甘草酸二铵对脂肪肝合并动脉粥样硬化大鼠模型的影响

Chinese Hepat ol ogy,Ap r .2009,Vol .14,No .2

and interleukin 1beta messenger RNA in a rat model of granul omat ous enter ocolitis and hepatitis .Gast oenter ol ogy,1993,105:399.

7　Naveau S,Poynard T,Benattar C,et al .A l pha 222macr ogl obulin and

hepatic fibr osis diagnostic interest .D igest D is Sci,1994,11:24262

2432.

(收稿日期:2008209202)

(本文编辑:钱燕)

甘草酸二铵对脂肪肝合并动脉粥样硬化大鼠模型的影响

蔡晓波　魏国华　范建高

作者单位:200080　上海交通大学附属第一人民医院脂肪肝诊治中心(蔡晓波、魏国华);上海交通大学医学院附属新华医院消化内科

(范建高)

通信作者:范建高,E 2mail:fattyliver 2004@https://www.wendangku.net/doc/3011123735.html,

现代社会中非酒精性脂肪性肝病(NAF LD )患病率不断升高。对NAF LD 患者的前瞻性研究显示,其最重要的死因为心血管疾病和肝病,且心血管转归比肝病转归发生率更高[122]。除了NAF LD 和心血管疾病共有的危险因素作用外,多个研究显示,NAF LD 本身可能对心血管疾病的发展有促进作用[324]。因此,保肝药物治疗NAF LD 肝损伤同时是否能对心血管疾病起防治作用?甘草酸二胺为肝细胞保护剂。本研究通过高脂饮食/维生素D /丙硫氧嘧啶(PT U )建立脂肪肝合并动脉硬化模型,一方面观察甘草酸二铵对肝脏脂肪变、炎症的改善程度,另一方面观察其对糖脂代谢紊乱以及心血管的影响。

材料与方法

一、实验材料

动物实验为健康雄性S D 大鼠22只,清洁级,体质量200～

250g,购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。甘草酸二铵

由江苏正大天晴药业股份有限公司提供,PT U 购至上海复星朝晖药业有限公司。ALT 、AST 、血糖(BG )、甘油三酯(TG )、总胆固醇(TC )、高密度脂蛋白(HDL 2C )、低密度脂蛋白(LDL 2C )检测试剂盒购自南京建成生物公司。

二、方法

(一)模型建立　S D 大鼠普通饲料喂养1周后随机分为对

照组,正常饮食喂养;模型组高脂饮食喂养,第9周时开始腹腔注射V it D 36000000U ?kg 21

并喂予高脂/PT U 诱导动脉粥样硬化,甘草酸二铵组为动脉硬化同时予饮水中甘草酸二铵

(225mg/kg ?d )干预。实验动物自由饮水和进食,饲养于(20±2)℃,明暗各12h 的动物实验室内,各组大鼠于第16周

处死。方法为隔夜禁食,次日以2%戊巴比妥钠溶液1m l/kg 腹腔内注射麻醉,从腹主动脉采血后处死,迅速取出肝脏并分离大鼠主动脉,按常规制备血清和肝、主动脉病理学检查。

(二)指标检测　生化检测:按试剂盒操作说明,分别测定

血清ALT 、AST 、TG 、TC 、HDL 、LDL;病理学检查:取肝脏左叶,

10%甲醛固定,常规HE 染色,观察肝组织的炎症、脂肪变程

度。脂肪变、炎症程度分级按照中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精肝学组2006年NAF LD 诊疗指南[5]。分离大鼠主动脉,取其主动脉起始部0.5cm 行HE 染色,镜下观察动脉硬化程度。

(三)统计学处理　组间比较采用两样本均数t 检验,肝组

织脂肪变、炎症程度的比较采用轶和检验。

结 果

一、病理学结果

(一)肝脏　正常组大鼠肝小叶结构完整,肝细胞未见明

显脂肪变、炎症、坏死;模型组大鼠肝小叶结构尚存在,肝细胞弥漫性脂肪变性,并有灶性坏死、较多慢性炎症细胞浸润和少数中性粒细胞浸润;甘草酸二铵干预组与模型组相比,肝脏脂肪变、炎症都有改善(P <0.05,见表1)。

表1　各组肝脏脂肪变性、炎症程度

组别例数

肝脏脂肪变程度

F 0

F 1

F 2

F 3

F 4

肝脏炎症程度

G 0

G 1

G 2

G 3

正常组6600006000模型组8021320233干预组

83

3

3

2

4

3

1

干预组与模型组比较,3P <0.05

(二)主动脉　正常组内膜光滑,有光泽,染色均匀,内膜下

细胞排列整齐;模型组中膜轻度增厚,无隆起,部分内皮下可见钙化斑,内皮细胞基本完好,未见脱落,内皮间隙未见明显增宽,未见迁移其中的血管平滑肌细胞,中膜血管平滑肌细胞增生不明显;细胞数目接近正常,排列规则;干预组与模型组相比主动脉壁改变无明显差异。

二、生化结果

模型组肝指数、ALT 、AST 、F BG 、TG 、TC 、HDL 2C 、LDL 2C 较

正常组明显增加,而干预组能明显降低肝指数(P =0.003)、

ALT 水平(P =0.008),但对血糖、血脂水平无明显改善作用(见表2)。

?

431?

肝脏2009年4月第14卷第2期

表2　各组肝指数、血清ALT 、AST 、F BG 、TG 、TC 、HDL 2C 、LDL 2C 变化

组别例数

肝指数

ALT (U /L )

AST (U /L )

F B

G (mmol/L )

TG (mmol/L )

TC (mmol/L )

LDL 2C (mmol/L )

HDL 2C (mmol/L )

正常组60.0247±0.006335.6±18.0149.4±28.27.57±0.980.31±0.151.22±0.360.15±0.091.25±0.52模型组80.0339±0.0028100.3±21.1242.4±81.29.94±3.210.47±0.243.71±0.772.17±0.941.32±0.44干预组

8

0.0323±0.007347.4±13.43177.9±40.88.56±1.050.39±0.224.09±0.703.02±1.031.39±0.50P 值　

0.003

0.008

0.305

0.110

0.668

0.432

0.480

0.640

与模型组比较,3P <0.01

讨 论

多个前瞻性研究显示,心血管疾病是NAF LD 患者最重要的死亡原因

[122]

。而NAF LD 本身可能对心血管疾病起促进作

用。这种作用表现在促进血管结构功能紊乱、促进其他代谢紊乱发生、促进全身炎症和氧应激、肝功能减退等方面

[6]

