动物细胞工程基础实验2

(完整版)分子生物学实验技术考试题(卷)库

一、名词解释 1.分配常数：又称分配系数，是指一种分析物在两种不相混合溶剂中的平衡常数。 2.多肽链的末端分析：确定多肽链的两末端可作为整条多肽链一级结构测定的标志，分为氨基端分析和羧基端分析。 3.连接酶：指能将双链DNA中一条单链上相邻两核苷酸连接成一条完整的分子的酶。 4.预杂交：在分子杂交实验之前对杂交膜上非样品区域进行封闭，用以降低探针在膜上的非特异性结合。 5.反转录PCR：是将反转录RNA与PCR结合起来建立的一种PCR技术。首先进行反转录产生cDNA,然后进行常规的PCR反应。 6.稳定表达：外源基因转染真核细胞并整合入基因组后的表达。 7.基因敲除：是指对一个结构已知但功能未知或未完全知道的基因，从分子水平上设计实验，将该基因从动物的原基因组中去除，或用其它无功能的DNA片断取代，然后从整体观察实验动物表型，推测相应基因的功能。 8.物理图谱：人类基因组的物理图是指以已知核苷酸序列的DNA片段为“路标”，以碱基对(bp，kb，Mb)作为基本测量单位(图距)的基因组图。 9.质谱图：不同质荷比的离子经质量分析器分开后，到检测器被检测并记录下来，经计算机处理后所表示出的图形。 10.侧向散射光：激光束照射细胞时，光以90度角散射的讯号，用于检测细胞内部结构属性。

11.离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的层析。 12.Edman降解：从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。 13.又称为限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)：是能够特异识别双链DNA序列并进行切割的一类酶。 14.电转移：用电泳技术将凝胶中的蛋白质，DNA或RNA条带按原位转移到固体支持物，形成印迹。 15.多重PCR：是在一次反应中加入多对引物，同时扩增一份模板样品中不同序列的PCR 过程。 16.融合表达: 在表达载体的多克隆位点上连有一段融合表达标签（Tag），表达产物为融合蛋白（有分N端或者C端融合表达），方便后继的纯化步骤或者检测。 17.同源重组：发生在DNA同源序列之间，有相同或近似碱基序列的DNA分子之间的遗传交换。 18.遗传图谱又称连锁图谱(linkage map)，它是以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”，以遗传学距离为图距的基因组图。 19.碎片离子：广义的碎片离子为由分子离子裂解产生的所有离子。 20.前向散射光：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度向前方散射的讯号用于检测细胞等离子的表面属性，信号强弱与细胞体积大小成正比。 21.亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的一种层析法。(利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合

人教版高中生物选修3作业测试练习2.1.1植物细胞工程的基本技术

ZHUAN TI ER | 专题2细胞工程 2．1植物细胞工程 2．1.1植物细胞工程的基本技术 课堂知能验收 对应学生用书P025 1．下列关于细胞全能性的叙述中，错误的是() A．理论上，生物体的每个细胞都含有该生物的全套基因，具有全能性 B．植物细胞虽然具有全能性，但并不是所有的细胞都能表现出来C．植物体只有生长点细胞具有全能性，而其他部位细胞没有全能性 D．植物细胞具有全能性，而其他生物细胞一般不表现出全能性 答案 C 解析具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能，也就是说，每个细胞都具有全能性，但并不是所有的细胞都能表现出来，一般来说植物细胞的全能性较高，动物细胞的全能性较低，C错误。

2．下列发生了细胞分化且能体现体细胞全能性的生物学过程是() A．玉米种子萌发长成新植株 B．小鼠骨髓造血干细胞形成各种血细胞 C．小麦花粉经离体培养发育成单倍体植株 D．胡萝卜根韧皮部细胞经组织培养发育成新植株 答案 D 解析种子萌发长成植株是由幼体到成体的正常生长发育过程，虽有细胞分化，但不能体现细胞的全能性，A错误；骨髓造血干细胞形成各种血细胞，仅仅是细胞分化的过程，没有形成完整的个体，不能体现细胞的全能性，B错误；花粉离体培养发育成单倍体植株，经历了细胞分化，体现的是花粉(生殖细胞)的全能性，没有体现体细胞的全能性，C错误；胡萝卜根韧皮部细胞经植物组织培养发育成新植株体现出体细胞的全能性，D正确。 3．植物组织培养依据的原理、方法步骤及诱导的植物激素分别是() ①细胞的全能性②离体的植物器官、组织或细胞③根、芽④生长素和细胞分裂素⑤生长素和乙烯 ⑥愈伤组织⑦再分化⑧脱分化⑨植物体

人教版生物-七年级上册2.1.3动物细胞 课堂活动

2.1.3动物细胞课堂活动 教学过程： 复习：1.制作临时装片的“七字步骤”；（擦、滴、取、展、盖、染、吸） 2.植物细胞的基本结构。（略）从而过度到本节。 师：上节课就有同学说：“老师，我真想看看自己身上的细胞呀，它和植物细胞一样吗？这节课就可以实现愿望了。 生：可是怎么看呢？ 师：出示实验题目——观察人的口腔上皮细胞，看到题目，你有什么疑问？ 生：口腔上皮细胞在什么部位？怎样取得？ 师：看着老师准备的用具，想一想？ 生：发现牙签，寻找解决问题的途径——在口腔侧壁上刮取（师引导、示范）。 师：再来认识一下其他的材料用具，有什么疑问？ 生：提问：关于生理盐水？（保持细胞的生理活性） 师：有了前两节课的经验，我们已经轻车熟路了，要想观察细胞，首先应做什么？ 生：制作临时装片。 师：利用这些材料用具，借鉴前面所学的方法，同学们自己设计一下制片的过程吧。 生：分组讨论、交流。设计方案如下： 1．方法步骤不变：擦→滴→刮→涂→盖→染→吸； 2．直接染色：擦→滴→刮→涂→染→盖→吸； 3．变化染色剂：使用高锰酸钾与碘液有何不同？ 4．变化取材部位：刮上颚与刮侧壁结果有何不同？ 选择一种方案制片，相邻同学尽量选择不同的方案，以增加对比性。 师：提示学生实验中的注意事项、规范操作。

