检验科三基问答题

第一章 质量管理

1． 有一实验室某次室间质评5个批号氯的靶值分别为110.3 mmol/L 、95.6 mmol/L 、125.4 mmol/L 、

90.2 mmol/L 、135.0mmol/L, 测定结果分别是115.3 mmol/L 、99.2 mmol/L 、131.2 mmol/L 、94.1 mmol/L 、

142.3mmol/L, 请计算出该实验室本次室间质评氯的得分，并对质评成绩作一简要分析。（氯的PT 方

案质量要求是靶值±5%）

（1）根据氯的质量要求是靶值±5%，分别求出各批号的可接受范围为104.8～115.8、90.8～100.4、119.1～

131.7、85.7～94.7、128.3～141.8；

（2）将测定结果与此一一比较，得出4个可接受结果，1个不可接受结果；

（3）根据得分=该项目的测定样本数

该项目的可接受结果数

×100%得 氯的得分=54×100%=80%

分析：本次室间质评氯的评分达到80%可接受成绩，为基本满意的EQA 成绩，但是有一个样品的测定结果

落在允许范围以外，结果偏高，观察所有结果，与靶值比较都有一定程度的正偏差，可能氯的测定

存在系统误差，应引起注意，并采取措施加以纠正。

2．某一丙肝抗体检测试剂盒检测结果见下表：

有病人数 无病人数 合计 试剂盒检测

阳性 90 5 95

阴性

10 95 105 合计 100 100 200 请分别求出该试剂盒的敏感性、特异性、阳性预期值、阴性预期值、诊断效率。

答案：计算：（1）敏感性=90/100=90%

（2）特异性=95/100=95%

（3）阳性预期值=90/95=94.7%

（4）阴性预期值=95/105=90.5%

（5）诊断效率=（90+95）/200=92.5%%

3．请简述实验室生物安全管理措施。

答案：实验室生物安全管理是当操作具有潜在感染力的微生物时，为了防止实验人员的感染因素的外泄，

采取恰当的实验室操作和实验程序，使用一定的实验室安全装备，对实验室的设施及结构提出特定要求，

并将上述诸因素综合起来进行应用的过程。根据所操作病原体的不同，实验室的生物安全水平可分为1～4

级，分别采用不同的感染控制措施

4．请你结合实际谈谈如何做好仪器的管理和维护。

5．结合本人所在岗位，以某一检测项目为例，简要试述室内质控步骤。

第二章 临床基础检验试题

1、手工显微镜计数红细胞已不常用，但为什么仍不能被淘汰?

1.手工显微镜法是传统的红细胞计数法，不需要特殊设备，但比仪器法费时，现虽已不常用，但仍作为血液分析仪的校正。

2、简述血沉测定的方法学评价。

2.(1)手工法包括魏氏法、潘氏法等，魏氏法简便实用，ICSH推荐为血沉测定的参比方法；潘氏法与魏氏法测定相关性较好，采用手指采血，用血量少，尤其适用于儿童，但易混入组织液，目前已很少使用。手工法只能测定血沉某个时刻的最终结果，特异性差，其应用有很大的局限性。(2)血沉仪可动态记录整个血沉过程的变化，描绘出红细胞沉降的曲线，反映了不同疾病或疾病不同阶段，血沉3个沉降阶段所存在的差异，为临床分析血沉测定结果提供了新的手段。

3、白细胞分类计数质量控制中应注意哪些影响因素?

(1)影响分类计数准确性的因素：主要是细胞在涂片中的分布不均和观察者对细胞辨认的差异。(2)影响分类计数精确性的因素。(3)影响涂片染色效果的因素。(4)白细胞分类计数的参考方法：EDTA-K3抗凝静脉血，人工制成血涂片，以Romanowaky液进行染色，使用“城墙式”移动法，油镜下分类计数200个白细胞。当其他分类法与此法作为标准进行比较时，需要4个熟练检验人员对同一张涂片各计数200个白细胞(即总数为800个细胞)后，求出平均值来作为各类白细胞的靶值。

4、嗜酸性粒细胞升高的临床意义是什么?

4.嗜酸性粒细胞增多指成人外周血嗜酸性粒细胞>0.5×109／L。引起嗜酸性粒细胞增多的原因包括：(1)寄生虫病是最常见的病因。(2)变态反应性疾病是仅次于寄生虫病的另一主要病因，见于支气管哮喘、坏死性血管炎、药物过敏反应等。(3)皮肤病，如湿疹等。(4)血液病，如慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症、多发性骨髓瘤、脾切除术后、嗜酸性粒细胞白血病、霍奇金病。(5)某些恶性肿瘤，如肺癌。(6)某些传染病，如猩红热急性期。(7)其他，如风湿性疾病、脑垂体前叶功能减低症等。(8)高嗜酸性粒细胞综合征。

5、电阻抗法血液分析仪进行血细胞计数的检测原理是什么?

5.根据血细胞相对非导电的性质，悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒在通过计数小孔时可引起电阻的变化，于是瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信号。脉冲信号变化的程度取决于非导电性细胞体积的大小，细胞体积越大产生的脉冲振幅越高，记录脉冲的数量就可测定细胞的数量。这些脉冲信号经过放大、阈值调节、甄别、整形、计数及自动控制保护系统，最终可打印出数据报告。

6、试述血红蛋白测定的主要方法及其方法学评价。

(1)氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)为国际标准参考方法。操作简单、显色快且结果稳定可靠，可检测除SHb 外的各种血红蛋白。KCN有剧毒，且存在高白细胞和高球蛋白血症可致试剂混浊，以及HbCO转化较慢等问题(2)十二烷基硫酸钠(SDS)血红蛋白测定法可替代HiCN法。SDS与Hb作用(除SHb外)，生成SDS-Hb棕红色化合物，其吸收峰在538nm，SDS可用HiCN法定的抗凝血或溶血液，制备标准工作曲线。本法操作简单，呈色稳定，准确性和精确性符合要求，且无公害，为次选方法。SDS本身质量差异较大，且破坏白细胞，不适用于同时有白细胞计数和Hb测定的血细胞分析仪上使用。(3)叠氮高铁血红蛋白(HiN3)测定法具有与HiCN测定法相似的优点，显色快而稳定，试剂毒性仅为HiCN的1／7，但仍存在公害问题。(4)碱羟血红蛋白(AHD575)

测定法，试剂简单，不含有毒剂，呈色稳定，可用氯化血红素作标准品。但此法在血液分析仪中的应用受限。 (5)多参数血液分析仪测Hb已逐步取代手工法，操作简单、快速，同时可以获得多项红细胞的参数。其测定原理多采用HiCN法，但由于各型号仪器使用的溶血剂不同，形成Hb的衍生物不同。仪器要经过HiCN 标准液校正后，才能进行Hb测定。

7、网织红细胞检测的临床意义是什么?