。因此,

对于NALF D 患者的治疗除了保护肝细胞受损以外,需要兼顾防治心血管疾病。既往对保肝药物的研究重点主要为其保肝作用及机制,而对其在心血管方面的作用研究较少。甘草酸二铵是中药甘草有效成分的第三代提取物,具有较强的抗炎、保护肝细胞膜及改善肝功能的作用。甘草酸二铵是否本身能影响糖脂代谢紊乱或通过改善肝功能、降低氧应激而对心血管疾病起到保护作用值得研究。

本实验在复制肝脂肪变大鼠模型基础上,加用维生素D 3和PT U,成功复制了大鼠高脂血症,模拟了发生NAF LD 后逐渐出现糖脂代谢紊乱甚至动脉硬化的情况。但可能由于造模时间尚不够,大鼠存在轻度的血管硬化及中膜增厚,但未见明显的脂质斑块[7]。

本研究结果显示,甘利欣能改善脂肪肝大鼠的肝脏脂肪变、炎症程度,对NALF D 大鼠升高的肝酶水平有明显的改善,但对血糖、血脂水平及动脉硬化无明显改善作用。这表明作为肝细胞保护剂的甘草酸二铵本身对糖脂代谢无明显影响。另一方面,通过保护肝细胞来改善NASH 大鼠的血管硬化效果不

佳,这表明肝脏炎症对血管硬化的影响较小,也可能是本实验造模时间不够。脂肪肝与心血管事件的联系需进一步研究。

参　考　文　献

1　Ada m s LA,Ly mp JF,Sauver JSt,et al .

The natural hist ory of

nonalcoholic fatty liver disease:a populati on 2based cohort study .

Gastr oenter ol ogy,2005,129:1132121.

2　Matteoni CA,Younossi Z M,Gra m lich T,et al .Nonalcoholic fatty liver

disease:a s pectrum of clinical and pathol ogical severity .

Gastr oenter ol ogy,1999,116:141321419.

3　Targher G,Bert olini L,Padovani R,et al .Relati ons bet w een car otid

artery wall thickness and liver hist ol ogy in subjects with nonalcoholic fatty liver disease .D iabetes Care,2006,29:132521330.

4　Schindhel m RK,Dekker J M ,N ij pels G,et al .A lanine a m inotransferase

p redicts cor onary heart disease events:a 102year foll ow 2up of the Hoorn Study .A ther oscler osis,2007,191:3192396.

5　中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组.非酒精性脂肪

肝性肝病诊疗指南.中华肝脏病杂志,2006,14:1612163.

6　范建高,蔡晓波.非酒精性脂肪性肝病促进动脉粥样硬化的发生.

中国动脉硬化杂志,2008,16:123.

7　魏国华,蔡晓波,刘兰,等.大鼠脂肪性肝炎合并动脉粥样硬化模型

的建立.肝脏,2008,13:45247.

(收稿日期:2008209208)

(本文编辑:钱燕)

胡芦巴总皂苷抗非酒精性脂肪性肝炎大鼠机制的研究

张瑜　张龑之　毛新民

作者单位:830000　新疆维吾尔自治区人民医院高血压科(张瑜);新疆医科大学药学院药理教研室(张龑之、毛新民)

胡芦巴,又名芸香草,系豆科蝶形花亚科1年生草本植物,也是新疆维吾尔自治区的特色药用植物。维医认为其有开窍醒脑、延年益寿之功效。胡芦巴所含的“胡芦巴苷”具有降血糖作用。Sowmya 等

[1]

对20例高胆固醇血症患者研究发现,胡芦

巴种子粉末可明显降低总胆固醇和低密度脂蛋白。英国学者

Shar ma 等对印度胡芦巴种子短期研究发现,其对2型糖尿病(T 2DM )患者血清脂质有明显降低作用。本课题组多年来对胡

芦巴总皂苷(TFGs )的研究也发现,其不仅对T 2DM 大鼠有很好的降糖作用,同时也能降低T 2DM 大鼠的血清脂质,同时能促进胆固醇代谢,减少脂质沉积,防止动脉硬化。本研究观察

TFGs 对非酒精性脂肪性肝炎(NASH )大鼠血清游离脂肪酸

?

531?

调脂及抗动脉粥样硬化药

第七节调脂及抗动脉粥样硬化药 一、概述 调脂及抗动脉粥样硬化药主要用于治疗血脂异常。血脂异常是动脉粥样硬化的主要致病因素,以动脉粥样硬化为基础的冠心病和缺血性脑卒中发病率正在升高,心脑血管病已成为我国城乡人群的第一位死亡原因。为此，对血脂异常的防治必须及早给予重视。将血脂长期控制于适当水平，不仅可以预防动脉粥样硬化，而且可以减轻动脉粥样斑块，减少冠心病事件。 因此，在广大人群中进行高脂血症的防治成为动脉粥样硬化防治的重要环节。合理的饮食与生活调节对防治高脂血症极为重要。调脂药物能部分地控制饮食治疗所不能控制的高脂血症。 （一）血脂异常的定义 血脂异常通常指血浆中胆固醇和（或）甘油三酯升高，俗称高脂血症。实际上高脂血症也泛指包括低高密度脂蛋白血症在内的各种血脂异常。 （二）血脂异常的分型 按临床可分为：高胆固醇血症、高甘油三酯血症、混合型高脂血症和低高密度脂蛋白胆固醇血症，具体见表1。按病因又可分为：原发性高脂血症和继发性高脂血症。 血脂的基本检测项目为胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。 表1 血脂异常的临床分型 （三）血脂异常的检出 1、血脂异常的检出 （1）建议20岁以上成年人至少每5年测1次空腹血脂，包括TC、LDL－C、HDL-C和TG测定。（2）建议40岁以上男性和绝经期后女性应每年均进行血脂检查。 （3）对于缺血性心血管病及其高危人群，则应每3～6个月测定1次血脂。 （4）对于因缺血性心血管病住院治疗的患者应在入院时或24h内检测血脂。 2、血脂检查的重点对象: （1）己有冠心病、脑血管病或周围动脉粥样硬化病者。 （2）有高血压、糖尿病、肥胖、吸烟者。