生：观察。注意根据染色的结果区分细胞的结构，注意细胞数量的多寡、分散状况如何？分析原因。 师生交流实验所得： 1．取材于口腔内侧壁，细胞数量较多，但不易分散； 取材于上颚，细胞数量少，但分散较好，便于个体观察。 2．使用高锰酸钾溶液染色的结果较有层次：细胞核呈棕色，细胞质呈紫红色，细胞膜无色，效果不错。 绘图。学生依照自己观察到的细胞，实事求是画一个口腔上皮细胞图，注出各部分名称，较好的绘图在全班展示。 师：让我们再来认识人体或动物体一些其他的细胞。媒体演示（投影片或多媒体）。 生：归纳总结人体或动物体细胞的基本结构：细胞膜、细胞质、细胞核。 比较动、植物细胞结构的主要不同点，表达交流，取得共识。 师：让我们来动手制作一个“动物细胞”吧！ 生：模拟制作，可以在教师帮助下按照书中的方法制作，也可以在不用琼脂的情况下，利用现成的果冻加入一枚彩色糖粒示意细胞核，果冻即细胞质，包装果冻的塑料壳即细胞膜，能够达到效果，比较方便、卫生，不足之处是学生动手的成分要少一些。谨供参考。 小结略（可将连续三节实验课的情况进行总结）。 练习略。

动物实验操作的基本知识

动物实验操作的基本知识 一、实验动物抓拿固定 （一）小白鼠(mouse) 右手抓住其尾，放在鼠笼铁纱网上，然后用左手拇指及食指沿其背向前抓住其颈部，并以左手的小拇指和掌部夹住其尾固定在手上(图3-1)。取尾血及尾静脉注射时，可将mouse固定在金属或木制的固定器上。 （二）大白鼠(rat) 实验者应戴帆布手套，用右手将鼠尾抓住提起，放在粗糙的台面或鼠笼上，抓住鼠尾向后轻拉，左手抓紧两耳和头颈部皮肤，余下三指紧捏鼠背部皮肤，如果rat后肢挣扎厉害，可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住，将整个鼠固定在左手中，右手进行操作（图3-2）。若进行手术或解剖，则应事先麻醉或处死，然后用棉线活结缚四肢，用棉线固定门齿，背卧位固定在大鼠固定板上。需取尾血及尾静脉注射时，可将其固定在大鼠固定盒里，将鼠尾留在外面供实验操作。 （三）豚鼠(cavy) Cavy具有胆小易惊的特性，因此抓取时要求快、稳、准。一般方法是：以右手拇指和食指夹住两前肢及头部，使整个颈胸部皆在手掌中（不要抓得太紧以免窒息），左手抓住两后肢，使腹部向上，而后进行操作（图3-3）。 （四）蛙或蟾蜍(frog or toad) 捉拿方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定，以中指、无名指、小拇指压住其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住左，右前肢，右手进行操作（图3-4）。 在捉拿toad时，注意勿挤压其两侧耳部突起之毒腺，以免毒液射到眼中。 实验如需长时间观察，可破坏其脑和脊髓以后放在蛙板上固定进行操作。 （五）家兔(rabbit) 用右手抓住其颈背部皮毛，轻提动物，再以左手托住其臀部，使家兔的体重主要落在左手掌心，然后按实验要求固定（图3-5）。作兔耳血管注射或取血时，可用兔盒固定。作各种手术时，可将家兔麻醉后固定在手术台上。固定方法常采用仰卧位固定，四肢用粗棉线固定，头用兔头固定夹固定或用棉线钩住家兔门齿再固定在兔台头端铁柱上。 （六）狗(dog)

(七年级生物教案)《动物细胞》教学设计

《动物细胞》教学设计 七年级生物教案 教学目标： 知识与能力： 1.学生进一步熟练制作临时装片和使用显微镜观察细胞，提高制作与观察的技能 2.通过对其他动物细胞结构的观察，概括动物细胞的基本结构，提高学生的观察、归纳、总结能力。 3．区分动植物细胞的异同点，提高学生观察、比较的能力。 4. 通过模型制作进一步强化对动物细胞结构的认识，提高学生动手能力。 过程与方法： 1.通过复习植物细胞临时装片制作，学生阅读课本，找出动物细胞临时装片制作与植物细胞临时装片制作的不同，明确制作动物细胞临时装片的步骤。 2.使用显微镜观察口腔上皮细胞初步了解动物细胞结构，进一步通过对其他动物细胞结构图的观察，概括出动物细胞的基本结构。 3.对动植物细胞结构图进行比较，强化对动、植物细胞结构异同点的认识并得出细胞是生物体结构的基本单位这一核心概念。 4.通过模型制作进一步强化对动物细胞结构的认识。 情感、态度与价值观： 1.进一步让学生体会实验对生物学的重要性。 2.认同细胞的生物体结构基本单位。 教学重点： 制作口腔上皮细胞临时装片，正确使用显微镜。 区别动植物细胞结构的异同点。 教学难点： 口腔上皮细胞临时装片的制作和观察。 课时安排： 一课时 教学过程： 教学环节