网织红细胞计数(Ret)是反映骨髓造血功能的重要指标。 (1)判断骨髓增生能力，判断贫血类型：①网织红细胞增多：表示骨髓造血功能旺盛。常见于溶血性贫血(尤其急性溶血)、急性失血；造血恢复期可见Ret 短暂和迅速增高，是骨髓功能恢复较敏感的指标；②网织红细胞减少：表示骨髓造血功能低下，见于再生障碍性贫血、溶血性贫血、自身免疫性溶血性贫血危象。典型再生障碍性贫血，网织红细胞计数常低于0.005，网织红细胞绝对值低于15 ×109／L，为其诊断标准之一。(2)评价疗效，判断病情变化： Ret是贫血患者随访检查的项目之一。(3)骨髓移植后监测骨髓造血恢复。

8、血沉变化的的临床意义是什么?

(1)生理性增快：女性高于男性。妇女月经期、妊娠3个月以上，以及老年人血沉常增快。(2)病理性增快可见于：①各种炎症：感染是血沉加快最常见的原因，如急性细菌性感染；结核病、结缔组织炎症、风湿热等慢性炎症于活动期血沉增快，病情好转时血沉减慢，故血沉(ESR)可动态观察病情变化。②组织损伤及坏死：见于较大范围组织损伤或手术创伤。心肌梗死时血沉增快，而心绞痛时血沉多正常，可作为两者鉴别指标。③恶性肿瘤血沉增快，而良性肿瘤血沉多正常。④高球蛋白血症。⑤贫血。⑥高胆固醇血症。(3)

血沉减慢：临床意义较小，主要见于红细胞明显增多、纤维蛋白原含量严重减低时。血沉是较为常用而缺乏特异性的指标，血沉常作为疾病是否活动的监测指标。

9、试述中性粒细胞病理变化的临床意义。

(1)中性粒细胞增多：指分叶核粒细胞超过70％，绝对值>7×109／L。①急性感染或炎症是最常见的原因，以中性粒细胞为主。尤其是化脓性球菌感染。其增高程度与病原体种类、感染部位和程度以及机体的反应

性等有关。②广泛组织损伤或坏死和急性溶血，如严重烧伤、心梗等均可见白细胞增多，以中性粒细胞为主。③急性失血，白细胞迅速增多，以中性粒细胞为主。。④急性中毒。⑤恶性肿瘤、白血病，急性白血病以幼稚白血病细胞增多为主。慢性白血病以成熟的白血病细胞增高为主。

10、为什么血细胞分析仪对白细胞的分类结果只能作为筛检试验？

10.1）三分群血液分析仪用阻抗法的原理，依据白细胞的体积的大小，人为地将白细胞分成三群，这种分类不够准确。

2）五分类的血细胞分析仪联合应用光学和电学等技术的仪器，检测同一血细胞的体积、细胞核形状及胞质中颗粒，在综合分析后作出白细胞分类，这种检测分类法虽然较电阻抗法高，但仍不能满足临床检出异常细胞的需要。

3）各类型的血液分析仪尚不具有识别红细胞、白细胞核、血小板的能力，仍不能检出白细胞形态的病理性变化，特别是对幼稚细胞的检测。而显微镜能根据血细胞与染色液特异性的结合，根据血涂片上细胞的体积、细胞核形状及胞质中颗粒等着色情况，进行综合分析并能识别异常和幼稚细胞，因此，血细胞分析仪只能作为健康人血液一般检验的筛检之用。

11、试述尿液常规分析的临床价值。

11. 1）泌尿系统疾病的诊断与疗效观察

泌尿系统的炎症、结石、肿瘤、血管病变及肾移植术后发生排异反应时，各种病变产物直接进入尿中，引起尿液成分变化，因此尿液分析是泌尿系统疾病诊断与疗效观察的首选项目。

2）其他系统疾病的诊断

尿液来自血液，其成分又与机体代谢有密切关系，故任何系统疾病的病变影响血液成分改变时，均能引起尿液成分的变化,因此可通过尿液分析协助临床诊断。

3）安全用药的监护

某些药物如庆大霉素、卡那霉素、多粘菌素B与磺胺类药等常可引起肾损害，故用药前及用药过程中需观察尿液的变化，以确保用药安全。

4）职业病的辅助诊断

铅、镉、铋、汞等均可引起肾损害，尿中此类重金属排出量增多，对职业病的诊断及预防有一定意义。5）对人体健康状态的评估

对人群进行尿液分析，可筛查有无肾肝、胆疾病和糖尿病，以达早期诊断及预防疾病的目的。

12、试述粪便隐血试验的临床意义。

粪便隐血检查对消化道出血的诊断有重要价值。消化性溃疡、药物致胃粘膜损伤(如服用阿司匹林、消炎痛、糖皮质激素等)、肠结核、克罗恩(Crohn)病、溃疡性结肠炎、结肠息肉、钩虫病及胃癌、结肠癌等消化道肿瘤时，粪便隐血试验均常为阳性。故须结合临床其他资料进行鉴别诊断。在消化性溃疡时，阳性率为40%～70%，呈间断性阳性。消化性溃疡治疗后当粪便外观正常时，隐血试验阳性仍可持续5—7天，此后如出血完全停止，隐血试验即可转阴。消化道癌症时，阳性率可达95％，呈持续阳性，故粪便隐血试验常作为消化道恶性肿瘤诊断的一个筛选指标。尤其对中老年人早期发现消化道恶性肿瘤有重要价值。此外在流行性出血热患者的粪便中隐血试验也有84％的阳性率，可作为该病的重要佐证。

13、试述尿HCG金标法测试原理。

13. 在纤维素膜的特定位置，分别包被单抗鼠IgG抗体(对照线)，单抗人HCG抗体(测定线)，呈上下排列，另外，试带上还含有均匀分布的胶体金标记人β-HCG单抗、胶体金标记的鼠IgG抗原。