小鼠酒精性脂肪肝模型的建立

小鼠酒精性脂肪肝模型的建立 发表时间：2011-11-23T10:28:36.130Z 来源：《中外健康文摘》2011年第30期供稿作者：张劲松1 (通讯作者) 吴铁2 邹丽宜2 [导读] 酒精及高脂饮食对对小鼠一般情况及体重的影响每天观察小鼠的一般症状，进食变化等。 张劲松1 (通讯作者) 吴铁2 邹丽宜2 （1广东医学院实验动物中心 523808;2广东医学院药理教研室 523808）【中图分类号】R575【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）30-0096-03 【摘要】目的探讨建立小鼠酒精性脂肪肝动物模型的方法。方法 80只雄性昆明小鼠随机分成4组：NS组每天灌胃生理盐水和普通饲料喂养，HM组、MM组和LM组采用每天按照5g.Kg-1.d-1对小鼠灌胃浓度为 60%（V/V）、30%（V/V）和10%（V/V）的乙醇的方法，连续6周，观察其肝脏病理改变、血液等指标的变化。结果造模6周后，模型组小鼠肝脏重量明显升高，与正常组比较有显著性差异；病理表现为广泛的脂肪变性，血清甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶（AST）、总胆固醇(CH)升高，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）显著降低，与正常组比较差异有显著意义 (P<0.05)；透明质酸（HA）变化不大（P>0.05）。结论本造模方法与人类酒精性脂肪肝病变类似，方法简单易行，实验周期短，模型稳定可靠。【关键词】酒精性脂肪肝动物模型高脂饲料小鼠Establishment of alcoholic fatty liver model with alcohol and fat emulsion in mice 【Abstract】 AIM: Tostudy the Establishment of alcoholic fatty liver model with alcohol in mice.METHODS: Eighty male mice were randomlydivided into 4groups with 20 rats pergroup: NSgroup(intragastric infusion ofsaline，5ml/kg，fed with commondiet)),hMgroup,mmgroup and LMgroup (intragastric infusion of alcohol by 60%V/V， 30%V/V or 10%V/V，5ml/kg.All mice weresacrificed at the end of the 6th week.The pathologic of the liver and the biochemistry index of plasma were observed.RESULTS:severe fattydeposition was appeared.serum TG，CH，ALT and AST ofhMgroup and LMgroup werehigher than NSgroup(P<0.05).CONCLUTION： The lesion of the alcoholic fatty liver model in mice issimilar to that inhumans.The experiment is verysimple and the experiment cycle isshort and the 【Key words】alcoholic fatty liver animal model mice 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 动物 2月龄清洁级昆明种小鼠80只，雄性，体重（22±4）g，由广东医学院实验动物中心提供（广东省动物质量合格证编号：A2010068 ）。饲养室内温度保持在24℃～26℃，湿度维持在50%～60%，专室饲养，专人负责。 1.1.2 药品、仪器与试剂 100%分析纯乙醇（广州化学试剂二厂，批号：2007061201）；丙氨酸氨基转移酶（ALT/GPT）测试盒，天冬氨酸氨基转氨酶（AST/GOT）和透明质酸（HA）测试盒均购于南京建成生物工程研究所，总胆固醇（TC）试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）试剂盒、甘油三酯(TG)试剂盒购于北京中生生物技术股份有限公司， LEICA QWIN图象分析仪（德国莱卡）；UV-3010紫外分光光度计(日本岛津)；梅特勒－托利多AE240电子天平（梅特勒－托利多仪器公司上海分公司）。 1.2 方法 80只小鼠随机分为4组，分别为正常对照组（NS组）、高剂量模型组（HM组）、中剂量模型组（MM组）和低剂量模型组（LM组），每组20只。所有小鼠均于晚上10点后禁食不禁水，次日NS组每天灌喂生理盐水，HM组、MM组和LM组分别予60%（V/V）、30%（V/V）和10%（V/V）乙醇水按照5g.Kg-1.d-1灌胃，每天1次，连续6周，于第6周末禁食12小时后进行取材检测相应的指标。 1.3 观察指标及测定方法 1.3.1 酒精及高脂饮食对对小鼠一般情况及体重的影响每天观察小鼠的一般症状，进食变化等。 1.3.2 酒精对小鼠血清学指标的影响采用摘眼球取血后，分离血浆检测TC、 TG、HDL-C、BG（血糖）、AST、ALT和透明质酸HA 水平。 1.3.3 酒精对小鼠肝脏指数的影响抽血后，剪开右心房，尽量放出余血，迅速取出肝脏，在4℃预冷的生理盐水灌洗后，用滤纸吸干水分，迅速用电子天平称量肝脏的重量，计算肝脏指数。 1.3.4 酒精对小鼠肝脏形态组织学的影响称重后的肝脏迅速置于冰上，在肝左叶取10mm×10mm大小肝组织行石蜡包埋切片及HE染色作病理检查，剩余肝组织分别切成小块，置于-70℃冰箱中待测肝组织MDA含量和CAT与SOD活性。 1.4 统计学处理实验结果均以表示，应用SPSS11.0软件包进行统计分析，参数资料采用One-Way ANOVA检验，非参数资料采用Ridit 分析。 2 结果 2.1 酒精对小鼠一般情况及体重的影响 实验过程中每天观察动物的进食量和饮水量，每周称量体重，称重前禁食10-12小时。由表1可知，前两周动物的体重没有明显的变化，而实验4周后，模型组的体重明显比NS组增加（P<0.05）,但第六周开始，HM组的体重明显下降。提示酒精可使小鼠的体重明显增加。 表1 酒精对小鼠体重的影响（x-±s，g） Compared with NS: a:P<0.05。