教学内容及教师组织引导 学生活动 设计意图 激发兴趣 通过多媒体展示两组植物图片和动物图片，激发学生的学习兴趣。 配合老师提出的问题，积极投入对新课程内容的学习。 激发学生学习兴趣，确定本节课程内容——观察动物细胞。 复习旧知 新课学习一、动物细胞临时装片制作及观察 ●二、总结动物细胞基本结构 ●三、模型制作强化动物细胞结构认识 ●四、比较动植物细胞异同点 启发学生回顾制作洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片的实验步骤，并尝试用一个字概括。 布置学生阅读制作口腔上皮细胞的实验步骤，同样用一个字概括。 引导学生找出动植物细胞临时装片制作之间的差异。 思考讨论：

动物细胞工程试题及详解

动物细胞工程试题 1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（C）A都须用液体培养基 B都需用培养箱 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 解析：动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物，植物体细胞离体培养体现的是全能性。植物体细胞是固体培养基。动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。 动物细胞培养： 1、动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 2、动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 3、动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。 4、动物细胞培养需要满足以下条件 (1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 (2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 (3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 (4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 5、动物细胞培养的过程： 取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理

分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2下列关于细胞工程的叙述，错误的是（D） A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 解析：A正确诱导原生质体融合的方法有物理法（离心振动电刺激）化学法（聚乙二醇PEG）生物方法（灭活的病毒）. B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖，又可产生特异性抗体。D错误，假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M，甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M；而甲乙品种杂交染色体数目是N+M。 3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（A） ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④ 解析：单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 4利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（D） A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体

观察动物细胞和植物细胞教学设计

台州学院生命科学学院 09科学教育2班实验教案 实验名称：观察动物细胞和植物细胞 姓名：____________ 参与人员：景双双钱志扬柳长隆郑如观察动物细胞和植物细胞教学设计

姓名：景双双钱志扬柳长隆郑如学号：35 36 37 38 课题七年级上第二章第4节细胞（第三课时）观察动物细胞和植物细胞 2011版课程标准对本节内容的要求与活动建议1、学会制作简单的临时装片。 2、熟练掌握显微镜的使用，观察装片，学会绘制简单的生物图。 3、知道细胞的基本结构。 学习者的认知起点 学习者是七年级的学生，学生在之前的课中认识了生物，认识了生物的分类，也认识了微观的细胞和其结构。细胞作为生物体结构和功能的基本单位是生物学的基础知识，其重要性是显而易见的。上一节课也已经学习使用了显微镜，所以在本节课中要学会如何制作临时装片来进一步巩固显微镜的使用并且进一步对细胞进行观察以及学习生物实验绘图的方法。 基于学习者实际所设计的具体教学目标知识与技 能目标 1、熟练掌握显微镜的使用和观 察方法。 2、学习如何绘制生物绘图，并能 够掌握画图技巧。 3、进一步明确动植物细胞的区 别。 4、会根据植物细胞装片的制作 自己推出动物临时装片制作 的过程，并自己动手操作。 学习者 达到教 学目标 的证据 和表现 1、自己能够使用显微镜观 察装片，并且说出一些主 要步骤及注意事项。 2、能够观察装片并且具有 绘制生物图的能力。 3、能够在观察的基础上说 出动植物细胞的不同点 和相同点。 4、可以较好的完成动物临 时装片的制作。 过程与方 法目标 观察和分析实验及相关的实验注 意点的探究学习方式。 学生具有敏锐的观察和良好 的归纳能力，学会自己制作动 物细胞的临时装片。 情感态度 与价值观 目标 1、体会对事物的观察要透过现象 看本质； 2、感受科学的发展往往需要付出 几代人的共同努力，是一个长期 的过程，从而培养协作的精神； 3、初步感受物质世界的统一性和 多样性。 4、体会归纳思想的重要性，学会 自己去发现和解决问题。 1、能够理论联系实际，将之 前所学的动植物细胞的 结构与自己制作的临时 装片进行对比。 2、学会归纳思想，并且应用 到生活实际。 科学、技 术、社会 与环境 （STSE） 目标 知道细胞是生命活动的基本单 位，我们只有通过这样对微观世 界的学习才能更好的了解生命的 本质，为例如农业、生物等提供 一些本质性的帮助，为社会服务。 体会到细胞对于生命的 意义，学会透过现象看本质的 方法，科学地看待事物，更好 的为以后的学习和工作服务。