检测时因层吸作用尿液中的HCG与胶体金标记的人β-HCG单抗结合，移至测定线，形成金标记β-HCG单抗—β-HCG抗原一单抗人HCG抗体的双抗体夹心式复合物，测试线呈现紫红色。同时金标记鼠IgG抗原随尿上行至单抗鼠IgG抗体时，形成金标记鼠IgG抗原与单抗鼠IgG抗体复合物，对照线呈紫红色。

第三章血液学检验试题

1简述血细胞发育过程中的形态演变规律。

胞体由大到小，但原始细胞比早幼粒细胞小，巨核细胞由小到大，核浆比例由大到小；胞核由大到小，成熟红细胞胞核消失；核形由圆到凹陷到分叶，有的细胞可不分叶；核染色质结构由细致疏松到粗糙紧密，核染色质颜色由淡紫色到深紫色；核膜由不明显到明显；核仁由显著可见到无，胞质量由少到多，胞质颜色由蓝到红或由深蓝到浅蓝；胞质颗粒由无到有；红细胞在成熟过程中，胞质不会出现颗粒。

2简述再障的骨髓病理学特点。

骨髓增生减退，造血组织与脂肪组织的容积百分比降低，脂肪细胞与基质增多。粒、红、巨核系细胞均减少，淋巴细胞增多。间质内浆细胞、肥大细胞、网状细胞等非造血细胞增多，并可有间质水肿、出血甚至液性脂肪坏死。

3再障的诊断标准是什么？

①全血细胞减少，网织红细胞绝对值减少;②一般无肝脾肿大;③骨髓至少1个部位增生减低或重度减低,骨髓小粒非造血细胞增多;④除外引起全血细胞减少的其他疾病，如PNH、MDS-RA、急性造血功能停滞等;

⑤一般抗贫血药物治疗无效。

4简述溶血性贫血的共性改变。

①一般贫血实验室表现，正常细胞性贫血，网织红一般增高，血片中有特殊形态的红细胞，类白血病反应。

骨髓有核细胞显著增多，粒红比例倒置。②血红蛋白的释放③胆红素代谢异常④红细胞寿

命缩短。

5如何鉴别慢性粒细胞白血病与骨髓纤维化。

慢粒骨髓纤维化

发热常见急变期不常见

贫血明显不一致

脾肿大更明显明显

血象

异形红细胞不明显明显，见泪滴红细胞

白细胞计数增多正常、减少或增多

有核红细胞无或少见常见

NAP 降低或0，急变可增高正常、增多或减少

骨髓涂片以中幼、晚幼、杆状粒细胞增殖多为干抽

骨髓活检粒系增殖与脂肪组织取代一致为纤维组织取代，有新骨髓组织形成、巨核

细胞增多

Ph染色体90%为阳性阴性

BCR/ABL融合基因阳性阴性

6简述凝血过程的三个阶段。

第一阶段为血液凝血活酶的形成，第二阶段为凝血酶的形成，第三阶段为纤维蛋白的形成。第一阶段有内源性和外源性凝血系统两个途径。外源性凝血系统是由于血管壁或组织损伤后释放因子Ⅲ，因子Ⅶ、钙离子形成复合物，促使因子Ⅹ活化，然后形成凝血活酶。内源性凝血系统是通过固相和液相激活因子Ⅻ，然后是Ⅸ-Ⅷ-Ca-PF3复合物形成，从而促使因子Ⅹ活化，形成凝血活酶

7如何早期诊断DIC。

①存在可引起DIC的病因，如感染、创伤、肿瘤等。②有两种以上的下列临床表现：反复、严重或广泛的出血；不明原因或难以纠正的休克；出现反映肺、脑、肝、肾等器官栓塞的症状和体征；原来疾病不可解释的溶血现象。③实验室检查符合以下表现：血小板减少或进行性下降，Fg含量减少，3P实验阳性或D-二聚体升高。PT缩短或较正常对照延长三秒以上。

8简述骨髓检查的适应证。

①外周血细胞数量、成分及形态异常②不明原因的发热、肝肿大、脾肿大、淋巴结肿大。③不明原因的骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜、血沉明显加快。④恶性血液病化疗后的疗效观察。⑤其他：骨髓活检、骨髓细胞培养、微生物学及寄生虫学检查等

9如何鉴别红白血病和巨幼细胞贫血？

红白血病巨幼细胞贫血

巨幼性改变

细胞形态类巨幼红细胞典型巨幼红细胞

细胞大小大小相差悬殊大而比较一致

核质发育质落后于核/ 核落后于质核落后于质

核染色质粗细不均，排列紊乱细致、排列疏松

副幼红细胞变明显极少见

有核红细胞PAS反应阳性阴性

早期幼粒细胞增生多见极少见

巨核细胞减少明显不明显

10血小板在止血过程中的作用是什么？

①血小板能维持正常血管壁的完整性，使其通透性减低。②通过粘附、聚集和释放反应在创口处形成血小板栓子。③释放各种血小板因子参与血液凝固，其中PF3最重要。④释放止血物质TXA2，使血小板进一步收缩。⑤释放血小板收缩蛋白，使血块收缩，有利于止血。

11何为急性白血病M4型？其亚型如何划分？

M4为粒-单核细胞白血病，按粒细胞、单核细胞的比例，形态不同分为四个亚型：①M4a：以原始及早幼粒细胞白血病增生为主。单核细胞系统细胞总数＞20%（NEC）。②M4b：以原、幼单核细胞增生为主，原粒细胞+早幼粒细胞＞20%（NEC）。③M4c；具有粒系又具有单核系特征的原始细胞＞30%（NEC）。④M4E O；除上述特征外，还有颗粒粗大且圆、着色较深的嗜酸性粒细胞，占5%~30%。

12何为造血干细胞？它具备哪些特征？

造血干细胞是一种具有自身复制能力的细胞，必须具备：①有分裂能力；一个干细胞在经过一个细胞周期活动哟后可生成两个与分裂前性质相同的干细胞，这就是干细胞自身复制的特性。由于它有自身复制能力，所以能保持本细胞库数的恒定。②有分化为更成熟细胞的能力：即具有向骨髓多系细胞分化的能力。造血干细胞既能自身复制，经常维持一定的数量，又能分化为使多系细胞相对稳定。概括上述，血细胞来源于骨髓的造血多能干细胞，多能干细胞能分化为多系统的定向干细胞，然后经过原始、幼稚各阶段，而后成熟为多种血细胞。