通络救脑注射液对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆及氧化应激反应的影响

2012年12月1日第12期No．12 1 Dec． 2012 中医学报 CHINA JOURNAL OF CHINESE MEDICINE 第27卷总第175期Vol．27 Serial No．175 *基金项目：北京中医药大学自主课题(编号:2011－JYBZZ － XS077) 通络救脑注射液对阿尔茨海默病模型大鼠学习 记忆及氧化应激反应的影响 * Effects of Tongluo Jiunao Injection on learning and memory and oxidative stress response for Alzheimer's Disease Rat Models 刘洋Liu Yang 1，李澎涛Li Pengtao 2，刘希伟Liu Xiwei 1，南一楠Nan Yinan 1，都文渊Du Wenyuan 1 1．北京中医药大学基础医学院中西医结合基础(病理)，北京110029 Integration of Traditional Chinese Medicine and Western Medicine Subject (Pathology )in Basic Medical College of Beijing University of Traditional Chinese Medicine ， Beijing ，China 1100292．北京中医药大学东直门医院，北京100700 Dongzhimen Hospital of Beijing University of Traditional Chinese Medicine ，Beijing ，China 100700 摘要：目的:探讨通络救脑注射液(Tong Luo Jiu Nao injection ， TLJN )对阿尔茨海默病(Alzheimer ’s Disease ，AD )模型大鼠的防治作用及其抗氧化机制。方法:采用脑内定位注射β淀粉样蛋白(βamyloid1-42)建立AD 大鼠模型，在模型建立成功的同时给予TLJN 治疗。采用Morris 水迷宫进行AD 大鼠的行为学检测，用化学比色法检测大脑皮质丙二醛(MDA )的含量。结果:与正常组比较，AD 模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长(P ＜0．01)，目标象限停留时间明显缩短(P ＜0．01);TLJN 治疗组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P ＜0．05)，目标象限停留时间明显增加(P ＜0．05)。AD 模型组大鼠脑皮质中MDA 含量增加(P ＜0.01);TLJN 治疗组，脑皮质MDA 含量显著减少(P ＜0．01)。结论:TLJN 具有改善学习记忆能力，对抗大鼠神经系统的退行性病变有一定的作用，可能通过抑制AD 模型大鼠脑皮质MDA 产生发挥其保护作用。 Abstract :Objective :To explore the preventive and therapeutic effect and anti-oxidation mechanism of Tong Luo Jiu Nao injection (TLJN )in Alzheimer's Disease (AD )rat models．Methods :The AD rat model was established by injecting β-amyloid1-42into the rat brain ，and successful model rats were given TLJN injection treatment at the same time．The behavioral changes of the AD rats were test-ed with Morris water maze．Chemical colorimetry was used to measure malondialdehyde (MDA )content in the cerebral cortex．Results :Compared with the control group ，the escape latent period of AD rats was significantly longer (P ＜0．01)，retention time of the target quadrant significantly obviously reduced (P ＜0．01);After TLJN treatment ，the escape latent period of AD rats was significantly shorter (P ＜0．05)，and retention time of the target quadrant was significantly increased (P ＜0．05)．In AD model group ，the MDA content in cerebral cortex was increased significantly (P ＜0．01);while after TLJN treatment ，the MDA content in cerebral cortex was decreased obviously (P ＜0．01)．Conclusions :TLJN treatment has certain effects on improving learning and memory ability of AD rats and resisting retrogression of rats nervous system ，and plays protective role in AD rats possibly via inhibiting the production of MDA．关键词：阿尔茨海默病;通络救脑注射液;Morris 水迷宫;学习记忆;氧化应激反应;大鼠 Key words :Alzheimer's Disease (AD );Tongluo Jiunao injection ;Morris water maze ;learning-memory ;oxidative stress response ;rat 中图分类号CLC number ：R285．5 文献标识码Document code ：A 文章编号Article ID ：1674－8999（2012）12－1614－03阿尔茨海默病（Alzheimer ’ s Disease ，AD ）是一种继心血管病、癌症、脑卒中后严重威胁人类健康的高发性神经退变性疾病。但目前临床上对于AD 的病因和发病机制尚不完全清楚， 对于其治疗仍旧是一个世界性的难题。近些年来，对于AD 的发病机制研究方面取得了很多进展，主要集中在遗传因素、环境因素、免疫-炎性机制、氧化应激和细胞凋亡等方面，而氧化应激在AD 中的作用越来越受到研究者的重视。结合本研究团队多年体内外实验研究， 发现AD 的中医病机关键为“毒损脑络”［1-2］ 。因此，本实验采用大鼠双侧海 马注射A β1-42这一致毒片段以模拟“毒损脑络”病证，观察“毒损脑络”病证下AD 大鼠学习记忆变化情况及氧化应激反应的改变，采用针对该中医病机关键具有解毒通络作用的中药复方通络救脑注射液进行干预， 通过Morris 水迷宫行为学检测方法观察药物干预后大鼠学习记忆的改善情况及通络救脑注射液的作用机制，为通络救脑注射液的临床应用提供体外实验依据。 1 材料与方法 1．1 动物分组 清洁级雄性SD 大鼠32只，体质量（250?20）g ，购自北 京维通利华实验动物中心。随机分成正常对照组（正常组）、 A β海马注射组（模型组）、A β海马注射+通络救脑注· 4161·

动脉粥样硬化模型的制备

动脉粥样硬化模型的制备 一、泡沫细胞模型的制备 (一)原理 巨噬细胞和血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)表面存在清道夫受体(scavenger receptor)，能大量地摄取修饰变性的低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)，特别是氧化LDL(oxidized LDL,OX-LDL)，使细胞内大量充盈脂质，在电镜或光镜下呈泡沫状，故称泡沫细胞。经油红O染色后呈红色颗粒状，含大量胆固醇，且胆固醇酯约占其50%。因而通过先制备OX-LDL，再使其作用于巨噬细胞或血管平滑肌细胞，即可造成泡沫细胞模型。 (二)实验步骤 1.LDL的制备：取新鲜全血200ml，不加抗凝剂分离出血清120ml，加入NaN324mg，EDTA(100mg/L)0.6ml以防腐和防氧化。调整血清密度为1.019，4?C，30000r/min，超速离心18小时。吸出上层乳白色液体(为极低密度脂蛋白，VLDL)及次层淡黄色液体(为中密度脂蛋白，IDL)；再调整密度为1.063，4?C，40000r/min，超速离心24小时。上层黄色液体即为LDL。经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为同一区带。在4?C，含10mg/L EDTA的磷酸缓(PBS)冲液中透析72小时，过滤除菌，4?C，保存备用。 2.OX-LDL的制备：将LDL在含10μmol/l CuSO4的PBS中，37?C,氧化72小时。然后于4?C，在含１００mg/L EDTA的PBS中透析，每８小时换液一次，透析２４小时。 LDL 的氧化程度通过测定样品中硫代巴比妥酸反应物质(thiobarbituric acid reactive substance,TBARS)的含量加以鉴定。取样品或丙二醛标准品0.1ml加入2.9ml复合液(CCl3COOH 0.92mol/L,C4H4N2O2S 0.026mol/L,HCl 0.25mol/L)中，置沸水浴30min，冷却后测定其在532nm的OD值，计算TBARS含量。再以胆固醇测定试剂盒测定LDL胆固醇含量。LDL的氧化修饰程度以每克LDL胆固醇的TBARS含量表示。 3.巨噬细胞源性泡沫细胞模型的制备：参考Leonard等的方法收集巨噬细胞。取雄性、10周龄C57BL/6J小鼠，腹腔注射无血清培养基RPMI 1640 2ml，4天后再次注射RPMI 1640 4ml 收集腹膜巨噬细胞，以109/L的密度种植于培养瓶中，培养12小时，弃培养液，用PBS冲洗掉未贴壁的细胞，重复3次。加入含OX-LDL(10mg/L)的RPMI 1640培养液，37?C下培养96小时(培养瓶中置盖玻片)。 1.VSMC源性泡沫细胞模型的制备：VSMC的培养参考本书有关章节。于培养液中加入OX-LDL