人教版生物选修三2.2动物细胞工程专项练习题

动物细胞工程专项练习题 1．美国科学家已经在实验室中成功培育出膀胱，并顺利移植到7名患者体内。这种技术为那些急需器官移植的患者带来福音。回答下列问题： （1）科学家从患者的膀胱上取下一小块活细胞样本，将其中的肌肉细胞和膀胱上皮细胞分别置于不同的培养皿中培养。在培养之前，需用 _____处理以分散细胞，将动物组织块消化后的初次培养称为 代培养。与植物组织培养的培养基相比，其培养基的主要不同点是含有 等一些天然成分。 （2）约一周后将培养皿中培养的细胞放在由胶原质制成的“支架”上继续培养，再过7周左右，原先的数万个细胞已经繁殖到15亿个左右，布满“支架”，膀胱上皮在内，肌肉在外，形成“新膀胱”。细胞数目大量增加，其增殖方式是 ；由这些细胞再形成肌肉和膀胱上皮的过程中要经过 。 （3）医生将“新膀胱”移植到患者膀胱的上面，这样新器官会继续生长并与老器官“重组”取代老器官中丧失功能的部分。新器官与老器官的“重组” （填“是”或“不是”）基因重组；“新膀胱”移植后， ______________（填“会”或“不会”）引起免疫排斥反应。 （4）除上述方法外，还可将患者的体细胞核移入去核的 ______中，利用体细胞 技术，形成相应组织、器官用于疾病的治疗。 2．下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。 回答下列问题： （1）图中A 表示正常细胞核，染色体数为2n ，则其性染色体的组成可为____________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_________________的方法。②代表的过程是__________。 （2）经过多次传代后，供体细胞中_______________的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。 （3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是__________________________________。 （4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了__________________________。 3．下图为利用小鼠制备抗埃博拉病毒的单克隆抗体过程示意图，图中A ～F 分别表示生物技术或细胞名称，请同答有关问题： （1）若A 细胞是经抗原刺激的小鼠B 淋巴细胞，则B 细胞一般选用__________，C 过程不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是____________________。 （2）在杂种细胞的培养过程中，为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的__________。 （3）单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选，首先用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，其具有的特点是_______________，还需进行克隆化培养和__________，最终获得足够数量的________________________，选出符合要求的细胞后，可在体外条件下培养或注射到__________内增殖。 （4）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断埃博拉病毒的感染者，这体现了单克隆抗体____________________的特性。 4．人乳头状瘤病毒（HPV ）与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV 的单克隆抗体可以准确检测出HPV ，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV 衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答： （1）单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有________________。 （2）将经融合处理后的细胞转到HAT 培养基上培养的目的是 ，该细胞 （填“能”、 “不能”）产生专一性抗体，所产生的抗体 （填“一定”、“不一定”）能抗HPV 。 （3）对于抗体检测呈______性的杂交瘤细胞克隆应进行克隆化培养，克隆化培养的方法最常用的是有 限稀释法，即稀释细胞到3～10个/mL ，每孔加入细胞稀释液______mL （填“0．1”、“1”或“10”），使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。 （4）科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因（prG ），该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路 __________________________________________________________ _________________________________________________________________________________________。 5．不同类型的细胞表达不同的基因组合。那么不同类型的动物细胞都具有全套基因吗？科学家进行了如图所示的克隆研究。Ⅰ～Ⅶ代表有关过程，a ～h 代表有关结构或个体。据图回答问题： (1)a 细胞的名称是________，选用该细胞作为核移植受体细胞的原因是 ________________________________________________________________________。 (2)对b 的操作方法通常是__________。若g 是能产生人生长激素的羊，则培育g 时，应将人生长激素基因导入___________，为了尽快获得大量的生长激素，但让g 进行有性生殖会丢失目的基因，你将通过________________技术来实现。 (3)从 d 中取出细胞进行培养时，一般不超过______代，原因是 ________________________________________________________________________。 此培养过程中与植物细胞培养过程中所用的培养基有何不同？_________________________________。 (4)如果图中的细胞均是人体细胞，则获得的h 细胞或器官可用于供体本人组织器官的移植，其优点是

动物细胞教案

第三节动物细胞教学设计案例 张建平 教学目标 ①进一步熟练制作临时装片和使用显微镜观察细胞，说明人口腔上皮细胞的基本结构，区别动植物细胞结构的主要不同点。 ②提高制作以及观察临时装片的技能。 ③设计实验、改革实验，开发自己的创新潜能，以此来体会科学探索的思想和方法是不断发展的；继续形成“胆大心细”的心理素质；在“模拟制作”活动中，提高学习生物学的兴趣。 重点和难点 重点：说明人口腔上皮细胞的基本结构，比较动植物细胞的相同点和不同点；提高实验能力和观察能力。 难点：制作临时装片过程中的刮取（首次观察自己身体上的细胞，学生感到既新鲜又好奇，取材关系到实验效果）；细胞结构的观察（与植物细胞相比不易观察，略有难度）；设计实验（应用以往的学习经验，是较高层次的学习）。 课前准备 学生：预习；3H铅笔，绘图纸；各种各样的果冻，彩色糖粒，果脯，小塑料食品袋，线等物品；上课前漱口。 教师：生理盐水，稀碘液，高锰酸钾溶液（质量分数为1％～5％），消毒牙签，滴管，纱布，镊子，吸水纸，载玻片，盖玻片，显微镜，清水，琼脂。 人口腔上皮细胞的结构挂图，不同种类的人体、动物体细胞挂图或投影片、投影仪或多媒体设备（若条件许可），提前制作临时装片、摆放示范镜。 教学设计

