的，漏填或错填，本小题0分，每小题1分，共10分） 1、构成DNA分子二级结构的化学键有 1）3 5-磷酸酯键； 2）氢键 3）盐氢 4）碱基堆积作用；5）酯键 2、对于下列一个五肽：焦谷半脱缬苯丙·谷氨醅胺，可以认为（） 1）用DNFB 试剂尚未出N-末端； 2）具有紫外吸收； 3）其 -羟基的 pka值Gln的 -COOH pka值略小；用肼解法测不出C-未端；5）比五肽呈疏水性。 3、胰凝乳蛋白酶作用于下列肽键（） 1）Arg-phe; 2)Glu-Ala; 3)Tyr-Ala; 4)phe-Lys; 5)Lys-Gly 4、能促使血糖升高的激素有 1）胰岛素 2）酶浓度； 3）PH； 4）温度 5）激活剂 5）影响酶促反应速度的因素有 1）底物浓度；2）酶浓度 3）PH 4）温度 5）激活剂 6、参与三闳酸循环的维生素有： 1）Vpp 2）VB1 3）VB2 4）硫辛酸 5）生物素 7、能提供一碳基因的氨基酸有 1）Gly 2)Glu; 4)His; 5)Met 8、谷按酰胺是多种物质的前体，它可以转变为 1）AMP 2）CTP; 3)Trp; 4）Lys 5）6-磷酸葡萄糖胺 9、第二倍使包括 1）cAMP 2）Cgmp; 3)Ca2+ 4)ppGpp; 5) Mrna

生物化学期末考试试题及答案

《生物化学》期末考试题 A 一、判断题（15个小题，每题1分，共15分） ( ) 1、蛋白质溶液稳定的主要因素是蛋白质分子表面形成水化膜,并在偏离等电点时带有相同电荷 2、糖类化合物都具有还原性 ( ) 3、动物脂肪的熔点高在室温时为固体，是因为它含有的不饱和脂肪酸比植物油多。( ) 4、维持蛋白质二级结构的主要副键是二硫键。 ( ) 5、ATP含有3个高能磷酸键。 ( ) 6、非竞争性抑制作用时，抑制剂与酶结合则影响底物与酶的结合。( ) 7、儿童经常晒太阳可促进维生素D的吸收，预防佝偻病。 ( ) 8、氰化物对人体的毒害作用是由于它具有解偶联作用。 ( )

9、血糖基本来源靠食物提供。 ( ) 10、脂肪酸氧化称β-氧化。 ( ) 11、肝细胞中合成尿素的部位是线粒体。 ( ) 12、构成RNＡ的碱基有Ａ、Ｕ、Ｇ、T。 ( ) 13、胆红素经肝脏与葡萄糖醛酸结合后水溶性增强。 ( ) 14、胆汁酸过多可反馈抑制7α-羟化酶。 ( ) 15、脂溶性较强的一类激素是通过与胞液或胞核中受体的结合将 二、单选题（每小题1分，共20分）

1、下列哪个化合物是糖单位间以α-1，4糖苷键相连：() A、麦芽糖 B、蔗糖 C、乳糖 D、纤维素 E、 香菇多糖 2、下列何物是体内贮能的主要形式 ( ) A、硬酯酸 B、胆固醇 C、胆酸 D、醛固酮 E、 脂酰甘油 3、蛋白质的基本结构单位是下列哪个： ( ) A、多肽 B、二肽 C、L-α氨基酸 D、L-β-氨基酸 E、以上都不是 4、酶与一般催化剂相比所具有的特点是 ( ) A、能加速化学反应速度 B、能缩短反应达到平衡所需的时间 C、具有高度的专一性 D、反应前后质和量无改 E、对正、逆反应都有催化作用 5、通过翻译过程生成的产物是： ( ) Ａ、ｔRNA Ｂ、ｍRNA Ｃ、ｒRNA D、多肽链Ｅ、DNA

