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人教版高中生物选修一专题2《微生物的培养与应用》word导学案

专题2微生物的培养与应用

第5课时微生物的实验室培养

目标导航 1.了解有关培养基的基础知识，掌握无菌操作技术的有关内容。2.了解消毒和灭菌常用的方法及二者的区别。3.学会以大肠杆菌为材料进行微生物培养与分离纯化的方法。

一、培养基与无菌技术

1．培养基

(1)概念：人们按照微生物对________________的不同需求，配制出供其________________的________________。

(2)成分：一般含有______、________、________、________，此外还要满足微生物对__________________(即生长因子)、________以及氧气的需求。

注意病毒目前不能利用人工培养基来培养，需接种在动、植物组织细胞中才能繁殖。常用于培养病毒的是活鸡胚。

2．无菌技术

(1)概念：防止一切外来杂菌的侵入，并保持灭菌物品及无菌区域不再被污染的方法，称为无菌技术。

注意在微生物的实验室培养中，无菌技术的核心是________________，________________。

(2)无菌技术的具体内容

①对实验操作的________、操作者的________________进行清洁和消毒。

②将用于微生物培养的__________、接种用具和培养基等进行________。

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在________________进行。

④实验操作时应避免已________处理的材料用具与周围的物品相接触。

(3)消毒和灭菌的概念

①消毒：消毒是指使用________的物理或化学方法杀死物体表面或内部的________________(不包括芽孢和孢子)。

②灭菌：灭菌是指使用__________的理化因素杀死物体内外________________，包括____________。

③消毒与灭菌的区别：两者最大的区别是________________________。

拓展深化某些细菌在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体，称为芽孢。每个细菌细胞仅形成一个芽孢，故它无繁殖功能。芽孢有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压的能力。芽孢的休眠能力十分惊人，可保持几年到几十年的生活力。

孢子是微生物产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞。一般是单细胞，个体微小，通常是适应于从不利环境条件中存活下来，并在条件改变时产生新的营养体，能直接发育成新个体。(4)消毒与灭菌的常用方法

二、实验操作

(一)配制培养基

1．配制原则

(1)____________(根据微生物的种类、培养目的等)，如培养基可由简单的无机物组成；生产用培养基内可加入化学成分不明确的天然物质，而分类鉴定用培养基内必须加入已知化学成分的物质。

(2)____________，注意各种营养物质的浓度和比例。

(3)____________，各种微生物适宜生长的pH范围不同，细菌6.5～7.5、放线菌7.5～8.5、真菌5.0～6.0。

注意①不同微生物对营养需求不同，因此，首先根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。

②营养物质浓度过低不能满足微生物营养需要，过高对微生物的生长有抑制作用，另外，培养基中各营养物质浓度比直接影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成和积累，其中碳氮比(C/N)的影响较大。例如，在谷氨酸生产中，当培养基中的碳源与氮源的比为4∶1时，菌体大量繁殖，而产生的谷氨酸少；当碳源与氮源的比为3∶1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸合成量大增。

2．配制方法(以制备牛肉膏蛋白胨固体培养基为例)

(1)

(2)实验流程

提醒合格的培养基必须灭菌效果好。培养基配制好后，要放在恒温箱中保温1～2 d，若无菌落生长则说明制备的培养基是合格的。

(二)纯化大肠杆菌

纯化大肠杆菌就是为了获得大肠杆菌的纯种菌落，这需在培养时，尽量使菌落中的菌体来自于一个大肠杆菌的分裂，即这个菌落的细菌群体由一个大肠杆菌繁殖而来，这就需接种时尽量接种单个的大肠杆菌。

1．微生物接种的方法

微生物接种的方法最常用的是__________和______________两种。

(1)____________通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

①将________放在酒精灯火焰上灼烧，直到接种环烧红。

②在火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的______。

③将试管口通过酒精灯的________。

④将已冷却的接种环伸入菌液中，________一环菌液。

⑤将试管口通过酒精灯的火焰，并迅速塞上棉塞。

⑥________将培养皿皿盖打开一条缝隙，________将沾有菌种的接种环迅速伸入________，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。

⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将____________的划线与________相连。

⑧将____________，放入培养箱中培养。

(2)________________则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

①系列稀释操作

a．取盛有9 mL水的6支试管灭菌，并按101～106的顺序编号。

b．用________吸取1 mL培养的菌液，注入101倍稀释的试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。

c．从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液，注入102倍稀释的试管内吹吸均匀，获得102倍液。依此类推。

②涂布平板操作

a．将________浸在盛有酒精的烧杯中。

b．取不超过0.1 mL的________，滴加到培养基表面。

c．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10 s。

d．用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。2．注意事项

(1)平板划线法

①操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行________________，划线操作结束时，仍需灼烧________。

②从第二次以后的划线操作总是从________________开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。

(2)稀释涂布平板法

稀释涂布平板的操作比较复杂，且各个细节均需保证“________”，应特别注意：

①酒精灯与培养皿的距离要合适。

②吸管头不要接触任何其他物体。

③吸管要在酒精灯火焰周围使用。

3．微生物分离纯化培养的结果作出分析与评价

(1)培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。

(2)在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。

(3)培养12 h和24 h后的菌落大小不同，菌落分布位置相同。原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大，而菌落的位置不动，只是菌落数增多。

(4)频繁使用的菌种利用临时保藏法保存，长期保存菌种的方法是甘油管藏法。前者利用固体斜面培养基培养后，保存在4℃冰箱中，第3～6个月转种培养一次，缺点是保存时间较短，菌种容易被污染或产生变异；后者将菌种与无菌甘油等量混合后保存在－20℃的冷冻箱中。

4．菌种的保存

为了保持菌种的纯净，需对菌种进行保藏。对于频繁使用的菌种，我们可以采用________________法；对于需要长期保存的菌种，可以采用________________法。将菌种放在低温环境中保藏的目的是________________________，但时间长了菌种还是要老化的，因此对临时保存的菌种________个月后需重新接种。

知识点一培养基与无菌技术

1．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是()

A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素

B．碳源物质也是该微生物的能源物质

C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D．水是该微生物的营养要素之一

2．下列说法正确的是()

A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质

B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基

C．除水以外的无机物只能提供无机盐

D．无机氮源不可能提供能量

知识点二大肠杆菌的纯化培养

3．有关平板划线操作的叙述，不正确的是()

A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物

B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上的菌种

C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液

D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者

4．下列为某同学在培养金黄色葡萄球菌实验中的部分操作步骤，其中正确的是() A．培养基中蛋白胨、牛肉膏溶化后，直接补充蒸馏水至100 mL

B．培养基配制完毕可直接使用

C．加压至100 kPa之前，要彻底排出锅内的冷空气

D．将接种环放在酒精灯火焰上灼烧，灭菌后立即伸入菌液试管内挑取少量菌种

一、选择题

1．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是()

A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板

D．待平板冷却凝固约5～10 min后，将平板倒过来放置

2．金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下述实验结束后的做法错误的是()

A．对接种环进行灼烧处理

B．带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉

C．带菌培养基必须经加热后才能倒掉

D．接种后双手必须经肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦拭

3．防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是() A．实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒

B．接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌

C．在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染D．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境

4．下列叙述错误的是()

A．右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞，为避免污染需放在酒精灯火焰附近B．倒平板整个过程应在火焰旁进行

C．打开培养皿盖，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖D．为避免水滴滴入培养基，平板应倒过来放置

5．有关稀释涂布平板法的说法中，错误的是()

A．用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后，要用手指轻压移液管的橡皮头，吹吸

三次，目的是使菌液与水充分混匀

B．移液管需经过灭菌

C．试管口与移液管应在离火焰1～2 cm处

D．涂布时可转动涂布器，使菌液涂布均匀

6．以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序正确的是()

A．计算→称量→倒平板→溶化→灭菌

B．计算→称量→溶化→倒平板→灭菌

C．计算→称量→溶化→灭菌→倒平板

D．计算→称量→灭菌→溶化→倒平板

7．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是()

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上

C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温－4℃保藏的方法

8．有关平板划线操作的叙述，正确的是()