13试举例说明急性白血病的MICM分型。

M(形态学)I(免疫学)C(细胞化学)M(分子生物学)，以急性早幼粒细胞白血病（M3）为例，Hb和RBC轻中度减少白细胞不定，分类以异常早幼粒为主，Auer小体易见。骨髓象以颗粒增多的异常早幼粒增生为主，≥30%（NEC）,早幼与原粒之比＞3:1，异常早幼粒胞核大小不一，胞质中有大小不等颗粒，可见束状Auer小体；POX(+)，CD13/CD33(+),CD34/HLA-DR(--)；t(15:17)(q22:q12)形成PML/RARa融合基因。

14试述血栓形成机制。

①血管壁损伤；局部内皮细胞抗血栓形成活性减弱或丧失，使血栓形成的内皮下成分暴露，促使血小板粘附、聚集和释放，激活内源性、外源性凝血途径，局部形成纤维蛋白的凝块或血栓，同时激肽的生成和血小板释放的血管壁通透性因子使血管壁通透性增加，利于血栓形成。②血液成分改变：血小板数量过多与功能亢进，血液凝固性增高。纤溶活性减低及白细胞等均利于血栓形成。③血流瘀滞：血流缓慢、停滞与涡流均可导致血栓形成、血黏度增高，利于血小板粘附、聚集，利于血栓形成

15试述原发性纤溶亢进与DIC继发性纤溶的鉴别要点。

原发性纤溶DIC继发性纤溶

血小板正常下降

β-TG 正常升高

PF4 正常升高

GMP-140 正常升高

F1+2 正常升高

FPA 正常升高

SFMC 正常升高

PCP 正常升高

D二聚体正常升高

Bβ1~42肽升高正常

Bβ15~42肽正常升高

16试举例说明为什么分析骨髓象必须常规分析血象。

①骨髓象相似而血象有区别，如类白血病反应，其骨髓象与慢粒相似，但血中的白细胞增多不及慢粒显著。

②骨髓象有区别而血象相似，如传染性淋巴细胞增多症和慢粒时时血象都有小淋巴细胞增多，但骨髓象显示前者淋巴细胞稍增多而后者显著增多。③骨髓象变化不显著而血象有显著异常，如传染性淋巴细胞增多症，其骨髓象中的异形淋巴细胞远不及血象中明显。④骨髓象有显著异常而血象变化不显著，如多发性骨髓瘤，骨髓中可见特异性骨髓瘤细胞，而血象甚少见到。⑤骨髓象细胞难辨认，如白血病，血象中白血病细胞的分化程度较骨髓象为好，也较骨髓象容易辨认。

17如何鉴别类白血病反应和白血病？

类白血病反应白血病

明确病因有无

临床表现原发病症状常明显贫血、出血、发热和肝

脾肿大等、白血病细胞浸血象

白细胞计数中度增加＜100×109/L 一般增多，可100~200×109/L

不成熟白细胞幼稚细胞5%~15%原始细胞1%~5% 很常见，在30%以上

白细胞形态感染病例见中毒颗粒及空泡常有细胞畸形，可见Auer小体嗜碱

性粒细胞不增多慢粒常增多

红细胞无明显变化减少且为进行性，并可出现幼红细胞

血小板正常或增加除慢粒早期外均减少

NAP 显著增加粒细胞白血病显著减少骨髓象白细胞系增加，核左移，极度增生，

但很少达到白血病程度并有大量原始及幼稚细胞

Ph染色体无90%慢粒阳性，急粒、急单偶见

病理检查无器官和组织白血病细胞浸润有器官和组织白血病细胞浸润

治疗反应解除原发病迅速恢复疗效差

18列举5例引起外周血全血细胞减少的血液病，主要的鉴别指征？

①血红蛋白再生障碍性贫血，骨髓有核细胞增生低下，淋巴细胞比例相对增高，粒、红、巨核三系增生减低。活检示造血组织减少，脂肪组织增加。②PNH；Ham实验和蔗糖溶血实验呈阳性反应。③MDS：骨髓象中可见至少一系的病态造血。④非白血性白血病：骨髓象中可见大量原始细胞和幼稚细胞。⑤恶性组织细胞病：骨髓象中可见恶性组织细胞。

19传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症和急性淋巴细胞白血病有何不同？请分别描述病态造血时粒、红、巨三系有何变化？