生物化学实验理论考试题答案

生物化学实验理论考试题答案 1.醋酸纤维薄膜电泳时点样端应靠近电极的哪一端，为什么？ 答；电泳时点样端应靠近负极，因为血清中各种蛋白质在PH为8.6的环境中均带负电，根据同性相吸，异性相斥原理，点样端在负极时蛋白质向正极泳动从而实现蛋白质分离。 2.用分光光度计测定物质含量时，设置空白对照管的作用,为什么？ 答；空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度，但是作为溶剂也能吸收，反射和透射一部分的光，因此必须以相同的溶剂设置对照，排除溶剂对吸光度的影响。 3.简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜的电泳原理？ 答；血清蛋白中各种蛋白质离子在电场力的作用下向着与自身电荷相反的方向涌动，而各种蛋白质等电点不同，且在PH为8.6时所带电荷不同，分子大小不等，形状各有差异，所以在同一电泳下永动速度不同从而实现分离。 4.何谓Rf值？影响Rf值的因素？ 答;Rf是原点到层析中心的距离与原点到溶剂前沿的距离之比。Rf的大小与物质的结构，性质，溶剂系统，层析滤纸的质量和层析温度有关，对同一种物质来讲Rf是一个常量。 5.什么是盐析？盐析会引起蛋白质的变性吗？一般用什么试剂? 答;盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时，蛋白质的溶解度下降，当中性盐的浓度达到一定程度的时候，蛋白质从溶液中析出的现象。盐析不会引起蛋白质的变性，因为蛋白质的结构并未发生改变，去掉引起盐析的因素蛋白质仍能溶解；一般用饱和硫酸铵溶液进行盐析 6.简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理？ 答;还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸，而DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5硝基水杨酸颜色的深浅成正比，用分光光度计测出溶液的吸光度，通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5硝基水杨酸的浓度，从而得出还原糖的浓度。 7.影响蛋白质沉淀的因素是什么？沉淀和变性有什么联系？ 答;水溶液中的蛋白质分子由于表面形成水化层和双电层从而形成稳定的亲水胶

四川大学生物化学、基础真题

2003年四川大学普通生物学试题 1，名词解释 呼吸熵稳态生物圈生殖隔离细胞内消化克隆选择学说神经节 反射弧分子进化中性学说光合磷酸化顶级群落反馈调节物种 五界系统造血干细胞 2填空略 3，4判断，选择（略） 5问答 1绘图并说明脊椎动物血循环系统的进化 2举例说名植物激素和动物激素的特点和功能 3简述神经信号产生和传导过程 4简要回答达尔文自然选择学说的基本要点 5简要回答现代生物工程的形成和发展 6简要回答人类基因组计划的由来和发展 2002年四川大学普通生物学试题 1，2选择，填空（略） 3问答 1简述物种的定义及形成原因 2简述生物的分类及五界系统 3动物界最繁荣昌盛的是哪一门？又以哪一纲为最？他们有何重要特征？ 4以人为例阐述高等动物的生殖和发育 5生物体的有机组成是什么，它们的生理功能又是什么？ 1997年四川大学生物化学试题 考试科目：生物化学 适用专业：生物化学、植物学、动物学、遗传学、细胞遗传学植物生理学、农药学、分子生物学 研究方向：以上专业各方向说明：一至四题所有专业考生必作，五、六题非生物化专业考生作，七、八题生化专业考生作。 一、填空题（每空1分，共20分） 1、动物和人体对糖类的降解有两种方式，一种需水为，另一种不需水为。 2、肽分子中α-羟基的PK2a比相应游离的氨其酸α-羟基的PK-a值，肽中α-氨基的PK-a比相应的游离氨基酸基的PK-a值。 3、在一般蛋白质中很存在，主要存在于胶原中的氨基酸是。 4、在葡萄糖的分解代谢中，β-磷酸甘油醛氧化产生的NADH，在酒精发酵中以为 受氢体，在酵解中以为受氢体，在有氧存在时以为受氢体。 5、在对小牛胸腺DNA进行的酸碱滴定时，在PH6~?之间PH变化很快，表明无可滴定的基因，在这个范围内应该是解离范围，说明在DNA分子中它参与了的形成。

北师大 生物化学平时小测验试题-2汇总

北京师范大学2009-2010学年第二学期 “生物化学”平时测验试题（一） 闭卷测试时间50分钟，卷面总分60，任课教师向本琼学生姓名：学号：所在院系： 1.在下列各种氨基酸溶液中，哪一种氨基酸不具旋光性？（D ） A.亮氨酸 B. 精氨酸 C. 苏氨酸 D. 甘氨酸 2.下列哪种氨基酸不存在于天然蛋白质中？（D） A.半胱氨酸 B. 蛋氨酸 C. 羟脯氨酸 D. 同型半胱氨酸 3.谷氨酸在PH=10的溶液中，其主要存在形式是：（D） A. 带有一个负电荷 B. 兼性离子 C. 带有一个正电荷 D. 带有两个负电荷 4.多肽链主链骨架的组成是：（C） A. —CNHOCNHOCNHO— B. —CNOHCNHOCNHO— C. —NCCNCCNCCNCC— D. —CHNOCHNOCHNO— 5.蛋白质的α螺旋：（C） A是由二硫键形成的周期性结构 B. 可被β巯基乙醇破坏 C. 可由主链骨架的NH与CO之间的氢键来维持稳定 D. 是通过疏水作用来维持稳定的 6.处于等电状态的蛋白质：（A） A. 分子不带电荷 B. 分子最不稳定、易变性 C. 分子带的电荷最多 D. 溶解性最大 7.变性蛋白质：（B） A. 颜色反应减弱 B. 丧失原有的生物活性 C. 理化性质不变 D. 一级结构被破坏 8.欲从组织提取液中沉淀出有活性的蛋白质而又不使之变性，方法是加入：（D） A. 1mol/L HCl B. 氯化汞 C. 生物碱试剂 D. 硫酸铵 9.关于肽键，叙述正确的是：（B） A. 肽键可自由旋转 B. 肽键具部分双键性质 C. 肽键类似于单键性质 D. 肽键为C—C键 10.血红蛋白的氧合曲线呈S型，这是由于下列哪种原因？（B） A. 氧与血红蛋白各个亚基的结合是互不相关的独立过程 B. 第一个亚基与氧结合后增加其余亚基与氧的亲和力 C. 第一个亚基与氧结合后降低其余亚基与氧的亲和力 D. 因为氧使铁变成高价铁 11.下列关于多肽Glu—His—Arg—V al—Asp的论述，不正确的是：（C） A. 在PH值为12时朝阳极移动 B. 在PH值为3时朝阴极移动 C. 在PH值为11时朝阴极移动 D. 它的等电点约为PH8