A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌

B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞

C．把皿盖打开，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可

D．最后将平板倒置，放入培养箱中培养

二、简答题

9．某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：

(1)对买回来的菌种进行扩大培养，首先制备试管培养基，写出制备牛肉膏蛋白胨固体培养基所需的原料：________、________、________、________、________。其中提供氮源的是______________；提供碳源的主要物质是________。

(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，故配制培养基时各成分要有合适的________。在烧杯中加入琼脂后要不停地________，防止________________________。(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入____________中灭菌，压力________kPa，温度______，时间______________。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管______________。

(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入________，把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。

(5)从一支试管向另一支试管接种时注意，接种环要在酒精灯________(“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环______后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，将接种的试管放入______℃冰箱中保藏。

(1)培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是________和________。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行__________处理。

(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是____________和______________两种。在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是______________。

(3)假设某同学发现培养基上细菌数目过多地连成一片，可能的原因是什么？

________________________________________________________________________。

第5课时微生物的实验室培养

知识清单

一、1.(1)营养物质生长繁殖营养基质(2)水无机盐碳源氮源特殊营养物质pH

拓展深化

碳元素细胞物质代谢产物能源物质氮元素微量有机物

(3)液体固体工业生产分离鉴定天然合成选择抑制促进分离鉴别鉴别

2．(1)防止杂菌污染保证培养的纯度(2)①空间衣着和手②器皿灭菌③酒精灯火焰附近④灭菌(3)①较温和部分微生物②强烈所有的微生物芽孢和孢子③芽孢和孢子是否存活(4)煮沸法巴氏消毒法化学药剂法灼烧灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌紫外线灭菌

二、(一)1.(1)目的要明确(2)营养要协调(3)pH要适宜 2.(2)计算称量溶化调节pH 分装灭菌倒平板

(二)1.平板划线法稀释涂布平板法(1)平板划线法

①接种环②棉塞③火焰④沾取⑥左手右手平板内⑦最后一区第一区⑧平板倒置(2)稀释涂布平板法①移液管②涂布器菌液

2．(1)①火焰灼烧灭菌接种环②上一次划线末端(2)无菌

4．临时保藏甘油管藏降低微生物的新陈代谢速率3～6

对点训练

1．B[对于CO2来说，它为无机物，只能做碳源而不能作为能源物质。]

规律链接微生物代谢类型与营养的关系：

2.A[根据培养基的物理性质，可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基，在液体培养基中加入不同量的凝固剂如琼脂可形成半固体或固体培养基；除水以外的无机物如NH4HCO3，既可以是碳源，也可以是氮源，不仅仅提供无机盐；无机氮源有时也能提供能量，如NH3可以为硝化细菌提供能量。]

3．C[在第二区域内划线时，接种环上的菌种来源于第一次划线的末端。]

规律链接(1)无菌技术是微生物培养中的关键环节。掌握无菌技术操作的方法及所适用的条件。时刻建立“有菌”观念，注意操作中的合理灭菌，以杜绝或防止杂菌污染。

(2)平板划线法和稀释涂布平板法都要求最终形成标准菌落。因此，划线或稀释要充分，如果培养基上长出的菌落相互重叠，则说明划线或稀释不充分，应该重新操作。

4．C[培养基的配制应该先加水，后加热溶化，否则培养基会被烧焦；培养基配制完毕要经过灭菌后才能使用；在高压蒸汽灭菌以前，如果高压蒸汽灭菌锅内的冷空气没有排尽，当压力上升到100 kPa时，锅内的温度就不会上升到应有的高度，导致灭菌不彻底；接种时，

接种环放到酒精灯火焰上灼烧灭菌是应该的，但不能立即伸入菌种试管内，否则会将菌种烫死。]

达标测试

1．A[制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。待培养基冷却至50℃，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时，进行倒平板。平板冷却5～10 min后还需倒置。]

2．C[金黄色葡萄球菌有很强的致病力，所以在操作时一定要做到安全防范，接种后双手用肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦拭，以起到杀菌的作用；对接种环进行灼烧也可以杀灭细菌，防止污染环境；高压蒸汽灭菌也可杀死培养基中的金黄色葡萄球菌；如果只对带菌培养基进行加热，杀不尽其中的致病菌，因为此菌的耐高温能力很强，会污染环境。] 3．B[对接种环等金属用具进行灼烧灭菌，应放在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰处。] 4．C 5.D 6.C

7．D[对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3 mL甘油瓶中加入1 mL甘油后灭菌，将1 mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在－20℃的冷冻箱中保存。]

8．D[平板划线操作时要时刻注意两个问题：一是防止杂菌污染；二是要尽可能地将菌种分离。]

9．(1)牛肉膏蛋白胨水无机盐琼脂蛋白胨牛肉膏(2)比例搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂(3)高压蒸汽灭菌锅100121℃15～30 min废弃(4)适量水(5)外冷却 4

10．(1)牛肉膏蛋白胨灭菌

(2)平板划线法稀释涂布平板法蘸取酒精；引燃灭菌(3)菌液浓度过高；培养过程中被杂菌污染；利用接种针划线时，划下一个区域前没有对接种针进行灭菌处理

解析牛肉膏和蛋白胨都是从天然物质中提取出来的，都含有丰富的有机物，可以为微生物提供碳源和氮源。平板划线法和稀释涂布平板法都能使菌体分散开，但如果操作不当，会使分离效果不理想。

第6课时土壤中分解尿素细菌的分离与计数

目标导航 1.研究培养基对微生物的选择作用。2.进行微生物数量的测定。

一、研究思路

1．筛选菌株

(1)实验室中微生物筛选的原理

人为提供有利于________________生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时________或________其他微生物生长。

(2)选择培养基

在微生物学中，将允许__________种类的微生物生长，同时________或________其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。

(3)分离分解尿素的细菌的选择培养基

①在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是____________，提供氮源的是________，

琼脂的作用是凝固剂。

②该培养基对微生物具有选择作用。其选择机制是________________________________才能在该培养基上生长。

③土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们体内能合成________，将尿素分解的反应式是________________________________________________________。

Taq细菌能忍受93℃左右的高温，是在美国黄石国家公园的一个热泉中发现的，这说明，在寻找目的菌株时，要根据____________________________________________。

2．统计菌落数目的方法

(1)稀释涂布平板法(也叫活菌计数法)

①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的____________，通过统计平板上的________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作

第一，设置重复组，增强实验的说服力与准确性。将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择________稀释度的菌液，分别取0.1 mL接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布器将菌液涂布整个平板表面，放在适宜的温度下培养并计算菌落数。为使结果接近真实值，可将同一稀释度涂布到三个或三个以上的平板上，培养并计算出__________。

第二，为了保证结果准确，一般选择菌落数在________的平板进行计数，若设置的重复组中结果相差太远，意味着操作有误，需重新实验。

③计算公式：每克样品中的菌株数＝C

V×M，其中C代表___________________________，V 代表________________________________(mL)，M代表____________。

(2)显微镜直接计数法

①原理：此法利用特定的____________或______________，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量，但不能区分细菌的死活。计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特定的面积1 mm2和高0.1 mm的计数室，在1 mm2的面积里又被划分成25个(或16个)中格，每个中格进一步划分成16个(或25个)小格，计数室由________个小格组成。

②操作：将稀释的样品滴在计数板上，盖上盖玻片，然后在显微镜下计数4～5个中格中的细菌数，并求出每个小格所含细菌的平均数，再按公式求出每毫升样品中所含的细菌数。

③计数公式：每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400×10 000×稀释倍数。

(3)设置重复和对照

①设置重复：培养过程中应设置重复组，同一稀释度下应涂布________个平板，才能增强实验的说服力与准确性。

②设置对照：实验中应设置对照，主要目的是________________________对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。如__________对照组，观察培养物中是否有杂菌污染；设置________培养基，观察选择培养基是否具有________作用。

二、实验设计

实验步骤

1．土壤取样：从肥沃、湿润的土壤中，用无菌小铁铲铲去表层土3 cm左右，迅速取土壤并装入____________密封或事先准备好的________中。

2．制备培养基：①制备________________培养基作为对照组，尿素为唯一氮源的培养基作为________，用来判断选择培养基是否具有____________。