传染性单核细胞增多症急性淋巴细胞白血病传染性淋巴细胞增多症发热常持续1~3周持续不规则发热无或短暂发热

淋巴结肿大有有无

脾肿大25%~75%有有无

传染性小无大

白细胞计数中等度增高从减少到极度增高显著增高

有诊断价值的细胞异形淋巴细胞原淋、幼淋细胞正常成熟小淋巴细胞

贫血无有无

血小板减少一般无有无

骨髓象有异形淋巴细胞原淋+幼淋显著增多正常小淋巴细胞增多

嗜异性凝集试验阳性阴性阴性

预后良好不良良好

20

红系粒系巨核系

骨髓过多或过少核分叶过多或过少小巨核细胞

巨幼样变Pelger样核异常多个圆形巨核

幼红细胞多核颗粒过多或过少单圆核巨核

核可畸形、分叶、碎裂成熟细胞质嗜碱

环形铁粒幼细胞双核或畸形核中幼粒细胞

外周血有核红细胞幼稚细胞或原始细胞巨大血小板

巨大红细胞其他同骨髓小巨核细胞

异形红细胞

第四章输血（血库）

1．输注全血有哪些缺点

①全血中含有白细胞、血小板和血浆蛋白，可以使受血者产生抗体，再输血时，可发生输血反应。

②由于血浆存在，全血容量较大，对老年人和儿童可引起循环超负荷，发生心力衰竭。

③全血的血浆中可能含有较高浓度的枸橼酸钠、钾和氨等，易发生代谢性碱中毒。

2．ABO定型试验中常要注意哪些问题

⑴ ABO亚型：红细胞上的A或B抗原很弱，只作正定型时可导致血型误定

⑵抗A、抗B定型血清质量差，对弱的A或B抗原漏检（假阴性）

⑶受检血清中存在不规则抗体。

⑷红细胞有多凝集现象

⑸某些疾病，如低丙种球蛋白血症等，导致反定型时血清中抗体漏检（假阴性）。

3．抗球蛋白配血法中，阳性对照、阴性对照和盐水对照的操作步骤是什么？结果如何判定？

1．取试管2支，分别标明主侧和次侧，主侧管加受血者血清2滴和供血者5%红细胞盐水悬液1滴；次侧管加供血者血清2滴和受血者5%红细胞悬液1滴。

2．混和，置37℃水浴致敏1小时，取出后用盐水离心洗涤红细胞3次，倾去上清液。

3．加最适稀释度抗球蛋白血清1滴，混匀，1000rpm离心1分钟，观察结果。

4．阳性对照：5%不完全抗D致敏的Rh阳性红细胞悬液1滴，加抗球蛋白血清1滴。

阴性对照：5%O型红细胞悬液1滴，加抗球蛋白血清1滴。

盐水对照：①供血者5%红细胞盐水悬液1滴加生理盐水1滴；②受血者5%

红细胞盐水悬液1滴加生理盐水1滴。

5. 结果判定：如阳性对照管凝集，阴性对照管、盐水对照管不凝集，主侧、次侧配血管都不凝集，表示

无输血禁忌

第五章临床生物化学检验

1．血糖的来源与去路。

血糖的来源：（1）肝糖原分解；（2）食物经消化吸收的葡萄糖；（3）糖异生。

血糖的去路：（1）氧化供能；（2）合成糖原；（3）转变为脂肪及某些非必须氨基酸；（4）转变为其他糖类物质。

2．根据米-曼氏方程计算，当[S]是Km的5倍时，反应速度ν相当于最大速度V max 的多少？

根据公式ν=V max[S] /（Km + [S]）当[S]=5 Km时ν= 83﹪V max

3．说明高氨血症导致肝昏迷的生化基础。

高氨血症时，脑中发生的反应为

氨+α-酮戊二酸→谷氨酸

氨+谷氨酸→谷氨酰胺

脑内α-酮戊二酸减少导致了三羧酸循环减弱，从而使ATP生成减少，脑组织供能缺乏表现昏迷。

4.体内胆红素可来源于何种代谢途径?

4.(1)体内胆红素大部分由衰老红细胞破坏降解而来。血红蛋白破坏后亚铁血红素经代谢转变成胆红素,约占75%。

(2)体内胆红素小部分来自组织(特别是肝细胞)中非血红蛋白的血红素蛋白质(如细胞色素P450、细胞色素b5,过氧化氢酶等)的血红素辅基的分解。

(3)极小部分由造血过程中血红素的少量分解,即无效造血所产生。

5.简述肝功能检查及其意义?

肝功能检查及其意义如下:(1)胆红素代谢检查了解其有无黄疸、黄疸的程度并鉴定其类型。(2)蛋白质代谢检查了解肝细胞合成蛋白质的能力。(3)酶类测定了解肝细胞受损的程度。(4)反映肝内外胆汁淤滞的检查。

(5)反映肝纤维化程度的检查。(6)反映肝占位性病变的检查。(7)免疫功能检查以确定肝炎类型。(8)输血后肝炎检查。

6.试述APOAI,APOB测定的临床意义?

APO作为脂类载体直接与脂类代谢APOAI测定可直接反映HDL和LDL水平,APOAI含量与HDL含量正相关,与冠心病和动脉硬化的发生呈负相关,APOAI越高对人体越有益,而APOB则相反,其水平越高意味着LDL越高患冠心病危险越大,APOAI下降和APOB增高见于冠心病,还见于未控制的糖尿病、肾病综合征、活动肝炎、营养不良等,冠心病的优选指标是APOB,其增高比HDL-CH降低和Tch升高更有意义,脑血管病以HDL-CH，APOAI下降更明显。

7. 肌钙蛋白是反映哪个器官损伤的标志物?有何临床意义?

肌钙蛋白(Tn)是心肌组织的一种特有的调节蛋白,严重心肌缺损时释放入血,是反映心肌损伤的血清标志物。肌钙蛋白以三种球型亚基组成,即TnT、TnI和TnC,分子量依次减小。其含量与年龄、性别、梗塞部位及溶栓药物种类等无关

8.尿中微量蛋白的检测对诊断早期肾损伤有什么意义?

蛋白尿是肾脏疾病的一个重要指标。在某些肾脏病早期,尿常规测定常为阴性,尿中蛋白质含量实际已有微量的增加(20～200mg/L)。若早期发现肾脏损害疾病如糖尿病肾损害等,必须做一些尿中微量蛋白的检测,以监测肾脏以及其他器官的功能状态,提供可靠的生化指标。

9.简述电泳的工作原理。

溶液中带电粒子在直流电场中向电性相反的方向移动的现象称为电泳。蛋白质、核酸与生物大分子具有两性电离及各自等电点(pI)。在pH相同条件下这些生物分子将会有带不同量的电荷。如果要分离一组等电点

不同的蛋白质,只要选择一个合适pH,使多种蛋白质在该pH的净电荷差异最大,即可用此电泳方法检查得到满意的分离效果。

10. 简述光谱吸收法的原理和朗伯-比尔定律。

光谱吸收法是指利用各种化学物质所具有的吸收光谱的特性，来确定其性质﹑结构和含量的方法。朗伯-

比尔定律：A=kbc, 其中k是吸光系数，b是比色杯光径，c为溶液浓度。C为1mol/L, b 为1cm时，则系数k为摩尔吸光系数，以ε表示，单位为L/(mol.cm)。

11. 何为连续监测法？其特点是什么？

连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间变化的多点数据，求出酶反应初速度，间接计算酶活性浓度的方法称连续监测法