新版四川大学生物学考研经验考研参考书考研真题

在我决定考研的那一刻正面临着我人生中的灰暗时期，那时发生的事对当时的我来讲是一个重大的打击，我甚至一再怀疑自己可不可以继续走下去，而就是那个时候我决定考研，让自己进入一个新的阶段，新的人生方向。那个时刻，很大意义上是想要转移自己的注意力，不再让自己纠结于一件耗费心力和情绪的事情。 而如今，已相隔一年的时间，虽然这一年相当漫长，但在整个人生道路上不过是短短的一个线段。 就在短短的一年中我发现一切都在不知不觉中发生了变化。曾经让自己大为恼火，让自己费尽心力和心绪的事情现如今不过是弹指的一抹灰尘。而之所以会有这样的心境变化，我认为，是因为，在备考的这段时间内，我的全身心进入了一个全然自我，不被外界所干扰的心境，日复一日年复一年的做着同样枯燥、琐碎、乏味的事情。 这不正是一种修行吗，若说在初期，只是把自己当作机器一样用以逃避现实生活的灾难的话，但在后期就是真的在这过程中慢慢发生了变化，不知不觉中进入到了忘记自身的状态里。 所以我就终于明白，佛家坐定，参禅为什么会叫作修行了。本来无一物，何处惹尘埃。 所以经过这一年我不仅在心智上更加成熟，而且也成功上岸。正如我预期的那样，我开始进入一个新的阶段，有了新的人生方向。 在此，只是想要把我这一年备考过程中的积累的种种干货和经验记录下来，也希望各位看到后能够有所帮助，只不过考研毕竟是大工程，所以本篇内容会比较长，希望大家可以耐心看完，文章结尾会附上我的学习资料供大家下载。

四川大学生物学的初试科目为: (101)思想政治理论 (201)英语一 (656)生物学 (939)生物化学与分子生物学(自主命题) 参考书目为： 1.《陈阅增普通生物学》第4版，2014，吴相钰等主编，高等教育出版社。 2.《动物生物学》第2版，2008，许崇任等主编，高等教育出版社。 3.《植物生物学》2018，林宏辉等主编，高等教育出版社。 4.《生物化学》第4版，朱圣庚等主编，高等教育出版社出版。 5.《现代分子生物学》第4版，朱玉贤等编著，高等教育出版社出版。 先说一下我的英语单词复习策略 1、单词 背单词很重要，一定要背单词，而且要反复背！！！你只要每天背1-2个小时，不要去纠结记住记不住的问题，你要做的就是不断的背，时间久了自然就记住了。 考察英语单词的题目表面上看难度不大，但5500个考研单词，量算是非常多了。我们可以将其区分为三类：高频核心词、基础词和生僻词，分别从各自的特点掌握。 （1）高频核心词 单词书可以用《木糖英语单词闪电版》，真题用书是《木糖英语真题手译》里面的单词都是从历年考研英语中根据考试频率来编写的。

生物化学实验题目

实验一胆固醇的提取2012-11-15 16:20:00 生物师范班题目 1.比色法测定样品的理论基础是什么？ 被测样品必须要有颜色。 2. 胆固醇含量在多少范围时，与值呈良好的线性关系？ 在400mg/ml范围内。 3.在提取胆固醇的过程中，为什么要加无水乙醇？ 促使蛋白质沉淀。 4.在试管中加入1ml磷硫铁试剂，会产生什么现象？（至少写2点） 产生紫红色化合物。产生热量。 5.在无水乙醇中加磷硫铁试剂时，正确的加法是什么？将产生什么现象？请准确描述 该现象。 沿管壁慢慢加入。溶液分层。上层是无水乙醇，下层是磷硫铁试剂。 1. 胆固醇提取过程中，无水乙醇为什么要分两次加入？ 目的是使蛋白质以分散很细的沉淀颗粒析出。 2.我们用比色法测定胆固醇含量的仪器名称是什么？ 分光光度计 3. P-S-Fe试剂配置时，能用稀硫酸吗？为什么？ 不能。因为FeCl3本身是亲水性物质，稀硫酸中含有水，会降低P-S-Fe试剂的浓度，从而导致反应不能发生。 4.请简述移液枪的使用步骤。 根据所要吸取的溶液的体积选定合适量程的移液枪。 调好量程。 插枪头。 吸取液体。 将移液枪的量程调至最大。 5. 请简述0.08mg/ml胆固醇标准溶液的配置方法。 准确称取胆固醇80mg，溶于无水乙醇，定容至100ml 将贮液用无水乙醇准确稀释10倍既得。