②放宽稀释范围，如稀释倍数为103～107范围内的要分别涂布，而每个稀释度下需要______个选择培养基、________个牛肉膏蛋白胨培养基，因此需要15个选择培养基和5个牛肉膏蛋白胨培养基。

③两种培养基应各有一个作为________对照，此外还需准备8个灭菌的试管和1个灭菌的移液管。

3．样品的稀释与涂布平板：参考下面的实验流程示意图，将10 g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(锥形瓶体积为250 mL)，充分摇匀，吸取上清液 1 mL，转移至盛有________ mL生理盐水的无菌大试管依次等比稀释至107稀释度，并按照由107～103稀释度的顺序分别吸取______mL进行平板涂布操作。按照浓度从低到高的顺序涂布平板，不必更换移液管。

说明：图中的1、2、3平板是____________，4为____________________作对照，判断选择培养基是否具筛选作用，还有两个空白对照，即不涂布稀释后菌液的选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基，验证培养基中是否____________。

4．将涂布好的培养皿放在30℃温度下培养，及时观察和记录。

5．挑选选择培养基上不同形态的菌落接入含____________培养基的斜面中，观察能否产生颜色反应。

6．细菌的计数

当菌落数目稳定时，选取菌落数在________的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出____________，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。同时仔细观察所分离到的菌落，并记录菌落特征。

7．统计表格

表一平板上的菌落数记录表

表现

出________的菌落特征。三、操作提示

1．取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都要________。

2．应在________旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入________中，塞好棉塞。 3．在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在________旁操作。

4．实验时要对________做好标记。注明________________________________________等。 5．为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当________________。

在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的________将尿素分解成了________。氨会使培养基的碱性增强，________升高。因此，我们可以通过检测培养基____________来判断该化学反应是否发生。

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入

________指示剂，培养某种细菌后，如果pH 升高，指示剂将________，这样，我们就可以准确地鉴定该种细菌能够分解尿素。

知识点一研究思路

(1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是____________________。

(2)按物理性质划分该培养基属于________培养基，理由是培养基中含有________________；该类培养基常用于微生物的______________________等。

(3)由于____________________________________________________________________，所以该培养基只能用于能够合成________的微生物的培养。用此培养基培养土壤浸出液能够从土壤中筛选出________的细菌。

(4)在微生物学中，将_______________________________________________________ __________________的培养基，称作选择培养基。

2．广东省是我国甘蔗生产区之一。甘蔗是一种高光效的C4植物，单位面积产量很高，种

植面积日益扩大，目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗→榨汁(蔗糖)→酵母发酵→蒸馏→成品(燃料酒精)。

(1)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意________________和____________，加琼脂后灭菌，制成固体平板。

步骤3：将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。

步骤4：根据________________________________________________________________，筛选出突变菌。

(2)上述步骤2、3和4的依据分别是___________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

知识点二实验设计

3．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是()

A．涂布了1个平板，统计的菌落数是230

B．涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238

C．涂布了3个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163

D．涂布了3个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233

4．在本实验操作中对使用的平板和试管要进行标记，以下说法正确的是()

A．对培养皿仅需注明培养基的种类即可

B．一般在使用之后进行标记

C．由于试管用的较多，只需对试管进行标记即可

D．标记的目的主要是为了防止实验中平板、试管等的混淆

一、选择题

1．在缺乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出()

A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌

B．固氮细菌、大肠杆菌、放线菌

C．固氮细菌、霉菌、放线菌

D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌

2．请选出下列正确的操作步骤()

①土壤取样②称取10 g土壤，取出加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中③吸取0.1 mL土壤溶液进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度

A．①→②→③→④

B．①→③→②→④

C．①→②→④→③

D．①→④→②→③

3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是()

A．筛选出能分解尿素的细菌

B．对分离的菌种作进一步鉴定

C．作细菌的营养成分

D．如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素

4．下面对“从土壤中分离分解尿素的细菌过程中灭菌”的理解，不正确的是()

A．防止杂菌污染

B．消灭全部微生物

C．稀释土壤溶液的过程中必须在火焰旁操作

D．灭菌必须在接种前进行

5．下列不属于菌种记数方法的是()

A．平板划线法B．稀释涂布平板法

C．显微镜检法D．滤膜法

6．下列有关配制培养基的叙述中，正确的是()

A．制作固体培养基必须加入琼脂

B．加入青霉素可得到乳酸菌

C．培养自生固氮菌不需要氮源

D．发酵工程一般用固体培养基

7．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最接近样品中菌体数真实值的是()

A．菌落数最多的平板

B．菌落数量最少的平板

C．菌落数量适中的平板

D．取若干个平板菌落数量的平均值

8．土壤中分解尿素的微生物所需氮源为()

A．硝酸B．氨C．尿素D．蛋白胨

二、简答题

9．在现代农业中，常在饲料中加入一定量的尿素去饲养牛等牲畜。因其有特殊的器官——瘤胃，在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物以尿素作唯一氮源。某一同学设计了如下实验，对能分解尿素的细菌进行分离和计数。

Ⅰ.取样：到屠宰场，在刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先准备好的信封中密封。Ⅱ.制备培养基：制备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基。将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数应明显多于选择培养基上的数目。由于初次实验，选择了一个较宽的稀释范围，并且每个稀释度下需要3个选择培养基，1个牛肉膏蛋白胨培养基。Ⅲ.微生物的培养与观察：按稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布操作。将涂布好的培养皿放在30℃下培养，并且需要无氧条件。比较两种培养基中菌落的数量、形态等，并做好记录。挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红指示剂的培养基中，观察是否产生颜色反应。

Ⅳ.细菌的计数：当菌落数目稳定时，选取平板计数。

请回答下列问题：

(1)制备牛肉膏蛋白胨培养基的目的是什么？

________________________________________________________________________。(2)为什么每个稀释度下需要3个选择培养基？

________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)上述培养时，为什么需要无氧条件？

________________________________________________________________________。

(4)应用含酚红指示剂的培养基的目的是什么？结果会呈现出什么样的颜色反应？原理是什么？

________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (5)计数时应选什么样的平板进行计数？怎样计算出样品中的细菌数目？

________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。

10．有人送来一支芽孢杆菌菌种，其中一部分芽孢杆菌有抗青霉素的能力，另一部分没有抗性。请你把对青霉素有抗性的芽孢杆菌分离出来。

(1)现有条件：无菌牛肉膏培养基两个、无菌接种台、接种工具齐备、医用青霉素两支。 (2)实验过程

①取两个培养基，分别标号为A 、B ，向A 、B 两个培养基中分别加入______________，加入过程一定要进行___________________________________________________________ 操作。

②向A 培养基中接种___________________________________________________。 ③接种后，将A 培养基放入恒温箱培养两天。

④从________________中挑取生长良好的芽孢杆菌，接种到B 培养基中。

⑤接种后，将B 培养基放入恒温箱内培养两天，即可获得较多抗青霉素芽孢杆菌。第④⑤两个步骤的目的是_________________________________________________。第6课时土壤中分解尿素细菌的分离与计数知识清单

一、1.(1)目的菌株抑制阻止 (2)特定抑制阻止

(3)①葡萄糖尿素 ②只有能够以尿素作为氮源的微生物 ③脲酶 CO(NH2)2＋H2O ――→脲酶

CO2＋2NH3 它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找

2．(1)①一个活菌菌落数 ②三个菌落平均数 30～300 某一稀释度下平板上生长的平均菌落数涂布平板时所用的稀释液的体积稀释倍数 (2)①细菌计数板血细胞计数板 400 (3)①至少3 ②排除实验组中非测试因素空白完全筛选二、1.(1)无菌信封烧杯 (2)①牛肉膏蛋白胨实验组选择作用 ②3 1 ③空白 (3)9 0.1 选择培养基

牛肉膏蛋白胨培养基含有杂菌 (5)酚红指示剂 (6)30～300 平均值 (7)同种微生物稳定

三、1.灭菌 2.火焰锥形瓶 3.火焰 4.培养皿培养基类型、培养时间、稀释度、培养物 5.事先规划时间

四、无偏高其他氮源大于 30～300 接近五、脲酶氨 pH pH 的变化酚红变红对点训练 1．(1)葡萄糖和尿素 (2)固体琼脂纯化、分离、计数 (3)培养基中只有尿素一种氮源脲酶分解尿素 (4)允许特定种类的微生物生长，并能抑制或阻止其他种类微生物生长