教学过程 复习：1．制作临时装片的“七字步骤”；（擦、滴、取、展、盖、染、吸）2．植物细胞的基本结构。（略）从而过度到本节。 师：上节课就有同学说：“老师，我真想看看自己身上的细胞呀，它和植物细胞一样吗?这节课就可以实现愿望了。 生：可是怎么看呢？ 师：出示实验题目──观察人的口腔上皮细胞，看到题目，你有什么疑问？ 生：口腔上皮细胞在什么部位？怎样取得？ 师：看着老师准备的用具，想一想？ 生：发现牙签，寻找解决问题的途径──在口腔侧壁上刮取（师引导、示范）。 师：再来认识一下其他的材料用具，有什么疑问？ 生：提问：关于生理盐水？（保持细胞的生理活性） 师：有了前两节课的经验，我们已经轻车熟路了，要想观察细胞，首先应做什么？ 生：制作临时装片。 师：利用这些材料用具，借鉴前面所学的方法，同学们自己设计一下制片的过程吧。 生：分组讨论、交流。设计方案如下： 1．方法步骤不变：擦→滴→刮→涂→盖→染→吸； 2．直接染色：擦→滴→刮→涂→染→盖→吸； 3．变化染色剂：使用高锰酸钾与碘液有何不同？ 4．变化取材部位：刮上颚与刮侧壁结果有何不同？ 选择一种方案制片，相邻同学尽量选择不同的方案，以增加对比性。 师：提示学生实验中的注意事项、规范操作。 生：观察。注意根据染色的结果区分细胞的结构，注意细胞数量的多寡、分散状况如何？分析原因。

动物细胞工程(1)

第三节动物细胞工程 动物细胞与组织培养、细胞核移植与动物体细胞克隆 学习目标： 1.简述动物细胞培养的过程、条件及其应用； 2.简述克隆动物的概念含义和基本原理； 3.简述体细胞核移植技术和动物克隆技术，以及应用前景； 课前导学： 一、动物细胞工程包括的主要技术 动物细胞工程的主要技术包括____ 、_____ 、___ ___、_______________、________________等技术。其中_________________________是其他动物细胞工程技术的基础。 二、动物细胞与组织培养 1．概念：动物细胞与组织培养是指在体模拟____ _ __，将动物细胞或组织在无菌、温度适宜和营养充足的条件下培养，使其、并维持原有和的技术。 2. 材料：动物或出生不久的的器官或组织。 3. 过程： （1）动物细胞培养： （2）动物组织培养： （3）动物细胞培养和动物组织培养的区别：动物细胞培养过程中需要用 __________________等使________________________________________________。 4.培养条件： （1）温度：最适温度是°C左右。 （2）PH：最适PH范围是_______。 （3）气体：主要是和，气体的含量不仅影响培养环境的，还直接影响。 （4）营养物质：如、无机盐、氨基酸、维生素、核酸、嘌呤、嘧啶、和生长因子等。 5.培养基的种类： 天然培养基：主要取自动物血清、动物组织提取液和鸡胚汁等，具有营养价值高、成分复杂的特点。 合成培养基：人工配制的，具有成分明确、便于控制实验条件的特点。缺点是缺乏天然培养

常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍

常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍 (2011-04-23 11:01:29)转载▼ 标签：分子生物学细胞生物学常用实用技术基本实验室技术生物学实验教育 常用的分子生物学基本技术 核酸分子杂交技术 由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性，它已成为分子生物学中最常用的基本技术，被广泛应用于基因克隆的筛选，酶切图谱的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下（适宜的温室度及离子强度等）可按碱基互补原成双链。杂交的双方是待测核酸序列及探针（probe）,待测核酸序列可以是克隆的基因征段，也可以是未克隆化的基因组DNA和细胞总RNA。核酸探针是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记的，能与特定的核酸序列发生特异性互补的已知DNA或RNA片段。根据其来源和性质可分为cDNA探针、基因组探针、寡核苷酸探针、RNA探针等。 固相杂交 固相杂交（solid-phase hybridization）是将变性的DNA固定于固体基质（硝酸纤维素膜或尼龙滤膜）上，再与探针进行杂交，故也称为膜上印迹杂交。 斑步杂交（dot hybridization） 是道先将被测的DNA或RNA变性后固定在滤膜上然后加入过量的标记好的DNA或RNA探针进行杂交。该法的特点是操作简单，事先不用限制性内切酶消化或凝胶电永分离核酸样品，可在同一张膜上同时进行多个样品的检测；根据斑点杂并的结果，可以推算出杂交阳性的拷贝数。该法的缺点是不能鉴定所测基因的相对分子质量，而且特异性较差，有一定比例的假阳性。 印迹杂交（blotting hybridization）