实验二总糖和还原糖测定2012-11-15 16:20:00 生物师范班 1. 请写出还愿糖与非还原糖结构的不同之处 拥有自由的醛基和酮基 2. 对没有还原性的糖，用什么方法进行糖含量的测定？ 酸水解的方法将非还原性的糖降解呈还原糖。 3. DNS之所以能和还原糖反应，是因为其结构中含有__________? 硝基 4. 如果将DNS和其与还原糖反应的产物同时进行比色，谁的A值更大？为什么？ 产物的更大，因为产物生成棕红色，颜色越深，吸光度越高。 5. 还原糖提取过程中，为什么要离心两次？ 因为这样可以更好地将还原糖全部提取出来。第二次洗涤沉淀。 海洋技术班 1.单糖都是还原糖吗？为什么？ 是的，因为有自由醛基和酮基 2.为什么能用比色法测定还原糖的量？ 因为还原糖的量与光吸收值呈线性关系。 3.DNS的全称是？ 3,5-二硝基水杨酸 4.总糖提取过程中，碘液的作用是什么？ 确认淀粉水解完全。 5.请简述标准曲线的作用。 通过标准曲线来算出未知样品的浓度。

四川大学生化题库及答案(I)

四川大学生物化学核酸合成部分考试题 （一）名词解释 1．半保留复制（semiconservative replication） 2．不对称转录（asymmetric trancription） 3．逆转录（reverse transcription） 4．冈崎片段（Okazaki fragment） 5．复制叉（replication fork） 6．领头链（leading strand） 7．随后链（lagging strand） 8．有意义链（sense strand） 9．光复活（photoreactivation） 10．重组修复（recombination repair） 11．内含子（intron） 12．外显子（exon） 13．基因载体（genonic vector） 14．质粒（plasmid） （二）填空题 1．DNA复制是定点双向进行的，股的合成是，并且合成方向和复制叉移动方向相同；股的合成是的，合成方向与复制叉移动的方向相反。每个冈崎片段是借助于连在它的末端上的一小段而合成的；所有冈崎片段链的增长都是按方向进行。 2．DNA连接酶催化的连接反应需要能量，大肠杆菌由供能，动物细胞由供能。3．大肠杆菌RNA聚合酶全酶由组成；核心酶的组成是。参与识别起始信号的是因子。 4．基因有两条链，作为模板指导转录的那条链称链。 5．以RNA为模板合成DNA称，由酶催化。 6．DNA或UpGpCpA分别经0.3NKOHR、NaseT1和牛胰RNaseI处理所得结果：DNA: 0.3NKOH：；RNaseT1：；RNase I： ; UpGpCpA：0.3NKOH：；RNaseT1：；RNase I ：。 7．基因突变形式分为：，，和四类。 8．亚硝酸是一个非常有效的诱变剂，因为它可直接作用于DNA，使碱基中基氧化成基，造成碱基对的。 9．所有冈崎片段的延伸都是按方向进行的。 10．前导链的合成是的，其合成方向与复制叉移动方向；随后链的合成是的，其合成方向与复制叉移动方向。 11．引物酶与转录中的RNA聚合酶之间的差别在于它对不敏感，并可以作为底物。 12．DNA聚合酶I的催化功能有、、、和。 13．DNA回旋酶又叫，它的功能是。 14．细菌的环状DNA通常在一个开始复制，而真核生物染色体中的线形DNA可以在起始复制。 15．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的活性使之具有功能，极大地提高了DNA复制的保真度。 16．大肠杆菌中已发现种DNA聚合酶，其中负责DNA复制，负责DNA损伤修

生物化学实验习题及参考答案完整版

生物化学实验习题及参 考答案 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】

生物化学实验习题及解答 一、名词解释 1、pI； 2、层析； 3、透析； 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳； 5、蛋白质变性； 6、复性； 7、Tm 值； 8、同工酶； 9、Km值； 10、DNA变性；11、退火；12、增色效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键（ ） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的（） A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是（） A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、-巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收（） A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收（） A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查（） A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 8、蛋白质变性是由于（） A、一级结构改变 B、亚基解聚 C、空间构象破坏 D、辅基脱落 9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（） A、胶体性 B、粘性 C、变性作用 D、沉淀作用 10、有关变性的错误描述为（）