动脉粥样硬化动物模型的建立

动脉粥样硬化动物模型的建立 摘要：动脉粥样硬化 (atherosclorosis , As) 是一种动脉疾病，是心脑血管疾病的主要病理基础。由于确切发病原因不明，建立As动物模型成为对其病因研究及探讨治疗措施的主要方法之一。 关键词：动脉粥样硬化动物模型 一、疾病简介 1.临床表现及危害 动脉粥样硬化(atherosclorosis , As) 是一种动脉疾病，是心脑血管疾病的主要病理基础。近年来有人提出As是一种慢性炎症过程。As的特征是发病缓慢，其临床症状在主要病变出现之前表现轻微。它主要造成三种临床表现：脑中风、冠心病和周围性血管性疾病。 2.病理过程 ①低密度脂蛋白(LDL) 在易损区域动脉内皮下间质内沉积。 ②单核细胞粘附于内皮细胞表面。 ③单核细胞进入内膜层增生，并吞噬氧化型LDL而转化成泡沫细胞。 ④泡沫细胞死亡并释放出脂质，形成坏死中心。 ⑤平滑肌细胞迁移、增生和聚集，并分泌纤维样物质，使形成的斑块增大。 3. 研究进展 As发病机理的研究已经经历了一个半世纪,主要是围绕三种学说:脂质浸润学说、血栓形成学说和损伤反应学说。Virchow曾提出As 是一种炎症的观点, 1998 年12 月法国卫生研究院及Merieux 基金会在法国的Annecy 组织了一次感染与As 研讨会。初步得出“As过程是炎症反应过程”这一基本观点。 然而从现有的流行病学、病理学和动物模型的研究资料来看,感染与As 之间是否存在着必然的因果关系,还不能作出最后判断。As 病变中发现的病原体是直接引起病理变化还是通过免疫反应起作用尚未明确，可能与其他危险因子共同起作用。

而以As 是一种炎症的观点出发,就必须从解决炎症发生发展的基本环节出发,去打断这一网络形成的主要环节,才能真正达到防治的目的,当然要做到这点还需要进行大量深入的研究。 4.预防及治疗 阻断动脉粥样硬化的形成过程 改善饮食习惯控制高脂血症 改善不良习惯是防治AS的重要措施 控制高血压及糖尿病阻断AS的发生和发展 AS的药物治疗 扩血管药 抗血小板药阿司匹林 溶栓与抗凝药 AS手术介入治疗 基因治疗及干细胞移植 二、可用于建立实验模型的动物 目前可以作为模型的动物有：大白兔、鸡、鼠、猪和猴等。其中猪和猴的系统发育和饮食结构类似于人．能够产生自发性的动脉粥样硬化，是研究人类AS的理想模型。家兔和鼠是现在研究AS最常用的模型动物，两者比较各有优缺点：家兔不易自发性产生AS，但它对高脂饮食特别敏感，但是家兔的As病变只与人的病变表面上相似，其病变中的脂类和巨噬细胞含量远比人类大。鼠具有抗As性，但是作为实验动物，具有经济效益比较高，生存能力强，死亡率低的特点。为此，人们不断摸索建立造型简便且重复性好的AS模型。 ⑴兔是最早用以制造高脂血症和动脉粥样硬化症模型的动物，至今仍然多被采用。它对外源性胆固醇的吸收率高，可达75～95%，大白鼠仅为40%，对高血脂的清除能力低，静脉注入胆固醇后脂血症可持续3～4天，大鼠仅为12小时，狗介于两者之间。只要给兔含胆固醇较高的饲料，不必附加其它因素，经3～4月即可形成明显的动脉粥样硬化症，而且与人体发生的病变相似，取血检查也较方便。但

动脉粥样硬化动物模型

（一）动脉粥样硬化模型 常选用兔、猪、大鼠、鸡、鸽、猴和犬等动物。常用的复制方法有下面几种（包括高血脂模型）： 1．高胆固醇、高脂肪饲料喂养法：是目前比较常用的方法，特点是死亡率低，可长期观察，但费时久。一般在家兔、鸽、鸡等，经数周喂养就可产生明显的高脂血症，经数月就能形成早期的动脉粥样硬化病变。大白鼠、小白鼠及犬则较难形成，如果饲料中增加蛋黄、胆酸和猪油等，可用促进作用。为了促进病变的形成，在高脂饲料中还可加入甲基硫氧嘧啶、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、苯丙胺、维生素D、烟碱或蔗糖等。 具体复制方法：兔诱发模型：体重2kg左右，每天喂服胆固醇0.3g，4个月后肉眼可见主动脉粥样硬化斑块；若每天剂量增至0.5g，3个月后可出现斑块；若增至每天1g，可缩为2个月。在饲料中加入15%蛋黄粉、0.5%胆固醇和5%猪油，经3周后，将饲料中胆固醇减去，再喂3周，可使主动脉斑块发生率达100%，血清胆固醇可长高至2000mg%。大白鼠诱发模型：喂服1～4%胆固醇、10%猪油、0.2%甲基硫氧嘧啶、86～89%基础饲料，7～10天；或喂服10%蛋白黄粉、5%猪油、0.5%胆盐、85%基础饲料，7天后均可形成高胆固醇血症。小白鼠诱发模型：雄性小白鼠饲以1%胆固醇及10%猪油的高脂饲料，7天后血清胆固醇即升为343±15mg；若在饲料中再加入0.3%的胆酸，连饲7天，血清胆固醇可高达530±36mg%。鸡、鸽诱发模型：4～8周的莱克享鸡，在饲料中加入1～2%胆固醇或15%的蛋黄粉，再加5～10%的猪油，经过6～10周，血胆固醇升至1000～4000mg%，胸主动脉斑块发生率达100%。鸽喂饲胆固醇3g/kg/天，加甲基硫氧嘧啶0.1g，可以产生

大鼠非酒精性脂肪肝实验模型的建立

大鼠非酒精性脂肪肝实验模型的建立 作者：熊丽，易鹏，余琼华，周隽敏，骆传佳 【摘要】目的建立一个非酒精性脂肪肝动物模型。方法 40只大鼠随机分为对照组和模型组。模型组给予高脂饮食（15％猪油，8％蛋黄粉，2％胆固醇），在造模第4周、8周、18周分别取模型组动物各2只，观察其病理模型形成情况。对照组给予正常饮食。结果造模过程中，模型组动物造模后体重增长较正常对照组迅速，至8周时，体重较正常组平均重21％，18周时模型动物体重及肝指数均较正常组显著增加（P<0.01），在病理方面，造模组4周后大鼠出现了轻度的肝脂肪变，造模8周大鼠多呈中度脂肪变。造模18周大鼠呈中重度的大泡性脂肪变。结论高脂高胆固醇饮食是一种有效的脂肪肝模型制作方法。 【关键词】非酒精性脂肪性肝炎；动物模型；动物实验 ［Abstract］Objective To duplicate the animal steatohepatitis model with fat rich and chol rich diet.Methods 40 SD male rats were randomly divided into 2 groups.The models were induced with fat rich diet which was compose of 15 percent lard oil，8 percent egg powder and 2 percent cholesterol.The normal control group were fed with normal