解析根据培养基的成分，可以推断培养基的类型以及适于培养的微生物的代谢类型。含有琼脂、明胶等凝固剂的培养基为固体培养基；不含凝固剂的为液体培养基。不含碳源的培养基适于自养微生物的培养，不含氮源的培养基适于固氮微生物的培养等。固体培养基常用于菌种的纯化、分离、记数等；液体培养基常用于菌种的扩大培养和工业生产。

规律链接

(1)培养基主要给培养物提供主要的营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及氧气等的要求，所以根据培养基成分可以推断培养基的类型以及适于培养的微生物代谢类型。

(2)选择培养基是指允许特定微生物生长并抑制其他杂菌生长的培养基，所以配制选择培养基时要明确要筛选的微生物的营养特点和代谢特点。

2．(1)添加高浓度蔗糖(葡萄糖)调低pH是否能在选择培养基上生长(2)提供高糖和酸性的筛选环境；获得单菌落；能生长的菌落具有耐高糖和耐酸的特性

解析(1)要筛选耐高糖和耐酸的菌种，培养基中必须加入高浓度蔗糖和调低pH，能在选择培养基上生长的即为所需菌种。(2)步骤2是给其提供高糖或酸性的筛选环境；步骤3是为了获得单菌落；步骤4是根据能生长的菌株具有耐高糖和耐酸的特性筛选出突变菌。

3．D[在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以A、B两项不正确。C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地用3个平板的计数值求平均值。]

规律链接设计实验要遵守单一变量原则和对照原则，同时为避免结果的偶然性，使结论更有说服力和准确性，要设置重复组，重复组之间结果相差不大时直接求其平均值；若相差太大，说明操作有误，不能简单求平均值。

4．D[为避免混淆，最好在使用前就做好标记，对培养皿标记时应注明培养基种类、培养日期以及平板上培养样品的稀释度等，故A、B错。C项试管不仅需进行标记，在梯度稀释时，还应按一定顺序依次放在试管架上。]

达标测试

1．C[固氮细菌可以在无氮培养基上生长；青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长，但不会抑制霉菌的生长；加入10%的酚的培养基可以抑制细菌和青霉菌的生长，但不会抑制放线菌的生长。]

2．C

3．B[筛选出能分解尿素的细菌用选择性培养基即可，不需要加指示剂。加入指示剂的培养基，目的都是对要分离的菌种作进一步的鉴定。]

4．B

5．A[平板划线法可以用于菌种的纯化和分离，不能用于菌种记数。]

6．C[制作固体培养基也可以用明胶、海藻酸钠等；青霉素抑制细菌和放线菌的繁殖，乳酸菌属于细菌；发酵工程一般用液体培养基；自生固氮菌能够利用空气中的氮气作为氮源。] 7．D[用稀释涂布平板法对样品中活菌数目进行统计，只是一种估测，根据此方法的实验过程可知，在某一稀释度下涂布的平板菌体数具有一定的偶然性，并不是绝对均匀，所以取若干个平板菌落数量的平均值比较接近样品中菌体数的真实值。]

8．C[只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素为氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源使其生长、发育及繁殖受到抑制，所以，能够选择出分解尿素的微生物。]

9．(1)作为对照，用来判断选择培养基是否起到了选择作用(2)每个稀释度下涂布3个平板，是作为重复组，以增强实验结果的说服力与准确性(3)由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌，

接触空气会死亡 (4)鉴别培养基，看是否有分解尿素的细菌存在。结果会变红。原理是分解尿素的细菌产生脲酶并催化下列反应CO(NH2)2＋H2O ――→脲酶

CO2＋2NH3，因产生NH3，培养基pH 升高，酚红指示剂呈红色反应 (5)选择菌落在30～300的平板进行计数。根据平板所对应的稀释度，对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，以此估算样品中细菌的数目

解析本题是从反刍动物瘤胃中分离分解尿素的细菌的过程，解题时应注意以下问题：(1)要设立基础培养基——牛肉膏蛋白胨培养基作对照，观察选择培养基是否具有选择作用。(2)要设立重复组，取平均值，如每一稀释度下涂布至少3个平板，以增强实验结果的说服力与准确性。(3)瘤胃是一个厌氧环境，在其中生活的微生物多为厌氧菌，分离时要注意创造无氧环境。(4)进一步鉴别尿素细菌需在培养基中加入酚红指示剂，若此种菌存在，则会变红，原理是分解尿素的细菌能产生脲酶，作用为催化下列反应：CO(NH2)2＋H2O ――→脲酶

CO2＋2NH3。因产生NH3，使培养基碱性增强，pH 升高，使酚红指示剂呈现红色反应。(5)为保证结果准确，计数应选择菌落数在30～300的平板。 10．(2)①青霉素无菌 ②适量芽孢杆菌菌种

④A 培养基的菌落获得纯度高的抗青霉素芽孢杆菌(分离出对青霉素有抗性的芽孢杆菌)

第7课时分解纤维素的微生物的分离

目标导航 1.了解纤维素在生物圈的分布；知道纤维素酶的组成和作用。2.知道刚果红染色法的原理；了解两种刚果红染色法的要领。

一、基础知识

(一)纤维素与纤维素酶 1．纤维素的化学组成

由________三种元素组成，是一种多糖。纤维素的基本组成单位是葡萄糖，人体内没有分解纤维素的酶，所以人体不能直接利用纤维素作为能源物质，但土壤中有分解纤维素的微生物，最终把纤维素分解成二氧化碳和水释放到无机环境中去。 2．纤维素的分布

________是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。纤维素产生于植物的光合作用，地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨。 3．纤维素酶的组成

纤维素酶是一种________，一般认为它至少包括C1酶、Cx 酶和葡萄糖苷酶三种组分。 4．作用机理

纤维素――→C1酶＋Cx 酶____________――→葡萄糖苷酶

________。

(二)纤维素分解菌的筛选

1．筛选方法：________________。

2．筛选原理

当我们在含纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成____________。当纤维素被________分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以________________为中心的透明圈，这样，我们就可以通过________________来筛选纤维素分解菌。

3．两种刚果红染色法

(1)先________________，再加入________进行颜色反应。

(2)在________时就加入刚果红。

二、实验设计

1．实验流程

2．设置对照

将1实验流程中的选择培养基改为__________的培养基，如牛肉膏蛋白胨基础培养基，其余

过程均与1实验流程相同。

3．梯度稀释

用1 mL无菌吸管从选择培养基中吸取1 mL培养液注入盛有9 mL无菌水的试管中，吹吸三次，使充分混匀；然后再用一支1 mL无菌吸管从此试管中吸取1 mL菌液注入另一支盛有9 mL无菌水的试管中，以此类推配制成101、102、103、104、105、106倍的各种稀释液。4．涂布培养

将鉴别培养基三个平板分别用记号笔写上104、105、106倍的三种稀释液，另取三个不含纤维素的培养基平板，分别用记号笔写上104、105、106倍的三种稀释液；然后用三支1 mL 无菌吸管分别从104、105、106倍的三管稀释液中吸取________对号滴入已写好稀释度的平板上，用无菌玻璃涂布器在培养基表面轻轻地涂布均匀。

将培养基平板________于30～37℃温室中培养1～2 d，每隔24 h观察菌落情况。

5．筛选菌株

(1)刚果红染色。

(2)挑选菌落：将产生明显________的菌落，挑取并接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在30～37℃下培养，可获得纯种。

6．结果分析与评价

(1)培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落：对照的培养基在培养过程中________菌落生长，则说明培养基制作合格；如果观察到________透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。

(2)分解的结果是否一致：由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量，因此最容易得到的是细菌。但由于所取土样的环境不同，学生也可能得到真菌和放线菌等不同的分离结果。

7．课题延伸

(1)为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行________________的实验，纤维素酶的发酵方法有________发酵和________发酵两种。