生物化学实验重点试题

一、解词 1、总氮量水中各种形态无机和有机氮的总量 2、酶的抑制作用是指在某个酶促反应系统中，某种低相对分子质量的物质加入后，导致酶活力降低的过程。 3、酶的最适温度酶催化活性最高时的温度 4、蛋白质的等电点每个蛋白都存在一个pH使它的表面净电荷为零即等电点 5、盐析增加中性盐浓度使蛋白质、气体、未带电分子溶解度降低的现象 6、蛋白质变性蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失6、酶的专一性酶对底物及其催化反应的严格选择性通常酶只能催化一种化学反应或一类相似的反应 7、激活剂能提高酶活性的物质大部分是离子或简单的有机化合物 8、抑制剂凡能使酶催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质 9、酶催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体 二、填空 1、球蛋白可在半饱和中性硫酸铵溶液中析出，清蛋白可在高盐浓度溶液中析出。 2、在PH3.0、和9.5时的电场中，卵清蛋白（PI4.6）移动方向分别为负移 动，正移动。 3、唾液淀粉酶的最适温度是37 4、还原糖与本乃狄试剂共热现象生成生成砖红色沉淀。 5、维生素C也称抗坏血酸，它具有很强还原性 6、用苔黑酚浓盐酸溶液可以鉴定核糖核酸 7、当溶液的PH低于蛋白质等电点时，蛋白质分子带正电荷；当溶液的 PH大于蛋白质等电点时，蛋白质分子带负电荷； 10．凯氏定氮法测定蛋白质含量消化终点颜色为清澈的蓝紫色色。 11．蛋白质变性的实质是空间结构被破坏。 12．常用的RNA提取方法有苯酚法、、高盐法等。 13、维持蛋白质亲水胶体稳定的因素是蛋白质颗粒表面的电荷层 和水化膜、 14、蛋白质在等电点时，主要以两性离子离子形式存在；当溶液的P H＞PI 时，蛋白质分子以负离子形式存在；当溶液的P H＜PI时，蛋白质分子带正离子形式存在。 15、蛋白质分子中氮的平均含量为 5.16% ，样品中的蛋白质含量常以测 氮量乘以 6.25 、即 6 。 三、选择 1、盐析法沉淀蛋白质的原理( ) A 与蛋白质结合成不溶性蛋白盐 B 次级键断裂蛋白质的构象改变 C 中和电荷，破坏水化膜 D 调节蛋白质溶液的等电点 2、以下哪项不是酶的特性（） A 酶是生物催化剂，催化效率极高 B 易受Ph，温度等外界因素的影响 C 能加速化学反应但不改变反应平衡点 D 有高度特异性 3、RNA和DNA的最大紫外吸收值是在（） A 280nm B 260nm C 510nm D 620nm 4、．凯氏定氮法使用的混合催化剂硫酸钾-硫酸铜配比为（） A 1:3 B 5:1 C 3:1 D 1:1

师大生物化学考试试题

生物化学阶段考试（一） 班级学号_____________姓名____________总分_____________ 一、是非题：每小题1分，共10分。错答一题倒扣0.5分，不答者不倒扣。是写“+”，非写“－”。 1、球蛋白与球状蛋白质是不同的。（） 2、神经节苷脂是由鞘氨醇、脂酸、已糖和唾液酸组成。（） 3、胆固醇以游离及酯的形式存在于一切动植物组织中。（） 4、极低密度脂蛋白就是β—脂蛋白。（） 5、磷脂和糖脂是构成生物膜脂双层结构的基本物质。（） 6、某蛋白质在pH6时向阳极移动，则其等电点小于6。（） 7、自然界的蛋白质和多肽类物质均由L一型氨基酸组成。（） 8、脂肪的皂化价高表示含低分子量的脂酸少。（） 9、在多肽分子中只存在一种共价键，即肽键。（） 10、硫酸软骨素B又称硫酸皮肤素。（） 二、填充题，每题2分，共20分。 1、卵磷脂分子中的________________为亲水端，_______________为疏水端。 2、Liebermann-Burchard反应（里一布反应）可用作_________________的定性或定量测定，它主要利用_______________和________________的反应。 3、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量是根据各种蛋白质________________________的不同。 4、直键淀粉的构象为__________________________________________，纤维素的构象为___________________________。 5、胰岛素是由___________________个氨基酸组成，其中A链__________________个氨基酸，B链________________个氨基酸，______________________对S-S键。 6、鉴别糖的方法为Molischer试验，是利用糖在浓酸情况下脱水生成_________________与_______________________反应，生成_______________________颜色的物质。 7、1分子血红蛋白可以结合________________分子的氧或结合___________________分子的2，3一二磷酸甘油酸。 8、利用超离心法测定蛋白质的分子量，常用的有两种方法，一种是__________________，另一种是_______________________。 9、常用的分离蛋白质的方法有______________、____________、______________、______________和________________等。 10、蛋白质顺序仪主要利用___________________法。该法是氨基酸的_______________与_______________________反应。 三、选择题：以下各题均有四个备选答案，其中一个或多个是正确的。每题1分，共15分。 1、下列哪些糖是还原糖？ （1）葡萄糖（2）果糖（3）蔗糖（4）乳糖 2、下列哪些糖或糖的衍生物有变旋现象？ （2）葡萄糖（2）果糖（3）淀粉（4）α—甲基葡萄糖苷 3、下列有关多糖的叙述哪些是正确的？ （1）天然淀粉溶于水