diet.At the 4，8 and 18 week，two rats of the steatohepatitis model group sacrificed for pathological observation each time.Results During the experimentation，the weight of the model group increased quicklier than the normal control group.After the rats had been induced for the model with fat rich diet for 8 weeks，the weight of the model group was heavier averagely by 21 percent than the normal control group.At the end of experimentation，the weight and the rate of liver weight of the model group were higher than the normal control group （P<0.01）.The livers presented the pathology of hepatocyte lower steatosis at the 4 week and medium fatty degeneration at 8 week in rats of model group.At 18 week of fat rich diet feeding，all model rats developed steatohepatitis severely.Conclusions Fat rich and chol rich diet is available in duplicating the animal steatohepatitis model. ［Key words］ nonalcoholic steatohepatitis；animal model；animal experiment 目前，非酒精性脂肪性肝炎的发病率为 1.2％～4.8％［1］，随着人民物质生活的改善，非酒精性脂肪性肝病的发病率将逐年上升。在某些地区脂肪肝已超过病毒性肝炎而成为第一大肝病。非酒精性脂

(完整版)动脉粥样硬化发病机制

动脉粥样硬化发病机制 动脉粥样硬化的发生发展机制目前仍不能全面解释,但经过多年的研究和探索主要形成了以下几种学说，脂代谢紊乱学说、内皮损伤学说、炎症反应学说、壁面切应力以及肠道微生物菌群失调等，这些学说从不同角度阐述了动脉粥样硬化的发生过程。 1、脂质代谢紊乱学说 高血脂作为AS的始动因素一直是相关研究的热点。流行病学资料提示，血清胆固醇水平的升高与AS的发生呈正相关。在高血脂状态下血浆低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）浓度升高，携带大量胆固醇的LDL-C 在血管内膜沉积，并通过巨噬细胞膜上的低密度脂蛋白受体（LDL-Ｒ）携带胆固醇进入细胞内。同时血液中及血管内膜下低密度脂蛋白（LDL）经过氧化修饰后形成氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL），其对单核巨噬细胞表面的清道夫受体（如: CD36，SＲ-A，LOX1）具有极强的亲和力，导致Ox-LDL 被迅速捕捉并被吞噬。然而Ox-LDL 对巨噬细胞具有极强的毒害作用，可以刺激单核巨噬细胞的快速激活增殖聚集退化，然后凋亡为泡沫细胞，这些泡沫细胞的大量聚集便形成了As 的脂质斑块。此外，Ox-LDL 通过与血管内皮细胞LOX1 结合导致细胞内信号紊乱并引起内皮细胞功能障碍。Ox-LDL还能促进血管平滑肌细胞不断增殖并向外迁移在血管内壁形成斑块。从脂代谢紊乱学说的病变过程中可以看出，血管内皮功能受损和氧化应激是动脉粥样硬化发生的重要环节。同时对于AS 动物模型的诱导当前国内外使用最多的方法是饲喂高脂高胆固醇饲料促使脂代谢紊乱。 2、内皮损伤学说 在正常情况下动脉血管内膜是调节组织与血液进行物质交换的重要屏障。由于多种因素（如: 机械性，免疫性，LDL，病毒等）刺激内皮细胞使其受到严重损伤导致其发生功能紊乱与剥落，进而改变内膜的完整性与通透性。血液中的脂质会大量沉积于受损内膜处，促使平滑肌细胞和单核细胞进入内膜并大量吞噬脂质形成泡沫细胞，泡沫细胞的不断累积便形成脂肪斑块。同时内皮细胞的凋亡与脱落促使血液中血小板大量粘附与聚集，功能紊乱的内皮细胞、巨噬细胞、血小板分泌产生大量生长因子和多种血管活性物质刺激中膜平滑肌细胞不断增生并进入内膜，同时导致血管壁产生收缩。其结果是脂肪斑块不断增大，同时管腔在不断缩小，进而导致AS 病变的形成。 3、炎症反应学说 As 并不是单纯的脂质在血管壁沉积性疾病，而是一个慢性低度炎症反应的过程，氧化应激过程贯穿于动脉粥样硬化的整个过程。某些脂类如溶血磷脂、氧固醇等作为信号分子与细胞的受体结合后可激活特定基因表达，生成许多促进炎性反应的细胞因子。在动脉粥样硬化病变过程中，血管内膜功能受损，导致ICAM1、M-CSF、MCP1、VCAM1、MMP 等细胞因子和炎性因子的表达明显增加，促进单核细胞与内皮细胞粘附、迁移进入内膜并吞噬Ox-LDL 形成泡沫细胞，促使中层平滑肌细胞增殖并向内膜方向迁移摄取脂质形成泡沫细胞。随着动脉粥样硬化的进展，炎性细胞和吞噬了Ox-LDL 的巨噬细胞增多，并产生肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素8（IL-8）、白介素1（IL-1）等多种重要的炎性因子进一步加剧动脉粥样硬化的发生与发展。C 反应蛋白（CＲP）是一种急性炎症反应物质，在临床研究中常作为全身炎症反应的敏感指标，同时研究证明CＲP 是动脉硬化心血管事件的独立危险因子，对于心血管疾病预测的价值超过LDL-C 及一些传统的心血管预测因子。而CＲP 不仅是炎症标志物也是一种炎症促进因子，直接参与动脉硬化斑块的形成与聚集，促使炎症反应放大。综上所述，炎症反应可能是众多危险因素致Ａｓ的共同通路，这为Ａｓ新的防治策略——以炎症机制的不同环节为靶向研发新的抗炎药物、用于Ａｓ性疾病的治疗提供了理论基础。 4、壁面切应力

动脉粥样硬化的研究进展及动物模型的建立

动脉粥样硬化的研究进展及动物模型的建立 摘要：动脉粥样硬化 (atherosclorosis , As) 是一种动脉疾病，是心脑血管疾病的主要病理基础。由于确切发病原因不明，建立As动物模型成为对其病因研究及探讨治疗措施的主要方法之一。 关键词：动脉粥样硬化 As 动物模型 1、 疾病简介 1.临床表现及危害 动脉粥样硬化(atherosclorosis , As) 是一种动脉疾病，是心脑血管疾病的主要病理基础。近年来有人提出As是一种慢性炎症过程。As 的特征是发病缓慢，其临床症状在主要病变出现之前表现轻微。它主要造成三种临床表现：脑中风、冠心病和周围性血管性疾病。[1] 2.病理过程 [2][3] ①低密度脂蛋白(LDL) 在易损区域动脉内皮下间质内沉积。 ②单核细胞粘附于内皮细胞表面。 ③单核细胞进入内膜层增生，并吞噬氧化型LDL而转化成泡沫细胞。 ④泡沫细胞死亡并释放出脂质，形成坏死中心。 ⑤平滑肌细胞迁移、增生和聚集，并分泌纤维样物质，使形成的斑块增大。 3. 研究进展[2] As发病机理的研究已经经历了一个半世纪,主要是围绕三种学说:脂质浸润学说、血栓形成学说和损伤反应学说。Virchow曾提出As 是一种炎症的观点, 1998 年12 月法国卫生研究院及Merieux 基金会在法国的Annecy 组织了一次感染与As 研讨会。初步得出“As过程是炎症反应过