细胞工程实验小结

细胞工程实验小结 专业：生物技术班级：0801 姓名：励丹学号： 在本次暑期短学期的细胞工程实验课上，我们做了细胞工程中基础的几个实验——饲养层细胞的制备、动物细胞的原代培养（组织块法培养小鼠肝脏细胞，消化法培养小鼠肾脏细胞）、免疫脾细胞的制备、免疫脾细胞与骨髓瘤细胞的融合、细胞的超低温冻存与复苏及活性测定（MTT法检测）、抗体IgG的检测（ELISA 法），让我受益菲浅。其中很多知识在平时的学习中都是无法学习到的，其中很多实验都开阔了我们的视野，让我们获得了许多平时课堂上得不到的知识。在细胞工程实验课即将结束的时候，我对这个短学期的学习进行总结，总结细胞工程课程试验来的收获与不足。 这次的实验分成了8个小组，因为细胞工程的实验都须在无菌室内进行，而无菌室较小，所以各小组轮流进无菌室进行实验操作，故没轮到进无菌室的小组在外面的实验室进行简单的操练，所以较为轻松。 我们中的大多数人都是第一次进无菌室，对无菌室充满了好奇。而进无菌室也需要一重重地灭菌，以确保无菌室内的安全。首先需要用新吉尔灭溶液对需要带进无菌室的物品及我们的手进行消毒灭菌，然后进入缓冲间穿戴无菌服、帽、手套及口罩。在进入无菌室后还需要用酒精棉擦拭手、超净台以及一些物品。在无菌室内的操作都需在超净台上进行，而且需要在酒精灯边上进行，不可以远离超净台，否则可能使培养的细胞或培养液等受到污染，从而造成实验失败。 我们小组在细胞培养的实验中较为成功，细胞生长状态良好，没有出现染菌现象。在进行细胞超低温冻存于复苏实验时，我们组将两只小鼠的细胞混在一起，是的细胞数增加，相对的在冻存中损伤的细胞数也增多，这个实验应该算不成功的。 通过9天的细胞工程实验，我发现实验是细胞工程学学的实践，我们学到的许多理论都会最终作用于实验，也学到了许多其他专业课上没有教到的理论。很多实验都是需要花费许多心思去学习的，也是非常复杂的。我们学习理科的同学，更加要重视实验课，因为理论与实际结合是最重要。在每次实验之后，我们都要做实验报告，通过实验讲义和自己参阅资料，得知本次实验的目的、原理、所需仪器、实验步骤、实验中的要求及注意事项等问题。实验操作当然是细胞工程

药理学实验动物的基本操作实验心得

药理学实验动物的基本操 作实验心得 Revised by Jack on December 14,2020

这次是第一次药理学实验，我们学习了很多实验动物的基本操作方法。在做药理学实验之前我们就有做过人体解剖生理学实验，解剖过蟾蜍，小白鼠和家兔，这次的药理学实验更是一次对所学知识的巩固和深化，教给了我们很多在生理学实验中并没有学过的知识点。在刚做实验时，黄老师就向我们介绍了3R原则，即减少，优化，替代。动物是我们人类的朋友，首先我们应该尊重动物。它们用生命来换取人类的健康，推动着医学的进步，人类医学的发展离不开动物实验，动物为我们人类的健康做出了牺牲，我们应遵循“3R”原则。黄老师还通过视频给我们重点介绍了常用麻醉药及用法，实验动物的捉拿、麻醉、固定、给药、取血和处死方法。让我学到了很多实用性很强的东西。 之后便是分组自己做实验了，首先陈老师向我们讲解了小白鼠的标记方法，用中性品红表示十位数，苦味酸表示个位数，加上空白对照，一共可以标记一百支小白鼠。标记顺序为先左后右，从上至下。用苦味酸作为标记物的一个原因是它不容易被分解和弄掉，不会因为小鼠的活动而消失。其次是因为其有苦味，避免了被其他老鼠舔掉。之后讲解了小鼠的性别鉴定方法，除了书上说的方法外还可通过观察小鼠的乳房辨别。关于大鼠和家兔的捉持方法，大鼠在捉持前最好对其进行安抚，避免其急躁而咬人，而家兔则不可用手扯其双耳将其拉起。在给药方法方面，灌胃法要注意从口角插入口腔，用灌胃针抵住舌头，插入不可过深，一般入喉即可。腹腔注射时最好将其倒转，头部朝下，这样不容易刺入内脏。是否插入腹腔的判断方法：推注完后，轻微回抽，若有负压将注射器的推杆拉回，则已入腹腔。皮下注射时是否的入皮下的判断方法上同，皮下无负压，回抽不拉回。尾静脉注射时注意静脉在尾的两侧，不在上下，注射时用手捏住尾巴前段有利于暴露血管。 家兔的灌胃用木质开口器，使用时要想办法将其舌头压在开口器下，因为舌头会阻碍导尿管插入口腔，可以另外使用棉签配合，一边用棉签压住舌头，一边将开口器插入口腔。耳缘静脉注射时要注意选择小号针头，因家兔耳静脉较小，插入时应仔细谨慎。