四川大学生物化学考试试题答案

一、名词解释：（10×2＝20分，答案写在专用答题纸上） 1、核酸分子杂交－不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性，形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程 2、蛋白质的超二级结构－指蛋白质分子中相邻的二级结构单位组合在一起所形成的有规则的、在空间上能辨认的二级结构组合体。 3、增色效应－当双螺旋DNA融解（解链）时，260nm处紫外吸收增加的现象。 4、伴娘蛋白－就是与部分折叠或不正确的折叠的多肽链相互作用的蛋白质，能够加速正确折叠的进行或提供折叠发生所需要的微环境。 5、顺反子－指DNA上的一个片段，有上千个脱氧核苷酸构成，相对独立的单位。DNA分子由许多相对独立的单位（基因）构成。 6、生物大分子的变性－生物大分子的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象。蛋白质在受到光照、热、有机溶剂以及一些变性剂的作用时，次级键受到破坏，导致天然构象的破坏，使蛋白质的生物活性丧失。DNA变性(DNA denaturation)指DNA双链解链分离成两条单链的现象。 7、回纹结构－即反向重复序列(inverted repeat sequence)：在同一多核苷酸链内的相反方向上存在的重复的核苷酸序列。在双链DNA中反向重复可能引起十字形结构的形成。 8、PCR －扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定DNA序列的一种技术。在该反应中，使用与目的DNA序列互补的寡核苷酸作为引物，进行多轮的DNA合成。其中包括DNA变性、引物退火和在Taq DNA聚合酶催化下的DNA合成。 9、激素－一类由内分泌组织合成的微量的化学物质，它由血液运输到靶组织，起着一个信使的作用调节靶组织（器官）的功能。 10、同工酶－是指有机体内能够催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。 二、写出下列生化名词缩写符号的的中文名称（10×0.5＝5分，答案直接写在小题后） 1、cAMP 3,5－环腺嘌呤核苷酸 2、NADP＋氧化型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 3、cccDNA 共价闭合环DNA 4、GSH 还原型谷胱甘肽 5、ddNTP 双脱氧核苷三磷酸 6、RNase 核糖核酸酶 7、Subunit 亚基 8、hnRNA 核内不均一RNA 9、Ψ（指一种稀有碱基）假尿嘧啶10、holoenzyme 全酶 三、填空题：（20×1＝20分，答案直接写在题中括号内） 1.真核生物细胞中的80 S核糖体是由60 S 和（40 ) S 组成。 2.构成α螺旋中肽键的原子（H和O）和DNA双螺旋中（B－DNA）中嘌呤核苷的碱基的排列均采用（反式或Trans ） 式排列。 3.（His或组氨酸）的功能基是催化中最有效、最活泼的，它是构成胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等的电荷中继网氨 基酸残基之一,在生理pH条件下，既可以作为H＋的受体，也可以作为H+的供体 4.已知一个酶对a、b、c三个底物作用的K m之间的关系是K ma＞K mb＞K mc, 则该酶的最适底物是( c ) 。 5.蛋白质分子α－螺旋构象中，螺旋一圈中含有（3.6 ）个氨基酸残基。