(2)纤维素酶的测定方法：一般是采用对纤维素酶分解纤维素后所产生的________含量进行定量测定。

知识点一基础知识

1．下列关于分离纤维素分解菌的实验的叙述，有误的是()

A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

B．选择培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少

C．经稀释培养后，用刚果红染色

D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上

2．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是()

A．分解尿素的细菌B．硝化细菌

C．分解纤维素的细菌D．乳酸菌

知识点二实验设计

3．有些微生物含有纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。纤维素酶可以通过微生物进行发酵生产，为了提高酶的产量，请你设计一个实验，利用诱变育种的方法，获得产生纤维素酶较多的菌株。

(1)写出实验步骤

①________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

②制备含有纤维素的固体鉴别培养基若干。

③________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

④一段时间后，取培养基__________，观察记录菌落周围透明圈的大小情况。

(2)预期实验结果及结论。

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。4．分离土壤中纤维素分解菌用到的方法是()

①稀释平板法②涂布平板法③单细胞挑取法

④选择培养分离法

A．①②B．②③④C．②③D．①③④

一、选择题

1．纤维素、纤维素酶和控制纤维素酶合成的物质，它们的基本组成单位依次是() A．葡萄糖、葡萄糖和氨基酸

B．葡萄糖、氨基酸和核苷酸

C．氨基酸、氨基酸和核苷酸

D．淀粉、蛋白质和核酸

2．通过分离分解纤维素的微生物实验，对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选，这只是分离提纯的第一步，还需要进行()

A．发酵产纤维素酶的实验

B．提取纤维二糖的实验

C．浓缩纤维素分解菌的实验

D．提取葡萄糖的实验

3．从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计，正确的是()

A．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→挑选菌落

B．土壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落

C．土壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落

D．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落

4．鉴定纤维素分解菌时，可以使用刚果红对其染色，刚果红染色法有两种常用方法，两种刚果红染色法的结果是()

A．均会出现透明圈

B．方法一出现，方法二不出现

C．均不会出现透明圈

D．方法一不出现，方法二出现

5．纤维素酶是一种复合酶，主要包括()

A．C1酶B．Cx酶

C．葡萄糖苷酶D．包括A、B、C

(完整版)人教版高中生物选修一第一章学案和习题1

商丘市一高2010-2011学年下学期高三生物选修1 1.1果酒和果醋的制作编制：秦伟审定：备课组长：使用时间：总第期 1 1．有细胞结构而没有核膜的一组生物是 ( ) A ．噬菌体、细菌 B ．变形虫、草履虫 C ．蓝藻、酵母菌 D ．放线菌、圆褐固氮菌 2．酒厂用酵母菌酿酒时，经检测活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是 ( ) A ．降低温度 B ．隔绝空气 C ．加缓冲液 D ．加新鲜培养基 3．将葡萄汁制成果酒和果醋后（） A ．能量减少，有机物种类变化 B ．能量增加，有机物种类不变 C ．能量不变，有机物种类变化 D ．能量减少，有机物种类不变 4．细胞结构是原核细胞、生长繁殖过程不需氧、体内不含有氧呼吸酶的微生物是 ( ) A ．酵母菌 B ．醋酸菌 C ．乳酸菌 D ．变形虫 5．在醋酸菌利用葡萄酒生产葡萄醋的过程中，因为培养环境的改变，醋酸菌也可能出现变异现象，这种变异来源是 ( ) A ．染色体变异 B ．基因突变 C ．基因重组 D ．等位基因分离 6．(多选)若在制作葡萄酒时，在发酵液中同时生成了葡萄醋，可能的原因是 ( ) A ．密封不严，有氧气进入 B ．有空气中的醋酸菌进入 C ．发酵罐消毒不彻底 D ．发酵液灭菌不彻底 7．(多选)制作葡萄酒的过程中，涉及的操作过程有 ( ) A ．发酵装置的消毒 B ．接种菌种 C ．通人氧气量和酸碱度的控制 D ．发酵过程高温加热 8．下列关于果酒和果醋制作的叙述，错误的是 ( ) A ．制作果酒时瓶口需密闭，而制作果醋时中断通氧可能会引起醋酸菌死亡 B ．温度对酵母菌酒精发酵的影响很大，而对醋酸菌的发酵影响不大 C ．在变酸的果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的 D ．制作果酒和果醋时都应用70%的酒精对发酵瓶消毒并注意无菌操作 9．利用微生物发酵制作果酒，该过程利用的微生物是___________，其代谢类型是 ____________，与生产实际相关的反应式是_______________ ，在不灭菌的情况下，如何使酵母菌成为优势菌种?____ ________________________ _____________________________ ___________。 10．酵母菌是自然界中常见的一类真菌． (1)从细胞核的结构看，酵母菌属于_______________________ 生物． (2)酵母菌常进行___________________生殖，在基因工程中，也常用酵母菌作为转入基因的受体细胞，是因为___________________________________________________。 (3)用染料使染色体着色，发现一酵母菌细胞核中有17条染色体，该酵母菌是______倍体．在自然环境中，酵母菌属于生态系统中的___ ___成分． (4)酵母菌体内遗传物质主要在上，而醋酸菌的遗传物质主要在________上． 11．下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题： (1)完成图1中的实验流程。 (2)冲洗的主要目的是_________，冲洗应特别注意不能____________，以防止菌种的流失。 (3)图2装置中的充气口在________时关闭，在_______时连接充气泵，并连续不断地向内________________________________________________________________________。 (4)排气口在酒精发酵时排出的气体是由_______产生的______，在醋酸发酵时排出的是________________________________________________________________________。 (5)写出与(4)题有关的反应方程式： ①________________________________________________________________________； ②________________________________________________________________________。 (6)若在果汁中就含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明原因_______________________________________________________________________________________________________________。 (7)在酒精发酵时瓶内温度一般应控制在________。醋酸发酵时温度一般应控制在________。 1.1答案 1—8 DBACB ABCD ABC B 9、酵母菌异养兼性厌氧型 C 6H 12O 6 2C 2H 5OH+2CO 2+能量将混合菌置于缺氧，酸性环境下，利用酵母菌兼性厌氧的特点，而绝大多数其他微生物都无法适应这一环境受到抑制 10、真菌出芽酵母菌繁殖快遗传物质相对少单分解者细胞核拟核 11、(1)醋酸发酵 (2)洗去浮尘反复冲洗 (3)酒精发酵醋酸发酵泵入空气(氧) (4)酵母菌 CO 2 ( 含氧量少的)空气、CO 2 (5)C 6H 12O 6―→2C 2H 5OH ＋2CO 2 C 6H 12O 6＋2O 2―→2CH 3COOH ＋2CO 2＋2H 2O ， C 2H 5OH ＋O 2―→CH 3COOH ＋H 2O (6)不能。因为酒精发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长，且醋酸菌发酵条件是氧气充足 (7)18 ～25 ℃ 30 ～35 ℃ 作业班级：学号：姓名：高三生物酶

人教版高中生物选修一专题二《微生物的培养与应用》知识点归纳

专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养 ·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。 ·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。 ·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。 ·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。 ·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。 ·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。 ·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。 ·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件 ·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面： ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

高中生物选修三专题二细胞工程知识点总结归纳和答案

植物细胞工程和动物细胞工程默写 1、细胞工程是在或的操作 2、细胞工程按操作对象分为和 3、植物细胞工程通常采用的技术手段是：和 4、植物组织培养的理论基础是： 5、理论上每一个活细胞都应该具有。因为 6、受精卵的全能性最高，受精卵生殖细胞体细胞 7、为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ 8、植物组织培养的外界条件：，内在原理是： 9、植物组织培养的过程：经过形成经由过程形成，最后移栽发育成。 10、是指已分化细胞经诱导，失去其特有的结构和功能而变为未分化细胞的过程。 11、是指由外植体长出来高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 12、植物体细胞杂交的意义（优势）：。 13、去除细胞壁的常用方法：（纤维素酶、果胶酶等） 14、人工诱导原生质体融合方法：物理法：等；化学法： 15、融合完成的标志是： 16、植物体细胞杂交过程包括：和。 17、植物体细胞杂交的原理是：和

18、人工种子的特点是： 19、作物脱毒(1)材料: (2)脱毒苗: 20、单倍体育种：(1)方法: (2)优点: ; 21、动物细胞工程常用的技术手段：(基础)、、、 22、动物细胞培养的原理是：。 23、用处理，一段时间后获得单个细胞。 24、细胞贴壁： 25、细胞的接触抑制： 26、原代培养：，培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。将原代细胞从培养瓶中取出，用处理后配制成，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为 27、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为 28、细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 29、动物细胞培养的条件：1. 2. 3. （培养液的Ph为7.2-7.4）4.