细胞生物学实验方法与技术

第二节细胞生物学实验方法与技术 细胞生物学是生命科学中的重要分支，它以生命基本单位细胞为研究对象，应用近代物理、化学和实验生物学方法，从显微、亚显微和分子水平来揭示细胞生命活动及规律，其中包括细胞的生长、发育、分裂、分化、遗传、变异（包括癌变）、兴奋、运动、代谢、衰老与死亡等基本生命现象，并且利用与调控细胞的行为活动，已达到为生产实践尤其为医药卫生事业服务。当前细胞生物学与医药保健事业联系的较为紧密的热点问题主要有以下几种：1）真核细胞基因结构及其表达调控；2）细胞膜、膜系、受体与信号传递研究；3）细胞生长、分化、衰老、癌变、死亡，尤其是程序性细胞死亡的研究；4) 细胞工程，包括基因工程及体细胞核移植的研究。 一、细胞培养常用方法 1、细胞原代培养（primay culture）又称初代培养，即直接从机体取下细胞、组织、或器官、让他们在体外维持与生长。原代细胞的特点是细胞或组织刚离开机体，他们的生物状态尚未发生很大的改变，一定程度上可反映他们在体内的状态，表现出来源组织或细胞的特性，因此用于药物实验尤其是药物对细胞活动、结构、代谢、有无毒性或杀伤作用等研究是极好工具。常用的原代培养方法有组织快培养法及消化培养法。前者方法简单，细胞也较易生长，尤其是培养心肌有时能观察到心肌组织块的搏动。细胞从组织块外长并铺满培养皿或培养瓶后即可进行传代。 2、细胞的传代培养当细胞生长至单层汇合时，便需要进行分离培养否则会因无繁殖空间、营养耗竭而影响生长，甚至整片细胞脱离基质悬浮起来直至死亡。为此当细胞达到一定密度时必须传代或再次培养，目的是借此繁殖更多的细胞，另一方面是防止细胞的退化死亡。 二、器官培养方法 器官培养（organ culture）是指用特殊的装置使器官、器官原基或它们的一部分在体外存活，幷保持其原有的结构和功能。器官培养可模拟体内的三维结构，用于观察组织间的相互反应、组织与细胞的分化以及外界因子包括药物对组织细胞的作用。 器官培养方法很多，最经典的方法即表玻皿器官培养法；一种最常用的方法是不锈钢金属网格法及Wolff培养法和扩散盒培养法，实验者可根据情况选择采用。 三、放射自显影术测定 放射自显影术（autoradiography）是利用放射性同位素电离辐射对核子乳胶的感光作用，显示标本或样品中放射物的分布、定量以及定位的方法。放射性同位素能在紧密接触的感光乳胶中记录下它存在的部位和强度，准确显示出形态与功能的定位关系。现已可将放射自显影术与电镜以及生物分子结合起来。不但可以研究放射性物质在组织和细胞内的分布代谢，而且可以揭示核酸合成及其损伤等改变，目前已在生命科学各领域被广泛应用。 四、染色体分析技术 染色质或染色体是遗传物质在细胞水平的形态特征。前者是指当细胞处于合成期时遗传物质经碱性染料着色后，呈现出细丝状弥漫结构；当细胞进入分裂期时，染色质细丝高度螺旋化凝聚为形态有特征的染色体。特别是在分裂中期，复制后的染色体达到最高程度的凝聚，称为中期染色，是进行染色体形态观察分析的最佳时期。染色体分析应用领域越来越广，主要用于以下几方面：1）为临床诊断提供新手段；2）研究不育和习惯性流产发生的遗传基础； 3) 通过检查胎儿的染色体，预防有染色体异常患儿出生（先天愚型）；4）根据染色体的多肽性进行亲子和异型配子的起源研究；结合DNA重组技术可以将基因定位于染色体的具体

《观察动物细胞》说课稿

《观察动物细胞》说课稿 作为一名老师，通常需要用到说课稿来辅助教学，说课稿有利于教学水平的提高，有助于教研活动的开展。那么优秀的说课稿是什么样的呢？以下是作者整理的《观察动物细胞》说课稿，欢迎大家分享。 一、教材分析 1、教材的地位和作用 本节课是生物学人教版七年级上册第二单元第一章第三节的内容，本单元主要是引导学生在细胞水平上认识生物体，教学上会有一定困难。这是因为细胞结构微小，距离学生的生活经验较远。因此，应当多给学生提供用显微镜观察细胞的机会，增加学生对细胞的感性认识。本节课尽管内容比较抽象，但是学生有了前面的植物细胞的观察作为基础，学起来还是比较容易的。 2、三维目标 知识目标 ①进一步熟练制作临时装片和使用显微镜观察细胞，说明人口腔上皮细胞的基本结构。 ②区别动植物细胞结构的主要不同点。 能力目标 提高制作以及观察临时装片的技能。 情感态度价值观 设计实验、改革实验，开发自己的创新潜能，以此来体会科学探索的思想和方法是不断发展的;继续形成“胆大心细”的心理素质;在“模拟制作”活动中，提高学习生物学的兴趣。 3、重点和难点 重点：说明人口腔上皮细胞的基本结构，比较动植物细胞的相同点和不同点;提高实验能力和观察能力。 难点：制作临时装片过程中的刮取(首次观察自己身体上的细胞，学生感到既新鲜又好奇，取材关系到实验效果) 细胞结构的观察(与植物细胞相比不易观察，略有难度);

设计实验(应用以往的学习经验，是较高层次的学习)。 二、学情分析 七年级的学生还是处于一个好动的年龄，在学生已经观察了植物细胞的结构并有一定的了解下，这节课采用灵活的教学方式，让学生在动手中进一步了解动物细胞的结构。而且在学生实验能力没有得到充分的锻炼下，还不是很强，所以只有充分的感性认识才能吸引学生兴趣，把握课堂的重点。 三、设计理念 新课程标准提出“提高学生科学素养”，就是要把我们在教学中只注重对学生科学知识的传授转向全面提高学生科学素养的教育，强调学生在生物学知识、科学探究技能、情感态度与价值观等领域的全面发展。因此，我在教学中遵循“从做中学，学中做”的原则，运用实验法、比较法、多媒体演示法等方法进行教学，学生在教师的指导下可以运用小组合作法、比较法、观察法等方法学习。 四、教学环节 (一)创设情境，引入新课 复习：临时装片的制作方法;植物细胞的基本结构。 温故而知新，提出问题： ①想看看自己身上的细胞吗? ②人的细胞与植物细胞有什么相同和不同之处? 引导学生联系自身，提出问题，创设学习情境，引入新课。 (二)组织实验，合作交流 出示题目，交流：“看到题目，你有何疑问? 疑问:人的口腔上皮细胞在哪?怎样取材?引导、分析。 ①设计：根据已有的经验，设计实验方案(注意取材、方法、染色剂的变化); ②制作：同组同学尽量选择不同的方案制作临时装片，增加对比性。 ③观察自己制作的临时装片，然后同学间交换观察。 (三)归纳反思，学以致用 绘制细胞的基本结构图，感知动物(人)细胞的形态结构，注意绘图要领。多媒体演示不同种类的动物细胞。 (四)模拟制作，能力拓展