临床生物化学实验原理方法及检测介绍

临床生物化学实验原理、分析方法及检测技术 中国中医研究院广安门医院临床检测中心 生物化学实验——是把化学(分析技术)和生物化学(实验反应原理)的方法应用于疾病的诊断、治疗、监控的实验分支。 一个生化实验的最后测定结果应包括四大部分来完成。 一、实验反应原理及分析方法（理论依据） 二、实验检测技术（手段）生化仪的分析技术。 三、质量控制程序（质量保证）室内质控、室间质评、仪器、试剂、人员五要素。 四、临床意义（目的）咨询服务、异常结果的解释。 实验反应原理及分析方法(理论依据) 一个生物化学实验的反应原理设计，首先要找出所检测的化学特性，如测定体液（首先是血液）中酶的含量血液中除少数酶（如凝血溶血酶、铜氧化酶及假性胆碱脂酶等）含量较多外，血液正常生理状况下含量微乎其微。一般每毫升含微微克（Pg）水平，要直接测定如此微量物质是相当困难的。用免疫化学方法可测定全部酶蛋白分子含量（不论其有无活性）而用化学方法测定只能测定酶的催化活性，间接计算出酶的含量。目前利用酶具有催化活性这一特性，在临床上已普遍应用测定酶蛋白，同时还可以测定三大代谢的产物，如糖、脂类、蛋白质、这样也就建立起利用酶促反应的一级反应测定代谢物的方法。一级反应—反应速度与底物浓度成正比，因此只有当酶反应为一级反应时，才能准确测定底物含量，（如测定血糖、总甘油三脂、总胆固醇等）。从此在临床试剂盒的方法中出现了以酶为试剂测定各种代谢产物。 临床化学方法的分类 特别是自动生化仪方法的特点 以往临床化学实验都采用比色法进行各个项目的测定，这是因为比色法具有微量、迅速、准确的优点，特别适合于微量的生物体体液中各项物质测定。 在一般比色法中，手工使用比色计或分光光度计可以测定各种反应溶液的吸光度，但由于很难控制测定时间和反应温度，很难准确记录反应过程中吸光度变化，因此，毫不奇怪在很长一段时间内我们所使用的方法，都是在呈色反应达到完全或者反应达到平衡时，吸光度达到稳定时才进行测定。即所谓平衡法或终点法。 但自从自动生化仪出现后，从根本上改变了上述情况。通过各项先进技术，人们可以精确测定反应的动态过程。并可以准确计算任何一段反应时间内的反应速率，这样大大开阔了临床化学家对方法选择。除经典的终点法外还可以进行动态测定。这样不仅缩短了操作时间，大大提高了工作效率，还可进行一些用常规比色方法不能进行的测定。如测定酶反应的初速 度（V o ）等等。测酶初速度（V o ）只能用分光光度法。 因此，用好自动生化仪一个重要前提必须对自动生化仪可以提供的测试方法类型有所了解。 生化自动分析仪特点： 1 精确测定反应的动态过程； 2 准确计算任何一段反应时间内的反应速率； 3 除经典的终点法外还可以进行动态测定。 分析方法的分类

生物化学实验内容

《生物化学》实验教学大纲 课程类别：专业基础 适用专业：本科临床学专业 课程总学时：实验学时：32 实验指导书：生物化学与分子生物学实验教程 开课实验室名称：生化实验室 一、目的和任务 生物化学是一门在分子水平上研究生命现象的学科，也是一门重要的实验性较强的基础医学课程．随着医学的发展，该学科已渗透到医学的各个领域。生物化学实验技术已被广泛地应用于生命科学各个领域和医学实验的研究工作。生物化学实验是生物化学教学的重要组成部分，它与理论教学既有联系，又是相对独立的组成部分，有其自身的规律和系统。我们根据国家教委对医学生物化学课程基本技能的要求，开设了大分子物质的常用定量分析法、酶活性分析、电泳法、层析技术、离心技术及临床生化，使学生对生物化学实验有一个比较系统和完整的概念，培养学生的基本技能和科学思维的形成，提高学生的动手能力。 二、基本要求 1.通过实验过程中的操作和观察来验证和巩固理论知识，加深学生对理论课内容的理解。 2.通过对实验现象的观察，逐步培养学生学会观察，比较，分析和综合各种现象的科学方法，培养学生独立思考和独立操作的能力。 3.通过对各类实验的操作和总结，培养学生严谨的科学态度。 4.进行本学科的基本技能的训练，使学生能够熟练各种基本实验方法和实验技术的操作。 三、考试方法及成绩评定方法 四、说明 实验教材及参考书： 1.揭克敏主编：生物化学与分子生物学实验教程（第2版）。科学出版社，2010 参考资料： 1..袁道强主编：生物化学实验（第1版）。化学工业出版社，2011 五、实验项目数据表

2）要求：0：必修1选修 3）类型：0：演示1：验证2：综合3：设计 4）每组人数：指教学实验项目中一次实验在每套仪器设备上完成实验项目的人数。 六、各实验项目教学大纲 实验一蛋白质的沉淀反应 【预习要求】 预习四个小实验的具体实验原理和操作内容。 【实验目的】 1. 加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识； 2. 了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。 【实验内容】 （一）蛋白质的盐折 1. 原理 大量中性盐类如硫酸铵((NH4)2SO4)、硫酸钠(Na2SO4)和氯化钠(NaCl)等加入到蛋白质溶液后，可引起蛋白质颗粒因失去水化膜和电荷而沉淀。各种蛋白质分子的颗粒大小和电荷数量不同，用不同浓度中性盐可使各种蛋白质分段沉淀。例如血清中的球蛋白可在半饱和硫酸铵溶液中沉淀。当硫酸铵浓度达到饱和时血清中的白蛋白使沉淀下来。盐析沉淀蛋白质时能保持蛋白质不变性，加水稀释降低盐浓度，能使沉淀的蛋白质重新溶解，并保持其生物活性。因此，利用盐析法可达到分离提纯蛋白质的目的。 2. 操作步骤 ①取小试管1支、加入5％鸡蛋清溶液20滴，饱和硫酸铵溶液20滴，充分摇匀后静置5min，记录结果。