高二生物选修一专题一二测试卷(含答案)26454

高二生物选修一专题一二测试卷学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________ 一、选择题（35x2=70） 1．关于果酒的制作过程，下列叙述中正确的是 A．先去烂子粒和枝梗，再用清水冲洗掉污物 B．发酵的温度维持在18～25 ℃最好 C．发酵过程中需要适时打开瓶盖放气，以防止发酵瓶破裂 D．需要不断地充入氧气 2．下列关于果酒和果醋制作的叙述，正确的是 A．在制作果酒和果醋实验中，一直保持厌氧环境 B．当氧气、糖源充足时，醋酸菌能将果汁中的糖发酵为醋酸 C．由于酵母菌的繁殖能力很强，不需对所用装置进行消毒 D．温度对酵母菌酒精发酵的影响很大，而对醋酸菌的发酵影响不大 3．对制葡萄酒和葡萄醋发酵条件的控制中，错误的是 A．葡萄汁装入发酵瓶时，要留有的空间 B．用清水冲洗葡萄除去污物，应反复多次冲洗 C．制葡萄酒的过程中，除在适宜的条件下，时间应控制在10～12d D．制葡萄醋的温度要比葡萄酒的温度高些，但时间一般控制在7～8d左右 4．下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是 A．果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同 B．制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒 C．变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落 D．果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件 5．下列叙述错误的是 A．酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精 B．醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸 C．泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵 D．腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪 6．与醋酸发酵有关的微生物是 A．一种细菌和另一种细菌 B．丝状真菌和细菌 C．酵母和细菌 D．酵母和丝状真菌 7．下列对腐乳实验操作过程的叙述，错误的是 A．前期发酵，将笼屉中的温度控制在15～18 ℃ B．豆腐块分层摆放，逐层加盐，层数加高盐量不变 C．卤汤中的酒量应控制在12%左右 D．腌制腐乳的玻璃瓶冲洗后要用沸水消毒，装瓶后密封，瓶口通过酒精灯火焰8．某同学在制作腐乳的过程中，发现豆腐腐败变质，下列不属于其原因的是A．用盐腌制时，加盐量太少 B．用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒 C．制作卤汤时，料酒加的量较多 D．装瓶后，没有将瓶口密封 9．下列关于腐乳制作的叙述，错误的是 A．毛霉可利用其体内的酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸

(完整word版)2017人教版高中生物选修1专题5课题3《血红蛋白的提取和分离》word导学案

专题5课题3 血红蛋白的提取和分离一、基础知识（一）凝胶色谱法 1、凝胶色谱法也称做，是根据分离蛋白质的有效方法。 2、凝胶实际上是一些微小的球体，这些小球体大多数是由构成的，如葡聚糖或琼脂糖。 3、在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同，相对分子质量的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程，移动速度；而相对分子质量的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在移动，路程，移动速度。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。（二）缓冲溶液 1、缓冲溶液的作用是。 2、缓冲溶液通常由溶解于水中配制而成的。 3、生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，为了，必须保持体外的pH与体内的。（三）电泳 1、电泳是指。 2、许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷的电极移动。电泳利用了待分离样品中各分子的差异以及分子本身的、的不同，使带电分子产生不同的，从而实现样品中各种分子的分离。 3、两种常用的电泳方法是和，在凝胶中加入SDS，电泳速率完全取决于，因此，在测定蛋白质分子量时通常使用。二、实验操作蛋白质的提取和分离一般分为四步：、、和。（一）样品处理 1、红细胞的洗涤：洗涤红细胞的目的是，采集的血样要及时分离红细胞，分离时采用离心（500r/min），然后用胶头吸管吸出上层透明的，将下层暗红色的倒入烧杯，再加入（质量分数为），缓慢搅拌 min，离心，如此重复洗涤三次，直至，表明红细胞已洗涤干净。 2、血红蛋白的释放：在和作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白。 3、分离血红蛋白溶液：将搅拌好的混合溶液离心（2000r/min）后，试管中的溶液分为4层。第一层为无色透明的，第2层为白色薄层固体，是，第3层是红色透明液体，这是，第4层是的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的。（二）粗分离：透析取1mL的血红蛋白溶液装入中，将透析袋放入盛有300mL的物质的量的浓度为20mmol/L的

人教生物选修一专题2 课题1

专题二课题1 一、选择题 1．菌种鉴定的重要依据是(B) A．细菌的大小、形状和颜色B．菌落的大小、形状、颜色 C．有无鞭毛D．培养基的不同 [解析]不同种类的细菌所形成的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征，所以，每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。单个的细菌用肉眼是看不见的，故细菌的个体特征不能作菌种鉴定的依据。 2．下列生物与灭菌无关的是(C) A．接种前用火焰灼烧接种环B．接种前用酒精擦拭双手 C．将平板倒置，放入培养箱中培养D．接种在酒精灯的火焰旁完成 [解析]接种用具、器皿、空气中都充满了微生物，都有污染的可能，必须严格地消毒灭菌。A、B、D都是实验操作过程中灭菌或防止杂菌污染的措施。将平板倒置，放入培养箱中培养与灭菌无关。 3．下列关于平菇培养的操作程序，正确的是(D) A．配制牛肉膏蛋白胨培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养 B．配制牛肉膏蛋白胨培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养 C．配制棉子壳培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养 D．配制棉子壳培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养 [解析]平菇的代谢类型属于异养型，需要提供现成的有机物才能成长。在题目给出的选项中，B选项是实验中培养细菌等的方法，D选项则是人们常用的培养平菇的方法，为了避免杂菌污染，应在接种前先进行灭菌处理。 4．下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1,2,3,4,5。下列操作方法正确的是(D) A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌 B．划线操作必须在火焰上进行

C．最可能得到所需菌落的区域是1 D．在1,2,3,4,5区域中划线前后都要对接种环灭菌 [解析]操作前要将接种环放在火焰上灼烧灭菌；划线操作必须在火焰旁进行，而不是火焰上；最可能得到所需菌落的区域是5。 5．制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基，关于倒平板的具体描述正确的是(C) ①待培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板 ②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞 ③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰 ④用左手的拇指和食指完全打开皿盖 ⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖 ⑥等待平板冷却5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上 A．①③④⑤B．④⑤⑥ C．③⑤D．①②④⑥ [解析]琼脂是一种多糖，在98℃以上可溶解于水，在45℃以下凝固，倒平板时高于50℃则会烫手，低于50℃时若不能及时操作，琼脂会凝固。无菌操作应贯穿于操作的全过程，皿盖全打开则空气中的微生物会进入培养基。 6．(2017·西宁四中高二月考)下列有关细菌培养的叙述，正确的是(D) A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌 B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长 C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长 D．在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动 [解析]菌落是指单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，形成的一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，所以单个菌落中通常只有一种细菌，A错误；青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成，所以青霉素培养基抑制细菌生长而促进真菌生长，B错误；破伤风杆菌的代谢类型属于异养厌氧型，向其培养基中通入氧气会抑制其生长，C错误；在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动，D正确。 7．平板冷凝后要将平板倒置，其意义是(D) A．利于大肠杆菌的接种B．防止杂菌污染 C．利于培养基的冷却D．防止皿盖冷却水倒流入培养基 [解析]平板倒置可避免凝集在皿盖上的水流入培养基。

高中生物选修一专题2微生物的培养与应用经典练习

高中生物选修一专题2微生物的培养与应用经典练习 1、（2014新课标2,39,15分）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是；然后，将水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是。（3）示意图A和B中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比

静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高的利用率。【答案】 (1)检测培养基平板灭菌是否合格 (2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 (3)B (4)溶解氧营养物质 2、（2014理综，10,11分）有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 ⑴微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是________________________________________。 ⑵与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和________________，这些植物激素一般需要事先单独配制成___________保存备用。 ⑶纯化菌株时，通常使用的划线工具是____________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_________________________________________。