12. 何为电极法？表示电极法的基本公式是什么？

利用电极、电位和物质浓度之间的关系来确定物质含量的分析方法称为电极法。表示电极法的基本公式是能斯特方程式

13.自动生化分析仪性能评价指标主要有哪些？

自动生化分析仪常用性能指标有精密度、波长准确性、相关性、取样量和最小反应体积及携带污染情况等

14.简述干化学法原理。

干化学法是以被测样本中存在的液体为反应介质（液体中的水溶解了试纸条上的试剂），被测成分直接与固化于载体上的干试剂反应的一种方式。

第六章微生物学检验

1.有那些特殊的结构？它们在医学上有何实际意义？

细菌的特殊结构有

a．荚膜许多细菌胞壁外围绕一层较厚的粘性、胶冻样物质，称为荚膜。

b．鞭毛某些细菌体表面附着有细长呈波状弯曲的丝状物，称为鞭毛，是细菌的运动器官。

c．菌毛一些细菌菌体表面遍布着短而细直的蛋白质丝状物，称为菌毛，与细菌的致病性有关。

d.芽胞某些细菌在一定环境条件下，细胞质脱水浓缩，在菌体内形成一个折光性强的圆形或卵圆形小体，称为芽胞。芽孢对外界的抵抗力增强，不易被杀灭。

2．常见的细菌变异现象有哪些？有何实际意义？

1．常见的细菌变异现象有非遗传性（表型性）改变和遗传性（基因型）变异。

其意义为：表型性改变，是指当外界环境条件发生改变时所引起的细菌某一性状的改变。当条件回复，可恢复原来的性状，不遗传给后代。常见的有：形态结构的改变，细菌形态的改变，毒力的改变。

基因型变异，是细菌自身遗传物质（细菌染色体、质粒）发生改变而引起的变异。新获得的性状可以稳定地传给后代。

3．外毒素和内毒素有哪些主要的区别？

答：外毒素是某些细菌在代谢过程中产生并分泌到菌体外的毒性物质。主要由革兰阳性菌产生，少数革兰阴性菌也能产生。外毒素的化学成分是蛋白质，性质不稳定，易被热、酸及酶破坏；外毒素的毒性作用强；不同细菌产生的外毒素对人体组织有选择性的毒性作用，引起特殊病变。外毒素有较强的抗原性，经甲醛处理可脱去毒性，但仍保留抗原性，成为类毒素，类毒素可刺激机体产生相应的抗毒素，用于人工自动免疫；内毒素是革兰阴性杆菌细胞壁中的脂多糖成分，只有当菌体死亡裂解或用人工方法裂解细菌后才释放出来。内毒素对机体组织的毒性作用选择性不强，引起的病理变化和临床症状基本相同

4、正常菌群一般不引起人体感染，请问在什么情况下可发生感染？

当病人免疫功能下降，体内微生态环境失衡或发生细菌易位时，即可发生感染。

5、头孢菌素类抗生素，是否第四代头孢就一定比第一代头孢抗菌效果好，为什么？

不一定，要看对什么细菌而言。如一代头孢菌素对革兰阳性菌抗菌效果要好于第四代头孢菌素，而四代头孢菌素对革兰阴性菌抗菌能力则强于一代头孢菌素。

6、药敏试验时常报告“中介”结果，你知道其临床意义吗？

中介是介于敏感和耐药之间的一个实验缓种区域，有二层意义；一是反映在操作中可能因控制不好出现的结果有误，应重复试验或改做MIC。二是提示高于正常给药或在某些生理药物浓集的部位（如尿液中喹诺酮类）时细菌可被抑制

7. 简述用细菌制片和进行革兰染色的基本步骤。

制片：取生理盐水一滴，置玻片上，用接种环挑取菌落，将细菌放在生理盐水内研匀成薄的菌膜后，自然干燥，并经火焰固定。

染色：（1）初染加结晶紫染于涂片上，染1min后，用水洗去染液。（2）媒染加碘液染1min，水洗。（3）脱色加95%乙醇，不时摇动约30s，至无紫色脱落为止，水洗。（4）复染加稀释石炭酸复红染30s，水洗，干后镜检

8. 简述甲基红试验的原理。

某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸, 并进一步分解丙酮酸产生甲酸、乙酸、乳酸等使PH下降至4.5

以下, 加入甲基红试剂后呈红色, 为阳性。若分解葡萄糖产酸量少, 或产生的酸进一步分解为其他非酸性物质, 则PH在6.2以上, 加入甲基红试剂后呈黄色, 为阴性。

9. 简述金黄色葡萄球菌的最低鉴定特征。

(1)革兰阳性球菌, 呈葡萄串状排列;

(2)血平板上产生透明溶血环;

(3)触酶试验阳性;

(4)血浆凝固酶试验阳性;

10. 简述细菌鉴定的基本思路。

细菌鉴定的基本思路是首先进行革兰染色以区分细菌的基本形态和革兰染色性。根据形态和染色性的不同做一些大的分类试验，如革兰阴性杆菌做氧化酶试验，革兰阳性球菌做触酶试验，其后再进行不同的生化试验，必要时进一步进行血清学试验。

11. 请叙述血液感染的细菌学检验程序。

无菌采集血液标本→增菌培养（需氧或厌氧培养）→有菌生长取其菌落

具体步骤：(1)涂片、染色、镜检

（2)直接药敏试验→初级报告

(3)分离培养→观察菌落，取菌落涂片、染色、镜检。纯培养→血清学鉴定、生化鉴定、药敏

试验→出示报告。

第七章免疫学检验

1．比较补体两条主要激活途径的不同点。

答案：表1 两条激活途径的主要不同点

C C

C C

2．补体的生物学活性是什么？

答案：补体的生物学活性是指补体活化过程的产物表现出的具有扩大免疫效应的多项生

物学活性，根据这些产物的活性特点可分为五类。

(1)细胞溶解作用即膜攻击作用新生的C5b可插入就近的细胞膜上，进而有C6、C7、

和C9与膜上有C5b组成膜攻击单位C5b·6·7·8·9n，构成可让细胞膜内外物质自由出入的通道壁，造成细胞或细菌的破裂死亡。

(2)调理作用与病原体或免疫复合物共价键结合的C3b，还可与吞噬细胞表面的C3b受体（CR1）结

合，以促进其吞噬过程，成为补体的调理作用。

(3)引起炎症反应引起炎症反应（的物质），C3a、C4a、C5a有过敏毒素作用，C5a有对粒细胞趋

化作用，其综合作用效果是导致组织充血、水肿及渗出等炎症表现。

(4)清除免疫复合物即补体（C3b）的免疫粘连作用在替代活化途径和经典活化途径

新产生的C3b，都可以借其不稳定的硫酯键断裂，直接与病原体（或其成分）或免疫复合物中的抗原成分共价性结合。和病原体或免疫复合物共价结合的C3b，可再与血小板或人红细胞表面的C3b受体（CR1）结合，使这些病原体或免疫复合物粘附于血小板或人的红细胞上，成为免疫粘连作用。免疫粘连作用不仅可减少血液中游离的免疫复合物及病原体，而且被粘附于血小板或红细胞表面的免疫复合物或病原体易被吞噬细胞捕捉吞噬，消除它们对机体的危害。