北京师范大学研究生入学考试生物化学试题剖析

北师大生物化学历年考研真题1999 一、解释名词（3分/题） 1.增色效应 2.蛋白质的变构作用 3.米氏常数 4.转换数 5.迟留时间（TR） 6.空体积（V0） 7.衰减调节 8.DNA的半不连续复制 9.糖异生作用 二、填空（1分/空） 1.DNA的二级结构为______________。 2.在真核细胞中DNA的三级结构为__________________结构。它由140bp的DNA缠绕于由______________组成的八聚体外，又依60bp的DNA及___________形成的细丝相连组成串珠状结构__________。 3.__________酶具有极高的专一性，识别DNA上特定位点，将两条链都切断，形成粘末端或平末端。 4.组成DNA的基本单位是___________，组成RNA的基本单位是____________。 5.一般来说，DNA分子中G-C含量高，分子较稳定，融解温度Tm___________。 6.蛋白质二级结构包括______，_______和________等结构单元。 7.糖酵解途径又叫________途径。 8.一分子反式CH3CH=CHCOOH完全分解成CO2和H2O共产生______分子ATP。 9.有机体从头合成嘧啶核苷酸时先利用分子物质形成带有嘧啶环的_________，再与____________生成_____________，再转化成UMP。 10.脱氧核苷酸的生物合成是在___________的基础上还原生成的。 11.在真核生物中DNA复制后组装成核小体时的组蛋白是________的组蛋白。 12.真核生物RNA聚合酶III负责转录_________。 13.在真核生物中蛋白质合成起始时________和_________复合物，再和_____形成40S 起始复合物。 14.根据原癌基因产物在细胞中的位置，可分为3大类： 第一类是____________包括______________，第二类是_________包括______，第三类是____________包括__________。 15.基因重排是指____________.通过基因重排调节基因活性的典型例子是_________。 三、问答题 1.用Brcn处理含等量的Met，Phe，Asp，Ser，Thr的多肽，释放出肽和单一的高丝氨酸。原5肽用胰凝乳蛋白酶处理的两个碎片，一个比另一个酸性强，酸性碎片有甲硫氨酸。原来肽用羧肽酶A处理，迅速放出Ser，随后放在Thr.推断该5肽的氨基酸排列顺序。（5分） 2.什么是蛋白质的四级结构？以血红蛋白为例说明之。（3分） 3.说明酶活力共价调节的基本原理。（7分） 4.说明等电聚焦技术的基本原理。（6分） 5.简述人体内丙氨酸彻底分解成最终产物的过程。一分子Ala彻底分解共产生多少ATP？（8分）

(完整版)生物化学试题 华南师范

华南师范大学历年考研试题 生物化学 一、是非题（本大题共10小题，你若认为该题陈述的观点是正确的，请在题号前的括号里写“+”；若认为该题陈述的观点是错误的，请在题号前的括号里写“?”。每小题答案真确得1分，错误倒扣1分，不作答0分。整个题满分10分，最低0分）。 （）1、研究蛋白质结构可分为一级、二级、三级、四级结构，所有蛋白质都具有四级结构。 （）2、蛋白质的变性作用主要是由于蛋白质分子的内部结构发生改变而引起，并不导致一级结构的破坏。 （）3、纯化DNA时，可用稀碱处理核酸粗提物以除去RNA杂质。 （）4、大多数真核生物的蛋白质编码基因含有不为多肽链的“居间顺序”（内含子），在成熟的mRNA中不表现其转录片段，表明编码基因在转录过程中，内含子不被转录。 （）5、酶是蛋白质，遇热易变性失活，故酶促反应会随温度升高而下降。 （）6、酶的某些基团经化学修饰后，其活性丧失，是因为这些基团均参与组成酶的活性中心。 （）7、三羧酸循环是生物体内有机物质彻底氧化的必由途径。 （）8、氰化物中毒的原理是它能阻断呼吸链末端氧化酶的电子传递途径。 （）9、同工酶能催化同一化学反应是因为这些酶具有相同的分子结构和功能。 （）10、利用同一限制性内切酶作用产生的粘性末端的DNA片段，都能通过互补碱基配对连接。 二、择填空（本大题共10分，全部为单选答案，满分10分）。 1、根据Watson-Crick模型，1μm DNA双螺旋片段平均核苷酸对为 A、294 B、2702 C、2941 D、3921 2、对全酶分子而言，在下列功能中，不是辅因子的功能。 A、决定酶的专一性 B、基团转移 C、传递电子 D、催化反应 3、下列反应途径不能直接产生3-磷酸甘油醛。 A、糖酵解 B、磷酸戊糖支路 C、糖异生 D、乙醛酸循环