生物选修一专题二练习教材

专题二练习一、选择题 1．微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是（）A．细菌的大小、形状、颜色 B．菌落的大小、形状、颜色 C．有无鞭毛 D．培养基的不同 2．下列4种生物中，哪一种生物的细胞结构与其他3种生物的细胞有明显的区别（）A．酵母菌B．乳酸菌C．青霉菌D．蘑菇 3．下列有关平板划线接种法的操作错误的是（） A．将接种环放在火焰上灼烧 B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液 C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行 D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 4．细菌培养基通常在121℃压力锅中灭菌。如果只有在100℃的温度下将细菌培养基灭菌，以下哪一种生物仍会存活（） A．大肠杆菌B．一种青霉菌 C．枯草芽孢杆菌D．鼠伤寒沙门氏菌 5．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（） A.接种针、手、培养基 B.高压锅、手、接种针 C.培养基、手、接种针 D.接种针、手、高压锅 6．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是（）Ａ．操作顺序为计算、称量、熔化、倒平板、灭菌Ｂ．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯Ｃ．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板Ｄ．待平板冷却凝固约5~10min后将平板倒过来放置 7.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是（） A.培养基分装到培养皿后进行灭菌 B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线 C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养 D.培养过程中每隔一周观察一次 8．获得纯净培养物的关键是（） A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 B.接种纯种细菌 C.适宜环境条件下培养 D.防止外来杂菌的入侵

高中生物选修三专题一试题

高中生物选修三专题一试题篇一：高中生物选修三专题一基因工程知识点专题一基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。（一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

黏性末端：当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 ④对受体细胞无害。（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有

高中生物选修1选修1教学案及专题测试和知识点汇总

选修1基础知识点背诵《果酒和果醋和制作》一、果酒制作 1．原理：菌种，属于核生物，新陈代谢类型，有氧时，呼吸的反应式为：；无氧时，呼吸的反应式为：。 2．条件：繁殖最适温度，酒精发酵一般控制在。（传统发酵技术所使用的酵母菌的来源） 3．菌种来源：???。：。：菌菌种分离获得得纯净的酵母人工培养型酵母菌附着于葡萄皮上的野生自然发酵现在工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，更好地抑制其它微生物的生长，采取的措施是。 4．实验设计流程图挑选葡萄→冲洗→______________→_______________→_______________ ↓ ↓ 果酒果醋 5．根据教材P4操作提示设计实验步骤及装置。充气口作用；排气口作用；出料口作用。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是。使用该装置制酒时，应该关闭；制醋时，应将充气口。 6．实验结果分析与评价：可通过嗅觉和品尝初步鉴定，并用______________检验酒精存在。可观察到的现象为二、果醋的制作： 1．原理：菌种：___________，属于___________核生物，新陈代谢类为_________ 醋酸生成反应式是___________________ _________ 。 2．条件：最适合温度为__________，需要充足的______________。 3．菌种来源：到______________或______________购买。 4．设计实验流程及操作步骤：果酒制成以后，在发酵液中加入______________或醋曲，然后将装置转移至 ______________0C 条件下发酵，适时向发酵液中______________。如果没有充气装置，可以将瓶盖打开，在瓶盖上纱布，以减少空气中尘土污染。三、操作过程应注意的问题（1）为防止发酵液被污染，发酵瓶要用消毒。（2）葡萄汁装入发酵瓶时，要留出大约的空间。（3）制作葡萄酒时将温度严格控制在，时间控制在 d 左右，可通过对发酵的情况进行及时的监测。

高中生物选修一专题1、2重点知识点总结

专题一课题1果酒和果醋的制作 (二）果醋制作的原理 ⑴当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成。 ⑵当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为，再变为。反应式为：。（三）、果酒和果醋的制作过程挑选葡萄冲洗果酒果醋（二）、果酒和果醋的发酵装置 1、装置中的充气口、排气口和出料口分别有哪些作用？ 2、为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接？ 3、发酵瓶为什么要留有1/3的空间？ 4、装置的使用：在进行酒精发酵时应关闭口，在进行果醋发酵时，充气口应连续充气，输入专题一课题 2 腐乳的制作 (一)制作腐乳的实验流程: (二)毛霉的生长: 1.腐乳制作时,温度应控制在 ,并保持一定的湿度。自然条件下毛霉的菌种来自中的。

一、腐乳的制作过程 1、前期发酵——让豆腐上长出毛霉（1）前期发酵的作用是什么？（2）前期发酵的温度为什么为15～18 ℃？ 2、后期发酵——加盐腌制、加卤汤装瓶、密封腌制专题一课题3 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量（二）亚硝酸盐含量的测定 1.原理（1）在条件下，亚硝酸盐与发生反应后，与结合形成色染料。（2）将显色反应后的样品与已知浓度的进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量2.测定方法：比色法3.测定步骤配制溶液→ →制备样品处理液→ 3、制备样品处理液称取泡菜榨汁 →加入蒸馏水、提取液、氢氧化钠过滤→加入氢氧化铝乳液问题2：提取剂、氢氧化钠、氢氧化铝乳液的作用？ 5、测定结果：泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量的变化、发酵时间亚硝酸盐含量 10d

专题2课题1微生物的实验室培养（2）消毒：是指使用的物理或化学方法杀死物体表面或内部的微生物，（不包括和）常用的方法有：、、灭菌：是指使用的理化因素杀死物体内外的微生物。包括芽孢和孢子常用的方法有、、，此外，实验室里还用或进行消毒。三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤： →→→→倒平板四、纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法中最常用的是和。五、菌种的保存为了保持菌种的纯净，需对菌种进行保藏。对于频繁使用的菌种，我们可以采用法；对于需要长期保存的菌种，可以采用法。课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1．尿素只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。土壤中的微生物之所以能分解尿素，是因为它们体内能合成。 2．设置对照：主要目的是排除实验组中因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。如：空白对照组可用来观察是否有杂菌污染。设置完全培养基，用来观察选择培养基是否具有作用。 1．常用来统计样品中活菌数目的方法是。土壤中分解尿素的细菌合成的将尿素分解成，使培养基的增强，PH ,在以尿素为唯一氮源的培养基中加入指示剂，培养细菌后，若PH升高，指示剂将，这样就可以初步鉴定该细菌能够分解尿素。

新人教版高中生物选修1血红蛋白的提取和分离学案

血红蛋白的提取和分离学案 [导学诱思] 1．凝胶色谱法凝胶色谱法也称做，是根据分离蛋白质的有效方法。凝胶实际上是一些由构成的多孔球体，在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同，相对分子质量较小的蛋白质进入凝胶内部的通道，路程，移动速度；而相对分子质量的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在移动，路程，移动速度。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。 2．缓冲溶液缓冲溶液的作用是。缓冲溶液通常由溶解于水中配制而成的。生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，例如：血浆的pH是，要在实验条件下准确模拟生物体内的过程，必须保持体外的pH与体内的基本一致。 3．电泳电泳是指。许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷的电极移动。电泳利用了待分离样品中各分子以及分子本身的、的不同，使带电分子产生不同的，从而实现样品中各种分子的分离。两种常用的电泳方法是和，在测定蛋白质分子量时通常使用。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于以及等因素。 4．蛋白质的提取和分离蛋白质的提取和分离一般分为四步：、、和。5．样品处理血液由和组成，其中红细胞最多。红细胞具有的特点。红细胞中有一种非常重要的蛋白质，其作用是，血红蛋白有个肽链组成，包括，其中每条肽