(5)免疫调节作用补体可对免疫应答的各个环节发挥调节作用：①C3可参与捕捉、

固定抗原，使抗原被APC处理与提呈；②补体成分可与多种免疫细胞相互作用，调节细胞的增殖分化，例如C3b与B细胞表面CR1结合，可使B细胞增殖分化为浆细胞。CR2能结合C3d，iC3b及C3dg，助B细胞活化；③补体参与调节多种免疫细胞效应功能，如杀伤细胞结合C3b后可增强对靶细胞的ADCC作用。

3．细胞因子的生物学作用特点是什么？

答案：

(1)细胞因子的作用有高效性极微量（pg水平）即可发挥生物学效应。

(2)细胞因子的旁泌和自泌作用自产生分泌出来后作用于附近的细胞或自身产生细胞。

(3)细胞因子作用的一时性只在局部短时间发挥作用，临床上细胞因子作为药物治疗时，在药理剂

量下也可随血流分部全身发挥作用。

(4)细胞因子作用的多效性一种细胞因子可作用于多种靶细胞，发挥多种生物学效应如促进靶细胞

增殖分化，增强抗感染和杀伤效应，促进或抑制其他细胞因子的产生和细胞膜表面分子的表达。

(5)细胞因子作用的网络性不同的细胞因子之间有相互协同或相互制约的作用，由此构成了复杂的

细胞因子免疫调节网络，如IL－1又到产生IL－2，IL－10抑制γ干扰素产生。

4．试论MHC在医学上的意义。

（1）器官移植：移植排斥反应的实质是免疫应答，故移植成败的关键是供受者间MHC的相容程度。（2）免疫调节：①抗原提呈：无论外源性抗原还是内源性抗原大多需经细胞加工处理后形成抗原肽段，再与HLAⅠ、Ⅱ类分子结合，HLA－抗原肽复合物共同表达于细胞膜表面，才能被CD8＋T细胞或CD4＋T细胞所识别；②MHC限制性：在免疫应答过程中各种免疫细胞如Th、Mφ、B及Tc细胞间的相互作用均受到不

同的MHC分子的调控或严格的约束。例如，Tc细胞识别病毒抗原或肿瘤抗原时必须识别自身MHC－Ⅰ类分子；而Th细胞识别的抗原肽必须是与自身MHC－Ⅱ类分子结合者。这种特定T细胞识别特定类别自身MHC分子而发挥效应的现象称MHC限制性；③决定免疫应答能力：在HLA－Ⅱ类基因区有一免疫应答基因Ir，可对免疫应答进行调节，包括增进免疫应答或抑制免疫应答。

（3）HLA与疾病的关系：人类MHC即HLA复合体是目前已知的最复杂多态性的人类基因系统，在人类证实强直性脊柱炎与B27有强相关性后，通过群体的流行病学调查和家系调查发现许多内分泌疾病、类风湿性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤和感染性疾病等与HLA有关。HLA与疾病易感染相关的主要位点是DR3、DR4、和B27等。

5．参与体液免疫应答的细胞有哪些？如何发挥作用？

.答案：胸腺依赖抗原（TD－Ag）次级B细胞产生抗体有下述细胞参加反应。

（1）抗原呈递细胞（APC）：主要是单核－居噬细胞类将处理的抗原提呈给Th细胞并分泌IL－1，IL －6活化T细胞。

（2）Th细胞：经抗原刺激活化后分泌细胞因子，特别是Th2细胞分泌IL－4、IL－5、IL－10等，除辅B细胞活化分化变成浆细胞产生抗体，还有调节抗体产生的作用。

（3）B细胞：经抗原次级后变成浆细胞合成并分泌抗体，在对应抗原再次应答时B细胞是主要的抗原提呈细胞（APC），可处理并提呈抗原给Th细胞，使之活化。

（4）非胸腺依赖抗原（TI－Ag）直接刺激B细胞产生IgM类抗体，如脂多糖或肺炎球菌荚膜多糖抗原可直接与B细胞表面的Ig结合，刺激其分化为浆细胞。

6.什么是自身抗原？它是怎样产生的？有何临床意义？

答案：一般来说，自身物质对自身没有抗原性。在一定条件下，自身物质对自身发挥抗原作用，引起免疫应答，称之为自身抗原。

自身抗原产生的原因：

（1）隐蔽的自身抗原某些自身物质在正常条件下与血流和免疫系统相对隔绝，称为隐

的自身蔽抗原。外伤、感染或手术不甚等原因，使这些物质进入血流，引起自身免疫应答。例如眼外伤后，眼葡萄膜色素和眼晶体蛋白释放可引起交感性眼炎和过敏性眼炎；精子抗原释放引起男性不育症；甲状腺球蛋白释放引起变态反应性甲状腺炎；脑脊液和周围神经的髓鞘蛋白的释放引起脱髓鞘脑脊髓炎和外周神经炎。

（2）修饰的自身抗原在病原微生物感染、电离辐射或药物等影响下，自身组织分子改变，形成新的抗原决定簇或暴露出内部的隐蔽的决定簇，成为自身抗原刺激机体产生免疫应答，引起自身免疫疾病。例如，服用氨基比林或甲基多巴，可改变粒细胞或红细胞表面的化学界构，出现新的抗原决定簇，从而引起粒细胞减少症或自身免疫性溶血性贫血。

7.试述抗原抗体反应的基本原理。

答案：抗体能够特异性结合是基于两种分子间的结构互补性与亲和性，这两种特性是由抗原与抗体分子的一级结构决定的。抗原抗体反应分为两个阶段：第一阶段为抗原与抗体发生特异性结合阶段，此阶段反应快，仅需几秒钟至几分钟，但不出现可见反应。第二阶段为可见反应阶段，抗原抗体复合物在环境因素（如电解质，、PH、温度、补体）的影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀、溶解、补体结合介导的生物现象等肉眼可见的反应。此阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。

8.简述HVGR和GVHR的主要区别。

答案：HVGR和GVHR的主要区别在于：HVGR是由宿主体内致敏的免疫效应细胞和抗体对移植物进行攻击，导致移植物排斥；而GVHR是由移植物中的抗原特异性淋巴细胞，即“过路”淋巴细胞识别宿主抗原而发生的一种排斥反应。这种反应不仅导致移植失败，而且还能给受者造成严重后果