程”这一基本观点。 然而从现有的流行病学、病理学和动物模型的研究资料来看,感染与As 之间是否存在着必然的因果关系,还不能作出最后判断。As 病变中发现的病原体是直接引起病理变化还是通过免疫反应起作用尚未明确，可能与其他危险因子共同起作用。[3] 而以As 是一种炎症的观点出发,就必须从解决炎症发生发展的基本环节出发,去打断这一网络形成的主要环节,才能真正达到防治的目的,当然要做到这点还需要进行大量深入的研究。 4.预防及治疗 改善饮食习惯控制高脂血症　 1 阻断AS的形成过程 改善不良习惯是防治AS的重要措施　 控制高血压及糖尿病阻断AS的发生和发展 扩血管药　 ②AS的药物治疗 抗血小板药阿司匹林 溶栓与抗凝药 ③AS手术介入治疗 ④基因治疗及干细胞移植 2、 可用于建立实验模型的动物[4] 目前可以作为模型的动物有：大白兔、鸡、鼠、猪和猴等。其中猪和猴的系统发育和饮食结构类似于人．能够产生自发性的动脉粥样硬化，是研究人类AS的理想模型。家兔和鼠是现在研究AS最常用的模型动物，两者比较各有优缺点：家兔不易自发性产生AS，但它对高脂饮食特别敏感，但是家兔的As病变只与人的病变表面上相似，其病变中的脂类和巨噬细胞含量远比人类大。鼠具有抗As性，但是作为实验动物，具有经济效益比较高，生存能力强，死亡率低的特点。为此，人们不断摸索建立造型简便且重复性好的AS模型。

小鼠棕色脂肪和白色脂肪的识别研究

小鼠棕色脂肪和白色脂肪的识别 ——白色脂肪、棕色脂肪及脂肪肝含量的CT测量研究 选自PLoS ONE, May 2012 研究背景：现代的生活方式导致了肥胖的高发。由能量摄取和消耗不平衡所导致的肥胖通常会伴随高血压，血脂异常，冠心病等症状，最终导致新陈代谢异常。脂肪的分布而不是总脂肪量决定了新陈代谢的状况。皮下脂肪对人体有益，而内脏脂肪的增加及肝脏、骨骼肌及胰腺的异常脂肪量则会增加2型糖尿病的风险。另一个与新陈代谢疾病密切相关的是广泛存在的非酒精性脂肪肝疾病。最近，棕色脂肪（BAT）逐渐吸引了广泛的关注。棕色脂肪的研究主要集中在小动物体内，然而新的数据表明BAT同样在成人体内发挥作用，BAT的量与BMI值呈现负相关性，表明棕色脂肪在人体内能量代谢的作用。 目前检测人体腹部脂肪和肝脏脂肪含量的金标准是MRI and CT。小鼠的身体脂肪通常由定量核磁共振法quantitative magnetic resonance (QMR) 所测量，该技术测量精确，不需对动物麻醉且测量速度快，但是无法区分皮下脂肪和内脏脂肪，因此在本次实验中，我们使用LaTheta LCT-200 (Hitachi-Aloka, Tokyo, Japan), 来区分腹部脂肪及皮下脂肪并对两部分脂肪进行定量研究，同时我们也用该仪器测量了肝脏脂肪含量及棕色脂肪情况。 方法：我们使用不同的消瘦及肥胖小鼠模型(C57BL/6, B6.V-Lepob, NZO) 来确定扫描不同部位脂肪的最佳的扫描参数。数据与扫描后的实际称重相比较。肝脏脂肪量由生化分析法测定。 结果：脂肪组织经天平称重的值与经CT测量值的相关性为：皮下脂肪 (r2 = 0.995), 内脏脂肪(r2 = 0.990)，总的白色脂肪(r2 = 0.992). 另外，利用腹部区域（腰椎L4到L5之间）的扫描与身体脂肪的相关性可以减少扫描时间，并降低对实验动物的辐射及麻醉。 CT扫描所得的肝脏脂肪量与生化分析的结果呈线性相关(r2 = 0.915)。另外，棕色脂肪的CT测量结果与天平测量的结果呈高度相关(r2 = 0.952)。短期冷冻 (4℃, 4 hours) 导致棕色脂肪含量变化，从而引起甘油三脂变少，这种变化可由CT成像时CT值的增加体现。结论：LCT200对小鼠总脂肪，皮下脂肪、内脏脂肪及棕色脂肪、肝脏脂肪的3D成像及定量分析可靠准确，这种非入侵的方式可以使我们对小鼠的肥胖情况进行长期的扫描研究。

ApoE小鼠动脉粥样硬化模型的建立_图文.

体内的脂类物质代谢异常时，多余的脂质沉积在血管壁上，并逐渐形成斑块，使血管内皮增厚、变硬，是引起动脉粥样硬化（atherosclerosis, AS ）的重要原因之一。载脂蛋白E （apolipoprotein E, apoE ）主要存在于乳糜微粒 （chylomicron, CM ）、极低密度脂蛋白（very low desity lipoprotein, LDL ） ApoE -/-小鼠动脉粥样硬化模型的建立 欧海龙，张礼林，何晓兰，李红梅，雷霆雯* (贵阳医学院生物化学与分子生物学教研室，中国贵州贵阳550004 摘 要：ApoE -基因敲除小鼠（ApoE -/-）经含有21％脂肪和0.15％胆固醇的高脂饲料喂食12周后进行各项血脂 胆固醇水平检测，以及整体主动脉油红O 染色与主动脉根部病理切片油红O 染色等动脉粥样硬化病理分析。结果显示经过高脂诱导的ApoE -/-小鼠的血浆总胆固醇和甘油三酯水平均比未经饮食诱导的ApoE -/-小鼠、经同样饮食处理的野生型小鼠以及未经处理的野生型小鼠均显著升高（P <0.05）；低密度脂蛋白-胆固醇水平与野生型（正常饮食组和高脂组）相比升高了近3倍多；高脂诱导ApoE -/-小鼠的主动脉斑块面积占整体主动脉面积的65％，显著高于ApoE -/-小鼠的正常饮食组（21％）（P <0.05），同时主动脉根部的血管壁明显增厚，管腔变窄。实验结果表明通过高脂饲料饮食诱导，成功建立了动脉粥样硬化模型小鼠，可为下游的药物筛选、基因治疗以及动脉粥样硬化机理的体内研究提供理想的实验材料。关键词：ApoE -/-小鼠；动脉粥样硬化；胆固醇；血脂；主动脉中图分类号： R394文献标识码：A 文章编号：1007-7847(201502-0141-04