链环绕一个，磁基团可携带。血红蛋白因含有呈现红色。红细胞的洗涤洗涤红细胞的目的是，采集的血样要及时采用分离红细胞，然后用胶头吸管吸出上层透明的，将下层暗红色的倒入烧杯，再加入，缓慢搅拌，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至，表明红细胞已洗涤干净。血红蛋白的释放在和作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白。分离血红蛋白溶液将搅拌好的混合溶液离心后，试管中的溶液分为4层。第一层为无色透明的，第2层为白色薄层固体，是，第3层是红色透明液体，这是，第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤，除去之溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明液体。透析取1mL的血红蛋白溶液装入中，将透析袋放入盛有300mL的物质的量的浓度为20mmol/L的中，透析12h。透析可以去除样品中的杂质，或用于更换样品的。 6．凝胶色谱操作第一步要制作，第二步要，因为，所以装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需要的凝胶量。在装填凝胶柱时，不得有存在。因为气泡会，降低分离效果。第三步是。 [疑难点拨] 1．凝胶色谱法分离蛋白质的原理凝胶色谱法也称为分配色谱法，它是根据分子量的大小分离蛋白质的方法之一。所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成，小球体内部有许多贯穿的通道，当一个含有各种分子的样品溶液缓慢流经时，各分子在色谱柱内进行两种不同的运动，即垂直向下的运动和无规则的扩散运动，相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量中等的分子后流出，相对分子质量最小的分子最后流出，这种现象又叫分子筛现象。此外，凝胶本身具有三维网状结构，相对

(整理)高中生物选修一专题二过关检测

精品文档专题二单元复习题一、选择题：（25小题，每小题2分，总50分） 1.关于微生物的营养，说法正确的是（） A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源B．凡是碳源都能提供能量 C．除水以外的无机物仅提供无机盐D．无机氮源也能提供能量 2.细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（） A．接种针、手、培养基B．高压锅、手、接种针 C．培养基、手、接种针D．接种针、手、高压锅 3.下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（） A．含碳有机物B．蛋白胨C．含碳无机物D．花生粉饼等天然物质 4.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是（） A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板 D．待平板冷却凝固约5~10min后将平板倒过来放置 5.发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种。消灭杂菌获得纯种的方法不包括（）A．根据微生物对碳源需要的差别，使用不同碳源的培养基 B．根据微生物中缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子 C．根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸 D．根据微生物对抗菌素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素 6.某混合样品微生物R含量极少，要得到大量的R比较理想的方法是采用（） A．天然培养基B．稀释涂布平板法 C．利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基 D．用显微镜直接观察、寻找，再培养 7.不同种类的细菌菌落表现为不同的特征。下列属于菌落特征的是（） ①菌落的大小②菌落的形状③菌落的隆起程度④菌落的颜色⑤菌落的透明度 A．①②③B．②③④C．①③④D．①②③④⑤ 8.在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，下列不属于厌氧细菌生存环境的是（） A．土壤深层B．人或动物体内寄生C．真空D．池塘淤泥 9.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（） A．比实际值高B．比实际值低C．和实际值一致D．比实际值可能高也可能低10.测定土壤中细菌数量一般选104、105、106倍的稀释液进行平板培养；而真菌的数量，一般选用 102、103和104倍稀释，其原因是（） A．细菌个体小，真菌个体大B．细菌易稀释真菌不易稀释 C．细菌在土壤中含量比真菌高D．随机的，没有原因 11.在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是（） A．用液体培养基可获得大量菌体B．纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长 C．用液体培养基可以充分利用培养基中营养物质 D．用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌12.鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成的，这些物质是（） A．指示剂或化学药品B．青霉素或琼脂C．高浓度食盐D．维生素或指示剂 13.蓝藻常利用的碳源、氮源依次为（） A．二氧化碳、氨基酸B．氨基酸、葡萄糖 C．二氧化碳、硝酸盐D．葡萄糖、蛋白胨 14.在温度条件适宜的热带雨林，纤维素分解菌分解落叶的速度是非常快的。关于微生物的代谢速度与高等动、植物相比快得多的下列叙述中错误的是（） A．表面积与体积比很大B．与外界环境物质交换迅速 C．适宜条件下微生物的繁殖速度非常快D．微生物内酶的种类比其他生物多 15.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是（） A.培养基分装到培养皿后进行灭菌 B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线 C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养 D.培养过程中每隔一周观察一次 16.高温灭菌的的原理是（） A．每种微生物生长的最适温度是一定的B．微生物对于高温环境不适应 C．高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动D．高温降低了环境中氧的浓度 17.在斜面培养基上接种时，其正确的操作顺序是（） ①用左手大拇指、食指和无名指夹住在菌种试管和待接种的斜面试管，管口并齐，使斜面向上成水平状态②右手拧松棉塞，但不取下 ③在火焰边用右手无名指和小指夹两个棉塞，将它们取下，同时左腕转动，灼烧管口一周 ④将接种环伸入管内，让环先接触培养基上未长菌的部位，使环冷却，然后轻轻挑取少量菌体 ⑤右手拿接种环，在火焰上灼烧灭菌 ⑥在火焰旁边迅速将沾有菌体的接种环伸到培养基的底部，由里向外轻轻画蛇形细线 ⑦抽出接种环，再用火焰灼烧管口，并在火焰上方将棉塞塞上 A．①②③④⑤⑥⑦B．①②⑤③④⑥⑦C．①③②④⑤⑥⑦D．②③①④⑤⑦⑥ 18.金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下述实验结束后的做法错误的是（） A．对接种环进行灼烧处理B．带菌培养基须经高压蒸气锅灭菌后才能倒掉 C．带菌培养基须经加热后才能倒掉D．接种后双手须经肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦试19.尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养基时（） A．葡萄糖在培养基中含量越多越好B．尿素在培养基中含量越少越好 C．尿素分解菌有固氮能力，故培养基中尿素为无机氮 D．尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮 20.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最接近样品中菌体数真实值的是（） A．菌落数最多的平板B．菌落数量最少的平板 C．菌落数量适中的平板D．取若干个平板菌落数量的平均值 21.以纤维素为唯一碳源筛选出多种具有较高纤维素降解能力的微生物，其中有真菌和细菌，试分析此类微生物在生态系统中的作用与下列哪种生物类似（） A．硝化细菌B．蓝藻C．蚯蚓D．兔子 22．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（） A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

新课标高中生物选修三2.1植物细胞工程导学案

2.1 植物细胞工程一、知识与技能目标 1、简述植物组织培养和体细胞杂交技术，掌握它们的原理、过程及关键环节。 2、了解植物繁殖的新途径及作物新品种的培育的具体方法。二、过程与方法目标 1、尝试进行植物组织培养，运用细胞的基础知识，分析植物细胞工程的理论基础；收集植物细胞工程的相关资料并进行整理、分析、交流。 2、以植物细胞工程的基本技术为基础，弄清楚其在生产实践中的实际应用。三、情感与价值观目标 1、体验植物组织培养技术，讨论植物细胞工程的社会意义及细胞学基础理论与技术开发之间的关系。 2、搜集相关的实际技术应用，积极参加各种技术应用的讨论，体验现代生物科技的新进展带来的社会效益，激发学习生物学的兴趣。四、教学过程 1、植物细胞的基本结构包括、、。 2、植物细胞主要的增殖方式是，细胞分化是指，_______________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________。原因是。 3、全能性是指，已分化的细胞表现为全能性的原因是。 4、织物组织培养就是在和条件下，将培养在上，给予条件，诱导其产生形成完整的植株。 5、植物体细胞杂交就是将细胞在一定条件下融合成，并把它培养成的技术，优点是。 6、生物体可遗传变异类型包括、、。

根据变异类型育种的方法有、、、等。 7、植物的微型繁殖技术指，_____________举例_________________________________________________________。 8、获得脱病毒的植株的方法。 9、神奇的人工种子指。 10、生物育种技术比较技术原理优点缺点诱变育种基因突变提高生物变异的频率，使后代变异频率较快稳定；可大幅度改良某些性状，缩短育种进程盲目性大，需大量处理供试材料杂交育种基因重组使位于不同个体的优良性状，集中于一个个体周期长，难以克服远缘杂交的障碍单倍体育种染色体变异获得个体均为纯种，明显缩短育种年限技术复杂，须与杂交育种配合多倍体育种染色体变异器官大，提高产量和营养成分适用于植物，动物方面难以开展基因工程育种分子遗传学原理打破物种界限，定向地改造生物遗传性状细胞工程育种细胞生物学和分子生物学原理克服远缘杂交不亲和的障碍；扩大了用于杂交的亲本组合范围；定向改变生物遗传性状不能按人们的需要表现出亲代的优良性状

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