9.T细胞亚群检测有何临床意义？

答案：T细胞亚群检测已作为临床辅助诊断与研究的一种重要手段，对各种疾病如自身免疫病、免疫缺陷病、病毒感染、恶性肿瘤等的发生、发展、临床疗效考核和预后估计都具有极其重要的意义；对了解机体的免疫状态也有十分重要的意义。

10.简述ELISA的基本原理。

（1）使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。

（2）使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或酶标抗体，这种酶标抗原或酶标抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，令受检标本（测定其中的抗原或抗体）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化形成有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。

11.试述直接Coomb’s试验与间接Coo mb’s试验的共同点与不同点。

答案：直接Coomb’s试验主要用于检查已吸附在红细胞上的不完全抗体。此试验常用于新生儿溶血症、自身免疫性溶血症及特发性自身免疫性贫血等检查。间接Coomb’s试验主要用于检查血清中游离的不完全抗体。此试验多用于检测母体Rh（D）抗体，可及早发现和避免新生儿溶血症的发生。亦可对红细胞抗原不相容性输血所产生的血型抗体进行检测

12.简述ELISA双抗体夹心法的操作步骤。

主要操作步骤如下：

（1）特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。

（2）加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。

（3）加酶抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量呈正相关。

（4）加底物：夹心复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。

13.ELISA操作的注意事项有哪些？

ELISA操作注意事项如下：

（1）加样：在ELISA中除了包被外，一般需进行4～5次加样。在定性测定中有时不强调加样量的准确性，例如规定为加样一滴。此时应该使用相同口径的滴管，保持准确的加样姿势，使每滴液体的体积基本相同。在定量测定中则加样量应力求准确。标本和结合物的稀释液应按规定配制。加样时应将液体加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出现气泡。

（2）孵育：在ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加结合物后，此时反应的温度和时间应按规定的要求，保温容器最好是水浴箱，可使温度迅速平衡。各ELISA板不应叠在一起。为避免蒸发，板上应加盖，或将平板放在底部垫有湿纱布的湿盒中。湿盒应该是金属的，传热容易。如用保温箱，空湿盒应预先放在其中，以平衡温度，这在室温较低时更为重要。加入底物后，反应时间和温度通常不做严格要求。（3）洗涤：洗涤在ELISA过程中虽不是反应步骤，但却是决定成败的关键。洗涤的目的是洗去反应中没有与固相抗原或抗体结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。

（4）显色及终止反应：显色是一步酶促反应，应按规定的温度和时间操作，用酸终止。

（5）结果判断：用比色计测定结果，准确性决定于ELISA板底的平整与透明度和比色计的质量。

14.试述流式细胞术（FCM）的工作原理及其特点。

答案：经过荧光抗体染色的单细胞悬液和鞘液在氮气压力下同时进入流室，形成鞘液包裹细胞悬液的稳定层流，由喷嘴高速射下（1000-5000个细胞/S），与垂直而来的激光束交会。在混合细胞中，由于细胞大小、胞内颗粒多少以及DNA含量等不同，使激光产生不同的散射，分别由散射光检测接受；细胞上着染的荧光染料在激光激发下，辐射出荧光，由荧光检测器接受。所有信号自动传入电子计算机分析处理，以获得检测结果。

第八章临床分子生物学检验

1.简述核酸探针及其应用。

（1）一小段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素、和荧光染料标记它的末端或者全链，我们就把这一段多聚核苷酸序列称为探针。（2）可以用于检测特异DNA或RNA序列片段，可以用于遗传病的基因诊断，用于限制性片段长度多态性作疾病的相关分析，法医学上的性别分析和性别鉴定。

2.简述PCR技术的基本原理及基本反应步骤。

（1）PCR的基本原理是以需要扩增的DNA为模板，以一对分别与模板的5,和3，末端相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。（2）PCR的基本步骤包括：①变性：将反应系统加热至95℃，使模板DNA全部变性变成单链DNA。②退火：将温度下降至适当温度，使引物与模板DNA退火结合。③延伸：将温度升至72℃，DNA聚合酶以dNTP底物催化DNA的合成反应。上述三个步骤称为一个循环，这样的循环重复25-30次，就可以得到大量的目的DNA。

3.什么叫人类基因组计划，它对医学上的研究具有哪些意义？

（1）1991年，由美国众院批准的一个15年的人类基因组研究计划，花费金额约为30亿美元，该项目很快得到各国科学家和各国政府的所重视，1994年，我国也加入到其中的相关研究项目，人类基因组分析的主要内容包括：遗传图分析，物理图分析，转录图分析，基因组序列测定等。（2）人类基因组计划的实施大大促进了医学的发展，DNA的遗传作图和物理作图对于认识疾病相关基因具有巨大的推动作用。遗传性疾病的基因定位，尤其是对多基因位点将可以进行全基因组的定位扫描，使得确定致病基因的工作更为容易。

4.简述核酸分子杂交的基本原理、类别和应用。

（1）单链的核酸分子在合适的温度和离子强度下，通过碱基互补形成双链杂交体的一类技术。（2）核酸分子杂交分为液相杂交，固相杂交，原位杂交，基因芯片技术。（3）主要应用SOUTHERN BLOTTING 用于未知DNA的检测，NORTHERN BLOTTING用于检测未知RNA，原位杂交用于组织和细胞中的基因定位。

5.简述基因诊断检测的临床应用

主要应用于感染病原的检测、遗传病的诊断、组织配型及肿瘤的早期诊断等。

6.核酸产物主要用哪些方法检测，他们分别用在哪些情况下？

主要的检测方法有：（1）凝胶电泳分析法：主要用于PCR产物的检测。（2）微孔板夹心杂交法（PCR-ELISA）本法可避免电泳和杂交的繁杂步骤，适于常规的ELISA计数仪检测PCR反应的产物。（3）荧光探针标记法：

（4）分支DNA（dDNA):这种方法在PCR的反应过程中对PCR产物中荧光强度的检测，从而对PCR产物进行定量。

可以用于一些计算机程序中自动计算标本病毒RNA的含量。

7.简述DNA芯片技术的应用。

7.主要应用于（1）基因诊断；（2）DNA序列测定；（3）临床药物筛选；（4）其他领域：法医学鉴定、食品工业、环境监测。