医学实验手册：动脉粥样硬化动物模型

医学实验手册：动脉粥样硬化动物模型 一、实验动物 目前可以作为动脉粥样硬化（AS）模型的动物有：兔、猪、鼠、鸡、鸽、猴和犬等。家兔和鼠是其中最常用的，两者比较各有优缺点：家兔对高脂饮食特别敏感易造模，然而其AS病变与 人的病变只在表面上相似，病变中的脂类和巨噬细胞含量远比人类大；鼠作为实验动物，具有经济效益高、生存能力强、死亡率低的特点，鼠AS模型病变的形态、斑块的破裂位置与人类十分 相似，但鼠模型的斑块破裂处缺乏纤维蛋白和血栓形成。 二、常用造模方法 1、高胆固醇、高脂肪饲料喂养法： 在基础饲料前提下，添加胆固醇、蛋黄、猪油，为了促进病变的形成，在高脂饲料中还可加入甲基硫氧嘧啶、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、苯丙胺、维生素D、烟碱或蔗糖等，根据不同实验目的，采用不同配方。 2、灌胃法： 采用脂肪乳剂灌胃法（脂肪乳剂按胆固醇∶猪油∶蛋黄粉=1∶5∶4配制），同步氮气损伤（历时5min，150ml/min氮气流损伤血管内皮），可用于建立兔颈动脉粥样硬化模型。 3、机械损伤法： 包括球囊损伤法、辐射损伤法、空气干燥法、下丘脑弓状核损伤法、颈动脉内膜切除法等。其中球囊损伤法具有可靠性强、可重复性高、更符合临床动脉粥样硬化疾病的发生发展过程等优点。 4、免疫损伤法： AS的发病机制有免疫因素的存在，所以可以从免疫学的角度来建立AS模型，如使用牛血清白蛋白、卵清白蛋白、肺炎衣原体、EB病毒、巨细胞病毒、幽门螺杆菌、内毒素等进行免疫刺激，从而诱发AS的产生。 5、基因改造法： ApoE和LDL-R基因敲除鼠可自发形成动脉粥样硬化斑块，是动脉粥样硬化研究的常用模型。但由于基因改造小鼠体积小、临床性检查评估难、与人类脂类代谢差异较大，此法存在一定的局限性。 6、其他：

脂肪肝模型动物及建立方法汇总

1.中药药理与临床2007 标题：大鼠高血脂及脂肪肝模型的建立 （本实验选用高脂饲料诱导大鼠高血脂、脂肪肝，为预防脂肪肝药物的筛选提供实验模型。）目的：建立大鼠高血脂及脂肪肝模型。 方法：SD大鼠随机分为2组，分别接受正常饲料、高脂饲料，连续3周，测定大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)、极低密度脂蛋白(VLDL—C)。 1．1动物：SD大鼠，SPF级，20只，雌雄各半，体重180—220g, 实验动物质量合格证明号：2006A 1．2高脂饲料：高脂饲料由猪油(12％自制)、胆固醇(2％)、丙硫氧嘧啶(0.2％)、3号胆盐(0.5％)、普通混合饲料粉(85.3％)组成，将以上各物先人工充分混匀，再经搅拌，压成圆条状颗粒，真空包装后，经”co辐照消毒备用，由南方医科大学实验动物中心制作。 1．3方法：将大鼠随机分为正常对照组(10只)、高脂模型组(10只)，雌雄各半。正常对照组投喂普通颗粒饲料，高脂模型组以高脂饲料替代普通饲料投喂，平均每天每只约20克左右。动物造模3周，实验结束前1天晚上禁食，不禁水，次日上午麻醉后，腹主动脉采血，分离血清，送南方医科大学附属南方医院医学检验中心检测血脂五项。取肝脏，称肝湿重，计算肝指数，并在肝右叶离边缘1cm处，横切一块肝组织用10％中性福尔马林固定，常规脱水，HE染色。 讨论：本文用高脂饲料成功地复制了大鼠高脂血症及脂肪肝模型，严重的肝细胞的变性可导致部分动物出现不同程度的肝细胞坏死。高脂模型组大鼠肝脏体积增大，重量增加，质软切面油腻为奶黄色。高脂模型组大鼠血清TG、TC、LDL—c、VLD含量都非常显著升高。对于HDL—c所占Tc的百分率，正常对照组非常显著高于高脂模型组，虽然高脂模型组HDL —C含量明显高于正常对照组，但由于正常对照组TC含量远远低于模型对照组，故HDL —C含量必然低于模型对照组。HDL—C为动脉粥样硬化性心脑血管病的保护因子，本实验可知，正常对照组H／T明显高于模型对照组，故将H／T作为一项衡量HDL—C在体内相对含量高低的指标，更有实际意义。在本实验中，正常对照组平均每只大鼠饲料消耗量为5369，高脂模型组平均每只大鼠饲料消耗量为M89。高脂模型组大鼠体重的减轻，与大鼠形成严重脂肪肝后，影响摄食量有关。 2.吉林大学学报(医学版) 标题：大鼠脂肪肝模型的建立 目的：探讨脂肪肝动物模型的制作方法。 方法：用缺乏蛋氨酸和胆碱的饲料喂养大鼠，复制脂肪肝模型，并进一步研究门静脉压、肝重／体重比以及肝脏病理结构的变化。 结论：用缺乏蛋氨酸和胆碱的饲料喂养大鼠复制脂肪肝模型，喂养时间短，价格低廉，是一种较好的脂肪肝模型制作方法。 配方成分：蔗糖360g，右旋麦芽糖200 g，猪油250 g，植物纤维素50g，玉米粉50g，食盐 7.5g，黑豆30 g，CaCO32.5 g，MgO1.5 g,维生素A15000u，维生索D2 1500u，维生素E0.5 g。 一、方法①雄性wiscar大鼠36只，体重(200士l0)g，随机抽取12只，作为对照组．用正常饲料喂养21 d后行门静脉压、肝重测定以及肝脏病理检查。其余24只大鼠作为实验组行脂肪肝模型复制，用该饲料喂养后的第8、14、2l和28天各取3只大鼠处死，进行肝脏病理切片(锇酸染色>，观察肝脏脂肪变性程度，第21天另取12只大鼠行门静脉压和肝重测定。②实验前14h禁食，可以自由饮水，戊巴比妥纳30 mg/kg腹腔内注射麻醉。上腹正中