《动物细胞》教案一

动物细胞 九江市都昌县北炎中学艾冰华 一、教学分析 1.教材分析 本节内容是“植物细胞”内容的自然延续。本节的实验活动也是以上一节的实验知识与技能作为铺垫。 学生在了解植物细胞的基本结构之后，自然就想知道动物细胞的基本结构。这两类细胞有哪些共同的特点？又有哪些不同之处？“想一想，议一议”活动安排的内容，就是依据这种想法进行设计的。这体现了教材在帮助学生建构概念时，利用了学生已有的一些前概念的思想。 本节中的实验活动，因为有了制作植物细胞临时装片的经验，因此，实验活动的难度不大。但需要教师理解的是，教材选择的材料是人的口腔上皮细胞，一方面因为材料取自学生自身，可以有效地激发学生的好奇心，保证学生顺利地观察到人的口腔上皮细胞；另一方面，由于口腔内壁上脱落的细胞较少，而且有不少是食物残渣，因此，采用人的口腔上皮细胞，无形地增加了学生操作的难度。教师需要在教会学生取材以及后期染色方面多加指导。 关于动物细胞的结构，同上一节一样，引导学生通过实验观察、归纳、总结后获得相关知识。在具体的操作层面上，制作人的口腔上皮细胞临时装片的步骤中，强调要将上皮细胞放置在质量分数为0.9%的生理盐水中，其目的是保持细胞的正常形态，滴加碘液的目的是便于观察细胞，特别是观察到细胞核。 在讲述植物细胞和动物细胞基本结构的基础上，教材在正文中总结出“细胞是构成生物体的基本单位”这一重要概念。从教材呈现这一重要概念的位置来看，教材是非常重视帮助学生逐步形成概念的，概念的形成是有事实性材料来支撑的。不仅如此，教材还在“科学家的故事”栏目中，介绍了施莱登和施旺建立细胞学说的过程和成功的原因，以及细胞学说建立的重要意义，让学生全面理解“细胞是构成生物体的基本单位”这一概念的重要意义。 “制作动物细胞模型”的活动，一方面通过学生的动手动脑活动，进一步巩固加深动物细胞基本结构的知识；另一方面，制作模型的材料成本并不高，如果注意卫生是完全可以食用的，这也无形地激发了学生动手的兴趣。 2.学情分析 学生经过了前面的学习，知道了植物细胞的基本结构，初步学会了制作植物细胞临时装片的基本方法。很自然会想知道动物细胞结构和人（自己）细胞结构的冲动和极大的兴致和好奇心。所以，同样会出现操作的盲目性，以及在操作过程中因为找不到细胞而出现心理波动，这些教师一定要注意。比较植物细胞和

常用实验动物的实验基本操作技术

常用实验动物的实验基本操作技术 第一节常用实验动物的生物学特征 1．蛙（或蟾蜍）的生物学特点是什么？主要用于哪些实验？ 属于两栖变温动物，皮肤光滑湿润，有腺体无外鳞。蛙的心脏有两个心房，一个心室，心房与心室区分不明显，动静脉血液混合，有冬眠习性。生存环境比哺乳动物简单，在机能学实验中有多种实验选择该动物。如：①离体蛙心实验，常用来研究心脏的生理功能及药物对心脏活动的影响。②蛙的腓肠肌和坐骨神经可用于观察外周神经及其肌肉的功能，以及药物对周围神经、骨骼肌或神经肌肉接头的影响。③缝匠肌可用于记录终板电位。脊休克、脊髓反射、反射弧分析、肠系膜微循环等。在临床检验中，可用雄蛙作妊娠反应实验。 2．小白鼠的生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 小白鼠性情温顺，易于捕捉，胆小怕惊，对外来刺激敏感。它胃容量小，不耐饥渴，随时采食。在机能学实验中常选用该动物。故适用于大量的实验动物，如：某些药物的筛选实验、半数致死量（LD50）测定、药效比较、毒性实验、妊娠期20天左右，常用于避孕药实验及抗癌药实验。 3．大白鼠的生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 大白鼠性情温顺，行动迟缓，易于捕捉，但受惊吓或粗暴操作时，会紧张不安甚至攻击人。大鼠嗅觉发达，对外界刺激敏感，抵抗力较强。大鼠无胆囊，肾单位表浅，肝再生能力强。大鼠的血压反应比兔稳定，可用它作血压实验，也可用于慢性实验、抗炎、降脂、利胆、子宫实验及心血管系统的实验。药典规定该动物为催产素效价测定及药品指控中升压物质检查指定动物。 4．豚鼠生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 豚鼠性情温和，胆小，饲养管理方便，可群养。豚鼠耳蜗管发达，听觉灵敏，存在可见的普赖厄反射（听觉耳动反射），乳突部骨质薄弱。豚鼠对组织胺、人型结核杆菌很敏感。能耐受腹腔手术，使用于肾上腺机能的研究。其自身不能制造维生素C，是研究实验性坏血症的唯一动物。 5．家兔生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 家兔属于草食性动物，性情温顺但群居性差，听觉、嗅觉十分灵敏，胆小易惊，具夜行